Name: Çözünme sırasında tutarlı bir anti-Stokes Raman saçılması (CARS) Mikroskopi visualizes İlaç Tabletler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: Öğrenin, CARS mikroskopisi ve UV absorpsiyon spektroskopisi kullanarak ilaç tabletlerinin çözünme sürecini gerçek zamanlı görselleştirme yöntemini. Bu teknik, yüzey değişikliklerini ve çözünme hızlarını ilişkilendirerek geleneksel yöntemlere göre daha detaylı bilgi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

AF NWO uygulamalı bilim bölümüdür Hollandalı Teknoloji Vakfı STW, ve Ekonomik İşler Bakanlığı Teknoloji Programı tarafından desteklenmektedir. (STW OTP 11114).

<img alt="Şekil 1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51847/51847fig1highres.jpg" width="500"> Şekil 1.. Çözünme kurulum ile içsel akışı ile CARS mikroskop kurulum gösteren şematik. Bu rakam Fussell ark 13 modifiye edilmiştir. 1.. Sistem Başlatma <ol><li> 1.064 nm ARABALAR lazer darbeli 20 İcra Komitesinin açın ve lazer (yaklaşık 1,5 saat)-ısınmak için izin verir. </li><li> Döteryum lamba UV ışık kaynağı açın ve (yaklaşık 10 dk)-ısınmak için izin verir. </li><li> "Açmak" için deklanşör düğmesini ayarlayarak döteryum lamba UV ışık kaynağına deklanşörü açın. </li><li> Mikroskop kontrol bilgisayarı açın ve mikroskop kontrol yazılımı açın. </li><li> UV spektrometre PC'de açmak ve spektrometre kontrol yazılımı açın. </li></ol> 2. Microscope Kur <ol><li> İstediğiniz mikroskop hedefi seçin. Bu çalışmada sunulan sonuçlar elde etmek için bir 20X/0.5 NA objektif kullanın. </li><li> Uyarma lazerler iletmek ve CARS sinyalini yansıtmak için filtre seti taret filtreleri ayarlayın. Bu çalışmada gösterilen sonuçları çoğaltmak için 775 nm uzun geçiş dikroik ayna ve 650 nm bant geçiren 40 nm filtre seçin. </li><li> ARABALAR istenmeyen ışık sinyal ve filtre iletmek photomultiplier tüp (PMT) dedektör önüne uygun filtreler yerleştirin. Bu çalışmada yapılan deneyler çoğaltmak için 750 nm kısa-pass filtre ve 650 nm bant geçiren 40 nm filtre ile ışık filtre. </li></ol> 3.. Sistem Test <ol><li> Boru yapılan önceki sıvı temizlemek için Z-şekilli UV akış hücresi içinden bir kaç dakika için peristaltik pompa ve pompa çözünme ortamı açın. </li><li> 2 dakika içinde pompalanır çözünme ortamının miktarı tartılarak pompanın akış hızını belirler. Pompa hızı un ayarlayıntil istenen akış hızı ulaşılır. Bu çalışmada rapor edilen sonuçları elde etmek için 5 ml / dk 'lık bir akış hızında erime araç pompası. </li></ol> 4. UV Feshi Ölçüm <ol><li> UV spektrometre kontrol yazılımı olarak, "Dosya" menüsünü tıklatın mevcut tüm spektrometrelerin listeleyen bir pencere açmak için "Yeni absorbans ölçümü" tıklayın. </li><li> Doğru UV spektrometre üzerine tıklatın ve sonra veri toplama parametrelerini görüntüleyen bir pencere açmak için "İleri" butonuna tıklayınız. </li><li> Entegrasyon zaman ve spektral ortalamasını hem tanımlayın. Bu çalışmada gösterilen sonuçları çoğaltmak için 200 ortalamaları ile 150 ms bir entegrasyon süresini seçin. </li><li> Referans spektrumu kaydetmek için kullanılan ekrana getirmek için "Next" düğmesini tıklayın. </li><li> Bir referans spektrumu kaydetmek için sarı bir ampul gibi görünen butonuna tıklayın. Bu ölçüm sırasında sürekli çözünme ortamı Pompa. </li><li> "Kapalı" anahtarını ayarlayarak döteryum lamba UV ışık kaynağına deklanşörü kapatın. </li><li> Karanlık spektrum kaydetmek için kullanılan ekrana getirmek için "Next" düğmesini tıklayın. </li><li> Karanlık bir spektrum kaydetmek için bir gri ampul gibi görünen butonuna tıklayın. Bu ölçüm sırasında sürekli çözünme ortamı Pompa. </li><li> UV absorbans ölçümleri başlamak için "Finish" yazan butona tıklayın. </li></ol> 5.. ARABALAR Feshi video <ol><li> Bir "XYT" ölçümü seçer butonuna CARS mikroskop kontrol yazılımı tıklamayla. </li><li> Açılan kutusunu tıklatın ve piksel görüntü boyutunu seçin. Bu çalışmada bildirilen görüntüleri çoğaltmak 512 x 512 piksel görüntü boyutunu seçin. </li><li> "Hızlı", "orta", ya da "yavaş" konumuna birine görüntüleme hızı sürgüsünü sürükleyin. Ulaşmak için hızlı tarama hızı (görüntü başına 1.12 sn) kullanınBu çalışmada gösterilen sonuçları. </li><li> Yakınlaştırma seviyesini ayarlamak için "zoom" etiketli okları tıklatın. Görünüm bu sonuçlar için kullanılan (350 x 350 mikron) ve zoom ve alan seviyesini çoğaltmak için "2x" zoom seçin. </li><li> Açılan kutusunu tıklatın ve kullanılan hedefi seçin. </li><li> Giriş kutusuna tıklayın ve (deney uzunluğuna bağlı olarak) CARS çözünme video için gerekli kare miktarını yazın. Bu çalışmada gösterilen sonuçları üretmek için 900 çerçeve kayıt ile yaklaşık 15 dakika boyunca erimesini Davranış. </li></ol> 6.. ARABALAR Dalgaboyu Tuning <ol><li> Optik parametrik osilatör arzu edilen Raman frekansta maksimum Lazer çıkışı ulaşana kadar (OPO) kontrol, sıcaklık, piezo konum ve Lyot filtre konum olarak OPO arasında ayarları kullanarak. 2.960 cm -1 Bu makalede sunulan gibi aynı sonuçları kaydetmek için nağme OPO. </li></ol> 7. Feshi Deney<ol><li> Özel numune tutucu içine bir tablet yerleştirin inşa ARABALAR, akış hücresinin numune tutucu sızıntıyı önlemek için sıkıca kapalı vida. </li><li> CARS borularını takın CARS çözünme ortamı ve peristaltik pompa içeren beher akış hücresinin bağlayan akış hücresinin. </li><li> Mikroskop sahnede bir tablet içeren CARS akış hücresi yerleştirin. </li><li> ARAÇLAR hücre çözünme ortamı beher, peristaltik pompa, Z-şekilli UV akış hücresi ve atık toplama beher bağlı akış kontrol edin. </li><li> Sürekli tarama modunda mikroskop sistemi taramaya başlamak için "XY tekrar" düğmesini tıklayın. </li><li> Tabletin yüzey mikroskop kontrol bilgisayar ekranında görüş alanında kadar amaç taşıyarak mikroskop odağı ayarlayın. </li><li> "PMT" etiketli mikroskop kontrol yazılımı sürgünün üzerine tıklayın. Kadar PMT gerilimi artan / azalan tarafından dedektör hassasiyetini ayarlayıntatmin edici bir resim (çok koyu ne de doymuş ne) ekranda görünür. NOT: Yüksek gerilim kullanarak PMT'yi aşırı dikkat edin. Bu iş için, biz 600 V civarında bir PMT gerilim kullanılır ama bu kullanılan PMT bağlı olarak değişebilir. </li><li> Sürekli taramayı durdurmak için mikroskop kontrol yazılımı "Durdur" düğmesini tıklayın. </li><li> Aynı anda (veya mümkün olduğunca birbirine yakın) çözünme ortamı pompalama başlatmak, tek bir XYT tarama kayıt başlatmak ve UV absorbans spektrumları toplamaya başlar. </li><li> Çözünme Deney sırasında, video kayıt izlemek ve elle tablet odak sürekli olmasını sağlamak için mikroskop odağı ayarlayın. </li></ol> 8. Mesaj Feshi <ol><li> Kapatarak peristaltik pompayı durdurun. </li><li> "Dosya" menüsünü tıklatın ve sonra bir video olarak XYT taramayı kaydetmek için mikroskop kontrol yazılımı tıklayıp "video olarak kaydet". </li><li> "Dosya" menüsüne tıklayın, ardından "Kaydet "ve ardından" UV absorpsiyon spektrumları koleksiyonu durdurmak için spektrometre kontrol yazılımı Durdur Export ". </li><li> CARS mikroskop aşamasında gelen akış hücresinin ve CARS akış hücresinden tablet kaldırın. </li><li> CARS su ve etanol kullanılarak akış hücresinin yıkayın ve sonra kağıt mendil kullanarak kurutun. </li></ol>

