Adenilat siklaz uyuşturucu kaynaklı Sensitizasyonu: Küçük Molekül ve siRNA Tarama Uygulamaları için Deney düzene ve minyatür

Bu prosedürün genel amacı, kimyasal kütüphane taraması da dahil olmak üzere yüksek verimli tarama uygulamaları için tek günlük hücre bazlı döngüsel A MP duyarlılaştırma testi geliştirmektir. Bu, önce önceden hazırlanmış tahlillere hazır kriyoprezerve hücrelerin çözülmesi ve kaplanması ile gerçekleştirilir. İkinci adım, hücrelere test bileşikleri veya antagonistlerin eklenmesi ve ardından adenil siklaz duyarlılaştırıcı ilacın eklenmesidir.

Daha sonra, siklik A MP birikimini uyarmak için fosfodiesteraz inhibitörü varlığında adenilil siklaz aktivatörü eklenir. Son adım, homojen zamanla çözülen floresan veya HTRF döngüsel A MP tespiti ile reaksiyonu söndürmek, lizis tamponunda reaktifler ve ardından floresanı ölçmektir. Sonuç olarak, kriyoprezerve hücrelerin ve HTRF döngüsel A MP teknolojisinin kullanılması, küçük molekül taraması için tek günlük bir duyarlılaştırma testinin yürütülmesine izin verir.