Name: Deneysel Subaraknoid Kanama Sonrası Gecikmeli Serebral Vazospazm değerlendirin A Düşük Mortalite Rat Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-01-17T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 3 s
Description: Öğrenin, subaraknoid kanama sonrası gecikmeli serebral vazospazmı fare modelinde incelemek için otojen kan toplama ve sisterna magna enjeksiyonu yöntemini. Bu model nörovasküler araştırmalar için değerlidir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz bu makale için kadar yazmak onun değerli girişler için Dr Mary-Lou Vallano, Nörobilim ve Fizyoloji Anabilim Dalı, çabaları kabul etmek istiyorum.

1. SAK Konu için Rat Cerrahi 0.15 ml Otolog Arteryel Kan ile Injected <ol><li> Sıçan 0,1 mg / Ksilazin / Ketamin kemirgen kokteyl kg kullanan ve 5 dakika boyunca oturmak için izin anestezi olduğunu. </li><li> Yeterli anestezi arka ekstremite refleks azalması ile teyit edilir. </li><li> Bir elektronik tıraş makinesi kullanma sub-oksipital bölgede etrafında saç alanı Burnu için bir boyun traş edilir. </li><li> Hayvan ameliyat masasında sırtüstü yerleştirilir ve kuyruk steril bir insizyon sağlamak için betadin ile sürülür. </li><li> Düz 1 cm orta hat kesi kuyruk ventral alınır </li><li> Kuyruk arter tespit ve izole edilinceye kadar bir teşrih uzatılır. </li><li> Steril 26 gauge kateter kullanarak, kuyruk arter kanüle edilir ve arteriyel kan 0.15 ml&#39;lik bir enjektöre çekilir. </li><li> Bir steril gazlı kesi mühür vetbond uygulamasından önce hemostaz sağlamak için kesi sarılır. </li><li> To sıçan betadin ile sürülür alt-oksipital bölge üzerinde masa ve traş alana eğilimli açıktır. </li><li> Dikey bir orta hat kesi ile erişim kullanma sisterna magna kazanılır. </li><li> Bir kez tanımlanan bir 25 gauge iğne sisterna magna sokulur ve BOS 0.15 ml otolog kan hacminin enjeksiyonu ile artmış intrakraniyal basıncı önlemek için bir şırınga içine çekilir. </li><li> Şimdi, kuyruk atar damarından kan ekstre 0.15 mL sisterna magna içine yavaşça enjekte edilir. </li><li> İğne dikkatli çekilmiş sonra subaraknoid aralığa pıhtılaşma ve sağlamak için 30 saniye süreyle yerinde bırakılır. </li><li> Hemostaz sağlanır ve kesi bir stapler kullanılarak kapatıldı. </li><li> Hayvan şimdi ler arter etrafında tanklı donmak için kan izin vermek için, 20 dakika boyunca aşağıya doğru bir pozisyon 20 ° kafası ile bir ısınma eğilimli yüzeye yerleştirilir. </li><li> 1,1-1,15 Adımlar dışında ikinci bir ameliyata 48 saat boyunca tekrarlanır. </li&gt; </ol> 2. SAK Konu için Rat Cerrahi 0.15 ml Salin Enjekte <ol><li> Sıçan 0,1 mg / Ksilazin / Ketamin kemirgen kokteyl kg kullanan ve 5 dakika boyunca oturmak için izin anestezi olduğunu. </li><li> Yeterli anestezi arka ekstremite refleks azalması ile teyit edilir. </li><li> Bir elektronik tıraş makinesi