Name: Substantia nigra ve ventral Tegmental Bölgesi Dopamin Yönetmelik Kapsamlı Profilleme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-08-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 54 s
Description: Öğrenin farelerde substantia nigra ve ventral tegmental bölgeden dopamin düzenlemesini analiz etme yöntemini. HPLC ve Western blot teknikleriyle moleküler mekanizmaları araştırın.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma ve 2,10 olarak anılan, finansmanı, Yaşlılık Araştırma, Edward P. Stiles Fonu ve Kuzeybatı Louisiana Biyomedikal Araştırma Vakfı Amerikan Federasyonu MF Salvatore bir araştırma hibeler ile, kısmen sağlandı ve Ike Muslow predoctoral Kardeşliği BS Pruett için, LSU Sağlık Bilimleri Merkezi-Shreveport.

<ol><li>Trevitt, J. T., Carlson, B. B., Nowend, K., Salamone, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substantia+nigra+pars+reticulate+is+a+highly+potent+site+of+action+for+the+behavioral+effects+of+the+D1+antagonist+SCH23390+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Substantia nigra pars reticulate is a highly potent site of action for the behavioral effects of the D1 antagonist SCH23390 in rat.</a> Psychopharmacology. 156, 32-41 (2001).</li>
<li>Salvatore, M. F., Pruett, B. S., Spann, S. L., Dempsey, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+reveals+a+role+for+nigral+tyrosine+hydroxylase+ser31+phosphorylation+in+locomotor+activity+generation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Aging reveals a role for nigral tyrosine hydroxylase ser31 phosphorylation in locomotor activity generation.</a> PLoS ONE. 4, e8466(2009).</li>
<li>Rossato, J. L., Bevilaqua, L. R. M., Izquierdo, I., Medina, J. H., Cammarota, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+controls+persistence+of+long-term+memory+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Dopamine controls persistence of long-term memory storage.</a> Science. 325, 1017-1020 (2009).</li>
<li>Keller, C. M., Salvatore, M. F., Pruett, B. S., Guerdin, G. F., Goeders, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biphasic+dopamine+regulation+in+mesoaccumbens+pathway+in+response+to+non-contigent+binge+and+escalating+methamphetamine+regimens+in+the+Wistar+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Biphasic dopamine regulation in mesoaccumbens pathway in response to non-contigent binge and escalating methamphetamine regimens in the Wistar rat.</a> Psychopharmacology. 215, 513-526 (2011).</li>
<li>Lu, L., Dempsey, J., Liu, S. Y., Bossert, J. M., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single+infusion+of+brain-derived+neurotrophic+factor+into+the+ventral+tegmental+area+induces+long-lasting+potentiation+of+cocaine+seeking+after+withdrawal%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A single infusion of brain-derived neurotrophic factor into the ventral tegmental area induces long-lasting potentiation of cocaine seeking after withdrawal.</a> J. Neurosci. 24, 1604-1611 (2004).</li>
<li>Hoffer, B. J., Hoffman, A., Bowenkamp, K., Huettl, P., Hudson, J., Martin, D., Lin, L. F., Gerhardt, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor+reverses+toxin-induced+injury+to+midbrain+dopaminergic+neurons+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Lett%22%5BJournal%5D)">Glial cell line-derived neurotrophic factor reverses toxin-induced injury to midbrain dopaminergic neurons in vivo.</a> Neurosci. Lett. 182, 107-111 (1994).</li>
<li>Salvatore, M. F., Zhang, J. L., Large, D. M., Wilson, P. E., Gash, C. R., Thomas, T. C., Haycock, J. W., Bing, G., Stanford, J. A., Gash, D. M., Gerhardt, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Striatal+GDNF+administration+increases+tyrosine+hydroxylase+phosphorylation+in+the+rat+striatum+and+substantia+nigra%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Striatal GDNF administration increases tyrosine hydroxylase phosphorylation in the rat striatum and substantia nigra.</a> J. Neurochem. 90, 245-254 (2004).</li>
