Name: Yakın Kızılötesi (NIR) Işık Fare Vestibüler Duyu Epitelinin Mitokondriyal Fonksiyonun bir Marker Anlatım artırır (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 56 s
Description: Keşfedin yakın kızılötesi ışık uygulamasının yaşlanan farelerdeki vestibüler duyu epitelinde mitokondriyal fonksiyonu ve antioksidan gen ekspresyonunu nasıl artırdığını. Bu basit, invaziv olmayan yöntem nöroprotektif tedavi potansiyeli sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar mRNA çıkarma ve PCR ile yardım için Dr. Paul Witting ve Bayan Genevieve Fong kabul etmek isteyen, ve destek için Garnett Passe ve Rodney Williams Memorial Vakfı.

Etik Beyanı: Aşağıda belirtilen tüm işlemler Sydney Hayvan Etik Kurulu Üniversitesi tarafından onaylanmıştır. 1. Hayvanlar NOT: 1 ve 8 - 9 aylık fareler (C57 / BL6) Hayvan Kaynakları Merkezi (Perth, Avustralya) elde edilmiştir. Fareler Sydney Üniversitesi&#39;nde Bosch Kemirgen Tesisinde yerleştirildiler. <ol><li> Gıda ve su ad libitum erişimi olan bir 12/12 saat ışık / karanlık döngüsünde standart fare kafesleri Ev fareleri. </li><li> Yakın kızılötesi her bir yaş grubunda Böl fareler (NUR) tedavi, ya da sahte karşılaştırma için (kontrol) gruplar muamele. </li></ol> 2. yakın kızılötesi (NIR) Işınlama ve Sham Tedavisi <ol><li> Tedavi rejiminin tamamlanmasından önce saç hızlı yeniden büyümesini önlemeye mümkün olduğunca yakından bir elektrikli ustura ile fare baş ve boyun bölgesinde kürk Tıraş. Farelerin patojensiz durumunu muhafaza etmek için,% 70 etanol kullanımıtıraş hayvanlar ve ayrı kafeslere gelen hayvanlar arasındaki F10 veteriner dezenfektan arasındaki aletleri temizlemek için. Hayvanlar üzerinde saplı değildir bu yüzden tedaviye başlamadan 3 gün önce - bu 2 yapın. </li><li> Kuyruk proksimal ucunu tutarak fare dizginlemek ve yanlış sonuçlara yol açabilir stresi en aza indirecek şekilde o bir el ya da tezgah üstünde avuç içinde dinlenmek için izin verir. </li><li> LED Nir (670 nm) (ışık yayan diyot) 1 Cihazı tutun - 2 cm uzakta maruz (traş) alan ve 90 saniye (Şekil 1A) için cihazı açın. NOT: 90 saniye maruz kalmanın bir sonucu olarak sıcaklık değişimi, 100 ml su içinde 0.2 ° C &lt;olarak ölçülmüştür. </li><li> Hayvanların sahte tedavi grubu için 2.3 ancak aygıt kapalı (Şekil 1B) bırakın - Tekrar 2.2 adımları. </li><li> Hayvanların Nir-bloke tedavi grubu için 2.3 ama alüminyum folyo ile cihazı kapak - yineleyin 2.2 adımları. </li><li> Approximat günlük 2.5 - 2.2 tekrarlayın adımlarıbirbirini takip eden 5 gün süre ile 24 saat aralıklarla, e. </li><li> Beşinci gün tedavi sonrası her iki kulaklarından vestibüler duyu epitel (3 krista ve 1 utricular makülayı) Extract (aşağıdaki Bölüm 3&#39;e bakın). </li></ol> 3. Doku Ekstraksiyon 20 <ol><li> 26 NaHCO 3, 11 glukoz, 250 gliserol, 2.5 KCl, 1.2 NaH 2 PO 4, 1.2 MgCl2, ve 2.5 CaCl2 (mM olarak) oluşan, bir gliserol bazlı yapay serebrospinal akışkan (ACSF) 300 ml hazırlayın. CaCI2 ilave edilmeden önce, 7.4 bir pH değeri ve kalsiyum çökelmesi (bulanıklık) önlemek için karbojen (% 95 O2 ve% 5 CO2) ile çözelti gaz. Bir buz bulamaç oluşturulur, böylece, 45 dakika için -80 ° C dondurucu içinde bir çözüm soğutun. </li><li> Etiketli vida üst mikrotüplerde RNA izolasyonu lizis tamponu hazırlayın (kapak haşhaş durduğunda donma ve sıvı azot içinde çözülme arasındaki boru basınç değişiklikleri) göreüretici veya olağan laboratuar uygulamalarının talimatlarına. Bir alüminyum Dewar şişede sıvı azot hazır bulundurun. NOT: Sıvı azot kullanırken koruyucu kıyafet ve Eyeware kullanın. Doğal gaz formunda hacmi yaklaşık olarak sıvı halde 700 katıdır ve boğulmaya neden olabilir gibi sıvı nitrojen iyi havalandırılmış bir odada kullanılan emin olun. </li><li> Derin bir intra-peritonal enjeksiyon yoluyla ketamin (400 mg / kg) ile fareler uyuşturan. Arka-bacak refleks tamamen fareler tamamen anestezi olduğu göstergesi olarak düşmesi. </li><li> Keskin paslanmaz çelik makas ile fareler başını kesmek ve bir jilet kullanarak kafatasının sagital cilt boyunca bir kesi yapmak (# 22 yuvarlanmış). Bu noktada ve genelinde 3.5 adımları - 3.9, doku üzerinde buz soğuk ACSF düzenli uygulanması ile mümkün olduğunca serin kafatası tonoz, beyin, ve altta yatan vestibüler aparat tutun. </li><li> Bir hızlı s yapmak standart desen makas sivri kolunu kullanmal lambda kafatası insizyon ve sagital sütür boyunca kesilir. </li><li> Yavaşça beyin sürükleyerek olmadan kemik alt yüzeyine mümkün olduğunca yakın bıçak tutarak parietal kemikte altında sığ rongeurs bir kolunu kaydırın. Güvenli ve beyin maruz kadar posteriora yanal parietal kemik ve oksipital kemik uzak çekin. </li><li> Bir küçük paslanmaz çelik spatula kullanın ve vestibülokohlear sinir (CN VIII) maruz uzakta anterior ve orta kranial fossa beyni kaldırın. Doğrudan vestibüler saç hücrelerini innerve primer afferent aksonlar gereksiz gerilimi önlemek için sinir transect. </li><li> CN VIII kesisi sonrasında toto beyin çıkarın. </li><li> Koklea ve orta kranial fossada periferik vestibüler organları içeren kemik labirent gözlemleyin. Her kemik labirent yanında iki küçük kesiler yapmak ve ön semisirküler kanal tutan ve daha sonra çekerek tüm yapıyı tüketimmüttefik. </li><li> Hemen sürekli karbojen ile perfüze ise (aşama 3.1&#39;de tarif edildiği gibi), buz soğukluğunda ACSF çözeltisini ihtiva eden bir kesme çanak kesilerek çıkarılmış labirentler bırakın. </li><li> Steromikroskopla, koklea ile labirenti basılı tutun ve forseps ile çanak altına sabitleyin. <ol><li> Ön semisirküler kanal (SSC) ampulla üstünde kemik küçük bir açıklık kazımak için düz ince forseps kullanın. </li><li> Yavaşça hemen kemik altına ulaşan ve dışa uzak ampulla gelen iterek bu açılış büyütmek. Ağzına forseps itin ve aşağıda kırılgan membranöz labirent zarar değil burada dikkatli. Kesecik, ön ve yan ampülleri tüm maruz kadar bu şekilde devam ediniz. Mümkünse de arka ampulla çıkarın. </li></ol></li><li> Ince forseps kullanarak, hafifçe kaldırın ve kırbacık tamamen müstakil kadar kemik labirent uzak ampülleri. Mümkünse, onları tutmakilişkili semisirküler kanallar tarafından duyusal epitel zarar vermemek için. Bazı durumlarda, yarım daire membranöz kanalın proksimal kısmı kemikten ampülleri serbest bırakmak için iris makas ile kesilebilir gerekebilir. </li><li> Güvenli adımda 3.2 önceki hazırlanan lizis tamponu içine forseps ucu ile yer arasındaki vestibüler organları kavramak. Yavaşça vestibüler organları forseps kopuk emin olmak için tampon etrafında forseps girdap. Bu stereomicroscope altında forseps getirerek durumda kontrol edin. <ol><li> Mikrotübül kapağındaki vida ve hemen sıvı nitrojen içinde örnek dondurma. </li></ol></li></ol> 4. RNA Ekstraksiyonu ve RT-PCR <ol><li> Üreticinin talimatlarına veya tercih edilen laboratuvar protokollerine göre mesajcı RNA (mRNA) ekstre standart yöntemleri takip edin. NOT: mRNA küçük verim yalıtmak için taşıyıcı RNA&#39;lar kullanılan bir ticari kit bu kullanıldıprotokol. Alt elüsyon hacimleri mRNA nihai konsantrasyonlarını arttırmak için kullanılabilir. NOT: Negatif &quot;hayır enzim&quot; denetimleri (UEM) ve &quot;hayır DNA şablonu&quot; denetimleri (NTSC) da gözlenen etkilerin geçerliliğini sağlamak için tamamlanması gereken. </li><li> Hedef genlerin 21-23 tamamlayıcı DNA (cDNA) ve büyütme için mRNA&#39;nın ters transkripsiyon standart yöntemler uygulanır. </li></ol>

