Name: Evaporatif Akı Yöntemi (EFM) kullanarak Işınım ve Dehidrasyon için Yaprak Hidrolik İletkenlik ve Stoma İletkenlik ve Yanıtları Ölçümü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-12-31T12:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 11 s
Description: Keşfedin yaprak hidrolik iletkenliği ve stoma iletkenliği ölçüm yöntemini ışık ve dehidrasyon yanıtlarını incelemek için. Bu teknik bitki fizyolojisi ve ekolojik adaptasyon çalışmalarında kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz el yazması iyileştirilmesi için dört anonim değerlendirenler minnettarız ve Ulusal Bilim Vakfı (Hibe IOS-0546784) destek için.

1. Sönmüş Yapraklar için Ölçüm Yaprak Hidrolik iletkenlik (K max) <ol><li> Tercihen ksilem gerginlikler ıslak kağıt havlu ile dolu karanlık plastik torba içinde hava ve yerde kesilmiş, düşük olduğu gibi akşam ya da gece çekimleri toplayın. Laboratuarda, su altında her sürgünün sonunda en az iki düğüm yeniden keser. Saf su, veya K yaprak ölçümler için kullanılacak olan diğer solüsyon gece boyunca rehidrate çekim izin verin. Farklı çözümler etkileri bir faktör olarak araştırılması gereken sürece saf su akışı çözümü olarak tavsiye edilir. </li><li> Kısmen degaze akışı çözümü altında yeni bir jilet ile sürgün gelen yaprak kesin. Farklı çözümler etkileri bir faktör olarak araştırılması gereken sürece saf su akışı çözümü olarak tavsiye edilir. Bir vakum pompası kullanılarak bir şişe içerisinde gece boyunca çözelti gazının alınması tavsiye, fakat diğer yöntemler kullanılabilecektir. </li><li> Petio Sarılabilir gergin parafilmyaprak sapı ve tüp arasında iyi bir sızdırmazlık sağlamak için le. İlave parafilm sarma tüp içine sığacak şekilde sapı yuvarlak yardımcı olacaktır Bu adım, sigara yuvarlak petioles için özellikle yararlıdır. Diş yapıştırma sapı içinde oluklar doldurmak için parafilm sarma önce sapı ile uygulanabilir. </li><li> Sisteme giren hava girişini önlemek için saf su altında silikon tüp için yaprak bağlayın. Yaprak su kaynağı üzerinde kaldırılmış gibi, boru içinde su subatmosferik basınçta, ve herhangi bir hava ölçüm esnasında tüp içine çekilir ise, böylece conta iyidir. OmniFIT, Cambridge, İngiltere);; Bu yaklaşım özellikle karmaşık şekillere sahip petioles için yararlıdır, veya çim bıçakları için Alternatif silikon tüp içine doğrudan sapı sızdırmazlık için kauçuk conta ile kompresyon fitting (örneğin, (omniFIT A2227 delik adaptörü kullanılabilir hangi bir cam çubuk etrafına sarılmış ve kompresyon fitting ile kapalı olabilir. Mümkünse, si doğrudan sapı mühürlemelicone tüp hızlı olmak ve şeffaf bir sapı-tüp kavşak bırakarak, kabarcıklar daha kolay görülebilir olmasını sağlayan bir avantaja sahiptir. Boru bilgisayar (; Mettler-Toledo GmbH, Greifensee, İsviçre örneğin &quot;Denge Link&quot; Yazılımını kullanarak) her 30 sn veri günlükleri bir denge (± 10 mg çözünürlük), bir dereceli silindire çalışan sabit hortumuna yaprak bağlanır yaprak yoluyla debisinin hesaplanması için. </li><li> Yaprakları büyük bir kutu fan üzerinde misina ile ve bir ışık kaynağı (&gt; 1.000 mmol • m 2 • s -1 yüksek ışınım ölçümler için fotosentetik aktif radyasyon), hafifçe seviyesinden altında sinirli ahşap çerçeveler adaxial yüzey yukarı tutulmalıdır mezun silindir menisküs. Yaprak gibi olur, yaprak hareketli suyun transpirasyon tarafından yönlendirilen, ve yerçekimi nedeniyle baskı altında yaprak girerek değil sağlamak için mezun silindir su üstünde olmalıdıryaprak silindir içinde su menisküs altına yerleştirildi durumunda da aynı olabilir. Islak kağıt havlu ile doldurulmuş küçük kaplar ve böylece denge içinde atmosfere su kaynağından buharlaşma kaçınarak, dengede hava suya doygun olmasını sağlamak için denge haznesi içine yerleştirilir. Bu olasılık tüp bir dört yollu musluk vanası kullanarak yaprak akmasını durdurmak ve denge su silindirin kütlesi azalmaya olmadığını kontrol ederek kontrol edilebilir. </li><li> Lamba ısı absorbe yaprağı yukarıdaki su ile dolu bir açık Pyrex kap yerleştirin. </li><li> ° C deney boyunca ısı lambası altında yaprak etrafında havayı ısıtmak için yeterince Pyrex kabın ısı etmez, öyle ki Pyrex kabın daha soğuk su ilave edilerek 23 ° C ile 28 arasında yaprak sıcaklığı muhafaza edin. </li><li> Böylece yüksek parlama gelmesini için yeterli bir zaman veren ve Bununla, en azından 30 dakika için cihaz üzerinde sızmak için yaprak izinonally kadar akış hızı hiçbir yukarı veya aşağı doğru bir eğilim ile birlikte, stabilize edilmiş, ve varyasyon katsayısı &lt;30 sn akış aralıklarla yapılan ölçümler, en azından 5-10 için% 5 ile gelmiştir. Bu yöntem, istikrarlı bir Ψ yaprak varsayar çünkü akış hızı kararlı bir duruma ulaşması için esastır. Önceki çalışmalarda bu kriterleri akış hızı (E), Ψ yaprak ve K yaprak stabilizasyonu için yeterli buldum; kararlı bir akış sonra uzun ölçüm süreleri ile testlerin geniş bir yedi türlerinin her biri için ölçüm zaman K yaprak arasında herhangi bir ilişki gösterdi kuruldu yaprak kapasitans 17,18 aralığı. Stabilizasyon genellikle 30 dakika veya daha kısa sürer, ancak bazı türler bazı türler için bir saatten fazla gerektirebilir. </li></ol> Not: debi (&lt;8 mg s -1) çok düşük olduğunda, istikrar son beş 30 sn aralıklarla çalışan ortalama kullanılarak tespit edilebilir. </p&gt; <ol start="9"><li> Aniden akımı değişiklikleri, ya bağlı ani stomaların kapanmasına veya parçacıkları veya hava kabarcıkları ile sistemde mühür veya tıkanıklığı belirgin sızıntı varsa ölçümler atın. </li><li> Akışını stabilize, bir termokupl ile yaprak sıcaklığı kaydedin. </li><li> Hızla borudan yaprağı kaldırmak, dab sapı kuru ve terleme durdurmak için, daha önce ekshale edilmiş bir yapışmalı torbaya yaprağı koyun. </li><li> Kanadın en az 20 dakika boyunca onun çantasında muvazene edelim. </li><li> Son 10 debi ölçümleri ortalama. Bu E ölçümü olacaktır. </li><li> Yaprak dengelenmiş olduğunda, bir basınç bölmesi ile nihai yaprak su potansiyeline (Ψ nihai) ölçün. </li><li> Bir flatbed tarayıcı ve görüntü işleme yazılımı ile ya da bir yaprak alanı ölçer ile yaprak alanı ölçün. </li><li> K yaprak E /-ΔΨ yaprak (burada ΔΨ yaprak = Ψ nihai olarak hesaplanır </alt&gt; - 0 MPa) ve yaprak alanı daha da normalleştirilmiş. Birimler mmol m -2 s -1 MPa -1 vardır. Yaprak sadece ölçülü silindir içinde su seviyesinin üstünde konumlanmış olduğu için, yaprak giren suyun basıncı azaltma yerçekiminin etkisi, her zaman&gt; -0.1 MPa olduğu, Ψ nihai için özellikle göreceli önemsiz olacaktır. </li><li> Suyun viskozitesi 15,19,20 sıcaklığa bağımlılığı ile indüklenen K yaprak değişiklikleri düzeltmek için, aşağıdaki denklem kullanılarak 25 ° C K yaprak değerleri standardize: </li></ol><img alt="Denklem 1" fo:content-width="3.863in" fo:src="/files/ftp_upload/4179/4179eq1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4179/4179eq1.jpg" /><ol start="18"><li> E buhar pressu eşdeğer yaprak hava-buhar basınç farkı ile bölünmüş olarak Stomatal iletkenlik (g ler) i tespit edilebiliryaprak bitişik bir sıcaklık ve bağıl nem sensörü kullanılarak belirlenen yeniden açığı (VPD). VPD, aşağıdaki denklem kullanılarak hesaplanır 21 </li></ol><img alt="Denklem 2" src="/files/ftp_upload/4179/4179eq2.jpg" fo:content-width="1.67in" fo:src="/files/ftp_upload/4179/4179eq2highres.jpg" /> (; Arden Buck Denklem 22&#39;ye göre bir sıcaklık fonksiyonu olarak kPa) ve AP atmosferik basınç (kPa) RH bağıl nem olduğu, VP hava doymuş buhar basıncıdır. 