The Soft Agar Colony Formation Assay

Stanley Borowicz; Michelle Van Scoyk; Sreedevi Avasarala; Manoj Kumar Karuppusamy Rathinam; Jordi Tauler; Rama Kamesh Bikkavilli; Robert A. Winn

doi:10.3791/51998

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

The Soft Agar Colony Formation Assay

Yumuşak Agar koloni formasyon deneyi

Full Text

113,942 Views

08:01 min

October 27, 2014

DOI: 10.3791/51998-v

Stanley Borowicz¹, Michelle Van Scoyk², Sreedevi Avasarala², Manoj Kumar Karuppusamy Rathinam², Jordi Tauler², Rama Kamesh Bikkavilli², Robert A. Winn^2,3

¹Department of Hematology and Oncology,University of Illinois at Chicago, ²Department of Pulmonary, Critical Care, Sleep, and Allergy,University of Illinois at Chicago, ³Jesse Brown Veterans Affairs Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Yumuşak agar koloni oluşum testi, in vitro hücresel ankrajdan bağımsız büyümeyi doğrulamak için kullanılan bir yöntemdir. Bu protokolün amacı, transforme olmuş hücrelerin tümörjenik potansiyelinin ve proteinlerin transforme olmuş hücreler üzerindeki tümör baskılayıcı etkilerinin tespiti için sıkı bir yöntem göstermektir.

Bu prosedürün genel amacı, hücresel ankrajdan bağımsız büyümeyi ölçmektir. Bu, önce hücre kültürü plakası üzerine bir agar tabakasının kaplanması ve sertleşmesine izin verilmesiyle gerçekleştirilir. İkinci adım, önceki agar tabakasının üzerine agar içindeki bir hücre karışımını kaplamaktır.

Daha sonra, hücrelerin birkaç haftalık bir süre içinde koloniler oluşturmasına izin verilir. Son adım, görselleştirme ve niceleme için kolonileri boyamaktır. Sonuç olarak, yumuşak agar koloni oluşumu testi, hücresel dönüşümün bir göstergesi olarak Anchorage'dan bağımsız büyümeyi göstermek için kullanılır.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos