Name: Sıçan Heterotopik Abdominal Kalp / Bir Ses yüklenen Yapılandırması Tek akciğer transplantasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-29T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 16 s
Description: Öğrenin sıçanlarda heterotopik abdominal kalp-akciğer transplantasyonu tekniğini; dinamik hacim yüklemesi ve gerçek zamanlı greft fonksiyon değerlendirmesi sağlar. Bu yöntem transplantasyon biyolojisi ve kardiyovasküler fizyoloji araştırmaları için değerlidir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Mark J. Kearns (Doktorlar ve Kanada Royal College of Surgeons aracılığıyla verilen) UBC Klinisyen Araştırmacı Programı ve UBC 4YF Doktora Bursu destek alır. John H. Boyd Sağlığı Araştırma Scholar için Ulusal Sanatoryum Derneği ve Michael Smith Vakfı. CIHR aracılığıyla Fon. Yazarlar kurulum ve perfüzyon ekipmanın bakım ile yardım için Dr. M. Allard ve Richard Wamboldt teşekkür etmek istiyorum.

Tüm hayvanların barındırıldığı ve Ulusal ve bakım ve laboratuar hayvanlarının kullanımı için kurumsal kurallar ile uyumlu bakım için. Bu protokol Etik onay British Columbia Hayvan Bakım Komitesi Üniversitesi tarafından verildi. 300 arasındaki ağırlığındaki erkek Sprague-Dawley sıçanları - 450 g bu protokol için kullanılmıştır. 1. Donör Operasyonu <ol><li> 3-yollu uzun intravenöz (IV), kateter tüp bağlanan bir silindirik bir şişeye kardiyopleji (RT), yaklaşık olarak 100 ml yazıldı. Yerçekimi tarafından kardiyopleji teslim edilmesini sağlayarak, yaklaşık 80cm operatif yüzeye yukarıda şişeyi yükseltmesine bir stand kullanın. </li><li> Yeterince yapılarını görselleştirmek için, cerrahi loupes bir çift veya bir diseksiyon mikroskobu birini kullanın. NOT: Şu anda 3.4 ile binoküler mikroskop çalışma kullanın - 21.3X büyütme. </li><li> Bir anestezik odasında donör koyun ve 4 ile anestezi neden -% 5 izofluran. </li&gt; <li> Bir işletim platformuna sıçan aktarın ve 1 ile burun konisi ile anestezi korumak -% 2 izofluran. Kuruluğunu önlemek için hayvanın gözlerine veteriner merhem sürün. 25 G iğne ile midazolam (2 mg / kg) intraperitoneal olarak yönetmek. </li><li> Cerrahi makası kullanarak, alt çeneye xiphisternum gelen donör tıraş. (Sonradan IV erişimi için), sol kasık küçük bir bölgesini tıraş. Operatif yüzeylere bir Tüyleri ajanı uygulayın, yaklaşık 5 dakika bekleyin ve gazlı bez parçası ile saç kaldırmak. </li><li> Bir povidon-iyot veya chlorexidine tabanlı bir çözüm olan cerrahi siteleri (biz sadece chlorhexidine kullanın) hazırla. % 0.5 lidokain subkutan - 0.1 ile insizyonel siteleri sızmak. </li><li> Anestezi derinliği ve vital bulguların izlenmesi için ücretsiz sağ hindlimb bırakarak, yapışkan bant ile çalışma platformu ön ayakları ve sol hindlimb sabitleyin. </li><li> Pedal tutam uygun anestezi derinliği olduktan sonra kullanarak, sol kasık kırışık bir kesi yapmak22-bıçak neşter. Künt diseksiyon ile, sol ana femoral ven ortaya çıkarmak ve şöyle IV erişim elde: <ol><li> Yavaşça femoral ven örten doku geri ve 24 G IV damar cannulate. Tuzlu dolu IV boru kısa bir uzunluğa IV bağlayın ve yapışkan bant ile yerine tüp sabitleyin. NOT: sıçanlarda femoral venöz kanülasyon için prosedür Jespersen ve arkadaşları 14 tarafından başka açıklanmıştır. </li><li> IV doğru konumlandırma sağlamak için kan aspire hafifçe IV boru bir tuzlu dolu 10 ml şırınga bağlayın ve. </li><li> IV tüp aracılığıyla fraksiyone olmayan heparine 500 IU, ve daha sonra 3 ile tüp yıkayın - - 300 enjekte serum fizyolojik 5 ml. </li></ol></li><li> Bunun ardından, verici tracheotomize: <ol><li> 22-bıçaklı neşter kullanılarak juguler çentik ve mandibulanın arasındaki yumuşak dokularda bir orta hat kesi olun. Metzen kullanarak orta hatta tiroid bezinin kapsülü NüfuzKünt diseksiyon kullanarak baum makas, ve ayrı onun loblar. </li><li> Künt diseksiyon kullanarak, trakea ön yüzeyini açığa orta hatta boyun askısı kasları ayırın. </li><li> Açık açık trakea etrafında bir çember uçağı incelemek için kavisli bir forseps kullanın. 