2. Kurutulmuş Yapraklar için Yaprak Hidrolik İletkenlik Ölçüm <ol><li> Tercihen ksilem gerginlikler ıslak kağıt havlu ile dolu karanlık plastik torbalarda hava ve yerde kesilmiş, düşük olduğu gibi akşam ya da gece çekimleri toplayın. Laboratuarda, su altında her sürgünün sonunda en az iki düğüm yeniden keser. K le için kullanılmak üzere saf su ya da başka bir solüsyon içinde gece boyunca rehidrate çekim Letaf ölçümleri. Farklı çözümler etkileri bir faktör olarak araştırılması gereken sürece saf su akışı çözümü olarak tavsiye edilir. </li><li> Saf su altında en az üç yaprakları ile segmente sürgünler kesin ve Ψ yaprak değerleri bir dizi farklı zaman aralıklarında için bir fan ile sürgünler kurutmak. </li><li> Çekimlerin her yaprak çevresinde daha önce ekshale edilmiştir), ve sonra ıslak kağıt ile büyük yapışmalı torbaya bütün sürgün yerleştirmek; sonra sürgünler susuz, yapışmalı çanta (Nasco, Fort Atkinson, WI, ABD Whirl-Pak) yerleştirin havlu. </li><li> Ateş en az 30 dakika (kesinlikle susuz çekimleri için uzun dengeleme kez gerekli olabilir) için muvazene edelim. </li><li> Dengelenme sonra, ÖTV üst ve alt yaprak ve ölçü başlangıç ​​Ψ yaprağı (= Ψ o) bir basınç odalarını kullanarak. </li><li> Bu iki yaprak Ψ yaprak arasındaki fark 0.1 den daha büyük MPa (stron için ise, sürgün silGly kurutulmuş yaprakları, bu aralık) 0,3 MPa kadar uzatılabilir. </li><li> Üçüncü yaprak sonra yukarıdaki adım 1.2 -1.18 takiben, EFM K yaprak ve g s belirlemek için kullanılır. Özellikle, sürekli hal E stoma hala açık ve kütiküler iletkenlik 17 önemli ölçüde daha yüksek g s değerleri oluşturmak gibi, ileri derecede dehidrate yaprakları olmuştur yaprakları için bile elde edilebilir. </li><li> Hidrolik açığı eğrileri oluşturmak için, adım 1.16 olarak Ψ nihai kullanarak K yaprak hesaplamak ve sonra düşük hangisi karşı komplo K yaprak değerleri, Ψ o veya Ψ nihai, yani deney sırasında yaprak yaşadığı güçlü dehidratasyon (= Ψ düşük). Benzer şekilde, yaprak dehidrasyon cevaben g s düşüş düşük Ψ karşı g s grafiğini çizerek belirlenir. Önceki çalışmalar sh vardır<html> kendi dehidratasyon K yaprak ve g s 14,16 en azından kısmen geri dönüşümsüz düşüşler indükler. </li><li> Biz Ψ düşük 0,5 MPa aralığı başına en az 6 K yaprak değerleri elde tavsiye (Çalıştığınız türler dehidratasyon gerçekten korumasız olması durumunda bu aralık 0.25 MPa azaltılabilir). </li><li> Güvenlik açığı eğrisi 23 outliers kaldırmak için düşük Ψ her 0,5 MPa su potansiyeli aralığında K yaprak değerlere Dixon Aykırı testi yapın. </li><li> Türler dehidratasyon 14,16 K yaprağı ve g s verdikleri yanıtlar farklılık olduğundan, her tür için farklı işlevler uygun ve maksimum olabilirlik (düşük AIC değeri; ayrıntılar için 14) seçin. Biz daha önce literatürde kullanılan uydurma en az dört fonksiyonları tavsiye: Doğrusal (pg &quot;fo: content-width =&quot; 1.4in &quot;fo: src =&quot; / files/ftp_upload/4179/4179eq3highres.jpg &quot;/&gt;), sigmoid ( <img alt="Denklem 4" src="/files/ftp_upload/4179/4179eq4.jpg" fo:content-width="1.483in" fo:src="/files/ftp_upload/4179/4179eq4highres.jpg"/> ), Lojistik ( <img alt="Denklem 5" src="/files/ftp_upload/4179/4179eq5.jpg" fo:content-width="1.7in" fo:src="/files/ftp_upload/4179/4179eq5highres.jpg"/> ) Ve üstel ( <img alt="Denklem 6" src="/files/ftp_upload/4179/4179eq6.jpg" fo:content-width="1.583in" fo:src="/files/ftp_upload/4179/4179eq6highres.jpg"/> ). </li></ol> 3. Temsilcisi Sonuçlar Dehidrasyon ile yaprak hidrolik iletkenlik düşüş türler (Şekil 1) arasında kuvvetli bir şekilde değişmektedir. Yüksek ışınım altında ölçüldüğünde Kuraklık duyarlı türler, daha kuraklığa dayanıklı türler daha az negatif su potansiyellerine de güçlü bir düşüş yaşayabilir (PAR&gt; 1.000 mmol • m -2 • s -1). Sumesic ot Helianthus annuus için hidrolik iletkenlik% 80 kaybı (P 80), potansiyel California chaparral yerli Heteromeles arbutifolia göre daha az olumsuz 3 MPa, oldu. Helianthus annuus olmayan gösterdi oysa Heteromeles arbutifolia, su potansiyelinin düşmesine doğrusal yanıtladı düşüş doğrusal. Stoma iletkenlik (g ler) ve yaprak hidrolik iletkenlik (K yaprak) Her ikisi de (Şekil 2) parlama dramatik yanıt verebilirsiniz. Raphiolepis indica için, stoma iletkenliği yüksek ışınım altında ölçülen yaprakları için dehidrasyon ile ciddi şekilde düşmüştür (PAR&gt; 1.000 mmol • m -2 • s -1) ve laboratuvar ışık altında (PAR &lt;6 mmol • m -2 • s -1). Yüksek ışınım altında, iyi aydınlatılmış lea için tipik bir su potansiyeline susuz olmuştu EFM ölçülen yaprakgün ortası sağlam bitkilere ves bir porometer (Şekil yıldız. 2) ile sağlam bitkiler üzerinde ölçülen yaprakları gibi benzer g s gösterdi. Özellikle, yüksek hidrasyon de yaprakları için, K yaprak düşük ışınım (11 vs 2.8 mmol m -2 s -1 MPa -1) daha yüksek sıcaklıklara maruz yaprakları için dört kat daha yüksek olduğu ve bu nedenle K yaprak iyi bir güçlü ışık tepki gösterdi Aram daha sulu yaprakları. Ayrıca, yüksek ışınım altında, K yaprak dehidratasyon daha ciddi şekilde düşmüştür. P 80 düşük parlama daha yüksek basınçta 0.93 MPa daha az negatif idi. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/4179/4179fig1.jpg" /> Şekil 1. Duyarlı bir kuraklık (üstte) ve bir kuraklığa toleranslı (alt) türleri (14,24) olup olmadığını Yaprak hidrolik açığı eğrileri. Her nokta bir günah temsilevaporatif akı yöntemi (EFM) kullanarak müstakil bir yaprak üzerine yaprak hidrolik iletkenlik (K yaprak) ve gle ölçümü. Dikey çubuklar türün ilk yaprak hidrolik iletkenlik (P 80)% 80 kaybetti hangi su potansiyeli temsil etmektedir. Maksimum olabilirlik kullanarak En uygun fonksiyonlar hem türler için çizilir. <img alt="Denklem 7" src="/files/ftp_upload/4179/4179eq7.jpg" fo:content-width="3.293in" fo:src="/files/ftp_upload/4179/4179eq7highres.jpg"/><img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/4179/4179fig2.jpg" /> Şekil 2. Raphiolepis indica için düşen yaprak su potansiyeli stoma iletkenlik (g ler) ve yaprak hidrolik iletkenlik (K yaprak) ve tepkisi yüksek ve düşük parlama (16) altında ölçülür. (PAR&gt; 1.000 ve &lt;6 mmol • m -2 • s-1). Her nokta, sırasıyla yüksek ve düşük parlama altında ölçülen yaprakları temsil beyaz ve siyah noktalarla, evaporatif akı yöntemi (EFM) kullanarak müstakil bir yaprak tek bir ölçüm temsil eder. Yüksek ve düşük parlama içinde stoma iletkenlik eğrileri için denklemler: <img alt="Denklem 8" src="/files/ftp_upload/4179/4179eq8.jpg" fo:content-width="4.727in" fo:src="/files/ftp_upload/4179/4179eq8highres.jpg" /> ve <img alt="Denklem 9" src="/files/ftp_upload/4179/4179eq9.jpg" fo:content-width="2.26in" fo:src="/files/ftp_upload/4179/4179eq9highres.jpg"/> . Yüksek vs Düşük parlama güvenlik açığı eğrileri için denklemler: <img alt="Denklemi 10" src="/files/ftp_upload/4179/4179eq10.jpg" fo:content-width="2.7in" fo:src="/files/ftp_upload/4179/4179eq10highres.jpg"/> ve <img alt="Denklemi 11" src="/files/ftp_upload/4179/4179eq11.jpg" fo:content-width="1.8in" fo:src="/files/ftp_upload/4179/4179eq11highres.jpg"/> . Üst panelinde gri yıldızı ortalama ± sta temsilAram ve porometer ile gün ortası sağlam bitkilerin yaprakları üzerinde ölçülen yaprak su potansiyeli için ndard hatası. Gri ve alt panel siyah dikey çubuklar türleri sırasıyla yüksek ve düşük parlama altında ilk yaprak hidrolik iletkenlik (P 80)% 80 kaybetti hangi su potansiyeli temsil etmektedir.