<ol><li>Ku, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+Biopharmaceutical+Classification+System+in+Early+Drug+Development%5BTitle%5D)+AND+%22The+AAPS+Journal%22%5BJournal%5D)">Use of the Biopharmaceutical Classification System in Early Drug Development.</a> The AAPS Journal. 10, 208-212 (2008).</li>
<li>The United States Pharmacopeia. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22United+States+Pharmacopeial+Convention+32nd+ed%22">United States Pharmacopeial Convention 32nd ed</a>. , Rockville, MD. 1-8 (2009).</li>
<li>Florence, A. J., Johnston, A. Applications of ATR UV/vis spectroscopy in physical form characterisation of pharmaceuticals. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFlorence%2C+AJ+%22Spectrosc.+Eur%22">Spectrosc. Eur</a>. 4, John Wiley & Sons Ltd. (2004).</li>
<li>Aaltonen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+measurement+of+solvent-mediated+phase+transformations+during+dissolution+testing%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharm.+Sci%22%5BJournal%5D)">In situ measurement of solvent-mediated phase transformations during dissolution testing.</a> J. Pharm. Sci. 95, 2730-2737 (2006).</li>
<li>Savolainen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Better+understanding+of+dissolution+behaviour+of+amorphous+drugs+by+in+situ+solid-state+analysis+using+Raman+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Better understanding of dissolution behaviour of amorphous drugs by in situ solid-state analysis using Raman spectroscopy.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 71, 71-79 (2009).</li>
<li>Slipchenko, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vibrational+imaging+of+tablets+by+epi-detected+stimulated+Raman+scattering+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Vibrational imaging of tablets by epi-detected stimulated Raman scattering microscopy.</a> Analyst. 135, 2613-2619 (2010).</li>
<li>Parekh, S. H., Lee, Y. J., Aamer, K. A., Cicerone, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-Free+Cellular+Imaging+by+Broadband+Coherent+Anti-Stokes+Raman+Scattering+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Label-Free Cellular Imaging by Broadband Coherent Anti-Stokes Raman Scattering Microscopy.</a> Biophys. J. 99, 2695-2704 (2010).</li>
<li>Kang, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+Situ+Visualization+of+Paclitaxel+Distribution+and+Release+by+Coherent+Anti-Stokes+Raman+Scattering+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">In Situ Visualization of Paclitaxel Distribution and Release by Coherent Anti-Stokes Raman Scattering Microscopy.</a> Anal. Chem. 78, 8036-8043 (2006).</li>
<li>Kang, E., Robinson, J., Park, K., Cheng, J. -X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paclitaxel+distribution+in+poly%28ethylene+glycol%29%2Fpoly%28lactide-co-glycolic+acid%29+blends+and+its+release+visualized+by+coherent+anti-Stokes+Raman+scattering+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Controlled+Release%22%5BJournal%5D)">Paclitaxel distribution in poly(ethylene glycol)/poly(lactide-co-glycolic acid) blends and its release visualized by coherent anti-Stokes Raman scattering microscopy.</a> J. Controlled Release. 122, 261-268 (2007).</li>
<li>Kang, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+coherent+anti-stokes+Raman+scattering+microscopy+to+image+the+changes+in+a+paclitaxel-poly%28styrene-b-isobutylene-b-styrene%29+matrix+pre-+and+post-drug+elution%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedical+Materials+Research+Part+A%22%5BJournal%5D)">Application of coherent anti-stokes Raman scattering microscopy to image the changes in a paclitaxel-poly(styrene-b-isobutylene-b-styrene) matrix pre- and post-drug elution.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 87A, 913-920 (2008).</li>
<li>Jurna, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coherent+anti-Stokes+Raman+scattering+microscopy+to+monitor+drug+dissolution+in+different+oral+pharmaceutical+tablets%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Innovative+Optical+Health+Sciences%22%5BJournal%5D)">Coherent anti-Stokes Raman scattering microscopy to monitor drug dissolution in different oral pharmaceutical tablets.</a> Journal of Innovative Optical Health Sciences. 2, 37-43 (2009).</li>
<li>Windbergs, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+Imaging+of+Oral+Solid+Dosage+Forms+and+Changes+upon+Dissolution+Using+Coherent+Anti-Stokes+Raman+Scattering+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Chemical Imaging of Oral Solid Dosage Forms and Changes upon Dissolution Using Coherent Anti-Stokes Raman Scattering Microscopy.</a> Anal. Chem. 81, 2085-2091 (2009).</li>
<li>Fussell, A., Garbacik, E., Offerhaus, H., Kleinebudde, P., Strachan, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+dissolution+analysis+using+coherent+anti-Stokes+Raman+scattering+%28CARS%29+and+hyperspectral+CARS+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">In situ dissolution analysis using coherent anti-Stokes Raman scattering (CARS) and hyperspectral CARS microscopy.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 85, 1141-1147 (2013).</li>
<li>Lua, Y. -Y., Cao, X., Rohrs, B. R., Aldrich, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+Characterizations+of+Spin-Coated+Films+of+Ethylcellulose+and+Hydroxypropyl+Methylcellulose+Blends.+%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Surface Characterizations of Spin-Coated Films of Ethylcellulose and Hydroxypropyl Methylcellulose Blends. </a> Langmuir. 23, 4286-4292 (2007).</li>
<li>Skoog,, Holler, F. J., Crouch, S. R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSkoog%2C++%22Principles+of+Instrument+analysis.+6+ed%22">Principles of Instrument analysis. 6 ed</a>. , Thomson Brooks/Cole. (2007).</li>
<li>Rodríguez-Hornedo, N., Lechuga-Ballesteros, D., Hsiu-Jean, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phase+transition+and+heterogeneous%2Fepitaxial+nucleation+of+hydrated+and+anhydrous+theophylline+crystals%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Pharm%22%5BJournal%5D)">Phase transition and heterogeneous/epitaxial nucleation of hydrated and anhydrous theophylline crystals.</a> Int. J. Pharm. 85, 149-162 (1992).</li>
</ol>