4-0 ipek kravat ile trakea kuşatmak. </li><li> Iris makas kullanarak, tiroid kıkırdak yaklaşık 5mm aşağı, ön trakea içinde enine bir kesi yapmak. Yavaşça trakeal kanül (14 G IV) tanıtmak ve 4-0 ipek kravat kullanarak yerine sabitleyin. </li><li> Mekanik ventilatöre trakeal kanül bağlayın. Ventilatör devresi aracılığıyla oksijen ve izofluran akışını Redirect ve hızı ve ağırlığı 13 tarafından tahmin tidal hacimde donör havalandırın. </li></ol></li><li> Xipisternum altına juguler çentik at kesi uzanan, (22 bıçaklı neşter kullanılarak) göğüs orta hatta bir kesi yapmak. </li><li> Orta hatta kalıyorumBir kemik kesici kullanılarak medyan sternotomi gerçekleştirin. Kendinden istinat retraktörün ile sternum kenarlarını geri çekin. Perikard ve plevra boşlukları girin. </li><li> Bir timektomi gerçekleştirin. İlk açık açık orta hatta timus bölmek ve sonra künt ve keskin diseksiyon bir arada kullanarak çevre yapılardan ayırmak için en kolay yoldur. NOT: timüs uzakta üstün sternum kenarlardan diseksiyon sırasında internal torasik arterlerin kökeni yaralı olabilir. Kanamayı önlemek için, hemostatik klipler bu noktalarda timus çıkarmadan önce tatbik edilebilir. </li><li> Metzenbaum makas kullanarak ve / veya keskin Lauer, inferior vena kava (IVC) uzak yağ peri-kaval teşrih. IVC altta diyaframa, superior cavo-atriyal kavşağına yağ ve bağ dokusu görece özgür olduğundan emin olun. </li><li> Keskin Lauer, çevresel ücretsiz superior vena kava (SVK) kullanma ve 4-0 ipek kravat ile kuşatmak. </li><li> Sonraki, teşrihçevredeki yapılardan ücretsiz vena kava sol ve proksimal ve distalde 4-0 ipek kravatlar ile bağlanır. Sol subklavian arteri ortaya çıkarmak için cava müdahale kısmını rezeke. </li><li> Çevresel ücretsiz keskin Lauer kullanarak arkus aorta gemiler. Innominate artere yakın ve uzak cerrahi klipleri uygulayın ve kliplerin arasına bölün. Sol karotis arter ve sol subklavyen arter un-kırpılmış bırakın. </li><li> Sonra, 24 G IV kateter ile SVC cannulate. Önceden yerleştirilen 4-0 ipek kravat ile kateter sabitleyin. </li><li> Bir çare, ama nazik greft hasat için hazırlanın. </li><li> Keskin bir makas kullanarak, diyafragma yüzeyine IVC sadece üstün bölün. Yakındaki havayolu yapıları yaralı olmadığını sağlanması, onun kanülasyon sitesine SVC üstün bölün. </li><li> Vantilatör kapatın ve trakeal kanül ayırın. Proksimale trakea transect. </li><li> Forseps ile kesilen trakea tutun ve kalp kaldırmakve akciğerler en blok. Kalp-akciğer greft kaldırılır gibi bu keskin diseksiyon ile nazik çekiş gerektirecektir. Altta yatan özofagus trakea ayırın. Bunun büyük bir kısmı hasattan sonra bozulmadan kalır, böylece inen aort yaralanmasına kaçının. </li></ol> Kalp-akciğer Greftinin 2. Hazırlık NOT: Prosedürün bu bölümünü tamamlarken, bir asistan alıcı kemirgen anestezi ve greft implantasyonu için hazırlık olmalıdır. <ol><li> Aşağı bakacak şekilde kalbin ön yüzeyi ile cerrahi gazlı bez üzerine kalp-akciğer greft yerleştirin. Keskin diseksiyon kullanarak, arka hava yollarına yaralanmasına kaçınarak, herhangi bir kalıntı özofagus çıkarın. </li><li> Inen aorta bulun ve bir 16 G künt uçlu kanül yerleştirin. 4-0 ipek kravat ile yerine kanül sabitleyin. </li><li> Aortik ark damarları bulun ve sol subklavian arter cerrahi klip uygulayın. Un-kırpılmış sol karotis arter bırakın alt içinizleyen de-havalandırma. </li><li> 16 G aort kanül Kardiyoplejisi boru bağlayarak kardiyoplejisinin ilk dozunu. Karotis arter geçici kardiyoplejisinin yeterli teslim edilmesini sağlamak için forseps ile tıkanmıştır gerekir. Not: bağlı aortik kanül sahip bir yararı arzu edildiği gibi kardiyopleji, sürekli ve / veya kesintili olarak tatbik edilebilir olmasıdır. 45 sn - 30 5 ml bolus 15 dk - aralıklı doz için, genellikle kardiyoplejisinin her 10 teslim. </li><li> Metzenbaum makas kullanarak ve / veya keskin Lauer, uzak aortadan peri-aort yağ teşrih. Aort kendi kanulasyon sola subklavian arter (distal kemer) den yağ ve bağ dokusu görece özgür olduğundan emin olun. </li><li> Sonra, keskin bir Lauer kullanarak sol ana bronş maruz ve 4-0 ipek kravat proksimale Arter. Iris makası kullanarak dikilen sola bronş distalinden transect. Sol pulmoner bağlanarak bir sol pnömonektomi gerçekleştirin4-0 ipek kravatlar ile arter ve ven. Ligature distalinde transect ve sol akciğeri çıkarın. </li><li> Yukarıdaki gibi, sağ üst ve orta lob hariç diğer tüm akciğer lobları kaldırın. Hastaya lobektomi gerçekleştirilmesi sürecinde IVC yaralanmasına kaçının. </li><li> Aort kanül Kardiyoplejisi boru bağlayın ve alıcı hazırlanan edilirken sürekli kardiyoplejisine yönetmek. Steril bir kaba (örneğin, bir bardak) kalp-akciğer greft yerleştirin. </li></ol> 3. Alıcı Operasyonu <ol><li> Yukarıda, donör operasyonu başına alıcı anestezisi. Kuruluk gelen hayvanın gözleri korumak için veteriner merhem kullanın. Pedal tutam tarafından sıkça anestezi onaylayın. </li><li> Vital bulguları ve anestezi derinliği izlemek için ücretsiz sağ ön ayakları bırakarak, donör operasyonu başına bu kez hayvan yerleştirin. </li><li> Xiphisternum gelen penise karın Tıraş. (Sonradan IV erişimi için), sol kasık küçük bir bölgesini