kullanma sub-oksipital bölgede etrafında saç alanı Burnu için bir boyun traş edilir. </li><li> Hayvan ameliyat masasında sırtüstü yerleştirilir ve kuyruk steril bir insizyon sağlamak için betadin ile sürülür. </li><li> Düz 1 cm orta hat kesi kuyruk ventral alınır </li><li> Kuyruk arter tespit ve izole edilinceye kadar bir teşrih uzatılır. </li><li> Steril 26 gauge kateter kullanarak, kuyruk arter kanüle edilir ve arteriyel kan 0.15 ml&#39;lik bir enjektöre çekilir. </li><li> Bir steril gazlı kesi mühür vetbond uygulamasından önce hemostaz sağlamak için kesi sarılır. </li><li> Rat betadin ile boyanmıştır alt-oksipital bölge üzerinde masa ve traş alana eğilimli açıktır. </li><li> Dikey bir orta hat kesi ile erişim kullanma sisterna magna kazanılır. </li><li> Bir kez tanımlanan bir 25 gauge iğne sisterna magna eklenir ve CSF 0.15 ml bir şırınga içine çekilir ve örnek depolanır. </li><li> Şimdi, normal salin 0.15 ml (37 ° C) sisterna magna içine yavaşça enjekte edilir. </li><li> İğne 30 sn için yerinde bırakılır ve dikkatle geri çekilir. </li><li> Hemostaz sağlanır ve kesi bir stapler kullanılarak kapatıldı. </li><li> Hayvan artık 20 dakika boyunca pozisyon aşağı 20 ° kafa ile bir ısınma yüzeye yüzüstü yerleştirilir. </li><li> 2,1-2,15 Adımlar dışında ikinci bir ameliyata 48 saat boyunca tekrarlanır. </li></ol> 3. Sıçan Kurban <ol><li> İkinci ameliyat sonrası 5. günde ratlar kardiyak perfüzyon ile sakrifiye edilmiştir. </li><li> Sıçan ölümcül dozda (0 verilirÖlümcül Plus .2 ml / kg) (Vortech İLAÇ LTD., Dearborn, MI) </li><li> Dikey bir orta hat kesi ile karın boşluğuna yaklaştı ve periton açıldı. </li><li> Bir anterior torakotomi ve kalp maruz kalmaktadır. </li><li> Hayvan kanı akıtılır ve sonra% 4 paraformaldehid ile perfüze edilmiştir bir fosfat tampon solüsyonu (PBS, pH 7.4 ve 37 ° de) bağlı bir 26-gauge kateter kullanımı. </li><li> Perfüzyon ettikten sonra, perfüzyon durdurulur ve sıçan dekapitasyon masaya getirilir. </li><li> Dekapitasyon sonra, bir kemik rongeur beyin çıkarılması için kafatası çıkarmak için kullanılır. </li><li> Beyin ve beyin sapı dikkatle 48 saat süreyle kafatası çıkarılan ve% 4 paraformaldehid çözeltisi içine yerleştirilir ve 4 ° C&#39;de saklanır. </li></ol> 4. Vazospazm Değerlendirememesi Bölümler oluşturma <ol><li> Şimdi 4 gün için% 30 sakkaroz daldırılırsa sıçan beyin inci getirilirkesit için e kriyostat. </li><li> Bir kez cryoprotected, 12 uM bölümler arası konu tutarlılığı sağlamak için başlangıç ​​noktası olarak Anterior inferior serebellar arter (AICA) ile, kriyostat kullanılarak oluşturulur. </li><li> 20 bölüm Superior Serebellar arter (SCA) biten, her bir hayvan için oluşturulur. </li><li> Bölümleri bir cam slayt üzerine yerleştirilir ve histolojik metodoloji kullanarak vazospazm için değerlendirilir </li></ol>