<ol><li>Agrawal, Y., Carey, J. P., Della Santina,, C, C., Schubert, M. C., Minor, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disorders+of+balance+and+vestibular+function+in+US+adults%3A+data+from+the+National+Health+and+Nutrition+Examination+Survey%2C+2001-2004%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+internal+medicine%22%5BJournal%5D)">Disorders of balance and vestibular function in US adults: data from the National Health and Nutrition Examination Survey, 2001-2004.</a> Archives of internal medicine. 169, 938-944 (2009).</li>
<li>Bessho, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+subthreshold+infrared+laser+treatment+for+drusen+regression+on+macular+autofluorescence+in+patients+with+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Effect of subthreshold infrared laser treatment for drusen regression on macular autofluorescence in patients with age-related macular degeneration.</a> Retina. 25, 981-988 (2005).</li>
<li>Olk, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+benefits+of+infrared+%28810-nm%29+diode+laser+macular+grid+photocoagulation+in+prophylactic+treatment+of+nonexudative+age-related+macular+degeneration%3A+two-year+results+of+a+randomized+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Therapeutic benefits of infrared (810-nm) diode laser macular grid photocoagulation in prophylactic treatment of nonexudative age-related macular degeneration: two-year results of a randomized pilot study.</a> Ophthalmology. 106, 2082-2090 (1999).</li>
<li>Rodanant, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+drusen+reduction+after+subthreshold+infrared+%28810+nm%29+diode+laser+macular+grid+photocoagulation+for+nonexudative+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22American+journal+of+ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Predictors of drusen reduction after subthreshold infrared (810 nm) diode laser macular grid photocoagulation for nonexudative age-related macular degeneration.</a> American journal of ophthalmology. 134, 577-585 (2002).</li>
<li>De Taboada, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcranial+laser+therapy+attenuates+amyloid-beta+peptide+neuropathology+in+amyloid-beta+protein+precursor+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Alzheimer%27s+disease+%3A+JAD%22%5BJournal%5D)">Transcranial laser therapy attenuates amyloid-beta peptide neuropathology in amyloid-beta protein precursor transgenic mice.</a> Journal of Alzheimer's disease : JAD. 23, 521-535 (2011).</li>
<li>Grillo, S. L., Duggett, N. A., Ennaceur, A., Chazot, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+infra-red+therapy+%281072+nm%29+reduces+beta-amyloid+protein+levels+in+the+brain+of+an+Alzheimer%27s+disease+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22TASTPM.+Journal+of+photochemistry+and+photobiology.+B%2C+Biology%22%5BJournal%5D)">Non-invasive infra-red therapy (1072 nm) reduces beta-amyloid protein levels in the brain of an Alzheimer's disease mouse model.</a> TASTPM. Journal of photochemistry and photobiology. B, Biology. 123, 13-22 (2013).</li>
<li>Purushothuman, S., Johnstone, D. M., Nandasena, C., Mitrofanis, J., Stone, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photobiomodulation+with+near+infrared+light+mitigates+Alzheimer%27s+disease-related+pathology+in+cerebral+cortex+-+evidence+from+two+transgenic+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Alzheimer%27s+researc.%2C+%26+therapy%22%5BJournal%5D)">Photobiomodulation with near infrared light mitigates Alzheimer's disease-related pathology in cerebral cortex - evidence from two transgenic mouse models.</a> Alzheimer's researc., & therapy. 6, 2(2014).</li>
<li>Sommer, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((670+nm+laser+light+and+EGCG+complementarily+reduce+amyloid-beta+aggregates+in+human+neuroblastoma+cells%3A+basis+for+treatment+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Photomedicine+and+laser+surgery%22%5BJournal%5D)">670 nm laser light and EGCG complementarily reduce amyloid-beta aggregates in human neuroblastoma cells: basis for treatment of Alzheimer's disease.</a> Photomedicine and laser surgery. 30, 54-60 (2012).</li>
<li>Moro, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photobiomodulation+preserves+behaviour+and+midbrain+dopaminergic+cells+from+MPTP+toxicity%3A+evidence+from+two+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+neuroscience%22%5BJournal%5D)">Photobiomodulation preserves behaviour and midbrain dopaminergic cells from MPTP toxicity: evidence from two mouse strains.</a> BMC neuroscience. 14, 40(2013).</li>
<li>Peoples, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photobiomodulation+enhances+nigral+dopaminergic+cell+survival+in+a+chronic+MPTP+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Parkinsonis.%2C+%26+related%22%5BJournal%5D)">Photobiomodulation enhances nigral dopaminergic cell survival in a chronic MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Parkinsonis., & related. 18, 469-476 (2012).</li>
<li>Shaw, V. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotection+of+midbrain+dopaminergic+cells+in+MPTP-treated+mice+after+near-infrared+light+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+comparative+neurology%22%5BJournal%5D)">Neuroprotection of midbrain dopaminergic cells in MPTP-treated mice after near-infrared light treatment.</a> The Journal of comparative neurology. 518, 25-40 (2010).</li>
<li>Ying, R., Liang, H. L., Whelan, H. T., Eells, J. T., Wong-Riley, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pretreatment+with+near-infrared+light+via+light-emitting+diode+provides+added+benefit+against+rotenone-+and+MPP%2B-induced+neurotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+research%22%5BJournal%5D)">Pretreatment with near-infrared light via light-emitting diode provides added benefit against rotenone- and MPP+-induced neurotoxicity.</a> Brain research. 1243, 167-173 (2008).</li>
<li>Rajguru, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infrared+photostimulation+of+the+crista+ampullaris%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+physiology%22%5BJournal%5D)">Infrared photostimulation of the crista ampullaris.</a> The Journal of physiology. 589, 1283-1294 (2011).</li>
<li>Chung, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nuts+and+bolts+of+low-level+laser+%28light%29+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+biomedical+engineering%22%5BJournal%5D)">The nuts and bolts of low-level laser (light) therapy.</a> Annals of biomedical engineering. 40, 516-533 (2012).</li>
<li>Desmet, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+and+experimental+applications+of+NIR-LED+photobiomodulation%5BTitle%5D)+AND+%22Photomedicine+and+laser+surgery%22%5BJournal%5D)">Clinical and experimental applications of NIR-LED photobiomodulation.</a> Photomedicine and laser surgery. 24, 121-128 (2006).</li>
<li>Huang, Y. Y., Chen, A. C., Carroll, J. D., Hamblin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biphasic+dose+response+in+low+level+light+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Dose-response+%3A+a+publication+of+International+Hormesis+Society%22%5BJournal%5D)">Biphasic dose response in low level light therapy.</a> Dose-response : a publication of International Hormesis Society. 7, 358-383 (2009).</li>
<li>Rojas, J. C., Gonzalez-Lima, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-level+light+therapy+of+the+eye+and+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Eye+and+brain%22%5BJournal%5D)">Low-level light therapy of the eye and brain.</a> Eye and brain. 3, 49-67 (2011).</li>
<li>Vranceanu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Striated+organelle%2C+a+cytoskeletal+structure+positioned+to+modulate+hair-cell+transduction%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Striated organelle, a cytoskeletal structure positioned to modulate hair-cell transduction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109, 4473-4478 (2012).</li>
<li>Johnson, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separate+and+combined+effects+of+Sod1+and+Cdh23+mutations+on+age-related+hearing+loss+and+cochlear+pathology+in+C57BL%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+research%22%5BJournal%5D)">Separate and combined effects of Sod1 and Cdh23 mutations on age-related hearing loss and cochlear pathology in C57BL/6J mice.</a> Hearing research. 268, 85-92 (2010).</li>
<li>Tung, V. W., Di Marco, S., Lim, R., Brichta, A. M., Camp, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+isolated+semi-intact+preparation+of+the+mouse+vestibular+sensory+epithelium+for+electrophysiology+and+high-resolution+two-photon+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">An isolated semi-intact preparation of the mouse vestibular sensory epithelium for electrophysiology and high-resolution two-photon microscopy.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , e50471(2013).</li>
<li>Kirby, J., Menzies, F. M., Cookson, M. R., Bushby, K., Shaw, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+gene+expression+in+a+cell+culture+model+of+SOD1-related+familial+motor+neurone+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Human+molecular+genetics%22%5BJournal%5D)">Differential gene expression in a cell culture model of SOD1-related familial motor neurone disease.</a> Human molecular genetics. 11, 2061-2075 (2002).</li>
<li>Parry, S. N., Ellis, N., Li, Z., Maitz, P., Witting, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myoglobin+induces+oxidative+stress+and+decreases+endocytosis+and+monolayer+permissiveness+in+cultured+kidney+epithelial+cells+without+affecting+viability%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+and+Blood+Pressure+Research%22%5BJournal%5D)">Myoglobin induces oxidative stress and decreases endocytosis and monolayer permissiveness in cultured kidney epithelial cells without affecting viability.</a> Kidney and Blood Pressure Research. 31, 16-28 (2008).</li>
<li>Saee-Rad, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+superoxide+dismutase+1%2C+dual-specificity+phosphatase+1%2C+and+transforming+growth+factor%2C+beta+1+genes+expression+in+keratoconic+and+non-keratoconic+corneas%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+vision%22%5BJournal%5D)">Analysis of superoxide dismutase 1, dual-specificity phosphatase 1, and transforming growth factor, beta 1 genes expression in keratoconic and non-keratoconic corneas.</a> Molecular vision. 19, 2501-2507 (2013).</li>
<li>Albert, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRPV4+channels+mediate+the+infrared+laser-evoked+response+in+sensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neurophysiology%22%5BJournal%5D)">TRPV4 channels mediate the infrared laser-evoked response in sensory neurons.</a> Journal of neurophysiology. 107, 3227-3234 (2012).</li>
<li>Moro, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photobiomodulation+inside+the+brain%3A+a+novel+method+of+applying+near-infrared+light+intracranially+and+its+impact+on+dopaminergic+cell+survival+in+MPTP-treated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neuroscience%22%5BJournal%5D)">Photobiomodulation inside the brain: a novel method of applying near-infrared light intracranially and its impact on dopaminergic cell survival in MPTP-treated mice.</a> Journal of neuroscience. 120, 670-683 (2014).</li>
<li>Moreno, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infrared+neural+stimulation%3A+beam+path+in+the+guinea+pig+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+research%22%5BJournal%5D)">Infrared neural stimulation: beam path in the guinea pig cochlea.</a> Hearing research. 282, 289-302 (2011).</li>
<li>Curthoys, I. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+red+thread+as+a+guide+in+the+vestibular+labyrinth%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+physiology%22%5BJournal%5D)">A red thread as a guide in the vestibular labyrinth.</a> The Journal of physiology. 589, 1241-1241 (2011).</li>
<li>Chakrabarti, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+Dysfunction+during+Brain+Aging%3A+Role+of+Oxidative+Stress+and+Modulation+by+Antioxidant+Supplementation%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+and+disease%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial Dysfunction during Brain Aging: Role of Oxidative Stress and Modulation by Antioxidant Supplementation.</a> Aging and disease. 2, 242-256 (2011).</li>
<li>Petrosillo, G., De Benedictis, V., Ruggiero, F. M., Paradies, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decline+in+cytochrome+c+oxidase+activity+in+rat-brain+mitochondria+with+aging.+Role+of+peroxidized+cardiolipin+and+beneficial+effect+of+melatonin%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+bioenergetics+and+biomembranes%22%5BJournal%5D)">Decline in cytochrome c oxidase activity in rat-brain mitochondria with aging. Role of peroxidized cardiolipin and beneficial effect of melatonin.</a> Journal of bioenergetics and biomembranes. 45, 431-440 (2013).</li>
<li>Zhu, H., Sun, A., Zou, Y., Ge, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducible+metabolic+adaptation+promotes+mesenchymal+stem+cell+therapy+for+ischemia%3A+a+hypoxia-induced+and+glycogen-based+energy+prestorage+strategy%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+thrombosis%2C+and+vascular+biology%22%5BJournal%5D)">Inducible metabolic adaptation promotes mesenchymal stem cell therapy for ischemia: a hypoxia-induced and glycogen-based energy prestorage strategy.</a> Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology. 34, 870-876 (2014).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarını var beyan.

