Yüksek Tuz Diyet ve Lewis Rat Kronik Böbrek Hastalığı tetikleyebilecek Nitrik Oksit Sentaz inhibisyonu ile bağlantılı 5/6th nefrektomi

Bu prosedürün genel amacı, Lewis sıçanında kronik böbrek hastalığını indüklemektir. Bu işlem, öncelikle dört haftalık bir P süresi boyunca nitrik oksit blokörü olan NG Nitro, L arginine veya LNNA uygulanarak gerçekleştirilir. Ardından, sağ böbreğin tamamı çıkarılır.

Ardından bir hafta sonra, sol böbreğin üçte ikisi çıkarılır. Son olarak, LNNA ve yüksek tuzlu diyet ile tedavi edilirken, sıçandaki böbrek yetmezliğinin gelişimi zaman içinde takip edilir. Nihayetinde; protein ve hematokrit ölçümü için idrar toplanması ile kandaki, plazmadaki ve/veya idrardaki UIA ve sistolik kan basıncı ölçümleri aracılığıyla, yerleşmiş kronik böbrek hastalığını gösteren sonuçlar elde edilebilir.

Böbrek fonksiyonu nihayetinde inulin ve para amino hipürat, yani PAH klirensi ile belirlenir. Bu yöntem, CKD patolojisinin daha iyi anlaşılması gibi nefroloji alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir ve terapötik müdahalelerin etkisini incelemek için kullanılabilir. İlk nefrektomi prosedüründen dört hafta önce, sıçanların içme suyuna litre başına 20 miligram nitrik oksit sentaz inhibitörü LNNA ekleyerek uygulamaya başlayın.

Bu zaman çizelgesine göre, prosedüre başlamadan önce masayı dezenfekte etmek için %70 alkol kullanın. Cerrahiye hazırlanmak için şu aletleri sterilize ederek başlayın: bir battaniye, bir adet bir ila iki dişli 12 santimetre student doku pensi, bir adet student standart patern pens, iki adet simkin pens, bir adet mayo makası, bir adet student iris makası ve makaslı bir adet Olson heger iğne tutucu.

Ardından aşağıdaki envanteri hazır bulundurun. Isıtma pedi ve lambası olan bir ameliyat masası, oksijen ve izofluran dokuları. Bir shaver, steril cerrahi aletler, 5x5 ve 10x10 steril gazlı bez, %70 alkol, %0,9 sodyum klorür çözeltisi, 1 mL'lik bir şırınga, 25 gauge iğneler, jel sünger pedler, 4.0 ve 5.0 Vicryl sütürler, kg başına 0,03 mg buprenorfin ve ameliyat sonrası sıçanlar için temiz bir kafes.

İndüksiyon odasında %4 izofluran ile anestezi indükledikten ve pre-analjezi uyguladıktan sonra, gerekirse sıçanı masadaki ısıtma pedinin üzerine sol yan tarafı üzerine gelecek şekilde yerleştirin ve %2 izofluran ile bir litre oksijen karışımı içeren bir burun konisi kullanarak ventile edin. Sıçanın yan karnını tıraşlayın ve cerrahi bölgeyi dezenfekte etmek için alkol kullanın.

Cerrahi işlem yarı steril bir ortamda gerçekleştirildiğinden, daha steril bir hazırlık için kırmızı deri sadece alkol ile dezenfekte edilir. Betadine ile ovalama işlemi uygulanabilir; ardından bir bone ve maske takılıp, steril cerrahi eldivenler giyilmeden önce eller yıkanır ve dezenfekte edilir. Sonrasında, anatomik forseps ve küt uçlu makas kullanarak kaburgalara paralel, bir ila bir buçuk santimetrelik bir insizyon yapılır.

Ardından, sırt kaslarının künt diseksiyonu ile sağ böbreği açığa çıkarın. Böbreğin alt polü görünür olduğunda, perirenal yağ dokusunu dikkatlice tutmak için küçük künt pens kullanın. Daha sonra, adrenal bezi rahatsız etmemeye dikkat ederek perirenal yağı pensle nazikçe çekin ve böbreği adrenal bezden ayırmak için dışarı çıkarın.

Bir pensi yağ dokusundaki medial bölgeye yerleştirin ve dokuyu adrenal bez ile böbrek arasından nazikçe yukarı doğru hareket ettirin. Böbreği nazikçe gazlı bez üzerine yerleştirin ve çevredeki yağ ile bağ dokusundan arındırın. Renal arteri ve veni tanımlayın ve gevşetin.

Ligatürün kaymasını önlemek için damarların etrafına tek düğümlü bir ligatür yerleştirin. Kesme işleminden sonra, böbrek ile düğüm arasında boşluk oluşturmak için gevşek düğümü damarlar boyunca aortaya doğru yaklaşık 0.5 santimetre dikkatlice kaydırın. Ardından, ligatürün uçlarını kesmeden iki adet çift düğüm atın.

Perfüzyon başarıyla durdurulduğunda, böbreğin rengi hemen kahverengiye dönecektir. Ardından, renal damarları böbreğe yakın bir noktadan kesin ve böbreği çıkarın. Renal damarlarda kanama olup olmadığını kontrol etmek için ligatürün uzun uçlarını nazikçe çekin.