tıraş. Uygula biroperatif yüzeylere ajan tüylerini giderildikten, yaklaşık 5 dakika bekleyin ve gazlı bez parçası ile saç kaldırmak. </li><li> Bir povidon-iyot veya chlorexidine tabanlı bir çözüm olan cerrahi siteleri hazırlayın. % 0.5 lidokain subkutan - 0.1 ile insizyonel siteleri sızmak. </li><li> Tracheotomize ve yukarıda belirtildiği şekilde alıcı havalandırın. Alternatif olarak, burun konisi anestezi altında alıcı korumak. </li><li> Yukarıda tarif edildiği gibi femoral damara bir kateter tanıtılması. IV tüp aracılığıyla fraksiyone olmayan heparine 500 IU, ve daha sonra 3 ile tüp yıkayın - - 300 enjekte serum fizyolojik 5 ml. </li><li> Penise xiphisternum bir 22-bıçak neşter ile orta hat karın kesi yaparak bir laparotomi gerçekleştirin. Kendi kendine istinat Retraktörü kullanarak karın duvarı çekin. Sonra, superior ve sıçan sol tarafa bağırsakları geri çekin. Sıcak, tuzlu batırılmış gazlı bez onları sarın. </li><li> Keskin örten yeniden aracılığıyla diseksiyon ile VKİ ve abdominal aorta Açığatro-periton yağ. </li><li> Kavisli damar kelepçe mevcut ve hazır bulundurun. </li><li> Çevresel proksimale ve distale IVC ve aort özgür ve 4-0 ipek kravatlar ile kuşatmak. Bu siteler arasında boşluk 3 cm - yaklaşık 2 olmalıdır. </li><li> Dikkatle IVC ve aort hem yeterli bir bölümünün kelepçe çene yukansında yer alır sağlanması, eğri damar kelepçesini uygulanır. </li><li> Bir tuzlu dolu 1 ml şırınga bağlı 25 G iğne ile IVC ön duvarında bir kesi yapmak. Donör IVC deliğin uzunluğu maç için Potts makas ile kesi uzatın. </li><li> Kendi kabından kalp-akciğer greft çıkarın ve kardiyoplejisinin bağlantısını kesmek. Venöz anastomoz gerçekleştirmek için en uygun pozisyonda alıcının karın greft yerleştirin. NOT: kalp-akciğer greft sonuçta karın yıllardan doğru apeks işaret ile, hafifçe eğik odaklı olacak alt kadranda bıraktı. </li><li> Topuk Güvenlive ayak 9-0 naylon sütür ile anastomoz biter. Dikiş uzun koluna bağlı iğne, daha sonra bağlı olan sütür kısa bir ucunu bırakarak, her iki ucunda güvenli bir düğüm. Kardiyoplejisinin bir doz yönetme. </li><li> Moda çalışan olarak, karşıt kısa dikiş koluna dikiş hattı ve kravat tam bir buçuk. Kardiyoplejisinin bir doz yönetme. </li><li> Sütür hattının diğer yarısını tamamlayın ve aşağı kravat. Venöz anastomoz tamamlandı. Kardiyopleji bir dozunun tatbik edilmesi </li><li> Orient karın yıllardan karşı kalbin apeks işaret ile kalp-akciğer greft alt kadranda bıraktı. Venöz anastomoz kıvrılmış veya bükülmüş olmadığından emin olun. </li><li> Gerilimsiz ve un-Dirsekli konfigürasyonlarda IVC ve aort anastomoz hem bakımını alıcı aorta ulaşmak için gerekli olacak donör aort uzunluğunu değerlendirin. </li><li> Bir iris makas ile (sol subklavian arter distalinde) inen aorta bölün. </li><li> Bir incisio Yapn, bir tuzlu su ile doldurulmuş 1 ml şırınga bağlı bir 25 G iğne ile alıcı aort ön duvarında. Donör aort deliğinin uzunluğu maç için Potts makas ile kesi uzatın. </li><li> 9-0 naylon dikiş kullanılarak aort alıcıya donör aort burnunu (üstün yönü) Çapa. Ardından, aortun medial iğne geçmek ve moda çalışan anastomoz yarısını tamamlamak. </li><li> Aort anastomoz topuk, sütür hattının (dikiş yönünde bir geçiş) yönünü ters ve moda çalışan anastomoz lateral yarısını tamamlamak. </li><li> Yavaşça SVC IV kateter kaldırmak ve cerrahi klip ile SVC Arter. </li><li> De-hava un kırpılmış sol karotis arter bularak aorta. Havanın serbestçe tahliye sağlayacak bir dik bir konumda arteri açık tutmak. </li><li> Kısaca d kavisli damar kelepçe çeneleri açılır ve (karotid arter kanamaya izinE-hava) 2 - 3 sn. Damar kelepçesini yeniden uygulayın. </li><li> Karotid arter cerrahi bir klip uygulayın. Kavisli damar kelepçesini çıkarın. </li><li> Sütür hatlarında kanama olup olmadığını kontrol edin. Varsa, 9-0 naylon sütür (kanamanın şiddetine bağlı olarak) uzunluğunda bir cerrahi gazlı bez ya da tamir nazik sıkıştırma uygulayın. </li><li> Donör kalp dakika içinde yenerek devam etmesi gerekir. </li><li> Alıcının vital bulgular, anestezi derinliği yakın ilgi ve gerektiği gibi ses canlandırma yönetmek. </li><li> Ya deneysel uç noktaları bağlı hayvanın karın kapatın ve anestezi kurtarmak izin veya kardiyovasküler değerlendirme için hayvan hazırlar. NOT: greft değerlendirme örnekleri yük-bağımlı ve yük bağımsız hemodinami in vivo tedbirler, in vitro Langendorff&#39;a işlevin önlemleri ve çalışma kalp modları ve (hayatta kalma cerrahi) ekokardiyografik veya MR incelemeleri dahil. </li><li> AtAkut Terminal deneyler sonunda, hayvanlar kan kaybından ötenazi. </li></ol>

