Name: Parkinson Hastalığı Fare Modeller Duyusal Motor Fonksiyon Değerlendirilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 32 s
Description: Öğrenin Parkinson hastalığı fare modellerinde duyusal motor fonksiyonu değerlendirmek için kiriş geçiş, silindir aktivitesi ve yapışkan çıkarma testlerini kullanın. Bu hassas davranışsal testler, preklinik ilaç çalışmalarında maliyet etkin ve güvenilir sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma NIH / NINDS NS07722-01 ve Parkinson Hastalığı ve Hareket Bozuklukları için Gardner Aile Merkezi tarafından finanse edilmektedir.

Optimal farelerin aktif (karanlık) döngüsü sırasında test edilmelidir. Laboratuvarımızda fareler bize uygun kendi aktif döneminde (ve bizim) sırasında fareler test etmek sağlayan bir ters aydınlık / karanlık döngüsü tutulur. Test karanlık döngüsü içine en az bir saat kadar başlatılmadı. Bununla birlikte, bir ters ışık döngüsü ile ayrı bir fare oda korumak için bir araştırmacı için her zaman mümkün değildir. Bu durumda, her üç test ışık döngüsü sırasında yapılabilir ama bu süre içinde test edildiğinde kiriş üzerinde hareket zamanı, silindir, ve iletişim ve kaldırma zamanlarda adımlar ve şahlanma sayısı daha uzun olabilir unutmayın. Aşağıda açıklanan Her üç test bir deneyci tarafından yapılabilir, ancak taşıma ve fareler ile çalışan deneyimli olmayan ya da farelerde hiçbir deneyimi ölçüm davranışı çok az olanlar için daha sonra ek bir deneyci gerekli olabilir. Bu durumda ikinci deneyi ile yardımcı olabilirdiğer deneyci deneme kayıtları veya yapıştırıcı kaldırma testinde ikinci deneyci Zamanlayıcı çalıştırabilirsiniz süre ise kafeste burun ve yerler fare üzerindeki diğer yerlerde etiket. kiriş üzerinde fareler koyarak zorlu ışın testi 1. Zorlu Işın Geçişi Prosedürü <ol><li> Bir masa üzerine veya bir fare kafes değişen istasyonunda 3 temiz fare kafesleri ters. Eşit böylece ışın (1 metre) uzunluğunu destek olabilir kafesleri sıraya. </li><li> Ters fare kafesleri üstüne dar bölümü ve yere en geniş gelen ışının dört bölümden birleştirin. </li><li> , Kirişin en dar ucuna sağ homecage doğru yöneltir, böylece yan ve kiriş sonunda test etmek için planı farelerin homecage yerleştirin. </li><li> Onun kuyruk tabanı tarafından ilk fare almak ve avuç ile arka ayaklarında destek. Kirişin geniş sonunda fare yerleştirin ve kuyruk gidelim ve han çıkarınd. </li><li> Fare hissetmenize ve daha iyi yönelik cihaz-eğer fare hafifçe istenilen yöne doğru yönlendirme etrafında döner. Olmak için hareket edelim </li><li> Yan aynı konumda tutarak homecage (bunun içinde cagemates olsa bile) yukarı kaldırın ve test fare yakın getirmek. Test fare deneyin ve homecage fare girmezse o kadar geri hareket girmek için başlar ama bir adım ileri yapar. Işını aşağı bu tüm yol yapmaya devam. Sonunda, fare homecage girmesine izin. Kafes her fare için aynı prosedürü uygulayın. Bu ilk &quot;destekli&quot; çalışmadır. </li><li> Işın iyice hayvan bakımı veya veteriner personeli tarafından sağlanan bir dezenfektan ile kafes arasındaki temizlenmelidir. Bu bir sonraki fare dikkatini dağıtır çünkü bir kafes içinde bir sonraki fare çalıştırmadan önce herhangi bir idrar ya da ışın kapalı fekal pelet temizlemek için önemlidir. </li><li> Bir kez kafes içinde tüm fareler sonra bir destekli deneme geçtilertekrar ilk fare almak ve kiriş geniş sonunda yerleştirin. Istenilen yönde hafifçe yönlendirmek fare elinizle, gerekli ve hafifçe kendi homecage içine kiriş uzunluğu boyunca taşımak için teşvik etmek için arka dokunursanız. Fare ulaşmak yada ışın elinizle fare düzeltmek veya onu almak ve yürüdü aynı bölüm üzerine yerleştirin yürümeye durur. Kirişin sonuna kadar fare rehberlik elinizi yakın var. Denemek ve kiriş sırasında durdurma ve keşfetmek fare en aza indirmek istiyorum. Daha bu daha az fare test sırasında bunu yapmak eğilimindedir eğitim sırasında yapılır. </li><li> Fare homecage içine ön ayakları biri verdiği zaman deneme biter. Sonraki fare daha sonra 2. deneme alabilirsiniz. Fareler her fare ~ 30 saniye veya daha fazla bir intertrial aralığı vardır ki fareler arasında değişen, ilk eğitim gününde 5 çalışmaların toplam alırsınız. Tipik olarak, son birkaç deneme fareler tarafından uzunluğu hareket edecekkiriş, kendi, düzeltmek için gerek kalmadan. </li><li> 24 saat sonra eğitim gün 2 başlayabilirsiniz. Günde 2 farenin kurulum gün 1 &#39;de anlatılanla aynı kiriş üzerinde 5 daha fazla deneme alır. Fareler herhangi bir yardıma ihtiyacınız olmamalı ama durdurma veya keşfetmek önlemek için arka tarafındaki düzeltilmesi veya dokundu gerekebilir. </li><li> 24 saat sonra gerçek test gün başlayabilirsiniz. Test günü için, ışının önceki 2 gün eğitim için benzer bir şekilde ayarlanır. Ancak, şimdi her ışın genişliği karşılık gelen bir örgü ızgara her kiriş bölümün üstüne yerleştirilir. Bir video kamera tüm ışın çapraz geçiş denemeleri kaydetmek için kullanılır ve bir veya daha fazla deneyi ile yapılabilir. </li><li> Temel deney bilgiler (tarih, mouse #, deneme #, vb) ile bir kart etiketleyin. Bu test ediliyor hangi fare ve üzerinde ne deneme açıktır ki 2-3 saniye kamera ve kayıt önünde bu kartı yerleştirin. </li><li> Fare kirişin en geniş bölümünde yer alan kılavuz yüzeyin üstüne yerleştirilir ve kaydedilirs kiriş boyunca hareket eder. Kayıt yeterince yakın fare vücudun tüm uzunluğu kamera görülebilir olduğunu olmalıdır. Çok uzak ise, o fişleri görmek zordur ve çok daha sonra yakın ise