İdrar Yolu ve Probe tabanlı Konfokal Lazer Endomikroskopi: Tekniği
10 Ocak 2013
Prob tabanlı konfokal lazer endomikroskopi gibi cep çözünürlüğü ile mesane kanseri gibi patolojik durumların dinamik, intravital görüntüleme sağlayan, sistoskopi sırasında insan üriner sistem gerçek zamanlı mikroskopi sağlar. Endomikroskopi, standart beyaz ışık endoskopinin tanısal doğruluğu artırmak ve cerrahi rezeksiyon geliştirmek için intraoperatif görüntü kılavuzluğunda sağlayabilir.
Aşağıdaki deneyin amacı, mesane tümörünün transüretral rezeksiyonu yapılan bir hastada prob tabanlı konfokal lazer endo mikroskobu kullanılarak in vivo mikroskopi göstermektir. Bu, önce mesanenin tüm ürotelyumunu görselleştirmek ve herhangi bir anormal veya şüpheli mukozal lezyonu not etmek için beyaz ışık sistoskopisi kullanılarak elde edilir. İkinci adım olarak, konfokal lazer endo mikroskobu ile görüntüleme için gerekli olan floresan kontrastı sağlayan bir kontrast madde intra ally damlatılır, üçüncü adımda ise her bir ilgi alanının in vivo mikroskopisi yapılır ve dokunun hücresel, mikromimari ve vasküler özellikleri not edilir.
Sonuç olarak, in vivo mikroskopi bulguları, ilgilenilen bölgelerin biyopsilerinin histopatolojik analizi ile karşılaştırılabilir. Prosedürü gösteren, ameliyathanede idrar yolu için prob tabanlı konfokal lazer endo mikroskobu uygulamasını geliştiren ürolojik cerrah Dr.Joseph Leal olacaktır. Denek litotomi pozisyonuna geldikten sonra, mesanenin bölgelerini beyaz ışık altında gözetlemek için standart beyaz ışık sistoskopisi kullanarak üretradan sert bir sistoskop sokarak başlayın.
Konfokal lazer endo mikroskobu için ilgilenilen bölgeleri bir rezeksiyon döngüsü ile işaretleyin. Floresan sistoskopi ve dar bant görüntüleme gibi diğer makroskopik optik görüntüleme yöntemleri bu adımda ek şüphe alanlarını belirlemek için kullanılabilir, şimdi 60 mililitrelik bir kateter kullanarak mesaneye steril bir idrar kateteri yerleştirilir. Uç şırınga, seyreltilmiş kontrast maddeyi yerçekimi ile aşılayın.
Daha sonra, kontrast maddeyi konutta tutmak için idrar sondasını klempleyin. Beş dakika sonra, ajanı mesaneden boşaltın. Daha sonra, intravenöz floresein enjeksiyonu için mesaneden kalan kontrastı temizlemek için 60 mililitrelik şırıngaya 240 ila 300 mililitre normal salin dökün.
Bir şırıngaya bir mililitre floresein çizin. Şırıngayı intravenöz erişim noktasına takın ve hattı normal salinle yıkayan bir bolus olarak intravenöz olarak 0.5 ila bir mililitre floresein enjekte edin. Kontrast madde enjekte edildikten sonra, steril bir konfokal lazer endo mikroskopi görüntüleme probunu ambalajından çıkarın ve lazer tarama ünitesine bağlayın.
Ardından, görüntüleme probunu üreticinin talimatlarına göre ısıtın ve kalibre edin ve ardından sıfır derece lensli sert sistoskopu mesaneye yeniden yerleştirin. Şimdi konfokal endomikroskopi görüntüleme Probunu, ucu beyaz ışık altında sistoskopun hemen ötesinde olacak şekilde sistoskopun çalışma kanalı boyunca ilerletin. Görüntüleme probu ilgilenilen bölgeyi tararken daha önce işaretlenmiş ilgi alanlarını bulun.
Gelecekteki analizler için görüntüleri kaydedin. Ardından, konfokal endomikroskopi görüntülemeyi manipüle etmek için operatörün elini kullanın. İlgilenilen bölgelerin optik kesitlenmesi için ilgilenilen bölgelerin doğrudan hızlı teması için prob.
İç mesanede bulunan tümörlere ulaşmak için doğrudan teması sürdürürken görüntüleme probuna giden basıncı nazikçe artırın ve azaltın. İlgilenilen bölgeyle doğrudan temas için görüntüleme probunun sapmasını kolaylaştırmak için standart bir AL dirseği ve köprüsü kullanın. İstenirse, konfokal lazer endo mikroskobu ile taranan ilgili bölgelerden soğuk kesim biyopsileri alın.
