March 1st, 2014
Bu makalede, farelerde öğrenme korku ve belleği değerlendirmek için bir video analiz sistemi kullanılarak bir bağlamsal ve cued korku klima testi için bir protokol sunuyor.
Bağlamsal ve akut korku koşullandırma testi, Lawrence'ın öğrenme yeteneğini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan davranışsal bir testtir. Agresif bir deneyim ile çevresel ipuçları arasındaki ilişkileri hatırlayın. Bununla birlikte, bu testte işyeri arasında bazı metodolojik farklılıklar vardır, bu da verilerin karşılaştırılmasında ve sonuçların tekrarlanmasında zorluğa neden olabilir.
Daha kararlı ve ayrıntılı veriler elde etmek için test protokolünü mümkün olduğunca standartlaştırmak önemlidir. Burada saha testinin protokolünü gösteriyoruz. Korku İşlevsellik testi, hafızanızı değerlendirmek için basit, hassas ve güvenilir bir testtir.
Bu test genellikle nöro ve moleküler mekanizmayı, temel öğrenme ve hafızayı anlamak ve ayrıca stres sonrası bozukluk ve şizofreni gibi psikiyatrik bozuklukların potansiyel fare modellerinin bilişsel işlevlerini değerlendirmek için kullanılır. Öğrenme ve hafıza indeksi olarak ölçülen ve insan gözlemcilerin katılımı ile puanlanan davranışa bakma testinde, kullanım davranışını otomatik olarak analiz etmek için bazı otomatik sistemler kullanılmıştır. Görüntü FG ve görüntü A tabanlı yazılım programı kullanarak bir görüntü analiz sistemi geliştiriyoruz.
Bu tür bir yazılım programını dağıtıyoruz ve bu adresten ücretsiz olarak indirilebilir. Burada test protokolümüzü ve otomatik analiz sistemimizi tanıtıyoruz. İlk olarak, yazılım programının görüntüsü olarak uygulama operatörünün güvenliğinin nasıl sağlanacağını gösteriyoruz.
İkinci olarak, koşullandırma bağlamı testi ve sistemi kullanan cihaz için Q testi dahil olmak üzere testin ayrıntılı protokollerini gösteriyoruz. Son olarak, N görüntü FD sisteminin son derece güvenilir sonuçlar üretebileceğini gösteren mevcut bir sonuç sunuyoruz. Şimdi başlayalım.
Korku koşullandırma testine hızlı bir şekilde başlayın. Bir fare, sınıf zemini olan bir odaya yerleştirilir. OID bir denetçi olarak sunulur.
Denetçi 30 saniye boyunca kuyruğa girin. Daha sonra, bir elektrik kodu şoku sağlanır. Bu eşleştirme, bir denetçi kuyruğu ve ayak şoku, denetçi kuyruğu ile elektrik kodu şoku arasındaki ilişkiyi geliştirmek için üç kez verilir.
Test sırasında, donma davranışı, ilişkili öğrenme ve haksız hafızanın bir indeksi olarak ölçülür. İkincisi, 24 saat sonra, fare aynı koşullandırma odasına yerleştirilir ve pire davranışı için puanlanır. Bağlamsal olarak kontrol korkusunu ölçmek için, fare daha sonra herhangi bir işitsel kuyruk olmadan farklı şekilli G'ye aktarılır ve daha sonra işitsel kuyruk sunulur.
Bu testte, donma davranışı akut korku hafızasının bir indeksi olarak kullanılır. Test sırasında, fare davranışı bir bilgisayara bağlı bir kamera aracılığıyla kaydedilir. Davranış donma veya donmama olarak değerlendirilir.
Görüntü yazılım programı ile program, donma süresi ve mesafe trafiğinin yüzdesini hesaplayabilir. Burada örnek olarak, test sırasında görüntü analizi gösterilmektedir. Canlı görüntüler saniyede bir uzunlukta yakalanır.
'nin görüntüsü, her çift için her canlı görüntüden bir ikili görüntü oluşturur. Ardışık alevlerle, farenin hareket ettiği alan miktarı programın görüntüsü ile hesaplanır. Alan belirli bir eşiğin altında olduğunda, davranış donma olarak değerlendirilir, bu da genellikle solunum dışında herhangi bir hareketin tamamen olmaması ve yenilmesi zor olarak tanımlanır.
Tanımlanan süre eşiğinden daha kısa süren dondurma davranışı dondurma olarak değerlendirilmez. Eşik değeri, Z görüntüsü ile ölçülen donma süreleri ile insan gözlemleri arasında en iyi uyumu sağlayacak şekilde önceden ayarlanmalıdır. Alan miktarı eşiğe veya X üç Z'ye eşit olduğunda, davranışın donmayan olduğu kabul edilir.