bacak hareketleri atlanabilir. Kamera kılavuz izleyici ortasında olacak şekilde yerleştirilmiş olmalıdır. </li><li> Test gününde tüm fareler ızgara yüzeyli kiriş üzerinde 5 denemeler alırsınız. </li></ol> 2. Işın Video Analizi <ol><li> Videolar kamera doğrudan görüntülenebilir veya daha büyük bir ekran görünümü için bir televizyon ya da bilgisayar bağlanabilir. Video teyp deney içinde genotip ve tedavi durumuna kör bir deneyci tarafından atılır gerekir. </li><li> Video yavaş oynanır her deneme için Hatalar puanlanır. Fare bakan ve ileriye doğru hareket olduğunda Fiş veya hata sayılır. Ekstremite ızgara yüzeyinin altında 0.5 cm (yarım) ötesinde fişleri zaman ızgara dışında aracılığıyla veya bir kayma bir hata olarak kabul edilir. Herhangi fişleribir fare durur ya da tarafına başını yönlendirir sonra yapılan hataları kabul edilmez. Fareyi ileriye doğru hareket değildir ve bir uzuv veya uzuvların tekrar tekrar ızgara arasından kayıp gidiyor eğer bir hata olarak kabul edilemez. Arka ayaklarında baz ızgara ve yan asılı ayak üstünde olabilir kirişin dar bölümü, bu bir hata olarak kabul edilmez. </li><li> Adımlar yavaş sayılır. Kamera bakan bacak adım sayısını izlemek için kullanılır. Fareyi ileri ilk adım yapar ve fare homecage içine ön ayakları yerleştirir biter sayma başlar. </li><li> Hareket zaman bir kronometre kullanarak atılırsa ve gerçek zamanlı olarak yapılır. Fareyi ileriye taşımak için başlar ve ilk forepaw homecage yerleştirildiğinde sona erdiğinde zamanlayıcı başlatılır. </li></ol> 3. Silindir İşlemi Spontan Aktivitesi <ol><li> Bir masa üzerine veya bir fare kafes değişen istasyonunda 3 temiz fare kafesleri ters. E yanında iki kafesleri düzenlemekach diğer kafesleri ön deneyci karşı karşıya ayrı şekilde ~ 18 cm. Kalan kafes diğer iki kafeste arkasına yerleştirilir ve ayna desteklemek için hizmet edecektir. </li><li> 2 kafesleri üstünde cam parçası yerleştirmek ve cam ilk 2 kafes dış kenarı ile desteklenmektedir şekilde konumlandırın. </li><li> Arka 3. kafes dayanarak, camın üst ve cam altında bir açıyla ayna üzerinde silindir yerleştirin. Açısı 30 ° her yerde arasında olabilir - 45 ° ama daha da önemlisi aynadan görünümü silindirin tam çapı dahil etmek vardır. </li><li> Eğer silindirin alt tüm çapı görüntüleyebilirsiniz kadar ayna önünde video kamera kurmak ve ayna ve video kamera hem ayarlayın. </li><li> 3 dakika zamanlayıcı ayarlayın ve önemli bir deney ayrıntıları (tarih, mouse #, vb) ile bir kart etiket. Videorecord 2-3 sn için etiket. </li><li> Silindir ve basın kayıt ve zamanlayıcı fare yerleştirin. Recüç dakika boyunca fare ord. Bu yüksek sesler ve konuşma fare dikkatini dağıtmak ve potansiyel donma davranışlara neden olabilir olarak test alan sessiz olması önemlidir. </li><li> 3 dakika boyunca fare silindir iken yapar rears sayısını için bir el karşı kullanın. Bir arka fare sadece arka ayakların üzerinde duran, böylece yerden ön ayakları hem de dikey bir hareketi olarak tanımlanır. 3 dakika sonunda, fare kaldırmak ve homecage geri yerleştirin. </li><li> Hayvan bakımı ve veteriner personeli tarafından sağlanan bir dezenfektan ile silindir ve cam temizleyin. Temizlik çözüm silindir sonraki fare yerleştirmeden önce kurumasını bekleyin. </li></ol> 4. Spontan Faaliyet Analizi <ol><li> Videolar kamera doğrudan görüntülenebilir veya daha büyük bir ekran görünümü için bir televizyon ya da bilgisayar bağlanabilir. Video kasetleri deney içinde genotip ve tedavi durumuna kör bir deneyci tarafından atılır gerekir. </li><li> Video yavaş çalınır gibi ön ayakları adım sayılır. Bir ön ayakları adım bir hayvan ardışık hareketi silindirin zemin üzerinde iki sıralı ön ayakları hareket ettiğinde sayılır. Bir ön ayakları hareket ve diğer ön ayakları arasındaki zaman 5 sn daha uzun ise bir ön ayakları hareket sayılmaz. Hindlimb adımları ayakları kademelerle aynı şekilde sayılır. </li><li> Tımar harcanan zaman bir kronometre kullanarak ve gerçek zamanlı video oynatırken ölçülür. Burun, burun kılı ve vücut üzerinde bakım nöbetleri ölçülür. </li></ol> 5. Yapıştırıcı Temizleme <ol><li> Test salonunda veya bir fare kafes değişen istasyonunda kendi homecage yerleştirin fare. </li><li> Kafesinden besleyici bin çıkarın ve kafes kapağı değiştirin. Fareler / fare 1 saat için besleyici olmadan test odası ve kafes alışmakta izin verin. </li><li> Test için test fare homecage tek bir yani cagemates yerleştirmek için temiz bir kafes kullanın.~ 3/4 yatak çıkarın ve cagemates ile temiz bir kafes yerleştirin. </li><li> Homecage ense içinde sırayla test fare dizginlemek için ve fare burun üzerine küçük forseps yerde bir yapışkan etiket bir çift kullanarak. Hafifçe forcep ile burun üzerindeki etiketi basın ve fareyi bırakın. Kafes kapağı yerleştirin ve bir kronometre başlar. Fare, forepaws zaman kayıt ile etiket kaldırmak için bir girişim yaptığında. Fareyi temas eder ama çıkarın ve o zaman kayıt da (temas ve kaldırma süresi) gelene kadar zamanlayıcı devam sonra etiket kaldırmaz eğer. </li><li> Fareyi 60 saniye içinde etiket başvurun veya kaldırmaz o zaman deneme sonlandırılır ve etiket deneyci elle kaldırılır. </li><li> Temiz bir kafes içinde test fare yerleştirin ve bir sonraki fare çıkarın ve homecage yerleştirin ve test başlar. Tüm fareler 3 deneme alırsınız. Bu her üç çalışma yapmak yerine fareler arasında geçiş için önemlidirbir anda bir fare. Etiket düşer ya da burun üzerinde güvenli değildir Denemeler sayılmaz. </li></ol>

