Name: Locust Sinir Aktivitesi Karakterize Multi-ünite Kayıt Yöntemleri ( Schistocerca Americana) Olfaktör Devreler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-01-25T12:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 13 s
Description: Öğrenin, çekirge Schistocerca americana'nın anten lobu ve mantar cismi gibi ilk üç işlem merkezindeki koku uyarılı çoklu ünite sinir aktivitesini karakterize etmek için dış hücre kayıt tekniklerini. Bu yöntem, sinirbilim araştırmalarında topluluk aktivitesini incelemek için uyarlanabilir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Cömert start-up fonları Biyomedikal Mühendisliği Bölümü Washington Üniversitesi, Sistemleri Neuroscience hibe, Donanma Araştırma hibe bir Office için bir McDonnell Merkezi (Grant #: N000141210089) BR yazarlar bu iş için fon aşağıdaki teşekkür etmek istiyorum

1. Koku Hazırlama ve Gönderme <ol><li> İstenilen konsantrasyon seviyesini elde etmek için hacim olarak mineral yağ içinde koku çözümler seyreltilir. 60 ml bir cam şişe içinde mineral yağ ve odorant bir karışım 20 ml saklayın. Bir girişi ve bir çıkış hattı sağlamak için, bir kauçuk durdurucu (19 ölçü), yukarıdan gelen ve bir diğerinin içine iki şırınga iğneleri yerleştirin. Bu lastik tıpa ile cam şişe Seal ve giriş hattı (Şekil 1A) filtre aktif karbon tasarlanmış özel bir takın. </li><li> Karbon filtre iki adet 6 ml şırınga kullanılarak yapılır. Yarısında şırınga kesin ve piston sonu atın. Isı shrink boru kullanarak bunları birbirine bağlamadan önce pamuk ve aktif kömür ile kalan parçalarını her doldurun. </li><li> Anten boyunca sabit bir hava akımı sağlayan plastik tüp (Nalgene FEP Boru, ID 5.8 mm) (Şekil 1B koku şişesi (polietilen boru, ID 0.86 mm kullanarak) çıkış hattını bağlayın </strong&gt;). </li><li> Keçiboynuzunun anten birkaç cm içine yerleştirilen plastik bir tüp kullanarak Keçiboynuzunun doğru; Doğrudan karbon filtreli, Nem havadaki (debisi 0.75 L / dk taşıyıcı gaz). </li><li> Koku stimülasyonu için, şişe koku çözümü yukarıda Statik headspace sabit bir ses (0.1 L / dk) yerinden. Bu, bir Pico-pompa (WPI, BD-820) kullanılarak şişe içine nemi alınmış hava eşit miktarda enjekte edilerek elde edilir. Koku şişe buhar hava akımı boru (Şekil 1B) üzerine çıkış hattı üzerinden yönlendirilir. </li><li> ~ 10 cm keçiboynuzu antenin arkasında bir vakum huni koyarak teslim koku buharlar çıkarın. </li></ol> 2. Tek Sensillum Kayıt için Locust Anten hazırlanması <ol><li> Tam yetiştirilen kanatları ile seks ya bir genç-yetişkin keçiboynuzu seçin, ancak önce çiftleşme sahne kalabalık bir kolonisi. Keçiboynuzu dizginlemek için, önce bacaklarını kesmek. Doku yapıştırıcısı (Vetbond, 3M) ile amputasyon siteleri mühürleyin. Güvenli t(Şekil 2A) onun göğüs çevresinde bol dökümlü elektrik bandı küçük bir parça kullanarak özel olarak tasarlanmış odasına o çekirge. </li><li> Bir diseksiyon mikroskobu altında, anten yerleştirme için balmumu platformu (Şekil 2A) sığ bir oluk yapmak. Oluk içine anteni yerleştirin ve antenin iki ucu (Şekil 2B, bir electrowaxer balmumu eritmek için kullanılır) de batik balmumu kullanarak stabilize. </li><li> Toraks (~ 1 cm uzakta kafa) bir toprak elektrotu (chlorided gümüş tel) takın. Her iki mühür kesi siteye batik balmumu kullanın ve yeri (Şekil 2A) topraklama kablosu tutun. </li></ol> 3. Tek Sensillum Kayıt Olfaktör Reseptör Nöronlar (ORNs) den Koku-uyarılmış yanıtlar Monitör <ol><li> Bir titreşim izolasyon tablo (TMC) (Şekil 3A) üzerinde bir stereomikroskop (Leica M205C) altında stabilize akasya anten yerleştirin. Kayıt sensillum tabanı açık olduğundan emin olunly görünür (Şekil 3B). </li><li> Borosilikat cam kapiller tüp (OD 1,2 mm ID 0.69 mm) kullanılarak cam elektrotlar (keçiboynuzu ile salin 9, uç çapı 1-3 mikron dolduran MΩ empedans 3-10) imal etmek bir mikropipet çektirmesi (Sutter P-1000) kullanın. </li><li> Motorlu bir mikromanipülatör (Sutter MP-285) bağlı olan bir mikropipet tutucu içine cam elektrot yerleştirin. Nazikçe sensillum (Şekil 3B) tabanına elektrodu takın. Her sensillum çekirgeler 10 3-50 ORNs içerebilir unutmayın. </li><li> AC amplifikatör (Çim P-55) kullanılarak sinyal (10,000 kez) Amplify. 