Name: Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-16T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 30 s
Description: Öğrenin yenidoğan hipoksik-iskemik ensefalopati için domuz yavrusu modeli kurmayı. Amplitude integrated EEG ile kontrollü hipoksi indüksiyonu ve beyin aktivitesi izleme yöntemlerini keşfedin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, Danimarka Aarhus Üniversite Hastanesi İletişim Bölümü'nden John Kristensen ve Søren Braad Andersen'e çekim ve kurgu konusundaki olağanüstü yardımları için teşekkür eder. Hayvan teknisyeni Diana Gyldenløve ve veteriner hekim Birgitte Kousgaard, Aarhus Üniversitesi Hastanesi Klinik Tıp Enstitüsü, Danimarka, hayvan bakımına yardımcı oldukları için. Bu çalışma Lundbeck Vakfı, Laerdal Akut Tıp Vakfı, Orta Danimarka Bölgesi Araştırma Vakfı, Augustinus Vakfı, Aase ve Ejnar Danielsens Vakfı, Aarhus Üniversite Hastanesi Klinik Tıp Enstitüsü, Brødrene Hartmanns Vakfı, Karen Elise Jensens Vakfı, Fonden til Lægevidenskabens Freme ve Marie Dorthea og Holger tarafından desteklenmiştir. Haderslevs düşkün.

Mevcut protokol Danimarka Hayvan Deneyleri Müfettişliği tarafından onaylandı. Tüm test hayvanları prosedürler boyunca anestezi uygulandı. Bu protokolün çoğaltılması, ulusal etik ve hayvan refahı kurallarına uygun olarak yürütülen ve yerel etik komiteleri tarafından onaylanmalıdır. 1. Hayvanlar <ol><li> 2.000 gr - yaklaşık 1.500 ağırlığında Danimarkalı Landrace domuz yavrusu &lt;24 saat eski. </li></ol> 2. Anestezi ve Bakım Sıvıları <ol><li> Sevofluran yönetim, alkol bezlerden, periferik damar içi kateter, lastik bant, tuzlu su ile şırıngalar, propofol (5 mg / kg) için bir maske, fentanil (10 ug / kg) ve prokain benzilpenisilin: anestezi için gerekli olan ekipman (Şekil 1) hazırlayın (15,000 IU / kg). </li><li> Bir solunum maskesi ile% 1-2 sevofluran sunarak anestezi neden olur. <ol><li> Palpebral ve çekilme refl için değerlendirerek anestezi derinliğini değerlendirmekgiderler. Piglet derinden anestezi olduğunu zaman belli, perkütan kulak damar içine periferik intravenöz kateter yerleştirin. </li><li> Periferik damar içi kateter açıklığını onaylamak için, steril% 0.9 tuzlu su 1-2 ml kateteri yıkayın. Propofol (5 mg / kg) ve fentanil (/ kg 10 ug) bolus enjeksiyonları uygulayın. Bolus enjeksiyon yönetimine müteakiben steril% 0.9 tuzlu su 1-2 ml kullanarak intravenöz kateter ikinci kez yıkayın. </li><li> Iki ayrı bir şırınga infüzyon pompalarında propofol (10 mg / ml) ve fentanil (10 ug / mi) ile bir yer şırınga. Intravenöz kateter bağlı olan tek bir satır halinde infüzyon katılarak üç yollu iki şırınga pompaları iv tüpleri bağlayın. Sürekli propofol infüzyonu (4-12 mg / kg / saat) ve fentanil (10 ug / kg / st) başlatın. Sürekli infüzyon çalışan sonra, propofol ve fentanil ek bolus enjeksiyonları vermeyin. </li><li> Sevofluran gaz ANEST durdurulmalıdır yönetimilerine. </li><li> Antibiyotik profilaksisi için yerel kurallar uyarınca intramüsküler prokain benzilpenisilin (15,000 IU / kg) deri altından veya enjekte edilir. Günlük tekrarlayın. Video domuz yavruları im tatbikat ile karşılaştırıldığında daha yüksek bir plazma konsantrasyonu ve daha uzun yarı ömür ile sonuçlandığı gösterilmiştir SC uygulamasına göstermektedir. </li><li> Gözlerin kurumasını önlemek için göz yağlama merhem sürün. Bir cep şeklindeki açıklık oluşturmak için yavaşça alt göz kapağını aşağı çekin. Cebin içinde merhem küçük bir miktar sıkın. Kapat göz merhemi dağıtmak için. Kuruluk saatlik kontrol edin ve gerekirse yeniden uygulayın. </li><li> % 5 dekstroz, sürekli bir infüzyon hızı / 10 ml / kg / saat% 0.45 NaCl iv başlatın. Sırasında ve hipoksi sonrasında 5 ml / kg / saat hızını azaltın. 