<ol><li>Abbott, C. P., Lindsey, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+heart+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">A technique for heart transplantation in the rat.</a> Arch Surg. 89 (1964), 649-652 (1964).</li>
<li>Ma, Y., Wang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+2+heterotopic+heart+transplant+techniques+in+rats%3A+cervical+and+abdominal+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Transplant%22%5BJournal%5D)">Comparison of 2 heterotopic heart transplant techniques in rats: cervical and abdominal heart.</a> Exp Clin Transplant. 9 (2), 128-133 (2011).</li>
<li>Wiedemann, D., Boesch, F., Schneeberger, S., Kocher, A., Laufer, G., Semsroth, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graft+function+after+heterotopic+rat+heart+transplant+with+an+isolated+reperfused+working+heart%3A+a+methodic+consideration%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Transplant%22%5BJournal%5D)">Graft function after heterotopic rat heart transplant with an isolated reperfused working heart: a methodic consideration.</a> Exp Clin Transplant. 10 (2), 154-157 (2012).</li>
<li>Chen, Z. H., Xia, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+technique+of+heterotopic+heart-lung+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Tongji+Med+Univ%22%5BJournal%5D)">The technique of heterotopic heart-lung transplantation in the rat.</a> J Tongji Med Univ. 6 (2), 67-70 (1986).</li>
<li>Ibrahim, M., Navaratnarajah, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+abdominal+heart+transplantation+in+rats+for+functional+studies+of+ventricular+unloading%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Heterotopic abdominal heart transplantation in rats for functional studies of ventricular unloading.</a> J Surg Res. 179 (1), e31-e39 (2013).</li>
<li>Asfour, B., Hare, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+new+model+of+physiologically+working+heterotopic+rat+heart+transplantation+provides+hemodynamic+performance+equivalent+to+that+of+an+orthotopic+heart%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">A simple new model of physiologically working heterotopic rat heart transplantation provides hemodynamic performance equivalent to that of an orthotopic heart.</a> J Heart Lung Transplant. 18 (10), 927-936 (1999).</li>
<li>Figueiredo, J. -L., Nahrendorf, M., Sosnovik, D. E., Weissleder, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI+of+a+novel+murine+working+heart+transplant+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Heart+Fail%22%5BJournal%5D)">MRI of a novel murine working heart transplant model.</a> Circ Heart Fail. 2 (3), 272-274 (2009).</li>
<li>Wen, P., Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+technique+for+a+new+working+heterotopic+heart+transplantation+model+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">A simple technique for a new working heterotopic heart transplantation model in rats.</a> Transplant Proc. 45 (6), 2522-2526 (2013).</li>
<li>Didié, M., Biermann, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preservation+of+left+ventricular+function+and+morphology+in+volume-loaded+versus+volume-unloaded+heterotopic+heart+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22A.Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Preservation of left ventricular function and morphology in volume-loaded versus volume-unloaded heterotopic heart transplants.</a> A.Am J Physiol Heart Circ Physiol. 305 (4), H533-H541 (2013).</li>
<li>Galiñanes, M., Zhai, X., Hearse, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+load+on+atrophy%2C+myosin+isoform+shifts+and+contractile+function%3A+studies+in+a+novel+rat+heart+transplant+preparation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">The effect of load on atrophy, myosin isoform shifts and contractile function: studies in a novel rat heart transplant preparation.</a> J Mol Cell Cardiol. 27 (1), 407-417 (1995).</li>
<li>Yokoyama, H., Ohmi, M., Murata, S., Nakame, T., Tabayashi, K., Mohri, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proposal+of+a+working+left+heart+model+with+a+heterotopic+transplantation+technique+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Proposal of a working left heart model with a heterotopic transplantation technique in rats.</a> J Heart Lung Transplant. 14 (4), 706-712 (1995).</li>
<li>Maruyama, T., Swartz, M. T., McBride, L. R., Pennington, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Working+heart+model+of+heterotopic+heart-lung+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Working heart model of heterotopic heart-lung transplantation in rats.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 107 (1), 210-215 (1994).</li>
<li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Bátkai, S., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nat Protoc. 3 (9), 1422-1434 (2008).</li>
<li>Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Femoral+arterial+and+venous+catheterization+for+blood+sampling%2C+drug+administration+and+conscious+blood+pressure+and+heart+rate+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements.</a> J Vis Exp. (59), 3496-3410 (2012).</li>
<li>Habertheuer, A., Kocher, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innovative%2C+simplified+orthotopic+lung+transplantation+in+rats%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Innovative, simplified orthotopic lung transplantation in rats).</a> J Surg Res. 185 (1), 419-425 (2013).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Burada anlatılan teknikle Başarı çeşitli faktörlere esas alınacaktır. Aralarında Key üniforma greft soğutma ile tam kardioplejik tutuklama, toplam iskemik süresini en aza indirmek sağlanması, güvenli ve minimal kan kaybı ile ilişkili olan titiz operatif teknik benimseyen, hem donör ve alıcı hayvanların istikrarın sağlanması ve yeterli de-havalandırma greft olacaktır. Yukarıda kabul gibi, tekniğin teknik karmaşıklığı onun baş sınırlamadır. Biz birçok bakımdan önceki HAHLT teknikleri gelişmiş ...