<ol><li>Tyree, M. T., Zimmermann, M. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTyree%2C+MT+%22Xylem+Structure+and+the+Ascent+of+Sap%22">Xylem Structure and the Ascent of Sap</a>. , Springer. (2002).</li>
<li>Lawlor, D. W., Cornic, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photosynthetic+carbon+assimilation+and+associated+metabolism+in+relation+to+water+deficits+in+higher+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell+Environ%22%5BJournal%5D)">Photosynthetic carbon assimilation and associated metabolism in relation to water deficits in higher plants.</a> Plant Cell Environ. 25, 275-294 (2002).</li>
<li>Sack, L., Holbrook, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leaf+hydraulics%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Plant+Biology%22%5BJournal%5D)">Leaf hydraulics.</a> Annual Review of Plant Biology. 57, 361-381 (2006).</li>
<li>Cochard, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Putative+role+of+aquaporins+in+variable+hydraulic+conductance+of+leaves+in+response+to+light%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">Putative role of aquaporins in variable hydraulic conductance of leaves in response to light.</a> Plant Physiol. 143, 122-133 (2007).</li>
<li>Johnson, D. M., Meinzer, F. C., Woodruff, D. R., McCulloh, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leaf+xylem+embolism%2C+detected+acoustically+and+by+cryo-SEM%2C+corresponds+to+decreases+in+leaf+hydraulic+conductance+in+four+evergreen+species%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell+Environ%22%5BJournal%5D)">Leaf xylem embolism, detected acoustically and by cryo-SEM, corresponds to decreases in leaf hydraulic conductance in four evergreen species.</a> Plant Cell Environ. 32, 828-836 (2009).</li>
<li>Cochard, H., Froux, F., Mayr, F. F. S., Coutand, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xylem+wall+collapse+in+water-stressed+pine+needles%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">Xylem wall collapse in water-stressed pine needles.</a> Plant Physiol. 134, 401-408 (2004).</li>
<li>Blackman, C. J., Brodribb, T. J., Jordan, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leaf+hydraulic+vulnerability+is+related+to+conduit+dimensions+and+drought+resistance+across+a+diverse+range+of+woody+angiosperms%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytol%22%5BJournal%5D)">Leaf hydraulic vulnerability is related to conduit dimensions and drought resistance across a diverse range of woody angiosperms.</a> New Phytol. 188, 1113-1123 (2010).</li>
<li>Nardini, A., Salleo, S., Raimondo, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+leaf+hydraulic+conductance+correlate+with+leaf+vein+embolism+in+Cercis+siliquastrum+L%5BTitle%5D)+AND+%22Trees--+Structure+and+Function%22%5BJournal%5D)">Changes in leaf hydraulic conductance correlate with leaf vein embolism in Cercis siliquastrum L.</a> Trees-- Structure and Function. 17, 529-534 (2003).</li>
<li>Trifilo, P., Nardini, A., Lo Gullo, H. A., Salleo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vein+cavitation+and+stomatal+behaviour+of+sunflower+%28Helianthus+annuus%29+leaves+under+water+limitation%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Plant%22%5BJournal%5D)">Vein cavitation and stomatal behaviour of sunflower (Helianthus annuus) leaves under water limitation.</a> Physiol. Plant. 119, 409-417 (2003).</li>
<li>Shatil-Cohen, A., Attia, Z., Moshelion, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bundle-sheath+cell+regulation+of+xylem-mesophyll+water+transport+via+aquaporins+under+drought+stress%3A+a+target+of+xylem-borne+ABA%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+J%22%5BJournal%5D)">Bundle-sheath cell regulation of xylem-mesophyll water transport via aquaporins under drought stress: a target of xylem-borne ABA.</a> Plant J. 67, 72-80 (2011).</li>
<li>Engelbrecht, B. M. J., Velez, V., Tyree, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydraulic+conductance+of+two+co-occuring+neotropical+understory+shrubs+with+different+habitat+preferences%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+For.+Sci%22%5BJournal%5D)">Hydraulic conductance of two co-occuring neotropical understory shrubs with different habitat preferences.</a> Ann. For. Sci. 57, 201-208 (2000).</li>
<li>Sheffield, J., Wood, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Projected+changes+in+drought+occurrence+under+future+global+warming+from+multi-model+multi-scenario%2C+IPCC+AR4+simulations%5BTitle%5D)+AND+%22Climate+Dynamics%22%5BJournal%5D)">Projected changes in drought occurrence under future global warming from multi-model multi-scenario, IPCC AR4 simulations.</a> Climate Dynamics. 31, 79-105 (2008).</li>
<li>Blackman, C. J., Brodribb, T. J., Jordan, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leaf+hydraulic+vulnerability+influences+species%27+bioclimatic+limits+in+a+diverse+group+of+woody+angiosperms%5BTitle%5D)+AND+%22Oecologia%22%5BJournal%5D)">Leaf hydraulic vulnerability influences species' bioclimatic limits in a diverse group of woody angiosperms.</a> Oecologia. 168, 1-10 (2012).</li>
<li>Scoffoni, C., McKown, A. D., Rawls, M., Sack, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+of+leaf+hydraulic+conductance+with+water+status%3A+quantification+and+analysis+of+species+differences+under+steady-state%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Bot%22%5BJournal%5D)">Dynamics of leaf hydraulic conductance with water status: quantification and analysis of species differences under steady-state.</a> J. Exp. Bot. 63, 643-658 (2012).</li>
<li>Sack, L., Melcher, P. J., Zwieniecki, M. A., Holbrook, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hydraulic+conductance+of+the+angiosperm+leaf+lamina%3A+a+comparison+of+three+measurement+methods%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Bot%22%5BJournal%5D)">The hydraulic conductance of the angiosperm leaf lamina: a comparison of three measurement methods.</a> J. Exp. Bot. 53, 2177-2184 (2002).</li>
<li>Guyot, G., Scoffoni, C., Sack, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+impacts+of+irradiance+and+dehydration+on+leaf+hydraulic+conductance%3A+insights+into+vulnerability+and+stomatal+control%5BTitle%5D)+AND+%22Plant%2C+Cell+%26+Environment%22%5BJournal%5D)">Combined impacts of irradiance and dehydration on leaf hydraulic conductance: insights into vulnerability and stomatal control.</a> Plant, Cell & Environment. 35, 857-871 (2012).</li>
<li>Scoffoni, C., Pou, A., Aasamaa, K., Sack, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rapid+light+response+of+leaf+hydraulic+conductance%3A+new+evidence+from+two+experimental+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell+Environ%22%5BJournal%5D)">The rapid light response of leaf hydraulic conductance: new evidence from two experimental methods.</a> Plant Cell Environ. 31, 1803-1812 (2008).</li>
<li>Pasquet-Kok, J., Creese, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turning+over+a+new+%22leaf%22%3A+multiple+functional+significances+of+leaves+versus+phyllodes+in+Hawaiian+Acacia+koa%5BTitle%5D)+AND+%22Plant%2C+Cell+%26+Environment%22%5BJournal%5D)">Turning over a new "leaf": multiple functional significances of leaves versus phyllodes in Hawaiian Acacia koa.</a> Plant, Cell & Environment. 33, 2084-2100 (2010).</li>
<li>Weast, R. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWeast%2C+RC+%22Handbook+of+Chemistry+and+Physics%22">Handbook of Chemistry and Physics</a>. , 54th, CRC Press. (1974).</li>
<li>Yang, S. D., Tyree, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydraulic+resistance+in+Acer+saccharum+shoots+and+its+influence+on+leaf+water+potential+and+transpiration%5BTitle%5D)+AND+%22Tree+Physiol%22%5BJournal%5D)">Hydraulic resistance in Acer saccharum shoots and its influence on leaf water potential and transpiration.</a> Tree Physiol. 12, 231-242 (1993).</li>
<li>Pearcy, R. W., Schulze, E. -D., Zimmermann, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPearcy%2C+RW+%22Plant+Physiological+Ecology%3A+Field+Methods+and+Instrumentation%22">Plant Physiological Ecology: Field Methods and Instrumentation</a>. Pearcy, R. W., Ehleringer, J. R., Mooney, H. A., Rundel, P. W. , Kluwer Academic. 137-160 (2000).</li>
<li>Buck, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+equations+for+computing+vapor-pressure+and+enhancement+factor%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Meteorology%22%5BJournal%5D)">New equations for computing vapor-pressure and enhancement factor.</a> Journal of Applied Meteorology. 20, 1527-1532 (1981).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Biometry%22">Biometry</a>. Sokal, R. R., Rohlf, F. J. , 3rd, Freeman, W.H. (1995).</li>
<li>Scoffoni, C., Rawls, M., McKown, A., Cochard, H., Sack, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decline+of+leaf+hydraulic+conductance+with+dehydration%3A+relationship+to+leaf+size+and+venation+architecture%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">Decline of leaf hydraulic conductance with dehydration: relationship to leaf size and venation architecture.</a> Plant Physiol. 156, 832-843 (2011).</li>
