Kültür Hücreler Kanser ile ilişkili Sinyal İletimi sorgulanması için bir Multiplexed Lusiferaz tabanlı Tarama Platformu

Aşağıdaki protokolün genel amacı, birden fazla hücresel okumayı aynı anda izleyerek gen fonksiyonunun genom ölçeğinde sorgulanmasını sağlamaktır. Bu gösterimde, sırasıyla P 53 WINT ve KRAS yolak aktivitesini izlemek için Firefly RAN ve Cipro Dina Luciferaz tabanlı raportörler kullanılmıştır. Bu üç raportör, bir kolorektal kanser hücre hattı olan HCT one 16 hücrelerine ilgi çekici bir geni hedefleyen irna ile transekte edilmiştir.

Daha sonra, Cipro DEA lusiferaz aktivitesi sırasında hücre lizatlarında ateşböceği ve vanilya lusiferaz aktiviteleri ölçülür. Kültürde salgılanan bir enzim ölçülür. Tahlil sisteminin tekrarlanabilirliğinin yanı sıra, kanserle ilgili bu üç yol içindeki genlerin ortak ve benzersiz eylemlerini ortaya çıkarma yeteneğini gösteren orta sonuçlar elde edilir.