Name: Yaşlanma Fare Vestibüler Sistemi Davranışsal Değerlendirme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 30 s
Description: Öğrenin yaşlanan farelerde denge performansını değerlendirmek için rotor çubuk ve denge kirişi testlerini kullanarak. Bu invaziv olmayan yöntem, yaşla ilişkili motor kontrol değişikliklerini incelemek için güvenilir veri sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, Garnett Passe ve Rodney Williams Memorial Vakfı ve Bosch Enstitüsü Hayvan Davranış Tesisi'ne teşekkür eder.

1.. Hayvanlar <ol><li> Yaş 1, 9 ve 13 ay arasında eski Fareler (C57/BL6) Animal Resources Merkezi (Perth, Avustralya) firmasından elde edilmiştir. Bu fareler, yiyecek ve su ad libitum erişimi olan bir 12/12 saat ışık / karanlık döngüsünde Sydney Üniversitesi Bosch Kemirgen Tesisinde standart fare kafeslerinde barındırılmıştır. Aşağıda belirtilen prosedürler Sydney Hayvan Etik Kurulu Üniversitesi tarafından onaylanmıştır. </li><li> Fareler test ortamı alışmasına izin vermek için önce 10 dakika boyunca her test için test odasına fare kafes getirin. </li></ol> 2. Rotarod <ol><li> Rotarod aparatı (Şekil 1A) ayarlayın: <ol><li> Totarod her kulvarda dübellerini takın. Not: Bu örnek sıçan dübel (çapı 70 mm) dübel tutunmuş ve &quot;pasif dönmeler&quot; 10 yerine gelen fareler vazgeçirmek için fare yerine dübel (çapı 32 mm) kullanılmaktadır. </li><li> Varsaymakonlar totarod bir yere dokunmak ve eğerek değil emin totarod her sokağın dibinde bulunan tel üzerinde manyetik iniş platformları iyon dokunmadan her kulvarın manyetik sağ duvara mümkün olduğunca yakın yerleştirilir. Not: rotarod test fareler dönen ve hızlanan dübel kalmak için bir ileri yönde yürümek gerekmektedir sırasında. Bir fare artık dübel kalmak mümkün olduğunda, onlar düşecek ve daha sonra manyetik sensörü aktive iniş platformu yerinden. Bu süre, döner dübel, düşme ve kat edilen mesafe otomatik olarak her bir fare için hesaplanmıştır ve döner çemberde geçirdiği ön ekran üzerine kaydedilmektedir zamanında dübel rpm düşmesi alınmıştır. </li><li> Yukarıdaki altındaki kısa paneller ve uzun paneller ile her rotarod kulvarın ön içine 2 şeffaf plastik paneller kaydırın. </li><li> Girdi totarod önünde bulunan tuş takımını kullanarak test parametreleri. St izleyineps hızlanan rotarod test parametreleri için 2.1.4.6 ile 2.1.4.1 ve sabit hız rotarod test parametreleri için 2.1.4.12 için 2.1.4.7 adımları. <ol><li> 60 sn testin maksimum süreyi ayarlayın. </li><li> Kullanılacak şerit sayısını (veya test edilecek olan farelerin sayısı) ayarlayın. </li><li> 5 devir için, test başlangıç ​​hızını ayarlayın. </li><li> 44 rpm test hıza ayarlayın. </li><li> 60 sn test rampa hızını ayarlayın. </li><li> Seçilen dübel boyutunu ve bir ileri yönde dönen sıçan dübel dönme yönünü ayarlar. </li><li> 240 sn testin maksimum süreyi ayarlayın. </li><li> Fareler tek tek test olarak 1 için kullanılacak şerit sayısını ayarlayın. </li><li> 15 rpm testin başlangıç ​​hızını ayarlayın. </li><li> 15 rpm test hıza ayarlayın. </li><li> 0 sn test rampa hızını ayarlayın. </li><li> Bir On telleri icin dönen bir sıçan takoz için seçilen takoz boyutu ve dönme yönünü ayarlayınrd yönü. Not: Yukarıdaki ayarları farklı deneylerin ihtiyaçlarına uygun şekilde değişmiş olabilir. </li></ol></li><li> Denemeler sırasında fare davranışı kaydedilebilir ve video fareler döner çemberde geçirdiği kalmak mümkün zaman süresini belirlemek için daha sonra analiz için kullanılır, böylece, sabit hızlı rotarod testi için döner çemberde geçirdiği önünde bir kamera yerleştirin. </li></ol></li><li> Hızlandırılması rotarod testi için adımlar 2.2.4 2.2.1 izleyin: <ol><li> Fareler totarod alışmasına izin vermek için 5 dakika boyunca her bir sabit dübel üzerine bir fare yerleştirin. </li><li> Yavaşça totarod arka yüz fareler dürtmek ve tüm konular bu yönde bakan olduğunda (Şekil 1B bakınız) rotarod test başlar. </li><li> Onlar dönen dübel düştüğü zaman kafeslerine tüm fareleri dönün ve gıda ve su erişimi olan 10 dakika dinlenmeye bırakın. </li><li> Tekrar emin temizlemek için yapım 8 çalışmaların toplam tamamlamak için 2.2.3 için 2.2.1 adımlarıdübel, yolları ve idrar ve dışkı için totarod iniş platformları ve arka her deneme kuyuları başlangıç ​​pozisyonuna iniş platformları hareket ettirin. Not: ilk 3-5 denemeleri fareler görev ile kendilerini alıştırmak için izin eğitim denemeleri olarak kullanılır. Düşmek zaman, mesafe yürüdü ve sonraki her deneme için düşme sırasında dübel ucu rpm (Şekil 2) daha sonra analiz için kaydedilir. </li></ol></li><li> Sabit hızlı rotarod testi için 2.3.8 için adımları 2.3.1 izleyin: <ol><li> Bu döner çemberde geçirdiği alışmasına izin vermek için 5 dakika için bir takoz üzerinde bir fare yerleştirin. Geri kafesine fare dönün. </li><li> Totarod üzerindeki kamera ve basın başlangıç ​​video kayıt başlayın. Sonra totarod arka yüzler sağlanması dönen takoz üzerinde fare yerleştirin. </li><li> Fare dönen dübel düştüğünde kamerada video kayıt durdurmak, ve yiyecek ve su erişimi ile 10 dakika boyunca kendi kafeslerine fareyi dönmek. </li><li> Tekrar 8 çalışmaların toplam emin dübel, şerit ve dışkı ve idrar için totarod iniş platformları temizlemek için yapım elde edilinceye kadar 2.3.2 ve 2.3.3 adımları ve arka her deneme arasında başlangıç ​​pozisyonuna iniş platformları hareket . </li><li> Fareler sesi ile aşina olmak için izin 20 saniye boyunca 3 Hz&#39;de özel inşa rotator