Name: Karotis Arter ve Ven Juguler kateterizasyon bir Bilinçli Rat Modelinde, İnfüzyonları ve Kan Örnekleme hemodinamik Tedbirleri Gerçekleştirme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-01-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 5 s
Description: Öğrenin, sıçanlarda karotis arter ve juguler ven kateterizasyonu ile hemodinamik ölçüm, infüzyon ve kan örnekleme tekniklerini. Bu yöntem, serbest hareket eden hayvanlarda sürekli kardiyovasküler izlem sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Intramural NIH programı bu modelin geliştirilmesini destekledi. Yayın desteği Harvard Apparatus Inc. ve ADInstruments Inc. tarafından sağlandı. Yazarların çalışmaları, ABD hükümeti tarafından finanse edilen araştırmanın bir parçası olarak yapıldı; ancak, ifade edilen görüşler mutlaka Ulusal Sağlık Enstitüleri'ne ait olmak zorunda değildir.

Aşağıda açıklanan prosedürler Ulusal Sağlık Enstitüleri Klinik Merkezi Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanan protokol kapsamında gerçekleştirildi. Cerrahi için 1. Hazırlık <ol><li> Gaz kateterler ve aletleri sterilize. </li></ol> 2. Balon hazırlayın <ol><li> Açıklığını sağlamak ve sızıntıyı önlemek için heparinli gliserol (250 IU heparin / 1 ml gliserol) ile kateterler yıkayın. Heparinli gliserol korumak için bir metal durdurucu (20 ga, 15 mm) ile kateterin ucunu takın. </li></ol> 3. Aseptik Workstation hazırlayın <ol><li> Iş istasyonu ve cihaz tepsileri sprey% 70 alkol kullanın. Tepsiye işletim masa ve alet tepsileri ve yer araçlarını kapsayacak şekilde steril örtüyü kullanın. </li></ol> 4. Cerrahi Rats hazırlayın <ol><li> Yer sıçan tek bir Lucite odasında ve bir anestezik maruz; izofluran (% 3-5) karışımıBilinçsiz kadar oksijen ile ed. Odasından sıçan çıkarın ve boyun anterior ve posterior alanlarından kürk tıraş. Gözleri yağ merhemi sürün. </li></ol> 5. Kateter Yerleştirilmesi <ol><li> Ventral pozisyonda ısıtılmış cerrahi masaya anestezi sıçan (ayak tutam tarafından teyit) yerleştirin; (;% 3.5 izofluran) spontan solunum frekanslarında ile anestezi korumak için burun konisi içine burnunu yerleştirin. Yavaşça cerrahi alanı Betadine ve% 70 alkol kullanımını alternatif 3 kez fırçalayın. Cerrahi makas kullanarak scapulalar arasında 0,5 cm&#39;lik orta hat cilt kesi olun. </li><li> Sırtüstü sıçan yerleştirin; yavaşça lastik bantlar kullanarak masanın her tarafında bacaklarını dizginlemek; anestezi korumak. Biraz daha iyi poz için aşırı esneterek boyun altında iki haddelenmiş steril gazlı bez 4x4 yerleştirin. Bir neşter kullanılarak klavikula düzeyinde boyun orta hatta 2 cm ventral servikal cilt kesi sağ olun. </li></ol> 6. SağJuguler Ven Kateterizasyon <ol><li> Bir hemostat kullanarak, açık açık, sağ juguler ven incelemek görselleştirmek ve geminin 5 mm bölümünü izole etmek tükürük ve lenfatik dokular ayırmak. 4-0 ipek sütür kullanarak, geminin en üst düzeye çıkarmak geminin hem kranial ve kaudal ucunda gevşek kravat yerleştirin. Bir mikro cerrahi makas yeterince bir kesi büyük yapmak kullanarak iki bitişik harfler arasındaki geminin doğrultusunda, kateter geçmek ve geminin etrafında kranial bitişik harfleri kravat. </li><li> Mikro diseksiyon kanca ve forseps yardımı ile kalbe doğru kabın içine venöz kateter yerleştirin ve PU 3F segmentinde tüm kap içinde olduğu kadar kateter ilerlemek. Kabına deriye tespit için kafatası ve kuyruk uçlarından bitişik harfler kullanın. </li></ol> 7. Sol Karotis Arter Kateterizasyon <ol><li> Bir hemostat kullanarak, açık açık sol karotis arter ortaya çıkarmak için uzunlamasına omohyoid kas incelemek ve benkabın 5 mm bölümü solate. Tamamen arterden ayrılır (beyaz renkte) vagus siniri emin olun. Özen parçalamak veya sinir kırmak için değil. </li><li> 4-0 ipek sütür kullanarak, geminin kaudal ucunda gevşek kravat yerleştirin geminin kranial ucunu kapalı kravat ve kesi aşağıdaki kan akışını durdurmak için dikiş üzerinde kaudal bir bulldog kelepçe yerleştirin. Bir mikro cerrahi makas kullanarak, yeterince büyük bir kesi, iki bitişik harfler arasındaki geminin doğrultusunda, kateter geçmek olun. Mikro diseksiyon kanca ve forseps yardımı ile kalbe doğru arteriyel kateter yerleştirin. </li><li> Sıkı bulldog kelepçesini çıkarmadan önce geminin içindeki kateter bölümünü tutmak için kilit olmadan pürüzsüz bir iğne tutucu kullanın. Kateterin tüm PU 2F segmentinde kadar yavaş yavaş iğne tutucu gevşeterek kabında ise forseps bir çift ile kateter Advance. Sabitlemek için kateter ve geminin etrafında gevşek kaudal bitişik harfleri Kravat, ama çok tigh değilt, kateter tıkanması için. </li></ol> 8. Tünel geri deri altına Kulak arkasında ve scapulalar arasındaki Kesiden ile 5 cm Tüp, bir düz hemostatın kullanma. Tüp yoluyla Balon exteriorize ve Tüp çıkarın. 9. Yerinde dışarıya Balon Güvenli 4-0 İpek Sütürlerin Üç Paslanmaz Çelik Yara Klipler ventral kesi ve dorsal insizyon kapatın. 10. Post-cerrahi Monitör ve Bakım <ol><li> Kateterizasyon sonrasında, anestezi sonlandırmak ve selüloz yatak ile bir kafeste lateral dekübit pozisyonunda sıçan kurtarmak. Daha sonra günde bir kez en az 4 saat veya ağrı belirtisi gösteren kadar 2 saat aralıklarla sıçan gözlemleyin ve. Sıçan ağrı veya sıkıntı belirtileri gösteriyorsa ketoprofenin [5 mg / kg, deri altı enjeksiyon (SQ)] ver hemen prosedürü ve her 12 saat sonrası. Bizim tecrübelerimize göre, hiçbir sıçan inisiyatif aşağıdaki ağrı için ek analjezi gerektirmiştirl enjeksiyonu. Analjezi ek dozlar için dikkate ortaya istiyorum gözlenen Özellikler ancak sınırlı içerir; anormal duruş; artış solunum hızı, insizyon sitenin savurgan / ungroomed, enfeksiyon / inflamasyon, göz akıntısı, piloerection / azalış (&quot;kirpi haircoat&quot;), sesli veya dokunsal uyaranlara yanıt olarak aktivitesinde azalma. NOT: Sıçanlar çalışmaya alındı ​​edilecek öncesi kateterizasyon ağırlığı&gt; 10 g kazanç 72 saat kurtarıldı. </li></ol> Hemodinamik Sistemine 11. Bağlantı <ol><li> Kurtarma ardından, çalışmada sağlıklı fareler (kilo&gt; 10g) kayıt. Lucite bölme sıçan yerleştirin ve daha önce anlatıldığı gibi anestetize. </li><li> Steril hemostata, mikro forseps, ekli künt iğne ile 1 ml şırınga ile cerrahi masaya steril örtüyü yerleştirin. NOT: hemostatı ipuçları kateter zarar görmesini önlemek için kauçuk ile kaplanmış olmalıdır. Cerrahi üzerinde anestezi sıçan yerleştirinburun konisi içine ventral konumu ve yeri burun tablo kendiliğinden respirations ile anestezi (% 3-5) korumak için. </li><li> Kelepçe arteriyel ve sadece metal fiş pimleri altındaki lastik kaplı hemostatlarla bir çift kullanarak venöz kateterler. Kateterin ucuna metal pimi çıkarın ve bağlı bir kör iğne ile heparin tuzlu su ile dolu bir 1 ml şırınga bağlamak için bir çift forseps kullanır. Buna karşılık, hemostat kaldırmak ve kateterler, patent sağlamak için 0.1 ml çekme. </li><li> , Kateterler yeniden kelepçe iğneyi çıkarın ve ayakkabı kutusu kafesinin üstüne (heparin tuzlu su ile önceden boşaltılan) bir döner bağlı oluyor ve gergin bir uzun kateter bu ucunu. Veri toplama ve kayıt, örnekleme, veya infüzyon için dönüştürücüler bu kateterler bağlayın. NOT: Tüm kateterler kendi kafesine hareket bir hayvanın dizi yetecek kadar uzun sarmal yay kanalları ile korunmaktadır. </li><li> Kateter bağlantısı, anestezi sonlandırmak takiben veselüloz yatak takımları ile bir kafes içinde sternum pozisyonda hayvanları kurtarmak. Elle 0.05 ml heparin tuzlu (50 IU / ml) hayvanların düzenli değerlendirmeler denk 24 saat her 1 saat ile satırları yıkayın, arteriyel kateter açıklığını korumak için. </li></ol> 12. Kan Örnekleme, Basıncı İzleme ve İlaç İdaresi <ol><li> Boş şırınga takın kateter arteriyel ve 0.6 ml satır içi floş çekme bağlı musluğunu için. Örnek şırınga takın örnek almak, ve 0.7 ml heparinli serum fizyolojik floş ardından 0.6 ml satır içi floş dönün. </li><li> Kullanım veri toplama donanım ve yazılım kayıt MAP ve kalp hızı sürekli ölçmek ve. </li><li> Venöz kateter için otomatik ilaç verme sistemi (ADDS) bağlayın. NOT: ADDS vazopressör infüzyon hızı normal fizyolojik aralığında muhafaza baskılara tespit MAP dayalı (yüksek, düşük, ya da 0 doz) ayarlar. </li></ol>