0.3 arasındaki sinyal filtreleme - 10.0 kHz ve bir veri toplama sistemi kullanılarak 15 kHz örnekleme oranı (Şekil 3D) (LabView, PCI-MIO-16E-4 DAQ kartları; National Instruments) de kazanır. </li></ol> 4. Antennal Lob ve Mantar Vücut Kayıtları için Locust Diseksiyon Prosedürü <ol><li> Restraini izleyinng prosedürler bölüm 2.1 &#39;de açıklanan. Şekil 4A ve B &#39;de gösterildiği gibi, özel olarak tasarlanmış bir boşluk içinde akasya yerleştirin. </li><li> Sırasında salin serpmek ve diseksiyon işlemden sonra, keçiboynuzu başının etrafında bir mum bardağı oluşturmak için. Balmumu göre sadece ağız parçaları üzerinde başlar ve Şekil 4c &#39;de gösterildiği gibi iki anten arasındaki bölge kapsayan göz bileşimi ötesinde uzanmalıdır. </li><li> Antenler mum fincan geçmesine izin vermek için, plastik (polietilen) boru (5 mm uzunluğunda, ID 0.86 mm) kullanılarak her iki tarafta küçük tüneller oluşturabilir. Plastik boru balmumu kap aracılığıyla kayabileceği emin olun. İkincisi sıkıca plastik tüp sarar bir kauçuk conta kullanılarak elde edilir, ancak balmumu-fincan (Şekil 4C) eklenir. </li><li> Epoksi reçine kullanarak, plastik borunun alt uç ile anten baz eklemek. Bu adım, antenler bile çevreleyen sonra yerinde tutulur sağlarkütikül kaldırılır. </li><li> Bu noktadan itibaren serum fizyolojik 9 dolu mum fincan tutun. Iki anten (anteroposterior ekseni ile aynı hizada dikdörtgenin uzun kenarı) arasında merkezi bir dikdörtgen bölgesini kaldırarak başlayın. Daha sonra, anteni (Şekil 4D) dibinde bileşik gözler ve manikür bozmadan komşu bölgelerde manikür çıkarın. </li><li> Ince forseps kullanarak, hafifçe hava keseciklerinin ve beyni çevreleyen yağ maddeleri temizleyin. Bu adımın sonunda, keçiboynuzu beyin açıkça (Şekil 4D) görülmelidir. Koku bilgileri (açık sarı pigmentasyon) ile işleme beyin bölgeleri iki anten arasında bulunmaktadır dikkat edin. </li><li> Çekirgeler olarak bağırsak, beyin altında ve gövde uzunluğu boyunca uzanır. Potansiyel hazırlık istikrarsızlaştırma gelen bağırsak hareketini önlemek için hafifçe foregut çekin ve ince makas kullanarak kesin. Karında küçük bir kesi olun sadecerektum yukarıda ve kaba forseps ile hindgut çekerek gut kaldırabilirsiniz. Bir tuzlu sızıntısı önlemek için, dikiş ipliği ile kesi yeri hemen anterior karın kravat. </li><li> Şekil 4D &#39;de gösterildiği gibi elektrofizyoloji sırasında beyin yükseltmek ve 11 onu sabitlemek için balmumu ince bir tabaka ile kaplı bir ince telden yapılmış küçük bir platformu kullanın. </li><li> Böcek beyni öncesi deneylere kaldırılması gerekiyor ince bir yalıtım tabakası ile kaplıdır. Desheath için, beyin, yavaşça ince forseps kullanılarak 9 beyin yüzeyi üzerinde bir enzim küçük bir miktar (0.3-0.4 mg proteaz, Sigma Aldrich) yayıldı. Enzim uygulama ~ 5-10 sn sonra, serum fizyolojik ile iyice beyin durulayın. Süper ince forseps kullanarak nazikçe tutun ve kılıf yukarı çekin ve sonradan kayıt yerleri (AL ve MB; Şekil 4E, F gösterilmiştir) üzerinden yırtarak açın. </li></ol> 5. Multi-ünite antennal Lob gelen Kayıtlar veMantar Vücut <ol><li> Bir titreşim izolasyonu masaya yerleştirilen bir patlama standı asılı bir stereomikroskop altında çekirge hazırlanması (Şekil 5A) yerleştirin. </li><li> Deney boyunca sabit bir salin perfüzyon oranı (0.04 L / saat yaklaşık) koruyun. Toprak elektrodu olarak tuzlu dolu mum fincan dalmış bir chlorided gümüş tel