Görüntülemenin tamamlanmasının ardından, konfokal endomikroskopi görüntüleme probunu çalışma kanalından çıkarın. Bu prosedürü denerken, görüntülemeden önce mesane içindeki fazla floreseini yıkamayı ve bir prob ile mukozal yüzey arasında 90 derecelik teması sürdürmeyi unutmamak önemlidir. Bu ilk görüntü, intravasküler olarak boyanmış bir papiller tümör ile temsili bir beyaz ışık sistoskopisinden alınmıştır.
Görüntünün altında görünen 2,6 milimetrelik görüntüleme probuna dikkat edin. Bu iki görüntü, sırasıyla intravezikal ve intravenöz floresein kullanılarak iki farklı mesane tümöründen elde edilen temsili konfokal lazer endomikroskopi görüntüleridir. Görüntüleme problarının farklı sistoskop tipleri konfokal lazer arasında değiştirilebileceği göz önüne alındığında, endo mikroskopi, burada gösterildiği gibi floresan sistoskopi ve burada gösterildiği gibi dar bant görüntüleme dahil olmak üzere her iki teknolojinin de kendi başına tanısal doğruluğunu artırabilen diğer gelişmekte olan görüntüleme modaliteleri ile birleştirilebilir.
Dolayısıyla bu yöntem mesane kanseri hakkında fikir verebilir. Biyopside tanı konulması zor olabilen üst sistem ürotelyal karsinomları gibi diğer sistemlere de uygulanabilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu çalışma, sistoskopi sırasında insan üriner sisteminin gerçek zamanlı görüntülemesi için prob tabanlı konfokal lazer endomikroskobinin kullanımını göstermektedir. Bu teknik, mesane tümörlerinin hücresel çözünürlükte dinamik olarak görselleştirilmesine olanak tanıyarak tanısal doğruluğu ve cerrahi yönlendirmeyi potansiyel olarak artırmaktadır.
Temel Çalışma Bileşenleri
Bilim Alanı
- Üroloji
- Endoskopi
- Mikroskopi
Arkaplan
- Prob tabanlı konfokal lazer endomikroskopi, yüksek çözünürlüklü görüntüleme sağlar.
- Standart beyaz ışık endoskopisi ile birlikte kullanılabilir.
- Bu yöntem, mesane kanseri tespitini geliştirebilir.
- İntraoperatif görüntüleme, cerrahi rezeksiyona rehberlik edebilir.
Çalışmanın Amacı
- Mesane tümörlerinin transüretral rezeksiyonu sırasında in vivo mikroskobinin gösterilmesi.
- In vivo bulguların histopatolojik analizle karşılaştırılması.
- Konfokal lazer endomikroskobinin mesane tümörlerini belirlemedeki etkinliğinin değerlendirilmesi.
Kullanılan Yöntemler
- Beyaz ışık sistoskopisi kullanılarak mesanenin başlangıç görüntülemesi.
- Görüntülemeyi geliştirmek için kontrast madde enjeksiyonu.
- Detaylı analiz için konfokal lazer endomikroskopi görüntüleme probunun kullanımı.
- Biyopsi sonuçlarıyla gelecekte karşılaştırmak üzere görüntülerin kaydedilmesi.
Ana Sonuçlar
- Konfokal lazer endomikroskopi kullanılarak tümörlerin başarıyla tanımlanması.
- Çeşitli mesane lezyonlarından elde edilen yüksek çözünürlüklü görüntüler.
- Görüntüleme sonuçlarının histopatolojik bulgularla karşılaştırılması doğruluğu onaylamıştır.
- Diğer üriner sistem karsinomlarında uygulama potansiyeli.
Sonuçlar
- Prob tabanlı konfokal lazer endomikroskopi, mesane kanseri teşhisini geliştirmektedir.
- Bu teknik, daha iyi görüntüleme yoluyla cerrahi sonuçları iyileştirebilir.
- Diğer sistemlerdeki uygulamasını araştırmak için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır.
Sıkça Sorulan Sorular
Sektörel Uygulama ve Önem
Prob tabanlı konfokal lazer endomikroskopi, sistoskopi sırasında üriner sistem dokularının gerçek zamanlı ve yüksek çözünürlüklü görüntülemesini sağlayarak mesane kanserinin erken teşhisini destekler ve cerrahi rezeksiyona rehberlik eder. Bu teknoloji, histopatolojik analizi tamamlayan hücresel düzeyde görselleştirme sunarak diagnostik güvenilirliği artırır ve lezyon karakterizasyonundaki belirsizliği azaltır. Standart endoskopik iş akışlarına entegrasyonu, urothelial karsinom yönetiminde risk stratifikasyonunun iyileştirilmesi için translasyonel bir yol sunar.