<ol><li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke. 26, 1086-1091 (1995).</li>
<li>Cheng, G., Wei, L., Zhi-Dan, S., Shi-Guang, Z., Xiang-Zhen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atorvastatin+ameliorates+cerebral+vasospasm+and+early+brain+injury+after+subarachnoid+hemorrhage+and+inhibits+caspase-dependent+apoptosis+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Atorvastatin ameliorates cerebral vasospasm and early brain injury after subarachnoid hemorrhage and inhibits caspase-dependent apoptosis pathway.</a> BMC Neurosci. 10, 7-17 (2009).</li>
<li>Jackowski, A., Crockard, A., Burnstock, G., Russell, R. R., Kristek, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+time+course+of+intracranial+pathophysiological+changes+following+experimental+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">The time course of intracranial pathophysiological changes following experimental subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 10, 835-849 (1990).</li>
<li>Kaoutzanis, M., Yokota, M., Sibilia, R., Peterson, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurologic+evaluation+in+a+canine+model+of+single+and+double+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Neurologic evaluation in a canine model of single and double subarachnoid hemorrhage.</a> J. Neurosci. Methods. 50, 301-307 (1993).</li>
<li>Karaoglan, A., Akdemir, O., Barut, S., Kokturk, S., Uzun, H., Tasyurekli, M., Colak, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+resveratrol+on+vasospasm+after+experimental+subarachnoid+hemorrhage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Surg.+Neurol%22%5BJournal%5D)">The effects of resveratrol on vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Surg. Neurol. 70, 337-343 (2008).</li>
<li>Lee, J. Y., Huang, D. L., Keep, R., Sagher, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+an+improved+double+hemorrhage+rat+model+for+the+study+of+delayed+cerebral+vasospasm%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Characterization of an improved double hemorrhage rat model for the study of delayed cerebral vasospasm.</a> J. Neurosci. Methods. 168, 358-366 (2008).</li>
<li>Lee, J. Y., Sagher, O., Keep, R., Hua, Y., Xi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+experimental+rat+models+of+early+brain+injury+after+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Comparison of experimental rat models of early brain injury after subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 65 (2), 331-343 (2009).</li>
<li>Megyesi, J. F., Vollrath, B., Cook, D. A., Findlay, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+animal+models+of+cerebral+vasospasm%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">In vivo animal models of cerebral vasospasm: a review.</a> Neurosurgery. 46, 448-460 (2000).</li>
<li>Prunell, G. F., Mathiesen, T., Diemer, N. H., Svendgaard, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+subarachnoid+hemorrhage%3A+Subarachnoid+blood+volume%2C+mortality+rate%2C+neuronal+death%2C+cerebral+blood+flow%2C+and+perfusion+pressure+in+three+different+rat+models%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Experimental subarachnoid hemorrhage: Subarachnoid blood volume, mortality rate, neuronal death, cerebral blood flow, and perfusion pressure in three different rat models.</a> Neurosurgery. 52, 165-176 (2003).</li>
<li>Prunell, G. F., Mathiesen, T., Svendgaard, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+subarachnoid+hemorrhage%3A+Cerebral+blood+flow+and+brain+metabolism+during+the+acute+phase+in+three+different+models+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Experimental subarachnoid hemorrhage: Cerebral blood flow and brain metabolism during the acute phase in three different models in the rat.</a> Neurosurgery. 54, 426-436 (2004).</li>
<li>Ryba, M. S., Gordon-Krajcer, W., Walski, M., Chalimoniuk, M., Chrapusta, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydroxylamine+attenuates+the+effects+of+simulated+subarachnoid+hemorrhage%3A+implication+for+the+role+of+oxidative+stress+in+cerebral+vasospasm%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol.+Res%22%5BJournal%5D)">Hydroxylamine attenuates the effects of simulated subarachnoid hemorrhage: implication for the role of oxidative stress in cerebral vasospasm.</a> Neurol. Res. 31, 195-199 (1999).</li>
<li>Satoh, M., Parent, A. D., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibitory+effect+with+antisense+mitogen-activated+protein+kinase+oligodeoxynucleotide+against+cerebral+vasospasm+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Inhibitory effect with antisense mitogen-activated protein kinase oligodeoxynucleotide against cerebral vasospasm in rats.</a> Stroke. 33, 775-781 (2002).</li>
<li>Suzuki, H., Kanamaru, K., Tsunoda, H., Inada, H., Kuroki, M., Sun, H., Waga, S., Tanaka, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heme+oxygenase-1+gene+induction+as+an+intrinsic+regulation+against+delayed+cerebral+vasospasm+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Heme oxygenase-1 gene induction as an intrinsic regulation against delayed cerebral vasospasm in rats.</a> J. Clin. Invest. 104, 59-66 (1999).</li>
<li>Swift, D. M., Solomon, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subarachnoid+hemorrhage+fails+to+produce+vasculopathy+or+chronic+blood+flow+changes+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Subarachnoid hemorrhage fails to produce vasculopathy or chronic blood flow changes in rats.</a> Stroke. 19, 878-882 (1988).</li>
<li>Vatter, H., Weidauer, S., Konczalla, J., Dettmann, E., Zimmermann, M., Raabe, A., Preibisch, C., Zanella, F., Seifert, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+in+the+development+of+cerebral+vasospasm+after+experimental+subarachnoid+hemorrhage%3A+clinical+and+neuroradiological+assessment+of+the+rat+double+hemorrhage+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Time course in the development of cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage: clinical and neuroradiological assessment of the rat double hemorrhage model.</a> Neurosurgery. 58, 1190-1197 (2006).</li>
<li>Veelken, J. A., Laing, R. J., Jakubowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Sheffield+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Stroke. 26, 1279-1283 (1995).</li>
<li>Zubkov, A. Y., Nanda, A., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Signal+transduction+pathways+in+cerebral+vasospasm%5BTitle%5D)+AND+%22Pathophysiology%22%5BJournal%5D)">Signal transduction pathways in cerebral vasospasm.</a> Pathophysiology. 9, 47-61 (2003).</li>
</ol>

