Name: Murin için Endoskop In Vivo Karsinojenez ve bağırsak Değerlendirilmesi Multimodaller Görüntüleme Yara İyileşmesi ve İltihap (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 42 s
Description: Keşfedin farelerde kolonoskopi ile kolit şiddetini değerlendirme, mukozal yara iyileşmesini izleme ve intestinal tümörleri floresan görüntüleme yöntemlerini. Bu teknik inflamatuar bağırsak hastalıkları ve kolorektal kanser araştırmalarında tekrarlayan değerlendirmeler sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz uzman teknik yardım için Sonja Dufentester ve Elke Weber teşekkür ederiz. Biz tıp bilişimi destek el yazması ve Stefan Brückner düzeltiyorum için Faekah Gohar teşekkür ederim. Bu çalışma Else-Kröner-Fresenius-Stiftung (2012_A94) bir disiplinlerarası hibe ile desteklenmiştir. D. Bettenworth Tıp Fakültesi, Westfälische Wilhelms-Universität Münster bir araştırma bursu ile desteklenmiştir. M. Brückner Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG SFB1009B8) bir &quot;Gerok&quot; dönme pozisyonuna tarafından desteklenmiştir. Biz fare karikatür resmi için Heike Blum teşekkür ederim.

Tüm hayvan deneyleri Alman Hayvanları Koruma Kanunu&#39;na göre Landesamt für Natur, Umwelt und Verbraucherschutz (LANUV) tarafından onaylanmıştır. 1. Malzemeler ve Deney Düzeneği <ol><li> Hayvan bakım <ol><li> 20 ila 25 gr ağırlığında herhangi bir zorlanma kadın ya da erkek fareler kullanın ve yerel hayvan bakımı mevzuatına göre bunları barındıracak. </li><li> Kemirgenler için özel diyeti ile fareler Yem ve yonca-ücretsiz yemi uygulamak en az üç gün Endoluminal otomatik floresan en aza indirmek için sınavlara floresan önce. </li><li> Otoklavlanmış içme suyu ad libitum sağlayın. </li></ol></li><li> DDS ile indüklenen akut kolit indüksiyonu <ol><li> Su otoklavlanmış, 100 ml DSS, 3 g çözülerek çözelti: dekstran sülfat sodyum (DSS Da 36,000-50,000 moleküler ağırlık) (ağ / hac) bir% 3 hazırlayın. Fareye gerektiğinde özel içme suyu olarak, bu çözüm sunar ve fare / günde DSS çözeltisi 5 ml hesaplar. Yem devamDSS istenildiği 9 olmadan otoklavlanmalıdır su ile rol farenin. </li></ol></li><li> Kolorektal kanserin başlaması <ol><li> Mutajenik azoksimetan (AOM) çözündürün (kanser ve genetik hasara neden olabilir DİKKAT!) Steril izotonik tuz çözeltisi içinde 1 mg / ml bir nihai konsantrasyon elde edilmiştir. Vücut ağırlığı intraperitoneal olarak 1 ml şırınga (30 g), 10 kg ile 10 mg AOM tek bir doz uygulanır. </li><li> 21&#39;den% 3 ila 7 gün, 0 (ağ / hac), DSS, gün 14, tekrarlı devreler, gün 28-35 ve 42-49 gün ile (kontrol farelerinde hariç) Görev farenin enflamatuar tahrik kolorektal karsinogenezi tetiklemek için karıştırılabilir. Sadece bu zorluklara (ayrıntılı bir zaman çizelgesi için Şekil 4A) arasında Otoklavlanmış su ile fareler besleyin. Deney boyunca Otoklavlanmış su ile kontrol fareler besleyin. </li></ol></li><li> Floresan endoskopi hazırlanması (FE) <ol><li> Kullanım Flüoresanla Isothiocyanat (FITC) -, dekstran (molekül ağırlığı 70.000 Da moleküler FITC: Glukoz = 1: 250) için deterjanlarıdisplazi ilişkili vasküler desen görsel iyileştirme ile kolon adenomu avranış. </li><li> Intravenöz 5 dk floresan endoskopik muayene öncesi 100 ul PBS içinde seyreltilmiş 60 mg FITC-dekstran yönetmek. </li></ol></li><li> Anestezi <ol><li> (, Hacimce% 1.5-2 izofluran [2-kloro-2-(diflorometoksi) -1,1,1-trifloro-etan] 1,5 Lo 2 / dakika) ile anestezi sürekli izofluran kaynağını temin ederler. Sıkı anestezi kontrol etmek için bir yüz maskesi ile özel bir veteriner anestezi ekipman kullanın. </li></ol></li><li> Lavman hazırlanması <ol><li> Sıvı lavman 2 ml aşılamak (içindekiler: disodyumhidrojenfosfat (w /% 1.5 h) ve sodyum w / v) (% 11 dihidrojen-) kolona önemli dışkı yükleme şüphesi varsa görünümü gizleyebilir ki. </li></ol></li></ol> 2. Teknik Ekipmanlar <ol><li> Geliştirilen ve küçük hayvan endoskopi kullanımı onaylanmış bir veteriner endoskopik iş istasyonu kullanın. Wo bağlayınBir kamera birimi, ksenon ışık kaynağı, bir hava pompasına ve beyaz ışık endoskopi için bilinen bir PC monitörü rkstation. Sonra kamera ve minyatür sert teleskop (Şekil 5 1.9 mm dış çap, 10 cm uzunluğunda) bağlayın. </li><li> Biyopsi forseps veya enjeksiyon tüp uygulaması için çalışma kanalı (Şekil 5D) ile endoskop kılıfı kullanın. Tanısal kolonoskopi için çalışma kanalı olmadan kılıfı kullanın. </li><li> Kullanılmış izleyiciler uyarmak için floresan endoskopi için, ışık kaynağının yapılandırma ayarları (örneğin, FITC ile konjüge edilmiş dekstran 490 nm). Ayrıca, teleskop ve kamera (FITC-dekstran örneğin, 525 nm) arasında uygun bir Avanlanche entegre. </li><li> Biyopsisi almak için endoskop çalışma kanalına esnek biyopsi forseps (3 Charr., 28 cm) yerleştirin. </li><li> Topikal, intramukozal için çalışma kanalına esnek enjeksiyon tüp (0.96 mm) tanıtmak veya Endoluminaldiagnostik veya terapötik madde arasında dministration. </li><li> 42 ° C&#39;lik bir sıcaklık ile ısıtılabilen bir muayene masası