Burada, bu video analiz sistemini kullanarak farelerde test protokolümüzü gösteriyoruz. Bu protokolde operatörler, metal ızgaralara sahip ve şeffaf bir kurşun görüntüsü ile ortaya çıkarılan bir ızgara kare odası üzerinde yapıcıdır. FD, yakalanan her video görüntüsünde karanlık konuyu beyaz bir arka plandan ayırt edebilir.
Ancak bu süreç, siyah, iyi veya doğrudan siyah farelerin davranışını analiz etmek için odanın beyaz bir zemine yerleştirilmesi gereken konu donma davranışını analiz etmemizi sağlar. Alüminyum farelerin donma davranışı, siyah metal ızgaralar kullanılarak görüntü D ile de analiz edilebilir. Siyah bir kural altında, ışık yayan diyot ışıkları, aparatın üzerindeki yelkene bağlanır. Izgara kuralı, LED ışıklar ile 100 çatıda aydınlatılır.
Beyaz gürültü tonu üretecine bağlı bir hoparlör, kapağın üzerindeki yelken üzerine monte edilmiştir. 55 beyaz gürültü, işitsel bir sıra olarak sunulur. Şebekeler, elektrikli gıda şokunu sağlamak için bir şok jeneratörüne bağlanmıştır.
Şok rüzgar testi, test başlatılmadan önce 0,3 milyon çift olarak ayarlanmıştır. Şebeke üzerindeki akım yoğunluğu bir metal tarafından kontrol edilmelidir, çünkü şok testi farelerde fe ve idrar birikmesiyle azaltılabilir, test odası dış gürültüyü en aza indirmek için ses geçirmez bir dokuma tezgahına yerleştirilir. Test sırasında temyiz, koni ve bağlam testlerinin yapıldığı sesten farklı bir seste bulunur.
Koni odasından farklı özelliklere sahip bir odadan oluşur. Normal bir bağlam sağlayarak, duyusal kodları mümkün olduğunca değiştirmek gerekir, böylece fare Nobel bağlamını conting odası ile ilgisiz olarak algılayacaktır. Bu protokolde aparat, düz bir acri kuralı ve şeffaf ucu olan bir acri üçgen odadır.
Bir hoparlör, bir veya üç kuyrukta sunum yapmak için kablonun üzerine yelken üzerine monte edilir. Bu kuyruk, tırmalama sırasında farelere sağlanan işaretin aynısıdır. Zeminin aydınlatma seviyesi, görünümleri incelemek için ayarlanmıştır.
Her oda, yelkene monte edilmiş bir şarj kabini, fare davranışını izlemek için cihaz kamerası olan bir küptür. Her test başlamadan önce, akrilik duvarlar ve zeminler süper yüksek brüt suda bir dil ile silinir ve ızgaralar %70 etanol ile temizlenir. Koku kesimine dayalı bir yanlılığı önlemek için, ızgaraların son iki ila dört fare nedeniyle elektriksel iletkenliklerini çıkaramadıklarını inju etmek için ızgaralar süper yutturmaca brüt su yerine Ethan ile silinir, Davranış üzerindeki kafes taşımacılığının olası artışlarını azaltmak ve fareleri deney ortamına adapte etmek için sıcaklık kontrollü bir bekleme odasında bir ev paketi.
Farelerin bulunduğu kafes, her test başlamadan en az 30 dakika önce ses geçirmez bir bekleme odasına aktarılır. Farklı zamanlarda test edilerek üretilebilecek davranış varyasyonlarını en aza indirmek için tüm deneyler aynı zaman diliminde yapılmalıdır. Deney süresinin potansiyel etkilerini azaltmak için her gruptan fareler bir karşı dengede test edilmelidir.
Deneğin davranışsal performansa ilişkin test sırasına göre, görüntü D, farelerden aynı anda test eden en fazla dört cihazı kontrol edebilirken, araştırmacı deneysel prosedürün fare davranışı üzerindeki potansiyel etkilerinde kesinti yapmak için zamandan ve dijitalden tasarruf edebilir. Devam eden oturum başlamadan önce A FD uygulama yazılımını çalıştırın. Fiş menüsü FD ilgili ve FD çevrimiçi olarak seçin ve adım adım ayarlanan parametre değerlerini aşağıdaki gibi ayarlayın.
Birinci adım, proje kimliği, dosyalarınızın tarihini saklamak istediğiniz klasörü belirtin. İkinci adım, oturum adı türü. Oturum kutusundaki herhangi bir kelime, referans kutusuna beyaz gürültünün ve yemek şokunun başlangıç zamanı ve süresinin yazıldığı dosyaya deney tarihi ve referans metnidir.
