Birçok deney, farelere ajanların uygulanmasına dayanmaktadır. Sıklıkla bu ajanlar, biyolojik bir süreç üzerindeki etkilerini test etmek amacıyla uygulanır. Ajanlar ayrıca hayvanların deneylere hazırlanmasında da önemli bir rol oynayabilir. Bu videoda, deneysel ajanların uygulanmasında dikkat edilmesi gereken önemli hususları, ajan iletim araçlarını, bazı spesifik uygulama yollarını ve bu temel tekniklerin uygulamalarını tartışacağız.
Peki, deneysel bir ajanın uygulaması planlanırken hangi faktörler göz önünde bulundurulmalıdır?
Birincisi, uygun dozdur. Genellikle hayvanın ağırlığına göre hesaplanan bir ajanın doğru dozunun sağlanması kritik öneme sahiptir.
Uygulama yolunun değerlendirilmesi de aynı derecede önemlidir. Ajanın lezzeti, viskozitesi, uygulanacak miktar, hedef doku ve istenen yayılım hızı gibi özellikler, mevcut birçok uygulama yolundan hangisini seçmeniz gerektiğini belirleyecektir. Bu videoda, ajan iletiminin en etkili yöntemlerinden biri olan enjeksiyona odaklanacağız.
Bir enjeksiyonun nasıl yapılacağını tartışmadan önce, teknikte kullanılan temel araçları tanıyalım.
Şırınga ile başlayalım. Sıvılar, doğru hacim ölçümlerine olanak tanıyan işaretlemeleri bulunan gövde içerisinde tutulur. Piston gövdeye oturur ve içindekilerin hareketini sağlamak için kullanılır. Son olarak, şırınga ucu, iğne göbeğinin takıldığı yerdir. İğne şaftının karşı ucunda eğimli bir uç bulunur. Dikkatli olun, burası çok keskindir!
İğne göbekleri, boyutlarını veya "gauge" (kalibre) değerlerini yansıtacak şekilde renk kodlarına ayrılmıştır; yüksek gauge numaraları daha küçük iğneleri belirtir. Gauge değerleri, istenen uygulama yoluna göre seçilir: alan ne kadar küçük veya hassassa, o kadar küçük bir iğne gerekir.
Deneyiniz için uygun iğneyi ve şırıngayı seçtikten sonra, pistonu geri çekerek ajanı gövdeye çekin. Ajanla birlikte enjekte edilen hava kabarcıkları dokuları bozabilir ve deney hayvanına zarar verebilir. Bu nedenle, şırıngayı ters çevirin ve gövdeye hafifçe vurun; böylece kabarcıklar uca doğru hareket ederek dışarı çıkacaktır. Mümkünse, kabarcıkların tamamen uzaklaştırıldığından emin olmak için bir miktar fazla ajanı dışarı atın.
Şırınganız kilitlendiğine ve doldurulduğuna göre, artık enjeksiyon yapmaya neredeyse hazırsınız!
Başlamadan önce, eldivenler de dahil olmak üzere uygun kişisel koruyucu ekipmanlarla donanmanız önemlidir. Hayvanların doğru şekilde tutulması da esastır ve kullanılan enjeksiyon bölgesine göre küçük farklılıklar gösterir.
Genellikle hayvanın boynunun dermis tabakasının altına hedeflenen deri altı (subkutan) enjeksiyonlar için fareler "ense derisinden tutularak" (scruffing) sabitlenir. İlk olarak, hayvanı kuyruğundan tutun ve kafes kapağına tutunmasını sağlayın. Ardından, hayvanın omuzları boyunca bir deri çadırı oluşturacak şekilde ense derisini sıkıca kavrayın.
İğne, oluşturulan deri çadırının tabanından yerleştirilmeli ve ajan, piston üzerine uygulanan sıkı ve tutarlı bir basınçla verilmelidir. Enjekte edilen sıvı, kan dolaşımına yavaşça emilecektir.
Vücut boşluğuna yapılan intraperitonal enjeksiyonlar, ağız yoluyla almaya benzer bir hızda emilir. Karın bölgesine erişmek için, ensesinden tuttuğunuz hayvanı ters çevirin ve kuyruğunu küçük parmağınızın altına güvenli bir şekilde sıkıştırın.