Heterotopik abdominal kalp naklinin (HAHT) ilk kemirgen modeli 1964 yılında Abbott ve arkadaşları tarafından tanımlanmıştır1. Bu teknik ve müteakip modifikasyonlar, transplant greft fonksiyonunu ve immünolojik durumu karakterize etmek için yaygın olarak uygulanmıştır. Tarif edilen HAHT tekniklerinin çoğu, hacim yüklü olmayan bir kalbi içerir2,3. Hacim yüklü ventrikülleri içeren HAHT modelleri tanımlanmıştır, ancak bunlar genellikle bir veya daha fazla açıdan sınırlıdır.
Hacim yüklü sol ventrikül (LV) ile birlikte heterotopik abdominal kalp-akciğer nakli (HAHLT) daha önce tanımlanmıştır. Chen ve meslektaşları4 ve daha sonra İbrahim ve meslektaşları5, HAPLT'yi tek bir aorto-aortik (alıcı abdominal aorta çıkan donör) anastomozu ile tanımladılar. Bu dolaşımda ventriküle sunulan tek hacim yükü koroner venöz dönüştür. Asfour ve meslektaşları, donör pulmoner arterin (PA) donör sol atriyuma (LA) anastomoz edilmesiyle akciğer devresinin elimine edildiği bir HAHT tekniğini tanımladılar6. Bu dolaşımda, sağ ventriküle (RV) venöz akış, bir donör SVC yoluyla alıcı IVC anastomozuna gerçekleşir ve sonraki LV yükü aorto-aortik anastomoza atılır. Kardiyak fonksiyon kısmen in vivo olarak ve ayrıca bir Langendorff teçhizatı kullanılarak in vitro olarak değerlendirildi. Figueiredo ve meslektaşları, farelerde kendi7'mize benzer bir HAHLT modeli tanımladılar. RV'ye venöz akış, donör SVC yoluyla alıcı IVC anastomozuna gerçekleşir. Kan daha sonra tek akciğer dolaşımından geçer ve LV yükü aorto-aortik anastomoza atılır. Çalışmalarındaki kardiyak fonksiyon manyetik rezonans görüntüleme (MRG) ile değerlendirildi. Wen ve meslektaşları, LV'nin bir alıcı aort vasıtasıyla donör LA anastomozunayüklendiği benzersiz bir HAHT tekniğini tanımladılar 8. Bu nedenle LV, sistemik basınçlarda dolar. Kardiyak fonksiyon ve LV strok hacminin modellerinde antegrad olarak atılıp atılmadığı değerlendirilmedi.
Yukarıda atıfta bulunulan tekniklerin çoğu, kısmi LV yükü sadece koroner venöz dönüş ile temsil edilen teknikler de dahil olmak üzere, fizyolojik olmayan LV yükleme koşullarını içerir. Öte yandan, fizyolojik LV yüklemesine yaklaşan birçok teknik vardır. Bu tekniklerin çoğu, Asfour ve meslektaşlarının tekniğinde olduğu gibi, pulmoner dolaşımı atlar ve LA anastomozunu donör yapmak için bir donör PA kullanır6,9. Galinanes ve meslektaşları10 tarafından tanımlanan dolaşım, pulmoner dolaşımı ve sağ kalbi atlayarak, donör LA anastomozuna doğrudan bir alıcı kava kullanır. Yokoyama ve meslektaşları, donör PA'yı bağlayarak ve donör kalbinde interatriyal bir iletişim oluşturarak (donör akciğeri ve sağ kalp dolaşımlarını atlayarak) aynı etkiyi elde ederler11. Maruyama ve meslektaşlarının12 dolaşımı, donör sol PA ile alıcı Ao arasında, bir kanal olarak pulmoner dolaşım yoluyla LV dolumuna izin veren, ancak sağ kalbi etkili bir şekilde dışlayan bir anastomoz içerir.
Fizyolojik yüklenmeye yakın koşulların sağlandığı durumlarda, HAHLT tekniğini 2 ana açıdan ilerletiyoruz. İlk olarak, bildiğimiz kadarıyla, rapor ettiğimiz kesin konfigürasyon sıçanlarda tanımlanmamıştır. Nakledilen kalp-akciğer greftinin fizyolojisini, yapısını ve immünolojisini incelemek isteyen araştırmacılar için muhtemelen en çok yönlü dolaşımdır. İkinci olarak, nakil greftinin işlevinin in vivo olarak doğrudan nasıl karakterize edilebileceğini açıklıyoruz.Bu uygulama için, basınç-hacim iletkenlik kateterleri doğrudan nakil greftinin LV apeksine yerleştirilebilir, bu da tam kardiyak fonksiyonel karakterizasyona izin verir. 
Burada açıklanan teknik, transplant greft fonksiyonunun hem akut hem de kronik çalışmalarına uygulanabilirken, fonksiyonel değerlendirme in vivo veya in vitro olarak gerçekleştirilebilir. Yükleme koşullarının fizyolojik olarak yakın olabileceği, ancak ventriküler yükleme derecesinin hem akut hem de kronik olarak venöz dönüşü grefte doğru veya greftten uzağa yönlendirerek manipüle edilebileceği bir model sunuyoruz. Yük sonrası koşullar da manipüle edilebilir. Akciğer ve hava yolu bu nakil konfigürasyonunda tutulduğundan, araştırmacılar donör akciğeri akut olarak yeniden havalandırabilir. Benzersiz bir şekilde, akciğerlerin yeniden ventilasyonu, nakledilen koroner arterleri perfüze eden kanın bileşimini değiştirir. Havalandırılmayan koşullar altında, donör aorttan çıkan kan oksijensiz hale getirilir ve alıcı aortta oksijenli kan ile karışır. Akut havalandırılan koşullar altında, dışarı atılan kan oksijenlenir. Bu nedenle, nakil grefti fonksiyonu, havalandırılan ve havalandırılmayan koşullar altında ve ayrıca değişken yüklü koşullar altında karşılaştırılabilir.
Aşağıdaki protokol, daha önce açıklanan HAHLT verici ve alıcı işlemlerinde yapılan önemli değişiklikleri açıklamaktadır. Ayrıca, iskemi dönemi boyunca (donör eksplant ile alıcı implantı arasındaki süre) nakil greftini korumak için en uygun tekniği tanımlar. Bu tekniğin avantajları arasında, potansiyel olarak ortotopik olarak nakledilen bir greftinkine yaklaşan fizyolojik durumlar ve çok çeşitli araştırma uygulamaları yer alır. Önemli bir sınırlama teknik karmaşıklığıdır. Yeterli mentorluk ve uygulama ile, bu tekniğin avantajları, onu benimsemedeki zorluklardan daha ağır basacaktır.