Burada açıklanan temsili sonuçlar NIR ışık kısa transkraniyal dağıtım (5 gün boyunca 90 sn / gün) plasebo ile tedavi edilen fareler ile karşılaştırıldığında, daha yaşlı farelerin antioksidan ifade seviyelerini yükseltmek için yeterli olduğunu göstermektedir. Nir yaydığı ısı bizim ölçüm cihazı &lt;0,2 ° C 90 sn bitmişti LED ve gibi neden düşüktür - yayılan ısı mitokondriyal ve / veya nöronal aktivasyon kaynağı temsil edebilir ederken, sıçan vestibüler için bildirilen 24 afferentler değişiklikler burada tarif. ...

Denge performansını Azalan ve sonraki düşüşler yaygındır ve doğal yaşlanma 1 maalesef sıklıkla tanımlayan özellikler. Bu düşüşün etkisi fiziksel hem de sosyal olmak, ve önemli ölçüde yaşlı insanlar için yaşam kalitesini düşürür yapabilirsiniz. Buna karşılık, fizik tedaviler ve rehabilitasyon düşme içine araştırma odağı olmuştur ama tekrarlanan düşme yaygınlığı tutarlı azalma ile ilişkili değil. Aynı zamanda, iş periferik veya santral vestibüler sistemi (dengesini korumak için sorumlu sistem) kıt olduğu ve bu sistemleri hedefleyen potansiyel tedavi stratejileri değişiklik ve sınırlı dengesizliğin altında yatan nedenleri araştırmak. Yaşla ilgili maküler dejenerasyon, 2-4, Alzheimer hastalığı modelleri 5-8, ve Parkinson hastalığı dahil olmak üzere, 9-12 yaş ile ilişkili nörodejeneratif hastalıkların üzerine yapılan son çalışmalar si nöro-koruyucu etkiler göstermiştiryakın kızılötesi (NIR) ışık mple non-invaziv bir uygulama. Bundan başka, denge sisteminin, NIR in vitro 13 vestibüler birincil aferent nöronların etkinliğini geliştirmek için kullanılmıştır. Nir ışık mekanizması iyi anlaşılamamakla birlikte, Nir kullanarak çalışmaların çoğu Nir hücresel metabolizmayı kolaylaştırmak için mitokondri karmaşık IV (sitokrom-c oksidaz) 14-17 uyardığını ileri sürmüşlerdir. Vestibüler duyu epitel tip I saç hücrelerinin subkutiküler plaka mitokondri 18 yoğun olduğu ve gibi terapötik Nir tedavisi için bir eylem siteyi temsil edebilir. Burada, transcranially kısa bir invazif olmayan bir tedavi rejimi hücresel metabolizmayı ölçmek için kullanılabilir (ve dolaylı mitokondriyal fonksiyonu olarak), fare vestibüler duyusal epitel anlatılan NIR uygulanır. Ayrıca ele alınan vestibüler duyusal epitel bir preparattır ve NIR bir ubiquito ekspresyonunu arttırdığı gösterilmiştirBize Anti-oksidanın, duyusal epitel (süperoksit dismutaz 1) - daha önce koklea saç hücre hayatta kalma 19 için önemli olduğu gösterilmiştir.