2-10 mmol / L arasında kan şekeri düzeylerini korumak için infüzyon hızı ayarlayın. </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/52454/52454fig1.jpg" /> Figuanestezi ve entübasyon 1. donatım yeniden. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52454/52454fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 3. Entübasyon ve Havalandırma <ol><li> Entübasyon için gerekli ekipman (Şekil 1) hazırlayın: açılması için roküronyum bromür (1 mg / kg) kas gevşemesi için, bir halat sapan (Şekil 1&#39;de gösterildiği gibi aynı 4 mm naylon halat iki ucunu kravat birlikte bir daire oluşturacak şekilde) ağız, pamuklu bir düz bıçak Xylocaine sprey (100 mg / ml), manşon olan çeşitli büyüklükte endotrakeal tüpler, 500 mi kendinden şişen torba (3.0 mm, 2.5 mm, 2.0 mm tipleri) (torba valf bezi ve veteriner larengoskop uçlu havalandırma, manşet enflasyon ve stetoskop için 2 ml şırınga için) maske. </li><li> Aşağıdaki adımları izleyerek entübe: <ol><li> Her taraftan boynunu destekleyen yatar pozisyonda yerleştirin piglet düz bir laringeal pas güvenlientübasyon için adaçayı. </li><li> Sternal çentik (genellikle yaklaşık 13 cm) burun ucundan ölçerek endotrakeal tüpün uzunluğu tahmin edin. </li><li> Üst çene etrafında Yeri halat sapan (aşağı bakan) ve açık ağzı tutmak için yukarı alt çene ve dil tutun. </li><li> Kas gevşemesini teşvik etmek için rokuronyum bromür (1 mg / kg), iv uygulayın. </li><li> Yukarı dilini kaldırmak için laringoskop kullanın. </li><li> Pamuk ya da yemek borusuna retrovert veya yumuşak damak arkasında yakalanmış olabilir Piglet uzun epiglottis, ücretsiz bez uçlu kullanın. </li><li> Aritenoid kıkırdaklar ve ses tellerinin tam görünüm sağlayan dil kökünde karşı kaldırdı epiglottis tutmak için laringoskop Advance. </li><li> Laringeal spazmları önlemek için larinks topikal xylocaine spreyi (100 mg / ml) uygulayın. </li><li> Ses tellerinin sayesinde endotrakeal tüp ilerletin. Dar trakea kıkırdaklarının geçişini yardımcı olmak için bir dönme hareketi kullanın. Peşin tüp maille Hesapönceden ölçülmüş mesafe rding ve manuel ventilasyon için kendi kendine şişen torba (poşet valf maske) bağlanın. Xylocaine spreyi ile endotrakeal tüpün distal 1/3 sprey entübasyon sırasında sürtünmeyi azaltmak için. </li><li> Doğru endotrakeal tüp yerleştirme onaylamak için: nefes almada zorluk herhangi bir endikasyon için gözlemlemek, her iki akciğerde içine ikili hava girişi için dinleme göğüs ausculate, görsel endotrakeal tüpün proksimal yönünde yoğunlaşma varlığını teyit ve end tidal karbon varlığını doğrulamak kolorimetrik karbondioksit dedektörü ile veya varsa mekanik ventilatöre bağlı ekspiratuar CO 2 okuma ile dioksit. Normal end tidal karbondioksit% 5 civarında olduğunu. Bir normal görünümlü dalga ile birlikte% 2 üzerinde bir değer endotrakeal tüp trakea olduğunu teyit edecektir. </li><li> Aspirasyonu önlemek için endotrakeal tüp şişirin. Olmalıdır Kol hava basıncı en az 25 cm iskemik hasarı engellemek için H2O<html> çevredeki dokuya. Yerinde endotrakeal tüpü tutarak, tüpün etrafında bant parçası rüzgar, çene kapatın ve yerine tüp sabitlemek için burnu etrafında bantlama devam edin. Yavaşça yerinde kalmasını sağlamak için tüp çekin. </li><li> Mekanik ventilatöre endotrakeal tüp