Murin için Endoskop In Vivo Karsinojenez ve bağırsak Değerlendirilmesi Multimodaller Görüntüleme Yara İyileşmesi ve İltihap

Bu videoda ilk uygulamada nöron endoskopisine kadar çeşitli uygulamalar sunulacaktır. Bir fare kolit modelinde hastalık şiddetini puanlamak için endoskopun nasıl kullanılacağı ikinci uygulamada gösterilecektir. İn vivo mukozal yara iyileşmesini izlemek için endoskopi kullanımı son uygulamada gösterilecektir.

Bağırsak tümörlerini tespit etmek için floresan endoskopinin kullanılması ve intramukozal olarak ajan enjekte etme tekniği, sonuçta bağırsak yara iyileşmesi, iltihaplanma ve kansere sunulacaktır. Agenezi, endoskopik analizin bulgularına dayanarak değerlendirilebilir. Bu tekniğin deneysel kolitin histolojik analizi gibi mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, bu teknikle bireysel takip muayeneleri yapabilmeniz ve mukozal değişiklikleri tekrar tekrar değerlendirebilmenizdir.

Bu nedenle, bu yöntem, kolitin zamansal oluşumu gibi deneysel bağırsak iltihabı alanındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin etkileri, neoplastik lezyonları fonksiyonel olarak karakterize etme olasılığı nedeniyle kolorektal kanserin tedavisine kadar uzanır. Bu yöntem kolorektal kanserin gelişimi hakkında fikir verebilse de, inflamatuar bağırsak hastalığı veya bulaşıcı kolit gibi diğer sistemlere de uygulanabilir.

Genel olarak, bu yönteme yeni olan kişiler, küçük ölçekli endoskop Floresansını kullanmanın zorluğu nedeniyle mücadele edeceklerdir. Endoskopi, endoskopik incelemeler sırasında floresan olarak işaretlenmiş izler ile hücresel yapıların spesifik olarak hedeflenmesi yoluyla geniş ışıklı endoskopinin potansiyelini moleküler görüntülemeye genişletir. Deney hayvanlarında kolorektal kanseri indüklemek için, önce kilogram başına 10 miligram interperitoneal enjekte etmek için 30 gauge iğne ile donatılmış bir mililitrelik bir şırınga kullanın, her fareye oksi metan olarak taze hazırlanmış mutajeniktir.

Deney fare grubuna, inflamatuar güdümlü kolorektal kanseri indüklemek için sıfırdan 7, 21 ila 28 ve 42 ila 49. gün arasında hacim başına ağırlık% 3, dekstran sülfat sodyum veya DSS'lik tekrarlayan döngülerle meydan okuyun. Kolonoskopi günündeki zorluklar arasında farelere otoklav suyu sağlayan agenezisi. Ayak parmağınızı sıkıştırarak sedasyonu onayladıktan sonra, bir deney hayvanının kolonuna iki mililitre sıvı lavmanı aşılamak için düğmeli bir kanül kullanın.

Önemli dışkı yüklemesinden şüpheleniliyorsa, farenin dışkılamasını beklerken, beyaz ışık endoskopisi için kamera ünitesine küçük bir hayvan veteriner endoskopik iş istasyonu bağlayın. Enjekte edilecek izleri uyarmak için ışık kaynağının ayarlarını yapılandırın ve ardından teleskop ile kamera arasına uygun bir bant geçiş filtresi entegre edin. Şimdi, fareyi muayene masasına yerleştirin ve endoskopu çok dikkatli bir şekilde yerleştirin.

Delinmeyi önlemek için kılıfın her iki valfini de açın. Hava pompasına bir valf bağlanmalıdır. Diğeri havayı kontrol etmek için işaret parmağı ile kapatılmalıdır.

Daha sonra kolonu yavaşça ve dikkatlice şişirin, anüsten yaklaşık 4,5 santimetre uzakta delinmeyi önlemek için endoskopu sadece sağ kolon fleksörüne kadar ilerletin. Şimdi, endoskopu yavaşça geri çekin ve mukozayı enflamatuar veya malign değişiklikler açısından inceleyin ve bağırsağın tüm çevresini değerlendirin. Daha sonra bir biyopsi örneği almak için, forsepsin ucu monitörde görünene kadar biyopsi forsepslerini çalışma kanalından dikkatlice yerleştirin.