Yazarlar, hiçbir rakip mali çıkarlarını olmadığını beyan ederim.

CARS mikroskobik çözünme deneyleri yapılırken, deney sırasında izlenmesi gereken birkaç kritik husus vardır. İlk olarak, çözünme ortamının CARS akış hücresine verilmesi odağın hareket etmesine neden olur. Bu, görüntünün hemen kaybolduğu ve yüzeyi tekrar bulmak için birkaç mikron objektif ayarlaması gerektiği anlamına gelir. İkinci olarak, deney sırasında cam kapağın kırılması durumunda CARS akış hücresinden sıvı sızıntısı riski vardır. Bu, potansiyel olarak optiklerde sıvı hasarına neden olabilir, bu nedenle camın kırıldığı anlamına gelebilecek herhangi bir çatlama sesini dinlemek önemlidir. Son olarak, deney sırasında sistemdeki partikül madde nedeniyle boruların tıkanması için küçük bir şans da vardır, bu, UV spektrumlarında ani olağandışı bir değişiklik olarak görülebilir ve ayrıca deney sırasında akışın periyodik olarak kontrol edilmesi yoluyla görülebilir.
Boruların partikül tıkanması, esas olarak çözünme sırasında parçalanacak şekilde tasarlanmış tabletlerle ilgili bir sorundur. Bu, bu tekniğin sınırlamalarından biridir, çünkü bu sistem, görüntülemeye izin vermek için tabletin yüzeyinin çözünme boyunca bozulmadan kalmasını gerektirir. Parçalanan tabletlere ek olarak, çözünme sırasında şişecek şekilde tasarlanmış tabletleri görüntülemek şu anda mümkün değildir, çünkü bu, CARS akış hücresinin kırılmasına neden olabilir.
Çözünme sırasında tabletlerin görüntülenmesi, çözünen bir tabletin yüzeyinde neler olduğunun daha iyi anlaşılmasını sağlar. Geleneksel farmasötik çözündürme yöntemleri, yalnızca çözünme ortamında çözünen ilaç içeriğine odaklanır ve bu da tabletin gerekli standardı geçip geçmediğini belirleyebilir. Ancak, başarısız bir test durumunda, başarısızlığa neyin neden olduğunu belirlemek zordur. Başarısız bir çözünme testi durumu, potansiyel olarak CARS mikroskobu kullanılarak yerinde çözünme analizinin cevaplar sağlayabileceği yerdir.
CARS mikroskobu kullanılarak yerinde çözünme analizi için gelecekteki uygulamalar, formülasyon geliştirme sırasında birden fazla ilaç veya yardımcı madde içeren daha karmaşık tabletlerin, özellikle şişmeyen sürekli veya kontrollü salım dozaj formlarının kullanıldığı araştırmaları içerebilir. Ek olarak, in vivo ile daha yakından ilişkili koşullar yaratan biyoilgili çözünme ortamı kullanarak numuneleri araştırmak mümkün olabilir. 
Sonuç olarak, bu çalışma, CARS mikroskobunun, hem ilaç hem de yardımcı madde içeren bir tablette ilacın seçici olarak görüntülenmesine izin veren Raman titreşim frekanslarına dayalı olarak hızlı kimyasal olarak spesifik görüntüleme yeteneğine sahip olduğunu göstermektedir. Ek olarak, hat içi UV absorpsiyon spektroskopisi ile birleştirilmiş CARS mikroskobu, çözünmeye uğrayan tabletlerin yüzeyini izleyebilen ve CARS kullanılarak görülen yüzey değişikliklerini çözünme hızındaki değişikliklerle ilişkilendirebilen güçlü bir araçtır.