<table><tbody><tr><td>Celsior Kardiyoplejik Soution</td><td>Genzyme</td><td></td><td>Çözelti işlem boyunca buz üzerinde tutulur. Ufak tefek değişikliklerle kendi çözümümüzü hazırlıyoruz.</td></tr><tr><td>Kemirgen Ventilatörü</td><td>Harvard Aparatı</td><td>Model 683</td><td></td></tr><tr><td>Yaşamsal Belirti Monitörü</td><td>Nonin</td><td>Model 9847V</td><td>SpO2 ve kalp atış hızını görüntüler.</td></tr><tr><td>IV Kanül</td><td>Jelco</td><td>3063</td><td>24 - 26 G x 3/4" kanüller.</td></tr><tr><td>IV Boru</td><td>CareFusion</td><td>MP9259-C</td><td>Kısa uzunlukta konektör borusu (18 cm).</td></tr><tr><td>Cerrahi Klipsler</td><td>Teleflex Medical</td><td>001204</td><td>Horizon titanyum bağlama klipsleri.</td></tr><tr><td>Sütürler</td><td>Ethicon, Sharpoint</td><td>LA54G, AK-0107</td><td>3-0 ipek makara ve 9-0 prolen sütür (tek kollu, DR5 iğne).</td></tr><tr><td>Cerrahi Aletler</td><td></td><td>Uygulanamaz Uygulanamaz</td><td>Kullanılan aletler jeneriktir ve herhangi bir cerrahi malzeme şirketinden satın alınabilir.</td></tr></tbody></table>