açın. Matkap kapatarak 20 saniye sonra Picture durdurmak ve ilk 20 sn geçmiş dönmeye devam etmesini durdurmak için çalışan bir tekerlek iki tarafında ellerinizi yerleştirin. Not: döndürücü kendisi bir matkap (Şekil 3A) sabitlenen bir kemirgen çalışan tekerlek oluşur. Çalışan bir tekerlek merkezinde fare (Şekil 3B) yerleştirilen bir kafes kapaklı küçük bir odadır. Döndürücü, dikey eksen etrafında saat yönünün tersi yönünde döner. Uyarıcı büyüklüğü 0.2 ile 3 Hz arasında değişen döner uyarımlar yaratmamaktad için yeterli olduğunu göstermek önceki çalışmalarla uyumlu olduğunuVOR ve VCR yanıtları 4,11,12 yedik. </li><li> Döndürücünün merkezinde odasının içine fare koyun ve kapağı yerine takın. </li><li> 20 saniye için 3 Hz&#39;lik en düşük ayarda rotator açınız. Rotarod başlatın ve gelecek duruşma için hazırlık bu dönemde kamerada video kayıt başlar. 20 sn sonunda matkap kapatın ve iplik onu durdurmak için çalışan bir tekerlek iki tarafında ellerinizi yerleştirin. Dönen dübel için mümkün olduğunca çabuk aktararak hemen sonra totarod üzerinde fareyi tekrar test edin. </li><li> Fare dübel düştüğünde kameranın video kaydı durdurmak ve kendi kafesine fareyi dönmek. </li></ol></li><li> Hafif bir deterjan / su karışımı ile şeffaf plastik panelleri temizleyin silindirik dübel, kuşak ve tüm fareler test edilmiş% 70 etanol ile totarod metal iniş platformları. </li></ol> Vestibüler Challenge ile 3. Denge <ol><li> Ba kurmakmızrak ışın cihazı Şekil 4A görülmektedir. Not: Denge düzeneği Carter et al bir cihaz uyarlanmıştır (2001) 13.. Bu test için, fareler 60 cm zemin üzerinde yer alan (a 5 x 6 cm bir kapı ile 13 x 22 cm), bir karanlık kutu hedef için, 52.5 cm, yerden olan kiriş, alt ucundan yürüme (Şekil 4A .) Fareler doğal olarak maruz kiriş lehine karanlığı ve hedef kutunun koruma ararlar ve başka bir yukarı yönde 14 çalıştırmak için doğal kaçış mekanizmayı patlatır hafif eğim tarafından ışınını hareket için teşvik edilir. Kirişin kendisi 1 m uzunluğunda ve 14 mm bir çapı olan bir dairesel enine kesite sahiptir. Kiriş çapları bir özel dizi deneyci testin hassasiyetini ayarlamak veya büyük konularda uyum sağlayan kullanılabilir. Denge kirişin alt ucunda, beyaz bir çizgi başlangıç ​​çizgisini gösterir. Başka bir çizgi olmuşturfiniş hattı (Şekil 4A) belirtmek için kirişin yüksek sonunda başlangıç ​​çizgisinden 60 cm çekilir. <ol><li> Konum 2 kamera, denge aleti (Şekil 4B) ve alt ucunda denge kirişin her iki tarafında bir,. Not: Bu kameralar denge kirişin tüm uzunluğu boyunca yakalama ve bu başlangıç ​​ve bitiş hatları denge kiriş üzerinde işaretli sağlamak için açılı olarak açık bir şekilde görülebilir. Onlar denge aleti geçerken Bu kameralar çıkan videolar daha sonra analiz için kullanılan ile video kaydına farelerin davranışlarını kullanılacaktır. </li><li> Her fareyi test sonrasında idrar ve dışkının kolay temizlik sağlar ve hedef kutusunun içindeki konular evde kafes konut kubbe yerleştirmek için, kağıt havlu ile amaç kutusunun zemin hat. </li><li> Aparatı düşmek herhangi konuları korumak için kaldırdı kirişin altında yeterli köpük veya diğer dolgu malzemesini yerleştirin. Sonbahar fareler deney hemen alınacaker ve dinlenmek için hedef kutunun içine yerleştirilir. </li></ol></li><li> Bu ortamına aşina olur böylece 2 dakika için hedef kutusuna bir fare yerleştirin. Fare bu davranışı vazgeçirmek için bu süre zarfında kirişe yürümeye çalışırsa 5 saniye için bir eldivenli el ile hedef kutusuna açılış kapsayacak. </li><li> Sadece hedef kutusuna açılması dışında kiriş üzerine yerleştirerek ve hedef kutuya yürümek için izin vererek fareyi eğitin. Fare hiçbir yardım ve minimal tereddüt ile hedef kutusuna başlangıç ​​çizgisine yürümek mümkün olduğu kadar giderek daha uzakta hedefi kutusundan kiriş üzerine yerleştirerek fareyi eğitmeye devam. Her koşudan sonra 1 dakika boyunca hedef kutusunda dinlenmek için fareyi bırakın. </li><li> Eğitim tamamlandığında fare test başlayın. <ol><li> Kameralarda video kaydını başlatmak. </li><li> Kirişin başlangıç ​​çizgisinde fare yerleştirin ve hedef kutunun yönünde ışın erişir bekleyin. </li><li> Ca video kaydını durdurunfare kutuyu ulaşır Meras. </li><li> 1 dakika için hedef kutusuna dinlenmeye fare bırakın. Beklerken duruşma sırasında tevdi edilmiş herhangi bir idrar veya dışkı çıkarmak. </li><li> Tekrar 5 çalışmalarda toplam tamamlanana kadar 3.4.4 için 3.4.1 adımları. </li></ol></li><li> Fareler sesi ile aşina olmak için izin (sabit hız rotarod testinde olduğu gibi) 20 saniye boyunca 3 Hz&#39;de özel inşa döndürücüde anahtarı. Matkap kapatarak 20 saniye sonra Picture durdurun ve iplik onu durdurmak için çalışan bir tekerlek iki tarafında ellerinizi yerleştirin. </li><li> Döndürücünün merkezinde odasının içine fare koyun ve kapağı yerine takın. </li><li> 20 saniye için 3 Hz&#39;lik en düşük ayarda rotator açınız. Yaklaşan deneme için hazırlık, bu süre içinde kameralar video kayıt başlayın. 20 sn sonunda matkap kapatın ve ilk 20 sn geçmiş dönmeye devam etmesini durdurmak için çalışan bir tekerlek iki tarafında ellerinizi yerleştirin. Transfer mümkün olduğunca çabuk denge kirişin başlangıç ​​fare ve fare hedef kutusuna ışın erişir bekleyin. </li><li> Fare amacı kutusunu ulaştığında kameralarda video kayıt durdurmak ve kendi kafesine fareyi dönmek. </li><li> % 70 etanol ile denge ışın cihazı temizlemek ve her fare test edildikten sonra hedef kutusuna kağıt havlu değiştirin. </li></ol>