<ol><li>Buckingham, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indwelling+catheters+for+direct+recording+of+arterial+blood+pressure+and+intravenous+injection+of+drugs+in+the+conscious+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Indwelling catheters for direct recording of arterial blood pressure and intravenous injection of drugs in the conscious rat.</a> J Pharm. Pharmacol. 28 (5), 459-461 (1976).</li>
<li>Buckle, J. W., Nathaniels, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proceedings%3A+A+dual+catheter+system+for+the+simultaneous+infusion+and+sampling+of+the+vascular+system+of+the+unrestrained+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Proceedings: A dual catheter system for the simultaneous infusion and sampling of the vascular system of the unrestrained rat.</a> J. Physiol. 242 (2), 55P-56P (1974).</li>
<li>Solomon, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effective+dosing+of+lipid+A+analogue+E5564+in+rats+depends+on+the+timing+of+treatment+and+the+route+of+Escherichia+coli+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Effective dosing of lipid A analogue E5564 in rats depends on the timing of treatment and the route of Escherichia coli infection.</a> J. Infect. Dis. 193 (5), 634-644 (2006).</li>
<li>Cui, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacillus+anthracis+cell+wall+produces+injurious+inflammation+but+paradoxically+decreases+the+lethality+of+anthrax+lethal+toxin+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Bacillus anthracis cell wall produces injurious inflammation but paradoxically decreases the lethality of anthrax lethal toxin in a rat model.</a> Intensive Care Med. 36 (1), 148-156 (2010).</li>
<li>Quezado, Z. M., Natanson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+hemodynamic+abnormalities+and+vasopressor+therapy+in+sepsis+and+septic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Kidney+Dis%22%5BJournal%5D)">Systemic hemodynamic abnormalities and vasopressor therapy in sepsis and septic shock.</a> Am. J. Kidney Dis. 20 (3), 214-222 (1992).</li>
<li>Perdue, P. W., Kazarian, K. K., Nevola, J., Law, W. R., Williams, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+local+and+systemic+antibiotics+in+rat+fecal+peritonitis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">The use of local and systemic antibiotics in rat fecal peritonitis.</a> J. Surg. Res. 57 (3), 360-365 (1994).</li>
<li>Qiu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+individual+survival+benefits+of+tumor+necrosis+factor+soluble+receptor+and+fluid+administration+are+not+additive+in+a+rat+sepsis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+Care+Med%22%5BJournal%5D)">The individual survival benefits of tumor necrosis factor soluble receptor and fluid administration are not additive in a rat sepsis model.</a> Intensive Care Med. 37 (10), 1688-1695 (2011).</li>
<li>Cui, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Severity+of+sepsis+alters+the+effects+of+superoxide+anion+inhibition+in+a+rat+sepsis+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Severity of sepsis alters the effects of superoxide anion inhibition in a rat sepsis model.</a> J. Appl. Physiol. 97 (4), 1349-1357 (2004).</li>
<li>Karzai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+with+antibody+to+tumor+necrosis+factor+differs+with+similarly+lethal+Escherichia+coli+versus+Staphylococcus+aureus+pneumonia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Protection with antibody to tumor necrosis factor differs with similarly lethal Escherichia coli versus Staphylococcus aureus pneumonia in rats.</a> Anesthesiology. 99 (1), 81-89 (2003).</li>
<li>Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Femoral+Arterial+and+Venous+Catheterization+for+Blood+Sampling%2C+Drug+Administration+and+Conscious+Blood+Pressure+and+Heart+Rate+Measurements%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements.</a> J. Vis. Exp. (59), e3496(2012).</li>
</ol>