Biz bu çalışmaya ait açıklama yok.

Primatlar, bir daha benzer bir genetik yapısı ve anatomik özelliklere sahip insan, daha yakından gecikmiş vazospazmdan olayları taklit ve daha kolay kemirgenler 8&#39;den arteriyel değişiklikler, izlemek için non-invaziv görüntüleme (MRI ve anjiografi) tabi olabilir. Ancak, primat modelleri maliyet-engelleyici ve küçük hayvan modelleri daha karmaşık bakım ve etik konular ile ilişkili vardır. Geliştirilmiştir Küçük hayvan SAK modellerinde önceden SAK inducing üç yöntem üzerinde odaklanmıştır: 1) Endovasküler a...

<table border="1"><tbody><tr><td> Ekipman / reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog Numarası </td></tr><tr><td> Erkek SD sıçanlar (250-300 g) </td><td> Taconic </td><td> SD-M </td></tr><tr><td> 26 G Kateterler </td><td> Webster </td><td> 8416683 </td></tr><tr><td> 25 G İğneler </td><td> Bizon </td><td> 305122 </td></tr><tr><td> 1 cc Enjektörler </td><td> Merkez mağaza </td><td> 54245 </td></tr><tr><td> Ketamin / Ksilazin kokteyl </td><td> Hayvan Bakımı (SUNY) * </td><td> - </td></tr><tr><td> Betadine </td><td> Merkez mağaza </td><td> 51458 </td></tr><tr><td> Sakaroz </td><td> Sigma </td><td> S9378-1kg </td></tr><tr><td> Paraformaldehyde </td><td> Sigma </td><td> P6148-500G </td></tr><tr><td> Fosfat tampon çözeltisi </td><td> Balıkçı </td><td> BP-399-4 </td></tr><tr><td> Ameliyat Masası </td><td> Harvard </td><td> PY2 72-2590 </td></tr><tr><td> Ekim Bileşik (cryoprotection) </td><td> VWR </td><td> 25608-930 </td></tr><tr><td> Superfrost Slaytlar </td><td> Balıkçı </td><td> 12-550-15 </td></tr></tbody></table> * Laboratuar Hayvan Bakımı Bölümü, SUNY Upstate Medical University&#39;de Sentezlenen. 1 cc ekleme [100 mg / ml] [100 mg / ml] Ketamin 10 ml atlara.