<ol><li>Agrawal, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disorders+of+balance+and+vestibular+function+in+US+adults%3A+data+from+the+National+Health+and+Nutrition+Examination+Survey%2C+2001-2004%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Intern.+Med%22%5BJournal%5D)">Disorders of balance and vestibular function in US adults: data from the National Health and Nutrition Examination Survey, 2001-2004.</a> Arch. Intern. Med. 169, 938-944 (2009).</li>
<li>Schwab, C. W., Kauder, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trauma+in+the+geriatric+patient%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Surg%22%5BJournal%5D)">Trauma in the geriatric patient.</a> Arch. Surg. 127, 701-706 (1992).</li>
<li>Stahl, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+video+and+magnetic+search+coil+recordings+of+mouse+eye+movements%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A comparison of video and magnetic search coil recordings of mouse eye movements.</a> J. Neurosci. Methods. 99, 101-110 (2000).</li>
<li>Takemura, K., King, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vestibulo-collic+reflex+%28VCR%29+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Vestibulo-collic reflex (VCR) in mice.</a> Exp. Brain Res. 167, 103-107 (2005).</li>
<li>Carter, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+progressive+motor+deficits+in+mice+transgenic+for+the+human+Huntington%27s+disease+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Characterization of progressive motor deficits in mice transgenic for the human Huntington's disease mutation.</a> J. Neurosci. 19, 3248-3257 (1999).</li>
<li>Wallace, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+and+reflexive+behavior+in+the+aging+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Motor and reflexive behavior in the aging rat.</a> J. Gerontol. 35, 364-370 (1980).</li>
<li>Ingram, D. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+age+on+motor+performance+in+two+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Aging%22%5BJournal%5D)">Differential effects of age on motor performance in two mouse strains.</a> Neurobiol. Aging. 2, 221-227 (1981).</li>
<li>Serradj, N., Jamon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+in+the+motricity+of+the+inbred+mice+strains+129%2Fsv+and+C57BL%2F6j%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Age-related changes in the motricity of the inbred mice strains 129/sv and C57BL/6j.</a> Behav. Brain Res. 177, 80-89 (2007).</li>
<li>Gage, F. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+learning+and+motor+deficits+in+aged+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Aging%22%5BJournal%5D)">Spatial learning and motor deficits in aged rats.</a> Neurobiol. Aging. 5, 43-48 (1984).</li>
<li>Rustay, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+task+parameters+on+rotarod+performance+and+sensitivity+to+ethanol+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Influence of task parameters on rotarod performance and sensitivity to ethanol in mice.</a> Behav. Brain Res. 141, 237-249 (2003).</li>
<li>Xiaocheng, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+calcitonin+gene-related+peptide+in+efferent+vestibular+system+and+vestibular+nucleus+in+rats+with+motion+sickness%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Expression of calcitonin gene-related peptide in efferent vestibular system and vestibular nucleus in rats with motion sickness.</a> PloS One. 7, (2012).</li>
<li>Beraneck, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ontogeny+of+mouse+vestibulo-ocular+reflex+following+genetic+or+environmental+alteration+of+gravity+sensing%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Ontogeny of mouse vestibulo-ocular reflex following genetic or environmental alteration of gravity sensing.</a> PloS One. 7, (2012).</li>
<li>Carter, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+coordination+and+balance+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Protoc.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Motor coordination and balance in rodents.</a> Curr. Protoc. Neurosci. , (2001).</li>
<li>Brooks, S. P., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tests+to+assess+motor+phenotype+in+mice%3A+a+user%27s+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Tests to assess motor phenotype in mice: a user's guide.</a> Nat. Rev. Neurosci. 10, 519-529 (2009).</li>
<li>Luong, T. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+motor+balance+and+coordination+in+mice+using+the+balance+beam%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Assessment of motor balance and coordination in mice using the balance beam.</a> J. Vis. Exp. (49), (2011).</li>
<li>McFadyen, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+among+eight+inbred+strains+of+mice+in+motor+ability+and+motor+learning+on+a+rotorod%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Differences among eight inbred strains of mice in motor ability and motor learning on a rotorod.</a> Genes Brain Behav. 2, 214-219 (2003).</li>
<li>Shiga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+effects+on+vestibulo-ocular+responses+in+C57BL%2F6+mice%3A+comparison+with+alteration+in+auditory+function%5BTitle%5D)+AND+%22Audiol.+Neurootol%22%5BJournal%5D)">Aging effects on vestibulo-ocular responses in C57BL/6 mice: comparison with alteration in auditory function.</a> Audiol. Neurootol. 10, 97-104 (2005).</li>
<li>Stahl, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eye+movements+of+the+murine+P%2FQ+calcium+channel+mutant+rocker%2C+and+the+impact+of+aging%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Eye movements of the murine P/Q calcium channel mutant rocker, and the impact of aging.</a> J. Neurophysiol. 91, 2066-2078 (2004).</li>
<li>Fahlstrom, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+changes+in+aging+female+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Aging%22%5BJournal%5D)">Behavioral changes in aging female C57BL/6 mice.</a> Neurobiol. Aging. 32, 1868-1880 (2011).</li>
<li>Bâ, A., Seri, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychomotor+functions+in+developing+rats%3A+ontogenetic+approach+to+structure-function+relationships%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Psychomotor functions in developing rats: ontogenetic approach to structure-function relationships.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 19, 413-425 (1995).</li>
<li>Yu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+animal+model+for+motion+sickness+and+its+first+application+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">A novel animal model for motion sickness and its first application in rodents.</a> Physiol. Behav. 92, 702-707 (2007).</li>
<li>Tung, V. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+isolated+semi-intact+preparation+of+the+mouse+vestibular+sensory+epithelium+for+electrophysiology+and+high-resolution+two-photon+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">An isolated semi-intact preparation of the mouse vestibular sensory epithelium for electrophysiology and high-resolution two-photon microscopy.</a> J. Vis. Exp. (76), (2013).</li>
</ol>

