İnsan Videofloroskopik Kırlangıç ​​Eğitim Yöntemleri uyarlanması Algılama ve Mürin Hastalık Modelleri disfajiyi Characterize

Bu prosedürün genel amacı, önce video floroskopik yutma çalışması veya VFSS olarak adlandırılan, serbestçe davranan kemirgenlerde yutma fonksiyonunu incelemektir. Test sırasında kemirgenleri küçük bir alanda hapsetmek için bir besleme odası inşa edilir. İkinci adım, maksimum katılımı sağlamak için bir test çözeltisi ile davranışsal koşullandırma yapmaktır.

Bir sonraki adım, önceden koşullandırılmış farelerle VFSS testi yapmaktır. Son olarak, yutma parametrelerini ölçmek için videolar kare kare analize tabi tutulur. Sonuç olarak, bu yeni değerlendirme aracı, aynalama hastalık modellerinde disfajiyi tespit etmek ve karakterize etmek ve klinik öncesi çalışmalarda kullanılmak üzere fonksiyonel biyobelirteçler sağlamak için kullanılabilir.

İlk olarak gözlem odalarını kullanma fikrimiz vardı çünkü insanların VFSS testi gönüllü ve sınırsızdır ve insan klinik prosedürünü yakından taklit etmek istedik. Bu tekniğin benzer mevcut yöntemlere göre ana avantajı, yutmanın tüm aşamalarının hızlı bir şekilde test edilmesine izin vermek için kemirgenlerde istemli beslenme davranışlarını hızlı bir şekilde ortaya çıkarmasıdır. Genel olarak, bu yönteme yeni olan kişiler, yutma ve farelerin küçük ve hızlı hareketlerini ayırt etmek zor olduğu için video analizi ile mücadele edeceklerdir.

Daha sonra gözlem odalarını monte ederek başlayın, test sırasında peg kaselerine çözelti sağlamak için bir şırınga dağıtım sistemi monte edin. Monte edildikten sonra, uzaktan konumlandırma için gözlem odasını motorlu bir makaslı platform üzerine yerleştirin. Uzaktan kumandalı makaslı kaldırma masasının ana avantajı, floroskopi görüş alanında serbestçe davranan kemirgenleri korurken araştırmacılar için geliştirilmiş radyasyon güvenliğidir.

Fareleri gözlem odasına alıştırarak ve gece boyunca su düzenleme periyoduna tabi tutarak hazırlayın. Test için hazır olduğunuzda, hazneyi kafesten çıkarın ve iyice temizleyin. Temizlenen her tüpü ev kafesine geri yerleştirmeden önce etiketlemek için bir kuru silme kalemi kullanın.

Ardından, floroskopi ortamını ayarlamak için çikolata aromalı iohexol solüsyonunu hazırlayın. Yanal düzlemde içmenin görselleştirilmesine izin veren floroskop ışını içindeki en uygun yüksekliği ve konumu belirlemek için yedek bir gözlem odası ve mandal kabı kullanın. Floroskopi kare hızını saniyede 30 kareye ayarlayın.

Varsa daha yüksek kare hızları kullanılabilir. Tüm test boyunca ekran monitöründe görünür olması için floroskop kamerasına bir radyoopak kalibrasyon işaretleyicisinin uygun şekilde yerleştirildiğinden emin olun. Bu adım, kullanımdan kaynaklanan stresi azaltmak için uzunluk ölçümlerinin kalibrasyonuna izin vermek için gereklidir.

Bir fare gözlem odasına serbestçe girene kadar kafesi gözlemleyin. İçeri girdikten sonra, hazneyi kafesten kaldırın ve ikinci uç kapağı yavaşça takın. Tekrarlanan testlerle, fareler, kafesin içine önlerine yerleştirildiğinde veya hazne açıklığı üzerinde kuyruk tarafından asılı kaldığında hazneye girmeleri için kolayca ikna edilebilir.

Yanal düzlemde VFSS testine başlamak için gözlem odasını floroskopi makinesinin içine yerleştirin. Ardından, peg kasesini çikolata aromalı iohexol çözeltisi ile doldurmak için bir şırınga dağıtım sistemi kullanın. Video floroskopi kaydını başlatın.

Fare test sırasında içmeye başladığında, gözlem odasının konumunu, yutma mekanizması görüş alanında görünecek şekilde ayarlamak için uzaktan kumandalı kaldırma masasını kullanın. Radyasyona maruz kalma süresini en aza indirmek için fare mandal kasesinden her döndüğünde kaydı duraklatın. Fare mandal kasesine döndüğünde kayda devam edin, mandal kasesini gerektiği gibi yeniden doldurun.

