29 Haziran 2014
Biz küçük bir metalik klip kullanarak çıkan aortun daralması ile Wistar sıçanlarda basınç aşırı ve sol ventrikül hipertrofisi oluşturmak için adım adım bir prosedür açıklanmaktadır. Bu model yaygın olarak kalp büyümesi sırasında yeniden değişiklikleri incelemek için ve bu değişikliklerin regresyonu için stratejiler belirlenmesi ve değerlendirilmesi için kullanılmaktadır.
Merhaba, ben Kardiyovasküler Hastalık Biyolojisi Bölümü Raj Gandhi, Biyoteknoloji Hindistan merkezinden Aji Kumar GS. Process karta'nın rehberliğinde çalışıyorum ve bu videoda sıçanlarda I OTE inşasının artması için adım adım bir prosedür göstereceğiz. Laboratuvarımızda, kardiyak hipertrofi ve ilerleyici kalp yetmezliğinde patofizyolojiyi ve altta yatan moleküler mekanizmaları incelemek için bu yıllık modeli kullanıyoruz.
Bu modeli, sol kalp yetmezliği ile ilişkili pulmoner hipertansiyonu incelemek için de kullanıyoruz. Öyleyse başlayalım Ve hayvanı estetize edin ve sırtüstü pozisyonda tutun. İki trakeal halka arasında yarıya kadar bir kesi yaparak ve sırayla bir kemirgen ventilatörüne bağlı olan trakeal kanülü yerleştirerek endotrakeal entübasyon gerçekleştirin.
Daha sonra ikinci ve üçüncü kaburgalar arasındaki sol göğüs bölgesinde yaklaşık iki santimetre uzunluğunda bir cilt kesisi yapın ve kas katmanlarını ayırın. İotanın yükselen kısmının iota daralmasını görselleştirmek için, bir aplikatör ile küçük boyutlu bir titanyum klips kullanılarak gerçekleştirilmeli, kaburgalara karşı çıkılmalı ve daha sonra kas katmanlarını ve cildi kesintili bir şekilde dikilmelidir. Endotrakeal tüpün çıkarılmasından sonra, trakea kasını, katmanlarını ve cildi kapatın ve hayvanın iyileşmesine izin verin.
İşlem, kurumsal hayvan etik kurulundan onay alındıktan sonra yapıldı. Ameliyattan önce ameliyat alanını %70 alkolle dezenfekte edin ve ısıtma yastığını aseptik olarak tutun. Kemirgen ventilatörünü ve anestezi ünitesini ameliyat için hazır tutun.
Cerrahi aletleri otoklavlayarak sterilize edin. Asendan I otik daralmada kullanılan başlıca cerrahi aletler steril eldivenler, başparmak forsepsleri, makaslar, cerrahi bıçaklar, küçük boyutlu titanyum klipsler ve kanama durumunda gazlı bezli aplikatör arter forsepsleri, iğne tutucu prolin sütür materyali, örgülü ipek sütür ve iğnedir. Fareyi 24 saat boyunca bir antibiyotik şemsiyesi altında tutun ve fareleri yüzde yüz oksijenle karıştırılmış% 3 ISO flor içeren bir indüksiyon odasında estetize edin.
Sıçanın boyun çizgisinden ve sol göğüs bölgesinden kürkü çıkarın ve hayvanı üstte tutun. Bir ısıtma yastığı. Başarılı anestezinin doğrulanması için anesteziyi %1,5 ISO florür kontrol pedalı refleksi ile koruyun.
Cerrahi alanı povidon iyot solüsyonu ve ardından% 70 alkol ile dezenfekte edin. İşlemi üç kez tekrarlayın. Hayvanın üzerine steril bir örtü yerleştirin ve sadece ameliyat bölgesini açığa çıkarın.
Soluk borusuna paralel bir cilt kesisi yapın ve alttaki dokuyu ayırın. Trakeayı ortaya çıkarmak için. Soluk borusunun altına bir ipek iplik bağı sürün ve yavaşça yukarı doğru kaldırın.
İki kıkırdak halkası arasında yarıya kadar bir kesi yapın ve trakeal kanülü yerleştirin. Trakeal kanülü bir kemirgen ventilatörüne bağlayın. Ventilatör, dakikada 50 nefeslik bir solunum hızına ayarlanmalıdır.
Tidal hacim 1.7 ml ve inspirasyon süreleri 0.6 saniye. Sol göğüs bölgesinde, ikinci ve üçüncü kaburgalar arasında bir kesi yapın. İnterkostal kaslar katman katman ayrılmalıdır.
Kaburgalar arasındaki kesi yapılırken akciğerlerde herhangi bir yaralanma olmamasına dikkat edilmelidir. Kaburgaları geri çektikten sonra, yağ dokusunu nazikçe manipüle ederek iotanın yükselen kısmını dikkatlice yerleştirin. Ok, iota'nın artan kısmını gösterir.