Yazarlar, rekabet eden hiçbir mali çıkarları olmadığını beyan ederler.

Protokol çerçevesinde Kritik Adımlar Önceki iş bu totarod ve denge ışın cihazı ve bir sonucu olarak hem fareler eğitmek kolay olduğunu göstermiştir, doğru ölçümlerin edinimi zorlu 15 olabilir. Denge aleti üzerinde sürantrenman daha sık durdurulup (keşif davranış) ve ters yönde hareket neden olabilir Örneğin, totarod üzerinde sürantrenman doğru (fareler, kasten hem de iklimlendirme ve deneme dönemlerinde dowels atlayarak yani yol açabilir satır) 15 başlatın. Sonuçt...

Denge duygumuzu belki yürüyüş ve dönüm dahil bile en temel motor aktivitelerinin çoğu henüz gözden kaçan önemli bileşenlerinden biridir. Denge, kas gücü, motor koordinasyon ve vestibüler fonksiyonu dahil olmak üzere birçok faktör tarafından etkilenir ve tam işleyen bir denge sisteminin önemi takdir sadece vestibüler nöropati varlığında veya normal yaşlanma sırasında olur. Vestibüler sistem bozuklukları sıklıkla baş dönmesi veya baş dönmesi ve düşme ve sonraki yaralanmaların 1 riskinde artış ile sonuçlanan dengesizlik deneyimleri ile ilişkilidir. Bu düşme yaralanma 2. önde gelen nedenlerinden biri olan yaşlı nüfus özellikle önemlidir. Vestibüler fonksiyon testleri yaygın vestibüler reflekslerin, özellikle vestibülookuler (VOR) veya vestibülo collic refleksi (VCR) dayanmaktadır. VOR ve VCR görüntüleri stabilizasyonu için gerekli olansırasıyla baş ve gövde hareketleri sırasında retina ve baş pozisyonu. Genellikle, VOR ölçümler göz hareketleri ve göz hareketi 3 video izleme ölçmek için arama bobinleri invaziv implantasyonu gerektirir. Bu, fare göz ve video analizi 3 için öğrenci saptanmasında zorluk küçük doğası farelerde zordur. Bir alternatif olarak, VCR invaziv cerrahi 4 için gerek kalmadan farelerde vücut hareketlerine karşılık olarak başın sabitleştirilmesini ölçmek için kullanılmıştır. Buna rağmen, birkaç çalışma vestibüler sistemin daha önemlisi yaşlanma sırasında nasıl değiştiğini bir bütün olarak gerçekleştiren ve nasıl özel olarak odaklanmak. Genel dengesi performansını değerlendirmek için basit ve noninvaziv biz iki yaygın olarak kullanılan davranış testleri değiştirilmiş. Rotarod ve eğimli kiriş denge testleri kemirgenler ve daha önceki çalışmalarda, motor performansının farklı yönlerini değerlendirmek tam elde etmek için bir test bataryası kullanılmıştırMotor kapasitesi profili. Bu yetenek, hastalık ya da genetik modifikasyon etkilenen ve aynı zamanda normal gelişim ve 5-7 yaşlanma ile ilişkili işlemler duyarlıdır edilebilir. Rotarod kullanarak daha önceki çalışmaları farelerde motor koordinasyon 8 yaş 3 ay sonra azaldığını göstermiştir. Buna ek olarak, fareler Denge testinde 9 artan yaş ile fark denge açıkları göstermektedir. Bu çalışma, vestibüler sistem meydan okuma ve genç ve yaşlı farelerde denge performansına sonraki etkisini karakterize etmek için bir vestibüler uyarıcı ile bağlantılı olarak rotarod ve denge kiriş testlerin kullanımı açıklanmaktadır. Tarif basit ve girişimsel olmayan yöntemler periferik vestibüler fonksiyonun tek başına tedbirler olarak tasarlanmış olmasa da, farelerde normal yaşlanma sırasında vestibüler işleme birden fazla aşamada, hücresel değişiklikleri karşılaştırmak için kullanışlı ve basit bir davranış ölçüsünü sağlıyoruz.