sıçan heterotopik abdominal kalp / bir ses yüklenen yapılandırması tek akciğer transplantasyonu

Rat Heterotopic Abdominal Heart/Single-lung Transplantation in a Volume-loaded Configuration

Burada, sıçanlarda heterotopik abdominal kalp-akciğer nakli (HAHLT) için yeni bir teknik açıklıyoruz. Transplant greftinin konfigürasyonu, donör inferior vena kava'nın (IVC) alıcı IVC'ye ve donör çıkan aortun (Ao) alıcı abdominal Ao'ya anastomozunu içerir. Sağ üst ve orta akciğer lobları korunur ve sağ kalpten sol kalbe kan akışı için kanal görevi görür.
Bu tekniği kullanmanın çeşitli avantajları vardır ve geniş bir uygulama yelpazesine uygundur. Greft, dinamik hacim yüklemesine izin veren bir konfigürasyonda nakledildiğinden, kardiyak fonksiyon doğrudan in vivo olarak değerlendirilebilir. Basınç-hacim iletkenlik kateterlerinin kullanımı, yüke bağlı ve yüke bağlı hemodinamik parametrelerin karakterizasyonuna izin verir. Greft, alıcının infra-hepatik IVC'sine bir kelepçe uygulanarak yüklü bir konfigürasyona dönüştürülebilir. Hem donör hem de alıcı operasyonları için modifiye cerrahi teknikler ve ideal bir miyokardiyal koruma stratejisi tanımlanmıştır. Deneysel amaca bağlı olarak, bu model greft fonksiyonu, immünolojik durum ve değişken ventriküler yükleme koşulları ile ilgili hem akut hem de kronik çalışmalarda kullanılmak üzere uyarlanabilir. Nakledilen akciğere giden iletken hava yolları korunur ve akut akciğerin yeniden ventilasyonuna izin verir. Bu, grefte koroner perfüzyon sağlayan karışık venöz ve arteriyel kanın etkilerinin analizini kolaylaştırır.
Bu modelin bir sınırlaması da teknik karmaşıklığıdır. İdeal olarak teknikte mentorluk yapması gereken yeni operatörler için önemli bir öğrenme eğrisi vardır. Bu modeli uygulamak isteyenler için cerrahi eğitim geçmişi avantajlıdır. Karmaşıklığına rağmen, modeli açık ve kolay uygulanabilir bir formatta sunmayı amaçlıyoruz. Bu modelin ortotopik transplantasyona fizyolojik benzerliği ve geniş çalışma uygulamaları yelpazesi nedeniyle, tekniği öğrenmek için harcanan çabanın faydalı olması muhtemeldir.

Yukarıda tarif edilen HAHLT tekniği son derece teknik ve ayrıntı. Tablo yakın ilgi gerektiren 1 golleri başarısız prosedürlere karşı başarılı ile ilişkili önemli faktörlerden bazıları ve teknik zorlukları gidermek için bir rehber olarak kullanılabilir. Alıcı aort kelepçelenmemiş sonra, greft koroner arterler oksijenli kan ile doldurmak için görülmelidir. Buna göre, miyokard pembe ve iyi perfüze haline gelmelidir. Teknik olarak başarılı deneylerde, kalp greft...

Sıçanlarda heterotopik abdominal kalp-akciğer nakli (HAHLT) için yeni bir teknik tanımladık. Nakil konfigürasyonu, kısmen yüklü bir greft sirkülasyonu ile sonuçlanır ve doğrudan fonksiyonel değerlendirmeye izin verir. Bu model, nakledilen greftin fonksiyon ve immünolojik durumu ile ilgili akut veya kronik çalışmalar için kullanılabilir.

Sıçan Heterotopik Abdominal Kalp / Bir Ses yüklenen Yapılandırması Tek akciğer transplantasyonu

Herein, we describe a novel technique for heterotopic abdominal heart-lung transplantation (HAHLT) in rats. The configuration of the transplant graft ...

Bu prosedürün genel amacı, hacim yüklemesine izin veren bir konfigürasyonda kalp ve tek akciğer greftini heterotopik olarak nakletmektir. Bu işlem, öncelikle donör kalp akciğer greftinin alınmasıyla gerçekleştirilir. Ardından, alıcı hazırlanır ve sonrasında donör doku implante edilir.Son olarak, donör greft dokusundaki hava boşaltılır ve yeniden perfüze edilir. Nihayetinde, greftin fonksiyonunu gerçek zamanlı olarak değerlendirmek için bir basınç-hacim iletkenlik kateteri kullanılabilir. Bu tekniğin, heterotopik abdominal kalp transplantasyonu gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, akciğer greftinin eklenmesinin doğal bir devre üzerinden antegrad kan akışına izin vermesi, böylece kalp-akciğer greftinin dinamik hacim yüklemesini ve transplantasyon sonrası kardiyovasküler değerlendirmeyi kolaylaştırmasıdır.İnferior vena cava (IVC) hazırlamak veya ardından gelen anastomozu gerçekleştirmek için, cavo-atrial bileşkesinden başlayarak diyaframa doğru inferior yönde ilerleyerek donör hayvanın perikaval yağ dokusunu diseke ederek uzaklaştırın. Ardından, keskin bir şekilde çevresel olarak ayırarak superior vena cava'yı (SVC) serbest hale getirin ve 4-0 ipek bağ ile çevreleyin. Sol vena