Yazarların potansiyel çıkar çatışmaları yoktur.

<html> Doğru, böylece damar erişim gerektiren, hemodinamik izleme gerçekleştirmek için yeteneği hastalığın klinik modeline tedavi yaklaşımları zorunlu kılmaktadır incelenmesi. Sepsis Bizim modelinde, arteriyel kateterizasyon sistemik basınç izleme sağlar ve venöz kateterizasyon, standart klinik tedavinin uygulanması için izin verir. Sepsis için standart tedavi antibiyotik infüzyon istenen aralığında arter basıncı korumak için bakteriyel enfeksiyon ve sıvıların ve vazopresörlerin infüzyon tedavi içerir. Her iki kateterler, kan örneği almak için kullanılır. Bu tasarımda, programlanabilir infüzyon uygulaması arter basınçları ortalama gerçek zamanlı dayalı vazopressör infüzyon hızının otomatik tetikleme ile pompaları sağlık personeli tarafından ve klinik öncesi ayar yapar manuel titrasyon gerektiren klinik ortamda üzerinden bir ilerlemedir Hayvanların çok sayıda eğitim mümkün bu tedavi yönteminin kullanın. . Bir içine juguler venöz kateter kaybolmaması,; e_content &quot;&gt; Bazı komplikasyonlar modelinin geliştirilmesinde erken yaşanmış Bu kısmi arteriyel ve sıkılaştırılması yerinden venöz kateterler, PU2 ve PU3 bileşenleri bağları, (% 1-2), hem tıkanıklığı dahil 2 L / dk O 2 debi ile izofluran konsantrasyonuna 2-3.5% tutarak çözüldü kurtarma (pulmoner trombüs veya diğer organ hasarı belirgin) sonra açıklanamayan ani ölüm, (% 1-2), küçük dal, (&lt;% 1) . kanama, lokal enfeksiyon ve öz-hasarın Diğer sık ​​görülen cerrahi komplikasyon gözlenmemiştir. Bir kez cerrahi yeterlilik elde edilir, her bir işlem en fazla 15 dakika içinde tamamlanması gerekir. Sağlıklı kurtarma olarak ölçülen başarı oranı ve Patent kateterler, içinde &quot;olabilir başarısız bir kateter için veri kaybı ve gerekli hayvan sayısını ve hesabı en aza indirmek için bir kez tam eğitimli. Bir ek hayvan, her çalışmaya dahil 90% aşması bekleniyor olabilirkomplikasyonları nedeniyle sadece füzyon &quot;ya da ölüm. Bu prosedür en kritik adım, kateter tasarımı ve yerleşimi olduğunu. malzemeler çok kolay sıkma yapmadan damar duvarını delmek şekilde değil ucundaki yumuşak olması gerekiyor. kateter gövdesi sert yeterince kabına ilerlemek mümkün ve yerine tespit edilmelidir (ucu hariç) olmalıdır. 1 bağlantılı arteriyel kateter ve 2 farklı çap boru için bağlanan boru çapları 3 göstermektedir venöz kateter için. Bu bileşenler ucundaki kateter çapını azaltmak için birbirlerine arasında kaydırılır ve muhafaza kap veya kalp kateteri yerleştirilmesini temin etmek için ilave dübel ile birbirine yapıştırılır. Bir kez iyileşti ve döner ve sabrının bağlı, MAP ve CVP dalga Şekil 2&#39;de gösterilen verilere benzer görünmelidir. Arteriyel kateter patenc korumak içinizleme sırasında y saatlik heparin tuz akışı (0.05 mi) yapılmalıdır. Sürekli infüzyon venöz kateter açıklığını korur. Hat bağlantısı ve floş sırasında, yakın ilgi hattında hava kabarcığı vardır sigortalamak için ödenmelidir. ≥0.1ml bir hava kabarcığı, akciğer, beyin ve diğer organlarda bir embolisine neden olabilir. Hemodinamik dalga kaydedilir ve çalışma boyunca analiz edilmiştir. X ekseni zaman sıkıştırarak olduğunda, Şekil 3, 1 saat boyunca MAP ve CVP değişiklikleri ve aynı zamanda kuru ve vazopresör infüzyon etkideki değişiklikleri gösterir. prosedür birkaç potansiyel sınırlamalar vardır. Bizim çalışmalarda, kateterler kadar 11 gün süreyle patent kalır. Bu kateterler Bu dönemde ötesinde patent kalacağını ne kadar bilinmemektedir. Tarif edildiği gibi kateterler sığdırmak için, kabaca, kemirgen ağırlığı ile ilişkilidir az vasküler boyutu vardır, bu çalışmaya dahil hayvanlar gerektiren daha büyük olduğu200 gr. daha küçük bir kateter çapına kullanımı açıklığını azaltarak akış dirençleri artmasına neden olur. Santral venöz basınç önlemleri Kavuşturulması çalışma döneminde büyüklüğü ve büyüme için hesaba yeterli atrium kesin kateter yerleştirilmesi gerekir ve bir meydan okuma olabilir. Bir kez hakim, arteriyel ve vasküler kateterizasyon enstrümantasyon sırasında herhangi bir ağrı ve sıkıntı minimize veya bir kez kurtarıldı tutarken sıvıların veya tedavilerin hemodinamik izleme, kan örneklemesi ve infüzyon gerektiren kemirgen modellerinde geniş bir yelpazede için temel sağlayabilir. Aslında, femoral ven önceki JOVE yayın 10 anlatan kateterizasyon ile birlikte, başarıyla 3 implante kateter ile bu modeli gerçekleştirdik.