bağlayın. </li></ol></li><li> Ventilatör ayarlarını yapma: hacim kontrollü ventilasyon, tidal volüm (TV): 10 ml / kg [veya tepe inspiratuar basıncı 15 cm basınç kontrollü ventilasyon ile (PIP)]. Pozitif ekspirasyon sonu basınç (PEEP): 5 cm. I: E oranı 1: 2. Solunum hızı: 35 (4.5-5.5 kPa arasındaki end-tidal CO 2 korumak için hızını ayarlamak). </li></ol> 4. İzleme ve Vücut Sıvısı Örnekleme <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig2.jpg" /> Izlemek için 2. Ekipman rakam.ank &quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız. <ol><li> Sürekli rektal sıcaklık ölçümü, elektrokardiyografi (EKG) elektrotlar, pulse oksimetre, jilet ve EEG elektrotları için yapışkan bant, steril yağlayıcı, sonda: izleme (Şekil 2) için gerekli ekipman hazırlayın. <ol><li> Bir arka bacak üzerine yerleştirin doygunluk probu, rektal sıcaklık probu yağlayın ve rektum içine 6 cm yerleştirin 38,5-39 ° C fizyolojik düzeyde rektal sıcaklığı korumak için havai radyant ısıtıcı ve / veya ısıtılmış şişme hava yatağı yerleştirin ve yer EKG elektrotlar. </li><li> Derialtı iğne EEG elektrotları yerleştirilmesi için 1 cm x 1 cm alanlarını tıraş yüzüstü pozisyonda piglet yerleştirin; Her kulağın önünde tek ve sadece gözlerinin arkasında orta hatta referans elektrot. Alkollü bir bezle temizleyin elektrot sitesini, daha sonra iğne elektrot deri altına yerleştirin. Sırtüstü po yapışkan bant ve dönüş domuz yavrusu ile güvenli elektrotlarlan de. </li><li> AEEG monitörü açın. NOT: EEG entegre genlik üst ve alt kenar boşlukları ile yoğun bir iz oluşur. Bu modelde Alt ve üst kenar boşlukları genellikle bebeklerde görülen genellikle daha yüksektir 15-50 mV vardır. Hipoksi sırasında EKG o eser yanlış aEEG iz yükseltebilir, dikkat etmek önemlidir. Bolus ilaçlar (propofol veya fentanil) da geçici aEEG iz baskılayabilir ve deney sırasında mümkünse kaçınılmalıdır. Ilaç ve klinik olayların İdaresi aEEG izi yorumlanmasını kolaylaştırmak için işaretlenmiş olmalıdır. </li></ol></li><li> Steril eldiven, steril örtü, neşter, alkol bezlerden, steril mendil, göbek ven kateteri (5 Fr), umbilikal arter kateteri (3.5 Fr: merkezi arteriyel kan basıncı takibi ve kan örneklemesi (Şekil 3) için göbek kateterleri yerleştirmek için gerekli olan ekipman hazırlayın ), dikiş forseps, kavisli mikro forseps, makas, iğne tutucu ve sütür (setiÖrneğin, boyut 3-0), şeffaf yapışkan yama, kan örneklemesi için 5 ml şırınga. </li></ol><img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig3.jpg" /> Göbek hatları ve kan örneklemesi için 3. Ekipman rakam. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52454/52454fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <ol start="3"><li> Sterilize ve göbek çevresi asmak. Mümkün olduğunca cilde yakın göbek bağını kesmek için bir neşter kullanın. Bu anestezi Piglet umbilikal damarların maruz etmezse, damarları ortaya çıkarmak için göbek cilde göbek kordonu altında 2 mm kesti. Iki küçük göbek arterler ve daha büyük bir göbek ven (Şekil 4) belirleyin. </li><li> Arter (Şekil 4) dilate ve umbilikal arter kateter eklemek için kavisli mikro forseps kullanın(3.5 Fr). 