<li>Lu, L., Wang, X., Wu, P., Xu, C., Zhao, M., Morales, M., Harvey, B. K., Hoffer, B. J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+ventral+tegmental+area+glial+cell-line+derived+neurotrophic+factor+in+incubation+of+cocaine+craving%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Role of ventral tegmental area glial cell-line derived neurotrophic factor in incubation of cocaine craving.</a> Biol. Psychiatry. 66, 137-145 (2009).</li>
<li>Lavicky, J., Dunn, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corticotropin-releasing+factor+stimulates+catecholamine+release+in+hypothalamus+and+prefrontal+cortex+in+freely+moving+rats+as+assessed+by+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Corticotropin-releasing factor stimulates catecholamine release in hypothalamus and prefrontal cortex in freely moving rats as assessed by microdialysis.</a> J. Neurochem. 60, 602-612 (1993).</li>
<li>Salvatore, M. F., Pruett, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dichotomy+of+tyrosine+hydroxylase+and+dopamine+regulation+between+somatodendritic+and+terminal+field+areas+of+nigrostriatal+and+mesoaccumbens+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Dichotomy of tyrosine hydroxylase and dopamine regulation between somatodendritic and terminal field areas of nigrostriatal and mesoaccumbens pathways.</a> PLoS ONE. 7, e29867(2012).</li>
<li>Salvatore, M. F., Garcia-Espana, A., Goldstein, M., Deutch, A. Y., Haycock, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stoichiometry+of+tyrosine+hydroxylase+phosphorylation+in+the+nigrostriatal+and+mesolimbic+systems+in+vivo%3A+Effects+of+acute+haloperidol+and+related+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Stoichiometry of tyrosine hydroxylase phosphorylation in the nigrostriatal and mesolimbic systems in vivo: Effects of acute haloperidol and related compounds.</a> J. Neurochem. 75, 225-232 (2000).</li>
<li>Salvatore, M. F., Waymire, J. C., Haycock, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depolarization-stimulated+catecholamine+biosynthesis%3A+involvement+of+protein+kinases+and+tyrosine+hydroxylase+phosphorylation+sites+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Depolarization-stimulated catecholamine biosynthesis: involvement of protein kinases and tyrosine hydroxylase phosphorylation sites in situ.</a> J. Neurochem. 79, 349-360 (2001).</li>
<li>Haycock, J. W., Lew, J. Y., Garcia-Espana, A., Lee, K. Y., Harada, K., Meller, E., Goldstein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+serine-19+phosphorylation+in+regulating+tyrosine+hydroxylase+studied+with+site-+and+phosphospecific+antibodies+and+site-directed+mutagenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Role of serine-19 phosphorylation in regulating tyrosine hydroxylase studied with site- and phosphospecific antibodies and site-directed mutagenesis.</a> J. Neurochem. 71, 1670-1675 (1998).</li>
<li>Lindgren, N., Xu, Z. Q., Linskog, M., Herrera-Marschitz, M., Goiny, M., Haycock, J. W., Goldstein, M., Hokfelt, T., Fisone, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+tyrosine+hydroxylase+activity+and+phosphorylation+at+ser19+and+ser40+via+activation+of+glutamate+NMDA+receptors+in+rat+striatum%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Regulation of tyrosine hydroxylase activity and phosphorylation at ser19 and ser40 via activation of glutamate NMDA receptors in rat striatum.</a> J. Neurochem. 74, 2470-2477 (2000).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Şekil 1 &#39;de belirtildiği gibi, yukarıda detaylı yöntemler dopamin birden readouts ve sıçan veya fare ya elde SN ya VTA bir numuneden olan proteinleri düzenleyen TH, DAT ve VMAT2 vermelidir. Yine, bu Protokolün yürütülmesi yararları araştırmacı dopamin hemen her deneysel paradigma altında in vivo olarak düzenlenir ve bunu yaparken, herhangi bir gerekli hayvan sayısını azaltarak önemli deneysel kaynak tasarrufu nasıl bir operasyonel eşleştirilmiş girilmesi gerekmektedir olmalarıdır deney. <p class="jove_c...