<table><tbody><tr><td>Rotarod</td><td>IITC Yaşam Bilimleri A.Ş.</td><td>#755</td><td>"Sıçan dübelleri" = 70 mm çap. Etanolün perspex ile temas etmesine izin vermeyin.</td></tr><tr><td>iPhone</td><td>Apple</td><td></td><td>Her türlü kamerayı kullanabilir. Cırt cırt, 3D mafsallı kola takmak için arka yüzeye sabitlenmiştir.</td></tr><tr><td>3D mafsallı kol</td><td>Fisso/Baitella</td><td>Classic 3300-28</td><td>Her türlü sabit dikey stand yeterli olacaktır. Cırt cırt, iPhone bağlantısı için kolun apikal ucuna sabitlenmiştir.</td></tr><tr><td>Ahşap yürüyüş kirişi: 14 mm çapında</td><td></td><td></td> dairesel kesitli 1 m uzunluğunda düz ahşap şerit <td>Deneysel parametrelere uyacak şekilde çeşitli çaplar ve kesit şekilleri kullanılabilir</td></tr><tr><td>11 mm kalınlığındaki tahtalardan</td><td></td><td></td><td></td>yapılmış ahşap kale kutusu (130 x 140 x 220 mm)</tr><tr><td>41 x 41 mm kirişlerden yapılmış destek standı: Başlangıç ve kale bitişlerinde yerden sırasıyla 525 ve 590 mm yükseklikte 2 dikey kiriş; Doğrudan yürüme kirişinin altında zemin boyunca uzanan 803 mm yatay kiriş; 20 mm uzunluğundaki iki kiriş, her iki uçta yatay ve dikey kirişleri birleştiren "ayak" görevi görür; "başlangıç" dikey kirişinin apikal ucunda oyulmuş 21 x 21 x 36 mm'lik bir blok; Bu bloğun merkezinden 13 x 13 mm'lik bir açıklık kesilerek yürüyen kirişe dik uzanan bir tünel oluşturur.</td><td></td><td></td><td>Tüm birleşimleri küçük çelik braketlerle destekleyin.</td></tr><tr><td>Siyah boya (su bazlı)</td><td>Handycan</td><td>Akrilik Mat Siyah</td><td>Denge kirişi aparatının tüm ahşap yüzeyleri için 2-3 kat</td></tr><tr><td>Şeffaf yüzey</td><td>Wattle Estapol</td><td>Poliüretan Mat</td><td>Tüm kirişler için tek kat. Denge kirişi aparatının diğer tüm yüzeyleri için çift kat</td></tr><tr><td>Köpük, ambalaj malzemesi</td><td></td><td></td><td>Denge kirişinden düşmeleri önlemek için</td></tr><tr><td>%70 Etanol, kağıt havlu Her</td><td></td><td></td><td>hayvan arasındaki kirişi ve kale kutusunu temizleyin.</td></tr><tr><td>Gazlı bezler/kağıt havlular</td><td></td><td></td><td>Kale kutusunun zeminini kaplamak için</td></tr><tr><td>Fare evi (ev kafesinden)</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

yaşlanma fare vestibüler sistemi davranışsal değerlendirme

Behavioral Assessment of the Aging Mouse Vestibular System

Denge performansında yaşa bağlı düşüş kötüleşen kas gücü, motor koordinasyon ve vestibüler fonksiyonu ile ilişkilidir. Çalışmaların sayısı çok az normal şartlar altında veya yaşlanma sırasında dengelemek için vestibüler katkı izole kemirgenler yaşla birlikte denge fenotip değişiklikleri gösterir iken. Rotarod testi ve eğimli Denge testi: Biz ömrü boyunca belirlenen yaş noktalarda farelerin dengesi performansını karakterize etmek için iki standart davranış testleri kullanın. Önemli olsa da, aynı zamanda özel inşa rotator (hareket hastalığının belirgin belirtileri uyarılması olmadan) farelerinin vestibüler sistemini uyarmak için kullanılır. Bu iki test vestibüler aracılı-denge performans değişikliği kemirgen ömrü boyunca mevcut olduğunu göstermek için kullanılmıştır. Ön sonuçlar, rotarod testini ve tadil edilmiş denge ışın testi de daha fazla diffic için bir alternatif olarak, yaşlanma sırasında denge performansında değişiklikleri tespit etmek için kullanılabilir olduğunu göstermektedirBöyle vestibülookuler (VOR) ölçümleri gibi Ult ve invaziv teknikler.