3 x ağırlık cm Tahmin ekleme uzunluğu (kg) + 10 (otopsi renal arterlerin üzerinde inen aorta doğru yerleştirme dayalı ampirik formülü). </li><li> İkinci 5 Fr kateter göbek ven içine 5 cm (Şekil 4) yerleştirin. Kan dönüşü ile intravasküler kateter yerleştirme doğrulayın. Göbek etrafında bir çanta-string sütür koyarak Güvenli kateterler, dikiş göbek kateterleri her etrafında biter geçmesine ve bir düğüm. Yapışkanlı örtü ile kateterler örtün. </li><li> Önceden belirlenmiş zaman noktalarında kan örnekleri toplamak: 45 dakika hipoksik hasara 4) hipoksik saldırıdan sonra 2 st sonunda hipoksik hasara 3) içine 1) derhal hipoksi önce 2) 30 dakika. Kan örnekleri için deney diğer zaman noktaları amacına bağlı olarak seçilebilir. </li><li> Hipoksi-iskemi (Tablo 1) yol açtığı kan gazı değişiklikleri doğrulamak için hipoksi esnasında alınan kan örneklerinden arter kan gazı analizi kullanın. Domuz yavrusu düşük hemoglobin a sahip olduğunu unutmayınt doğum ve (8 g / dL civarında) sık kan örnekleme anemik hale gelebilir. 24 saat içinde beraberlik başına en az 2 ml kan / kg vücut ağırlığı, en az 5 ml kan / kg vücut ağırlığı çekiniz ve kan örneklemesi için yerel yönergelere uygun. Anemi belirtileri hematokrit ve taşikardi azalan içerir. </li><li> Intra-arteriyel kan basıncı izleme (MABP) devam için bir monitöre arteriyel hattı bağlayın. Sıvı ve ilaç uygulaması için venöz hattını kullanın. </li></ol><img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig4.jpg" /> 4. Göbek damarları Şekil. Umbilikal ven (sağda) ve iki göbek arterler (solda) birini. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52454/52454fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 5. hipoksi <ol><li> Izleme tamamladıktan sonra 60 dakika bekleyin. % 4 O 2 geçerek hipoksi øndükle </sub&gt; /% 96 N 2 gaz karışımı. Yakından hayati parametreleri ve aEEG izlemek ve 45 dk hipoksi devam ediyor. </li><li> AEEG iz (üst kenar boşluğu &lt;7 mV) düz sonra, ilham oksijen fraksiyonu (FiO 2) değiştirerek oksijenasyonu ayarlayın ve Şekil 5&#39;te gösterilen akış şemasına göre aEEG düz bir iz muhafaza yüksek FiO 2 seviyesine ortalama hava yolu basıncı. En az 10 dakika süreyle bazal% 70 altında MABP için Amaç ve alt FiO 2 gerekirse hipotansiyon ve iskemi sağlamak. Hipotansiyon tarif edilen seviyesi daha önce ilgili hipoksik iskemik beyin yaralanması meydana getirmek için diğer 19,13,30 tarafından gösterilmiştir. </li><li> Ciddi hipotansiyon durumunda (MABP &lt;25 mm Hg) aşağıdaki şekilde kademeli olarak tedavi: kısa bir süre için% 1-5 FiO 2 geliştirmek, tuzlu su, bolus (10 ml / kg), dopamin infüzyonu (5-20 ug / kg / dk), ve noradrenalinin (20 ng-1 ug / kg / dak) infüzyonu. </li><li> &gt; 10 dakika süren nöbetler halinde (klonik, tonik or miyoklonik nöbetler, genellikle fokal veya aEEG genliği ani değişiklikler) tarafından belirtildiği gibi () aşağıdaki enjeksiyon geçmeden önce 30 dakika izin ile adım adım tedavi: fenobarbital iv 20 mg / kg tekrarlayın fenobarbital iv 20 mg / kg yavaş bolus ve midazolam iv 0.5 mg / kg&#39;dır. <ol><li> Nöbetler gelişebilir ve ilaç tedavisi ötanazi yanıt vermeyen iseniz gösterilir. </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig5.jpg" /> Oksijenasyonda ayarlamaları gösteren Şekil 5. hipoksi-iskemi akış şeması. Akış aEEG yanıta göre (F i O 2 ve P aw). Havayolu basıncı (P aw) Ortalama PIP / TV (düşük PIP alt P aw verir) ve solunum hızı değiştirilerek ayarlandı (düşük RR alt P aw verir). AEEG = Üst iz marjı &lt;5 mV ve iz alt marjı&gt; 3 uV (ortalama 4 mV) hedefleyin. HedefKalp atım hızı (KAH) =&gt; 80. Hedef ortalama arteriyel kan basıncı (MABP) = MABP&gt; 25. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52454/52454fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 6. 