kullanın. </li><li> PN kayıtları için, 16 kanallı bir silikon prob (NeuroNexus Teknolojileri, ürün no A2X2-tet-3mm-150-150-121-A16, Şekil 5B) kullanın. Öncesinde her bir deney için, 200-300 kÊ aralığında empedans elde etmek için altın ile elektrotlar elektrolizle. Elektrokaplama için Şekil 7&#39;de gösterilen devre kullanın. </li><li> Yakın anten lobun yüzeyine elektrot yerleştirin ve yavaşça manuel mikromanipülatör (TEFE, M3301R) (Şekil 5D) kullanarak doku takın. </li><li> ~ 10 um adımlar halinde elektrot Advance. Her adımda 2-3 dk bekleyin ve elde değerlendirmekd sinyal kalitesi. İdeal kayıt sitesinde, ekstraselüler sinyaller birden fazla kayıt kanallar tarafından alınacaktır ve yüksek sinyal-gürültü oranı (SNR&gt; 3-5 kez gürültü SD) sahip olacaktır. </li><li> KC kayıtları için ısmarlama bir bükümlü tel tetrode (; Bölüm 6&#39;da sunulmaktadır adım adım üretim prosedürü Şekil 5C) kullanın. Adım 5.3 &#39;de tartışılan bu elektrotlar elektrolizle. KC somata MB 8 yüzeysel tabaka ile sınırlı olarak MB (Şekil 5E) yüzeyi üzerinde tetrode yerleştirin. </li><li> Şematik olarak, Şekil 5a&#39;da gösterildiği gibi PN ile KC kayıtların her ikisi de aynı akasya hazırlama aynı anda yapılabilir. </li><li> Elektrotların stabilizasyonu sağlamak için kayıt yeri bulduktan sonra en az 15 dakika bekleyin. </li><li> 0,3-6 KHz arasında filtre 15 KHz, tüm ekstraselüler sinyaller Edinme ve 16 kanal AC amplifikatör (Biyoloji Elektronik Mağazalar; Caltech, Pasadena, CA) kullanılarak (10,000 kez) yükseltmek (Şekil 6A, B). </li></ol> 6. KC Kayıtları için Twisted Telinin olun Prosedürleri <ol><li> KC kayıtları için çoklu birim elektrot tasarımı için, izolasyonlu krom nikel tel (RO800, 0.0005 &quot;filament) 8 kullanın. </li><li> Sekiz elektrotlar istenirse daha sonra karton 4 kez 10-15 cm uzunluğunda bir parça etrafında tel sarın. Karton uçları tel kesme gelen kenarlarına önlemek için plastik boru ile kaplı olabilir. Sarma da, biraz rahat olduğundan emin olun, ama tel gergin olmadığından emin olun. Kolayca kırılır gibi dikkatle tel tutun. </li><li> Karton üstündeki teller birbirine Bunch ve onları bir arada tutmak için bir parça bant (Zaman Bant, T-534-RP) kullanın. Diğer ucunda ipliklerini kesin. Kesim sonu yanı bant başka bir parça ile de kablo tellerini ve grup telleri çıkarın. </li><li> Ipliklerini (~ 72 dev / 3 dk birlikte bir titrede plaka çalkalayıcı (Thermo Scientific, Model 4625Q) rüzgar kullanmaBir bükülmüş tel oluşturacak şekilde dk). Bantlanmış iplikçiklerinin alt titresi plak rotoru kesilebilir ve üst bir patlama stand kesilebilir. Sarma sırasında tel henüz gergin olmayabilir, gevşek az olmalıdır. </li><li> Bir arada bireysel lifler yapışması ve bir tek tel oluşturmak için bir ısı tabancası (Weller 6966C) ile birlikte izolasyon eritin. Telin uzunluğu boyunca 3-4 yavaş geçer (3-4 sn her) ısıtmak ve birlikte ipliklerini kaynaştırmak için yeterli olmalıdır. Ardından alttan tel bırakın ve dinlenmek için izin verir. Bandı çıkarmak için uçlarının yakınındaki tel kesin. </li><li> 5-6 cm uzunluğunda, cam kapiller tüp (OD 1,0 mm, ID 0.58 mm) ile telin bir ucunu. Ince cımbız kullanarak bir ucunda bükülmüş tel dışında Tease ve çok kısa bir alev kullanarak sonuna kundakladıklarını tarafından kaplama çıkarın. Bu adım çok dikkatli yapılmalıdır; çok uzun alev tel maruz ipliklerini eritebilir ve karışmayı neden olacaktır. </li><li> Yavaşça Alevli ucunda 8 ipliklerini ayırmak bir8-pin IC sokete ayrı nd lehim her iplikçik. Coat epoksi ile IC yuva üst ipliklerini ve yerinde kılcal cam tutun. Ayrıca bir yerde (Şekil 5C) içinde tel tutmak için kılcal diğer ucunda epoksi küçük bir damla yerleştirin. </li><li> Son olarak, kapiller ucundan 0,5 cm yaklaşık karbür makas ile 45 derecelik bir açıyla telin ucu kesilir. </li></ol>