<table><tbody><tr><td>Quantum WARP 10</td><td>Quantum Cihazları</td><td>2070N030-A</td><td></td></tr><tr><td>Vidalı mikrotübüller</td><td>Kalite Bilimsel Plastikler</td><td>520-GRD-Q</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Parnell, İskenderiye Avustralya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Standart desen makas</td><td>FST</td><td>14001-12</td><td></td></tr><tr><td>Karbon çeliği cerrahi bıçaklar # 22</td><td>Livingstone</td><td>SBLDCL 22</td><td></td></tr><tr><td>Friedman-Pearson rongeurs</td><td>FST</td><td>16221-14</td><td></td></tr><tr><td>Stereo mikroskop</td><td>Leica Microsystems</td><td>A60S</td><td></td></tr><tr><td>Dumont # 5 SF forseps</td><td>FST</td><td>11252-00</td><td></td></tr><tr><td>İzole II RNA Mikro Kiti</td><td>Bioline</td><td>BIO-52075</td><td></td></tr></tbody></table>

yakın kızılötesi (nir) işık fare vestibüler duyu epitelinin mitokondriyal fonksiyonun bir marker anlatım artırır

Near Infrared (NIr) Light Increases Expression of a Marker of Mitochondrial Function in the Mouse Vestibular Sensory Epithelium