kullanın. Bu farenin muayene sırasında hipotermik hale önler. </li></ol> Hayvanlar 3. Anestezi <ol><li> Küçük ama sızdırmaz kutu içinde fare ve yönetmek izofluran (% 100 (h / h),% 5 hacim / dak 3 L). Fare bilincini kaybedene kadar bekleyin. </li><li> Endoskopi için muayene masasının üzerine fare aktarın. Bir doz 100% v / v, 1.5 hacim,% / dk 1.5 L yüz maskesi ile izofluran teneffüs devam edin. Her zaman anestezi altında iken göz kuruluğunu önlemek için göz merhemi uygulanır. </li><li> Refleksleri kontrol ederek anestezi etkinliğini değerlendirmek. &#39;Refleks dönüş&#39; Giriş: yeterince anestezi ise, sırtında döşeme fare etrafında çevirmek gerekir. Kontrol &#39;ayak refleks&#39;: anestezi yumuşak bacak çekilmesi (evresine yol açmamalıdır hayvanın ayak arasındaki kısma, yeterli zamancerrahi tolerans). </li></ol> 4. Kolonoskopi <ol><li> Muayene masasına sırtını / anestezi fare eğilimli yatıyordu. </li><li> Önemli dışkı yükleme görünümü gizleyebilir olduğu şüphesi varsa kolona düğmeli kanül aracılığı ile lavman 2 ml uygulayın. Farenin lavman uygulanmasından sonra arınmak için bekleyin. Perforasyonunu önlemek için çok dikkatli endoskop yerleştirin. </li><li> Bunlardan biri hava pompasına bağlanır kılıfın her iki vanalarını açın. Havayı dağıtmak için parmağı ile diğer vana kapatılmalıdır. Özellikle biyopsi veya enjeksiyon durumunda, yavaş ve dikkatli bir şekilde, hava ile kolon şişirmek. </li><li> Perforasyon (makattan 4-5 cm) önlemek için sağ kolon eğrilme gibi sadece kadar endoskop ilerlemek. </li><li> Tanı kolonoskopi <ol><li> Endoskop geri çekerken, enflamatuar veya malign değişiklikler için mukozayı inceleyin. Bağırsak bütün çevresini değerlendirmek için geri yavaşça çekin. Intraluminal pa değerlendiringerektiği gibi uygun kurulmuş skorlama sistemleri kullanılarak patolojiler. </li><li> Yara alanların tekrarlayan görselleştirme sırasında görüntü alımı için aynı endoskopik pozisyonunu garanti etmek, kemirgen anüs ve mukozal lezyon arasındaki mesafeyi unutmayın. Ayrıca, endoskop ve görüntü alımı sırasında yara bölgesi arasında aynı mesafe elde etmek için bir aralayıcı olarak biyopsi forseps ucunu kullanın. Yara büyüklüğü 3 mm ihtiva endoskop kılıfın büyüklüğü ile ilgilidir. NOT: Önceki sınavlarda fotoğraf belgeleri ile optik karşılaştırıldığında aynı pozisyonda yerleştirin endoskop. Her biri aynı açı ve mesafe Tedbir lezyonlar endoskopik muayene kadar izleyin. </li></ol></li><li> Biyopsi işlemi <ol><li> Iki araştırıcının yardımı ile biyopsilerin alınması. Forseps ucu ikinci araştırmacıya monitörde görünür oluncaya kadar çalışma kanalına dikkatlice biyopsi forseps tanıtın. Bir dikkatle açık ve kapalı forsepsgeçersiz perforasyon. </li><li> Patolojinin sitesine forseps taşıyın. </li></ol></li><li> Enjeksiyon prosedürü <ol><li> Iki araştırıcının yardımı ile enjeksiyon işlemini gerçekleştirin. Tamamen bir madde ile ön-doldurma esnek enjeksiyon borusu (0.96 mm) tatbik edilecek. Kanül (30 G), ikinci araştırmacı için monitörde görünür oluncaya kadar çalışma kanalına tüp itin. Ince şırınga hazırlayın ve yavaşça teşhis ya da tedavi edici bir maddenin istenen miktarda ilaç. Enjeksiyon hacmi 50 ul yüksek olmalıdır. </li><li> 15-30 derecelik bir açıyla submocosa iğne takın. Mukoza yönünde eğim Yüz. Mukoza başarılı enjeksiyondan sonra bir karakteristik kaldırma işareti gösterir. </li></ol></li><li> Floresan endoskopi (FE) <ol><li> Intravenöz önce endoskopik muayene floresan 100 ul PBS içinde seyreltilmiş 60 mg FITC-dekstran yönetmek. </li><li> Enjeksiyonu arasındaki optimum zaman noktasını kontrol edinfloresan etiketli izleyici ve izleyici farmakoloji bağlıdır görüntüleme yöntemidir. Kullanılan tracer eksitasyon ve emisyon dalga boyunda uygun olarak bant geçiş filtresi sistemi ayarlarını yapılandırır. Mukoza yüzeyinin vasküler dağılımını değerlendirmek için hemen floresan boya intravenöz enjeksiyonundan sonra (örneğin, FITC) ile spesifik olmayan kan hacmi ajanları için floresan endoskopi gerçekleştirin. </li><li> Background-oranı daha iyi hedef sağlamak için hedeflenen izleyici ya da &#39;akıllı prob&#39; durumunda izleyici uygulamadan birkaç saat sonra görüntüleme düşünün. </li><li> Sonuçların fotoğraf ve video belgeleri gerçekleştirin. </li></ol></li></ol> 5. Post-kolonoskopi <ol><li> Boş bir kafes içinde fare ayırın ve çöp aspire gelen fareyi korumak için bir kağıt havlu üzerinde yatıyordu. Hipotermi önlemek için redlight lamba ile fare ısıtın. Fareyi gözlemleyin ve yeterli kavuşana kadar sahipsiz bırakmayınbilinç sternum yatma korumak için. Tamamen bilinçli kez, geri gelen kafesine fare yerleştirin. </li><li> Ve küçük ama sızdırmaz kutu bir deney, yerleştir sonunda CO 2 (% 100 (h / h), 100 hacimce% 3 L / dk) yönetmek. Fare tam bilincini kaybeder ve nefes durana kadar bekleyin. Boyun kırığı tarafından sevk fare. Karın laparotomi gerçekleştirin ve kolon eksplantasyona. Uzunlamasına kolon açın ve daha fazla histolojik veya moleküler değerlendirme için yıkayın. </li></ol>