Tabletler ve kapsüller gibi oral farmasötik dozaj formlarının geliştirilmesi sırasında çözünme testi güçlü bir vurgu bulunmaktadır. Oral dozaj formları, terapötik etki için absorbe edilmeden önce çözünmesi gerekmektedir. Az çözünen ilaçlar genellikle 1 çözünme testleri, özellikle önemli kılan yeterli konsantrasyona ulaşmasını sorunları var. Farmakope erime yöntemler, genellikle erime analizi için kullanılmıştır. Çoğu durumda, bu daha sonra çözünme ortamı akan bir kabın içine yerleştirilen bir tablet veya kapsül gibi bir ilaç hazırlanması gerekir. Çözünmüş ilaç konsantrasyonu daha sonra, UV soğurma spektroskopisi 2 gibi standart spektroskopik teknik kullanılarak çözünme ortamının örnekleri analiz edilerek belirlenir. Bu geleneksel farmasötik çözünme metotları, numunenin doğrudan analizi veya dozaj formunun çözünme yüzeyinde meydana olabilecek herhangi bir değişiklik sağlamaz.Çözünme esnasında numunenin doğrudan analizi dağılan dozaj formu hakkında daha fazla bilgi sağlamak ve potansiyel çözünme testi yetmezliğine neden sorunları tespit edebilir. Eriyen dozaj formlar doğrudan analizi erime sürecini izleme yeteneğine sahip olan in situ analitik tekniklerin kullanımını gerektirir. Çözünme esnasında in situ kaydetmek için analitik teknik çözünme ortamının mevcudiyetinde etkilenebilir olmamalıdır ve güvenilir bir teknik saniye sırayla dağılan dozaj formuna değişiklikleri ölçmek için bir yüksek zamansal çözülmesi gerekmektedir. Zayıflatılmış toplam yansıtıcılık UV spektroskopisi çözünme esnasında değişiklikleri ölçmek için uygun olduğu gösterilmiştir, ancak görüntüleme teknikleri 3 tarafından sunulan uzaysal çözünürlüğü yoksun olmuştur. , Taramalı elektron mikroskobu (SEM) ve spontan Raman haritalama gibi geleneksel ilaç görüntüleme teknikleri kullanımını engelleyen sınırlayıcı faktörler var hem defesih için-situ. SEM görüntüleme farmasötik dozaj formlarının yüzeyini görüntüleme yeteneğine sahip yüksek-çözünürlüklü hızlı görüntüleme tekniğidir. Bununla birlikte, genel olarak görüntüleme SEM vakum koşulları altında gerçekleştirilebilir ve in situ çözünme görüntüleme için uygun olmayan hale örnek kaplama gerektirir. Bir hücre içinden akışı ve UV-akış emme spektroskopisi ile birlikte fiber bağlanmış kendiliğinden Raman spektroskopisi, teofilin 4, karbamazepin ve indometasin 5 de dahil olmak üzere, çözünme esnasında in situ çeşitli ilaç sistemleri izlemek için gerçekleştirilmiştir. Raman spektroskopisi dağılması sırasında meydana gelen yüzey değişiklikleri belirleme yeteneğine sahip ama yüzey değişiklikleri meydana nerede hakkında hiçbir mekansal bilgi verdi. Spontan Raman eşleme Raman spektrumunu kullanır ve numunenin yüzeyi ilgili uzamsal bilgiler sağlar, ancak görüntü alma, görüntü alanına bağlı olarak saat dakika sırasına alırİn situ erime görüntülemede için uygun değildir. Tutarlı bir anti-Stokes Raman saçılması (CARS) mikroskopi hızlı bir görüntüleme tekniği ve inline UV absorpsiyon spektroskopisi ile birlikte, bize yerinde çözünme analizi yapabilen bir teknik geliştirmek için izin olmasıdır. OTOMOBİL mikroskopi in situ çözünme analizlerinde için uygun bir teknik yapma çözünme ortamının mevcudiyetinde etkilenmeyen hızlı kimyasal seçici görüntü sağlar. OTOMOBİL teknikleri lazerlerin darbe süresine göre iki gruba kabaca ayrılır; bir dar ARABALAR (pikosaniyelik lazerlerin) ve diğer varlık genişbant ARABALAR (femtosaniye lazerlerin) olmak. Tipik OTOMOBİL mikroskop sistemi iki darbeli lazer kaynakları ve bir ters mikroskop oluşur. OTOMOBİL bir sinyal üretmek için, darbeli lazer biri ayarlanabilir olması gerekir böylece bir Raman titreşim eşleşen iki lazerler arasında bir frekans farkı yoktur. Ek olarak,iki lazer aynı zamanda numunenin aynı bölgede gelen iki lazerler gelen darbeleri ile, boşluk (mekansal) ve zaman (geçici) içinde üst üste gerekmektedir. Raman titreşimler kimyasal özeldir ve OTOMOBİL sinyali sadece mikroskop odak hacmi içinde oluşturulur gibi, arabalar mikroskopi aşağı kırılma sınırına çözünürlüğe sahip kimyasal olarak seçici görüntüleme yeteneğine sahiptir. Tek bir Raman titreşim modunu kullanarak Darbant ARABALAR mikroskopi spontan Raman haritalama teknikleri 6 ayına göre yaklaşık 100x daha hızlı görüntüleme sağlar. Daha geniş bir spektral aralıkta bant ARABALAR mikroskobu görüntüleri (600-3,200 cm -1 vs ~ 4 cm -1) ama (bir (10 cm -1 vs ~ 4 cm -1 civarında) daha düşük spektral çözünürlüğü ve yavaş görüntüleme hızı 50 msn / pixel vs ~ 5 mikro saniye olduğu / piksel) dar OTOMOBİLLER mikroskopi 7&#39;ye kıyasla. Darbant ARABALAR mikroskopi görüntü dru için kullanılır olmuşturBazı ilaç sistemlerinden g bırakma. Farmasötik formülasyonların alanında, Kang ve diğ. 8-10 görüntülenmiş ilaç yüklü polimer filmler. Başlangıçta statik çözünme ortamından, ilaç salınmasına ait görüntüleme izledi yüklenen ilaç dağılımını görüntülenmiş. Jurna et al. 11 ve Windbergs et al. 12, bir adım ileri gitmiş ve dinamik bir çözünme ortamı kullanılarak ilaç çözülmesini görüntüleme ve ardından lipid dozaj formlarında teofilin dağılım ilk olarak görüntüsü. Biz aynı anda UV absorpsiyon spektroskopisi ile çözünmüş ilaç konsantrasyonunu kaydederken dar ARABALAR mikroskobu ile çözülmesini geçiren tablet üzerinde yüzey değişiklikleri izlemek için yeni bir analitik yöntem geliştirdik. Biz, etil selüloz, çözünme ortamı olarak su ile birlikte çözünmeye geçiren Model ilaç teofilin içeren bu yöntem, görüntüleme tablet kullanımını göstermektedir.