Amaç, çoğu fare için tipik olan birkaç uzun sürekli içme nöbeti kaydetmektir. Testin ilk iki dakikası içinde, fare beş dakika içinde içmezse testi durdurun, uyumlu olmayan fareleri aynı gün daha sonra tekrar test etmek için ev kafesine geri koyun. 24 saatlik su düzenlemesini aşmayın.

Aynı ev kafesinden birden fazla fareyi test ederken. Peg kasesini ve hortumu fareler arasında kuru bir kağıt havluyla temizleyin. PE borunun ucunu gerektiği gibi kesin.

Test sırasında çiğnenirse, oda duvarlarına sıçrayan iohexol'ü çıkarmak için gözlem odasını gerektiği gibi temizleyin. Hazneyi musluk suyuyla durulayın ve bir kağıt havluyla kurulayın. Video floroskopi kayıtlarının kare kare analizine izin veren bir video düzenleme yazılımı programı kullanın.

İlgilenilen yutma parametrelerini ölçmek için, en az iki eğitimli incelemeci her videoyu kör bir şekilde analiz etmelidir. Birincil incelemeci, üç ila beş uzun içki içme nöbetini tanımlamak ve analiz etmek için her videoyu izler. Bu kriter, bu parametrenin istatistiksel analiz için yeterli olduğunu gösteren yayınlanmış radyografik olmayan yutma çalışmalarına dayanmaktadır.

İkincil gözden geçiren daha sonra, başlangıçta birincil gözden geçiren tarafından tanımlanan ve analiz edilen her fare için yutma parametresi başına üç ila beş ölçümü bağımsız olarak analiz eder. İnceleme tutarsızlıkları daha sonra her fare için belirlenir ve %100 fikir birliğine ulaşılana kadar yeniden analiz edilir. Her yutma parametresi için tartışmasız değerlerin ortalaması alınır ve daha sonra her fare için ortalama değer elde edilir.

Bir yutma parametresi için üçten az ölçü elde edildiğinde, bu ölçü için istatistiksel veritabanına eksik bir değer girin. Bu örnekler düşük enerjili floroskopi sistemi pozisyonu kullanılarak elde edildi. Biri tüm başın ve proksimal torasik bölgenin görüntülenmesine izin verir.

Yutma tetikleme noktası, görüş alanı içinde ortalanmıştır. İkinci konum, yutma tetik noktasından gastroözofageal bileşkeye kadar görselleştirmeye izin verir. En düşük büyütme ayarında bile distal yemek borusundan geçen bolusa dikkat edin.

Baş ve boynun kemik yapıları, düşük enerjili floroskopi sistemi kullanılarak kolayca görülebilir. Anatomik yapılar ayrıca, birkaç ek yutma parametresinin nicelleştirilmesine izin vermek için daha yüksek büyütmede incelenir. Bu şekil, iki VFSS yutma parametresi, yutma hızı ve yutmalar arası yutma hızı için temsili ön bulguları göstermektedir. yutma hızı, SOD bir fareler için yaşlı C 57'ye kıyasla önemli ölçüde daha yavaştı.

Fareler ve kontroller arası yutma aralığı gruplar arasında anlamlı olarak farklı değildi. Ana kopya oluşturulduktan sonra, video çekimi, düzgün bir şekilde gerçekleştirilirse kütle başına iki dakikadan biraz daha kısa bir sürede tamamlanabilir. Bu prosedürü denerken, kaçınma davranışlarına yol açabilecek viskozite ve lezzet değişikliklerini önlemek için çikolata aromalı test solüsyonunu hazırlandıktan sonraki birkaç saat içinde kullanmayı unutmamak önemlidir.

Bu yeni teknik, sinirbilim alanındaki araştırmacıların sağlıklı kemirgenlerde ve hastalık modellerinde doğal beslenme ve yutma davranışlarını keşfetmelerinin yolunu açıyor. Bu videoyu izledikten sonra, serbestçe davranan kemirgenlerin VFSS testinin nasıl başarılı bir şekilde gerçekleştirileceğini iyi anlamış olmalısınız Tipik beslenme davranışlarını ve yutma işlevini ölçmek için, Radyasyon yayan ekipmanla çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve bu prosedürü gerçekleştirirken zaman, mesafe ve koruma için radyasyon önlemlerine her zaman uyulması gerektiğini unutmayın.