Ligatür damar üzerinde yerinde kalmalıdır. Ligatürün uzun uçlarını kesin. Kalan renal damarlar abdominalite çekilecektir.

İskelet kasını arka ekstremiteye kapatmak için derhal 5.0 Vicryl sürekli sütürler kullanın. Kas içi yolla, kilogram başına 0.03 miligram buprenorfin enjekte edin. Ardından cildi kapatmak için 4.0 Vicryl deri altı sütürler kullanın.

Ardından, çıkarılan böbreği kurulayın ve tartın. Sıçanın; yiyecek ve suya erişimi olan, yarısı ısıtıcı ped üzerinde yerleştirilmiş temiz bir tekli kafeste iyileşmesine izin verin ve metin protokolüne göre izleyin. Yedi gün sonra.

İkinci ameliyat hazırlığı için, sağ böbreğin yaklaşık üçte ikisinin ağırlığını hesaplayın ve küçük parçalar halinde jel sünger hazırlayın. Sol böbreği dışarı çıkarmak ve adrenal bezi böbrekten ayırmak için gösterilen prosedürü tekrarlayın. Keskin makasları sol böbreğin üst polü çevresine yerleştirin ve üst polü tek bir hamleyle rezekte edin; hemen bir parça jel süngerle kapatın ve steril gazlı bezle hafifçe bastırın.

Ardından böbreğin alt polünü rezeke edin ve cilt üzerinde pıhtılaşmayı önlemek için benzer şekilde kapatın. Böbreği kaldırın ve kanama durana kadar her iki jel sünger ped üzerine hafif basınç uygulamak için steril gazlı bez kullanın. Kanama diğer sünger pedde devam ederse, yapışık jel sünger pedlerle birlikte kalan böbrek parçasını karın içine yerleştirin; kası ve cildi kapatın.

Sıçağın iyileşmesini takip etmek ve barındırmak için daha önce açıklanan prosedürün aynısını uygulayın. Subtotal nefrektomi sonrası, toplam renal kütlenin yaklaşık altıda biri bırakılır. Bu şekil, sağ böbreğin çıkarılan renal kütlesinin hesaplanan yüzdesini ortalama ve standart sapma ile birlikte göstermektedir.

Sonraki haftada gerçekleştirdiğimiz önceki deneylerde, tek taraflı nefrektomi sonrası sol böbrekte hipertrofi meydana gelmiş ve bu durum, sağ böbreğin hesaplanan ağırlığına dayalı olarak çıkarılması gereken tercih edilen renal doku miktarının hafifçe düşük tahmin edilmesine yol açmıştır. Bununla birlikte, sol böbreğin ağırlığını belirlemek mümkün olmadığından, renal kütlenin yaklaşık beş altıda birini çıkarmak için en doğru yöntem budur. Böbrek yetmezliğinin ilerlemesi; protein ve kreatinin ölçümü için idrar, plazma üre ve kreatinin için kan ve sistolik kan basıncı takibi ile izlenmektedir.

Kreatinin klerensi hesaplanabilir, ancak sıçanlardaki yaygın tübüler kreatinin sekresyonu nedeniyle GFR'deki düşüşü olduğundan düşük gösterme eğilimindedir; bu durum, renal fonksiyonun belirlenmesinde altın standart yöntem olan inulin ve PAH klerensinin önemini vurgulamaktadır; Conners ve arkadaşları prosedürün tamamını tanımlamıştır. Inulin ve PAH klerensi; idrar örneğindeki konsantrasyonları, idrar akış hızı ve plazma konsantrasyonları üzerinden hesaplanır. Zamanla, kronik böbrek hastalığı veya CKD olan sıçanlarda hipertansiyon, anemi, proteinüri, glomerüler filtrasyon hızında ve efektif renal plazma akışında belirgin bir azalma gelişir.

Altı hafta sonra yerleşmiş bir KBY gelişmiş olur; bu süre, zamanla artan kurtarma müdahalelerini test etmek için uygun bir zaman noktasıdır, hipertansiyonun güçlü bir ilerlemesi ve proteinüri gözlemlenirken hematokrit ve böbrek fonksiyonları hafif bir kötüleşme gösterir. Deneylerimizde odaklanılmayan diğer semptomlar arasında kalsiyum fosfat ve lipid metabolizması bozuklukları ve sırtlarınyasına bağlı olarak diğer pek çok durum yer alır. KBY gelişimi, burada kullanılan Lewis sıçanlarında belirgin şekilde farklılık gösterebilir.

Hipertansiyon ve endotelyal disfonksiyonu indüklemek için yüksek tuzlu diyet ve bir nitrik oksit blokerı eklendi. Küçük bir adım. Bu teknik, uygun şekilde uygulandığında yaklaşık 50 ila 20 dakika içinde tamamlanabilir.

Bu videoyu izledikten sonra, kademeli subtotal nefrektomi gerçekleştirerek loose reds farelerinde kronik böbrek yetmezliğinin nasıl indükleneceği konusunda kapsamlı bir anlayış kazanmış olmalısınız.