Sıçanların Arteriyel ve venöz kateterizasyon uzun laboratuvar araştırmalarında kullanılmıştır. 1, 2 Kateterizasyon sistolik, diyastolik ve ortalama arter basıncı (OAB), kalp atım hızı (KAH) ve santral venöz basınç dahil olmak üzere hemodinamik parametrelerin izlenmesi için kullanılabilir (CVP) . 3,4 Buna ek olarak, bu kateter standart tedavi veya potansiyel tedaviler enfüzyon ve kan örneklemesi ayrıca, bir hastalık ya da tedavi altında yatan mekanizma analizine izin verir. Bu nedenle, küçük bir hayvan modelinde damar yolu olan klinik performansı önlemler ve tedavi etkilerinin araştırılması için kritik önem taşır. Kritik hastalık altında yatan nedenleri araştırmak için, ilk insan durumunu simüle etmek için bir model geliştirilmesi önemlidir. Bakteri bilinen bir miktarda içi trakeal aşılama başarıyla pnömoni patogenezi, daha sonra sepsis içine gelişen ciddi pulmoner enfeksiyon üretmek için kullanılır olmuştur.3, 5 hemodinamik önlemler İzleme ve standart klinik tedavi sağlayan rutin destekleyici bakım simüle etmek çok önemlidir. Standart klinik tedavi altta yatan enfeksiyon ve sıvı ve vazopresörlerin yönetimini temizleyerek yardımcı olur antibiyotik infüzyon içerir, iki terapiler kan basıncını korumak için septik hastalarda kullanılan. 5-7 Vasküler erişim, biz çalışma zaman özellikle patent kateterler implantasyon özellikle önemlidir sepsis için araştırma tedaviler. Uzun yıllar boyunca, kemirgenler için standart klinik tedavi yönetmek yeteneği implante kateter ve doğru zamanla küçük hacimli sunmak için infüzyon teknolojisi yeteneğini oluşturmak için gerekli özelliklere sahip malzemelerin mevcudiyeti ile sınırlı kalmıştır. Buna ek olarak, belirli bir hemodinamik ölçüm sürekli izlenmesi yanıt olarak bir infüzyon tetiklemek için yeteneği, tutarlı ve tekrarlanabilir bir stand için izin verirDaha büyük örneği kullanılarak kemirgen çalışmaları tipik boyutları ard tedavi modeli. 8, 9 Bu teknolojik sınırlamalar malzeme ve hassas donanım hemodinamik parametreleri izlerken aynı anda rutin tedaviler sağlamak için ama üstesinden edilmiş, arteriyel ve venöz damar yolu hem mevcut olmalıdır. Video bir anestezi sıçan karotis arter ve juguler ven kateteri sık yerleştirilmesi için cerrahi teknik detayları. 72 saat geri kazanma periyodunu takiben, hayvanlar yeniden anestezi ve hemodinamik izleme sistemine takılan kateterlerin bağlamak için kullanılan kemirgen muhafazaya bağlı bir bağlayıcı ve döner kurulum bağlı. Çalışma sırasında, sistem, bir sıvı infüzyon için izin veren, belirli bir infüzyon hızında belirli bir ses seviyesini sağlayan veya belirli bir basınç aralığını korumak için tespit edilen ortalama arter basıncı üzerinde bağlı bir enfüzyon hızı sağlar otomatik bir sistem ya göre. Sıvı infüzyon sistemiprogramlanabilir şırınga veri toplama sisteminin dijital çıkışlı bu arayüz pompaları ve MAP izleme yazılımı tarafından kontrol edilir kullanır. , basınçları izleme sıvıları ve vazopressörler beslerken, ve hayvanları işlemek zorunda kalmadan kan örnekleme yaparken halata ve döner kurulum çalışma sırasında sıçan serbest dolaşımını sağlar. 24 Araçlı hayvanları izleme genişletilebilir donanım ile (bizim kurulumunda) 2 kateter her ile 12 enstrümante hayvanların eş zamanlı izlenmesi, her deneyde birden tabakalı grupları incelemek için esneklik büyük bir olanak. Bu kateterizasyon prosedürü kadar 11 gün süreyle izlenmesi, örnekleme ve tedavi için damar yolu gerektiren benzer kemirgen modelleri kullanmak araştırma olanakları için yararlı olabilir. Bu prosedürü dikkate araştırma tesisi daha sonra bu hayvanların bakımını developin için kemirgenler ile deneyim ve uygun destek yapıya sahipseg Bu beceriler (naif sıçan, kateter bileşenleri ve teknik masraflar dahil) az $ 50 dolardan fazla 180 Kateterize sıçan başına toplam maliyeti azaltarak ve zamanlama esnekliği artırarak, önemli bir maliyet tasarrufu sağlayabilir (naif sıçan şirketi teslimat takvimi vs kolayca kullanılabilir arasında) sıçanları implante. Bu prosedürün başarısı kateterizasyon gerçekleştiren kişinin becerilerine bağlıdır. Bu prosedür yetkin olmak için gerekli eğitim hayvanlar&gt;% 90 Elde edilen kateter açıklık oranı ile 20 40 sıçanlardan değişmektedir.