72 saat sağkalım <ol><li> Hipoksik hakaret sonra yakından piglet Monitör ve yavaş yavaş propofol ve fentanil infüzyon oranlarını azaltmak. Hayvan gönüllü nefes edildiği noktada Tüpü. </li><li> Yaşam süresi boyunca, yoğun bakım ve izleme eğitimli personel tarafından 24 saat seyretmek ile bir hayvan tesisinde domuz yavrusu tutun. Iv glukoz infüzyonları 20 ml yönetme / saatlik 2-3 kg. Hipoksi-iskemi kısmi şişe beslenme sonrası 26-48 saat sonra başlatılabilir. Öğürme refleksi mevcut değilse trakea ve akciğerlere aspirasyon biberonla besleme yoluyla oluşabilir. </li><li> Deney ile ilgili ise, Thoresen ve ark tarafından geliştirilen puanlama sistemi kullanılarak nörolojik durumlarını değerlendirmek., TarifOrijinal yayında 17 ayrıntı. </li></ol> 7. Sonuç Değerlendirmesi <ol><li> 72 saat sonra, uyutmak ve 2. bölümde açıklanan ve 3. Munkeby ark 31 ve diğerleri 2 tarafından açıklandığı gibi MR ilgili görüntüleme yöntemleri ile tarama gerçekleştirin tekrar havalandırın. </li><li> Deneyin sonunda pentobarbitalin letal dozu ile domuz yavrusu euthanize (5 g / kg, iv). </li><li> Deneyin amaca göre muayene için beyin hazırlayın. <ol><li> Formalin sabit doku beyin histoloji için.:. Robertson ve diğ 2 tarafından tarif edildiği gibi paraformaldehid diseksiyon ve sonrası sabitleme ardından PBS içinde% 4 paraformaldehit ile kardiyak perfüzyon, kullanım Chakkarapani ark 1 veya Liu ve diğerleri, 18 ya da beyin kaldırmak Andresen ve arkadaşları tarafından tarif edildiği gibi ve% 4 paraformaldehid içinde bırakın. 32 </li><li> Analiz için Snap-dondurulmuş doku gerektiren (örneğin, RNAAnaliz veya enzim aktivitesi deneyleri, 33). ilgi beyin bölgelerini teşrih, beyin çıkarın ve ek dondurularak azami 1 cm&#39;lik doku blokları sıvı azot içinde x 1 cm Munkeby ve arkadaşları tarafından tarif edildiği gibi 33 </li></ol></li></ol>

<ol><li>Chakkarapani, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenon+enhances+hypothermic+neuroprotection+in+asphyxiated+newborn+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of%22%5BJournal%5D)">Xenon enhances hypothermic neuroprotection in asphyxiated newborn pigs.</a> Annals of. 68, 330-341 (2010).</li>
<li>Robertson, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melatonin+augments+hypothermic+neuroprotection+in+a+perinatal+asphyxia+model%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+%3A+a+journal+of+neurology%22%5BJournal%5D)">Melatonin augments hypothermic neuroprotection in a perinatal asphyxia model.</a> Brain : a journal of neurology. 136, 90-105 (2013).</li>
<li>Lawn, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Every+Newborn%3A+progress%2C+priorities%2C+and+potential+beyond+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Every Newborn: progress, priorities, and potential beyond survival.</a> Lancet. 384, 189-205 (2014).</li>
<li>Lee, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrapartum-related+neonatal+encephalopathy+incidence+and+impairment+at+regional+and+global+levels+for+2010+with+trends+from+1990%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+research%22%5BJournal%5D)">Intrapartum-related neonatal encephalopathy incidence and impairment at regional and global levels for 2010 with trends from 1990.</a> Pediatric research. 74, Suppl 1. 50-72 (2013).</li>
<li>Kurinczuk, J. J., White-Koning, M., Badawi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+neonatal+encephalopathy+and+hypoxic-ischaemic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Early+human+development%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of neonatal encephalopathy and hypoxic-ischaemic encephalopathy.</a> Early human development. 86, 329-338 (2010).</li>