<ol><li>Schallert, T., Upchurch, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tactile+extinction%3A+distinguishing+between+sensorimotor+and+motor+asymmetries+in+rats+with+unilateral+nigrostriatal+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Biochemistry+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Tactile extinction: distinguishing between sensorimotor and motor asymmetries in rats with unilateral nigrostriatal damage.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 16 (3), 455-462 (1982).</li>
<li>Schallert, T., Upchurch, M., Wilcox, R. E., Vaughn, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Posture-independent+sensorimotor+analysis+of+inter-hemispheric+receptor+asymmetries+in+neostriatum%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Biochemistry+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Posture-independent sensorimotor analysis of inter-hemispheric receptor asymmetries in neostriatum.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 18 (5), 753-759 (1983).</li>
<li>Schallert, T., Norton, D., Jones, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+clinically+relevant+unilateral+rat+model+of+parkinsonian+akinesia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neural+Transplantation+and+Plasticity%22%5BJournal%5D)">A clinically relevant unilateral rat model of parkinsonian akinesia.</a> Journal of Neural Transplantation and Plasticity. 3 (4), 332-333 (1992).</li>
<li>Schallert, T., Tillerson, J. L. Intervention strategies for degeneration of DA neurons in parkinsonism: Optimizing behavioral assessment of outcome. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSchallert%2C+T+%22Central+Nervous+System+Diseases%22">Central Nervous System Diseases</a>. Emerich, D. F., Dean, R. L. III, Sandberg, P. R. , Humana Press. Totowa, New Jersey, USA. 131-151 (2000).</li>
<li>Whishaw, I. Q., O'Connor, W. T., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contributions+of+motor+cortex%2C+nigrostriatal+dopamine+and+caudate-putamen+to+skilled+forelimb+use+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">The contributions of motor cortex, nigrostriatal dopamine and caudate-putamen to skilled forelimb use in the rat.</a> Brain. 109 (5), 805-843 (1986).</li>
<li>Johnson, A. M., Doll, E. J., Grant, L. M., Ringel, L., Shier, J. N., Ciucci, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+training+of+ultrasonic+vocalizations+in+aged+and+Parkinsonian+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Targeted training of ultrasonic vocalizations in aged and Parkinsonian rats.</a> J. Vis. Exp. (54), e2835(2011).</li>
<li>Connor, B., Kozlowski, D. A., Schallert, T., Tillerson, J. L., Davidson, B. L., Bohn, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor+%28GDNF%29+in+the+striatum+and+substantia+nigra+of+the+aged+Parkinsonian+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Differential effects of glial cell line-derived neurotrophic factor (GDNF) in the striatum and substantia nigra of the aged Parkinsonian rat.</a> Gene Therapy. 6 (12), 1936-1951 (1999).</li>
<li>Kozlowski, D. A., Connor, B., Tillerson, J. L., Schallert, T., Bohn, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+a+GDNF+gene+into+the+substantia+nigra+after+a+progressive+6-OHDA+lesion+maintains+functional+nigrostriatal+connections%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Delivery of a GDNF gene into the substantia nigra after a progressive 6-OHDA lesion maintains functional nigrostriatal connections.</a> Experimental Neurology. 166 (1), 1-15 (2000).</li>
<li>Yang, M., Stull, N. D., Berk, M. A., Snyder, E. Y., Iacovitti, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+stem+cells+spontaneously+express+dopaminergic+traits+after+transplantation+into+the+intact+or+6-hydroxydopamine-lesioned+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Neural stem cells spontaneously express dopaminergic traits after transplantation into the intact or 6-hydroxydopamine-lesioned rat.</a> Experimental Neurology. 177 (1), 50-60 (2002).</li>
<li>Luo, J., Kaplitt, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subthalamic+GAD+gene+therapy+in+a+Parkinson%27s+disease+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Subthalamic GAD gene therapy in a Parkinson's disease rat model.</a> Science. 298 (5592), 425-429 (2002).</li>
<li>Yasuhara, T., Matsukawa, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+human+neural+stem+cells+exerts+neuroprotection+in+a+rat+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Transplantation of human neural stem cells exerts neuroprotection in a rat model of Parkinson's disease.</a> Journal of Neuroscience. 26 (48), 12497-12511 (2006).</li>
<li>Fleming, S. M., Mulligan, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pilot+trial+of+the+microtubule-interacting+peptide+%28NAP%29+in+mice+overexpressing+alpha-synuclein+shows+improvement+in+motor+function+and+reduction+of+alpha-synuclein+inclusions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A pilot trial of the microtubule-interacting peptide (NAP) in mice overexpressing alpha-synuclein shows improvement in motor function and reduction of alpha-synuclein inclusions.</a> Journal of Molecular and Cellular Neuroscience. 46 (3), 597-606 (2011).</li>
<li>Sedelis, M., Schwarting, R. K. W., Huston, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+phenotyping+of+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Behavioral phenotyping of the MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Behavioural Brain Research. 125 (1-2), 109-125 (2001).</li>
<li>Goldberg, M. S., Fleming, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parkin-deficient+mice+exhibit+nigrostriatal+deficits+but+not+loss+of+dopaminergic+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Parkin-deficient mice exhibit nigrostriatal deficits but not loss of dopaminergic neurons.</a> Journal of Biological Chemistry. 278 (44), 43628-43635 (1074).</li>
<li>Tillerson, J. L., Caudle, W. M., Reveron, M. E., Miller, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+behavioral+impairments+correlated+to+neurochemical+deficits+in+mice+treated+with+moderate+doses+of+1-methyl-4-phenyl-1%2C2%2C3%2C6-tetrahydropyridine%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Detection of behavioral impairments correlated to neurochemical deficits in mice treated with moderate doses of 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine.</a> Experimental Neurology. 178 (1), 80-90 (2002).</li>
<li>Fleming, S. M., Salcedo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+and+progressive+sensorimotor+abnormalities+in+mice+overexpressing+wild-type+human+alpha-synuclein%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Early and progressive sensorimotor abnormalities in mice overexpressing wild-type human alpha-synuclein.</a> Journal of Neuroscience. 24 (42), 9434-9440 (2004).</li>
<li>Lu, X. H., Fleming, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+artificial+chromosome+transgenic+mice+expressing+a+truncated+mutant+parkin+exhibit+age-dependent+hypokinetic+motor+deficits%2C+dopaminergic+neuron+degeneration%2C+and+accumulation+of+proteinase+K-resistant+alpha-synuclein%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Bacterial artificial chromosome transgenic mice expressing a truncated mutant parkin exhibit age-dependent hypokinetic motor deficits, dopaminergic neuron degeneration, and accumulation of proteinase K-resistant alpha-synuclein.</a> Journal of Neuroscience. 29 (7), 1962-1976 (2009).</li>
<li>Hwang, D. Y., Fleming, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3%2C4-Dihydroxyphenylalanine+reverses+the+motor+deficits+in+Pitx3-deficient+aphakia+mice%3A+Behavioral+characterization+of+a+novel+genetic+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">3,4-Dihydroxyphenylalanine reverses the motor deficits in Pitx3-deficient aphakia mice: Behavioral characterization of a novel genetic model of Parkinson's disease.</a> Journal of Neuroscience. 25 (8), 2132-2137 (2005).</li>
<li>Glajch, K. E., Fleming, S. M., Surmeier, D. J., Osten, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensorimotor+assessment+of+the+unilateral+6-hydroxydopamine+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Sensorimotor assessment of the unilateral 6-hydroxydopamine mouse model of Parkinson's disease.</a> Behavioural Brain Research. 230 (2), 309-316 (2012).</li>
<li>Rockenstein, E., Mallory, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+neuropathological+alterations+in+transgenic+mice+expressing+a-synuclein+from+the+platelet-derived+growth+factor+and+Thy-1+promoters%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">Differential neuropathological alterations in transgenic mice expressing a-synuclein from the platelet-derived growth factor and Thy-1 promoters.</a> Journal of Neuroscience Research. 68 (5), 568-578 (2002).</li>
<li>Fleming, S. M., Salcedo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+effects+of+dopaminergic+agonists+in+transgenic+mice+overexpressing+human+wildtype+a-synuclein%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Behavioral effects of dopaminergic agonists in transgenic mice overexpressing human wildtype a-synuclein.</a> Neuroscience. 142 (4), 1245-1253 (2006).</li>
<li>Chen, L., Cagniard, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+motor+deficits+and+dopaminergic+dysfunction+in+DJ-1+null+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Age-dependent motor deficits and dopaminergic dysfunction in DJ-1 null mice.</a> Journal of Biological Chemistry. 280 (22), 21418-21426 (2005).</li>
<li>Pothakos, K., Kurz, M. J., Lau, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restorative+effect+of+endurance+exercise+on+behavioral+deficits+in+the+chronic+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease+with+severe+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Restorative effect of endurance exercise on behavioral deficits in the chronic mouse model of Parkinson's disease with severe neurodegeneration.</a> BMC Neuroscience. 10 (6), (2009).</li>
<li>Patki, G., Che, Y., Lau, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dysfunction+in+the+striatum+of+aged+chronic+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Aging+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dysfunction in the striatum of aged chronic mouse model of Parkinson's disease.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 1 (3), (2009).</li>
<li>Rommelfanger, K. S., Edwards, G. L., Freeman, K. G., Liles, L. C., Miller, G. W., Weinshenker, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Norepinephrine+loss+produces+more+profound+motor+deficits+than+MPTP+treatment+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+national+academy+of+sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Norepinephrine loss produces more profound motor deficits than MPTP treatment in mice.</a> Proceedings of the national academy of sciences of the United States of America. 104 (34), 13804-13809 (2007).</li>
<li>Li, Y., Liu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutant+LRRK2%28R1441G%29+BAC+transgenic+mice+recapitulate+cardinal+features+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Mutant LRRK2(R1441G) BAC transgenic mice recapitulate cardinal features of Parkinson's disease.</a> Nature Neuroscience. 12 (7), 826-828 (2009).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCrawley%2C+JN+%22What%27s+Wrong+With+My+Mouse%3F+Behavioral+Phenotyping+of+Transgenic+and+Knockout+Mice%22">What's Wrong With My Mouse? Behavioral Phenotyping of Transgenic and Knockout Mice</a>. , John Wiley & Sons, Inc. New York, New York, USA. (2000).</li>
<li>Crawley, J. N., Paylor, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+proposed+test+battery+and+constellations+of+specific+behavioral+paradigms+to+investigate+the+behavioral+phenotypes+of+transgenic+and+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hormones+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">A proposed test battery and constellations of specific behavioral paradigms to investigate the behavioral phenotypes of transgenic and knockout mice.</a> Hormones and Behavior. 31 (3), 197-211 (1997).</li>
<li>Fernagut, P. O., Chalon, S., Diguet, E., Guilloteau, D., Tison, F., Jaber, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+behaviour+deficits+and+their+histopathological+and+functional+correlates+in+the+nigrostriatal+system+of+dopamine+transporter+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Motor behaviour deficits and their histopathological and functional correlates in the nigrostriatal system of dopamine transporter knockout mice.</a> Neuroscience. 116 (4), 1123-1130 (2003).</li>
</ol>

