RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/4178-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Kemik metastazının patogenezine, anjiyojenez önemli bir proses ve bu nedenle görüntüleme ve tedavi için bir hedef temsil eder. Burada siteye özel meme kanseri kemik metastazı bir sıçan modeli sunmak ve non-invaziv görüntü anjiyogenez için stratejiler tarif
Bu deney, bir sıçan meme kanseri modelinde anjiyogenezi non-invaziv olarak değerlendirmek için ücretsiz görüntüleme tekniklerini kullanır. Kemik metastazı ilk olarak insan meme kanseri hücrelerini yüzeysel epigastrik artere enjekte ederek çıplak sıçanların arka bacağında bölgeye özgü osteolitik kemik metastazlarını indükler. 25 ila 30 gün sonra, hayvanı görüntüleme analizi için hazırlayın ve manyetik rezonans görüntüleme, bilgisayarlı tomografi ve ultrason taraması ile veri elde edin.
Daha sonra, osteolitik lezyonlarda vaskülarizasyonun farklı yönlerini tanımlamak için bu görüntüleme modalitelerinden elde edilen tamamlayıcı morfolojik ve fonksiyonel verileri kullanın. Elde edilen sonuçlar arasında makro damar mimarisi, lokal kan hacmi, perfüzyon ve geçirgenliğin yanı sıra kemik metastazlarındaki vaskülarizasyonun gerçek zamanlı görüntülenmesi yer almaktadır. Bu yöntemler, kemik metastazı patogenezinde anjiyogenezin rolü hakkındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir ve bu da malign kemik lezyonlarının görüntülenmesi ve tedavisi üzerinde etkileri vardır.
Burada açıklanan hayvan modeli için, N-D-A-M-B 2 3 1 kemiğe özgü alt hücre hattının kullanılmasına gerek yoktur çünkü tümör alma oranı %90'ın üzerindedirRPMI 1640'ta insan meme kanseri hücrelerinin logaritmik bir kültürüyle başlayın. %10 fetal baldır serumu ile desteklenmiş ortam. Alt birleşen tümör hücrelerinin tripsin ile hasat edilmesinden sonra, hücreleri bir neubauer odası kullanarak numaralandırın ve bunları RPMI 1640'ta askıya alın, tüm deneyler sorumlu Devlet Hayvan Etik Komitesi tarafından onaylandı. Cerrahi prosedür için ekteki metinde belirtildiği gibi altı ila sekiz haftalık sıçan anestezi altına alındı.
16 kat büyütme oranına sahip uygun bir binoküler ameliyat mikroskobu kullanın. İndual bölgedeki cildi ve deri altı dokusunu iki ila üç santimetre uzunluğunda keserek başlayın. Şimdi femoral arterden ayrılan tüm arterleri inceleyin, S CA'nın orijininin proksimal femoral arterine ve ayrıca yerel kan akışını geçici olarak engellemek için DGA, PA ve S SA'ya klipsler koyun.
Daha sonra bu damarın kanama olmadan açılmasını sağlamak için SEA'yı distal kısmından bağlayın. Ligasyonun SEA proksimalini kesin ve SEA'ya %1'lik bir pipen solüsyonu uygulayın. Şimdi, s e çapının yaklaşık yarısını makasla kesin ve kabın kesilen ucunu bir forseps ile tutarken lümene bir iğne batırın.
Mümkünse, damar duvarının delinmesine yol açabilecek düzensiz hareketleri azaltmak için iğneyi harici bir cihaza sabitleyin. Ardından iğneye bir şırınga bağlayın. Klipsi distal femoral arterden çıkarın ve safen artere yerleştirin.
MDA MD 2 31 meme kanseri hücrelerinin O 0.2 mililitresini yüzeysel epigastrik artere yavaşça enjekte etmeye devam edin. Klipler sayesinde hücrelerin DGA ve pa'ya yönlendirildiğini unutmayın. Arteriyel klipsleri çıkarmadan önce kanamayı önlemek için iğneyi çıkarın ve yüzeysel epigastrik arteri bağlayın.