<ol><li>Ache, B. W., Young, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfaction%3A+diverse+species%2C+conserved+principles%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Olfaction: diverse species, conserved principles.</a> Neuron. 48, 417-430 (2005).</li>
<li>Laurent, G., Wehr, M., Davidowitz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+representations+of+odors+in+an+olfactory+network%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Temporal representations of odors in an olfactory network.</a> Journal of Neuroscience. 16, 3837-3847 (1996).</li>
<li>Stopfer, M., Jayaraman, V., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor+identity+vs.+intensity+coding+in+an+olfactory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Odor identity vs. intensity coding in an olfactory system.</a> Neuron. 39, 991-1004 (2003).</li>
<li>Steven de Belle, J., Heisenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associative+odor+learning+in+Drosophila+abolished+by+chemical+ablation+of+mushroom+bodies%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Associative odor learning in Drosophila abolished by chemical ablation of mushroom bodies.</a> Science. 263, 692-695 (1994).</li>
<li>Cassenaer, S., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditional+modulation+of+spike-timing-dependent+plasticity+for+olfactory+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Conditional modulation of spike-timing-dependent plasticity for olfactory learning.</a> Nature. 482, 47-52 (2012).</li>
<li>Hallem, E. A., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coding+of+odors+by+a+receptor+repertoire%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Coding of odors by a receptor repertoire.</a> Cell. 125, 143-160 (2006).</li>
<li>Raman, B., Joseph, J., Tang, J., Stopfer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporally+diverse+firing+patterns+in+olfactory+receptor+neurons+underlie+spatiotemporal+neural+codes+for+odors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Temporally diverse firing patterns in olfactory receptor neurons underlie spatiotemporal neural codes for odors.</a> Journal of Neuroscience. 30, 1994-2006 (2010).</li>
<li>Perez-Orive, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oscillations+and+sparsening+of+odor+representations+in+the+mushroom+body%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Oscillations and sparsening of odor representations in the mushroom body.</a> Science. 297, 359-365 (2002).</li>
<li>Naraghi, M., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odorant-induced+oscillations+in+the+mushroom+bodies+of+the+locust%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Odorant-induced oscillations in the mushroom bodies of the locust.</a> The Journal of Neuroscience. 14, 2993-3004 (1994).</li>
<li>Ochieng, S. A., Hallberg, E., Hansson, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fine+structure+and+distribution+of+antennal+sensilla+of+the+desert+locust%2C+Schistocerca+gregaria+%28Orthoptera%3A+Acrididae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+and+Tissue+Research%22%5BJournal%5D)">Fine structure and distribution of antennal sensilla of the desert locust, Schistocerca gregaria (Orthoptera: Acrididae).</a> Cell and Tissue Research. 291, 525-536 (1998).</li>
<li>Burrows, M., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+Potentials+in+the+Central+Terminals+of+Locust+Proprioceptive+Afferents+Generated+by+Other+Afferents+from+the+Same+Sense+Organ%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Synaptic Potentials in the Central Terminals of Locust Proprioceptive Afferents Generated by Other Afferents from the Same Sense Organ.</a> Journal of Neuroscience. 13, 808-819 (1993).</li>
<li>Pouzat, C., Mazor, O., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+noise+signature+to+optimize+spike-sorting+and+to+assess+neuronal+classification+quality%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Using noise signature to optimize spike-sorting and to assess neuronal classification quality.</a> Journal of Neuroscience Methods. 122, 43-57 (2002).</li>
<li>Mazor, O., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+dynamics+versus+fixed+points+in+odor+representations+by+locust+antennal+lobe+projection+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Transient dynamics versus fixed points in odor representations by locust antennal lobe projection neurons.</a> Neuron. 48, 661-673 (2005).</li>
<li>Christensen, T. A., Pawlowski, V. A., Lei, H., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-unit+recordings+reveal+context+dependent+modulation+of+synchrony+in+odor-specific+neural+ensembles%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Multi-unit recordings reveal context dependent modulation of synchrony in odor-specific neural ensembles.</a> Nature Neuroscience. 3, 927-931 (2000).</li>
<li>Pellegrino, M., Nakagawa, T., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+Sensillum+Recordings+in+the+Insects+Drosophila+melanogaster+and+Anopheles+gambiae%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae.</a> J. Vis. Exp. (36), e1725(2010).</li>
<li>Geffen, M. N., Broome, B. M., Laurent, G., Meister, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+Encoding+of+Rapidly+Fluctuating+Odors%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Neural Encoding of Rapidly Fluctuating Odors.</a> Neuron. 61, 570-586 (2009).</li>
<li>Ito, I., Ong, R. C., Raman, B., Stopfer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sparse+odor+representation+and+olfactory+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Sparse odor representation and olfactory learning.</a> Nature Neuroscience. 11, 1177-1184 (2008).</li>
<li>Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+network+dynamics+and+the+coding+of+multidimensional+signals%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Review+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Olfactory network dynamics and the coding of multidimensional signals.</a> Nature Review Neuroscience. 3, 884-895 (2002).</li>
<li>Brown, S. L., Joseph, J., Stopfer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Encoding+a+temporally+structured+stimulus+with+a+temporally+structured+neural+representation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Encoding a temporally structured stimulus with a temporally structured neural representation.</a> Nature Neuroscience. 8, 1568-1576 (2005).</li>
<li>MacLeod, K., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+mechanism+for+synchronization+and+temporal+patterning+of+odor-encoding+neural+assemblies%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Distinct mechanism for synchronization and temporal patterning of odor-encoding neural assemblies.</a> Science. 274, 976-979 (1996).</li>
<li>Wehr, M., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+between+afferent+and+central+temporal+patterns+in+the+locust+olfactory+system%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Relationship between afferent and central temporal patterns in the locust olfactory system.</a> The Journal of Neuroscience. 19, 381-390 (1999).</li>
<li>Moreaux, L., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimating+firing+rates+from+calcium+signals+in+locust+projection+neurons+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neural+Circuits%22%5BJournal%5D)">Estimating firing rates from calcium signals in locust projection neurons in vivo.</a> Frontiers in Neural Circuits. 1, 1-13 (2007).</li>
<li>Galizia, C. G., Joerges, J., Kuttner, A., Faber, T., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+semi-in-vivo+preparation+for+optical+recording+of+the+insect+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A semi-in-vivo preparation for optical recording of the insect brain.</a> Journal of Neuroscience Methods. 76, 61-69 (1997).</li>
<li>Galan, R. F., Sachse, S., Galizia, C. G., Hez, A. V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor-driven+attractor+dynamics+in+the+antennal+lobe+allow+for+simple+and+rapid+olfactory+pattern+classification%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Computation%22%5BJournal%5D)">Odor-driven attractor dynamics in the antennal lobe allow for simple and rapid olfactory pattern classification.</a> Neural Computation. 16, 999-1012 (2004).</li>
<li>Kuebler, L. S., Schubert, M., Karpati, Z., Hansson, B. S., Olsson, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antennal+Lobe+Processing+Correlates+to+Moth+Olfactory+Behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Antennal Lobe Processing Correlates to Moth Olfactory Behavior.</a> Journal of Neuroscience. 32, 5772-5782 (2012).</li>
<li>Silbering, A. F., Bell, R., Galizia, C. G., Benton, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+Imaging+of+Odor-evoked+Responses+in+the+Drosophila+Antennal+Lobe%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Calcium Imaging of Odor-evoked Responses in the Drosophila Antennal Lobe.</a> J. Vis. Exp. (61), e2976(2012).</li>
<li>Skiri, H. T., Galizia, C. G., Mustaparta, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Representation+of+Primary+Plant+Odorants+in+the+Antennal+Lobe+of+the+Moth+Heliothis+virescens+Using+Calcium+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Senses%22%5BJournal%5D)">Representation of Primary Plant Odorants in the Antennal Lobe of the Moth Heliothis virescens Using Calcium Imaging.</a> Chemical Senses. 29, 253-267 (2004).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