HPLC sisteminde: Temel sistemimizin, bir Shimadzu LC10-ADvp HPLC pompası, bir Waters WISP 717 otomatik örnek enjektör, bir 250 mm x 4.4 5 mikron Spherosorb ODS-1 C18 ters faz kolonu (Waters), bir Bioanalytical Systems (BAS) TL12 dual camsı oluşmaktadır karbon elektrot, iki BAS LC4B elektrokimyasal dedektörler ve Waters 2 veri toplama ve entegrasyon sistemi güçlendirin. Sütun 30-45 tutulur ° C (BAS LC22A kolon ısıtıcı). Mobil faz, 0.1 M sodyum fosfat (pH 3,0), 0.1 mM EDTA, 1-oktan sülfonik asit (Eastman Kodak) 0,2-0,4 mM, ve bir 0.45 mikron filtre ile filtrelenmiştir% 0.35 asetonitril (v / v) &#39;dir. Akış hızı 1.2 ml / dak taşımaktadır. Mobil faz dört litrelik gruplar pH, oktan sülfonik asit ve kolon sıcaklığı ayarlayarak ayırma için optimize edilir. Mobil faz geri kazanılır ve sürekli çözünmüş oksijen kaldırmak için helyum gazı ile temizlenir. Mobil faz, geri dönüşümümakul bir zaman süresi için iyi çözünürlük korumak için hemen hemen esastır. Mobil faz raf ömrü her dönem ilk 2-7 dakika boşa aktarmak için bir akış anahtarı (entegratör tarafından kontrol) ile korunur. Elektrotlar bir Ag/AgC1 referans elektroduna göre yaklaşık 0,78 ve 0.95V potansiyelleri az tutulur. Yüksek potansiyel olarak elektrot triptofan (NMDA ve dahili standart) tayin edilmesi için özel olarak kullanılır. 0.78 V potansiyel triptofan dışındaki monoaminler ve bileşiklerin tespiti için gürültü oranı üstün bir sinyali sağlar. Kromatogramlar güçlendirin iş istasyonunun sabit diskinde saklanan ve daha sonra işlenmiş ve veri metabolit miktarları ve grup veri derleme hesaplanması için bir Excel doğrudan aktarılır. Pompa: Shimadzu LC-10AD Hücre: BAS Çapraz Akış. Camsı karbon 0.780 ile 0.9 elektrot çalışma50 V potansiyel. Dedektör: BAS LC-4B çift kanal modunda çalıştırılır. Veri ACQ. Sistem: Waters Pro 2 güçlendirin. Enjektör: Waters WISP 717 Sütun: Waters Spherosorb ODS-1, 5 uM partikül, 4.4 mm X 250 mm. <table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td></tr><tr><td> Sodyum dodesil sülfat (SDS) </td><td> - JT Baker </td><td> 4095-02 </td></tr><tr><td> Trizma Base </td><td> Sigma </td><td> T1503-1KG </td></tr><tr><td> Trizma HCl </td><td> Sigma </td><td> T3253-1KG </td></tr><tr><td> Gliserin </td><td> Sigma </td><td> G8773-500 ml </td></tr><tr><td> PVP-40 </td><td> Sigma </td><td> PVP40-1KG </td></tr><tr><td> DPBS </td><td> Gibco </td><td> 21600-069 </td></tr><tr><td> Tween20 </td><td> Sigma </td><td> P1379-500 ml </td></tr><tr><td> Glisin </td><td> Sigma </td><td> G8898-1KG</td></tr><tr><td> Ponceau S </td><td> Fluka </td><td> 81460 </td></tr><tr><td> Bromophenol Mavi </td><td> Sigma </td><td> B8026-5G </td></tr><tr><td> Ditiyotretol </td><td> Sigma </td><td> D-9163 </td></tr><tr><td> Protein Standart 2 mg BSA </td><td> Sigma </td><td> P5619-25VL </td></tr><tr><td> Pierce BCA Protein Testi Reaktif A </td><td> Thermo Fisher Scientific- </td><td> 23223 </td></tr><tr><td> Hassas Plus, Protein Standart </td><td> Bio Rad </td><td> 161-0373 </td></tr><tr><td> [125l]-protein A, spesifik aktivite </td><td> Perkin-Elmer </td><td></td></tr></tbody></table> Tablo 2. Özel reaktifler. <table border="1"><tbody><tr><td> Reaktifler </td><td> Formüller </td></tr><tr><td> % 10 SDS </td><td> 10 g SDS, 100 mL DI H 2 0 </td></tr><tr><td> % 1 SDS (pH 8.2) </td><td><ol><li> 10 mL% 10 SDS </li><li> 60.5 mg Trizma Tabanı </li><li> 37.22 mg EDTA </li><li> 90 mL DI H 2 0 </li></ol></td></tr><tr><td> Bakır II Sülfat Çözüm </td><td><ol><li> 1 g bakır sülfat II </li><li> 25 mL DI H 2 0 </li></ol></td></tr><tr><td> 3X Örnek Tampon </td><td><ol><li> Trizma Base 2.27 g </li><li> SDS 6 g </li><li> Ditiyotretol 0.463 g </li><li> Gliserol 30 g </li><li> Bromophenol Mavi 10 mg </li><li> Dih 2 0 (ilk H 40 ml reaktiflerin üzerinde Mezür 2 0 ekleyin; hacmi 100 ml ulaşana kadar daha sonra H 2 0 ekleyin) </li><li> HCI (ekledikçe 6.85 pH ulaşmak için gerekli) </li><li> 50 2.0 ml tüpler çözüm dondurun. </li></ol> (100 ml yapar): 3X Örnek Tampon hacmi ihtiyaç = örneğinde kullanılan SDS ½ hacmi. </td></tr><tr><td> 1X Örnek Tampon </td><td> DI H 2 0 kullanarak 1X örnek tampon 3X Örnek Tampon aşağı sulandırınız </td></tr><tr><td> 10X<html> Tampon Koşu (4 L yapar) </td><td><ol><li> Trizma Bankası 121.1 g </li><li> Glisin 577 g </li><li> SDS 40 g </li></ol></td></tr><tr><td> 10X Transferi Tampon: (4 L yapar) </td><td><ol><li> Glisin 360 g </li><li> Trizma Base 96 g </li></ol></td></tr><tr><td> Ponceau </td><td><ol><li> Ponceau S. 0.5 g </li><li> Asetik asit 5 mL </li><li> DI H 2 0 95 mL </li></ol></td></tr><tr><td> .2% HCl </td><td> DI H 2 0 500ml 5.2 mL HCl </td></tr><tr><td> PVP-T20 soln engelleme. (4 L yapar) </td><td><ol><li> PVP-40 40 g </li><li> DPBS 38.2 g </li><li> Tween20 2 g </li><li> Thimerisol 0.4 g </li><li> 1M Tris pH 7.6 (60.6 g Tris HCl + 500 ml DI H 2 0 13.9 g Tris Base) - 50 ml </li></ol></td></tr><tr><td> 10X Blot Tampon (4 L yapar) </td><td><ol><li> Tween 20 20 g </li><li> Tris Base 14 g </li><li> Tris HCI 61 g </li></ol></td></tr></tbody></table>ontent &quot;&gt; Tablo 3. Protein Testi ve Western Blot Formüller. Tirozin hidroksilaz standartları: Bu laboratuvar tarafından kullanılan kalibre TH protein ve fosforilasyon standartları sonuçta Dr John Haycock 11 laboratuar kaynaklı önceden ayarlanmış TH standartlarına karşı TH ve protein fosforilasyon stoichiometries için analiz edildi PC12 hücre ekstreleri, türetilen .