<ol><li>Bettenworth, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translational+18F-FDG+PET%2FCT+imaging+to+monitor+lesion+activity+in+intestinal+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+nuclear+medicine+%3A+official+publication%2C+Society+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Translational 18F-FDG PET/CT imaging to monitor lesion activity in intestinal inflammation.</a> Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine. 54, 748-755 (2013).</li>
<li>Lewis, J. S., Achilefu, S., Garbow, J. R., Laforest, R., Welch, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+imaging.+current+technology+and+perspectives+for+oncological+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22European+journal+of+cancer%22%5BJournal%5D)">Small animal imaging. current technology and perspectives for oncological imaging.</a> European journal of cancer. 38, 2173-2188 (2002).</li>
<li>Huang, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colonoscopy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+endoscopy%22%5BJournal%5D)">Colonoscopy in mice.</a> Surgical endoscopy. 16, 22-24 (2002).</li>
<li>Becker, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+of+colitis+and+colon+cancer+development+in+mice+using+high+resolution+chromoendoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging of colitis and colon cancer development in mice using high resolution chromoendoscopy.</a> Gut. 54, 950-954 (2005).</li>
<li>Becker, C., Fantini, M. C., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+resolution+colonoscopy+in+live+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+protocols%22%5BJournal%5D)">High resolution colonoscopy in live mice.</a> Nature protocols. 1, 2900-2904 (2006).</li>
<li>Neurath, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+tumor+development+and+wound+healing+using+endoscopic+techniques+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Assessment of tumor development and wound healing using endoscopic techniques in mice.</a> Gastroenterology. 139, 1837-1843 (2010).</li>
<li>Pickert, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((STAT3+links+IL-22+signaling+in+intestinal+epithelial+cells+to+mucosal+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+experimental+medicine%22%5BJournal%5D)">STAT3 links IL-22 signaling in intestinal epithelial cells to mucosal wound healing.</a> The Journal of experimental medicine. 206, 1465-1472 (2009).</li>
<li>Shapira, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utilization+of+murine+laparoscopy+for+continuous+in-vivo+assessment+of+the+liver+in+multiple+disease+models%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+one%22%5BJournal%5D)">Utilization of murine laparoscopy for continuous in-vivo assessment of the liver in multiple disease models.</a> Plos one. 4, e4776(2009).</li>
<li>Wirtz, S., Neufert, C., Weigmann, B., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemically+induced+mouse+models+of+intestinal+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+protocols%22%5BJournal%5D)">Chemically induced mouse models of intestinal inflammation.</a> Nature protocols. 2, 541-546 (2007).</li>
<li>Neufert, C., Becker, C., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+inducible+mouse+model+of+colon+carcinogenesis+for+the+analysis+of+sporadic+and+inflammation-driven+tumor+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+protocols%22%5BJournal%5D)">An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression.</a> Nature protocols. 2, 1998-2004 (2007).</li>
<li>Dieleman, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+experimental+colitis+induced+by+dextran+sulphate+sodium+%28DSS%29+is+characterized+by+Th1+and+Th2+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+experimental+immunology%22%5BJournal%5D)">Chronic experimental colitis induced by dextran sulphate sodium (DSS) is characterized by Th1 and Th2 cytokines.</a> Clinical and experimental immunology. 114, 385-391 (1998).</li>
<li>Gao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colitis-accelerated+colorectal+cancer+and+metabolic+dysregulation+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">Colitis-accelerated colorectal cancer and metabolic dysregulation in a mouse model.</a> Carcinogenesis. 34, 1861-1869 (2013).</li>
<li>Foersch, S., Neufert, C., Neurath, M. F., Waldner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endomicroscopic+Imaging+of+COX-2+Activity+in+Murine+Sporadic+and+Colitis-Associated+Colorectal+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Diagnostic+and+therapeutic+endoscopy%22%5BJournal%5D)">Endomicroscopic Imaging of COX-2 Activity in Murine Sporadic and Colitis-Associated Colorectal Cancer.</a> Diagnostic and therapeutic endoscopy. 2013, 250641(2013).</li>
<li>Bremer, C., Ntziachristos, V., Weissleder, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical-based+molecular+imaging%3A+contrast+agents+and+potential+medical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22European+radiology%22%5BJournal%5D)">Optical-based molecular imaging: contrast agents and potential medical applications.</a> European radiology. 13, 231-243 (2003).</li>
<li>Keller, R., Winde, G., Terpe, H. J., Foerster, E. C., Domschke, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+endoscopy+using+a+fluorescein-labeled+monoclonal+antibody+against+carcinoembryonic+antigen+in+patients+with+colorectal+carcinoma+and+adenoma%5BTitle%5D)+AND+%22Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Fluorescence endoscopy using a fluorescein-labeled monoclonal antibody against carcinoembryonic antigen in patients with colorectal carcinoma and adenoma.</a> Endoscopy. 34, 801-807 (2002).</li>
<li>Jones, M. K., Tomikawa, M., Mohajer, B., Tarnawski, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastrointestinal+mucosal+regeneration%3A+role+of+growth+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+bioscience+%3A+a+journal+and+virtual+library%22%5BJournal%5D)">Gastrointestinal mucosal regeneration: role of growth factors.</a> Frontiers in bioscience : a journal and virtual library. 4, 303-309 (1999).</li>
<li>Mertz, H. R., Walsh, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptic+ulcer+pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22The+Medical+clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Peptic ulcer pathophysiology.</a> The Medical clinics of North America. 75, 799-814 (1991).</li>
<li>Pantelis, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+sealing+with+a+fixed+combination+of+collagen+matrix-bound+coagulation+factors+on+the+healing+of+colonic+anastomoses+in+experimental+high-risk+mice+models%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbeck%27s+archives+of+surgery+%2F+Deutsche+Gesellschaft+fur+Chirurgie%22%5BJournal%5D)">The effect of sealing with a fixed combination of collagen matrix-bound coagulation factors on the healing of colonic anastomoses in experimental high-risk mice models.</a> Langenbeck's archives of surgery / Deutsche Gesellschaft fur Chirurgie. 395, 1039-1048 (2010).</li>
<li>Burk, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+factor+from+a+transformed+cell+line+that+affects+cell+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">A factor from a transformed cell line that affects cell migration.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 70, 369-372 (1973).</li>
<li>Msaki, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+RelA+%28p65%29+threonine+505+phosphorylation+in+the+regulation+of+cell+growth%2C+survival%2C+and+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+biology+of+the+cell%22%5BJournal%5D)">The role of RelA (p65) threonine 505 phosphorylation in the regulation of cell growth, survival, and migration.</a> Molecular biology of the cell. 22, 3032-3040 (2011).</li>
<li>Zigmond, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utilization+of+murine+colonoscopy+for+orthotopic+implantation+of+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Utilization of murine colonoscopy for orthotopic implantation of colorectal cancer.</a> PloS one. 6, e28858(2011).</li>
<li>Foersch, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+of+VEGF+in+gastrointestinal+cancer+in+vivo+using+confocal+laser+endomicroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging of VEGF in gastrointestinal cancer in vivo using confocal laser endomicroscopy.</a> Gut. 59, 1046-1055 (2010).</li>
<li>Mitsunaga, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+endoscopic+detection+of+murine+colitis-associated+colon+cancer+by+topically+applied+enzymatically+rapid-activatable+probe%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Fluorescence endoscopic detection of murine colitis-associated colon cancer by topically applied enzymatically rapid-activatable probe.</a> Gut. 62, 1179-1186 (2013).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Epitelyal yara iyileşmesi devam eden bir süreçtir. Mide-bağırsak mukozasına olan yüzey hücrelerinin sürekli fizyolojik pullanarak 16 epitel hücrelerinin yenilenmesini gerektiren sık ortaya çıkar. Sonuç olarak, yara iyileşmesinde bozulma, gastrointestinal ülser ve 17 anastomoz kaçağı 18 dahil olmak üzere çeşitli hastalıklar üzerinde çok büyük bir etkisi vardır. Epitel iyileşmesini uyarmak için moleküler arka plan değerlendirilmesi yanı sıra potansiyel ilaç adayları, sadece eksik vitro...