<table><tbody><tr><td>Paladin 1.064 nm lazer</td><td>Tutarlı</td><td></td><td>Prototip modeli satılık değil</td></tr><tr><td>Levante Emerald Optik parametrik osilatör</td><td>APE Berlin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IX71 Mikroskop</td><td>Olympus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fluoview 300 tarama ünitesi</td><td>Olympus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fotoçoğaltıcı tüp R3896</td><td>Hamamatsu</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dikili tip optik / filtreler</td><td>Thorlabs ve Chroma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Reglo peristaltik pompa</td><td>ISMATEC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>USB2000+ spektrometresi</td><td>Okyanus Optiği</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DT-MINI-2-GS ışık kaynağı</td><td>Okyanus Optiği</td><td></td><td></td></tr><tr><td>FIA-Z-SMA-TEF Z şekilli akış hücresi</td><td>Okyanus Optiği</td><td></td><td></td></tr><tr><td>QP400-2-SR-BX fiber optik</td><td>Okyanus Optiği</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plastik borular</td><td>ISMATEC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CARS çözünme tablet akış hücresi</td><td></td><td></td><td>Üniversitede ev yapımı - 12 mm çapında, 3 mm kalınlığında tabletleri tutacak şekilde tasarlanmıştır. Akış hücresi yaklaşık 0,5 mm'lik bir kanal derinliğine sahiptir.</td></tr><tr><td>Cam beherler</td><td>VWR</td><td>D108980</td><td></td></tr><tr><td>Teofilin anhidrat</td><td>BASF</td><td>30058079</td><td></td></tr><tr><td>Etil selüloz</td><td>Colorcon</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

Çözünme sırasında tutarlı bir anti-stokes raman saçılması (cars) mikroskopi visualizes İlaç tabletler

Coherent anti-Stokes Raman Scattering (CARS) Microscopy Visualizes Pharmaceutical Tablets During Dissolution

Geleneksel ilaç çözünme testleri, çözünme ortamı içinde ilaç içeriğinin ölçülmesi ile, zaman içinde çözülmüş ilaç miktarını belirler. Bu yöntem, çözünen tablet yüzeyinde ne olduğu hakkında çok az doğrudan bilgi sağlar. Tablet bileşimi ve yüzey yapısı, çözünme esnasında değiştirebilir gibi, çözünme testi sırasında onu izlemek için gereklidir. UV soğurma spektroskopisi aynı zamanda teofilin anhidrat ve etil selüloz,% 50 karışımı içeren tabletler için çözülmüş ilaç konsantrasyonunun satır analiz sağlamaktadır sırasında bu çalışmada, tutarlı bir anti-Stokes Raman saçılma mikroskobu çözünmesi esnasında görüntü tabletlerin yüzey için kullanılır. Ölçümler, in situ OTOMOBİL mikroskopla etil selüloz varlığında seçici olarak teofilin görüntüleme yeteneğine sahip olduğunu göstermiştir. Buna ek olarak, teofilin anhidrat iğne şeklindeki ağlama ile, çözünme esnasında teofilin monohidrata dönüştürülebilirçözünme esnasında tablet yüzeyi üzerinde büyüyen Stals. Akan çözünme ortamına ilacın düşük maruz kalma ile birlikte monohidrata teofilin anhidrat dönüşüm azalmış, çözünme oranları ile sonuçlandı. Sonuçlarımız, in situ OTOMOBİL mikroskopisinde inline UV emme spektroskopisi ile birlikte göstermektedir farmasötik bir tablet çözünme izlenmesi ve erime oranındaki değişiklikler, yüzey değişiklikleri korelasyon yeteneğine sahiptir.

ARAÇLAR kullanılarak in situ çözünme analizlerinde mikroskobu tabletler (12 mm çap, düz-yüzlü) çözünme ortamı olarak 5 ml damıtılmış su ile pompalanan Model ilaç teofilin anhidrat ve etil selüloz / dak 'lık bir 50:50 karışımını içeren üzerinde yürütülmüştür. ARAÇLAR görsel (512 x 512 piksel) 2960 cm-1 çözünme deney süresince tablet içindeki teofilin içerik için seçicidir. Şekil 2 çözünme video çerçeveleri seçilmiş Şekil Raman titreşim frekansı, her 1.12 saniye toplanmıştır. Çözünmenin başlangıcından (Şekil 2, zaman 0 saniye) de, tabletin teofilin içeriğini gösteren yeşil alanları vardır ve tablet yüzeyinde bulunan selüloz sadece etil olduğu karanlık alanlar da vardır. Tabletin yüzeyi üzerinde koyu alanlarda bu hafifçe, etil selüloz içeriği görmek mümkündür. Bu rapor çünkü bu olduğuna etil cellulose etrafında 2.930 maximum ve 2975 cm -1 14 ile Raman titreşim frekansları vardır. Yaklaşık 60 saniye sonra dar iğne biçimli kristaller çerçevenin merkezi (Şekil 2, zaman 60 saniye), en az bir kristal çekirdeğinden dışarı doğru artan olarak görülebilir yüzeyinde teofilin monohidrat kristal büyümesinin başlangıcı orada görünüyor . Monohidrat kristal büyüme çok daha net bir şekilde (Şekil 2, süresi 130 sn) 130 saniye sonra görülür olabilir. Buna ek olarak, zaman noktasında 130 sn 'de bu monohidrat kristal tabletin yüzeyi boyunca tamamen yayılmamış görülebilir. Etil selüloz bölgelerin varlığı, fiziksel olarak monohidrat iğnelerin uzaması engelledi gibi görünür. 250 saniye sonra, yüzeyin monohidrat kapsamı monohidrat kristalleri eritmek kendilerini başlıyor olduğunu göstermektedir ki olarak belirgin olmadığı görülebilir. ARABALAR çözünme videodan Şekil 2.. Çerçeveler. Seçilen ARABALAR görüntüleri (2.960 cm -1) etil selüloz tablet ile teofilin anhidratı için bir çözünme video. 60, 130 ve 250 saniye görsel numunenin başka bir alanına kaydedilen ise 0 sec görüntü numunenin bir alanı kaydedilir. ARABALAR Video ilave bilgi olarak mevcuttur. Ölçek çubuğu 50 mm. Ultraviyole (UV) spektroskopisi uyarım kaynağı olarak UV-Işık emme spektroskopisi şeklidir. UV spektroskopisi taban durumundan uyarılmış halde 15 elektron geçişlerinden. Etil selüloz, çözünme ortamı yani kaydedilen UV spektrumu katkı beklenmemektedir pratik olarak çözülmez iken Teofilin 270 nm etrafında geniş bir tepe vardır. Kapatılması konusu öncelikli Analiziinline z-şekilli UV akış hücresi kullanılarak devrim sisi orta us kantitatif çözünme sırasında çözülmüş ilaç miktarını belirlemek için olanak sağlar. 3 etil selüloz tablet ile teofilin anhidrat çözünmesi için UV-çözünme profilini göstermektedir. UV çözünme profili (Şekil 3) gösterir teofilin anhidrat bu hızlı erime 120 saniye içinde yaklaşık 90 ug / ml 'lik bir maksimum konsantrasyona ulaşmıştır başlar; Bu zaman noktasından sonra, çözünme oranı azalmaya başlar. Erime oranındaki azalma, teofilin monohidratın varlığında, 25 ° C de 16 (çözünürlük 12 mg / ml teofilin anhidrat daha az çözünür olan yüzeyinde kristaller (25 ° C 16 çözünürlüğü 6 mg / ml) olabilir ) ve açık bir şekilde, bu zaman noktasında ARAÇLAR erime video (Şekil 2) görülmektedir. Kademeli olarak azaltılması çözünme hızı da kısmen b açıklanabilirakan orta teofilin maruz kalma ya azalma. Teofilin, kalan, etil selüloz çözünme ortamına maruz teofilin engellemektedir çözünen kadar etil selüloz, suda hemen hemen çözünmez olduğu için bu azalma oluşur. <img alt="Şekil 3," fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51847/51847fig3highres.jpg" width="500"> Çözünme deney sırasında çözünme ortamı teofilinin konsantrasyonunu gösteren etil selüloz tablet ile birlikte bir teofilin anhidrat için zaman grafiği Şekil 3,. UV çözünme profili. Konsantrasyon.

