10 Temmuz 2014
Fare modelleri, davranışsal sinirbilim çalışmalarında giderek daha popüler hale geldi. Modeller ilerledikçe, fareye özgü hassas davranışsal ölçümler geliştirmek önemlidir. Bu protokol, fare vuruş modellerinde kullanılmak üzere yetenekli bir motor görev olan Makarna Matrisine Ulaşma Görevini tanımlar.
Bu prosedürün genel amacı, telafi edici uzuv kullanımının davranışsal etkilerini ve bir fare inme modelini değerlendirmektir. Bu, ilk olarak, şekillendirme prosedürleri sırasında farelerin her iki uzuvla ulaşmasına izin vererek tercih edilen ulaşma uzvunun belirlenmesiyle gerçekleştirilir. İkinci adım, makarna matrisi ulaşma görevi üzerinde sadece tercih edilen ulaşma uzvunu eğiterek motor beceriyi oluşturmaktır.
Daha sonraki telafi edici uzuv kullanımı, farelerin makarna matrisi üzerinde daha az etkilenen uzvu kullanmaları için eğitilmesiyle öğretilir. Tercih edilen uzanma uzvuna kontralateral tek taraflı iskemik yaralanmadan dört gün sonra başlayan göreve ulaşma. Son adım, daha az etkilenen uzuv eğitiminin inmeden etkilenen uzvun fonksiyonel sonucu üzerindeki etkisini değerlendirmektir.
Sonuç olarak, etkilenen uzvun bozulmuş fonksiyonel sonucu, birkaç günlük test boyunca başarılı erişimlerin sayısında bir azalma ile gösterilir. Bu yöntem, davranışsal müdahalelerin fonksiyonel sonuç üzerindeki etkileri de dahil olmak üzere temel inme araştırmalarındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Genel olarak, bu yönteme yeni başlayan bireyler, farelere bu son derece yetenekli görevi öğretmek için harcanan zaman ve hastalar nedeniyle mücadele edeceklerdir.
Bunun yararı, bu testin duyarlılığının diğer duyusal motor testlerininkinden daha fazla olmasıdır. Farelerde. Pişmemiş CAPI makarna parçalarını bir tıraş bıçağı kullanarak keserek işleme başlayın.
Daha sonra makarna parçalarını makarna matrisine yerleştirin. Bir fareyi, her biri beş ila 10 dakikalık üç seans boyunca, önüne tam bir makarna matrisi yerleştirilmiş ve erişimi şekillendirmek için yemek için altta birkaç parça makarna ile test odasına alıştırın. Fareyi, yerleşim eğitiminde olduğu gibi, önünde tam bir makarna matrisi olacak şekilde test odasına yerleştirin.
Her uzuv ile erişim sayısını kaydedin ve sağ ve sol uzuv ile erişim sayısını belirtin. Ayrı ayrı. Bir uzanmayı, bir uzvun uzanma açıklığından uzatılması olarak tanımlayın, öyle ki bilek odanın düzlemini kırar ve dört pençeyi odanın dışında görünür hale getirir. Şekillendirme seansları sırasında erişimin makarnaya doğru yönlendirilmesi veya temas etmesi gerekli değildir.
Fareyi, hangisi gerçekleşirse, haznede en fazla 10 erişim veya 10 dakika ile sınırlayın. İlk olarak, fareyi ulaşmaya teşvik etmek için. Ulaşan açıklıktan haznenin hemen içinde birkaç parça makarna tutun.
Fare koklama veya ısırma gibi ilgi gösterdiğinde makarna parçalarını dışarı çekin, böylece geri çekilen makarna parçalarının peşinden uzanmaya teşvik edin. Fareler kuru makarnaya ilgi göstermezlerse, makarnanın uçları küçük bir bardak ılık suda daha lezzetli hale getirmek için ne olur. Şekillendirme seansları aynı zamanda uzuv tercihini belirlemek için de kullanılır.
Bir fare, günlük erişimlerinin en az %70'ini tek bir uzuvla sergilediğinde, bu dört uzuv tercih edilen uzuv olarak tanımlanır. Önünde yarım dolu matris olacak şekilde test odasına bir fare yerleştirin. Fareyi, tercih edilen uzuvun yalnızca kontralateral matrisinin işaretini doldurarak yalnızca tercih ettiği uzuvla ulaşması için eğitin.
Eğitimin bu aşaması sırasında, bu uzuvla ulaşma girişimlerini caydırmak için matrisin daha az etkilenen uzuvlara karşılık gelen kısmını doldurulmamış bırakın. Farenin makarna parçalarını hedeflemeyi ve kırmayı başarılı bir şekilde öğrenmesine yardımcı olmak için günde bir kez, 15 dakikalık veya 100 erişim eğitim seansı uygulayın. Erken antrenman seansları sırasında, makarna parçaları matrisin içindeyken üzerine az miktarda baskı uygulayın ve başka bir makarna parçasını hafifçe, arkada ve hedeflenen hedefe dik olarak tutun.