Hayvan modelleri büyük ölçüde sayısız bağırsak patolojileri anlayışımızı zenginleştirilmiş. Laboratuvar faresi (Mus musculus) nedeniyle bol genetik ve genomik bilgiye biyomedikal araştırma bir başbakan hayvan modeli olarak ortaya çıktı ve transgenik ve nakavt suşları kolayca kullanılabilir etti. Anlayış hastalık patogenezini artırmaya ek olarak, hayvan modelleri de önemlisi ilaç adayları gibi klinik öncesi teşhis ya da tedavi müdahale test edilmesi için kullanılır. Ancak, insan hastalığı taklit fare modellerinin çeşitliliği rağmen, rutin hasta bakımında kullanılan birçok tanısal ve girişimsel seçenekleri fareler için mevcut değildir. Buna göre, gözetim stratejiler genellikle dolaylı gözlemlere sınırlıdır kemirgen hastalığı veya terapötik müdahalelerin etkisinin seyrini izlemek ya da ölüm sonrası analizleri yayınlamak için. Non-invaziv girişimler izleme fareler için hastalık aktivitesi endeksleri gibi canlılık mevcut iken, qukilo kaybı veya kazancı, kan, idrar ve dışkı antification bu sadece dolaylı göstergeleri ve bireyler arası değişkenliğin tarafından önyargılı, analiz eder. Ayrıca, otopsi tekrarlı zaman noktalarında boyuna gözlemler önlemek analiz eder. Sofistike görüntüleme teknikleri sadece son 1,2 getirilmiştir farelerde hastalık aktivitesini izlemek için. Bu görüntüleme teknikleri tekrarlanan analizler için izin olsa da, onlar doğrudan mukozal görselleştirme izin veya biyopsi satın alma veya ilaç adayları topikal ve intramukozal uygulama olarak tanısal veya tedavi edici girişimler izin vermez, bağırsak üzerinde bir açıklayıcı ve genellikle özensiz bir görünüm sağlar. Son zamanlarda, canlı farelerde kullanım için yüksek çözünürlüklü endoskopi sistemleri 3,4 geliştirilmiştir. İlk defa bu endoskopik teknikler, yara iyileşmesi veya bağırsak iltihabı sağlayan obj olarak Endoluminal kolon hastalık patolojilerinin doğrudan görselleştirme izintekrarlanan zaman noktalarında aynı hayvanın uzunlamasına çalışmalar sağlayan ci, gerçek zamanlı durum. Yanı sıra tekil bir fare tekrarlanmıştır biyopsiler izin vermek veya endoskopik tedavi edici sistemler aynı zamanda ilgi alanı, bir maddenin doğrudan uygulanmasını sağlayan bir ayrı tümör veya lokalize iltihabı etkilemek için kullanılabilir. Tedavi ve kontrol maddeleri ilgi alanına doğrudan teslim edilebilir, bunun için bireyler arası değişkenliğin hariç, aynı fare gerçekleştirilebilir. Bu sistemler artık bu tür kolit şiddeti (MEICS) 5-7 kemirgen endoskopik indeksi gibi kolon iltihabı, yara iyileşmesi, laparoskopik karaciğer biyopsisi ve çeşitli skorlama sistemleri kullanılarak karaciğer tümörleri 8 ve tümör gelişiminin ortotopik indüksiyon değerlendirilmesi için istihdam edilmiştir. Kolon duvarının kalınlaşması, vasküler desen değişiklikleri, fibrin varlığı, MUCOS bir ayrıntı: MEICS iltihabı değerlendirmek için beş parametreden oluşmaktadıral yüzey, ve dışkı kıvamı. Bu protokolde, bağırsak yara iyileşmesi, enflamasyon ve kolon kanseri olan kemirgen modellerinde katı endoskopi kullanılmasını tarif eder. Öncelikle, biz yara iyileşmesi ve inflamatuvar barsak endoskopik değerlendirme yanı sıra kolit aktivite boyuna değerlendirilmesi ve kemirgen kolon karsinogenezi çalışma göstermektedir. Kemirgen endoskopi tanımlayıcı kullanımının ötesinde, biz biyopsisi almak için endoskopik enstrümantasyon kullanımı hakkında ayrıntılı yönergeler sağlar ve farklı ilgi bileşenleri (örneğin, ilaç adayları veya tümör hücrelerinin) topikal ve intramukozal uygulama. Son olarak, kolorektal tümörlerin ortamda gelişmiş moleküler görüntüleme teknikleri kullanılır sıçangil floresan endoskopi kullanımını göstermektedir.