En uyarıcılardır nöron toplulukları dağıtılmış kombinatoryal tepkiler çağrıştırıyor. Bu nedenle, çok-nöron aktivitesi eşzamanlı izleme bilgisi beyin sinir devreleri ile temsil edilen ve nasıl işlendiğini uyarıcı özel anlamak için gereklidir. Burada, böcek koku yolu boyunca ilk üç işleme merkezlerinde koku-uyarılmış yanıtlar karakterize ekstrasellüler çoklu ünite kayıt teknikleri göstermiştir. Biz burada sunulan tekniklerin koku kodlama önceki çalışmalarda çok sayıda kullanılmış olan ve bu alanda 3,6,13-17 bir...

<table border="1"><tbody><tr><td> Isim </td><td> Şirket </td><td> Katalog Numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Elektrofizyoloji Ekipmanları </td></tr><tr><td> AC yükselteç </td><td> ÇİM </td><td> Model P55 </td><td> Tek sensillum kayıtları için </td></tr><tr><td> Ses monitörü (model 3300) </td><td> AM Sistemleri </td><td> 940000 </td><td></td></tr><tr><td> 16 kanal ön-amplifikatör ve amplifikatör Ismarlama </td><td> Cal. Tech. Biyoloji Elektronik Mağazalar </td><td></td><td> AL ve MB kayıtlar için </td></tr><tr><td> Veri toplama ünitesi </td><td> National Instruments </td><td> BNC-2090 </td><td></td></tr><tr><td> Fiber optik ışık </td><td> TEFE </td><td> SI-72-8 </td><td> &lt;/ Td&gt; </tr><tr><td> Işık kaynağı 115 V </td><td> TEFE </td><td> NOVA </td><td></td></tr><tr><td> Manuel mikromanipülatör </td><td> TEFE </td><td> M3301R </td><td> keçiboynuzu beyin kayıtları için </td></tr><tr><td> Boom stand Stereomicroscope1 </td><td> Leica </td><td> M80 </td><td> keçiboynuzu beyin kayıtları için </td></tr><tr><td> Stereomicroscope2 </td><td> Leica </td><td> M205C </td><td> Tek sensillum kayıtları için </td></tr><tr><td> Titreşim izolasyonu tablosu </td><td> TMC </td><td> 63-500 serisi </td><td></td></tr><tr><td> Motorlu mikromanipülatör </td><td> Sutter Aletleri </td><td> MP285 / T </td><td></td></tr><tr><td> Osiloskop </td><td> Tektronix </td><td> TD2014B </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Elektrotlar / İnşaat Araçları &lt;/ Td&gt; </tr><tr><td> 16 kanallı elektrot </td><td> NeuroNexus </td><td> A2X2-tet-3mm-150-121 </td><td> antennal lob kayıtları için </td></tr><tr><td> Filament, ID 0.69 mm Borosilikat kılcal tüpler </td><td> Sutter Aletleri </td><td> BF120-69-10 </td><td> Cam elektrotlar yapmak için </td></tr><tr><td> Mikropipet çektirme </td><td> Sutter Aletleri </td><td> P-1000 </td><td></td></tr><tr><td> Fonksiyon jeneratörü </td><td> Multimetre Atölyesi </td><td> SG1639A </td><td> altın kaplama elektrotlar için </td></tr><tr><td> Altın kaplama çözeltisi (siyanür olmayan) </td><td> SIFCO Sektörler </td><td> NC SPS 5355 </td><td></td></tr><tr><td> Empedans test </td><td> BAK Electronics Inc </td><td> IMP-2 </td><td> altın kaplama elektrotlar için </td></tr><tr><td> Döner Anahtar </td><td> ELECTROSWITCH </td><td> C7D0123N </td><td> altın pl içinating elektrotlar </td></tr><tr><td> Darbe izolatörü </td><td> TEFE </td><td> A365 </td><td> altın kaplama elektrotlar için </td></tr><tr><td> Q serisi elektrot tutucu </td><td> Warner Instruments </td><td> 64-1091 </td><td></td></tr><tr><td> Gümüş tel 0.010 &quot;çap </td><td> AM Sistemleri </td><td> 782500 </td><td> Toprak elektrodu </td></tr><tr><td> 8 Pinli DIP IC yuva </td><td> Digikey </td><td> ED90032-ND </td><td></td></tr><tr><td> Filament, ID 0.58 mm Borosilikat kılcal tüpler </td><td> Warner Instruments </td><td> 64-0787 </td><td> bükülmüş tel tetrode inşaat </td></tr><tr><td> Isı tabancası </td><td> Weller </td><td> 6966C </td><td></td></tr><tr><td> Rediohm-800 tel </td><td> Kanthal Hassas Teknolojileri </td><td> PF002005 </td><td></td></tr><tr><td> Titer plaka çalkalayıcı </td><td> ThermoBilimsel </td><td> 4625Q </td><td> büküm teller </td></tr><tr><td> Karbür makas, 4.5 &quot; </td><td> Biyomedikal Araştırma Instr </td><td> 25-1000 </td><td> bükülmüş tetrode telleri kesmek için </td></tr><tr><td> Güzel nokta cımbız </td><td> HECO </td><td> 