Bir aplikatör yardımıyla yükselen iotanın etrafına küçük boyutlu bir titanyum klips yerleştirin, böylece iota'yı Orijinal çapın %50 ila %60'ı kadar daraltın. I otik Daralmayı takiben, kalbi yeniden konumlandırın ve prolin sütür ile kaburgaları yaklaşık olarak Eşzamanlı olarak Akciğerleri yeniden şişirmek için ventilatörü yaklaşık iki ila dört saniye duraklatın. Kasları prolin ile katmanlar halinde gönderin, ardından kesintili bir Sütür düzeninde ipek dikişlerle cildi yayınlayın.
Ventilatörde ayarlanan solunum hızını kademeli olarak azaltın ve hayvanın spontan nefes alıp almadığını gözlemleyin. Spontan ve düzenli solunum yeniden sağlandıktan sonra Trakeal kanülü çıkarın. Artık anestezi burun konisi ile sürdürülmektedir.
Trakea halkaları arasındaki açıklığı proline dikişlerle kapatın. Kas tabakalarını ve cildi sırasıyla prolin ve ipek dikişlerle kapatın. Postoperatif analjezi enjeksiyonu olarak Cerrahi alana povidon iyot solüsyonu uygulayın.
Tremadol intraperitoneal salin solüsyonu intraperitoneal olarak uygulanabilir. Dehidrasyon belirtileri ortaya çıkarsa, hayvan iyileştikten sonra anestezi kapalı konuma getirilir, kafese kaydırılır ve yedi gün boyunca içme suyuyla ağızdan karıştırılarak amoksisilin uygulanır. Yükselen iotanın daralmasıyla üretilen aşırı basınç yoğunluğu, iki boyutlu ekokardiyografi ile I otik daralma bölgesi boyunca basınç gradyanı gözlemlenerek belirlenebilir.
Şeklin sol paneli, 63 mm cıva basınç gradyanına sahip aort daralmış sıçanın Doppler ekosunu göstermektedir. Ve sağ panel, iota boyunca önemli bir basınç gradyanı olmayan sahte kontrollü bir fareyi temsil eder. Üst panelde sıçanlarda, ameliyattan sekiz hafta sonra sol ventrikülün M mod ekokardiyografisi gösterilirken, alt panelde sham kontrol gösterilmiş, intraventriküler septal kalınlık ve sol ventrikül arka duvar kalınlığı anlamlı olarak artmış, sol ventrikül iç çapı ise I otik daralma uygulanan sıçanlarda anlamlı olarak azalmıştır.
Sahte olarak ameliyat edilen kontrol grupları ile karşılaştırıldığında, sahte ameliyat sonrası sekiz haftalık cerrahi sonrası artan I otik daralma uygulanan sıçanlarda, sahte ameliyat edilen kontrol gruplarına kıyasla önemli bir kardiyak hipertrofi gözlenmiştir. Merhaba, ben Raj. Burada, sıçanlarda artan iotanın daralması prosedürünü açıklıyoruz.
Bu modelin temel avantajı, kardiyak hipertrofi ve kalp yetmezliğinin kademeli olarak gelişmesidir. Kronik hipertansiyondaki klinik duruma benzer şekilde bu annede de iotanın daralması için Titanik klips uygulamasında dikkatli olunmalıdır. En önemlisi de Titanic klips uygulamasının sol 20 artı stres için kritik iota daralması oluşturacak kadar yeterli olması, ancak akut elektronik yetmezlik ve pulmoner ödem oluşturacak kadar şiddetli olmaması ve kaburgalar arasında kesi yapılırken akciğerlerde herhangi bir yaralanma olmaması için de dikkatli olunması gerektiğidir.
Akciğerleri yeniden şişirmek için ventilatörler kaburgalara karşı çıkarken üç ila dört saniye boyunca asılı kalmalıdır. Bu videoyu izlediğiniz için teşekkür ederiz ve deneylerinizde iyi şanslar.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, asendan aorta konstriksiyonu yoluyla Wistar sıçanlarda basınç aşırı yüklemesi ve sol ventrikül hipertrofisi indüklemek için adım adım bir prosedürü açıklamaktadır. Bu model, kardiyak hipertrofiyi araştırmak ve potansiyel regresyon stratejilerini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılmaktadır.
Sıçanlarda asendan aort konstriksiyonu, basınç aşırı yüklemesine bağlı gelişen kardiyak hipertrofi için güçlü bir preklinik model sunarak, kardiyovasküler ilaç keşfinde mekanistik risk azaltma ve hedef doğrulamaya olanak tanır. Bu model, kronik hipertansiyonda gözlemlenen hipertrofi ve kalp yetmezliğinin kademeli başlangıcını yeniden ortaya koyarak translasyonel araştırmalar için öngörülebilir güvenilirlik sağlar. Tekrarlanabilirliği ve kantitatif çıktıları, onu portföy önceliklendirme ve erken aşama terapötik hipotez testleri için değerli kılmaktadır.
Bu model, erken dönem mekanistik çalışmalar ile kardiyovasküler ilaç adayları için translasyonel doğrulamayı birbirine bağlayarak, keşiften preklinik aşamaya kadar olan sürekliliğe entegre olur.