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Reaktifler</td></tr><tr><td>Yonca içermeyen diyet</td><td>Harlan Laboritories, Madison, ABD</td><td>2014</td><td></td></tr><tr><td>Azoksimetan (AOM)</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Almanya</td><td>A5486</td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen göz merhemi</td><td>Bayer, Leverkusen, Almanya</td><td>80469764</td><td></td></tr><tr><td>Dekstran sülfat sodyum (DSS)</td><td>TdB Konsolosluğu, Uppsala, İsveç</td><td>DB001</td><td></td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Almanya</td><td>E 4382</td><td></td></tr><tr><td>Etilendiamintetraasetik asit (EDTA)</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Almanya</td><td>E 9884</td><td></td></tr><tr><td>Falcon Tube 50 ml</td><td>BD Biosciences, Erembodegem, Belçika</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Florene 100 V/V</td><td>Abbott, Wiesbaden, Almanya</td><td>B506</td><td></td></tr><tr><td>Hematoksilen</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Almanya</td><td>HHS32-1L</td><td></td></tr><tr><td>İzopentan (2-Metilbütan)</td> <td>Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Almanya</td><td>M32631-1L</td><td></td></tr><tr><td>Metilen mavisi</td><td>Merck, Darmstadt, Almanya</td><td>1159430025</td><td></td></tr><tr><td>O.C.T. Doku Tek bileşiği&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>Sakura, Zoeterwonde, Hollanda</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>Omnican F - canula</td><td>Braun, Melsungen, Almanya</td><td>9161502</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu salin, PBS</td><td>Lonza, Verviers, Belçika</td><td>4629</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Klorür %0.9</td> <td>Braun, Melsungen, Almanya</td><td>5/12211095/0411</td><td></td></tr><tr><td>Standart diyet</td><td>Altromin, Lage, Almanya</td><td>1320</td><td></td></tr><tr><td>Tissue-Tek Cryomold</td><td>Sakura, Leiden, Hollanda</td><td>4566</td><td></td></tr><tr><td>Vitro &ndash; Clud&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>R. Langenbrinck, Teningen, Almanya</td><td>04-0002&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Ekipman</td></tr><tr><td>AIDA Control</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>20 096020</td><td></td></tr><tr><td>Bant geçiren filtre</td><td>Semrock, Rochester, ABD</td><td>HC 716/40</td><td></td></tr><tr><td>Bant geçiren filtre</td><td>Semrock, Rochester, ABD</td><td>HC 809/81</td><td></td></tr><tr><td>Biyopsi Forseps, 3 Fr., 28 cm</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>61071ZJ</td><td></td></tr><tr><td>Dell Monitör</td><td>Dell, Frankfurt Main, Almanya</td><td>U2412Mb</td><td></td></tr><tr><td>Muayene Kılıfı, 9 Fr.Karl</td> <td>Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>61029D</td><td></td></tr><tr><td>Muayene Kılıfı, 9 Fr.Karl</td> <td>Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>61029C</td><td></td></tr><tr><td>Fiber Optik Işık Kablosu, 3.5 mm</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>69495NL</td><td></td></tr><tr><td>Floresan Mavisi Filtre Sistemi</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>20100032</td><td></td></tr><tr><td>Floresein Bariyer Filtresi</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>20100033</td><td></td></tr><tr><td>Ayak pedalı</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>20010430</td><td></td></tr><tr><td>HOPKINS Teleskopu, 1.9 mm, Uzunluk 10 cm</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>1830231</td><td></td></tr><tr><td>SCB D-ışığı P&nbsp;</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>20 133720</td><td></td></tr><tr><td>SCB tricam SL II</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>20 2230 20</td><td></td></tr><tr><td>Boru seti aletleri VETPUMP II</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>69811</td><td></td></tr><tr><td>Tricam PDD PAL</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>20221037</td><td></td></tr><tr><td>UniVet Porta</td><td>Groppler Medizintechnik, Deggendorf, Almanya</td><td>BKGM 0451</td><td></td></tr><tr><td>Vetpump 2</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Almanya</td><td>69321620</td><td></td></tr></tbody></table>