<li>Sack, L., Tyree, M. T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSack%2C+L+%22Vascular+Transport+in+Plants%22">Vascular Transport in Plants</a>. Holbrook, N. M., Zweiniecki, M. A. , Elsevier/Academic Press. (2005).</li>
<li>Nardini, A., Tyree, M. T., Salleo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xylem+cavitation+in+the+leaf+of+Prunus+laurocerasus+and+its+impact+on+leaf+hydraulics%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">Xylem cavitation in the leaf of Prunus laurocerasus and its impact on leaf hydraulics.</a> Plant Physiol. 125, 1700-1709 (2001).</li>
<li>Brodribb, T. J., Holbrook, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stomatal+closure+during+leaf+dehydration%2C+correlation+with+other+leaf+physiological+traits%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">Stomatal closure during leaf dehydration, correlation with other leaf physiological traits.</a> Plant Physiol. 132, 2166-2173 (2003).</li>
<li>Blackman, C. J., Brodribb, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+measures+of+leaf+capacitance%3A+insights+into+the+water+transport+pathway+and+hydraulic+conductance+in+leaves%5BTitle%5D)+AND+%22Funct.+Plant+Biol%22%5BJournal%5D)">Two measures of leaf capacitance: insights into the water transport pathway and hydraulic conductance in leaves.</a> Funct. Plant Biol. 38, 118-126 (2011).</li>
<li>Nardini, A., Raimondo, F., Lo Gullo, M. A., Salleo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leafminers+help+us+understand+leaf+hydraulic+design%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell+Environ%22%5BJournal%5D)">Leafminers help us understand leaf hydraulic design.</a> Plant Cell Environ. 33, 1091-1100 (2010).</li>
<li>Sheriff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaporation+sites+and+distillation+in+leaves%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Bot%22%5BJournal%5D)">Evaporation sites and distillation in leaves.</a> Ann. Bot. 41, 1081-1082 (1977).</li>
<li>Canny, M. J., Huang, C. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leaf+water+content+and+palisade+cell+size%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytol%22%5BJournal%5D)">Leaf water content and palisade cell size.</a> New Phytol. 170, 75-85 (2006).</li>
<li>Santiago, L. S., Mulkey, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+test+of+gas+exchange+measurements+on+excised+canopy+branches+of+ten+tropical+tree+species%5BTitle%5D)+AND+%22Photosynthetica%22%5BJournal%5D)">A test of gas exchange measurements on excised canopy branches of ten tropical tree species.</a> Photosynthetica. 41, 343-347 (2003).</li>
<li>Sack, L., Cowan, P. D., Jaikumar, N., Holbrook, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%27hydrology%27+of+leaves%3A+co-ordination+of+structure+and+function+in+temperate+woody+species%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell+Environ%22%5BJournal%5D)">The 'hydrology' of leaves: co-ordination of structure and function in temperate woody species.</a> Plant Cell Environ. 26, 1343-1356 (2003).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Burada sunulan evaporatif akı yöntemi stoma iletkenlik eşzamanlı ölçümleri ile laboratuvar yaprak hidrolik iletkenlik nispeten hızlı (30 dakika) belirlenmesini sağlar. EFM göz önüne alındığında, şimdiye kadar en yakın yaprak su doğal bir yol takip eden yöntem ki stoma 15 yaprak havasahalarında ve tümör su buharlaşır. K yaprak tayini için diğer deneysel yöntemler bir dizi özellikle üç ortak olmak, 25 var. (1) yüksek basınç akış yöntemi (HPFM), su yüksek basınç altında 15,26 yaprak ile itilir. Ancak, güvenlik açığı eğrileri bu yöntemle elde edilemez uygulanan pozitif basınç dolum embolisi olabilir ve mezofil dokusunda rehidrate çünkü. (2) rehidrasyon kinetiği yöntemi (RKM), K yaprak kanal ile susuz Yaprakları ve rehidrasyon arasındaki benzerlik kullanılarak hesaplanırBir dirençleri 27,28 ile seri bir kondansatör arging. Bu yöntem, hızlı, ancak yaprak içinde doğal transpirational yollarının tüm sistemi üretmez ve kolay bir şekilde yüksek parlama acclimated yaprak ölçüm izin vermek için değiştirilmez. Değişik şiddetlerde vakumlar Yaprak 15,26 gelen yaprak sürüş su kaybı uygulanır iken (3) Vakum pompası yöntemi (VPM) ise yaprak odasına yerleştirilir, onun sapı, bir denge üzerine bir su kaynağına bağlı. Bu yöntem, zaman alıcı olabilir. Üç yöntem kullanılarak Ölçümler tutarlı sonuçlar 15,28,29 vermek için bulunmuştur, ve bu nedenle sık sık kendi EFM transpirational su hareketine dayalı olarak verilmiş kullanılmış, ve onun nispi hız, ve farklı koşullar altında K yaprak ölçülmesi için kendi değişiklik edilir. K yaprak belirlemek için kullanılan tipik yöntemleri tüm acc rakamlarla belirsizlik düzeyi içerirtranspirasyon 25 karşılık urately itici güçtür. EFM yılında ΔΨ yaprak yaprak basınç bombayı dengelenmiş sonra bu toplu Ψ yaprak esas olarak K yaprak, gerçek itici güç daha düşük hesaplamak için kullanılır. Bu noktada, yaprak dökme Ψ zorunlu olarak hidrolik yolun, sonunda hücreler su potansiyelini temsil etmediği su buharlaşır değil, daha ziyade su, düşük su potansiyeline nispeten az hücreleri için bir hacim ağırlıklı ortalama hareketli ve buharlaştırılır, ve terleme akım izole edilebilir, yüksek su potansiyeli daha fazla sayıda hücre için. Ψ yaprak gerçek itici güç farkı ne kadar bu sayede su yaprak buharlaşan yere bağlıdır. Eğer yaprak boyunca su buharlaşır, toplu Ψ yaprak gerçek itici güç yakın olabilir ve su sadece çok az c buharlaşır eğerstoma yakın arşın, toplu Ψ yaprak ölçüde gerçek itici güç, yani, aslında çok daha düşük olabilir, bu hücrelerin su potansiyeli hafife olabilir, ve böylece gerçek K yaprak EFM ile belirlenen daha düşük olurdu. Böylece, EFM tarafından belirlenen K yaprak gerçek K yaprağı temsil ettiği ölçüde hala iyi anlaşılmış değildir su akış yolları, duyarlıdır. EFM K yaprağı (yukarıya bakınız) ölçmek için kullanılan diğer yöntemler ile eşleşmesi ve karşılaştırmalı kullanım için mükemmel veri, tür değişimi mezofil su akışı yollar daha ileri araştırmalara ihtiyaç olasılığı sağlar iken. Gerçekten de, hatta verilen türlerin yaprakları için, bu su yollarının farklı Irradiances ve ısı yükleri 4,30 altında veya farklı su durumu (doku küçülmesi verilen) 31, farklı koşullarda, örneğin altında değişebilir. Ayrıntılı bilgisu taşıma yollarının dolayısıyla EFM genel yaprak hidrolik taşıma değişen yollarının etkilerini gidermek için kullanılmasına izin istiyorum. EFM içinde stoma iletkenlik ölçümü ışınım ve dehidratasyon yanıtların belirlenmesine olanak tanımaktadır ve K yaprak g s eşleşen yanıtları sağlama avantajı vardır. Ek olarak, tekrar nemlendirme üzerine g s, ardından önceki yaprak kurutma etkisi bu yöntem ile tespit edilebilir. Bununla birlikte, bu yöntem, iki olası sakıncaları vardır. İlk olarak, bu g s ölçme yerine sağlam bir bitki değil, bir eksize yaprak üzerinde yapılan ve ikincisi de stoma iletkenlik tayini iklim yaprak ölçümü bazı mesafe, yerine porometer odası gibi yaprak yakın dayanmaktadır , fan ile yaprak havalandırma hava çevreleyen yaprak yüzeyinde equilibrates olsa. Bazı türler için, eksizeyaprakları bozulmamış bir bitki 16,32 yaprakları için farklı stoma tepkiler gösterebilir. Bununla birlikte, birçok türün g s EFM kullanılarak gün ortası Ψ yaprak 16 (Şekil 2) yaprak için bir porometer ile dokunulmamış bitkileri üzerinde ölçülen değerlere benzer tahmin edilmektedir. EFM K yaprak, yapısı ve anatomisi yılında temeli ve çevresel faktörlerle yanıtların dinamiklerin incelenmesi, fizyolojik içgörü, yani için uygulanabilir. Ayrıca, yöntem, farklı koşullar altında yetiştirilen belirli türdeki bitkiler karşılaştırmak ya da farklı yaşlardaki ya da farklı ortamlar için uyarlanmış farklı türdeki bitkiler ile karşılaştırmak için kullanılabilir. Yaprak açığı eğrileri inşa ederek, bir kuraklık türlerin tolerans mekanizmaları içgörü kazanabilirler. Kuraklık sırasında, kavitasyon ve hücre çökme bazı yaprak ksilem oluştuğu görülmüştür<html> türler, ve dehidratasyon sırasında mezofil hücre küçülmesi de (14 yorum) su hareketinin etkileyebilir. Gelecekteki çalışmalar K yaprak ve stoma kapanması düşüş sürüş bu süreçlerin her birinin göreli önemini belirlemek için gerekli olacaktır. Işınım Ayrıca K yaprak ve EFM oldukça yüksek ışınım altında ölçümler için uygundur etkileyen güçlü bir faktördür. Işınım ve kuraklığa Aquaporinlerin kombine yanıt çok ilgi kazanmak gerekir. Azaltılmış ifade ve / veya Aquaporinlerin de-activatation dehidratasyon yol açar, K yaprağı azaltılması ise Yüksek Işınım, K yaprak artan artmış ekspresyonu ve / veya canlı hücreler aracılığıyla hızlı su akışına izin Aquaporinlerin aktivasyonuna yol açar. K yaprak üzerinde ışınım ve su temini kombine etkilerinin daha fazla araştırma 4,10,16,33 gerektirir. çadır &quot;&gt; Ayrıca, türler arasında, K yaprak ve güvenlik açığı. hafif su ve diğer kaynakların 3,13,24 arzı ile ilgili türlerin dağılımı ile ilgili olmuştur Türlerin kuru bölgelerden gelen bakan, hidrolik düşüş büyük bir direnç gösterme eğilimindedir daha olumsuz toprak su potansiyeli ve daha negatif su potansiyellerine yüksek bir K yaprak koruyarak, yüksek g s korumak ve fotosentez 13,14 için CO 2 çekmeye devam. Böylece, yaprak hidrolik özelliklerinin çalışma düzeyinde anlayışlar sağlar edebilirsiniz hücresi, yaprak ve tüm bitki ve çevreye karşı tepkileri, ve tüm ölçeklerde çok sayıda önemli yeni keşifler vermesi muhtemeldir.