Tutarlı anti-Stokes Raman saçılımı (OTOMOBİL) mikroskopi yerinde ve çözünme uygulanan farmasötik tablet yüzeyinin gerçek zamanlı görselleştirme sağlamak için bir iç akış yoluyla erime kurulumu ile birleştirilir. Bu özel inşa kurulumu kullanarak, bu hat üzerinde UV absorpsiyon spektroskopisi kullanılarak kaydedilen ilaç çözünme profilleri ile ARABALAR videoları ilişkilendirmek mümkündür.

Çözünme sırasında tutarlı bir anti-Stokes Raman saçılması (CARS) Mikroskopi visualizes İlaç Tabletler

Traditional pharmaceutical dissolution tests determine the amount of drug dissolved over time by measuring drug content in the dissolution medium. This ...

Bu prosedürün genel amacı, yerinde araba çözünme analizi kullanılarak farmasötik çözünme geçiren bir tabletin yüzeyinde kimyasal olarak seçici görüntüleme yapmaktır. Bu, önce otomobilin lazer sistemini tabletteki ilgilenilen kimyasal için seçici bir frekansa ayarlayarak ve spektrumları kaydetmek için UV absorpsiyon spektrometresini ayarlayarak gerçekleştirilir. İkinci adım, arabanın çözünme akış hücresine bir tablet yerleştirmek ve sıkıca vidalamaktır.Daha sonra, arabanın çözünme akış hücresi mikroskop aşamasına yerleştirilir ve borular onu pompaya ve çözünme ortamına bağlar. Son adım, çözünme ortamını pompalarken ve UV absorpsiyon spektrumlarını kaydederken aynı anda bir arabanın çözünme videosunu kaydetmektir. Sonuç olarak, yerinde arabanın çözünme analizi, çözünme sırasındaki yüzey değişikliklerinin görselleştirilebileceğini ve çözünme hızındaki değişikliklerle ilişkilendirilebileceğini göstermek için kullanılır.Bu tekniğin farmakope çözünme yöntemleri gibi mevcut tekniklere göre en büyük avantajı, init car'ın çözünme analizinin, çözünme sırasında değişebilen bir tabletin yüzeyi hakkında derinlemesine bilgi sağlamasıdır. Başlamak için, arabanın lazerini ve döteryum lambası ultraviyole veya UV ışık kaynağını açın ve ısınmasına izin verin. Deklanşör anahtarını açık konuma ayarlayarak döteryum lambası UV ışık kaynağındaki deklanşörü açın.Ardından, mikroskop kontrol PC'sini açın ve mikroskop kontrol yazılımını açın. UV spektrometresi PC'yi açın ve spektrometre kontrol yazılımını açın. İstediğiniz mikroskop objektifini seçin.Uyarma lazerlerini iletmek ve aracın sinyalini yansıtmak için filtre ayar taretindeki filtreleri ayarlayın. Aracın sinyalini iletmek ve istenmeyen ışığı filtrelemek için fotoğraf çarpanı tüp dedektörünün önüne uygun filtreleri yerleştirin. Sistem testi için, borulardaki önceki sıvıyı temizlemek için peristaltik pompayı ve pompa çözünme ortamını V şeklindeki UV akış hücresinden birkaç dakika boyunca açın.İki dakika pompalanan çözünme ortamı miktarını tartarak pompanın akış hızını belirleyin. İstenen akış hızına ulaşılana kadar pompa hızını ayarlayın. UV spektrometresi kontrol yazılımında UV çözünme ölçümü için dosya menüsüne tıklayın.Ardından, mevcut tüm spektrometreleri listeleyen bir pencere açmak için Yeni absorbans ölçümü'ne tıklayın. Doğru UV spektrometresine tıklayın ve ardından veri toplama parametrelerini görüntüleyen bir pencere açmak için ileri'ye tıklayın. Hem entegrasyon süresini hem de spektral ortalamayı tanımlayın.Referans spektrumunu kaydetmek için kullanılan ekranı getirmek için yanındaki etiketli düğmeye tıklayın. Bir referans spektrum pompası çözünme ortamını sürekli olarak kaydetmek için sarı ampul olarak görünen düğmeye tıklayın. Bu ölçüm sırasında, anahtarı kapalı konuma getirerek döteryum lambası UV ışık kaynağı üzerindeki deklanşörü kapatın.Karanlık spektrumu kaydetmek için kullanılan ekranı getirmek için yanındaki etiketli düğmeyi tıklayın. Karanlık spektrumlu bir pompa çözünme ortamını sürekli olarak kaydetmek için gri bir ampul olarak görünen düğmeye tıklayın. Bu ölçüm sırasında, araba mikroskobu kontrol yazılımında UV absorbans ölçümlerine başlamak için bitir yazan düğmeye tıklayın, bir XYT ölçümü seçen düğmeye tıklayın.Açılır kutuyu tıklayın ve piksel cinsinden görüntü boyutunu seçin. Görüntüleme hızı kaydırıcısını hızlı, orta veya yavaş konuma sürükleyin. Yakınlaştırma düzeyini ayarlamak için yakınlaştırma