Çözelti hazırlamak, dünya genelinde yürütülen neredeyse tüm biyolojik ve kimyasal deneylerde yer alan temel bir prosedürdür.
Bir çözelti, bir sıvı içerisinde çözünmüş bir maddeden oluşur. Çözünen maddeye çözünen, ana sıvıya ise çözücü denir. Ortaya çıkan homojen karışıma ise çözelti adı verilir.
Çözeltiler, birim çözelti başına ne kadar çözünen madde bulunduğunun bir ölçüsü olan çözünen konsantrasyonları ile tanımlanabilir.
Çözelti hazırlamak temel bir laboratuvar becerisi olabilir, ancak yetersiz teknik, başarılı veya başarısız bir deney arasındaki farkı belirleyebilir.
Çözelti hazırlarken ilk dikkat edilmesi gereken husus güvenliktir. Çalıştığınız kimyasalların türüne bağlı olarak eldiven ve laboratuvar önlüğü giymek gibi uygun önlemleri almak önemlidir.
Bir çözelti hazırlamak için birçok farklı yöntem vardır. Bu video, su bazlı veya sulu bir çözelti hazırlamanın en yaygın yolunu gösterecektir.
Öncelikle, belirli bir çözelti hacminde istenen konsantrasyonu elde etmek için ihtiyacınız olan çözünen maddenin mol sayısını belirleyin. Ardından bu değeri, kimyasalın molekül ağırlığını veya mol başına gram miktarını kullanarak grama çevirin.
Kimyasallar, bir dijital terazi ve tartım kabı kullanılarak tartılabilir.
Ardından, çözeltinin nihai hacminin yaklaşık dörtte üçü kadar saflaştırılmış su ölçmek için bir dereceli silindir kullanılabilir.
Sulu çözeltilerin musluk suyu yerine saflaştırılmış su ile hazırlanması zorunludur. Bunun yapılmaması, sadece çözeltinin kalitesini değil, potansiyel olarak ilerideki birçok deneyi de tehlikeye atabilir.
Bu noktada, saflaştırılmış su, manyetik karıştırıcı üzerindeki bir manyetik baloncuk içeren behere aktarılmalıdır.
Ardından, ölçülen çözünen maddeler karıştırılan saflaştırılmış suya eklenebilir. Karışımın karıştırılması, çözünen maddenin çözünmesine yardımcı olur. Bu amaçla ısı uygulamak da kullanılabilir.
Tüm çözünen maddeler çözücü içinde çözündüğünde, çözeltinin pH değeri bir pH metre kullanılarak ayarlanabilir. pH değerini yükseltmek için karıştırılan çözeltiye seyreltik sodyum hidroksit ekleyin. pH değerini düşürmek için seyreltik hidroklorik asit ekleyin. pH hızla değişebileceği için asit veya bazı yavaşça eklediğinizden emin olun.
Bir çözeltinin pH'ını ölçmek için pH kağıdı da kullanılabilir, ancak kalibre edilmiş bir pH metre kullanımı daha doğru bir ölçüm sağlar.
Çözelti, nihai hacmine tamamlanabilmesi için bir huni yardımıyla balon jojeye dökülür. Bu hacme ulaşmak için yeterli miktarın eklenmesi, çözeltinin Q.S.'lenmesi (quantum satis) olarak bilinir.
Menisküsün balon jojen üzerindeki işaretle hizalandığından emin olun. Sulu bir çözeltide menisküs konkavdır ve eğrinin en düşük noktasından okunmalıdır.
Biyolojik araştırmalar, özellikle de canlı hücreleri içeren araştırmalar gerçekleştirirken, çözeltilerin kullanım öncesinde sterilize edilmesi gerekebilir. Bu işlem, çözeltiyi yüksek basınç altında yüksek sıcaklıkta buhara maruz bırakan otoklavlama ile yapılabilir.
Alternatif olarak, çözelti, bakteriyel hücreleri dışarıda bırakacak olan 0,22 mikronluk bir filtreden geçirilerek sterilize edilebilir.
Çözeltilerin nasıl hazırlanacağına dair temel bir anlayış kazandığınıza göre, şimdi laboratuvarda yaygın olarak kullanılan bazı çözeltilere ve bunların uygulamalarına göz atma zamanı.
Biyolojik araştırmalarda, birçok çözelti fizyolojik sıvıları taklit edecek şekilde tasarlanmıştır. Bu çözeltiler tamponlanmıştır, yani belirli bir aralıkta pH değişimine karşı direnç gösterirler; hücre içi ve hücre dışı sıvıları simüle etmek için pH genellikle 7.4 civarında tutulur.
Fosfat tamponlu salin veya PBS, biyolojik araştırmalarda fizyolojik pH ve ozmolariteyi taklit eden yaygın olarak kullanılan bir tampondur. Ozmolarite, bir çözeltideki toplam çözünen mol sayısını ifade eder. Örneğin, 1 mol NaCl içeren bir çözelti, sodyum ve klorür iyonları çözeltide ayrıştığı için 2 osmol çözünen içerir. PBS, hücrelerinkine çok yakın iyon konsantrasyonlarına sahiptir ve bu da onu izotonik bir çözelti yapar; yani hücre dışındaki çözünen miktarı, hücre içinde bulunan miktara eşittir. PBS, 7.2 ile 7.6 aralığında sabit bir pH sağlayan fosfat gruplu tuzlar da dahil olmak üzere, su içindeki birkaç farklı tuzdan oluşur.
PBS'nin laboratuvardaki yaygın kullanım alanları arasında hücrelerin yıkanması ve protein gibi biyomoleküllerin seyreltilmesi yer alır.
Yapay beyin omurilik sıvısı veya ACSF, beyin omurilik sıvısının elektrolit konsantrasyonlarını taklit eder. Bu çözelti taze olarak hazırlanmalı; pH, ozmolarite ve iyonik kompozisyon in vivo koşullarla eşleşmesi için dikkatle izlenmelidir.
ACSF, elektrofizyolojik çalışmalarda genellikle beyin dilimlerini hazırlamak ve deneyler sırasında bunları perfüze etmek için kullanılır. Ayrıca patch clamp ölçümleri sırasında hücre dışı çözelti olarak da hizmet edebilir.
Ringer çözeltisi, biyolojik araştırmalarda kullanılan, dengeli pH'a sahip izotonik bir salin çözeltisidir. Genellikle organlar ve dokularla yapılan in vitro deneylerde kullanılır.
JoVE'nin çözelti hazırlama giriş videosunu izlediniz. Bu videoda, çözelti hazırlama sürecini baştan sona gözden geçirdik... gerekli çözünen miktarının nasıl belirleneceği (A), bir çözeltinin nasıl uygun şekilde hacme tamamlanacağı (B) ve sterilizasyon yöntemleri (C) dahil olmak üzere. Ayrıca, yaygın olarak kullanılan bazı çözeltileri ve bunların biyolojik araştırmalardaki uygulamalarını da inceledik (D).
İzlediğiniz için teşekkürler; çözelti hazırlarken her zaman uygun teknikleri kullanmayı unutmayın.
Çözeltileri başarıyla hazırlayabilme yeteneği, hemen hemen tüm biyolojik ve kimyasal deneylerde uygulanan temel bir laboratuvar becerisidir. Çözelti,…
Bu videodaki bölümler
0:00
Overview
1:00
Making a Solution
4:17
Applications
6:47
Summary
Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.