5 Mart 2014
Bu çalışmanın genel amacı, bir perakende deli bir ortamda gıda kaynaklı patojen Listeria monocytogenes potansiyel çapraz kontaminasyon mekanizmasını göstermekti. Bu metodoloji, patojen kirlenme izlemek için farklı ortamlarda çeşitli tatbik edilebilir.
Bu prosedürün genel amacı, gıda kaynaklı patojen listeria monocytogenes'in bir şarküteri ortamındaki potansiyel çapraz kontaminasyon mekanizmasını göstermektir. Bu işlem, öncelikle perakende ortamını simüle etmek için temsili bir şarküteri mutfağı tasarlanarak gerçekleştirilir.
İkinci adımda, şarküteri eti floresan bir bileşik ile inoküle edilir ve ardından gönüllülerden kaplanmış eti dilimlemeleri, paketlemeleri ve buzdolabında saklamaları istenir. Son adımda, potansiyel çapraz kontaminasyon, floresan bileşiğin siyah ışık altında gözlemlenmesiyle takip edilecektir. Nihayetinde, perakende şarküteri ortamında çapraz kontaminasyonun nasıl gerçekleştiğini göstermek için floresan bileşiği miktar olarak belirlemek amacıyla spektrometri kullanılabilir.
Bu tekniğin mikroorganizma kullanan yöntemlere göre temel avantajı, floresan bileşiğin spektral fotometre ile hızlı bir şekilde miktarının belirlenebilmesidir. Bu yöntem perakende sektörüne dair içgörü sağlayabilse de, gıda güvenliği küçük çiftlikler, gıda işleme tesisleri ve diğer gıda hizmeti işletmeleri gibi diğer sistemlere de uygulanabilir. İşleme başlamadan önce, prosedür sırasında kullanılmak üzere temiz eldivenleri ve %70 ethanol'ü tezgaha yerleştirin.
Ardından, şarküteri etini yaklaşık 100 milimetre kalınlığında üç örneğe bölmek için temiz bir bıçak ve kesme tahtası kullanın. Daha sonra, bir örneği taze hazırlanmış floresan tozla eşit şekilde kaplamak için hafif nemli, temiz bir sünger kullanın. Sonra, tüm örnekleri streç filmle sarın ve bant kullanarak floresan tozla kaplı örneği a, kalan iki örneği ise b ve c olarak etiketleyin.
Ardından numuneleri 4 °C'ye yerleştirin ve dilimleme alanının etrafına 13 W ampullere sahip siyah kompakt floresan lambalar monte edin. Süpürme işlemi için şablon olarak kullanılacak 5x5 cm boyutunda bir alüminyum folyo kesin ve aynı zamanda 1315 mL'lik tüpleri 6 mL %95 etanol ile doldurun. Daha sonra, mock deli alanının tüm bölgelerini aynı anda gözlemlemek için stratejik konumlara üç adet video kamera yerleştirin.
Şarküteri etinin floresan tozla kontaminasyonunu takip etmek için, işlem sırasında katılımcıları videoya çekmek üzere kameraları açın ve sahte şarküterinin siyah floresan ışık altındaki öncesi fotoğrafını çekin. Ardından, her katılımcının şunları yapmasını sağlayın. İlk olarak, A etiketli et örneğini buzdolabından çıkarın.
Ardından, plastik sarmalı saklayarak eti paketinden çıkarın ve örneği dilimleyicinin taşıyıcı tepsisine yerleştirin. Örneği et tutucu ile sabitleyin, ardından dilimleyiciyi açın ve dilimleme indeks düğmesini ikiye ayarlayın. Sonra, beş parça eti dilimleyip şarküteri kağıdının üzerine alın, ardından gücü kapatın ve et tutucuyu serbest bırakın.