<li>Shankaran, S., Woldt, E., Koepke, T., Bedard, M. P., Nandyal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+neonatal+morbidity+and+long-term+central+nervous+system+sequelae+of+perinatal+asphyxia+in+term+infants%5BTitle%5D)+AND+%22Early+human+development%22%5BJournal%5D)">Acute neonatal morbidity and long-term central nervous system sequelae of perinatal asphyxia in term infants.</a> Early human development. 25, 135-148 (1991).</li>
<li>Robertson, C. M., Finer, N. N., Grace, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((School+performance+of+survivors+of+neonatal+encephalopathy+associated+with+birth+asphyxia+at+term%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+pediatrics%22%5BJournal%5D)">School performance of survivors of neonatal encephalopathy associated with birth asphyxia at term.</a> The Journal of pediatrics. 114, 753-760 (1989).</li>
<li>Bennet, L., Booth, L., Gunn, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+biomarkers+for+hypoxic-ischemic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+feta.%2C+%26+neonatal+medicine%22%5BJournal%5D)">Potential biomarkers for hypoxic-ischemic encephalopathy.</a> Seminars in feta., & neonatal medicine. 15, 253-260 (2010).</li>
<li>Yager, J. Y., Ashwal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+perinatal+hypoxic-ischemic+brain+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+neurology%22%5BJournal%5D)">Animal models of perinatal hypoxic-ischemic brain damage.</a> Pediatric neurology. 40, 156-167 (2009).</li>
<li>Buckley, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maturation+of+circulatory+system+in+three+mammalian+models+of+human+development%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+biochemistry+and+physiology.+A%2C+Comparative%22%5BJournal%5D)">Maturation of circulatory system in three mammalian models of human development.</a> Comparative biochemistry and physiology. A, Comparative. 83, 1-7 (1986).</li>
<li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+aspects+of+the+brain+growth+spurt%5BTitle%5D)+AND+%22Early+human+development%22%5BJournal%5D)">Comparative aspects of the brain growth spurt.</a> Early human development. 3, 79-83 (1979).</li>
<li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+growth+and+development+of+human+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+disease+in+childhood%22%5BJournal%5D)">Quantitative growth and development of human brain.</a> Archives of disease in childhood. 48, 757-767 (1973).</li>
<li>Foster, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+survival+model+of+hypoxia%2Fischaemia+in+the+piglet+suitable+for+neuroprotection+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+research%22%5BJournal%5D)">An improved survival model of hypoxia/ischaemia in the piglet suitable for neuroprotection studies.</a> Brain research. 919, 122-131 (2001).</li>
<li>LeBlanc, M. H., Li, X. Q., Huang, M., Patel, D. M., Smith, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AMPA+antagonist+LY293558+does+not+affect+the+severity+of+hypoxic-ischemic+injury+in+newborn+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+journal+of+cerebral+circulation%22%5BJournal%5D)">AMPA antagonist LY293558 does not affect the severity of hypoxic-ischemic injury in newborn pigs.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 26, 1908-1914 (1995).</li>
