10 Nisan 2014
Biz tekrar elde edilebilirliğini arttırmak için, sol ön inen arter (LAD) üzerine ligasyon konumlandırma daha fazla netlik sağlar fare modellerinde miyokard infarktüsü (MI) simüle etmek için deneysel iskemi / reperfüzyon (I / R) hasarı ikna etmek için bir cerrahi yöntemi tanıtmak Farelerde MI deneyler.
Bu prosedürün genel amacı, iskemi reperfüzyon hasarı oluşturmak için kalbin bir kısmına kan akışını tıkamaktır. Bir miyokard enfarktüsünü simüle etmek için, bu önce sol ön inen arteri veya LAD'yi ortaya çıkarmak için bir torakotomi yapılarak gerçekleştirilir. İkinci adımda, kan akışını durdurmak için LAD'ın etrafına bir dikiş bağlanır.
Daha sonra iskemik bir dönemden sonra dikiş çıkarılır ve arter kanla yeniden perfüze edilir. Son aşamada cerrahi kesi kapatılır. Sonuç olarak, miyokard enfarktüsünün şiddeti, serum biyobelirteç seviyelerinin analizi ve kalp dokusunun histolojisi ile ölçülebilir.
Malardi enfeksiyonunu simüle etmek için mevcut tüm yöntemimizin ana avantajı, LED'i bulmanın ve ipliği doğru pozisyona getirmenin kolay olmasıdır. Görsel gösterim çok önemlidir çünkü manipülasyonları öğrenmek çok zordur ve yazılı açıklamalar bu manipülasyonların karmaşıklığını iyi bir şekilde aktarmaz. Bu oldukça zor bir prosedürdür ve genel olarak konuşursak, insanlar bu konuda deneyimsizdir İşlem sırasında başlarsa LED'i tanımlamakta veya kanamayı kontrol etmekte sorun yaşarlar.
Çıkarımlardan biri, bu yaklaşımın, terapötik bileşiklerin miyokard infarktını tedavi etmedeki etkinliklerini test etmek için kullanılabileceğidir. Etkili bir şekilde ölçebilmek için bu yaklaşımlarda bir hayvan modelinin kullanılması gerektiğinden, cerrahi bir platforma en az 10 santimetre uzunluğunda iki sıcak ipek dikişle başlıyorum. Daha sonra dikişi anestezi uygulanmış farenin ön üst kesici dişlerinin etrafına sarın, fareyi gergin bir şekilde çekin ve ardından kuyruğu platforma ve bacakları hayvanın vücudunun yanlarına bantlayın.
Traş edilmiş cerrahi bölgeleri Betadine ve alkol ile temizledikten sonra, platformu fare kafası tezgahın sonuna bakacak şekilde yerleştirin ve cilde 0,5 santimetre medyan servikal bir kesi yapın. Trakeanın kas altında görülebildiği Sterno OID kasını ortaya çıkarmak için tiroid bezinin loblarını isuslarında ayırın. Ardından, 18 kalibrelik bir trokarın iç iğnesini çıkarın ve ardından bir çift kavisli forseps ile fare dilini hafifçe yukarı doğru hareket ettirmek için bir elinizi kullanın.
Servikal deri kesisinden trakeayı bulun ve ardından diğer elinizle trokar entübasyon tüpünü trakeanın içinde görülene kadar nazikçe yerleştirin. Şimdi, entübasyon tüpünü ventilatöre bağlamak için modifiye edilmiş bir Y şekli konektörü kullanarak, hayvan için yapay ventilasyon sağlamak için oksijende% 2 izofluran havalandırılan bir hayvan solunum cihazını dakikada 0,4 litrelik bir akış hızına ayarlayın, trakeal tüpün doğru konumlandırılması simetrik göğüs genişlemesi değerlendirilerek doğrulanabilir. Kuyruktaki bandı çıkarın ve sonraki ameliyat için sağ lateral dekübit pozisyonuna getirmek için fareyi hafifçe çevirin.