Artan yaş ile denge fonksiyonu düşüş zayıflatmaya yönelik stratejiler denge görevleri ve egzersiz gibi fiziksel tedaviler ağırlıklı odaklanmış bulunmaktadır. Ancak, bu yaklaşım denge düşüş yatan nedenleri ele yoktur. Fareler kullanarak, vestibüler duyu epitel hücrelerin metabolizması üzerine yakın kızılötesi ışığın etkisi (NUR) değerlendirildi. Toplanan veriler bu basit ve güvenli bir müdahale doğal yaşlanma zararlı etkilerinden bu hassas hücreleri koruyan olabileceğini göstermektedir. mRNA izole vestibüler duyusal epiteli (krista ampullaris ve utricular makula) elde edilir ve daha sonra, bir cDNA kitaplığında transkribe edilmiştir. Bu kütüphane, daha sonra her yerde antioksidan (SOD-1) ifadesi için problanmıştır. Antioksidan gen ifadesi hücre metabolizmasını ölçmek için kullanıldı. Genç Nir ve transkranial teslim (4 hafta) ve üzeri kullanma - 5 d (8 9 ay) fareler ve kısa bir tedavi rejimi (90 sn / günays), bu çalışma vestibüler duyusal epitel mitokondriyal fonksiyonu geliştirmek için yeterli olabilir ve yalnız NIR göstermektedir. Vestibüler saç hücre fonksiyonunu artırmak için tedavinin hiçbir mevcut, uygun fiyatlı, non-invaziv yöntemler şu anda olduğundan, dış NIR radyasyon uygulaması vestibüler duyu epiteli inthe hücresel metabolizma üzerinde yaşlanma etkilerini ortadan kaldırmak için potansiyel bir strateji sağlar.

Genç NIR tedavi etkisini (4 hafta) ve daha büyük karşılaştırılması - fareler (8 9 ay) (n = 20) (n = 16), genç antioksidan süperoksit dismutaz 1 (SOD-1) ifadesini ölçülür ve eski plasebo ile tedavi edilmiş, NIR-muamele ya da NIR-bloke fareler. Şekil 2, genç plasebo ile tedavi edilen hayvanlara kıyasla NIR tedavi genç hayvanlarda en fazla 2 misli β-aktin normalize SOD-1 ekspresyonunda önemli bir artış olduğunu göstermektedir (p &lt;0.01) ve genç Nir-bloke hayvanlar (p &lt;0.01). Eski NIR ile tedavi edilen...

Mitokondriyal disfonksiyon hücresel yaşlanma bir özelliğidir. Bu kağıt yaşlanma fare vestibüler duyu epitel mitokondriyal fonksiyon geliştirmek için non-invaziv yakın kızılötesi (NIR) tedavi kullanır.

Yakın Kızılötesi (NIR) Işık Fare Vestibüler Duyu Epitelinin Mitokondriyal Fonksiyonun bir Marker Anlatım artırır

Strategies for attenuating decline in balance function with increasing age are predominantly focused on physical therapies including balance tasks and ...