evaporatif akı yöntemi (efm) kullanarak işınım ve dehidrasyon için yaprak hidrolik İletkenlik ve stoma İletkenlik ve yanıtları Ölçümü

Measurement of Leaf Hydraulic Conductance and Stomatal Conductance and Their Responses to Irradiance and Dehydration Using the Evaporative Flux Method (EFM)

Su önemli bir kaynaktır ve bitki su taşıma sistemi maksimum büyüme ve kuraklık toleransı ilgili limitleri belirler. Bitkilerin fotosentez için CO 2 yakalamak için yüksek stoma iletkenlik (g ler) ulaşmak için stomalarını açtığınızda, su terleme 1,2 kaybolur. Havasahalarında gelen buharlaşan su sapları ve kökleri ksilem sırayla çizim, yaprak damarları ksilem su çizim sırayla, hücre duvarlarından değiştirilir. Su sistemi yoluyla çekilir gibi, sistem boyunca gerilim ve düşük yaprak su potansiyeli (Ψ yaprak) oluşturarak, hidrolik direnci ile karşılaşır. Yaprak kendisi tesisi hidrolik direnç 3 ortalama olarak% 30 için muhasebe, tüm bitki sisteminde önemli bir darboğaz olduğunu. Yaprak hidrolik iletkenlik (K yaprak = 1 / yaprak hidrolik direnç) yaprak üzerinde su potansiyeli degrade su debisi oranı ve özetlerKarmaşık bir sistemin davranışı:. sapı yoluyla ve damarlar, paket kılıf içine çıkar ve hava sahası içinde buharlaşırken ve stoma gelen transpired önce mezofil hücreleri aracılığıyla veya çevresinde geçer birkaç emir yoluyla su hamle K kanadı gibi güçlü ilgi olduğunu türler karşılaştırılarak önemli fizyolojik özelliği, su taşıma ve yapısındaki değişim ile ilişkisi (örneğin, Yaprak damarlanma mimarisi) ve fotosentetik gaz değişimi üzerinde yarattığı etkiyi araştırmak için bir anahtar değişken için yaprak yapısı ve fizyolojisi etkinliğini ölçülmesidir. Ayrıca, K yaprak K yaprak Aquaporinlerin, membran ile 4 su taşıma dahil proteinlerin ekspresyonu ve aktivasyonu değişiklikler nedeniyle görünüşte ışınımı önemli ölçüde artırabilir. Iç ve dış yaprak çevreye 3 güçlü tepki, ve K yaprak boyunca güçlü azalır drkavitasyon ve / veya mezofil ve paket kılıf hücre büzülme veya aquaporin etkisizleştirme 5-10 bağlı olarak ekstra-ksilem dokularda ksilem borusu, ve / ya da geçirgenlik kaybı çökme nedeniyle gerek. K yaprak iyi sulanan koşullarda türler arasında ve kuraklık sırasında g s ve fotosentetik oranı sınırlamak ve böylece tüm fabrika performansını sınırlayabilir Çünkü kuraklık sıklığı ve şiddeti 11-14 artış özellikle onlar muhtemelen tür dağılımları belirleyebilir. Biz eksize yapraklarında K yaprağı ve g s eş zamanlı tayini için basit bir yöntem sunar. Bir transpiring yaprak bir denge üzerine bir su kaynağına çalışan tüp onun sapı ile bağlıdır. Dengesi suyun kaybı yaprak aracılığıyla akış hızı hesaplamak için kaydedilir. kararlı durum terleme (E mmol • m -2 • s -1) ulaşıldığında, g <sub&gt; S buhar basıncı açığı bölünmesiyle belirlenir ve bir basınç odası kullanılarak belirlenen su potansiyeli itici gücü bölerek K yaprak (K yaprak = E / - Δψ yaprak, MPa) 15. Bu yöntem farklı Irradiances ve dehidratasyon 14,16,17 K yaprak açığı K yaprak yanıtları değerlendirmek için kullanılabilir.

Biz yaprak hidrolik iletkenlik eş zamanlı ölçümü için (nispeten hızlı (30 dakika) ve gerçekçi bir yöntem tarif<em&gt; K</em<sub&gt; Yaprak</sub&gt;) Ve stoma iletkenlik (<em&gt; G</em<sub&gt; S</sub&gt;) Transpiring eksize yaprakları için. Yöntem ışık ve dehidrasyon tepkilerini ölçmek için modifiye edilebilir<em&gt; K</em<sub&gt; Yaprak</sub&gt; Ve<em&gt; G</em<sub&gt; S</sub&gt;.

Evaporatif Akı Yöntemi (EFM) kullanarak Işınım ve Dehidrasyon için Yaprak Hidrolik İletkenlik ve Stoma İletkenlik ve Yanıtları Ölçümü

Su temel bir kaynaktır ve bitki su taşıma sistemi, maksimum büyüme ve kuraklığa tolerans üzerinde sınırlamalar oluşturur. Bitkiler, ... için stomalarını açtıklarında