Yarayı kapattıktan ve inhalasyon anestezisini sonlandırdıktan sonra, hayvanda 25 ila 30 gün tümör büyümesine izin verin. Radyo frekansı uyarması ve algılaması için özel bir deneysel MR tarayıcısı veya bu ev yapımı bobin gibi uygun bir hayvan bobinine sahip bir insan MR sistemi kullanın. Sıçanı oksijen ve ISO flor ile uyuşturduktan sonra, kuyruk damarına bir kateter yerleştirin ve kuyruğa sabitleyin.
Bant kullanarak, kontrast reaktifi içeren bir şırınga bağlayın. Daha sonra fareyi inhalasyon anestezisini koruyarak MR sistemine yerleştirin. Kemik metastazını bulmak için morfolojik bir MR dizisi ile başlayın.
Daha sonra, en büyük çapa sahip kemik metastazı dilimini belirleyin ve yaklaşık 30 saniye sonra D-C-E-M-R-I dizisini başlatın. Kontrast maddeyi 10 saniyelik bir süre boyunca enjekte etmeye başlayın. Bir insan veya deneysel bir tarayıcı olan uygun bir CT sistemi seçin.
Burada düz panel donanımlı hacimsel bilgisayarlı bir tomografi prototipi kullanıyoruz. Sıçanı oksijen ve flor ile uyuşturduktan sonra, kuyruk damarına bir kateter yerleştirin ve bant kullanarak kuyruğa sabitleyin. Ardından kontrast madde içeren bir şırınga bağlayın.
Şimdi fareyi inhalasyon ve anestezi altında tarayıcıya yerleştirin. VCT için tarama parametrelerini ayarlayın. Bu amaçla çeşitli deneysel ve klinik ultrason sistemleri mevcuttur.
Sıçanı oksijen ve flor ile uyuşturduktan sonra, kuyruk damarına bir kateter yerleştirin ve bir bant kullanarak kuyruğa sabitleyin. Ardından bir mikro kabarcık kontrast maddesi içeren bir şırınga bağlayın. Ultrason dönüştürücüsünü bir tripod kullanarak ilgili arka bacağa sabitleyin ve dönüştürücü ile arka bacak arasına ultrason jeli uygulayın.
Ardından, B modu görüntüleme iletimini gerçekleştirin. Kemik metastazının en büyük çapını belirlemek ve dönüştürücüyü bu pozisyonda sabitlemek için, doku perfüzyonu hakkında bilgi için B modu görüntülerine doppler sinyali ekleyin. Sadece kortikal kemiği bozan lezyonların ultrason dalgalarına erişilebilir olduğunu unutmayın.
Dinamik kontrastlı ultrason için, ultrason cihazını kadans, kontrast nabız sıralama moduna ayarlayın, mikro kabarcıkları enjekte edin ve 90 saniye uzunluğunda bir döngü kaydedin. Yumuşak doku tümörünü ve kemik metastazlarının iskelet yıkımını karakterize etmek için M-R-I-V-C-T ve ultrasondan elde edilen morfolojik bilgileri işleyin. Daha sonra anjiyografi için bir DICOM görüntüleyici kullanarak kemik metastazlarının yerini ve hacmini belirleyin.
eRx DICOM görüntüleyiciyi kullanarak, kemik metastazlarındaki damarların dallanma modelini elde etmek için VCT verilerini göz önünde bulundurun. Çıkarma teknikleri olsun veya olmasın arteriyel faz bilgilerini kullanarak 2D veya 3D görüntüleri yeniden oluşturun. D-C-M-R-I-D-C-E-V-C-T ve DCE'den vaskülarizasyonun fonksiyonel parametrelerini ölçmek için ultrason, her modaliteye özel yazılım araçları kullanın.