Aşağıdaki deneyin genel amacı, yakın kızılötesi ışığın fare vestibüler duyusal epiteli üzerindeki potansiyel nöroprotektif etkisini incelemektir. Bu, çeşitli gelişim aşamalarındaki farelere yakın kızılötesi ışığın basit ve kısa süreli transkraniyal uygulamasıyla gerçekleştirilir. İkinci adım olarak, tedavi edilen hayvanların kemik labirentleri diseke edilerek vestibüler duyusal epitelin izole edilmesi sağlanır.Ardından, tedavinin mitokondriyal performans üzerindeki etkisini değerlendirmek için ilgili antioksidan genin ekspresyonu R-T-P-C-R ile ölçülür. Son olarak, kısa süreli yakın kızılötesi ışık tedavisinin farelerdeki spesifik antioksidan genlerin ekspresyonu üzerindeki etkisini değerlendirmek için densitometri yapılır. Bu yakın kızılötesi tedavi tekniğinin temel avantajı, basit ve non-invaziv olmasıdır; bu da tedavi sonrası ileri düzey fizyolojik, moleküler ve davranışsal analizlere olanak tanır.Bu tekniğin sonuçları, normal yaşlanma sırasında periferik vestibüler sistemin potansiyel nöroproteksiyonuna veya vestibüler hastalık veya eksiklik sonrası denge performansının iyileştirilmesine kadar uzanmaktadır. Tedavi rejimi tamamlanmadan önce hayvanın tüylerinin yeniden çıkmasını önlemek için, deneye başlamadan iki ila üç gün önce her bir farenin baş ve boyun bölgelerindeki tüyleri mümkün olduğunca kısa kesin. Hayvanların patojen içermeyen durumunu korumak için, her tıraş işlemi arasında aletleri %70 ethanol ile temizleyin.Ardından, tedavi günü her bir hayvan denek için, yakın kızılötesi ile tedavi edilen hayvanların stresini minimize etmek amacıyla fareyi kuyruğunun proksimal ucundan tutun ve bir elin avucunda rahatlamasını sağlayın. Her hayvan için, 670 nanometrelik bir LED cihazını tıraşlanmış bölgeden bir ila iki santimetre uzaklıkta tutun ve cihazı 90 saniye boyunca çalıştırın. Sham grubu için, tedavi prosedürünü aynı şekilde ancak cihaz kapalıyken tekrarlayın; yakın kızılötesinin engellendiği grup için hayvanları yakın kızılötesi ile tedavi edilen grupla aynı şekilde ancak cihaz alüminyum folyo ile kaplıyken tedavi edin.Her grup için tedaviler beş ardışık gün boyunca 24 saatlik aralıklarla tekrarlandıktan sonra, taze olarak hazırlanan gliserol bazlı yapay beyin omurilik sıvısını (A CSF), bir buz lapası oluşana kadar -80 °C dondurucuda 45 dakika boyunca dondurun. Ardından, her fare için, kafatasının sagital derisi boyunca bir insizyon yapmak için yuvarlatılmış 22 numara bir jilet kullanın; bu sırada doku üzerine düzenli olarak buz gibi A CSF uygulayarak kranial kubbeyi, beyni ve altta kalan vestibüler aparatı mümkün olduğunca soğuk tutun. Daha sonra, standart model bir makasın sivri ucunu kullanarak Lambda bölgesinde kafatasına küçük bir insizyon yapın ve sagital sütür boyunca kesin.Ardından, sığ bir URS kolunu nazikçe pariyetal kemiğin altına kaydırın ve beyin açığa çıkana kadar pariyetal kemiği lateral olarak, oksipital kemiği ise posterior olarak sabitleyip çekin. Daha sonra, beyni anterior ve orta kranial fossadan kaldırmak için küçük bir paslanmaz çelik spatula kullanın. Vestibüler koklear siniri açığa çıkarmak için, vestibüler tüy hücrelerini doğrudan innerve eden primer aferent aksonlar üzerindeki gereksiz gerilimi önlemek amacıyla siniri transekt edin.Ardından beyni bütün halde çıkarın ve orta kranial fossada koklea ile periferik vestibüler organları içeren kemik labirenti gözlemleyin. Şimdi, her bir kemik labirentin yanına iki küçük insizyon yapın; tüm yapıyı çıkarmak için anterior semisirküler kanalı yan tarafa doğru tutup çekin. Ardından, çıkarılan labirenti, karbogen ile sürekli perfüzyon uygulanırken, buz gibi soğuk A CSF çözeltisi içeren bir diseksiyon kabına derhal daldırın.Bu prosedürün en zor kısmı, her hayvan için tutarlı miktarlarda canlı doku elde etmektir; dokunun dikkatle gözlemlenmesini ve özel bir şekilde aydınlatılmasını öneririz. Ardından, bir stereo mikroskop altında, labirenti kokleadan tutarak sabitleyin ve düz ince pensler kullanarak dokuyu kabın tabanına yerleştirin. Anterior semisirküler kanal kula üzerindeki kemikte küçük bir açıklık oluşturun.Ardından kemiğin hemen altına ulaşın ve ULA'dan dışarıya doğru hafifçe iterek açıklığı nazikçe genişletin. Utrikül ile anterior ve lateral pulalar tamamen açığa çıkana kadar bu şekilde devam edin. Sonra, utrikül ve pulaları tamamen ayrılana kadar kemik labirentten nazikçe kaldırmak için ince pensler kullanın.Son olarak, vestibüler organları pensetin ucuyla güvenli bir şekilde kavrayın ve vidalı kapaklı bir mikrotüpte taze hazırlanmış liziz tamponuna yerleştirin; vestibüler organları ayırmak için penseti tampon içerisinde nazikçe çevirin. Ardından, stereo mikroskop altında pensette doku kalmadığını doğruladıktan sonra mikrotüp kapağını kapatın ve genç ve yaşlı fareler arasındaki yakın kızılötesi işleminin etkisini karşılaştırmak için örneği hemen sıvı azot içerisinde dondurun.Messenger RNA, komplemanter DNA'ya ters transkribe edilmiş, ardından antioksidan süperoksit dismutaz bir veya SOD bir ekspresyonu densitometre ile ölçülerek analiz edilmiştir; genç, yakın kızılötesi uygulanmış hayvanlarda, genç sham uygulanan hayvanlara ve genç yakın kızılötesi engellenmiş hayvanlara kıyasla, beta aktin ile normalize edilmiş sod bir ekspresyonunda iki kattan fazla anlamlı bir artış gözlemlenmiştir. Yaşlı yakın kızılötesi uygulanmış hayvanlar da, yaşlı yakın kızılötesi engellenmiş hayvanlarla karşılaştırıldığında sod bir'de iki katın üzerinde bir yukarı regülasyon göstermiştir. Bu prosedürün ardından; yakın kızılötesi ışık, vestibüler duyusal epitelde diğer gen veya protein ekspresyonunu artırır mı gibi ek soruları yanıtlamak için davranışsal, moleküler veya fizyolojik deneyler gerçekleştirilebilir.Yoksa yakın kızılötesi ışık, tedavi edilen farelerin genel denge performansını iyileştiriyor mu?

near-infrared-nir-light-increases-expression-marker-mitochondrial

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Parkinson hastalığı yol açan genlerde mutasyon taşıyan hastaların Fibroblastlar kolay erişilebilir bir...