Daha sonra torakotomiyi gerçekleştirmek için kuyruğu ve bacakları tekrar bantla platforma sabitleyin. İlk olarak, sol ön bacağın vücutla birleştiği yönde sol sternal sınırdan yaklaşık bir santimetre uzunluğunda ve iki milimetre uzakta eğik bir kesi yapın. Bacak ve vücudun birleştiği yerin yaklaşık bir ila iki milimetre altında.
Yüzeysel torasik ven bu bölgeye yakındır ve kesi, insizyonun yan ucu damara kadar çıkacak, ancak damarı kesmeyecek şekilde yapılmalıdır. Altındaki kaburgaları ortaya çıkarmak için göğüs kasını kesin. Geminin kazara yaralanmasını önlemek için özen göstermek.
Daha sonra, iç torasik arterin bulunduğu sternal sınırdan en az iki milimetre uzakta, üçüncü interkostal boşlukta altı ila sekiz milimetrelik bir kesi ile göğüs boşluğunu açın ve artere zarar vermemeye dikkat edin. Ardından, ev yapımı göğüs ekartörlerini insizyona yerleştirin ve insizyonu sekiz ila 10 milimetre genişliğinde olana kadar açmak için yavaşça geri çekin. Akciğerden kaçınmaya özen göstererek, kalp artık akciğerlerin altında kısmen görünür olmalıdır.
Perikardı nazikçe kaldırmak, ayırmak ve ardından dokuyu ekartörün arkasına kaydırmak için kavisli forsepsleri kullanın. Şimdi, kalp duvarının ortasından kalbin tepesine yakın bir yerden sol ventrikülden aşağı doğru uzanan ve kalbin yüzeyinde parlak kırmızı ve güçlü bir şekilde titreşen sol ön inen koroner arteri veya LAD'yi bulmak için bir diseksiyon kapsamı kullanın. Kardiyak ven bazen LAD ile karıştırılır, ancak uygun aydınlatma iki damarı ayırt etmeye yardımcı olabilir.
Aydınlatma çok parlaksa, kaplar arasındaki renk farklılıklarını görselleştirmek zor olabilir. Daha sonra sol atriyum ile sol ventrikül arasına bir ila iki milimetrelik bir pamuk parçası yerleştirin. Sol atriyumu kaldırmak ve LAD'ı açığa çıkarmaya ve konumunu netleştirmeye yardımcı olmak için, kalbi yerinde tutmak ve ligatürü bağlamayı basitleştirmek için sol oracle'ı tanımlamak için pulmoner gövdeyi kullanın, amaçlanan ligasyon noktasının hemen altına, sol Oracle'ın ucundan yaklaşık iki milimetre daha düşük bir basınç uygulayın.
Daha sonra, sol ventrikül odasına girmemeye veya LAD'ye zarar vermemeye dikkat ederek, LAD'ın altından altı büyük bir ipek sütür geçirmek için konik bir iğne kullanın. Sütürle gevşek bir çift düğüm yapın ve iki ila üç milimetre çapında bir halka bırakın. Ardından, halkanın içinden iki ila üç milimetre uzunluğunda bir PE 10 boru parçası yerleştirin ve halkayı arter ve borunun etrafına sıkın.
Karıncık duvarına zarar vermemeye dikkat ederek ek bir kayma düğümü bağlayarak halkayı sabitleyin. Sol ventrikülün ön duvarında, ligasyondan birkaç saniye sonra ortaya çıkması gereken bir soluk veya renk görünümünü kontrol ederek LAD'ın tıkanmasını onaylayın. Daha sonra ekartörü çıkarın ve iskemi döneminden sonra yarayı geçici olarak kapatmak için cildi bir bulldog kelepçesi ile sıkıştırın, bulldog kelepçesini çıkarın ve bağı ortaya çıkarmak için göğüs ekartörlerini yerleştirin.