deneysel subaraknoid kanama sonrası gecikmeli serebral vazospazm değerlendirin a düşük mortalite rat modeli

A Low Mortality Rat Model to Assess Delayed Cerebral Vasospasm After Experimental Subarachnoid Hemorrhage

Amaç: karakterize ve başlatan olaylar, fizyopatolojik değişiklikleri ve potansiyel tedavi hedefleri belirlemek için, sıçanlarda anevrizmal subaraknoid kanama (SAK) sonrası gecikmiş serebral vazospazm gösteren bir tekrarlanabilir model kurmak için. Yöntem: Yirmi sekiz erkek Sprague-Dawley sıçan (250 - 300 gr) - SAK veya salin kontrol keyfi iki gruba ayrıldı. SAK grubunda (n = 15) Sıçan subaraknoid kanama sisterna magna içine, 48 saat arayla, otolog kan çift enjeksiyonu ile sağlandı. Benzer bir şekilde, normal salin (n = 13) sisterna magna tuzlu kontrol grubu içine enjekte edildi. Sıçanlar ikinci kan enjeksiyonu sonrası beşinci günde sakrifiye edildi ve beyinleri histolojik analiz için korundu. Vazospazm derecesi, NIH Image-J yazılımı kullanılarak iç luminal kesit alanı ölçülerek, baziler arter kesitleri kullanılarak ölçüldü. Önemi olduTukey / Kramer &#39;s istatistiksel analiz kullanılarak test. Bulgular: histolojik kesitlerin analizinden sonra, baziler arter lümen kesit alanı eski grubunda vazospazm ile tutarlı, salin grubuna göre SAK daha küçüktür. SAK grubunda, baziler arterin iç alanı (.056 mikron ± 3) iç alanı ile salin kontrol grubuna (0,069 ile karşılaştırıldığında, beş gün ikinci kan enjeksiyonu (yedi gün ilk kan enjeksiyonu sonra) vazospazm itibaren belirgin olarak düşüktü ± 3, p = 0.004). Serebral vazospazm hiçbir ölüm oluşmamıştır. Sonuç: sıçan çift SAK modelinde küçük bir hayvan modelinde serebral vazospazm patofizyolojik mekanizmaları incelemek için kullanılabilecek bir hafif, survivable, baziler arter vazospazm indükler. Düşük ve kabul edilebilir ölüm oranı vazospazmın mekanizmaları elucid olabilir böylece ideal SAK hayvan modeli için sağlanması gereken önemli bir kriterdirated 7, 8. Modelin ek modifiye vazospazm ve nörolojik sınavlardan artan ciddiyetine göre ayarlama yapılabilir.

Yukarıda tarif edilen protokollere içinde, daha önce literatürde tarif edilmiş olandan daha iyi bir model nitelemeyi gerektirecektir inanıyoruz birkaç adım vardır. Burada bir tekrarlanabilir düşük mortalite vazospazmdan küçük bir hayvan modeli elde etmek ve düzgün yapılmadığında bu model ile ilişkili potansiyel tuzaklar önlemek için gerekli olan adımları odaklanmak. 1. Kuyruk Arter gelen Otolog Kan Beraberlik: Kuyruk arterde angiocatheter dikkatli yerleştirme modeli...

Anevrizmal subaraknoid kanama (SAK) zaman bir anevrizma rüptürü subaraknoid boşluğa oluşur kanıyor. Subaraknoid kanama birkaç yıl önce olduğu gibi aynı olmaya devam ediyor sonra bu olay gelen morbidite ve mortalite gelişmiş tedavi yaklaşımları nedeniyle bir düşüş, vazospazm riski olmuştur da. Serebral vazospazm başlatan olayları tanımlamak için kapsamlı ve tekrarlanabilir hayvan modeli kurmanın önemi Barry tarafından 1979 yılında deneysel vazospazm modelinde sıçanların ilk kullanımından bu yana araştırma odağı olmuştur<em&gt; Ve ark.</em&gt; Sıçanlarda Erken çalışma sisterna magna içine otolog kan tek bir enjeksiyon akut yol açtı (dakikalar içinde) ama vazospazm gecikmeli olmadığını gösterdi<sup&gt; 3, 6, 14</sup&gt;. Burada düşük mortalite SAK sıçan modelinde karakterize olduğunu tekrarlanabilir gecikmiş vazospazm sonuçları.