Parkinson Hastalığı Alanında Mitokondriyal Fenotiplerinin İzleme İlköğretim İnsan Fibroblast Kullanımı

Kaynak: Zhang, L., et al. Yakın kızılötesi (NIr) ışık, fare vestibüler duyusal epitelinde mitokondriyal fonksiyonun bir belirtecinin ekspresyonunu arttırır. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, vestibüler nöronları aktive etmek ve nöronal fonksiyonu destekleyen süperoksit dismutaz-1 (SOD-1) üretimini uyarmak için traş edilmiş bir fare kafa derisine NIr ışığı uygulama sürecini göstermektedir. Prosedür, nöroprotektif bir strateji olarak NIr tedavisini vurgulamaktadır.

Yakın Kızılötesi Işık Kullanarak Bir Fare Modelinde Duyusal Nöronal Sinyalleşmeyi Modüle Etme

Bu video naif fare görsel projeksiyon kontrastlı MR görüntüleme ve akut optik sinir ezilme yaralanma ve kronik optik sinir dejenerasyonu ile ilişkili optik sinir dejenerasyonu tekrarlayan ve uzunlamasına in vivo çalışmalar için, bir klinik 3 T tarayıcı kullanarak, bir yöntemi göstermektedir knock-out fareler (p50 KO).

Farelerde kontrastlı MR ile optik sinir lifi Dürüstlük İn vivo

Tutarlı olmayan Xenon ışığı, kültürlenmiş hücrelere değişen dalga boyu ve yoğunlukta ışık iletmek için dar bant girişim ve nötr yoğunluk filtrelerinden geçirildi. Bu protokol, kırmızı / yakın kızılötesi ışık terapisinin in vitro olarak reaktif türlerin üretimi üzerindeki etkilerini değerlendirmek için kullanıldı: test edilen parametreler kullanılarak herhangi bir etki gözlenmedi.

Dalga boyundaki ve Oksidatif Stres Kırmızı / yakın-kızılötesi ışık Terapisi şiddetler bir Range Etkilerinin Değerlendirilmesi için Yöntemi İn Vitro

Photobiomodulation tedavi geniş bir nörolojik ve psikiyatrik hastalıkların tedavisi için yenilikçi bir noninvaziv modalite ve aynı zamanda sağlıklı beyin fonksiyonlarını artırabilir. Bu iletişim kuralı tarafından diğer laboratuvar Rodents kullanmak için adapte edilebilir Transkraniyal ışık teslim farelerde beyin photobiomodulation gerçekleştirmek için adım adım yönergeler içerir.

Farelerde Transkraniyal Photobiomodulation tedavisi için bir iletişim kuralı

Burada, İmmünohistokimya ve yüksek çözünürlüklü beyin bölgelerinin proteinleri için tarama ile birlikte yakın kızılötesi boyalar kullanan bir protokol sunuyoruz.

Kemirgen beyninde protein Ifadesini ölçmek için yakın kızılötesi floresan ve yüksek çözünürlüklü tarama kullanma

Mevcut protokol, bir NIR-II optik görüntüleme cihazı kullanan bir farenin ayrıntılı, gerçek zamanlı NIR-II floresan görüntüleme işlemini tanımlamaktadır.

Vasküler ve Tümör Görüntüleme için Parlak Bir NIR-II Floresan Probu

Burada Near Infrared Spektroskopisi (fNIRS), bilişsel sinirbilim kullanılan non-invaziv bir roman beyin görüntüleme sistemi, özellikle çocuğun beyin gelişimi eğitim işlevsel bir veri toplama ve analiz yöntemi açıklar. Bu yöntem, veri toplama ve verilerin yorumlanması ve bilimsel keşif için hayati analiz evrensel bir standart sağlar.

Yakın Kızılötesi Spektroskopisi ile bebekler, Çocuk ve Yetişkin Bilişsel Fonksiyonları keşfetmek

Bu prosedür, Gen Verici MXcell elektroporasyon sistemi hızlı ve kolay bir fare embriyonik fibroblastlar (MEFS) veya diğer birincil hücreler için en iyi elektroporasyon koşulları belirlemek için nasıl kullanılacağını gösterir. Sorun giderme için dikkat edilmesi gereken noktalar da ilgili video tartışılmıştır.

Yüksek Verimli Primer Hücre Transfect Gen Verici MXcell Elektroporasyon Sistemi

Hi-C yöntemi kromatin etkileşimler (1) tarafsız, genom kimlik sağlar. Hi-C çiftler yakınlık ligasyonu ve güçlü paralel sıralama. Ortaya çıkan veriler farklı ölçeklerde genomik mimarlık eğitimi için kullanılabilir: ilk sonuçlar, kromozom toprakları, segregasyon, açık ve kapalı kromatin ve megabase ölçekte kromatin yapısı gibi özellikleri tespit.

Hi-C: genomların Üç boyutlu Mimari Eğitim Bir Yöntem.

Keşfedin yakın kızılötesi ışık uygulamasının yaşlanan farelerdeki vestibüler duyu epitelinde mitokondriyal fonksiyonu ve antioksidan gen ekspresyonunu nasıl artırdığını. Bu basit, invaziv olmayan yöntem nöroprotektif tedavi potansiyeli sunar.

Yakın Kızılötesi (NIR) Işık Fare Vestibüler Duyu Epitelinin Mitokondriyal Fonksiyonun bir Marker Anlatım artırır

Daha fazla video keşfet