<table><tbody><tr><td>Düz mikro diseksiyon forseps</td><td>Roboz</td><td>RS-8102</td><td>cerrahi alet</td></tr><tr><td>Hassas düz hemostatik forseps</td><td>Roboz</td><td>RS-7114</td><td>cerrahi alet</td></tr><tr><td>Hassas kavisli hemostatik forseps</td><td>Miltex</td><td>&nbsp; 7-4</td><td>cerrahi alet</td></tr><tr><td>Serrefine kavisli, çok hassas mikro kelepçe</td><td>Roboz</td><td>RS-5471</td><td>cerrahi alet</td></tr><tr><td>Mikro diseksiyon kancası</td><td>Miltex</td><td>19-220</td><td>cerrahi alet</td></tr><tr><td>Kenarda açılı mikro diseksiyon yaylı makas</td><td>Roboz</td><td>RS-5618</td><td>cerrahi alet</td></tr><tr><td>Hafif makas</td><td>Roboz</td><td>RS-6750</td><td>cerrahi alet</td></tr><tr><td>Neşter sapı ve bıçağı (# 10)</td> <td>Cincinnati Surgical</td><td>RS-9843</td><td>cerrahi alet</td></tr><tr><td>Kavisli iğneli 4-0 ipek sütür paketi</td><td>Ethicon</td><td>FS-2</td><td>cerrahi alet</td></tr><tr><td>Düz mikro dikiş iğnesi tutucu</td><td>Roboz</td><td>RS-6410</td><td>cerrahi alet</td></tr><tr><td>Yara klipsi</td><td>Stoelting</td><td>59027</td><td>cerrahi alet</td></tr><tr><td>Steril gazlı bez 2"x2"&nbsp;</td><td>Dynarex</td><td>3362</td><td>sarf malzemesi</td></tr><tr><td>Gazlı Bez 4"x4"&nbsp;</td><td>Covidien</td><td>2556</td><td>sarf malzemesi</td></tr><tr><td>Anestezi buharlaştırıcı</td><td>Surgivet</td><td>V703001</td><td>ekipmanları</td></tr><tr><td>Lucite kutusu</td><td>Özel</td><td></td><td>ekipman</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Baxter</td><td></td><td>ekipmanı</td></tr><tr><td>Aşağı çekiş Masa</td><td>Airscience</td><td></td><td>ekipmanı</td></tr><tr><td>Masa üstü cerrahi platform</td><td>Özel</td><td></td><td>ekipman</td></tr><tr><td>Arteriyel Kateter</td><td>Özel - Scientific Commodities Inc.</td><td></td><td>sarf malzemesi</td></tr><tr><td>venöz kateter</td><td>özel - Scientific Commodities Inc.</td><td></td><td>sarf malzemesi</td></tr><tr><td>Veri toplama sistemi</td><td>ADInstruments</td><td>Powerlab 16/30</td><td>ekipmanı</td></tr><tr><td>Veri analiz yazılımı</td><td>ADInstruments</td><td>LabChart v7.3</td><td>ekipmanı</td></tr><tr><td>Programlanabilir infüzyon pompaları</td><td>Harvard Aparatı</td><td>PHD Ultra</td><td>ekipmanı</td></tr></tbody></table>

karotis arter ve ven juguler kateterizasyon bir bilinçli rat modelinde, İnfüzyonları ve kan Örnekleme hemodinamik tedbirleri gerçekleştirme

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

Kritik hastalık incelemek için küçük bir hayvan modelinin başarısı, kısmen, insan durumunu simüle etmek modelin yeteneğine bağlıdır. Bakteri bilinen bir miktarda içi trakeal aşılama başarıyla sonra sepsis içine geliştirir pnömoni patogenezi yeniden oluşturmak için kullanılır olmuştur. Hemodinamik parametreleri İzleme ve antibiyotikler, sıvı ve kan basıncını korumak için uyuşturucu yapmak ama bu modelde rutin destekleyici bakım taklit için kritik infüzyonu dahil olmak üzere standart klinik tedavi sağlayarak böylece arteriyel ve venöz damar erişim gerektirir. Video bir anestezi sıçan karotis arter ve juguler ven kateteri sık yerleştirilmesi için cerrahi teknik detayları. 72 saat geri kazanma periyodunu takiben, hayvanlar yeniden anestezi ve hemodinamik izleme sistemine takılan kateterlerin bağlayan kemirgen muhafazaya bağlı bir bağlayıcı ve döner kurulum bağlı. Bu kurulum serbest hareketine izin verirsürekli sıvı ve ilaç beslerken, baskılar izleme (antibiyotikler, vazopressörler) ve kan örneklemesi yapılırken çalışma sırasında sıçan.