etiketli okları tıklayın.Ardından açılır kutuyu tıklayın ve kullanılan reklam verme amacını seçin. Giriş kutusuna tıklayın ve aracın çözünme videosu için gereken kare miktarını yazın Optik parametrik osilatörü veya OPO kontrol cihazını kullanarak, istenen ramen frekansında maksimum lazer çıkışına ulaşılana kadar OPO'nun sıcaklık pazo konumu ve LEO filtre konumu gibi ayarlarını yapın. Özel yapım arabanın akış hücresinin numune tutucusuna bir tablet yerleştirin ve numune tutucuyu sıkıca kapatın.Sızıntıyı önlemek için, boruları kabinin akış hücresine takın ve kabinin akış hücresini çözünme ortamını ve peristaltik pompayı içeren behere bağlayın. Aracın bir tablet içeren akış hücresini mikroskop tablasına yerleştirin. Aracın akış hücresinin çözünme ortamı kabına bağlı olduğunu kontrol edin.Peristaltik pompa, V şeklindeki UV akış hücresi ve atık toplama kabı. Mikroskop sistemi taramasını sürekli tarama modunda başlatmak için XY tekrar düğmesine tıklayın. Tabletin yüzeyi mikroskop kontrol bilgisayarı ekranında görüş alanına girene kadar objektifi hareket ettirerek mikroskobun odağını ayarlayın.PMT etiketli mikroskop kontrol yazılımındaki kaydırıcıya tıklayın. Ekranda tatmin edici bir görüntü görünene kadar PMT voltajını artırarak veya azaltarak dedektör hassasiyetini ayarlayın. Sürekli taramayı aynı anda durdurmak için mikroskop kontrol yazılımında durdur'a tıklayın.Çözünme ortamını pompalamaya başlayın. Tek bir XYT taraması kaydetmeye başlayın ve UV emici spektrumları toplamaya başlayın. Çözünme deneyi sırasında video kaydını izleyin ve mikroskop odağını manuel olarak ayarlayın.Tabletin sürekli olarak odakta olmasını sağlamak için. Peristaltik pompayı kapatarak durdurun. XYT taramasını spektrometre kontrol yazılımında video olarak kaydetmek için dosya menüsünü ve ardından mikroskop kontrol yazılımında video olarak kaydet'i tıklayın, dosya menüsü kaydet'i tıklayın ve ardından dışa aktarmayı durdur'u tıklayın.UV absorpsiyon spektrumlarının toplanmasını durdurmak için, aracın akış hücresini mikroskop aşamasından çıkarın ve tableti aracın akış hücresinden çıkarın. Son adım olarak, aracın akış hücresini su ve etanol kullanarak yıkayın ve ardından kağıt mendil kullanarak kurulayın. Aracın çözünme videosundan seçilen kareler, çözünmenin başlangıcında burada gösterilir.Tabletin teofilin içeriğini gösteren yeşil alanlar vardır. Karanlık alanlar, tabletin yüzeyinde sadece etil selülozun bulunduğu yerlerdir. Yaklaşık 60 saniye sonra, teofilin monohidrat kristal büyümesinin başlangıcı, çerçevenin merkezindeki en az bir kristal çekirdeğinden dışa doğru büyüyen dar iğne şeklindeki kristaller olarak yüzeyde gözlenir.Monohidrat kristal büyümesi 130 saniye sonra açıkça görülebilir. Şu anda, monohidrat kristali tamamen tabletin yüzeyine yayılmamıştır. Etil selüloz bölgelerinin varlığı, monohidrat iğnelerinin uzamasını fiziksel olarak engelleyebilir.250 saniye sonra, yüzeyin monohidrat kaplamasının o kadar belirgin olmadığı görülebilir, bu da monohidrat kristallerinin UV çözünmeye başladığını düşündürür Teofilin aninin etil selüloz tablet ile çözünmesi için profil Teofilin anhidratın çözünmesi, teofilin anhidratın çözünmesinin 120 saniye içinde mililitre başına yaklaşık 90 mikrogram maksimum konsantrasyona hızla ulaştığını gösterir. Bu zaman noktasından sonra çözünme hızı azalmaya başlar. Bu videoyu izledikten sonra, koskoskobu kullanarak yerinde çözünme analizinin nasıl yapılacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.Bu teknik, kimyasal olarak seçici görüntüleme kullanarak çözünen bir tabletin yüzeyini izleyerek çözünme işleminin daha iyi anlaşılmasını sağlar.

coherent-anti-stokes-raman-scattering-cars-microscopy-visualizes

Research

JoVE Journal

Engineering

Mühendislik

Üç tek dalga boyu kısa darbeli lazerler bir arada tutarlı bir anti-Stokes Raman saçılması (CARS) ve iki kat rezonans ARABALAR (DR-CARS) oluşturmak için kullanılır. Bu sinyaller arasındaki fark, aksi takdirde tutarlı Raman sinyalleri algılamak için zor zayıf Raman sikliklerin görüntüleme sağlayan gelişmiş hassasiyet sağlar.