murin için endoskop in vivo karsinojenez ve bağırsak değerlendirilmesi multimodaller görüntüleme yara İyileşmesi ve İltihap

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Fare modeller yaygın insan hastalıkların oluş çalışma ve klinik öncesi tanı usullerinin yanı sıra terapötik girişimlerin değerlendirmek için kullanılır. Bununla birlikte, patolojik değişimlerin geçerli değerlendirme genellikle histolojik analizini gerektirir ve ex vivo olarak gerçekleştirilen zaman, hayvanın ölümü gerektirir. Bu nedenle, geleneksel deneysel ortamlarda, birey-içi izlem muayeneleri nadiren mümkündür. Dolayısıyla, canlı farelerde kemirgen endoskopi ortaya çıkışı ile mide-bağırsak mukozası ve aynı zamanda görsel değişiklikler izlemek için prosedürü tekrarlayın hem ilk kez araştırmacılar sağlar. In vivo kemirgen endoskopi birçok uygulamaları, bağırsak iltihabı veya yara iyileşmesini okuyan defalarca mukozal biyopsilerin dahil olmak üzere mevcut ve yerel minyatür enjeksiyon kataterlerinden tanısal veya terapötik ajanlar yönetmek. En son, moleküler görüntüleme genişletmiştir tanısal görüntüleme moBelirli photoprobes kullanarak farklı hedef moleküllerin saptanmasına olanak tanıyan spesifik, şekilleri. Sonuç olarak, kemirgen endoskopi in vivo görüntüleme tanı deneysel için yeni bir son teknoloji olarak ortaya çıkmıştır ve önemli ölçüde çeşitli alanlarda preklinik araştırma etkileyebilir.