substantia nigra ve ventral tegmental bölgesi dopamin yönetmelik kapsamlı profilleme

Comprehensive Profiling of Dopamine Regulation in Substantia Nigra and Ventral Tegmental Area

Dopamin MSS bir gayretle çalıştı nörotransmitterdir. Nitekim, lokomotor aktivite ve ödül ile ilgili davranışı kendi katılımı dopamin regülasyonu ile ilişkili moleküler eksikliklerin bir soruşturma beş yıl teşvik etti. Nigrostriatal ve mesoaccumbens yolların terminal alanında bölgelerde düzenlenmesi için moleküler temeli üzerine beyin odak dopamin yönetmeliğin bu soruşturmaların çoğunluğu, striatum ve nukleus akumbens. Ayrıca, bu tür çalışmaların sadece ıslak doku ağırlığı normale dopamin doku içeriğinin analizi üzerinde yoğunlaşmıştır. Böyle tirozin hidroksilaz (TH) protein, TH fosforilasyon, dopamin taşıyıcısı (DAT) ve veziküler monoamin transporter 2 (VMAT2) protein olarak, dopamin düzenleyen proteinlerin incelenmesi genellikle aynı örnek dopamin doku içeriğinin analizini içermez. Dopamin doku içeriği ve düzenleyen proteinleri (post-tra dahil olmak üzere her iki analiz yeteneğinslational değişiklikler) protein düzeyi ve TH, DAT, ya VMAT2 fonksiyonu ile dopamin arasındaki ilişkiyi yorumlama doğasında güç verir, aynı zamanda örnek ekonomisi uzatır sadece. Henüz daha az maliyet ve çevirmenize araştırmacılar &#39;seçim hemen her paradigma dopamin moleküler düzenlenmesi irdeliyoruz üretir. Biz orta beyindeki analizleri odaklanır. SN ve VTA genellikle dopamin regülasyonu en çalışmalarda ihmal rağmen, bu çekirdekler kolayca uygulama ile disseke edilir. Kapsamlı bir dopamin doku içeriği ve TH okuma, DAT, ya VMAT2 yapılabilir. Orada davranışı SN ve VTA dopamin fonksiyonunun etkisi literatürde filizlenen ve orada 1-5 eksojen maddeler veya hastalık süreçleri sıkışmaları edilir. Ayrıca, bu tür büyüme faktörleri gibi bileşikler SN veya VTA içinde nispeten büyük ölçüde, dopamin ve dopamin düzenleyen proteinler üzerinde derin bir etkiye sahiptir <sup&gt; 6-8. Bu nedenle, bu yöntem özel tedaviler davranış ve dopamin regülasyonu modüle nasıl Araştırmalarına uzatmak istiyorsanız laboratuvarlar referans sunulmuştur. Burada, çok adımlı bir yöntem dopamin doku içeriğinin analizi, TH protein düzeyleri, DAT, ya VMAT2 ve kemirgen ortabeyin gelen substantia nigra ve VTA gelen TH fosforilasyon için sunulmuştur. TH fosforilasyon analizi sadece TH aktivitesi nasıl düzenlendiği, aynı zamanda belirli bir paradigma içinde somatodendritik çekirdeklerinde etkilenen sinyal kademelerin önemli anlayışlar elde edebilirsiniz. Biz bu iki çekirdeğin ve her çekirdek (Şekil 1) için spesifik in vivo dopamin regülasyonu moleküler mekanizmaları, ortaya bir profil üreten disseke doku örnek işleme ayırmak diseksiyon tekniği örneklerle gösterecek.