Aşağıdaki deneyin genel amacı, yaprak hidrolik iletkenliği olarak da bilinen K leaf ile yaprak boyunca su taşıma verimliliğini ölçmektir. Bu yöntem, bilinen bir hidrasyon durumu ve ışınım seviyesindeki bir yaprak için stomat iletkenliğinin eş zamanlı olarak belirlenmesine olanak tanır. K leaf; bitki su kullanımının, fotosentetik hızın, büyümenin ve ekolojik adaptasyonun önemli bir belirleyicisidir.Bu ölçüm, belirli bir yaprak su potansiyeline kadar susuz bırakılmış, üç yapraklı kesilmiş sürgünlere dayanmaktadır; bu potansiyel, ikinci bir adım olarak basınç odası kullanılarak sürgündeki iki yaprak üzerinde ölçülecektir. Kalan üçüncü yaprağın, yapraktaki akış hızını belirlemek için öncelikle belirli bir ışınım altında evaporatif akış yöntemiyle K yaprağı ölçümü yapılacaktır. Ardından, kararlı durum akışına ulaşıldığında akış hızı kaydedilecek ve bu akış hızına karşılık gelen su potansiyeli itici gücünü belirlemek için yaprak basınç odasına yerleştirilecektir.Bu işlem, akış hızını su potansiyeli itici kuvvetine bölerek kle değerini hesaplamamıza olanak sağlayacaktır. S stomatal iletkenliği, akış hızının yaprak ve hava arasındaki buhar basıncı farkına bölünmesiyle elde edilebilir. Yaprak yakınında elde edilen sonuçlar, yaprak hidrolik iletkenliğinin ve S somatik iletkenliğinin su potansiyeli ile birlikte azalmasının ışınım miktarına bağlı olduğunu ve türler arasında farklılık gösterdiğini ortaya koymuştur; bu durum fizyoloji, tüm bitki performansı ve ekoloji açısından önemli sonuçlar doğurmaktadır.Bu tekniğin, yüksek basınçlı akış ölçer, rehidrasyon kinetiği yöntemi veya vakumlu pompa yöntemi gibi yaprak hidroliğini ölçen diğer yöntemlere göre en büyük avantajı, yaprak boyunca su hareketinin doğal terleme yollarını izlemesidir. Bu yöntem, bitki fizyolojisi ve ekolojisi alanlarında, yaprakların belirli ortamlarda optimal bitki performansına izin verecek şekilde nasıl tasarlandığı ve türlerin kuraklık gibi çevresel değişimlere karşı ne kadar hassas olduğu gibi temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Sürgünleri akşam veya gece toplayın ve ıslak kağıt havlularla doldurulmuş karanlık plastik poşete yerleştirin.Ardından laboratuvarda, her sürgünün ucundan su altında en az iki boğumu yeniden kesin, saf suda veya klen ölçümleri için kullanılacak başka bir solüsyonda gece boyunca rehidre edin. Yaprağı, kısmen gazı alınmış akış solüsyonu altında taze bir jiletle sürgünden kesin. Daha sonra, taç yaprak ile tüp arasında iyi bir sızdırmazlık sağlamak için önceden gerilmiş Parastretch'i taç yaprağın etrafına sarın.Sistemdeki kabarcıklar tahliye edilip valf açıldıktan sonra, sisteme hava girmesini önlemek için yaprağı ultra saf su altındayken silikon boruya bağlayın. Yaprak su kaynağından yukarı kaldırıldığında, borunun içindeki su sub atmosferik basınç altında kalır. Boruya hava çekilmiyorsa, sızdırmazlık sağlanmış demektir.Alternatif olarak, özellikle karmaşık şekle sahip yapraklar veya plastik bir çubuğun etrafına sarılıp sıkıştırmalı bağlantı ile sızdırmaz hale getirilebilen çimen yaprakları için kauçuk contalı bir sıkıştırmalı bağlantı kullanılabilir. Not: yapraktan gelen borulama, bir şırınga ve musluk aracılığıyla, her 30 saniyede bir bilgisayara veri kaydeden ve bir terazi üzerinde duran dereceli silindire bağlanmıştır; bu düzenek yaprak yüzeyindeki akış hızının hesaplanması içindir. Yapraklar, misina kullanılarak ahşap çerçeveler içinde eksenel yüzeyleri yukarı bakacak şekilde yerleştirilir; yaprağı ve çerçeveyi büyük bir kutu fanın üzerine ve fotosentetik olarak aktif radyasyon sağlayan bir ışık kaynağının altına yerleştirin, yaprakları dereceli silindirdeki menisküs seviyesinin hafifçe üzerinde konumlandırın. Yaprak, dereceli silindirdeki suyun üzerine yerleştirildiği için, yaprak tarafından gerçekleşen her türlü alım terleme ile yönlendirilir.Terazideki havanın suyla doyurulduğundan emin olmak için terazi haznesinin içinde ıslak kağıt havlularla doldurulmuş küçük kapların bulunduğuna dikkat edin. Yaprağı yerleştirmeden önce, su kaynağından atmosfere herhangi bir buharlaşma kaçmadığını doğrulamak için borudaki dört yollu stop musluk vanzasını kullanarak akışı durdurun ve terazideki su silindirinin kütlesinin azalmadığını kontrol edin. Yaprağın üzerine yerleştirilen şeffaf bir Pyrex kap, lambanın ısısını soğuracaktır. Pyrex kaba soğuk su ekleyerek deney boyunca yaprak sıcaklığını 23 ve 28 °C arasında tutun.Yaprağın sistem üzerinde en az 30 dakika boyunca terlemesine izin verin ve ardından akış hızı, 32 saniyelik akış aralıklarında alınan en az beş ölçümle stabilize olana kadar bekleyin; varyasyon katsayısının %5'ten daha az olduğunu doğrulayın. Akış hızının kararlı duruma ulaşması esastır. Bu yöntem stabil akış varsayımıyla çalıştığı için, yapraktaki akış değişirse herhangi bir ölçümü göz ardı edin. Bu durum, sap metal kapanması, sızdırmazlıkta kaçak veya sistemde partiküller ya da hava kabarcıkları nedeniyle oluşan tıkanıklıklardan kaynaklanabilir.Yaprak kararlı duruma ulaştığında, bir termokupl ile yaprak sıcaklığını kaydetmeye geçin. Yaprağı tüp düzeneğinden hızlıca çıkarın, sapını kurulayın ve terlemeyi durdurmak için önceden içine nefes verilmiş kapanabilir bir torbaya yerleştirin, ardından bu torbayı ikinci bir torbanın içine koyun. Yaprağın torba içerisinde en az 20 dakika boyunca dengelenmesini bekleyin.Son 10 akış hızı ölçümünün ortalamasını alın. Ardından, bir basınç odası ile nihai yaprak su potansiyelini ölçün. Ayrıca, yaprak alanını ölçün.