Bağırsak yara iyileşmesi in vivo izleme (Şekil 1A 1 mm'ye eşit) rutin endoskopi sırasında, mukozal yaralar 3 Fransızca çapında minyatür biyopsi forseps mekanik oluşturuldu. Daha sonra, yara iyileşmesi, günlük muayene, endoskopik olarak izlenip, örneğin resim düzenleme yazılımı kullanarak kalıntı yara bölgesinde ölçülmesiyle nicelleştirilmiştir, İmageJ (Şekil 1B). Zaman içinde, bireysel yara kapatma kısmının gerçek yara alanı / ilk yara bö...

Küçük hayvan görüntüleme teknikleri seri tetkikler ve in vivo terapötik müdahaleyi sağlar. Son zamanlarda, uygulamaların kapsamı önemli genişletmiştir ve şu anda kolon tümör gelişiminin değerlendirilmesi, yara iyileşmesi ve enflamasyon izleme içerir. Bu protokol kemirgen endoskopi bu çeşitli potansiyel uygulamaları göstermektedir.

Murin için Endoskop In Vivo Karsinojenez ve bağırsak Değerlendirilmesi Multimodaller Görüntüleme Yara İyileşmesi ve İltihap

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions ...

Bu videoda ilk uygulamada nöron endoskopisine kadar çeşitli uygulamalar sunulacaktır. Bir fare kolit modelinde hastalık şiddetini puanlamak için endoskopun nasıl kullanılacağı ikinci uygulamada gösterilecektir. İn vivo mukozal yara iyileşmesini izlemek için endoskopi kullanımı son uygulamada gösterilecektir.Bağırsak tümörlerini tespit etmek için floresan endoskopinin kullanılması ve intramukozal olarak ajan enjekte etme tekniği, sonuçta bağırsak yara iyileşmesi, iltihaplanma ve kansere sunulacaktır. Agenezi, endoskopik analizin bulgularına dayanarak değerlendirilebilir. Bu tekniğin deneysel kolitin histolojik analizi gibi mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, bu teknikle bireysel takip muayeneleri yapabilmeniz ve mukozal değişiklikleri tekrar tekrar değerlendirebilmenizdir.Bu nedenle, bu yöntem, kolitin zamansal oluşumu gibi deneysel bağırsak iltihabı alanındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin etkileri, neoplastik lezyonları fonksiyonel olarak karakterize etme olasılığı nedeniyle kolorektal kanserin tedavisine kadar uzanır. Bu yöntem kolorektal kanserin gelişimi hakkında fikir verebilse de, inflamatuar bağırsak hastalığı veya bulaşıcı kolit gibi diğer

murine-endoscopy-for-vivo-multimodal-imaging-carcinogenesis

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Postoperatif ileus (POI) artmış morbidite ve uzamış hastanede kalış yol abdominal cerrahi bir komplikasyonudur. Profilaktik veya terapötik stratejiler yoğunlaştırılmış araştırma yokluğu nedeniyle gereklidir. Bu nedenle İÇN patofizyolojisi araştırmak ve olası tedavi seçenekleri incelemek için bir standart ve uygulanabilir fare modeli kurulmuştur.

Bağırsak Manipülasyon bir Standart Model Analizleri: Kemirgenler Barsak Motilite ve Gut Duvar İnflamasyon İşlevsel Değerlendirilmesi

Son birkaç yılda, yeni nesil endoskoplar kemirgen kolit ve kolorektal tümörlerin değerlendirilmesinde önemli bir tanı araştırma yardımcıları olarak ortaya çıkmıştır. Bu farelerde enflamasyonun ve kolorektal tümörleri endoskopik değerlendirme, hem de kolit ve kolorektal tümörleri endoskopik şiddetini belge ondalık tanımlayıcıları kullanan yeni bir skorlama sistemi için bu tarifnamede detaylı bir protokol mevcut.

Bir Geçerliliği Endoskopik Puanlama Sisteminin Kullanılması Kolit ve Kolorektal Tümörlerin Şiddetini Değerlendirmek için Farelerde esnek Kolonoskopi

Transgenik raportör fareler ve enjekte edilebilir floresan etiketler kullanarak, uzun süreli intravital eğirme diski konfokal mikroskobu, ApcMin/+ kolorektal kanser modelinde miyeloid hücre davranışının bağırsak adenomuna doğrudan görselleştirilmesini sağlar.