Çifte rezonans Tutarlı Anti-Stokes Raman saçılımı (CARS) Biyolojik Yapıların Diferansiyel Görüntüleme

Kaynak: Zhang, M. ve ark., Tek bir bakteride deuteryum dahil edilmesinin uyarılmış raman saçma görüntülemesi ile hızlı antimikrobiyal duyarlılık testi. J. Vis. Exp. (2022)Bu video, sömürücü etiketli metabolik aktiviteyi takip ederek antibiyotiklere karşı hassasiyeti değerlendirmek için uyarılmış Raman saçılma mikroskobunun uygulanmasını göstermektedir. Karbon–döteryum sinyallerini izleyerek yöntem, dirençli ve hassas bakteri popülasyonlarının hızlı tespitini sağlar.

Uyarılı Raman Saçılma Mikroskobu Kullanılarak Bakteriyel Antibiyotik Duyarlılığının Tespiti

Kaynak: McCullagh, EA, et al. Beyin Dilimlerinde Miyelinasyonu Görüntülemek için Tutarlı Anti-Stokes Raman Spektroskopisi (CARS) Uygulaması. J. Vis. Uzm. (2022)Video, kemirgen beyin dokusundaki nöronal mimariyi görselleştirmek için floresan ve Tutarlı Anti-Stokes Raman Spektroskopisi (CARS) görüntülemeyi göstermektedir. Nissl boyama, ribozomal RNA'ya bağlanarak hücre gövdelerini etiketlerken, CARS görüntüleme, lazerle indüklenen sinyaller yoluyla lipit açısından zengin miyelini hedefler.

Fare Beyin Dokusundaki Miyelinli Nöronları Görselleştirmek için Tutarlı Anti-Stokes Raman Spektroskopisi

molekül bağlarının doğasında titreşim dayalı Tutarlı bir anti-Stokes Raman saçılması (CARS) mikroskopi etiket ücretsiz kimyasal seçici canlı hücre görüntüleme izin verir. safir lazer ve bir OPO lazer: Bu çalışma femtosaniye Ti dayalı standart bir multiphoton lazer tarama mikroskobu tamamlayıcı mikroskopi tekniği uygulanmasını sunar.

Sapphire ve OPO Lazer Bazlı Standart Lazer Tarama Mikroskobu: Bir Ti bir Tutarlı Anti-Stokes Raman saçılması (CARS) Sisteminin Uygulanması

Uyarılmış Raman saçılma (SRS) mikroskopisi, spesifik kimyasal moieties'in seçici, etiketsiz görüntülenmesini sağlar ve lipit moleküllerini in vivo olarak görüntülemek için etkili bir şekilde sunulmuştır. Burada, SRS mikroskopi prensibine kısa bir giriş sağlıyoruz ve Caenorhabditis elegans'talipid depolama görüntülemede kullanımı için yöntemleri açıklıyoruz.

Uyarılmış Raman Saçılma Mikroskopisi Kullanılarak Caenorhabditis elegans Lipid Depolama Dinamiklerinin Etiketsiz Görüntülenmesi

Bu protokol, D 2O metabolizmasının tek hücreli uyarılmış Raman saçılma görüntülemesi ile 2.5 saat içinde hızlı antimikrobiyal duyarlılık testi (AST) testi sunar. Bu yöntem, klinikte hızlı tek hücreli fenotipik AST için dönüştürücü olan idrar veya tam kan ortamındaki bakteriler için geçerlidir.

Tek Bir Bakteride Döteryum Birleşmesinin Uyarılmış Raman Saçılma Görüntülemesi ile Hızlı Antimikrobiyal Duyarlılık Testi

Cilt içindeki farmasötik bileşikleri görselleştirmek ve ölçmek için tutarlı bir Raman saçılma görüntüleme metodolojisi açıklanmaktadır. Bu yazıda deri dokusu hazırlığı (insan ve fare) ve topikal formülasyon uygulaması, uzaysal zamansal konsantrasyon profillerini ölçmek için görüntü elde etme ve topikal ilaç dağıtımını değerlendirmek için ön farmakokinetik analiz açıklanmaktadır.

Tutarlı Raman Saçılma Görüntüleme Kullanarak Ciltteki Farmasötik Bileşiklerin Görselleştirilmesi ve Ölçülmesi

Bu makale, aynı mikroskop platformuna entegre edilmiş uyarılmış Raman saçılmasının (SRS) ve tutarlı anti-Stokes Raman saçılmasının (CARS) çözünürlüğünü, hassasiyetini ve görüntüleme kontrastlarını doğrudan karşılaştırmaktadır. Sonuçlar, CARS'ın daha iyi bir uzamsal çözünürlüğe sahip olduğunu, SRS'nin daha iyi kontrastlar ve spektral çözünürlük sağladığını ve her iki yöntemin de benzer hassasiyete sahip olduğunu göstermektedir.

Kimyasal Görüntüleme için Hiperspektral Uyarılmış Raman Saçılması ve Tutarlı Anti-Stokes Raman Saçılma Mikroskobunun Doğrudan Karşılaştırılması

Geniş bant uyarılmış Raman saçılma (SRS) mikroskobu ile kimyasal görüntüler elde etmek için bir protokol sunuyoruz. Diferansiyel çok kanallı kilitleme tespiti ile çalışan bir SRS mikroskobuna dayanan protokol, numune hazırlamayı, SRS cihazının ayarlanmasını ve kimyasal olarak heterojen numunelerin farklı bileşenlerini çözmek için kemometriyi açıklar.

Geniş Bant Uyarılmış Raman Saçılma Mikroskobuna Dayalı Multipleks Kimyasal Görüntüleme

Miyelinasyonu görselleştirmek, sinir sistemini inceleyen birçok araştırmacı için önemli bir hedeftir. CARS, miyelin gibi özel yapıları aydınlatan beyin gibi doku içindeki lipitleri doğal olarak görüntüleyebilen immünofloresan ile uyumlu bir tekniktir.

Beyin Dilimlerinde Miyelinasyon Görüntüleme için Tutarlı Anti-Stokes Raman Spektroskopisi (CARS) Uygulaması

Öğrenin, CARS mikroskopisi ve UV absorpsiyon spektroskopisi kullanarak ilaç tabletlerinin çözünme sürecini gerçek zamanlı görselleştirme yöntemini. Bu teknik, yüzey değişikliklerini ve çözünme hızlarını ilişkilendirerek geleneksel yöntemlere göre daha detaylı bilgi sağlar.

Çözünme sırasında tutarlı bir anti-Stokes Raman saçılması (CARS) Mikroskopi visualizes İlaç Tabletler

Daha fazla video keşfet