Rotarod Farelerde motor performansı 8 çalışmalarda üzerinde her fare için kaydedilen To Fall Time (TTF) olarak tarif edilmiştir. TTF bu ölçümleri kullanarak, her bir fare için eğitim eğrileri çizilebilir. Şekil 2. 8 denemeleri boyunca tek 1 aylık fare ve bir 9 aylık fare motor performansının örneklerini göstermektedir. Bu eğitim eğriler bir sonraki plato ardından ilk 3-5 denemeler sırasında TTF bir artış göstermektedir. Plato oluşturan TTF ölçümleri kaydedilmiş ve (Şeki...

Motor kontrol ve denge performansı yaşla birlikte bozulmaya bilinmektedir. Bu kağıt yaşlanmanın bir fare modelinde denge performans vestibüler sistem ve gösteri değişiklikleri meydan basit bir döner uyarıcının eklenmesi ile standart noninvaziv davranış testleri bir dizi sunuyor.

Yaşlanma Fare Vestibüler Sistemi Davranışsal Değerlendirme

Age related decline in balance performance is associated with deteriorating muscle strength, motor coordination and vestibular function. While a number of ...

Aşağıdaki deneyin genel amacı, bir yaşlanma fare modelinde denge performansındaki değişimleri belirlemektir. Bu, öncelikle farelerin cihaza alışmalarını sağlamak ve ikinci bir adım olarak görevi öğrenmelerini sağlamak amacıyla cihaz üzerinde eğitilmeleriyle gerçekleştirilir. Farelerin motor koordinasyonlarını ve dengelerini değerlendirmek için cihaz üzerinde testler yapılır.Ardından farelere vestibüler uyaran uygulanır ve cihaz üzerinde yeniden test edilirler. Yine, sonuçlar rotarod ve denge kirişi verilerine dayanarak yaşa bağlı denge değişikliklerini gösterecektir. Göz hareketlerini takip eden vestibüler oküler refleks testi gibi mevcut yöntemlere göre bu tekniğin temel avantajı, denge performansını ölçmek için basit ve non-invaziv bir yöntem olmasıdır.Bu yöntem, farelerde denge performansı üzerindeki yaşa bağlı değişimlere dair bilgi sağlayabilse de, serebellar ataksi ve nöromüsküler bozukluklar gibi diğer sistemlere de uygulanabilir. Prosedürlerin uygulanışını laboratuvarımdaki doktora adayı Victoria Tongue, laboratuvar araştırma asistanı Edward Dabney ve Sidney Üniversitesi Bosch Enstitüsü Hayvan Davranış Tesisi yöneticisi Thomas Burton gösterecektir.Rotor rod testinde fareler, dönen ve hızlanan miller üzerinde yürümek zorundadır. Dengelerini kaybettiklerinde bir manyetik sensörü tetiklerler. Puanlanan parametreler rotor rod cihazı tarafından kaydedilir.Rotor çubuğunun her bir kulvarına dübelleri yerleştirerek başlayın. Fareler ve sıçanlar için farklı boyutlarda dübeller sağlanmıştır. Ancak, fareler için sıçan dübellerinin kullanılması etkili sonuçlar verir ve farelerin düşmek yerine dübellere tutunmasını engeller.Ardından, manyetik iniş platformlarını rotor çubuğunun her bir şeridinin altındaki tel üzerine yerleştirin. Platformların zemine değecek şekilde eğilmediğinden ve sağ taraftaki manyetik duvara değmeden mümkün olduğunca yakın olduğundan emin olun. Son olarak, ikinci slaytı kaydırın.Rotor çubuğunun her bir kulvarının önünde şeffaf plastik paneller bulunur. Kısa panel alta, uzun panel ise üste yerleştirilir. Farelerin alışması için, denemelere başlamadan 10 dakika önce fare kafeslerini test odasına getirin.Hızlanan rotor çubuğu testi için test parametrelerini girin. Öncelikle, testin maksimum süresini 60 saniye olarak ayarlayın. Ardından, kullanılacak kulvar sayısını veya test edilecek fare sayısını belirleyin.Ardından hızları ayarlayın. Testin 5 RPM'de başlamasını sağlayın ve maksimum hızı 44 RPM olarak belirleyin. Hızın 60 saniye boyunca kademeli olarak artmasını sağlayın.Son olarak, ileri yönde dönen sıçan pimlerinin kullanımı için pim parametrelerini ayarlayın. Fareler hazır olduğunda, alışmaları için test edilecek ilk grubu beş dakika boyunca sabit pimlerin üzerine yerleştirin. Ardından, fareleri nazikçe rotor çubuğunun arkasına bakacak şekilde yönlendirin ve tüm fareler doğru yöne baktığında testi başlatın.Fareler düştükten sonra, denemeler arasındaki dinlenme süresi boyunca fareleri 10 dakika boyunca yiyecek ve suya serbest erişimleri olacak şekilde kafeslerine geri koyun; bu sırada çubuk şeritlerindeki ve iniş platformlarındaki hayvan atıklarını temizleyin. Ayrıca iniş platformlarını bir sonraki test için yeniden ayarlayın. İşlemi fare başına toplam sekiz deneme olacak şekilde tekrarlayın.