Miyeloid hücrelerin Dynamics Gerçek zamanlı Görüntüleme Süm Min / + Bağırsak Tümörleri Disk Eşodaklı Mikroskopi Spinning tarafından

Farelerde kolon patolojilerinin tedavisi için terapötiklerin etkinliğinin rijit bir endoskop kullanılarak uzunlamasına izlenmesi için yöntemleri açıklıyoruz. Bu protokol, canlı farelerde tek bir tümörün terapötik yanıtının karakterizasyonu ve ayrıca potansiyel hastalık nüksünü izlemek için kolayca kullanılabilir.

Canlı Fareler Seri endoskopik Görüntüleme kullanma Bağırsak Patolojilerde Yeni Therapeutics Etkinliğinin Non-invaziv Değerlendirme

Yüzeysel doku görüntü verilerini hemoglobin konsantrasyonu, melanin konsantrasyonu ve oksijen satürasyonu dahil olmak üzere doku fizyolojik parametreleriyle birlikte kaydedebilen multimodal bir mikroendoskopun montajı ve kullanımı açıklanmıştır. Bu teknik, doku yapısını ve perfüzyonu değerlendirmek için yararlı olabilir ve araştırmacının bireysel ihtiyaçları için optimize edilebilir.

Multimodal Görüntüleme ve Non-invaziv için Spektroskopisi Fiber paket Mikroendoskopi Platformu,<em&gt; İn Vivo</em&gt; Doku Analizi

Hedef özgü probları protein ifade çeşitli hastalık (Örneğin, iltihap, enfeksiyon ve tumorigenesis) gibi moleküler mekanizmaları analiz etmek için yenilikçi bir araç temsil eder. Bu çalışmada, bağırsak makrofaj infiltrasyonu F4/80 özel tomografi Floresans aracılı kullanarak kolit, fare modeli üç boyutlu bir nicel tomografik değerlendirilmesi açıklar.

Floresan-aracılı tomografi algılama ve fare bağırsak iltihabı makrofaj ile ilgili miktar

Burada, küçük bağırsak hasarının önemli uç noktalarını ve proliferatif belirteçleri ve kemoterapi kaynaklı Mukozit modeli kullanılarak telafi edilen hiperproliferasyonu oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. Biz bir hücre döngüsü özel marker kullanarak proliferasyon hücrelerin tespiti ve küçük bağırsak ağırlığı kullanarak göstermek, Crypt derinliği, ve uç noktaları olarak villus yüksekliği.

Kemoterapiye bağlı Mukozinin fare modelini kullanarak küçük bağırsak yaralanmasını ve uyarlamasını değerlendirmek için önemli uç noktalar ve proliferatif Işaretçiler

Biz GFP etiketli γδ IELS görselleştirmek için bir yöntem açıklamak, ters dönen disk konfoksel mikroskobu tarafından murine ince bağırsak intravital görüntüleme kullanarak. Bu teknik, 4 h 'ye kadar mukoza içindeki canlı hücrelerin takibini sağlar ve çeşitli bağırsak immün-epitelyal etkileşimleri araştırmak için kullanılabilir.

Murine Ince bağırsak INTRAEPİTELYAL lenfosit intravital görüntüleme

İntravital mikroskopiden yararlanan burada sunulan yöntem, canlı hayvanlarda bağırsak epitel hücresi dökülmesinin gerçek zamanlı olarak görüntülenmesidir. Bu nedenle anestezili farelerin topikal lekeli bağırsak mukozası (acriflavine ve rhodamineB-dextran) konfokal mikroskopi kullanılarak tek hücreçözünürlüğe kadar görüntülenir.

İntravital Mikroskopi Tabanlı Bir Yaklaşım Bağırsak Geçirgenliği ve Epitel Hücre Dökülme Performansını Değerlendirmek için

Burada, farelerde kolonoskopik güdümlü çimdik biyopsilerini indüklemek ve yara kapanışını gerçek zamanlı olarak izlemek için prosedürün ayrıntılı bir açıklamasını sunuyoruz. Ayrıca yara yatağının histolojik, immünohistokimyasal ve moleküler analizleri için dokuların hazırlanması için yöntemler sağlanmaktadır.

Farelerde Kolonoskopik Güdümlü Çimdik Biyopsilerinin Yapılması ve Sonraki Doku Değişikliklerinin Değerlendirilmesi

Burada, lazerle indüklenen yaralama üzerine bağırsak görüntülerini elde etmek için bir yöntem sunuyoruz. Fare bağırsağını bir multifoton lazere maruz bırakarak, tek veya birden fazla kript (ler) in kaybı yerel olarak indüklenir. Hasarlı bölgeyi aylar boyunca tekrar tekrar görüntüleyerek, bağırsak iyileşmesinin gerçek zamanlı dinamikleri yakalanır.

Bağırsak Yeniden Şekillenmesini İncelemek için Lazer Ablasyon ve İntravital Mikroskopi

Keşfedin farelerde kolonoskopi ile kolit şiddetini değerlendirme, mukozal yara iyileşmesini izleme ve intestinal tümörleri floresan görüntüleme yöntemlerini. Bu teknik inflamatuar bağırsak hastalıkları ve kolorektal kanser araştırmalarında tekrarlayan değerlendirmeler sağlar.

Murin için Endoskop In Vivo Karsinojenez ve bağırsak Değerlendirilmesi Multimodaller Görüntüleme Yara İyileşmesi ve İltihap

Daha fazla video keşfet