<li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nicotine+affects+the+expression+of+brain-derived+neurotrophic+factor+mRNA+and+protein+in+the+hippocampus+of+hypoxic+newborn+piglets%5BTitle%5D)+AND+%22J+Perinat+Med%22%5BJournal%5D)">Nicotine affects the expression of brain-derived neurotrophic factor mRNA and protein in the hippocampus of hypoxic newborn piglets.</a> J Perinat Med. 37, 553-560 (2009).</li>
<li>Cheung, P. Y., Gill, R. S., Bigam, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+swine+model+of+neonatal+asphyxia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">A swine model of neonatal asphyxia.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2011).</li>
<li>Thoresen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+piglet+survival+model+of+posthypoxic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+research%22%5BJournal%5D)">A piglet survival model of posthypoxic encephalopathy.</a> Pediatric research. 40, 738-748 (1996).</li>
<li>Liu, X., Tooley, J., Loberg, E. M., Suleiman, M. S., Thoresen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immediate+hypothermia+reduces+cardiac+troponin+I+after+hypoxic-ischemic+encephalopathy+in+newborn+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+research%22%5BJournal%5D)">Immediate hypothermia reduces cardiac troponin I after hypoxic-ischemic encephalopathy in newborn pigs.</a> Pediatric research. 70, 352-356 (2011).</li>
<li>Bjorkman, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxic%2FIschemic+models+in+newborn+piglet%3A+comparison+of+constant+FiO2+versus+variable+FiO2+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+research%22%5BJournal%5D)">Hypoxic/Ischemic models in newborn piglet: comparison of constant FiO2 versus variable FiO2 delivery.</a> Brain research. 1100, 110-117 (2006).</li>
<li>Robertson, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Which+neuroprotective+agents+are+ready+for+bench+to+bedside+translation+in+the+newborn+infant%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+pediatrics%22%5BJournal%5D)">Which neuroprotective agents are ready for bench to bedside translation in the newborn infant.</a> The Journal of pediatrics. 160, 544-552 (2012).</li>
<li>Jacobs, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cooling+for+newborns+with+hypoxic+ischaemic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Cochrane+Database+Syst+Rev%22%5BJournal%5D)">Cooling for newborns with hypoxic ischaemic encephalopathy.</a> Cochrane Database Syst Rev. 1, CD003311(2013).</li>
<li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resuscitation+with+21+or+100%25+oxygen+in+hypoxic+nicotine-pretreated+newborn+piglets%3A+possible+neuroprotective+effects+of+nicotine%5BTitle%5D)+AND+%22Neonatology%22%5BJournal%5D)">Resuscitation with 21 or 100% oxygen in hypoxic nicotine-pretreated newborn piglets: possible neuroprotective effects of nicotine.</a> Neonatology. 93, 36-44 (2008).</li>
<li>Karlsson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+hypothermia+as+selective+head+cooling+or+whole+body+cooling+does+not+protect+brain+or+body+in+newborn+pig+subjected+to+hypoxia-ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+research%22%5BJournal%5D)">Delayed hypothermia as selective head cooling or whole body cooling does not protect brain or body in newborn pig subjected to hypoxia-ischemia.</a> Pediatric research. 64, 74-78 (2008).</li>