Dopamin belirgin hücre gövdeleri ve dopamin nöron dendritler içeren Ortabeyin çekirdekler, düzenlenmiştir. Burada substantia nigra (SN) ve kemirgenlerde ventral tegmental alan (VTA) ve orta beyin çekirdeklerinde dopamin regülasyonu üzerine, böylece bir diseksiyon ve örnek işleme sonuçları maksimize etmek için yaklaşım, sonuç ve görüşlerini açıklar.

Substantia nigra ve ventral Tegmental Bölgesi Dopamin Yönetmelik Kapsamlı Profilleme

Dopamin, MSS'de yoğun bir şekilde çalışılan bir nörotransmitterdir. Nitekim, lokomotor aktivite ve ödülle ilişkili davranışlardaki rolü, beş...

Bu prosedürün genel amacı, orta beyin bölgesinin somatodendritik bölgelerinden alınan tek bir doku diseksiyonu ile dopamin düzenlemesiyle ilişkili moleküler okumaların bilgisini maksimize etmektir. Bu, öncelikle substantia nigra'yı ventral segmental alandan ayırmak için hassas bir diseksiyon yapılarak gerçekleştirilir. İkinci adım, dokuların HPLC ile dopamin analizi için işlenmesi ve çökeltilmiş endojen proteinin analiz için daha ileri düzeyde işlenmesidir.Ardından, çöktürülmüş proteinin toplam protein içeriği için işlenmesi, örnekteki dopamin doku içeriği okumasıyla birlikte hangi dopamin düzenleyici proteinlerin veya protein fosforilasyonunun ölçülebileceğinin belirlenmesine olanak tanır. Nihayetinde, orta beynin ayrı somatodendritik bölgelerindeki dopamin ve onu düzenleyen proteinlerin analizleri, dopamin düzenlemesi ile ilişkili moleküler mekanizmalara dair sonuçlar çıkarılmasına imkan sağlar.Monoaminler birçok davranışsal sonucu etkiler ve nitekim bağımlılık, biyoloji ve özellikle Parkinson hastalığı gibi lokomotor disfonksiyon alanlarında çalışan araştırmacılar, laboratuvarımda incelediğimiz dopamin gibi monoaminlerin davranışsal sonuçları nasıl etkilediğiyle yakından ilgilen

comprehensive-profiling-dopamine-regulation-substantia-nigra-ventral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bir protokol unilateral 6-OHDA lezyonlar, farelerde medyal önbeyin demet gerçekleştirmek için tarif edilmektedir. Bu yöntem, striatal dopamin ve 90,63&gt;% 95 kaybı gösteren hayatta kalan hayvanların% 89 ile düşük mortalite oranı (% 13.3) ±% -4,02, lezyonun tarafa doğru ipsiversive dönme önyargı vardır.

Parkinson Hastalığının tek taraflı lezyonlanmıştır 6-OHDA Mouse Model Geliştirme

Striatal beyin dilimleri elektriksel olarak uyarılmış presinaptik dopamin dinamiklerini ölçmek için hızlı tarama döngüsel voltametri kullanma.