Damar basıncı değişikliği hemodinamik dalga formları ile temsil edilen elektrik sinyalleri haline dönüştürür sıvı dolu, kateter yolu ile (Şekil 1) iletilir ve dönüştürülür (Şekil 2, 3). Vasküler erişim olmadan, bu önlemlerin yapılamadı. Dalga Gerçek zamanlı streaming temelini yenmek için bir ritmi değişikliklere (Şekil 2) tespiti ve analizi için izin verir. Dalga zaman ölçeğini Sıkıştırma uzun süre (gün dakika) üzerinde meydana gelen değişiklikleri vazopressör infüzyon oranlarındaki değişikliklerle ilişkili olabilir (Şekil 3, üst 4 dalga) (Şekil 3, düşük 4 dalga) ölçülmesi için izin verir. <img alt="Şekil 1," src="/files/ftp_upload/51881/51881fig1.jpg"> Şekil 1. Kateter Tasarım: arteriyel ve venöz kateter PU, poliüretan bileşenlerinin Detayları;. PE, polietilen (segment uzunluğu) <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51881/51881fig1highres.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/51881/51881fig2.jpg"> Şekil 7 sn boyunca 4 tipik kemirgenler 7 gün sonrası kateterizasyon 2. Gerçek zamanlı MAP dalga. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51881/51881fig2highres.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/51881/51881fig3.jpg"> 1 saat boyunca 4 tipik kemirgenler (üst 4 dalga) 7 gün sonrası kateterizasyon Şekil 3. Zaman-sıkıştırılmış MAP dalga. MAP (düşük 4 dalga formları) ortalama zaman, bu değer tetik için kullanılır KATIYOR yüksek (&lt;90 mmHg) düşük (&lt;100 mmHg) veya stop (&gt; 110) infüzyon pompası akış yanıtı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51881/51881fig3highres.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a>

Hemodinamiği ölçmek, sıvı sağlamak ve kan örneklemesi yapmak için vasküler erişimler, herhangi bir küçük hayvan modeli çalışması için önemlidir. Anestezi uygulanmış bir sıçanda monitörizasyon, infüzyon ve örnekleme yapmak üzere bir sisteme bağlanmak üzere karotis arter ve ortak juguler ven içine kateter implantasyonu için bir teknik sunuyoruz.

Karotis Arter ve Ven Juguler kateterizasyon bir Bilinçli Rat Modelinde, İnfüzyonları ve Kan Örnekleme hemodinamik Tedbirleri Gerçekleştirme