Biz hiçbir çıkar çatışması var.

Bu çalışmada biz farelerde sensorimotor fonksiyon üç yararlı testleri ve analiz etmek için nasıl gösterir. Bu zorlu kiriş, silindir spontan aktivite ve duyusal uyaranlar (yapıştırıcı kaldırma) yanıt içerir. Bu testler ışın için biz ve diğerleri sadece eğitim kısa bir miktarda gereklidir onları genetik fare modelleri 14,16-18, 2) olarak nigrostriatal dopaminerjik disfonksiyon değişen derecelerde son derece hassas olarak bulduk aşağıdaki nedenlerle 1) için seçilmiştir ve duyusal uyaranlara testlere yanıt için taşıma ve bir kez deneyleri eğitim bir test seansta, ve 3) testleri için gerekli ekipman fiyatı gibi rotarod ve açık olarak daha otomatik ekipman satın alınmasına oranla oldukça düşüktür olabilir alanı odaları. Zorlu ışın testi i PD genetik fare modellerinde motor performans ve koordinasyon açıkları tespit de yararlı değil, aynı zamanda yararlıdırn, 1-metil-4-fenil-1 ,2,3,6-tetrahidropiridin-tedavi edilen ve 6-hidroksidopamin ile tedavi edilen fareler ve norepinefrin eksikliği olan farelerde 19, 23-25 ​​bozukluğu ortaya çıkarılması. Buna ek olarak, biz zorlu ışın daha az motor performans ve koordinasyon (rotarod ve kutup testi) diğer testlere göre vücut ağırlığı etkilendiği bulabilirsiniz. 50 + gram kadar ağır olabilir yaşlı erkek fareler ile çalışırken bu özellikle faydalıdır. Işın benzer şekilde, spontan aktivitesinde değişiklikler güvenilir parkin nakavt, PQ311X, Thy1-asyn, Pitx3-afaki ve LRRK2 fareler 14, 16-18, 26 gözlenmektedir. Yapışkan kaldırma testi de parkin nakavt, parkin Q311X, Thy1-asyn, ve fareler 14,16, 17, 22 DJ-1 nakavt mutasyonlar dahil olmak üzere genetik manipülasyon duyarlıdır. Tek taraflı 6-hidroksidopamin ile tedavi edilen fare yapıştırıcı kaldırma Test tipik olarak sıçan 1,2 ile yapılır kadar benzer bir şekilde gerçekleştirilir. Yapışkanlı etiket kullanarak her Forepaw yerleştirilirbir forcep ve etiket kaldırmak için zaman kaydedilir. Biz 6-hyrdoxydopamine ile tedavi edilen farelerde etkilenen uzuv 19 etiket kaldırma önce etkilenmemiş daldan etiket kaldıracağını bulundu. Bu test bataryası kronik tedaviler kullanarak çalışmalar yaşlanma uygulamak kolay ama aynı zamanda farmakolojik çalışmalarda kullanımı kolaydır. Bir kez hayvanlar her tahlil ayarlanabilir için bir test istasyonu test için eğitimli ve hazır. Hayvanlar daha sonra her test aynı sırayla yapılır. İlgi ilaç tatbik edilebilir ve bir kez istenen ilaç konsantrasyonunun zirve yapıştırıcı kaldırma test etmek için daha sonra, her bir fare kiriş üzerinde test edilebilir ulaştı ve daha sonra üç dakika için silindir içinde taşınır ve edilmektedir. Biz fareler 18, 21 farklı dopamin agonistleri test ederken iyi çalışması için bu strateji bulundu. Kiriş ve yapıştırıcı kaldırma testleri hem tekrar test için uygun olan, silindir ancak spontan aktivite tekrarlanan testi etkilenirng zaman 16 içinde düşük aktivite ile sonuçlanır. Açığı hala silindir 16 tekrarlanan test ile farklılıkları tespit etmek mümkün olabilir fare ne kadar sağlam bağlı. Genel olarak, alışkanlık ve daha az aktivite silindire 2. maruz kalma gibi ancak, biz farmakolojik çalışmalar 18,21 kiriş geçişi hemen ardından spontan aktivite testi ne zaman yeterli aktivite düzeyleri alabilirsiniz bulabilirsiniz en kısa sürede görülmektedir. Bir çalışmada dahil etmek spontan aktivite test seans sayısı fare suşu (bazıları diğerlerinden daha kesinlikle daha aktif) ve tedavi süresine bağlı olacaktır. Karışık bir C57BL / 6 biz 2-4 kez ve test oturumları arasındaki etkinliği ölçülmüştür X DBA arka plan üzerine farenin bizim farmakolojik çalışmalarda bir hafta 21 ile ayrılmıştır. Kiriş ve silindir testleri videorecorded davranışların sonrası test analiz gerektirir. Analizin bu yönü içindeneysel koşullara kör gözlemcinin olması özellikle önemlidir. Biz laboratuvarda yeni gözlemcinin tren ne zaman daha önce laboratuvardan değerlendirici bir uzman tarafından analiz video kasetleri üzerinde kişi puan davranış. Kriterleri açıkladı ve yeni değerlendirici ve daha sonra kişinin kendi önceden analiz kasetleri puan başlar gösterilmiştir. Puanlar daha sonra uzman &#39;derecelendirme karşılaştırılır. Onlar uzman% 95-98 doğruluk içinde kadar kişi oranı yeni verilere izin verilmez. Tüm veriler daha sonra rasgele değerlendirici bir uzman tarafından doğruluk için nokta kontrol edilir. Bu çalışmada açıklanan testlerin pil farenin sensorimotor fonksiyonunu değerlendirmek için tasarlanmıştır. Ancak, hastalık yeni bir fare modeli karakterize zaman buna da hayvanın temel bir inceleme yapmak için her zaman önemlidir. Burun kılı veya cl kaldırılması gibi, vücut ağırlığı ve sıcaklık test boyunca izlenmeli ve herhangi bir anormal davranışlar unutulmamalıdırkuyruk tarafından yakalandı zaman bir AsPing arka ayaklar. Temel nörolojik değerlendirmeler ayrıntılı 27-29 başka bir yerde açıklanmıştır.