İlk üç ila beş deneme, eğitim denemeleri olarak kullanılır. Sekiz denemenin tamamından sonra, rotor çubuğunun sap yollarını ve iniş platformlarını %70 etanol ile iyice temizleyin ve şeffaf plastik panelleri hafif bir deterjanla temizleyin. Bu testte fareler, hedeflerine ulaşmak için hafif bir eğim boyunca bir metre uzunluğunda ve 14 milimetre çapında açık bir kiriş üzerinde yürürler.Deneklerin konaklama kubbesini içeren karanlık bir oda. Denge kirişinin her iki yanına iki kamera yerleştirilmiştir. Her biri, kirişin tüm uzunluğunu yakalayacak şekilde açılanmıştır. Video kayıtları, kirişin altındaki denemeleri belgeler.Zemin yastıklama malzemesiyle kaplıdır. Düşen fareler derhal alınmalı ve toparlanmaları için hedef kutunun içine yerleştirilmelidir. Testler arasında hayvan atıklarını kolayca temizlemek için hedef kutunun içi kağıt havlu ile kaplanmıştır.Kutu, içerisine bir konut kubbesinin sığabileceği kadar büyüktür. Bir fareyi test etmeden önce, fareyi iki dakika boyunca hedef kutusuna yerleştirin. Eğer fare hedef kutusundan çıkmaya çalışırsa, tekrar çıkmasını engellemek için ışın açıklığını eldivenli bir el ile beş saniye boyunca kapatın.Ardından, fare görev için eğitilmelidir. Fareyi hedef kutusunun hemen dışındaki kirişin üzerine yerleştirin ve hedef kutusuna kadar yürümesine izin verin. Daha sonra bir dakika dinlenmesini sağlayın, ardından fareyi kirişin daha aşağısına yerleştirin ve tekrar yukarı yürümesine izin verin.Eğitim denemeleri arasında, fareye hedef kutusunda her zaman bir dakika süre tanıyın. Fare, başlangıç çizgisinden yardım almadan yürüyene kadar onu ışın üzerinde giderek daha geriye yerleştirin. Bir test gerçekleştirmek için önce kaydı başlatın ve ardından fareyi başlangıç çizgisine yerleştirin.Fare kutuya ulaştığında veya denemeler arasında kirişten düştüğünde kaydı durdurun. Fare hedef kutusunda bir dakika boyunca dinlensin; bu sırada kiriş ve altındaki köpük üzerindeki idrar veya dışkı kalıntılarını temizleyin. Her fare bu şekilde beş kez test edilmelidir.Bu teste ek bir vestibüler zorluk eklemek için, önce rotatörü uygulayın ve fareleri üç hertz frekansındaki rotatör sesine alıştırın. Cihazı 20 saniye boyunca çalıştırın. Ardından fareyi rotatör üzerindeki hazneye aktarın.Fareyi hazneye indirmekte zorluk yaşıyorsanız, her ikisini de hazneye indirmeden önce fareye tutunabileceği bir nesne verin. Fare hazneye girdikten sonra nesneyi çıkarın, kapağı kapatın ve rotatoru 20 saniye boyunca çalıştırın. Üç hertz hızda dönerken video kayıtlarını başlatın.20 saniye sonra rotatörü kapatın ve tekerleği manuel olarak mümkün olan en hızlı şekilde durdurun. Ardından fareyi hemen başlangıç çizgisine taşıyın ve denemeyi tamamlamasına izin verin. Her zamanki gibi, bu test, fareler iş birliği yapmayı bırakmadan önce bir ila üç kez gerçekleştirilebilir.Rotor rod uygulaması sırasında, fareler arasında terazi kolunu temizlemeyi ve kağıt havluyu değiştirmeyi asla unutmayın. Bir aylık ve dokuz aylık bir fare için düşme süresi test edildiğinde, birinci ile beşinci denemeler arasında süreler istikrarlı bir şekilde arttı ve bu nedenle bu denemeler eğitim denemeleri olarak kabul edildi.Skorun stabilize olduğu kesikli çizgi ile gösterilen bölgeden elde edilen veriler veri analizi için kullanılmıştır. Bir aylık fareler, dönen çubuk üzerinde dokuz aylık farelere göre anlamlı derecede daha uzun süre kalabilmiştir. Küçük örneklem boyutundan elde edilen veriler, ortalama artı veya eksi bir standart sapma olarak temsil edilmiştir.Vestibüler stimülasyonun denge performansı üzerindeki etkisi yaşla birlikte daha belirgin hale gelmiştir. Deneme öncesinde üç hertz hızında yapılan 22 turluk bir döndürme işlemi, 9 ve 13 aylık farelerde başlangıç ve bitiş çizgileri arasındaki denge kirişini geçme süresini artırmış, ancak genç farelerde bu etki görülmemiştir. Anlamlılık, Tukey post hoc testi ile tekrarlanan ölçümler ANOVA kullanılarak değerlendirilmiştir.Bu görev gerçekleştirilirken, hayvanın uyarandan kurtulma ihtimalini en aza indirmek ve görevi tamamlamasını sağlamak için, vestibüler uyarımın ardından hayvanın mümkün olan en kısa sürede aparata aktarılması gerektiğini unutmamak önemlidir. Motor ve denge performansındaki değişikliklerin vestibüler tüy hücresi fonksiyonundaki değişikliklerle ilişkili olup olmadığı gibi ek soruları yanıtlamak için PCR, kalsiyum görüntüleme ve patch clamp elektrofizyolojisi gibi diğer teknikler kullanılabilir.

behavioral-assessment-of-the-aging-mouse-vestibular-system

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Genel olarak Parkinson hastalığı, hareket bozuklukları, hassas ve güvenilir bir davranış testleri yeni potansiyel terapötikler test etmek için gereklidir. Burada, nigrostriatal sistemine zarar derecelerine ve klinik öncesi çalışmalar için yararlı duyarlı olan fareler için duyu testler yönetilebilir bir pil açıklanmaktadır.