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Bu prosedürün genel amacı, ayaktan bir sıçanda hemodinamiği ölçmek, sıvı sağlamak ve kan örneklemesi yapmak için karotis artere ve ortak juguler ven içine kateter implantasyonu için bir teknik sunmaktır. Bu, önce sağ juguler ven içine bir kateter yerleştirilerek ve daha sonra sol karotis artere bir kateter yerleştirilerek gerçekleştirilir. İki kateter daha sonra cilt altına tünellenir ve kürek kemikleri arasında dışsallaştırılır.Sonuç olarak, kateterler, farelerin serbest hareketine izin veren bir ip ve döner kuruluma bağlanır. Deneyci basınçları ölçebilir, sıvıları infüze edebilir ve kan örnekleri alabilir. Bu yöntemin görsel gösterimi, adımların birçoğunun öğrenilmesi zor olduğu için kritik öneme sahiptir.Kateter açıklığı, çok teknik odaklı olan hassas yerleştirmeye bağlıdır ve ameliyattan önce nasıl yapıldığını görmenin önemini artırır. Tüm aletler ve kateterler gazla sterilize edilmelidir. Her bir kateteri doldurarak ve metal bir tıpa ile tıkayarak heparinize gliserol kullanarak kateterlerde sızıntı olup olmadığını kontrol edin.İş istasyonunu ve tüm yüzeyleri %70 etanol ile temizleyin. Ardından ameliyat masasını steril bir örtü ile örtün ve alet tepsisine ek bir örtü koyun. Sıçan bilinçsiz olduğunda, boynunu ön ve arka taraflarda tıraş edin.Tıraştan sonra, farenin gözlerine kayganlaştırıcı sürün. Şimdi hayvanı cerrahi bölgeye aktarın. Vücut ısısını korumak için ılık bir pedin üzerine koyun.Ardından bir burun konisi takın ve% 3.5 flor verin. Cildi alternatif Betadine ve% 70 etanol fırçaları ile temizleyerek hazırlıkları tamamlayın. Bir ayak parmağını çimdikleyerek farenin yanıt vermediğini onaylayın.Daha sonra önce makas kullanarak ameliyata başlayın, scape arasında 0,5 santimetrelik orta hat cilt kesisi yapın. Sonra, fareyi sırt pozisyonuna çevirin. Daha sonra bacaklarını lastik bantlarla her iki tarafa doğru nazikçe tutun ve cerrahi alan maruziyetini iyileştirmek için boynunun altına biraz kıvrılmış gazlı bez koyun.Şimdi bir sonraki orta hattın sağında ve sağ juguler veni kateterize etmek için klavikula seviyesinde iki santimetrelik ventral servikal deri kesisi yapmak için bir neşter kullanın. İlk olarak, sağ juguler veni künt bir şekilde incelemek için bir hemostat kullanın. Tükürük ve lenfatik dokuları ayırın ve juguler bölgenin beş milimetrelik bir bölümünü izole edin.Daha sonra dört sıfır ipek sütür kullanarak, maruziyetini en üst düzeye çıkarmak için juguler venin hem kraniyal hem de coddle uçlarına gevşek bir bağ yerleştirin. Daha sonra, mikrocerrahi makasla, kateter için ligatürler arasında uzunlamasına bir kesi yapın. Daha sonra kesiyi takiben kraniyal ligatürü damarın etrafına bağlayın.Kateteri juguler içine kalbe doğru yerleştirmek için mikro diseksiyon kancası ve forseps kullanın, ta ki PU üç F segmentinin tamamı damarda olana kadar. Daha sonra kateteri sabitlemek için kraniyal ve coddle uçlarındaki bağları sıkın. Şimdi sol karotis arteri kateterize edin.İlk olarak, oma kasını künt bir şekilde incelemek ve sol karotis arterin beş milimetrelik bir bölümünü ortaya çıkarmak için bir hemostat kullanın. Vagus sinirinin arterden tamamen ayrıldığından emin olun. Siniri parçalamayın veya kırmayın.Daha sonra, geminin kıvrak ucuna gevşek bir sümük ile dört sıfır ipek sütür yerleştirin. Daha sonra damarın kraniyal ucunu bağlayın ve kritik olarak, insizyonu takiben kan akışını durdurmak için dikişin üzerine bir bulldog kelepçesi yerleştirin. Mikrocerrahi makas kullanarak, kateteri geçmek için ligatürler arasında uzunlamasına bir kesi yapın.Daha sonra bir mikro diseksiyon kancası ve forseps kullanarak arteriyel kateteri kalbe doğru yerleştirin. Şimdi kilitlemeden, kateterin bir kısmını damarda sıkıca tutmak için küçük bir iğne tutucu kullanın. Ardından bulldog kelepçesini çıkarın.Daha sonra forsepsleri kullanarak, iğne tutucuyu yavaşça gevşetirken kateteri ilerletin, tüm PU iki F segmentini karotide yerleştirin. Bu adım, kan kaybını en aza indirmek için pratik gerektirecektir. Şimdi kateterin etrafındaki coddle ligatürünü sıkın, ancak tıkayacak kadar sıkı değil.Bitirmek için, deri altından tünel açmak için düz bir hemostat, kulağın arkasında beş santimetrelik bir tüp ve scape arasındaki kesiden geçirin. Daha sonra kateterleri tüpün içinden dışarı çıkarın ve tüpü çıkarın. Şimdi dış kateterleri sabitlerken ventrikül insizyonunu üç paslanmaz çelik yara klipsi ile kapatın.Daha sonra dört adet sıfır ipek sütür kullanarak sırt kesisini kapatın. Şimdi anesteziyi sonlandırın ve farenin ameliyat sonrası selüloz yatak üzerinde lateral dekübit pozisyonunda iyileşmesine izin verin. Fareleri her iki saatte bir en az dört saat boyunca veya hiçbir ağrı belirtisi göstermeyene kadar gözlemleyin.Sonra fareleri günlük olarak kontrol edin. Bir farenin ağrıya ihtiyacı varsa, hazırlık için her 12 saatte bir ketoprofen sağlayın. Bobin sarılı uzun kateterleri heparin salin ile önceden yıkayın.Bu kateterler, bir döner kullanılarak bir ayakkabı kutusu kafesinin tepesine bağlanır ve dışsallaştırılmış kateterleri sıçanın üzerine takar, daha önce olduğu gibi bir sıçanı uyuşturur ve sıçanın prosedürü tolere etmesini sağlamak için bir burun konisi yoluyla anestezi sağlar. Şimdi kauçuk kapaklı kanama durdurucu kelepçeler kullanılarak, arteriyel ve venöz kateterlerin hemen altındaki metal tıkaç pimleri, kauçuk kateterlere zarar vermemek içindir. Daha sonra, kateterin ucundaki metal pimi çıkarmak için bir çift forseps kullanın ve körelmiş bir iğne ile heparin salin ile doldurulmuş bir mililitrelik şırınga takın.Sırasıyla, kanama durdurucuları çıkarın ve kateterlerin açık olup olmadığını kontrol etmek için 0.1 mililitre çekin. Şimdi kateterleri tekrar kelepçeleyin, iğneyi çıkarın ve daha uzun kateterleri takın. Ardından uzun kateterleri dönüştürücülere bağlayın.Tamamlandığında, sıçanın selüloz yatak takımı üzerinde sternal pozisyonda iyileşmesine izin verin. Arteriyel kateterin açıklığını korumak için, hatları, hayvanın düzenli değerlendirmeleriyle aynı zamana denk gelecek şekilde her saat 0,05 mililitre heparin salin ile yıkayın Kan örneği almak için. İlk olarak, arteriyel katetere bağlı durdurma musluğuna boş bir şırınga takın.0,6 mililitrelik bir hat içi yıkama çekin. Daha sonra hatta bir numune şırıngası takın ve kan örneğini alın. Ardından, hat içi yıkama hacmini geri getirin ve ardından 0,7 mililitre heparinize salin ile takip edin.Bu arada, MAP ve kalp atış hızları yazılıma kaydedilir ve ilaçlar, gerçek zamanlı basınç verilerini kullanarak fizyolojik koşulları koruyan venöz katetere bağlı otomatik bir sistem kullanılarak uygulanabilir. Vasküler basınçtaki değişiklikler sıvı alan kateterleri aracılığıyla iletilir ve elektrik sinyallerine dönüştürülür. Veriler hemodinamik dalga formları olarak temsil edilir.Damar yolu olmadan bu ölçümler yapılamıyordu. Gerçek zamanlı veri akışı, deneycinin değişiklikleri yenmek için bir vuruş temelinde algılamasına ve analiz etmesine olanak tanır. Dalga biçimlerinin zaman ölçeğini sıkıştırmak, uzun zaman dilimlerinde meydana gelen değişiklikleri ölçmek için yapılabilir.Beklendiği gibi, bu veriler vazopresör infüzyon hızındaki değişikliklerle ilişkilendirilecektir Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa 15 dakikadan daha kısa sürede yapılabilir.

catheterization-carotid-artery-jugular-vein-to-perform-hemodynamic

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Hiperinsülinemik öglisemik kelepçe insülin eylem değerlendirmesi için "altın standart". İnsülin, glukoz alımını teşvik sabit bir hızla doluyor. Bu düşüşün karşı aşılanmış eksojen glukoz miktarı insülin duyarlılığını göstermektedir. İşte prosedür bilinçli bir dizginlenmemiş sıçan yapılır.

