2 Ekim 2014
Tavşandaki deneysel intrakraniyal basınç kontrollü kan şantı subaraknoid kanama (SAK) modeli, standart prosedürleri birleştirir - subklavyen arter kanülasyonu ve transkutanöz sisterna magna ponksiyonu, SAK sonrası insan patofizyolojik durumlarının yakından taklit edilmesini sağlar. Adım adım talimatlar sunuyoruz ve başarılı deneysel SAK oluşturma için temel cerrahi noktaları tartışıyoruz.
Bu prosedürün genel amacı, tavşanda denetçiden bağımsız bir intrakraniyal basınç veya ICP kontrollü kan şant, akut subaraknoid kanama veya SAK modeli oluşturmaktır. Bu, önce subklavyen arterin kanüle edilmesiyle gerçekleştirilir. İkinci adımda, dijital çıkarma anjiyografisi yapılır ve ardından son adımda nöromonitörizasyon probları ve bir spinal erişim iğnesi yerleştirilir.
Spinal erişim iğnesi ve subklavyen arter, muayene ediciyi indüklemek için bir şanta bağlanır, bağımsız ICP kontrollü akut SAK, sonuçta ICP serebral kan akışı veya CBF ve hayvanın akut SAK'a kardiyorespiratuar yanıtı izlenebilir. Bu yöntem, erken beyin hasarı ve gecikmiş beyin damarı örneğinin unfarrow sonucuna ve mortaliteye nasıl katkıda bulunduğu gibi nörovasküler alandaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Anevrizmal subik kanamayı takiben: Sedasyonlu tavşanı, hem ön hem de arka bacakları ameliyat yüzeyine sabitlenmiş olarak sırtüstü pozisyonda yerleştirerek başlayın.
Bu şekilde üç kanallı bir elektrokardiyogram takın. Tavşanın ventral tarafına üçgen şeklinde üç deri altı elektrot yerleştirin. Daha sonra, cildi klavikulanın orta üçte birlik kısmı etrafındaki sağ resimsel kas üzerinde povidon iyot veya benzeri bir şeyle dezenfekte edin, hayvanı steril çarşaflarla örtün.
Göğüs kasına lokal anesteziklerle sızdıktan sonra, lateral paramöz bir cilt kesisi yapın ve göğüs kasını ortaya çıkarın. Subklavyen arter görüntülenene kadar künt diseksiyon ile kas lifini üst ve alt olarak bölün. Daha sonra mikroskop altında, iki düz mikro forseps kullanarak subklavyen arteri inceleyin ve ardından distal olarak bağlayın ve dört O polifilament sütür ve kavisli bir mikro forseps kullanarak açıkta kalan proksimal ucun etrafına bir ligatür yerleştirin.
Daha sonra, subklavyen arterin duvarını kesmek ve arteri retrograd kanüle etmek için kavisli bir mikro makas kullanın. Daha sonra kateteri proksimal ligatüre doğru çift düğümlü ligatür ile sabitleyin ve ek olarak, arterin proksimal kısımlarının arteriyel bükülmesini veya bükülmesini önlemek ve kaymayı veya büyük kanamayı önlemek için kateteri distal ligatüre doğru çift düğümlü ligatür ile sabitleyin. Daha sonra arteriyel kan gazı analiz durumu için kan örnekleri toplayın ve standart kardiyovasküler ve solunum parametrelerini sürekli olarak izleyin.
Anjiyografiyi kalibre etmek ve taban çizgisinin post hoc ölçümlerinin ve takip eden damar çapının tam bir karşılaştırmasını sağlamak için mandibula açılarının üzerine harici bir boyutlandırma cihazı yerleştirin. Daha sonra kanüllü arterden noniyonik GİB GİL'in retrograd intra arteriyel bolus enjeksiyonunu yapın ve merdivenin tıkanmasını önlemek için kanülü hemen salin ile yıkayın. Başlangıç dijital çıkarma anjiyografisini takiben, intra arteriyel kateteri manipüle etmemeye veya yeniden konumlandırmamaya dikkat ederek tavşanı yüzüstü pozisyona getirin.
Arteriyel kan basıncı monitörizasyonunu bağlayın ve elektrokardiyogram, arteriyel kan basıncı, periferik oksijen satürasyonu, ekspiratuar karbondioksit ve çekirdek sıcaklığı dahil olmak üzere standart kardiyovasküler ve solunum parametrelerini sürekli olarak izlemeye başlayın. Verileri analog çıkış arayüzü üzerinden bir analog dijital dönüştürücü veri kaydediciye aktarın ve saklayın. Kafayı aşağı doğru yönlendirilmiş 30 derecelik bir açıyla bir tutucuya yerleştirin ve ardından baş ve boynun üzerindeki cildi her biri bir dakika boyunca üç kez povidon iyotla dezenfekte edin.