Ardından, hayvanın karnını zihnen 4 kadrana ayırın ve iğneyi sol veya sağ alt kadrana yerleştirin. Birkaç yüz µL'ye kadar ajan iletmek için pistona sıkı ve tutarlı bir basınç uygulayın. Alternatif olarak, intravenöz enjeksiyonlar, deneysel ajanın daha verimli ve sistemik bir şekilde iletilmesini sağlar.
IV enjeksiyonlar en yaygın olarak kuyruk venlerine yapılır. Öncelikle fareler, venlerin şişmesini sağlayarak iğne girişini kolaylaştırmak için birkaç dakika ısı lambası altında ısıtılır. Enjeksiyon sırasında fareyi sabit tutmak için, kuyruğunu arkadaki özel delikten geçirerek plastik bir sabitleyiciye yerleştirin.
Başarılı intravenöz enjeksiyonlar için doğru damarın belirlenmesi zorunludur. Kuyruğun alt tarafındaki arteri değil, kuyruğun her iki yanındaki iki kaudal venlerden birini bulduğunuzdan emin olun.
İğnenin eğimli tarafı yukarı bakacak şekilde tutarak vene yerleştirin. İğne doğru yerleştirildiyse, ajan damar boyunca ilerledikçe enjeksiyon, venin rengini koyu maviden soluk beyaza çevirecektir.
Her enjeksiyondan sonra, iğneyi kapağını geri kapatmadan biyotehlikeli kesici-delici alet konteynerine atın. İğne uçları körelebileceğinden ve fareye zarar verebileceğinden, iğneyi asla tekrar kullanmayın.
Yaygın enjeksiyon yöntemlerine aşina olduğunuza göre, deneysel ajan iletiminin bazı pratik uygulamalarına bakalım.
Birçok deneyde, hastalık ilerlemesinin yanı sıra konakçı-patojen etkileşimlerini incelemek için fareler belirli bir patojenle enfekte edilir. Örneğin, antibiyotik dirençli bakterilerin deri altına enjekte edilmesi, boyutları patojenin virülansına göre ölçülen lezyonlara neden olur. Alternatif olarak, enfeksiyon bölgesine bağışıklık hücresi göçünün canlı görüntülemesi için ayak tabanına yapılan enjeksiyonlar kullanılabilir.
Fare modelleri, kanser ilerlemesi ve terapötiklerin incelenmesi için de faydalıdır. Bu modelleri oluşturmak için, hem karsinojenik bileşiklerin iletimi hem de kanser hücrelerinin konakçı dokularına implantasyonu yoluyla farelerde malign büyüme hızla ve verimli bir şekilde indüklemek için enjeksiyonlar kullanılabilir.
Bununla birlikte, ajan iletimi için her zaman enjeksiyon gerekmez. Örneğin, solunum yolu hastalığının ilerlemesini taklit etmek ve incelemek amacıyla ilgili bir ajanı akciğerlere uygulamak için intranazal inokülasyon kullanılabilir. Bir başka yol olan gavaj, gıda veya su bazlı tedaviyle elde edilemeyen kesin ve doğru bir dozaj sağlamak için ajanın mideye doğrudan uygulanmasına olanak tanır.
Fareye deneysel ajanların verilmesine ilişkin JoVE genel bakış videosunu izlediniz. Bu videoda, deneysel ajan seçerken dikkat edilmesi gereken faktörleri, fare enjeksiyonları için kullanılan araç ve stratejileri ve bu kritik tekniklerin bazı uygulamalarını inceledik. İzlediğiniz için teşekkürler!
Fareler (Mus musculus) üzerinde gerçekleştirilen birçok araştırma, hayvana deneysel bir ajanın uygulanmasını gerektirir. Örneğin, belirli bir tedavini…
Bu videodaki bölümler
0:00
Overview
0:41
Planning the Administration of an Agent
1:28
Tools for Injection
2:53
Mouse Injection Methods
5:40
Applications
7:12
Summary
Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.