Parkinson hastalığı (PD) öncelikle substantia nigra dopaminerjik nöronların ilerleyici kaybı ve merkezi ve periferik sistemlerinde Lewy cismi kapanım gelişimi ile karakterize bir zayıflatıcı nörodejeneratif bir hastalıktır. Hastalar bradikinezi, tremor, rijidite, ve zaman içinde daha da kötüye postural bozukluk dahil olmak üzere, duyu bozuklukları muzdarip. Son 15 yılda keşfedilen hastalığın nadir, ailesel formları potansiyel hastalık modifiye tedavi için önemli yeni hedeflerin belirlenmesi yol açmıştır rağmen. Diğerleri arasında alfa-sinüklein, parkin, DJ-1, LRRK2 ve ATP13A2 kodlayan genlerdeki mutasyonlar PD, genetik fare modelleri hayvan modellerinde yeni bir &quot;nesil&quot; gelişimini işaretleyin. Mükemmel olmayan ilaca bağlı davranışsal önlemleri PD yoğun çalışılan tek taraflı 6-hidroksidopamin (6-OHDA) sıçan modeli için var. Bu bacak kullanım için testleri asimetri, hareketbaşlatılması, somatosensoriyel ihmal, ulaşan yetenekleri, ve son zamanlarda ultrasonik sesler 1-6. Bu testler, nigrostriatal dopamin nöron kaybı değişen derecelerde duyarlıdır ve potansiyel terapötikler 7-11 arasında çeşitli etkinliğini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Ancak, genetik fare modelleri ile kullanmak için en iyi sensorimotor testlerinde ya da nasıl kullanmak için birçok net bir fikir birliği yoktur. Klinik öncesi çalışmalarda, yeni bir genetik fare modeli karakterize, ve modeller arasında karşılaştırmalar yapmak için çalışırken, bu problemlidir. Geçtiğimiz on yıl içinde sıçanlarda başarıyla kullanılmaktadır ne benzer fareler için sensorimotor testlerin bir pil bir araya getirmek için çalıştık. Bu makalede açıklanan testler PD çok sayıda genetik fare modelleri karakterize yardımcı olmak için kullanılmıştır ve şu anda yeni potansiyel terapötikler 12 test ön-klinik çalışmalarda kullanılmıştır. En yaygın testler kullanmakfarelerde motor fonksiyon değerlendirmek için d açık alanda ve koordinasyon 13 rotarod testinde faaliyetidir. Bu testlerin her iki sensorimotor işlevi ile ilgili bilgiler sağlamak için kullanımı ve otomatik, nispeten kolay olmasına rağmen, genellikle nigrostriatal dopamin sistemi içinde ince değişiklikleri tespit etmek için gerekli olan hassasiyet yoksundur. Örneğin, dopamin fonksiyon ince değişiklikler ile parkin eksikliği olan farelerde rotarod üzerinde bozuklukları görüntülenmez ama zor bir ışın testi 14 ekran motor bozukluk yok. Ayrıca, fare 1-metil-4-fenil-1, 2,3,6-tetrahidropiridin (MPTP) rotarod üzerinde bozuklukları görünmüyor nörotoksin orta dozları ile tedavi ama bir ters üzerinde yürüyüş ve bozuklukları önemli değişiklikler var Izgara test 15. Bu nedenle, fenotipik değerlendirmesi için sadece rotarod kullanmak çalışmaları daha ince bozukluklar kaçırabilir. Optimum bir yaklaşım, bize göre, davranışsal karakterizasyonu için bir ba içeren biridirduyusal ve motor fonksiyon farklı yönlerini ve bazal ganglion işlev 13-15 ince değişikliklere duyarlı testlerin ttery. Burada zor bir ışın geçişi testi, silindir spontan aktivite bir test ve duyusal uyaranlara testine yanıt kullanarak farelerde sensorimotor fonksiyonu ölçmek ve analiz etmek için nasıl açıklar.

<table><tbody><tr><td>Zorlu ışın</td><td>aparatı Starks Plastics</td><td>Segment 1= 3,5 cm Segment 2= 2,5 cm Segment 3= 1,5 cm Segment 4= 0,5 cm</td><td>İletişim bilgileri: 11276 Sebring Dr. Forest Park, OH 45240 ABD Ph +1 (513) 541-4591 Faks +1 (513) 541-6773</td></tr><tr><td>Silindir</td><td>Starks Plastik</td><td>15,5 cm çap 12,7 cm yükseklik</td><td>İletişim bilgileri: 11276 Sebring Dr. Forest Park ,OH 45240 ABD Ph +1 (513) 541-4591 Faks +1 (513) 541-6773</td></tr><tr><td>Mesh Izgara Kablolama</td><td>Ace Donanımı</td><td>1 cm2</td><td> </td></tr><tr><td>Fare Kafesleri</td><td>Ancare</td><td>19 x 29 x 12,7 cm</td><td> </td></tr><tr><td>Cam</td><td>Ace Donanım</td><td>19 cm2</td><td> </td></tr><tr><td>Ayna</td><td>Ace Donanımı</td><td>18 x 13 cm</td><td> </td></tr><tr><td>Video Kamera</td><td>Sony HDR-HC9</td><td></td><td> </td></tr><tr><td>MiniDV Bantlar</td><td>Sony DVC premium</td><td>90 dakika uzun oynatma</td><td> </td></tr><tr><td>Etiketler</td><td>AveryColor Kodlama Etiketler</td><td>6,35 mm çap (1/4" Yuvarlak)</td><td> </td></tr></tbody></table>

parkinson hastalığı fare modeller duyusal motor fonksiyon değerlendirilmesi

Assessment of Sensorimotor Function in Mouse Models of Parkinson's Disease

Hassas ve güvenilir davranışsal sonuç ölçümleri birçok nörodejeneratif hastalıklar için klinik öncesi çalışmalarda potansiyel terapötik tedavilerin değerlendirilmesi için gereklidir. Parkinson hastalığı, algılayıcı nigrostriatal disfonksiyon derece potansiyel terapötikler etkinliğini test etmek için temel olan değişen duyarlı test eder. Güvenilir ve oldukça zarif sensorimotor önlemler fareler için var, ancak bu testlerin ölçü sensorimotor birçok sıçan içinde asimetri ve PD daha yeni genetik fare modelleri için tamamen uygun değildir. Biz sıçanlarda hassas testler ilham ve fareler için adapte sensorimotor testlerin bir pil bir araya getirdik. Bu çalışmada vurgulanan test bataryası onun bir çalışmaya uygulanmasında kolaylığı, ve c) düşük gider) PD fare modelleri geniş bir yelpazede, b a) hassasiyet için seçilir. Bu testler PD yeni genetik fare modelleri karakterize hem de pota test yararlı kanıtlanmışential tedaviler hastalık modifiye.