rat-heterotopic-abdominal-heartsingle-lung-transplantation-volume

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Fare heterotopik kalp transplantasyonu modeli ret ve immün yanıt mekanizmaları eğitim için önemli bir yöntem olduğu birçok araştırmacı tarafından kanıtlanmıştır. Ancak, söz konusu teknikleri hala zorlu. Standart teknikler değiştirerek 1000 nakli ile daha fazla başarı elde ettiler.

Farelerde Heterotopik Kalp Nakli

Yardımcı karaciğer nakli başarısız karaciğer rejenerasyonu kadar, akut karaciğer yetmezliğinde geçici bir destek sağlar. Portal ven ve arteri (PVA) ile heterotopik yardımcı karaciğer transplantasyonu (HALT) yeterli karaciğer fonksiyon oluşturur. Biz greft morfolojisi ve fonksiyonu üzerinde portal ven arteriali etkisini incelemek için, sıçan benzer bir tekniği geliştirdi.

Heterotopik Yardımcı Sıçan Karaciğer Nakli ile Akut Karaciğer Yetmezliği Portal Ven arteriali Akış ayarlı

El yazması fare heterotopik kalp nakli gerçekleştirmek için gereken adımları açıklar.

Mürin Heterotopik Kalp Nakli Tekniği

Sıçanlarda heterotopik karın kalp transplantasyonunun bir modelini açıklayarak, basitleştirilmiş bir cerrahi yaklaşıma yol açan mevcut stratejilerde değişiklik ima ediyoruz. Ayrıca, hayati kardiyak kas hücrelerinin kulak içi enjeksiyonu ile yeni bir ret modeli tarif, sıçanlarda daha fazla nakil immünolojik analizler sağlayan.

Sıçanlarda Heterotopik Kalp ve Kardiyak Kas Hücre Nakli için İmmünolojik Model

Heterotopik abdominal fare kalp nakli modelinde kan devresi rekonstrüksiyonu için yeni bir teknik gösterilmiştir.

Abdominal Fare Kalp Nakli Modelinde Kan Devresi Rekonstrüksiyonu

Bu protokol, ESLP araştırmalarında kullanılmak üzere tasarlanmış ortotopik sol akciğer allotransplantasyonunun bir juvenil domuz modelini açıklamaktadır. Anestezi ve cerrahi tekniklerin yanı sıra kritik adımlar ve sorun gidermeye odaklanılır.

ESLP için Juvenil Domuz Modelinde Sol Akciğer Ortotopik Transplantasyonu

Domuz heterotopik kalp nakli modelinde terapötiklerin tüm kardiyak allogreftlere verilmesi için normotermik ex vivo sanguinöz perfüzyon sisteminin kullanılması için bir protokol sunuyoruz.

Terapötiklerin Kardiyak Allogrefte Verilmesi için Domuz Heterotopik Kalp Transplantasyonu Protokolü

Bu çalışma, sıçanlarda yeni başlayanların öğrenebileceği ve uygulayabileceği tekrarlanabilir bir heterotopik abdominal kalp nakli tekniğini göstermektedir. Ek olarak, sıçanlarda yeni bir aort yetersizliği modeli, heterotopik abdominal kalp nakli yapılarak ve hasattan sonra bir kılavuz tel kullanılarak donörün aort kapağına zarar verilerek üretilir.

Modifiye Heterotopik Abdominal Kalp Transplantasyonu ve Sıçanlarda Yeni Bir Aort Yetersizliği Modeli

Bu protokol, akciğer nakli sırasında donör posterior atriyal flebin rotasyonu yoluyla donör atriyal manşet ön duvar defektlerinin etkili bir şekilde yeniden yapılandırılması için yeni bir yöntemi tanımlamaktadır.

Akciğer naklinde sol atriyal manşet rekonstrüksiyonu için donör posterior atriyal flep rotasyonu

Bu protokol, sıçanlarda ortotopik sol akciğer nakli için operasyonel zorluğu azaltmaya ve sağkalım oranlarını iyileştirmeye odaklanan gelişmiş bir tekniği tanımlar.

Sıçanlarda Ortotopik Sol Akciğer Nakli

Öğrenin sıçanlarda heterotopik abdominal kalp-akciğer transplantasyonu tekniğini; dinamik hacim yüklemesi ve gerçek zamanlı greft fonksiyon değerlendirmesi sağlar. Bu yöntem transplantasyon biyolojisi ve kardiyovasküler fizyoloji araştırmaları için değerlidir.

Sıçan Heterotopik Abdominal Kalp / Bir Ses yüklenen Yapılandırması Tek akciğer transplantasyonu

Daha fazla video keşfet