D-C-E-M-R için, kemik metastazlarında perfüzyon ve damar geçirgenliği ile ilişkili kan hacmi ve değişim hızı sabiti ile ilişkili vasküler parametreleri belirlemek için Dyna Lab'ı kullanıyorum. D-C-E-V-C-T verilerini ölçmek için, eğrinin altındaki alan veya tepe geliştirme gibi parametreleri hesaplamak için verilerin tanımlayıcı bir analizini gerçekleştirin. Ayrıca, sina döngülerini analiz ederek kantitatif analiz yazılımı kullanarak gerçek zamanlı DCE ultrasondan gelen bilgileri ölçün Uygulanan bolus enjeksiyon modeline göre, kemik metastazı üzerindeki ilgilenilen bölge, eğrinin altındaki alan gibi tanımlayıcı faktörleri veya renk kodlu haritalardan kantitatif parametreleri belirler.
M-D-A-M-B 2 31 hücrelerinin SEA'ya intraarteriyel enjeksiyonu, çıplak sıçanın ilgili arka bacağında bölgeye özgü kemik metastazları geliştirmek için kullanıldı. Bu görüntü, yüzeysel epigastrik arter inen ular arter, popliteal arter ve safen arter dahil olmak üzere femoral arterin dallanma modelini göstermektedir. Arteriyel klipsler sa, PA ve proksimal fa üzerine yerleştirilir ve ayrıca SEA ligasyonu yapılır.
SEA daha sonra ligasyonun proksimalinde kesildi ve papin ilavesinden sonra damar duvarının kası forseps kullanılarak gevşetildi. SEA kesilir ve iğne için harici bir sabitleme cihazı kullanılarak SEA'ya bir iğne sokulur. İnsan meme kanseri tümör hücreleri SEA yoluyla enjekte edilir ve DGA ve pa'ya yönlendirilir.
Femurla sınırlı klipse osteolitik lezyonlar sayesinde tibia ve fibula, enjeksiyondan yaklaşık 25 ila 30 gün sonra M-R-I-V-C-T ve ultrason ile non-invaziv olarak görüntülenebilir ve birkaç hafta boyunca takip edilebilir. Her üç görüntüleme yöntemi de aynı sıçanda sırayla kullanılabilir. MRG, başlangıçta kemik iliği boşluğu ile sınırlı olan ve daha sonra gelişim sırasında kortikal kemiği aşan kemik metastatik yumuşak dokusunun morfolojisini gösterir.
Bu aksiyel kesitlerde T iki ağırlıklı MR görüntüsünde kemik metastazı yumuşak doku kısmı, D-C-E-M-R-I renk haritalarında lezyon kemik yapısı içindeki amplitüd A ve değişim hızı sabiti değerleri gösterilmekte ve özellikle metastazlardaki osteolitik değişiklikler MRG bulgularına ek olarak VCT ile yüksek çözünürlükte değerlendirilmektedir. OSTEOLİTİK lezyonlar intramedüller tümör büyümesine komşu yerleşimlidir. VCT anjiyografi, kemik metastazlarının değişmiş makro damar mimarisini ortaya çıkarır ve D-C-E-V-C-T, metastatik lezyonlarda kortikal kemiğin lokal yıkımına bağlı mikrosirkülasyonun ilgili yönlerini gösterir. Ultrasonografi, yumuşak doku tümörünün morfolojik ve fonksiyonel özelliklerini B modu ve doppler teknikleri kullanarak değerlendirmek için uygulanabilir.
Mikro kabarcıkların uygulanmasından sonra, DCE ultrason kemik metastazlarında vaskülarizasyonun gerçek zamanlı olarak görüntülenmesine izin verir. Bu videoyu izledikten sonra, bölgeye özgü meme kanseri, kemik metastazları için tümör hücrelerinin nasıl aşılanacağını ve bu lezyonlardaki anjiyogenezin morfolojik ve fonksiyonel yönlerini nasıl görüntüleyeceğinizi iyi anlamış olmalısınız. Non-invaziv olarak.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
08:04
Related Videos
25.2K Views
08:36
Related Videos
19.6K Views
08:55
Related Videos
12.8K Views
15:48
Related Videos
23.1K Views
05:19
Related Videos
10.8K Views
09:29
Related Videos
18.8K Views
10:32
Related Videos
11.5K Views
07:15
Related Videos
7.4K Views
08:32
Related Videos
7K Views
10:25
Related Videos
2.3K Views