<p class="jove_content"&gt; Zorlu ışın, silindir spontan aktivite ve yapıştırıcı kaldırma testleri farelerde sensorimotor fonksiyon tüm son derece yararlı testleri bulunmaktadır. Biz parkin nakavt, parkin Q311X, Pitx3-afaki, alfa-sinüklein eksprese ve tek taraflı 6-hidroksidopamin fareler de dahil olmak üzere Parkinson hastalığının çoklu genetik ve toksin fare modellerinde bu testler kullanılarak sensorimotor fonksiyonu değişiklikler bulduk<sup&gt; 14, 16-19</sup&gt;. Burada Thy1 organizatörü (Thy1-asyn) ve Pitx3-afaki fareler altında bulunan farelerin aşırı miktarda insan wild tip alfa-sinüklein toplanan verileri gösteriyor<sup&gt; 18,20</sup&gt;. Zorlu ışın biz güvenilir bir yabani-tip farelerden (kıyasla Thy1-asyn adım başına artış hataları tespit<strong&gt; Şekil 1</strong&gt;). Farelerin aynı çizgide biz de tekrar tekrar silindir adım bacak sağlam bir azalma tespit (<strong&gt; Şekil 2,</strong&gt;)<sup&gt; 12, 16, 21</sup&gt;. Yapışkan kaldırma testinde nigrostriatal dopamin nöronlar derin bir azalma ile Pitx3-afaki fareler (wild tip kontrollere göre iletişim önemli ölçüde artmıştır zaman gösterecektir<strong&gt; Şekil 3,</strong&gt;).</p&gt;<p class="jove_content" fo:keep-together.within-page="always"<img src="/files/ftp_upload/50303/50303fig1.jpg" alt="Figure 1"/<br /&gt;<strong&gt; Şekil 1. Wild tip (n = 13) ve yaş 4 aylıkken Thy1-asyn (n = 4) en zorlu hataları.</strong&gt;<strong&gt; A)</strongAdım başına&gt; Hatalar, beş çalışmaların anlamına gelir.<strong&gt; B)</strong&gt; Her ışın genişliği de hataları ortalama. ** P temsil &lt;0.01 sırasıyla farenin vahşi tip ile karşılaştırıldığında. Student t-testi.</p&gt;<p class="jove_content" fo:keep-together.within-page="always"<img src="/files/ftp_upload/50303/50303fig2.jpg" alt="Figure 2"/<br /&gt;<strong&gt; Şekil 2. Hindlimb yaş 4 aylık (n = 4) farenin vahşi tip (n = 13) ve Thy1-rın, silindir içinde adım.</strong&gt; * &lt;0.05 vahşi tip ile karşılaştırıldığında p temsil eder. Student t-testi.</p&gt;<p class="jove_content" fo:keep-together.within-page="always"<img src="/files/ftp_upload/50303/50303fig3.jpg" alt="Figure 3"/<br /&gt;<strong&gt; Şekil 3,. (N = 12) fareler 4 haftalık vahşi tip (n = 10) ve Pitx3-afaki zaman başvurun.</strong&gt; Vahşi tip ile karşılaştırıldığında ** p &lt;0.01 temsil eder. Mann-Whitney U</p&gt;<table border="1"&gt;<tbody&gt;<tr&gt;<td<strong&gt; Testi</strong</td&gt;<td<strong&gt; Parametreler</strong</td&gt;<td<strong&gt; Analiz Seçenekleri</strong</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td rowspan="3"<strong&gt; Zorlu Kiriş</strong</td&gt;<td&gt; Hatalar</td&gt;<td rowspan="3"&gt; Işın Genişlikleri (Yalnızca hatalar)<br /&gt; 5 Denemeler ortalama<br /&gt; Bireysel Denemeler</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Zaman</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Adımlar</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td rowspan="4"<strong&gt; Spontan Aktivitesi</strong</td&gt;<td&gt; Ön ayakları Adımlar</td&gt;<td rowspan="2"&gt; Ortalama<br /&gt; Ön ayakları / Hindlimb Oranı</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Hindlimb Adımlar</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Rears</td&gt;<td&gt; Ortalama</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Zaman Bakım</td&gt;<td&gt; Ortalama</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td rowspan="2"<strong&gt; Yapıştırıcı Temizleme</strong</td&gt;<td&gt; İletişim zaman</td&gt;<td rowspan="2"&gt; Ortalama<br /&gt; Medyan<br /&gt; En iyi / kötü Puan<br /&gt; Kaldırma zaman İletişim zaman puan</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Kaldırma zaman</td&gt;</tr&gt;</tbody&gt;</table&gt;<p class="jove_content"<strong&gt; Tablo 1. Sensorimotor fonksiyonu Test Bataryası: Analiz Seçenekleri.</strong</p

Genel olarak Parkinson hastalığı, hareket bozuklukları, hassas ve güvenilir bir davranış testleri yeni potansiyel terapötikler test etmek için gereklidir. Burada, nigrostriatal sistemine zarar derecelerine ve klinik öncesi çalışmalar için yararlı duyarlı olan fareler için duyu testler yönetilebilir bir pil açıklanmaktadır.

Parkinson Hastalığı Fare Modeller Duyusal Motor Fonksiyon Değerlendirilmesi

Sensitive and  reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of  potential therapeutic treatments in preclinical trials for many  ...