Bilinçli Rat hiperinsülinemik öglisemik Kelepçe

Sıçanlarda kan damarlarının Kronik kateterizasyon sık sık bir süre üzerinden veya direkt bilinçli bir kan basıncı ölçümü için kan örneği almak, maddelerin yönetimi için gereklidir. Sıçan ve ilgili bilinçli hayvan kan basıncı ölçümleri Femoral arteriyel kateterizasyon gösterilmelidir.

Kan Örnekleme, İlaç İdaresi ve Bilinçli Kan Basıncı ve Nabız ölçümleri Femoral Arter ve Venöz Kateterizasyon

Bu videoda, bir sıçan modelinde sol karotis arteri kanüle etmek için cerrahi bir prosedür gösteriyoruz.

Karotis arterinin bir sıçan modelinde kanülasyonu

Sistemik hipotansiyon ile birlikte iki taraflı karotis tıkanıklığı tekrarlanabilir şiddeti ile hipokampus hasar görebilir, sıçan küresel beyin iskemi üretir. Hayvanlar üzerinde beyin hasarı tahmin modelleri ile engelli, onlar expediently kurtarmak ve ölüm oranları nispeten düşüktür.

2-Gemi Tıkanıklığı / Hipotansiyon: Küresel Beyin İskemi Rat Modeli

Farelerde glukoz ve Intralipid kronik infüzyon için bir protokol açıklanmıştır. Bu model, organ fonksiyonu ve fizyolojik parametreler üzerindeki besin aşırı etkisini incelemek için kullanılabilir.

Sıçan Kronik Besin İnfüzyon Bir Model

Bu yordamı genel amacı fare modelleri iskemik inme kan - beyin bariyerini bozulma vivo içinde değerlendirmesi için son derece tekrarlanabilir bir teknik sağlamaktır.

Kan - beyin bariyerini bozulma iskemik inme, bir fare modeli Vivo içinde değerlendirilmesi

Burada sürekli kan örnekleme için bir protokol içinde PET/CT görüntülemede farelerin arter giriş fonksiyonunu ölçmek için (AıF) açıklanmıştır. Kateterizasyon, sistemin kalibrasyon ve kurulumu ve kan radyoaktivitesinin veri analizi gösterilmiştir. Oluşturulan veriler, sonraki Bio-kinetik modelleme için giriş parametreleri sağlar.

Küçük hayvan Pozitron Emisyon Tomografi/Bilgisayarlı tomografi sürekli kan örnekleme arteriyel giriş fonksiyon ölçümü sağlar

Aynı hayvanda sıralı kan alımı için daha uzun süreli juguler ven kanülasyon sıçanı modeli oluşturmak için ayrıntılı mikrocerrahi teknikler gösterilmiştir. Sıçanın iyileşme aşamasında fizyolojik ve hematolojik parametreler izlenmiştir. Bu model, hayvan stresine neden olmadan oral yoldan uygulanan polifenolün farmakokinetiğini incelemek için uygulanmıştır.

Oral Yoldan Verilen İlacın Seri Kan Örneklemesi için Sıçanlarda Kalıcı Juguler Ven Kanülasyonu Oluşturma Mikrocerrahi Becerileri

Burada, sıçanlarda anestezi olmadan hızlı, güvenli ve tekrarlanan kan alımını sağlayan etkili sıçan kısıtlaması ve subklavyen ven ponksiyon yöntemlerinin bir kombinasyonunu sunuyoruz.

Bilinçli Sıçanlarda Subklavyen Ven Kan Örneklemesi

Bu deneysel protokol, karaciğer lenfatik ve damar drenajının doğrudan ve nicel olarak değerlendirilmesini sağlayan karaciğer lenf kanalı kanülasyonlu bir fare modelini tanımlar. Model, karaciğer taşıması, metabolizması ve bağışıklık sinyalini incelemek için karaciğer lenf ve sistemik kanın eşzamanlı örneklenmesine olanak tanır ve ilaç farmakokinetiği ile karaciğer-spesifik biyolojinin çalışmalarını destekler.

Hemefir Taşıma Yollarının Eşzamanlı Lenfatik ve Kan Damarları Örneklemesi Yoluyla Değerlendirilmesi İçin Kapsamlı Fare Modeli

Öğrenin, sıçanlarda karotis arter ve juguler ven kateterizasyonu ile hemodinamik ölçüm, infüzyon ve kan örnekleme tekniklerini. Bu yöntem, serbest hareket eden hayvanlarda sürekli kardiyovasküler izlem sağlar.

Karotis Arter ve Ven Juguler kateterizasyon bir Bilinçli Rat Modelinde, İnfüzyonları ve Kan Örnekleme hemodinamik Tedbirleri Gerçekleştirme (Video) | JoVE Journal

Karotis Arter ve Ven Juguler kateterizasyon bir Bilinçli Rat Modelinde, İnfüzyonları ve Kan Örnekleme hemodinamik Tedbirleri Gerçekleştirme

Daha fazla video keşfet