Şimdi yaprak hidrolik iletkenliğini hesaplayın ve sıcaklığın neden olduğu değişimleri ve su viskozitesinin bağımlılığını düzeltmek için yaprak alanı ile normalize edin. Hava istasyonundan alınan buhar basıncı açığını kullanarak K leaf değerlerini 25 °C'ye standardize edin. Eşlik eden metinde detaylandırıldığı şekilde stoma iletkenliğini belirleyin.Sürgünleri akşam veya gece toplayın ve ıslak kağıt havlularla doldurulmuş karanlık bir plastik torbaya yerleştirin. Ardından laboratuvarda, her sürgünün ucundan en az iki boğumu su altında yeniden kesin ve saf suda veya K yaprak ölçümleri için kullanılacak başka bir solüsyonda gece boyunca yeniden hidrate edin.Her gece için, rehidrasyon ve ölçüm işlemlerinde, farklı solüsyonların etkileri bir faktör olarak araştırılmayacaksa su kullanmanızı öneririz. Ultrapure su altında, sürgünleri en az üç yapraklı segmentler halinde kesin. Ardından bir vantilatör kullanarak, sürgünleri farklı süreler boyuncaye dehidre edin.Çeşitli yaprak su potansiyelleri elde etmek için, sızdırmaz torbaların içine nefes verin ve bu torbaları sürgündeki her bir yaprağın etrafına yerleştirin. Ardından, ıslak kağıt havlularla birlikte tüm sürgünü büyük bir sızdırmaz torbayla örtün ve en az 30 dakika boyunca dengeye gelmesini bekleyin. En üstteki ve en alttaki yaprakları kesin.Başlangıç yaprak su potansiyelini bir basınç odası kullanarak ölçün ve sürgünü atın. Eğer iki yaprağın su potansiyeli farkı 0,1 MPa'den büyükse, şiddetli şekilde susuz kalmış yapraklar için bu aralık 0,3 MPa'e kadar genişletilebilir. Yaprak su potansiyelini ve stoma iletkenliğini belirlemek için üçüncü yaprağa geçin.Daha önce açıklanan evaporatif akı yöntemi izlenerek, hidrolik hassasiyet eğrileri oluşturulmalı ve stoma iletkenliğindeki azalma da grafiğe dökülmelidir. Yaprakle dehydrasyonuna yanıt olarak, yaprak su potansiyelinin her 0,5 megapascal aralığı için en az altı K yaprak değeri elde edilmesi önerilir. Kuraklığa duyarlı türler için bu aralık 0,25 megapascala indirilebilir.Ardından, hassasiyet eğrisindeki aykırı değerleri temizlemek için Dixon Aykırı Değer testini uygulayın. Türler, susuzluk tepkileri açısından farklılık gösterdiğinden, her tür için farklı fonksiyonlar uydurun ve maksimum olabilirlik modelini seçin. Literatürde daha önce kullanılmış en az dört fonksiyonun uydurulmasını öneririz. Yaprak hidrolik iletkenliğinin D susuzluğu ile azalması, türler arasında çok güçlü farklılıklar göstermektedir.Yüksek ışınım altında, kuraklığa hassas türler, kuraklığa daha dayanıklı türlere göre daha az negatif su potansiyellerinde daha güçlü bir düşüş yaşarlar. Müzik otu Hetus Annuus için hidrolik iletkenliğin %80 kaybındaki su potansiyeli, Kaliforniya Chaparralı heteros are Beau Folia'nınkinden üç megapaskal daha az negatifti. İlginç bir şekilde, heteros are beauti Folia su potansiyelindeki düşüşe doğrusal bir yanıt vermiştir.Heus Annuus ise doğrusal olmayan bir azalma göstermiştir. Burada, hem stoma iletkenliği hem de yaprak hidrolik iletkenliği ışınım miktarına dramatik bir şekilde yanıt vermektedir. Opus indica için stoma iletkenliği, hem yüksek ışınım altında ölçülen yapraklarda hem de sağlam bitkilerdeki iyi ışık alan yaprakların koşullarını taklit eden laboratuvar ışığı altında dehidrasyon ile birlikte güçlü bir şekilde azalmaktadır.Öğle saatlerinde, EFM verileri, yüksek ışımaya maruz bırakılan ve aynı yaprak su potansiyeline kadar susuz bırakılan yaprakların, sağlam bitkiler üzerinde ölçülen yapraklarla benzer stomatal iletkenliğe sahip olduğunu göstermektedir; iyi sulanmış yapraklarda belirgin olan bir parametre olarak, maksimum hidrasyonda hidrolik iletkenlik, stomatal iletkenliğe göre daha güçlü bir ışık yanıtı sergilemektedir. Yüksek ışımaya maruz kalan yaprakların hidrolik iletkenliği, düşük ışımaya maruz kalanlara göre dört kat daha yüksekti; yüksek ışımada, yaprak hidrolik iletkenliği susuzlaşma ile daha güçlü bir şekilde azalmıştır. Hidrolik iletkenliğin %80 kaybındaki su potansiyeli, yüksek ışımada düşük ışımaya kıyasla 0,93 megapascal daha az negatifti.Bu videoyu izledikten sonra, maksimum yaprak hidrolik iletkenliği ve gövde metal iletkenliği ölçümünün nasıl yapılacağı ve letal mobilite eğrilerinin nasıl oluşturulacağı konusunda iyi bir anlayış kazanmış olmalısınız. EFM tekniğinde uzmanlaşıldığında, bu işlem yaprak başına bir saatten daha kısa bir sürede düzgün bir şekilde gerçekleştirilebilir. Akış çözeltisini çok temiz tutmayı ve hava kabarcıklarından kaçınmayı unutmayın.Ayrıca sistemi haftada en az bir kez temizleyin, tüm tüp ve kap sistemini %10'luk çamaşır suyu ile 20 dakika boyunca yıkayın ve ardından durulayıp gazlanmış akış çözeltisi ile doldurun. Bu teknik, bitki fizyologlarının çok çeşitli bitki türleri için türlerin yaprak hidrolik iletkenliği ve bunun çevreye verdiği yanıtlar konusunda nasıl ve neden farklılık gösterdiklerini araştırmalarına olanak tanır.