Biyofarma Ar-Ge'de Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- Bilimsel Değer: Hücresel morfoloji ve vasküler mimarinin in vivo görselleştirilmesi yoluyla terapötik hipotezlerin sorgulanmasına olanak tanır.
- Operasyonel Değer: Görüntüleme bulgularının histopatolojik son noktalarla gerçek zamanlı korelasyonu aracılığıyla fonksiyonel hedef doğrulamasını destekler.
- Öngörücü Değer: Hastalıkla ilişkili mikro mimari değişikliklerin doğrudan gözlemlenmesine izin vererek hedef uygunlığına olan güveni artırır.
Tarama ve Analiz Geliştirme
- Bilimsel Değer: Biyopsi için ilgilenilen bölgelerin hassas lokalizasyonunu sağlayarak, valide edilmiş biyolojik sistemleri sonraki tarama aşamalarına hazırlar.
- Operasyonel Değer: Tekrarlanabilir kontrast madde uygulaması ve prob tabanlı görüntüleme protokolleri aracılığıyla analiz standardizasyonunu teşvik eder.
- Ölçeklenebilirlik: Değiştirilebilir görüntüleme probları ile esnek ve rijit sistoskopi sistemleri arasında platformun yeniden kullanımını kolaylaştırır.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Bilimsel Değer: Neoplastik dokunun dinamik vasküler ve hücresel özelliklerini yakalayarak hastalıkla ilgili sistem modellemesini destekler.
- Translasyonel Süreklilik: Lezyon progresyonunun boylamsal izlemesine olanak tanıyarak keşif ve preklinik validasyon arasında köprü kurar.
- Riskten Arındırılmış Kararlar: Patolojik derecelendirme ile korele olan kantitatif görüntüleme çıktıları aracılığıyla ilerleme kriterlerini belirler.
İş Akışı ve Boru Hattı Entegrasyonu
Bu yöntem, görüntüleme tabanlı fenotipik çıktılar sağlayarak, erken hedef hipotez testlerinden öncü bileşik belirleme ve preklinik doğrulamaya kadar olan keşif sürecine entegre olur.
- Keşif Biyolojisi: Tümörle ilişkili stromal ve epitel etkileşimlerinin doğrudan görselleştirilmesini sağlayarak hipotez testlerini ve yolakların netleştirilmesini destekler.
- Tarama: Moleküler profilleme ve bileşik taraması için şüpheli lezyonların hassas şekilde hedeflenmesine olanak tanıyarak analiz hazırlığını artırır.
- Analitik: Farklı durumlar arasında karşılaştırmalı analize imkan veren vasküler yoğunluk ve hücresel atipi skorları gibi kantitatif çıktılar üretir.
- Translasyonel Araştırma: Histopatolojik progresyon modellerini yansıtan boylamsal görüntüleme yoluyla preklinik süreklilikle bağlantı kurar.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: Birden fazla ürolojik endikasyon ve endoskop konfigürasyonunda uygulanabilen, yeniden kullanılabilir bir görüntüleme platformu olarak işlev görür.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: Doğrudan doku görselleştirmesi yoluyla mekanistik belirsizliği azaltarak hedef doğrulamadaki öngörü güvenini artırır.
- Operasyonel Değer: Standartlaştırılmış kontrast dozajı ve prob kullanım protokolleri aracılığıyla standartlaşmayı ve tekrarlanabilirliği geliştirir.
- Stratejik Değer: Lezyon malignitesinin görüntüleme tabanlı erken biyobelirteçlerini sağlayarak devam/dur karar verme sürecini iyileştirir.
- Portföy Etkisi: Preklinik modellerde terapötik yanıtın non-invaziv izlenmesine olanak tanıyarak risk odaklı önceliklendirmeyi destekler.
Uygulama Hususları
- Prob navigasyonu ve görüntü yorumlama için endoskopik üroloji ve konfokal görüntüleme tekniklerinde uzmanlık gerektirir.
- Lazer tarama ünitelerine ve üriner sistem erişimi için uygun çapta uyumlu fiberoptik problara bağımlıdır.
- Arka plan floresansını en aza indirmek için kontrast madde uygulamalarının (intravezikal veya intravenöz) ve yıkama protokollerinin standardizasyonunu gerektirir.
- Anatomik olarak karmaşık üriner sistem bölgelerinde prob sapması ve temasın sürdürülmesine yönelik adaptasyon değerlendirmelerini içerir.
- Doğrudan doku teması gerekliliği ile sınırlıdır; bu durum, prosedürel düzenlemeler yapılmadığı takdirde iltihaplı veya kırılgan mukozalarda kullanımı kısıtlayabilir.