Dosyaya saygı metni, görseldeki saygı klasöründe, klasör önceden hazırlanmalıdır. Üçüncü adım parametre ayarları. Süre, saat ve dondurma ölçütleri gibi parametre değerlerini filmde gösterildiği gibi girin.
Dördüncü adım, konu kimliği. Konu kimliğini girin. Beşinci adım, kamera ayarları, yakalanan görüntünün parlaklığını ve kontrastını karşılaştırır.
Altıncı adım, eşik ayarları. İlk olarak, ardışık görüntülerden mesafe hareketini ölçmek için, görüntüleri siyah parçacık ve beyaz arka plana bölmek üzere ayarlanan programın eşik ana değerini ayarlayın. Ardışık görüntülerde parçacık ile ağırlık merkezi için XY koordinatlarına sahip her bir set arasındaki mesafe hareketi hesaplanır.
Ardışık görüntülerden davranış için ikinci ila majör, görüntüleri arka plan altında siyah parçacığa bölmek için ayarlanan programın x ekstra değerini varsaymak ve ardından örtüşmeyen bölgenin hangi ardışık görüntü giriş penceresi çifti arasındaki örtüşmeyen bölgelerin alan miktarını hesaplayın. Bölgenin değer miktarı üzerindeki değere ekspres ortalamayı değiştirin, fare ing davranışı gösterirken ING ağlama değerinin altında olmalıdır. Bu değerler, görüntü yorgunluğuna göre veriler, insanın kendisi tarafından o kadroyla eşleşecek şekilde ayarlanmalıdır.
Yedinci adım, alanı yakalamak için ayarlayın, araç kutusundaki dikdörtgen düğmesiyle tıkladıktan sonra yakalamak istediğiniz odayı, zeminin etrafında dikdörtgen oluşturmak için belirtti. Canlı görüntü penceresindeki oda. Sonraki seçilen oda romanı ve son olarak tam düğmesine tıklamak için ayarla düğmesine tıklayın.
Parametre ayarları tanımlandıktan sonra, görüntü analiz sisteminin ve hangi gürültü şok jeneratörlerinin bu problemlerle çalıştığını belirlemek için tarihin ilk testinden önce alıştırma fareleri kullanılarak hazırlık testi yapılmalıdır. tarak kafesini içeren tarak farelerini ses testi kasvetine bitişik bekleme kasvetine hareket ettirin ve fareleri odaya yerleştirdikten hemen sonra her bir fareyi şartlandırma odasına yerleştirin, Farelerin 120 saniye boyunca odayı tamamen keşfetmesine izin verilir. Sonra. 30 saniye boyunca işitsel bir kuyruk olarak beyaz bir gürültü sunulur ve sesin son iki saniyesinde farelere bir yiyecek şoku verilir. Bu prosedür, kuyruk ile yemek şoku arasındaki ilişkiyi güçlendirmek için seansta üç kez tekrarlanır.
Maskeler, son eşleştirmeden sonra 90 saniye boyunca haznede bırakılır. Odanın bağlamı ile pasif deneyim arasındaki ilişkiyi daha da kurmak. 480 saniye geçtikten sonra, fare ev kafesine geri döner ve kafes bekleme odasının rafına geri döner.
Her testten sonra odaları ve ızgarayı dikkatlice temizleyin. Ardından sonraki analiz düğmesine tıklayın ve oturumu test farelerinde tekrarlayın. İlgili hareketten yaklaşık 24 saat sonra kafes, farelere ses geçirmez bir bekleme tezgahı odasına devam eder.
Her test başlamadan en az 30 dakika önce bekletme tezgahı. Yazılımın uzun görüntüsü ve parametre değerlerini koşullandırmada olduğu gibi ayarlayın. Ancak, süreyi 300 saniyeye kadar ayarlayın ve bağlamsal test için dosyalanacak 35 metin seçin.
35 Dosyaya metin boş. Fareyi koşullandırma odasına yerleştirin ve başlangıç altına tıklayın. Farelerin, herhangi bir uyaran sunumu olmadan 300 saniye boyunca odayı tamamen keşfetmelerine izin verilir.
300 saniye sonra, fareleri ev kafeslerine aceleyle sokun ve odaları temizleyin. Ardından bir sonraki analiz altına tıklayın ve test farelerinin uzun D görüntüsünde prosedürü tekrarlayın ve parametre değerlerini, bu test için dosyalanacak devam eden ancak ference metnindeki gibi ayarlayın ve süreyi 360 saniyeye kadar ayarlayın. Bu, bu test için dosyalanacak bir referans metnidir.