Bu küçük miktardaki destek, ince makarnayı stabilize etmeye yardımcı olur ve farenin kavraması daha kolaydır. Başarılı erişimler, farenin diyafram açıklığından ulaşmasını gerektirir. Bir parça makarna alın, makarna parçasını kırın ve matristen çıkarın.
Maksimum 100'e kadar toplam erişim sayısını ve başarıyla kırılan makarna parçalarının sayısını ve yerini kaydedin. Bu prosedürde. Daha az etkilenen uzuvu, tercih edilen ulaşma uzuvunun kontralateral motor korteksine iskemik hakaretten dört gün sonra başlayarak eğitin.
Ameliyat öncesi uzanma eğitiminde olduğu gibi, günde bir kez, 15 dakikalık veya 100 uzanma eğitimi seansı uygulayın. Daha az etkilenen uzuv eğitiminin ilk haftası için ilk makarna sütununu çıkarın. Etkilenen uzuv ile erken ulaşma girişimlerinin başarılı olmamasını sağlamak için, fareyi yarı dolu matris önde olacak şekilde ulaşma odasına yerleştirin.
Matrisin doldurulmuş yarısının, ameliyat öncesi doldurulmuş yarısının tersi olduğundan emin olun, bu da fareyi şimdi daha az etkilenen bir uzuvla ulaşmaya zorlayacaktır. Bunu yapmak için bu uzvun uzanma açıklığından uzatılmasını güçlendirerek daha az etkilenen uzuvla ulaşmayı teşvik edin. Fare, eğitimin ilk birkaç gününde daha az etkilenen uzvu uzattığında, ulaşma odasının zeminine küçük bir parça makarna yerleştirin.
Erişimin başarılı olup olmadığına bakılmaksızın, yalnızca daha az etkilenen uzuvla yapılan erişimleri toplam 100 erişim sayısına dahil edin. Etkilenen uzuvla yapılan gizli girişimleri toplam erişim sayısına dahil etmeyin. Daha sonra, daha az etkilenen uzuv eğitiminin ilk yedi gününden sonra makarnanın en medial dikey sütununu matrise geri koyun, toplam erişim sayısını ve başarıyla kırılan makarna parçalarının sayısını ve yerini kaydedin, daha az etkilenen uzvun telafi edici kullanımının inmeden etkilenen uzuvun fonksiyonel iyileşmesi üzerindeki etkisini belirlemek için.
Etkilenen uzvun performansını PMRT üzerinde test edin. Daha az etkilenen uzuv eğitimini takiben. Matrisi, ameliyat öncesi eğitim prosedürlerine aynı şekilde yönlendirilmiş odanın önüne yerleştirin.
Bu, fareleri, inme öncesi performans seviyeleriyle karşılaştırmak için felçten etkilenen uzuv kayıtları, toplam erişim sayısı ve başarıyla kırılan makarna parçalarının sayısı ve konumu ile ulaşmaya zorlayacaktır. Burada, tercih edilen uzuvun karşısındaki duyusal motor korteksin tek taraflı iskemik hakaretinden önce ve sonra farelerin etkilenen uzuvu ile temsili ulaşma paternleri gösterilmiştir. Anterior, farenin önünde giderek daha fazla bulunan makarna parçalarını, lateral ise farenin yanında giderek daha fazla bulunan makarna parçalarını belirtir.
Etkilenen uzvun ameliyat sonrası eğitim günleri boyunca temsili patern değişiklikleri burada gösterilmektedir. Bu grafik, daha az etkilenen uzuv eğitiminin, duyusal motor korteksin tek taraflı iskemik hasarını takiben 15 gün boyunca daha az etkilenen uzuvun PMRT eğitiminde etkilenen uzvun performansını nasıl etkilediğinin temsili bir örneğini göstermektedir. Şekillendirme aşamasında fareleri çok fazla uzanmalarına izin vererek aşırı eğitmekten kaçınmayı unutmamak önemlidir.
Aksi takdirde, öğrenme eğrisi bu testteki öğrenmenin erken aşamasını doğru bir şekilde yansıtmayacaktır. Bu prosedürü takiben. İmmünohistokimya, kortikal haritalama ve in vivo görüntüleme dahil olmak üzere diğer yöntemler, davranışsal müdahalelerin nöroanatomi üzerindeki etkisi ile ilgili diğer soruları araştırmak için kullanılabilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu protokol, inme modelleri için tasarlanmış bir beceri motor görevi olan Makarna Matrix Ulaşma Görevini özetlemektedir. Tek taraflı iskemik yaralanma sonrası telafi edici uzuv kullanımının davranışsal etkilerini değerlendirmeyi amaçlamaktadır.
This protocol provides a sensitive behavioral assay for evaluating motor skill learning and compensatory limb use in preclinical stroke models. It enables researchers to quantify functional outcomes and assess the impact of rehabilitative training strategies on recovery trajectories. The approach supports target validation and mechanistic de-risking in neurotherapeutic development by linking behavioral interventions to motor function recovery.
The method integrates into the discovery continuum from early target validation through preclinical efficacy testing, enabling iterative assessment of motor function across study phases.