Deneysel Subaraknoid Kanama Sonrası Gecikmeli Serebral Vazospazm değerlendirin A Düşük Mortalite Rat Modeli

Amaç: Anevrizmal subaraknoid kanama (SAK) sonrası gecikmiş serebral vazospazmı gösteren, tekrarlanabilir bir model oluşturmak ve karakterize etmek...

Bu prosedürün genel amacı, gecikmiş serebral vazospazm oluşturmaktır. İnsan subaraknoid kanamasının bir kemirgen modelinde, ilk adım ventral kuyruk arterinden otolog kan toplamaktır. Ardından, atlanto oksipital membran açığa çıkarılır.Serebrospinal sıvı uzaklaştırıldıktan sonra, kan membran üzerinden enjekte edilir. Yaralar kapatılır ve belirli bir süre sonra analiz için örnekler toplanır. Son olarak, damar kesit alanlarındaki değişimler histolojik ve morfometrik yöntemler kullanılarak nicelleştirilir.Bugün, nörovasküler alandaki temel bilimsel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilecek, örneğin subaraknoid kanama sonrası serebral vazospazm ile buna bağlı gelişen nöronal disfonksiyon arasındaki ilişkinin ne olduğu gibi konuları ele alacak ve prosedürü uygulamalı olarak göstereceğiz. Bugün bana laboratuvarımda çalışan baş teknisyenim Michelle Kyle eşlik edecek. Başlamak için, anestezi altındaki sıçanda anestezinin uygun derinliğini onaylayın. Hazır olduğunuzda, suboksipital bölge çevresindeki cerrahi alanı hazırlayın.Ardından, hayvanı cerrahi masaya sırt üstü pozisyonda yerleştirin. Kuyruğu Betadine ile sterilize edin. Kuyruğun ventral kısmında bir santimetre uzunluğunda düz bir orta hat insizyonu yapın ve kuyruk arterini dikkatlice belirleyin.Anjiyo kateterinin kuyruk arterine titizlikle yerleştirilmesi esastır. Steril 26 gauge bir kateter kullanarak kuyruk arterini kanüle edin; iyi kan dönüşü, anjiyo kateterinin doğru yerleştirildiğini onaylar. Daha sonra ihtiyaç duyulana kadar kan akışını durdurmak için bir enjeksiyon kapatma kapağı takın.Ardından, sıçanı pron pozisyona getirin ve tıraşlanmış bölgeyi Betadine ile silin. Ensenin arkasında dikey bir orta hat insizyonu yaparak başlayın. Daha sonra, atlanto-oksipital membran görünür hale gelene kadar suboksipital bölgedeki dokuları künt diseksiyonla ayırın.Bu parlak beyaz membran izole edildikten sonra, cisterna magna'yı 25 gauge bir iğne ile delin. İğneyi dikkatlice yerinde tutarken, bir şırınga ile 0.5 milliliters beyin omurilik sıvısı çekin. Bu işlem, kan enjekte edildiğinde meydana gelen intrakraniyal basınç değişikliğini dengelemek için yapılır.Serebrospinal sıvı alındıktan sonra, kuyruktan 0,15 mililitre arteriyel kan çekin ve bunu