Et dilimlerini A olarak etiketlenmiş plastik bir torbaya yerleştirin; ardından, maket mutfağın fotoğrafı çekildikten sonra gösterildiği gibi B ve C numunelerini dilimleyerek et numunesini tekrar sarın ve buzdolabına geri koyun. Floresan toz kontaminasyonunu belirlemek için, görüntüde belirtilen her bir alanın üzerine steril alüminyum folyo şablonu yerleştirin. Ardından, her alanı %95 Ethanol ile ıslatılmış steril bir kalsiyum aljinat pamuklu eküvyonla silin ve her bir pamuklu eküvyonu %95 Ethanol içeren tüplerden birine yerleştirin.
Her tüpü iyice vorteksleyin ve ardından içerikleri ayrı cam küvetlere aktarın. Her sürüntü örneğinin absorbansını 370 nanometrede ölçün ve ardından her alandan sürülen floresan toz miktarını hesaplamak için formülü kullanın. Son olarak, sahte masanın çeşitli yüzeylerine kaç kez dokunulduğunu belirlemek için videoyu izleyin.
Bu temsilci deneyde, şarküteri dilimlerinin hazırlanması sırasında et dilimleme makinesinin çeşitli yüzeylerine yapılan el temaslarının ortalama frekansını analiz etmek için gönüllüler videoya kaydedilmiştir. Daha sonra farklı izleyiciler videoyu analiz etmiş ve el temaslarının frekansının ortalaması alınmıştır. Veriler, beklendiği üzere, et tutucu, et sarıcı, şarküteri eti ve şarküteri kağıdının katılımcı başına ortalama sekiz ila 14 temas ile en yüksek el teması oranlarına sahip olduğunu göstermektedir.
Ardından buzdolabı, tutma masası, et tutucu, dilimleyici bıçağı ve taşıma tepsisinin çeşitli bileşenleri gibi yüzeylerden sürüntü alındı ve dilimleyicinin çeşitli bileşenleri ile temsili mutfaktaki floresan toz miktarı belirlendi. Beklendiği üzere, az önce gösterildiği gibi; sonuçlar, en yüksek kontaminasyon seviyelerinin buzdolabı, tutucu, et tutucu ve arka plakalarda bulunduğunu göstermiştir.
Bu prosedür uygulanırken, görüntülerin senkronize olduğundan emin olmak için video kameralarının aynı anda açılmasının önemli olduğu unutulmamalıdır. Bu yöntem, çapraz kontaminasyonun nasıl gerçekleştiği gibi gıda güvenliği alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir ve sonuçlarımıza dayanarak etkili eğitim uygulamaları geliştirilebilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu çalışma, perakende şarküteri ortamında gıda kaynaklı patojen Listeria monocytogenes'in potansiyel çapraz kontaminasyon mekanizmasını ortaya koymaktadır. Patojen kontaminasyonunun takibine olanak sağlamak amacıyla, perakende ortamını simüle eden temsili bir şarküteri mutfağı tasarlanmıştır.
Simüle edilmiş perakende ortamlarında mikrobiyal kontaminasyonun kantitatif takibi, gıda güvenliği protokollerindeki risklerin azaltılması ve kontaminasyon kontrol stratejilerinin doğrulanması için uygulanabilir içgörüler sağlar. Bu yaklaşım, Ar-Ge ekiplerinin yüksek riskli temas noktalarını belirlemesine ve müdahale stratejilerini optimize etmesine olanak tanıyarak, kontaminasyonun azaltılmasına yönelik öngörücü güveni destekler. Bu metodoloji, gıda güvenliği teknolojisi geliştirme süreçlerindeki portföy kararları ve sektörler arası kontaminasyon risk değerlendirmesi için doğrudan uygundur.
Bu kontaminasyon izleme yöntemi, kontaminasyon mekanizmalarının erken aşamadaki keşfinden, gıda güvenliği Ar-Ge süreçlerindeki analiz geliştirmeye ve translasyonel doğrulamaya kadar olan tüm aşamaları entegre etmektedir.