Perforasyonu önlemek için forsepsleri dikkatlice açın ve kapatın ve patoloji bölgesine taşıyın. Farmakolojik ajanların interra mukozal uygulaması için, esnek bir enjeksiyon tüpünü ilgilenilen ajanla tamamen önceden doldurun ve ardından kanül monitörde görünene kadar tüpü çalışma kanalından itin. Daha sonra ince bir şırınga takın ve iğneyi submukozaya yerleştirin 15 ila 30 derecelik bir açıyla, eğime mukoza yönünde bakacak şekilde, terapötik ajanın 50 mikrolitresine kadar nazikçe uygulayın.

Başarılı bir enjeksiyondan sonra, mukozal, floresan endoskopi yapmak için karakteristik bir kaldırma sergileyecek, incelemeden önce ilgilenilen ajanı intravenöz olarak uygulayacaktır. Floresan etiketli izleyicinizin enjeksiyonu ile izleyici farmakolojisine bağlı olan görüntüleme prosedürü arasındaki en uygun zaman noktasını kontrol edin. Daha sonra enjekte edilen ajanı floresan endoskopi ile görüntülemek için, bant geçiren filtre sisteminin ayarlarını, enjekte edilen izleyicinin uyarma ve emisyon dalga boylarına göre yapılandırın.

Son olarak, kolit indüksiyonundan sonra bir hedef / arka plan oranı okuması elde etmek için izleyicinin uygulanmasından sonra dokuyu görüntüleyin. Fare. Vücut ağırlığı kaybına uygun olarak yedinci günde meydana gelen maksimum %19'luk vücut ağırlığı kaybı ile üçüncü günden başlayarak kilo kaybı sergileyin. Kolit şiddet skorunun nöron endoskopik indeksi, DSS'nin başlamasından sonraki yedinci günde artar ve 13. güne kadar iyileşen kolon mukozasının büyük enflamatuar hasarını gösterir.

Ayrıca yedinci günde, DSS'nin başlamasından sonra, DSS ile tedavi edilen farelerde histolojik hasar, epitelyal denudasyon, mukozal ülserasyonlar ve artmış nötrofil infiltrasyonu ile yansıtılan kontrollere kıyasla önemli ölçüde daha yüksektir ve bunların tümü 13. güne kadar önemli ölçüde iyileşir. Rutin bir endoskopiden alınan bu temsili görüntülerde, mukozal yaralar, bir milimetre çapında bir yara ile minyatür biyopsi forsepsleri ile mekanik olarak indüklendi. İyileşme daha sonra günlük endoskopik muayene ile izlendi ve artık yara alanının görüntü düzenleme yazılımı ile ölçülmesiyle ölçüldü.

Zaman içinde bireysel yara alanı kapanması daha sonra ilk yara alanı başına gerçek yara alanı bölümü ile ifade edildi. Örneğin, yara oluşumundan üç gün sonra, yara alanının% 41'i iyileşirken, yedi günde yara tamamen iyileşti. Her zamanki gibi, bir deneyin sonunda, yaralar histolojik değerlendirme için rezeke edilebilir, X vivo hematin ve ESN lekeli yara yataklarının bu temsili görüntülerinde olduğu gibi sıfır ve beşinci günde, tümör indüksiyonundan yaklaşık 80 gün sonra oksi metan ve üç döngü DSS çoklu kolon tümörlerinin yanı sıra granül mukoza gibi makroskopik kronik inflamasyon belirtileri gözlenebilir.

Nöron bağırsağının bir izleyici uygulanmadan endoskopik olarak floresan endoskopisi, herhangi bir spesifik sinyalin tespit edilmemesine neden olur ve kolon dokusu veya fekal otofloresan ile herhangi bir etkileşim gözlenmez. Buna karşılık, Fitz Dextran'in intravenöz uygulamasından hemen sonra, florokrom kolon mukozasında gözlenebilir ve kronik inflamasyon veya malign mukoza bölgelerinde artmış vaskülaritenin değerlendirilmesi için kullanılabilir. Buna göre, floresan yoğunluğunun ölçülmesi, etkilenmemiş kolon mukozasına kıyasla malign doku içinde florokromun önemli ölçüde artan alımını ölçmek için kullanılabilir.

Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik düzgün bir şekilde yapılırsa beş ila 10 dakika içinde yapılabilir. Bu prosedürü denerken, rijit endoskopu deniz kolonundan dikkatlice ilerletmeyi unutmamak önemlidir. Bu videoyu izledikten sonra, deniz kolonoskopisi yaparken epitel yara iyileşmesini, bağırsak iltihabını ve kanser agenezisini nasıl değerlendireceğinizi iyi anlamış olmalısınız.