yavaşça cisterna magna içerisine enjekte edin. Enjeksiyondan sonra, iğneyi 30 saniye boyunca yerinde bırakın. Subaraknoid boşlukta pıhtılaşmayı sağlamak için iğneyi dikkatlice geri çekin ve kesi yerini tamamen kapatın.Bir zımba düzeneği kullanarak kuyruk arterine steril gazlı bez uygulayın ve hayvanı, başı 20 derecelik bir açıda olacak şekilde, ısıtıcı bir yüzey üzerinde yüzüstü pozisyonda 20 dakika bekletin. Bu, kanama durduktan sonra baziler arter çevresindeki sisternalarda kanın pıhtılaşmasını sağlar; insizyonu kapatmak için vet bond kullanın ve enjeksiyonu tekrarlayın. 48 saat sonra, ikinci enjeksiyondan beş gün sonra kardiyak perfüzyon ve dekapiitasyonun ardından, başı bir elle sıkıca tutun ve kafatasını çıkarmak için kemik frezesi kullanın.Alttaki beyne zarar vermemeye dikkat edin. Beyni ve beyin sapını kranial kasanın içinden dikkatlice çıkarın ve her ikisini de %4 paraformaldehit çözeltisine yerleştirin. Numuneleri 4 °C'de 48 saat boyunca saklayın.48 saat sonra, örnekleri dört gün boyunca kalacakları %30'luk sükroz çözeltisine aktarın. Dört gün sonra, örneklerin inferior serebellar arterden başlayıp superior serebellar arterde sona eren kesitlerini oluşturun. Dört gün sonra, kriyostat kullanarak örneklerin anterior inferior serebellar arterden başlayıp superior serebellar arterde sona eren 12 mikronluk kesitlerini alın.Her hayvan için 20 kesit alın. Subaraknoid kanaması olan ve olmayan hayvanlardan alınan beyin sapı örnekleri burada gösterilmiştir. Baziler arter çevresindeki subaraknoid boşlukta kan birikimine dikkat edin.Bu, vazospazm indüklemek için yeterli kan hacmini temsil etmektedir. Bu görüntü, her iki gruptan baziler arter kesitlerini göstermektedir. Subaraknoid kanaması olan sıçanlarda lümen kesit alanı daha küçüktü ve internal elastik laminada belirgin kıvrımlanmalar mevcuttu.Buna karşılık, salin kontrol grubundaki baziler arter alan olarak daha büyüktü ve oluklu bir internal elastik lamina göstermiyordu. Bu sütun grafiği, vazospazm nedeniyle kan enjekte edilen hayvanlarda baziler arter lümeninin kesit alanının, salin enjekte edilenlere kıyasla anlamlı derecede daha küçük olduğunu göstermektedir. Bu videoyu izledikten sonra, ventral kuyruk arterinden otolog kanın nasıl elde edileceği, atlanto oksipital membranın nasıl açığa çıkarılacağı ve kemirgen subaraknoid kanama modelini yeniden oluşturmak için subaraknoid boşluğa nasıl kan enjekte edileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.Bu videoyu izlediğiniz için teşekkürler.