Her fareyi üçgen hazneye yerleştirin ve Z görüntüsünün başlat düğmesine tıklayın. Ne beyaz gürültü ne de ayak şoku sunulmaz. Bu oda, yeni bir bağlam sağlayan ve devam eden oda ile ilgili farklı özelliklere sahiptir.
Bu odada tipik olarak çok fazla hareket etmeli ve davranış göstermemelidir. İlk üç dakikanın sonunda, Concho'da sunulan beyaz gürültü, farelere üç dakika boyunca sağlanır. Denetçinin sunumu sırasında, denetçi kuyruk fareleri veya 360 saniye patladıktan sonra yazılı davranış sergiler, fareleri ev kafesine geri koyar ve kafesi bekletme odasının rafına geri koyar.
Testten sonra hazneleri dikkatlice temizleyin. Ardından bir sonraki analiz altına tıklayın ve test farelerini kullanarak prosedürü tekrarlayın. Bu video, sistemin görüntüsü tarafından analiz edilen donma geçişinin, bir insan gözlemci tarafından ölçülen düşünceyle daha yakından ilişkili göründüğünü göstermektedir.
Gözlem, her testte görüntü fiziği ile ölçülen kiralama yüzdesinin, insan gözlemci tarafından yüksek oranda ilişkili veya düşünce puanı olduğunu gösteren ayrıntılarla doğrulandı. Ayrıca bu rakam, insan gözlemleri ile ölçülen donma yüzdeleri ile görüntüdeki sistemin görüntüsü arasındaki farkların en küçük olduğunu göstermektedir. Bu sonuçlar, sistemin görüntüsü ile ölçülen donma yüzdesinin insan gözlemi ile elde edilenlere benzer olduğunu ve Z görüntüsü ile sebep miktarını ölçme doğruluğunun yüksek olduğunu göstermiştir. Tamam.
Nasıl beğendin? Testte gördüğünüz gibi standart davranış analizi kolaylıkla yapılabilir. Sistemin görüntüsünü kullanmak için bazı ipuçları ve önemli noktalar var, bu yüzden ika'ya sormama izin verin. Tamam.
İlk olarak, sistem görüntüsünün test prosedürü hakkında ne hissettiniz? Test prosedürümüzün çok basit olduğunu ve sistemin görüntüsünün mantığı, davranışı doğru ve hızlı bir şekilde ölçmek için yararlı bir araç olduğunu düşünüyorum. Önceden eğitim almış bir yazılım programını herkes kolayca kullanabilir Sonuç olarak, bu sistem kısa sürede aylarca hafızalarını değerlendirmek için kullanılabilir, bu da bize zaman kazandıracak ve daha sonra tasarruf sağlayacaktır.
Anladım. O zaman testi yaparken dikkat etmemiz gereken bir şey var mı? Evet, çünkü operatör, davranışı tam olarak ölçmek için en keskin görüntüyü elde etmenin önemli olduğunu ve bu nedenle kamera uzunluğunu ve yazma şeylerini ayarlamanız gerektiğini belirtiyor.
Ayrıca program çalışmasında, davranışın gerekçe olarak nitelendirilip nitelendirilemeyeceğini değerlendirmek için cinsel değerleri ve neden kriterlerini dikkatli bir şekilde belirlemeniz gerekir. Sonucun hemen olması önemlidir, program insan gözlemi ile düşünüldüğü gibi Mevcut sonuçta gösterildiği gibi. Tamam. Gördüğünüz gibi, bu makale olabilir, test prosedürü ve yazılım programının kullanımı ile ilgili ayrıntılı bilgi sağlar.
Umarız bu makale olabilir. Test anlayışınızı teşvik edin ve protokolün standardizasyonuna katkıda bulunun.
Bu makale, farelerde korku öğrenme ve hafızasını değerlendirmek için bir video analiz sistemi kullanarak bağlamsal ve ipuçlu korku koşullandırma testi için bir protokol sunar. Çalışma, sinirbilim araştırmalarında davranışsal değerlendirmelerin güvenilirliğini artırmak için metodolojileri standartlaştırmayı amaçlamaktadır.
Standardized behavioral phenotyping is critical for de-risking target validation in neuroscience drug discovery. Automated video analysis systems improve data reliability and reproducibility, reducing variability in fear conditioning assays used to evaluate cognitive phenotypes in psychiatric disorder models. This supports predictive confidence in early discovery by enabling consistent, quantitative assessment of learning and memory mechanisms.
The method integrates into the discovery continuum from target hypothesis testing through lead optimization, where reliable cognitive phenotyping informs target selection and compound prioritization.