Bu prosedürlerin genel amacı, farelerde sensorimotor fonksiyonu nicel olarak değerlendirmektir. Bunu, bir dizi hassas davranışsal test kullanarak gerçekleştiriyoruz.Bunlar arasında, silindir içindeki zorlu kiriş geçişi spontane aktivitesi ve DOT testi olarak da bilinen yapışkan çıkarma testi yer almaktadır. Testlerin ardından, kiriş geçişi ve spontane aktiviteye ait video kayıtları puanlanabilir. Nihayetinde bu testler, yeni genetik fare modellerindeki duyusal veya motor fonksiyonların yanı sıra, hastalıklar için potansiyel terapötiklerin incelendiği preklinik ilaç çalışmalarının karakterize edilmesinde kullanılabilir.Bu testlerin diğer testlere, özellikle de otomatik olanlara göre temel avantajı, motor disfonksiyona karşı oldukça duyarlı olmaları ve rotarod gibi testlerden daha hassas sonuçlar vermeleridir. Buna ek olarak, bu testler, binlerce dolara mal olabilen otomatik testlerle kıyaslandığında aslında oldukça maliyet etkinleydir. Bu testler, genel olarak hareket bozuklukları alanındaki temel sorulara yanıt verebilir ve oldukça kullanışlı sonuç ölçütleridir.Potansiyel terapötikler test edilirken, üç temiz fare kafesi bir masa üstüne veya fare kafesi değiştirme çeker ocağına ters çevrilerek yerleştirilir. Kafesler, bir metrelik bir kirişin uzunluğunu destekleyebilecek şekilde düzgünce hizalanır. Ardından, kirişin dört bölümü en genişten en dar bölüme doğru birleştirilir ve ters çevrilmiş fare kafeslerinin üzerine yerleştirilir.Test etmeyi planladığınız farelerin ev kafesini, kirişin en dar ucunun doğrudan kafesin içine gireceği şekilde, kirişin sonuna yan yatırarak yerleştirin. Destekli denemeye başlamak için, ilk fareyi kuyruğunun kökünden tutun ve arka ekstremitelerini avucunuzla destekleyin. Fareyi kirişin geniş ucuna yerleştirin, kuyruğunu bırakın ve elinizi çekin.Fareyle apparatus'a daha iyi adapte olması için koklamasına ve etrafta dolaşmasına izin verin. Eğer fare geri dönerse, onu nazikçe istenen yöne yönlendirin. Fareyi yol boyunca ilerlemeye teşvik etmek için, ana kafesi yan tarafında aynı konumda tutarak kaldırın ve test faresine yaklaştırın.Fare ana kafese girmeye çalıştığında, fare içeri girmeyecek ancak ileriye doğru bir adım atacak şekilde onu geri çekin. Son olarak, farenin ana kafese girmesine izin verin. Kafesteki her bir fare için aynı işlemi uygulayın.Kafesler arasındaki kirişi, kafes içi hayvan odası temizleme solüsyonu ile iyice temizleyin. Bir sonraki farenin dikkatini dağıtabileceği için, bir sonraki fare denemeye başlamadan önce kiriş üzerindeki tüm idrar veya dışkı peletlerini temizlemek önemlidir. Kafesteki tüm fareler bir adet destekli denemeyi tamamladığında, ilk fareyi tekrar alın ve gerekirse kirişin geniş ucuna yerleştirin.Fareyi nazikçe istenen yöne doğru yönlendirin ve ev kafesine doğru kiriş boyunca ilerlemesini teşvik etmek için sırtına hafifçe dokunun; fare koklamayı bırakırsa veya kirişten çıkarsa onu düzeltin. Fareyi kirişin sonuna kadar yönlendirmek için elinizi yakınında tutun. Kiriş üzerindeyken duraksama ve keşif davranışlarını en aza indirin.Bu işlem eğitim sırasında ne kadar çok tekrarlanırsa, fare bunu yapmaya o kadar daha az eğilimli olur. Test sırasında, fare dört uzvundan birini ana kafese yerleştirdiğinde deneme sona erer; ardından bir sonraki fare ikinci denemesini alabilir. Fareler, ilk eğitim gününde, fareler arasında dönüşümlü olarak toplam beş deneme alırlar; böylece her fare için denemeler arası süre 30 saniye veya daha fazla olur.İkinci günde, her fare için birinci gündekiyle aynı kiriş kurulumunu kullanarak beş deneme daha gerçekleştirin; farelerin herhangi bir yardıma ihtiyacı olmamalıdır, ancak durmalarını veya etrafı keşfetmelerini önlemek için düzeltilmeye veya arka taraflarına dokunulmaya ihtiyaç duyabilirler. 24 saat sonra, test gününe başlayın. Kirişi, önceki iki eğitim gününe benzer şekilde kurun.Ardından, her bir ışın genişliğine uygun bir ağ ızgarayı her bir ışın bölümünün üzerine yerleştirin. Her deneme başlamadan önce, tüm ışın geçiş denemelerini kaydetmek için bir video kamera kullanın. Tarih, fare numarası ve deneme numarası gibi temel deney bilgilerini içeren bir kart hazırlayın ve bu kartı kameranın önüne yerleştirin.Hangi farenin test edildiği ve hangi denemede olduğu açıkça görülebilmesi için her denemeden önce iki ila üç saniye boyunca kayıt yapın. Her test için fareyi, ızgara yüzeyinin en geniş bölümünün üzerine yerleştirin ve farenin vücudunun tüm uzunluğu görünecek şekilde kiriş boyunca ilerlemesini kaydedin. Kamera, ızgara görüntüleyicinin ortasında olacak şekilde konumlandırılmalıdır.Her bir fareyi ızgaralı yüzey kirişi üzerindeki teste beş kez tabi tutun ve her fare arasında yüzeyi temizleyin. Spontan aktivite deneyini kurmak için, kafeslerin ön kısımları deneyciye bakacak şekilde iki kafesi yan yana, aralarında yaklaşık 18 santimetre mesafe olacak şekilde düzenleyin. Gerekirse, aynaya destek olması için diğer iki kafesin arkasına ek bir kafes yerleştirin.Ardından, iki kafesin üzerine bir cam parçası yerleştirin ve camın ilk iki kafesin dış kenarı tarafından desteklendiğinden emin olacak şekilde konumlandırın. Daha sonra camın üzerine bir silindir ve camın altına açılı bir ayna yerleştirin. Aynayı üçüncü kafese yaslayın.Açı 30 ile 45 derece arasında herhangi bir değerde olabilir, ancak daha da önemlisi, kamera görüş alanı silindirin tüm çapını kapsamalıdır. Deney düzeneği kurulduktan sonra, video kamerasını aynanın önüne yerleştirin ve silindirin tabanının tüm çapını görebilene kadar hem aynayı hem de video kamerasını ayarlayın. Ardından üç dakikalık bir zamanlayıcı kurun ve önceki deney videosunda olduğu gibi, önemli deney detaylarının yazılı olduğu bir kart hazırlayın.Etiketi iki ila üç saniye boyunca kaydedin. Ardından durdurun. Deneyi başlatmak için silindire bir fare yerleştirin.Kayda basın ve zamanlayıcıyı başlatın. Fareyi üç dakika boyunca kaydedin. Yüksek gürültüler ve konuşmalar farenin dikkatini dağıtabileceği ve potansiyel olarak donma davranışına yol açabileceği için test alanının sessiz olması önemlidir.Deney sırasında, farenin silindir içindeyken yaptığı ayağa kalkma (rear) sayısını saymak için bir el sayacı kullanın. Ayağa kalkma, farenin sadece arka üyeleri üzerinde duracak şekilde, her iki ön üyesinin de yerden kesildiği dikey bir hareket olarak tanımlanır. Süre dolduğunda, fareyi çıkarın ve kendi kafesine geri yerleştirin.Her fare arasında silindiri ve camı hayvan odası temizleme solüsyonu ile temizleyin. Bir sonraki fareye geçmeden önce temizleme solüsyonunun kurumasını bekleyin. Yapışkan çıkarma testine, fareyi kendi kafesine yerleştirerek başlayın.Yem haznesi çıkarıldıktan sonra, farelerin test odasına ve yem haznesi olmayan kafese alışmalarını sağlayın. Test işlemi için bir saat boyunca, kafes arkadaşlarını temiz bir kafese yerleştirerek test faresinin ana kafeste tek başına kalmasını sağlayın. Altlığın dörtte üçünü çıkarıp, ana kafesteki kafes arkadaşlarıyla birlikte temiz kafese yerleştirin.Küçük bir forseps kullanarak test faresini ensesinden kavrayıp sabitleyin ve farenin burnunun üzerine bir adet yapışkan etiket yerleştirin. Forsepsle etiketi burun kısmına nazikçe bastırın ve fareyi serbest bırakın. Kafesin kapağını kapatın ve fare dört patisiyle etiketleri çıkarmaya çalıştığında bir kronometre başlatın.Fare temas eder ancak etiketi kaldırmazsa süreyi kaydedin. Süreyi kaydedin ancak fare etiketi kaldırana kadar zamanlayıcıyı çalıştırmaya devam edin. Etiketi tamamen kaldırın.Fare etikete 60 saniye içinde temas etmezse veya etiketi kaldırmazsa, denemeyi sonlandırın ve etiketi manuel olarak kaldırın. Her denemeden sonra test edilen fareyi bekleme kafesine yerleştirin ve bir sonraki farenin testine başlayın. Tüm fareler, fareler arasında dönüşümlü olarak toplam üç denemeye tabi tutulur.Üç denemenin tamamı bir fare üzerinde aynı anda yapılmak yerine, etiketin düştüğü veya burun üzerine güvenli şekilde sabitlenmediği denemeler sayılmaz. Zorlayıcı kiriş, silindirdeki spontan aktivite ve yapışkan çıkarma testlerinin tamamı, farelerde sensorimotor fonksiyonların değerlendirilmesinde oldukça kullanışlı analizlerdir; zorlayıcı kiriş testinde, TH α-synuclein fareleri, vahşi tip farelere göre adım başına anlamlı derecede daha fazla hata yapmaktadır. Kiriş daraldıkça, TH α-synuclein farelerindeki hata sayısı artmıştır.Vahşi tip farelerde durum böyle değildi. Aynı fare hattı, silindir testinde arka bacak adımlarında da belirgin bir azalma göstermektedir. Bu sonuçlar, mutasyona uğramış farelerde insan alpha-nükleinin aşırı ekspresyonunun, saptanabilir sensör motor kusurların gelişmesine yol açtığını göstermektedir.Son olarak, yapışkan çıkarma testinde, nigrostriatal dopamin nöronlarında belirgin bir azalma olan PITX3 nakavt fareler, yabani tip kontrollerle karşılaştırıldığında temas süresinde anlamlı bir artış göstermektedir. Bizler ve diğer araştırmacılar, Parkinson hastalığı tedavilerinin terapötik potansiyelini değerlendirmek için bu testleri rutin olarak kullanmaktayız. Bu testler ayrıca, genetik fare modellerini karakterize etmek ve spesifik mutasyonların duyusal motor fonksiyonlar üzerindeki sonuçlarını belirlemek için de kullanılabilir.