a-low-mortality-rat-model-to-assess-delayed-cerebral-vasospasm-after

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Sıçan iskemik beyin hasarı Cerrahi indüksiyon inme araştırma için yaygın olarak kullanılan bir model. Burada orta serebral arter oklüzyonu ile fokal serebral iskemi indüksiyon göstermektedir. Histolojik boyama ve manyetik rezonans görüntüleme ile enfarkt Görselleştirme de gösterilir.

Endovasküler Dikiş Rat Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fokal Serebral İskemi Model

Bu video, bir subaraknoid kanama sıçan modeli oluşturma prosedürünü göstermektedir. Anestezi uygulanmış bir sıçan, intrakraniyal basıncı ve serebral kan akışını ölçmek için problarla implante edilir. Hedef bölge belirlenir ve iğne ön kiazmatik bir pozisyonda yerleştirilir. Otolog kan daha sonra subaraknoid boşluğa enjekte edilir, kafa içi basıncı arttırır ve serebral kan akışını azaltır ve model oluşturulur.

Otolog Kan Enjeksiyonu ile İndüklenen Subaraknoid Kanama Sıçan Modelinin Kurulması

Willis perforasyon intralüminal Circle subaraknoid kanama standartlaştırılmış bir fare modeli tarif edilmektedir. Gemi perforasyon ve subaraknoid kanama intrakranial basınç izleme tarafından izlenir. Buna ek olarak, çeşitli çok önemli parametreler kaydedilir ve fizyolojik koşulları sağlamak için kontrol edilir.

Subaraknoid Kanama bir fare modeli

Tavşandaki deneysel intrakraniyal basınç kontrollü kan şantı subaraknoid kanama (SAK) modeli, standart prosedürleri birleştirir - subklavyen arter kanülasyonu ve transkutanöz sisterna magna ponksiyonu, SAK sonrası insan patofizyolojik durumlarının yakından taklit edilmesini sağlar. Adım adım talimatlar sunuyoruz ve başarılı deneysel SAK oluşturma için temel cerrahi noktaları tartışıyoruz.

Subaraknoid Kanama Akut ve Geç sekeli Çalışmaları Tavşan Kan şant Modeli: Teknik Yönleri

Bu makalenin amacı mikro bilgisayarlı tomografi ve serebral vasospasm ölçmek için kullanılan tüm gemi parçaları hacimleri belirlenmesi sonra farelerde serebrovasküler ağaç 3 boyutlu rekonstrüksiyon sağlayan bir yöntem sunmaktır fare modelleri subaraknoid kanama.

Subaraknoid kanama, bir fare modeli serebral Vasospasm miktar hacimsel bir yöntemi

Bu protokolde, otolog tam kandan cisterna magna'ya çift enjeksiyon la standart laştırılmış subaraknoid kanama (SAH) fare modeli tanımlanmıştır. Çift enjeksiyon prosedürünün yüksek standardizasyon derecesi mortalite ile ilgili göreceli güvenlik ile SAH bir orta-akut modeli temsil eder.

Subaraknoid Kanama Modeli olarak Cisterna Magna içine Kan Çift Doğrudan Enjeksiyon

Subaraknoid kanama insanda yüksek mortalite ve morbidite yükü taşımaya devam etmektedir. Durum ve patofizyolojisi hakkında daha fazla araştırmayı kolaylaştırmak için, kiazmatik öncesi, tek enjeksiyon modeli sunulmaktadır.

Bir sıçan modelinde deneysel subaraknoid kanamayı indüklemek için kiazmatik öncesi, tek otolog kan enjeksiyonu

Burada, doğru kanama bölgesini sağlamak ve diğer ilgili intrakraniyal patolojileri dışlamak için operasyondan 24 saat sonra manyetik rezonans görüntüleme (MRG) ile kombine edilen endovasküler filament perforasyonu ile indüklenen standartlaştırılmış bir SAH fare modeli sunulmaktadır.

Manyetik Rezonans Görüntüleme (MRG) ile Kombine Subaraknoid Kanama için Endovasküler Perforasyon Modeli

Mevcut protokol, serebral damarların anatomik yapısını hasara neden olmadan koruyan bir orta serebral arter oklüzyonu/reperfüzyonu sıçan modelini tanımlar.

Serebral damarların anatomik yapısına zarar vermeden orta serebral arter tıkanıklığı/reperfüzyonunun bir sıçan modeli

İpliksi Orta serebral arter oklüzyonu farelerde iskemik inme eğitimi için ortak bir model.

Fare Modelleme İnme - Filament Model Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Öğrenin, subaraknoid kanama sonrası gecikmeli serebral vazospazmı fare modelinde incelemek için otojen kan toplama ve sisterna magna enjeksiyonu yöntemini. Bu model nörovasküler araştırmalar için değerlidir.

Deneysel Subaraknoid Kanama Sonrası Gecikmeli Serebral Vazospazm değerlendirin A Düşük Mortalite Rat Modeli

Daha fazla video keşfet