91-F5&#39;i-SA </td><td> dışında alay tetrode teller için </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Koku Gönderme </td></tr><tr><td> 6 ml şırınga </td><td> Kendall </td><td> 1180600777 </td><td> özel tasarlanmış aktif karbon filtre </td></tr><tr><td> Kahverengi koku şişeleri </td><td> Balıkçı </td><td> 08-912-165 </td><td></td></tr><tr><td> Kömür </td><td> <a href="http://BuyActivatedCharcoal.com" target="_blank">BuyActivatedCharcoal.com</a> </td><td> GAC-48C </td><td></td></tr><tr><td> Kurutucu </td><td> Drierite </td><td> 23005 </td><td></td></tr><tr><td> Drierite gaz kavanoz kurutma </td><td> Fischer Scientific </td><td> 09-204 </td><td></td></tr><tr><td> Şirink tüplerde Isı </td><td> 3M </td><td> EPS-200 </td><td> koku filtre hazırlığı </td></tr><tr><td> Derialtı iğne alüminyum merkezi, ölçer 19 </td><td> Kendall </td><td> 8881-200136 </td><td> koku şişeleri için giriş ve çıkış hatları sağlamak için </td></tr><tr><td> Madeni yağ </td><td> Mallinckrodt Kimyasallar </td><td> 6357-04 </td><td> koku seyreltme için </td></tr><tr><td> Nalgene plastik boru, 890 FEP </td><td> Thermo Scientific </td><td> 8050-0310 </td><td> taşıyıcı gaz teslimatı için </td></tr><tr><td> Pnömatik picopump </td><td> TEFE </td><td> sys-pv820 </td><td> koku teslim </td></tr><tr><td> Polietilen boru Kimlik 0.86 mm </td><td> Intramedic </td><td> 427421 </td><td> koku şişesi çıkışı connecti içinons ve tuzlu bolluğu tüp </td></tr><tr><td> Tıpalar </td><td> Lab Pure </td><td> 97041 </td><td> koku şişeleri sızdırmazlık için </td></tr><tr><td> Zaman bandı </td><td> PDC </td><td> T-534-RP </td><td></td></tr><tr><td> Boru luer </td><td> Cole-Parmer </td><td> 30600-66 </td><td></td></tr><tr><td> Vakum tüp </td><td> McMaster-Carr </td><td> 5488K66 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Hazırlık / Diseksiyon </td></tr><tr><td> 100 x 15 mm petri </td><td> VWR International </td><td> 89000-304 </td><td></td></tr><tr><td> 18 AWG bakır telli </td><td> Lapp Kabel </td><td> 4510013 </td><td> tel yalıtım kauçuk conta olarak kullanılır </td></tr><tr><td> 22 AWG çok telli Kargaburun tel </td><td> Alphawire </td><td> 1551 </td><td> beyinplatform </td></tr><tr><td> Batik balmumu </td><td> Jakarlı </td><td> 7946000 </td><td></td></tr><tr><td> Diş periferi Wax </td><td> Henry-Schein Dental </td><td> 6652151 </td><td></td></tr><tr><td> Electrowaxer </td><td> Almore Uluslararası </td><td> 66000 </td><td></td></tr><tr><td> Epoksi, 5 dk </td><td> Permatex </td><td> 84101 </td><td></td></tr><tr><td> Derialtı iğne alüminyum merkezi </td><td> Kendall </td><td> 8881-200136 </td><td></td></tr><tr><td> Streptomyces griseus gelen Proteaz </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P5147 </td><td> keçiboynuzu beyin desheathing için </td></tr><tr><td> Sütür iplik steril olmayan </td><td> Balıkçı </td><td> NC9087024 </td><td> gut çıkarıldıktan sonra karın montajı için </td></tr><tr><td> Vetbond </td><td> 3M </td><td> 1469SB </td><td> ben sızdırmazlık içinputation siteleri </td></tr><tr><td> Dumont # 1 forsepsi (kaba) </td><td> TEFE </td><td> 500335 </td><td></td></tr><tr><td> Dumont # 5 titanyum forseps (ince) </td><td> TEFE </td><td> 14096 </td><td></td></tr><tr><td> Dumont # 5SF forseps (süper ince) </td><td> TEFE </td><td> 500085 </td><td> keçiboynuzu beyin desheathing </td></tr><tr><td> 10 cm makas diseksiyon </td><td> TEFE </td><td> 14393 </td><td> bacaklarını ve kanatlarını kaldırmak için </td></tr><tr><td> Vannas makas (ince) </td><td> TEFE </td><td> 500086 </td><td> foregut kesme, manikür kaldırmak için </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Salin Profusion </td></tr><tr><td> Uzatma hızı akış regülatörü ile ayarlanır </td><td> Moore Tıp </td><td> 69136 </td><td> Tuzlu su akış düzenleme için </td></tr><tr><td> IV idaresi ile ayarlanırY enjeksiyon yerinde </td><td> Moore Tıp </td><td> 73190 </td><td> Tuzlu su akış düzenleme için </td></tr></tbody></table>