Yeni cerrahi alanı steril çarşaflarla kapladıktan sonra orta hatta cilt kesisi yapın. Dış kafatası işaretlerine göre üç yuvarlak osteotomi yapmak için küçük bir cerrahi ekartör yerleştirin ve nöromonitörizasyon problarını kalibre edin. İnterkraniyal basıncı ve inter parankimal lazer doppler kan akışı nöroizleme uçlarını yerleştirin ve kafatası sıvısını sıkı tutmak ve kapalı bir kafatası durumuna izin vermek için frez deliklerini kemik mumu ile kapatın
.Daha sonra, cisterna magna'ya transkutanöz 22 gauge 40 milimetre pediatrik spinal erişim iğnesi yerleştirin. Ardından, bir boşluk tespit edilene kadar iğneyi kemikli dış oksipital çıkıntı boyunca aşağı kaydırın. Tavşanın başı birkaç dakika boyunca 20 ila 30 derecelik bir açıyla aşağı eğikken beyin omurilik sıvısının kendiliğinden damlamasını gözlemleyerek iğnenin doğru konumlandırıldığını onaylayın.
Şimdi, cisterna magna'daki spinal erişim iğnesini daha önce kateterize edilmiş subklavyen artere bağlı üç yollu durdurma musluğuna bağlamak için kanla dolu bir basınç izleme tüpü kullanın. Daha sonra subaraknoid kanamayı indüklemek için subklavyen arter ile CI sternum magna arasındaki şant bağlantısını açın. Şant açıldıktan sonra kafa içi basıncı diyastolik kan basıncına yakın değerlere yükselmeye başlar.
Bu sırada, interkraniyal plato 10 saniyeden fazla tutulursa şanttaki akış durur veya basınç kendiliğinden azalırsa, interkraniyal basınç zirveye ulaştıktan sonra şantı kapatın, basınç taban çizgisi değerlerine yakın sabit bir duruma dönene kadar spinal erişim iğnesini yerinde tutun. Son olarak, serebral kan akışı ince iğnesini ve kafa içi basınç problarını çıkarın. Frez deliklerini kemik mumu ile tıkayın, ardından titiz bir yara irrigasyonu yapmak ve cildi dikmek için neomisin sülfat kullanın.
İlk olarak, cildi frez deliklerinin üzerine dikin. Daha sonra tavşanın sırtüstü pozisyonda yeniden konumlandırılmasından ve subklavyen arter kateterinin çıkarılmasından sonra, göğüs kasını ve cildi dikin. Bu raporda açıklanan SAH'ın kuduz kan şant modeli, hipokampus bazal korteksinde erken beyin hasarı ve yaralanmadan 24 saat sonra serebral vaskülatürde erken beyin hasarı üretir ve karakteristik bir kan dağılımına neden olur.
Ek olarak, bu model üçüncü günün orta ila şiddetli derecelerinde gecikmiş serebral vazospazmı tetikler. SAK indüksiyonundan sonra, hayvanların tam anestezi altında olduğu akut SAK sırasında solunum durması veya şiddetli bradikardi nedeniyle prosedürün mortalite oranı yaklaşık% 20'dir. Teknik açıdan bakıldığında, bu kan şantı modeli hem muayene eden kişiden bağımsız hem de kontrol edilebilir SAK indüksiyonuna izin verir.
Bu prosedürü denerken, bu sub klavon arteri sıkıca sabitlemeyi, büyük bir araba almayı ve hayvanı yeniden konumlandırmayı ve Cy Sternum akupunkturu sırasında çok nazik ve sabırlı olmayı unutmamak önemlidir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, tavşanlarda akut subaraknoid kanama (SAH) için intrakraniyal basınç kontrollü bir kan şant modelinin kurulmasına yönelik bir yöntem sunmaktadır. Prosedür, insan patofizyolojik koşullarını yakından taklit ederek SAH hakkında değerli bilgiler sağlamaktadır.
Subaraknoid kanamanın (SAH) hem erken hem de geç sekellerini yeniden oluşturan güvenilir hayvan modelleri, translasyonel nörovasküler araştırmalar ve preklinik hedef doğrulamaları için kritik öneme sahiptir. Tavşan kan şant modeli; araştırmacıdan bağımsız, intrakraniyal basınç (ICP) kontrollü SAH indüksiyonuna olanak tanıyarak, akut beyin hasarı ve geç vazospazmın tekrarlanabilir mekanistik çalışmalarını destekler. Bu model, patofizyolojik mekanizmaların ve potansiyel müdahalelerin değerlendirilmesi için sağlam bir platform sunarak keşif sürecindeki temel bir boşluğu doldurmaktadır.
Bu model, SAH patofizyolojisine yönelik hipotez odaklı çalışmalar ve müdahale testlerine olanak sağlayarak, keşiften preklinik aşamaya kadar olan sürece entegre olmaktadır.