Hızlı tarama Cyclic Voltametri striatal Beyin Slices presinaptik dopamin Dinamiği

Bu video, bir potansiyostat ve ventral tegmental alandaki dopaminerjik aktiviteyi modüle etmek için ilaçların infüzyonu kullanılarak çekirdek akumbenlerinde dopamin salınımını ölçmek için anestezi uygulanmış bir sıçanda elektrotların ve kanüllerin implantasyonunu göstermektedir.

VTA Dopaminerjik Nöron Reseptör Manipülasyonu ile Bir Sıçan Modelinde Dopamin Salınımının İzlenmesi

Bu protokol, yetişkin farelerde adaptif davranış ve beyin onarımının altında yatan çevresel kaynaklı beyin değişikliklerini incelemek için iki farklı çevresel manipülasyonu ve eşzamanlı bir beyin infüzyon protokolünü tanımlar.

Yetişkin Farelerde Orta beyin dopamin Nöronlar Sayısının Çevre Modülleri

Hızlı tarama çevrimsel voltametri, ilaçlar, hastalıklar ve diğer deneysel manipülasyonlar bağlamında in vivo dopamin nörotransmisyonunu izleyebilir. Bu çalışma, dopamin salınımı ve yeniden alım dinamiklerinin tahminlerini nicel nörobiyolojik modele göre nicel modele göre elektrikle uyarılan dopamin tepkilerini modellenebilen QNsim1.0 yazılımının uygulanmasını açıklamaktadır.

QNsim 1.0&#39;u Kullanarak Elektromanyetik Uyarılmış Dopamin Nörotransmisyon Verisinden Hızlı Tarama Çevrimsel Voltametri Veri Modellenmesi

Synaptosomal dopamin alımı ve yüksek performanslı sıvı Kromatografi analiz temsil deneysel araçları tarafından değerlendirilmesi dopamin taşıyıcı işlevi ve striatal dokusunda dopamin düzeyleri dopamin homeostazı farelerde araştırmak için anılan sıraya göre. Burada protokolleri dopamin doku içeriği ölçmek ve dopamin taşıyıcı işlevselliğini değerlendirmek için mevcut.

Dopaminerjik Homeostasis farelerde yüksek performanslı sıvı Kromatografi analizi ve Synaptosomal dopamin alımı kullanımı tarafından değerlendirilmesi

Dopamin D1-Alfa reseptör nucleus accumbens tanımlaması D1 reseptör disfonksiyonu bir merkezi sinir sistemi hastalığı sırasında açıklığa kavuşturulması için önemlidir. Biz bir belirli beyin bölgesinde tek RNA molekülleri görselleştirmek için bir roman RNA in situ hibridizasyon tahlil yapılır.

Dopamin D1-Alfa reseptör kemirgen Nucleus Accumbens bir yenilikçi RNA Situ içinde hafiye teknoloji tarafından içinde tanımlaması

Bu protokolün amacı, ventral tegmental alan reseptörlerini, alt bölüm dopamin salınımı için katkılarını incelemek için doğrudan manipüle etmektir.

Phasic Dopamin'in Ventral Tegmental Alan Reseptör Reseptör Reseptör Düzenlemesini Değerlendirmek için Hızlı Taramalı Döngüsel Voltammetri (CIS-FSCV) ile Kombine infüzyon ve stimülasyon

Burada sıçan substantia nigra pars compacta dopaminerjik nöron sayısının yarı nicel belirlenmesi için otomatik bir yöntem sunuyoruz.

Otomatik Görüntü Analizi Kullanılarak Kemirgen Modellerinin Substantia Nigra'sında Dopaminerjik Nöron Yoğunluğunun Yarı Nicel Belirlenmesi

Bu protokol, substantia nigra'nın nöromelanine duyarlı manyetik rezonans görüntüleme verilerinin nasıl elde edileceğini gösterir.

Substantia Nigra'nın Nöromelanine Duyarlı Manyetik Rezonans Görüntülemesi için Standartlaştırılmış Veri Toplama

Öğrenin farelerde substantia nigra ve ventral tegmental bölgeden dopamin düzenlemesini analiz etme yöntemini. HPLC ve Western blot teknikleriyle moleküler mekanizmaları araştırın.

Substantia nigra ve ventral Tegmental Bölgesi Dopamin Yönetmelik Kapsamlı Profilleme

Daha fazla video keşfet