Ardından düğümü çözün ve PE 10 borusunu çıkarın 15 ila 20 saniye sonra, sol ventrikülün ön duvarında pembe kırmızı rengin geri dönüşünü gözlemleyerek reperfüzyonu onaylayın. Son olarak, göğüs boşluğunu kapatmak için, insizyon üçüncü interkostal boşlukta dört adet ipek sütür ile kapatıldı. Dikiş düğümlerini bağlarken akciğerleri dikişten uzak tutmaya özen göstermek.
Göğüs boşluğunda sıkışabilecek havayı en aza indirmek için iğne tutucu ile göğse hafif bir baskı uygulayın. Daha sonra, göğüsteki tüm kas katmanlarını kapatmak için sürekli dört otomatik ipek sütür kullanın ve ardından cildi başka bir sürekli sütürle kapatmak için naylon sütürler kullanın. Dikiş tamamlandığında, oksijen akmaya devam ederken izofluran akışını durdurun.
Daha sonra, normal bir solunum paternine dönene kadar hayvanı dikkatlice izledikten sonra, herhangi bir ağız boşluğunun aspirasyonunu önlemek için tüpü yavaşça çıkararak fareyi ekstübe edin. Nadas mavi boya salgı uygulaması, LAD tıkanıklığının meydana geldiği kalp bölgesinin çözülmesini sağlarken, mavi boya ile boyanmayan kalpler 24 saatlik reperfüzyon infarktüsü sonrası sadece enfarktüs alanını gösterir. Beyaz renkli alanlar, kırmızı riskli alanlardan ve risk altında olmayan alanlardan ayırt edilebilir olmalıdır.
Mavi enfarktüs boyutları iskeminin süresine bağlıdır. Daha da önemlisi, iskemi ve reperfüzyon dışındaki tüm cerrahi işlemlerin uygulandığı sahte ameliyatlı hayvanlarda kardiyak troponin göz düzeyleri miyokard infarktüsü uygulanan hayvanlara göre daha düşüktür. Bu, sahte cerrahinin önemli bir kardiyak patoloji oluşturmadığını, iskemi reperfüzyon hasarının ise miyokard enfarktüsü için yaygın olarak kullanılan bu biyobelirteçin yükselmesi için yeterli olduğunu gösterir.
Bu videoyu izledikten sonra, malardi enfeksiyonunu simüle etmek için farelerde hayatta kalan bir ameliyatın nasıl yapılacağını iyi anlamış olmalısınız Bu prosedürü takiben, histolojik, kalbin boyanması gibi diğer yöntemler, enfarktüs boyutunu ve farklı tedavilerin etkinliğini belirlemek için yapılabilir. Bu, ağrı ve sıkıntıyı düzgün bir şekilde yönetmeniz gereken invaziv bir prosedür olduğu için hatırlamak önemlidir ve bu ağrıyı yerel yönergelere, kurumsal yönergelerinize ve ulusal yönergelere uygun olarak analjezikler sağlayarak yönetmek önemlidir. Bu deney için hatırlanması gereken önemli bir şey, onu özel sorunuzu ele alacak şekilde tasarlamaktır.
Örneğin, ciddi bir enfarktüs geçirmeniz gerekiyorsa, ameliyat sırasında iskemik dönemi uzatmanız gerekebilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, fare modellerinde iskemi/reperfüzyon (I/R) hasarını indüklemek için cerrahi bir yöntem sunar ve miyokard enfarktüsünü (MI) simüle eder. Teknik, sol anterior descenden arter (LAD) üzerinde ligasyonun kesinliğini artırır ve MI deneylerinin tekrarlanabilirliğini geliştirir.
Reproducible murine models of myocardial ischemia-reperfusion (I/R) injury are essential for preclinical cardiovascular drug discovery and mechanistic de-risking. This precise LAD ligation protocol enables consistent infarct induction, supporting robust target validation and translational biomarker assessment. Enhanced reproducibility reduces biological ambiguity and optimizes resource allocation across early discovery and preclinical pipelines.
This murine I/R model bridges early discovery, lead identification, and preclinical validation for cardiovascular programs.