measurement-leaf-hydraulic-conductance-stomatal-conductance-their

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Biz canlı bakteri stoma yanıt erişmek için basit ve tekrarlanabilir bir protokol geliştirmiştir. Bu yöntem daha önce bildirdiği epidermal peeling kullanımı ile karşılaştırıldığında yaprak yaralama ve manipülasyona en aza indirir.

Tüm Yaprak Görüntüleme kullanarak Bakteriyel Hücreler Live Stoma Tepki Değerlendirilmesi

Yüzey yenileme, enerji akışlarını belirlemek için giderek daha fazla kullanılan mikrometeorolojik bir yöntemdir, ancak teknik karmaşıklığı onu geniş bir kitle için erişilemez hale getirir. Bir yüzey yenileme saha istasyonunu kurmak ve kalibre etmek, verileri elde etmek ve işlemek ve sonuçları doğru bir şekilde yorumlamak için gereken adımları açıklıyoruz.

Yüzey Yenileme: Alan Ölçeğinde Enerji Akısı Yoğunluğu Verilerinin Ölçülmesi ve İşlenmesi için Gelişmiş Bir Mikrometeorolojik Yöntem

Fizyolojisi ve morfolojisi bağlantılı nasıl çözülüyor bitkinin mekanik işleyişinin daha derin bir anlayış bırakır verir. Biz geleneksel fonksiyonel yaprak özellikleri ile stomatal iletkenlik ölçümleri ve korelasyon gelen stoma yönetmelik parametreleri türetmek için bir prosedür hem sunuyoruz.

Yaprak Fonksiyonel Özellikleri için ağıza ait iletkenlik İlişkin

Yaprak dokusunun özgül ısı kapasitesini ve termal iletkenliğini, numune başına 1 dakikadan daha az süre gerektiren, non-invaziv, temassız yakın kızılötesi lazer sondalama ile belirlemek için bir yöntem geliştirilmiştir.

Bir Rapid Lazer Yöntemi Yaprak Termal Özelliklerinin non-invazif ve İletişim serbest Tayini kolaylaştırır Probing

Daha yüksek tesislerde fotosentetik tepkileri incelemek için yeni bir teknik  yaklaşım tanımlıyoruz. Arabidopsis'te aynı yaprak alanı.

Yaprak Reflektasyonu ve Klorofil Floresan Analizlerinin Eşzamanlı Ölçümleri ile Fotosentetik Davranışların Değerlendirilmesi

Bir bileşik kitaplığın büyük ölçekli taraması ile foliar transpirasyon modülatörlerini tanımlamak için bir yöntem salıyoruz.

Helianthus Annuus'ta Büyük Ölçekli Termal Görüntüleme Taraması ile Bitki Transpirasyonunun Yeni Regülatörlerinin Belirlenmesi

Burada, Arabidopsis thaliana'da bakteri istilasına karşı stoma yanıtlarının doğrudan gözlemlenmesi ve otomatik ölçümü için basit bir yöntem sunuyoruz. Bu yöntem, cihaz tarafından yakalanan yaprak görüntüleri için tasarlanmış bir görüntü analizi boru hattı ile birlikte taşınabilir bir stoma görüntüleme cihazından yararlanır.

Pseudomonas syringae pv'ye Stoma Yanıtlarının Doğrudan Gözlemi ve Otomatik Ölçümü. domates DC3000 içinde Arabidopsis thaliana

Tek ve birleşik ısı, kuraklık ve su basması tedavilerine morfolojik ve fizyolojik yanıtları belirlemek için görüntü tabanlı bir fenotipleme protokolü tasarladık. Bu yaklaşım, erken, geç ve geri kazanım tepkilerinin tüm tesis düzeyinde, özellikle yer üstü kısımlarda tanımlanmasını sağladı ve birden fazla görüntüleme sensörünün kullanılması gerekliliğini vurguladı.

Patateste Tek ve Kombine Streslere Morfolojik ve Fizyolojik Tepkileri Belirlemek için Yüksek Verimli Görüntü Tabanlı Fenotipleme

Bu makale, bir toprak numunesi için bir hidrolik özellik aleti kullanan basit bir buharlaştırma deneyini içermektedir. Verimli araçlar sayesinde, yüksek kaliteli veriler oluşturmak için bir dizi gün içinde ölçümler yapılabilir.

Hidrolik Özellik Analizörü Kullanılarak Basit Bir Buharlaşma Deneyine Dayalı Toprak Su Potansiyeli ve İletkenliği Ölçümleri

Kararlı izotop profil aracı metabolik akı gaz kromatografisi kütle spektrometrik analizi, nematod...

Kararlı İzotopik Profil geliştirilmesi ve Yetişkin Sahne Aracı Metabolik Akı Caenorhabditis elegans</em

Keşfedin yaprak hidrolik iletkenliği ve stoma iletkenliği ölçüm yöntemini ışık ve dehidrasyon yanıtlarını incelemek için. Bu teknik bitki fizyolojisi ve ekolojik adaptasyon çalışmalarında kullanılır.

Evaporatif Akı Yöntemi (EFM) kullanarak Işınım ve Dehidrasyon için Yaprak Hidrolik İletkenlik ve Stoma İletkenlik ve Yanıtları Ölçümü (Video) | JoVE Journal

Evaporatif Akı Yöntemi (EFM) kullanarak Işınım ve Dehidrasyon için Yaprak Hidrolik İletkenlik ve Stoma İletkenlik ve Yanıtları Ölçümü

Daha fazla video keşfet