assessment-sensorimotor-function-mouse-models-parkinson-s

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Parkinson hastalığı, deneysel 6-OH-dopamin tarafından tetiklenen olabilir striatum, dopaminerjik innervasyon kaybına neden olur. Biz stereotaksik lezyon gerçekleştirmek ve farelerde apomorfin bağlı dönme davranışı nasıl izleneceğini açıklar. Bu model, Parkinson hastalığı için yeni tedavilerin test etmek için faydalı ve güvenilir.

Parkinson Hastalığı için murin Model: 6-OH Dopamin Lezyon Davranış Testi

Protokoller iki de kurulan motor koordinasyon görevleri, hızlandırılması rotarod ve yatay çubuk, son zamanlarda Oxford geliştirilen iki test, statik çubuklar ve paralel bar sunulmaktadır. Bu testler motoru potansiyel olarak kendi başlarına ilgi bozuklukları yanı sıra davranış diğer alanlarda testlerde değişkenlerin olmak algılayabilir.

Farelerde Motor Koordinasyon Ölçüm

Bir protokol unilateral 6-OHDA lezyonlar, farelerde medyal önbeyin demet gerçekleştirmek için tarif edilmektedir. Bu yöntem, striatal dopamin ve 90,63&gt;% 95 kaybı gösteren hayatta kalan hayvanların% 89 ile düşük mortalite oranı (% 13.3) ±% -4,02, lezyonun tarafa doğru ipsiversive dönme önyargı vardır.

Parkinson Hastalığının tek taraflı lezyonlanmıştır 6-OHDA Mouse Model Geliştirme

Fare modelleri, davranışsal sinirbilim çalışmalarında giderek daha popüler hale geldi.  Modeller ilerledikçe, fareye özgü hassas davranışsal ölçümler geliştirmek önemlidir.  Bu protokol, fare vuruş modellerinde kullanılmak üzere yetenekli bir motor görev olan Makarna Matrisine Ulaşma Görevini tanımlar.

İskemik İnme bir Fare Modeli Duyusal Cortex Sakatlık sonrasında telafi edici Ekstremite Kullanımı ve Motor Beceri Öğrenme Davranışsal Değerlendirme

Koku alma fonksiyonundaki bozulma, Parkinson, Alzheimer ve Huntington hastalıkları dahil olmak üzere birçok nörodejeneratif bozuklukta ortak bir özelliktir. Bu makalede, nörodejeneratif hastalıkların fare modellerinde koku alma yeteneklerini ölçmek için kullanılabilecek farelerde koku alma ayrımını ve tespitini değerlendirmek için bir dizi test açıklanmaktadır.

Nörodejeneratif Hastalığının fare modelleri için koku alma Tahliller

Bu çalışmada, biz ventral uçak motor koordinasyon yanı sıra ateş fare modelleri (Örneğin, endophilin mutant çağda ilerleyen ile ilerleme ince değişiklikleri izlemek için Imaging temel kinematik yürüyüş analizi kullanımını göstermektedir fare hat).

Yaş bağımlı Motor bozuklukları ile ateş farelerde, yürüyüş analizi

Biz bir fare modeli için Parkinson hastaligi MPTP ve davranışsal değerlendirme motor işlevleri ölçmek için silindir ve açık alan testleri kullanarak kullanarak kurulması tanımlamak. O zaman bir örnek olarak PD ilaçların çalışmada bu modeli uygulamak nasıl göstermek için L-DOPA kullanın.

Bir fare MPTP kaynaklı Parkinson hastalığı modelinde kendiliğinden hareket davranış değerlendirme

Burada, MouseWalker aparatının sıçanların artan boyutuna ve ağırlığına uyum sağlayacak şekilde yeniden tasarlanmasıyla inşa edilen RatWalker sistemini tanımlıyoruz. Bu sistem, yürüyüş parametrelerini izlemek ve ölçmek için hayal kırıklığına uğramış toplam dahili yansıma (FTIR), yüksek hızlı video yakalama ve açık erişimli analiz yazılımı kullanır.

Parkinson Hastalığının Genetik Sıçan Modelinde Yürüme Analizi için RatWalker Sisteminin Uygulanması

6-hidroksidopamin (6-OHDA) modeli, Parkinson Hastalığının anlaşılmasını ilerletmek için on yıllardır kullanılmaktadır. Bu protokolde, medial ön beyin demetine 6-OHDA enjekte ederek, motor eksiklikleri değerlendirerek ve basamaklama testini kullanarak lezyonları tahmin ederek sıçanda tek taraflı nigrostriatal lezyonların nasıl gerçekleştirileceğini gösteriyoruz.

Parkinson Hastalığının 6-hidroksidopamin Sıçan Modeli

Bir ev kafes ortamında farelerin uzun süreli ve kapsamlı bir izleme beyin hastalıklarının kemirgen modellerinde anormal davranış daha derin bir anlayış sağlar. Bu kağıt, çağdaş davranış analizi önemli bileşeni olarak Entegre Davranış İstasyonu (INBEST) açıklar.

Entegre Davranış İstasyonu ile Kemirgen Hastalık Modellerinin Davranış Fenotiplendirme (INBEST)

Öğrenin Parkinson hastalığı fare modellerinde duyusal motor fonksiyonu değerlendirmek için kiriş geçiş, silindir aktivitesi ve yapışkan çıkarma testlerini kullanın. Bu hassas davranışsal testler, preklinik ilaç çalışmalarında maliyet etkin ve güvenilir sonuçlar sağlar.

Parkinson Hastalığı Fare Modeller Duyusal Motor Fonksiyon Değerlendirilmesi

Daha fazla video keşfet