locust sinir aktivitesi karakterize multi-ünite kayıt yöntemleri (<em&gt; schistocerca americana</em&gt;) olfaktör devreler

Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust (Schistocerca Americana) Olfactory Circuits

Olfaktör ipuçları Algılama ve yorumlama birçok organizma hayatta kalmak için çok önemlidir. Dikkate değer, filumlar genelinde türlerin kimyasal algılama için biyolojik yaklaşım evrimsel zaman 1 fazla optimize edildiğini çarpıcı benzer koku sistemleri düşündüren oylandı. Böcek koku sisteminde, koku aksiyon potansiyellerinin trenler içine kimyasal uyaranlara dönüştürmek anteni koku reseptör nöronları (ORN) tarafından transduced edilir. ORNs Duyusal input antennal lob (; omurgalı koku ampul benzer bir yapı AL) ulaştırılıyor. 2,3; al, kokular için sinirsel temsil asıl (nöronlar da projeksiyon nöronlar olarak anılacaktır PNS) oluşan bir grup dağıtılmış zamanmekansal ateşleme kalıpların şeklini alır. AL çıkışı sonradan mansap mantar vücut (MB), olfaktör bellek ve 4,5 öğrenme ile ilişkili bir yapı içinde Kenyon hücreleri (KCS) tarafından işlenir. OnuE, bu koku devrelerde koku-uyarılmış nöral yanıtlarını izlemek üzere elektrofizyolojik kayıt teknikleri sunuyoruz. İlk olarak, ORNs 6,7 popülasyonlarının seviyesinde koku-uyarılmış yanıtları incelemek için, tek bir sensillum kayıt yöntemi sunulmaktadır. Biz ekstraselüler ORN yanıtları izlemek için elektrotları olarak salin dolu bilenmiş cam pipetler kullanımını tartışmak. Sonra, ekstraselüler ticari bir 16 kanallı elektrot 3 kullanarak PN tepkileri izlemek için bir yöntem mevcut. Ismarlama bir 8-kanal bükülmüş tel tetrode kullanarak benzer bir yaklaşım Kenyon hücre kayıtları 8 için gösterilmiştir. Biz deney düzeneği ve bu tekniklerin her biri için bugünkü temsilcisi kayıt izlerinin ayrıntıları.

Iki farklı alkolün bir tek ORN kokusu-uyarılmış yanıtları Şekil 3B &#39;de gösterilmiştir. Kayıt konumuna bağlı olarak (sensilla tipi, elektrot yerleştirme) çoklu ünite kayıtları elde edilebilir. AL bir kayıt gelen bir ham hücre dışı dalga Şekil 6A&#39;da gösterilmiştir. Aksiyon potansiyelleri veya farklı PNS kaynaklanan değişen genliklerinin sivri Bu gerilim iz görülebilir. Keçiboynuzu antennal lob eksitatör projeksiyon nöronları ve inhibitör yerel nöron ol...

Biz omurgasız koku yolunun ilk üç aşamada koku-uyarılmış yanıtlar karakterize etmek ekstraselüler çoklu ünite kayıt tekniği varyasyonları göstermektedir. Bu teknikler kolayca başka sinir sistemlerinin topluluk etkinliği incelemek için adapte edilebilir.

Locust Sinir Aktivitesi Karakterize Multi-ünite Kayıt Yöntemleri (<em&gt; Schistocerca Americana</em&gt;) Olfaktör Devreler

Detection and interpretation of olfactory cues are critical for the survival  of many organisms. Remarkably, species across phyla have strikingly similar ...

Bu prosedürün genel amacı, böcek koku alma yolunun ilk üç sinyal işleme merkezinden koku ile iptal edilen çok birimli nöral aktiviteyi kaydetmektir. Bu, önce bir çekirgeyi özel olarak tasarlanmış bir odada tutarak ve antenlerinden birini elektrofizyolojik kayıtlar için stabilize ederek gerçekleştirilir. İkinci adım, bir cam mikro elektrot imal etmek ve koku uyandıran tepkileri izlemek için bir güneşin tabanına yerleştirmektir.Çekirge beyninden nöral aktiviteyi kaydetmenin yanında. Koku alma duyu nöronlarından gelen girdiyi işleyen nöral dokuyu ortaya çıkarmak için çok aşamalı bir diseksiyon prosedürü izlenir. Son adım, çekirge ve anten lobundan ve mantar gövdesinden topluluk nöral aktivitesini kaydetmek için çoklu elektrot dizilerinin uygun şekilde yerleştirilmesini içerir.Sonuç olarak, burada gösterilen hücre dışı kayıt yöntemleri, böcek koku alma yolu boyunca ilk üç işleme merkezinde koku uyarılmış tepkileri karakterize etmek için kullanılır. Bu yöntem, nispeten basit bir omurgasız koku alma sisteminde koku uyandıran nöro tepkiyi karakterize etmek için kullanılmış olsa da, diğer sinir sistemlerindeki topluluk aktivitesini incelemek için de uyarlanabilir. Bu yöntemin görsel göster

multi-unit-recording-methods-to-characterize-neural-activity-locust

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Multielectrode array (MEA) kayıtları nöronların büyük nüfus elektriksel aktivite eğitimi için bir yöntem sağlar. Burada, aynı anda doku uyarıcı fare vomeronasal epitel kayıt MEA hazırlanması ayrıntılar mevcut.