Parkinson Hastalığı Fare Modeller Duyusal Motor Fonksiyon Değerlendirilmesi

Vestibüler saç hücre fonksiyonu analizi kafatası, petröz temporal kemiğin en zor kısmı içinde derin konumlarına göre karmaşıktır. En işlevsel saç hücre çalışmaları akut izole saç hücrelerinin kullandık. Burada elektrofizyolojik ve iki-fotonlu mikroskop çalışmaları için fare vestibüler epitelyum bir yarı sağlam hazırlanması açıklanmaktadır.

Elektrofizyoloji ve yüksek çözünürlüklü İki foton Mikroskopi için Fare Vestibüler Duyu epiteli bir İzole Yarı sağlam Hazırlık

Davranışsal sınama önceden klinik çalışmalarda bir hastalık veya bir hayvanın refah tedavi fenotipik etkilerini değerlendirmek için kullanılır. Genel olarak motor işleyişini değerlendirmek için biz genel hareket, kas gücü ve koordinasyon için testler seçili: açık alan test, kafes test ve rotarod testi, anılan sıraya göre.

Batarya-in davranış değerlendirilmesi genel hareket, kas gücü ve koordinasyon farelerde testleri

Bu iletişim kuralı cerrahi labyrinthectomy vestibüler sistem çalışmak için kullanışlı bir yöntemdir bir farenin açıklar.

Vestibüler sistem çalışmaya farenin cerrahi Labyrinthectomy

Bu çalışmada, biz ventral uçak motor koordinasyon yanı sıra ateş fare modelleri (Örneğin, endophilin mutant çağda ilerleyen ile ilerleme ince değişiklikleri izlemek için Imaging temel kinematik yürüyüş analizi kullanımını göstermektedir fare hat).

Yaş bağımlı Motor bozuklukları ile ateş farelerde, yürüyüş analizi

Sunulan Protokolü kalıcı duyu çakışma uzun vadeli öğrenme eğitim amaçlı deneyler için üretir. Kalıcı olarak sabit bir aygıt başlarına giyerek, fareler sürekli ev kafeslerde serbestçe taşırken görsel ve Vestibüler girdiler arasında duyusal bir uyumsuzluk maruz kalır.

Fareler serbestçe davranıyor uzun vadeli duyusal çatışma

Protokoller asansör dikey hareket ve dönme dolap rotasyonu kullanarak kemirgenlerde pasif hareketin otonom ve davranışsal etkilerini değerlendirmek için sunulmaktadır.

Asansör Dikey Hareketi ve Dönme Dolap Rotasyonu Kullanarak Sıçanlarda Pasif Hareketin Otonom ve Davranışsal Etkilerinin Değerlendirilmesi

Burada sunulan, genç vahşi tip farelerde doğrulanmış bilişsel açık ve anksiyete benzeri davranışlara neden olabilecek, elektrik kontrollü bir yörünge rotorunun elde ettiği kronik uyku parçalanması (CSF) modeli için bir protokoldür. Bu model kronik uyku bozukluğu ve ilgili bozuklukların patogenezini keşfetmek için uygulanabilir.

Genç Vahşi Tip Farelerde Bilişsel Açık ve Anksiyete Benzeri Davranışlara Neden Olmak İçin Titreşimli Orbital Rotor Kullanan Kronik Uyku Parçalanma Modeli

Mevcut protokolün amacı, C57Bl/6x129J laboratuvar farelerinde fiziksel kırılganlığı değerlendirmek için talimatlar ve kılavuzlar sağlamaktır. Fiziksel kırılganlık indeksinde kullanılan her bir ölçüme ilişkin spesifik ayrıntılar açıklanmaktadır. Kırılganlık sonuçlarını raporlamak için çeşitli yöntemler de sunulmaktadır.

Yaşlanan Fare Modelinde Kırılganlık Değerlendirmesi

MicroRNA beyin yapısı ve fonksiyonu önemli rolleri vardır. Burada aşırı ifadesi bir mühendislik miRNA-ifade lentivirüs stereotaktik enjeksiyonu kullanılarak hipokampal miRNA uygulamak için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yaklaşım, değerlendirmek için nispeten hızlı bir yöntem olarak hizmet...

Bir Stereotaktik Enjeksiyon MicroRNA-ifade Fare Hippocampus CA1 Bölgesi Lentiviruses ve Davranış Sonuç Değerlendirilmesi

Öğrenin yaşlanan farelerde denge performansını değerlendirmek için rotor çubuk ve denge kirişi testlerini kullanarak. Bu invaziv olmayan yöntem, yaşla ilişkili motor kontrol değişikliklerini incelemek için güvenilir veri sağlar.

Yaşlanma Fare Vestibüler Sistemi Davranışsal Değerlendirme

Daha fazla video keşfet