Vomeronasal Epitel Multielectrode Dizi Kayıtlar

Böcek koku alma sistemleri electroantennograms (EAG) ve anteni bulunan tüm odorant reseptör nöronları (ORNs) ve bireysel ev sahipliği bu yanıtları toplanır tek sensillum kayıtları (SSR), formları kayıt odorant indüklenen yanıtları için eşsiz fırsatlar sunmaya sırasıyla sensilla.

Güve Koku Sistemi Elektrofizyolojik Ölçümler

Olfaktör ipuçları böcekler birçok farklı davranışlar arabuluculuk, bileşikler ve uçucu yüzlerce onlarca oluşan genellikle kompleks karışımlarıdır. Böcek anten lob çok kanallı bir kayıt ile gaz kromatografisi kullanarak, biyolojik olarak aktif bileşiklerin belirlenmesi için bir yöntem açıklanmaktadır.

Böcek antennal Lob Gaz Kromatografisi-Multi-ünite Recordings (GCMR) kullanarak Olfaktör Uçuculuk tanımlanması

Bu makalede, hamamböceği ventral sinir kablosu diseksiyonu ve Cercal sinir ve bağlaçlar hücre dışı kayıtları açıklar. Uyarılmış tepkiler Cercal sinir veya cerci doğrudan mekanik uyarma elektriksel stimülasyon tarafından oluşturulur.

Sinir Devre Kaydı bir Bozulmamış Hamamböceği Sinir Sistemi

Tek ünite elektrofizyolojik kayıtlar kullanılmak üzere microwires organize dizileri implante teknik sorunlar bir dizi sunuyor. Bu teknik ve gerekli ekipman yerine getirilmesi için yöntemler tarif edilmiştir. Ayrıca, yüksek uzaysal seçicilik ile farklı nöral altbölgeler kayıt örgütlü mikrotel dizilerin faydalı kullanımı tartışılmıştır.

Hayvanlar davranmak, Awake Tek-birim Recordings Microwires Organize Dizileri implantasyon için Usulü

İki farklı beyin neuropiles veya iki farklı anatomik yolları eşzamanlı dışı uzun süreli kayıtları arıları kuruldu. Bu kayıtlar farklı beyin bölgelerinde tek nörona yanı sıra davranıyor hayvanda topluluk düzeyinde karşısında nöronal işleme zamansal açıdan soruşturma izin.

Davranan Bal arısı iki nöronal İşleme Dönemlerinde Eşzamanlı Uzun vadeli Kayıtlar

Koku alma duyusal nöronlarının fizyolojik özelliklerini analiz etmek hala teknik sınırlamalarla karşı karşıyadır. Burada, gen hedefli farelerde koku alma epitelinin sağlam bir preparasyonu içinde delikli yama klempi yoluyla kaydediyoruz. Bu teknik, membran özelliklerinin karakterizasyonuna ve tanımlanmış koku alma reseptörlerini eksprese eden nöronların spesifik ligandlarına verilen yanıtlara izin verir.

Bozulmamış neuroepithelium Fare Koku Duyu Nöronlar Delikli Patch-kelepçe Kayıt: Bir Belirlenen Odorant Reseptör ifade Nöronlar Fonksiyonel Analiz

Uyanık farelerde hücre dışı nöral aktiviteyi aynı anda kaydetmek ve kayıt bölgelerinin yakınında birden fazla nöroaktif madde salmak için elektrotların yapımı için yöntemler sunuyoruz. Bu teknik, ilgilenilen nörona varsayılan yerel sinaptik girdilerin ayrıntılı analizine izin verir.

Uyanık Farelerde Nöroaktif Maddelerin Microiontophoretic Uygulaması ile birlikte Nöronal Faaliyet dışı Kaydı

Tatlandırıcı kodlamayı incelemek için üç yeni yöntem sunuyoruz . Basit bir hayvan olan Manduca güvesi Mandka'yı kullanarak, diseksiyon protokolünü, çoklu tatlılık reseptör nöronlarının aktivitesini kaydetmek için hücre dışı tetrodeslerin kullanımını ve tat vericilerin kesin zamanlı nabızlarını iletmek ve izlemek için bir sistemi tarif ediyoruz.

Tatlandırıcı Kodlamanın Yeni Yöntemleri

Bu kağıt sensilla basiconica tek sensillum kayıtları için detaylı ve son derece etkili iletişim kuralı böcek ağız dokunacı üzerinde açıklar.

Tek Sensillum kayıtları Locust Palp Sensilla Basiconica için

Koku sinirinden ekstrasellüler çok üniteli kayıt, deniz balıklarında koku alma hassasiyetini değerlendirmek için hassas, sağlam ve tekrarlanabilir bir yöntemdir. Birincil duyusal girişi kaydeder ve dış tuzluluktan bağımsızdır.

Teleostların Koku Sinirinden Ekstrasellüler Çok Birimli Kayıt

Öğrenin, çekirge Schistocerca americana'nın anten lobu ve mantar cismi gibi ilk üç işlem merkezindeki koku uyarılı çoklu ünite sinir aktivitesini karakterize etmek için dış hücre kayıt tekniklerini. Bu yöntem, sinirbilim araştırmalarında topluluk aktivitesini incelemek için uyarlanabilir.

Locust Sinir Aktivitesi Karakterize Multi-ünite Kayıt Yöntemleri (

Daha fazla video keşfet