<li>Kovacs, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asphyxia-induced+release+of+alpha-melanocyte-stimulating+hormone+in+newborn+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Peptides%22%5BJournal%5D)">Asphyxia-induced release of alpha-melanocyte-stimulating hormone in newborn pigs.</a> Peptides. 22, 1049-1053 (2001).</li>
<li>Varvarousi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asphyxial+cardiac+arrest%2C+resuscitation+and+neurological+outcome+in+a+Landrace%2FLarge-White+swine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+animals%22%5BJournal%5D)">Asphyxial cardiac arrest, resuscitation and neurological outcome in a Landrace/Large-White swine model.</a> Laboratory animals. 45, 184-190 (2011).</li>
<li>Tammela, O., Pastuszko, A., Lajevardi, N. S., Delivoria-Papadopoulos, M., Wilson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+of+tyrosine+hydroxylase+in+the+striatum+of+newborn+piglets+in+response+to+hypocapnic+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neurochemistry%22%5BJournal%5D)">Activity of tyrosine hydroxylase in the striatum of newborn piglets in response to hypocapnic hypoxia.</a> Journal of neurochemistry. 60, 1399-1406 (1993).</li>
<li>Cote, A., Barter, J., Meehan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+metabolic+effects+of+repeated+hypoxemia+in+piglets%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+journal+of+physiology+and+pharmacology%22%5BJournal%5D)">Age-dependent metabolic effects of repeated hypoxemia in piglets.</a> Canadian journal of physiology and pharmacology. 78, 321-328 (2000).</li>
<li>Tichauer, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+severity+of+perinatal+hypoxia-ischemia+in+piglets+using+near-infrared+spectroscopy+to+measure+the+cerebral+metabolic+rate+of+oxygen%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+research%22%5BJournal%5D)">Assessing the severity of perinatal hypoxia-ischemia in piglets using near-infrared spectroscopy to measure the cerebral metabolic rate of oxygen.</a> Pediatric research. 65, 301-306 (2009).</li>
<li>Jasani, M. S., Salzman, S. K., Tice, L. L., Ginn, A., Nadkarni, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthetic+regimen+effects+on+a+pediatric+porcine+model+of+asphyxial+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Resuscitation%22%5BJournal%5D)">Anesthetic regimen effects on a pediatric porcine model of asphyxial arrest.</a> Resuscitation. 35, 69-75 (1997).</li>
<li>Chakkarapani, E., Thoresen, M., Liu, X., Walloe, L., Dingley, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenon+offers+stable+haemodynamics+independent+of+induced+hypothermia+after+hypoxia-ischaemia+in+newborn+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+care+medicine%22%5BJournal%5D)">Xenon offers stable haemodynamics independent of induced hypothermia after hypoxia-ischaemia in newborn pigs.</a> Intensive care medicine. 38, 316-323 (2012).</li>
<li>Munkeby, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+piglet+model+for+detection+of+hypoxic-ischemic+brain+injury+with+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+radiologica%22%5BJournal%5D)">A piglet model for detection of hypoxic-ischemic brain injury with magnetic resonance imaging.</a> Acta radiologica. 49, 1049-1057 (2008).</li>
<li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Newborn+piglets+exposed+to+hypoxia+after+nicotine+or+saline+pretreatment%3A+long-term+effects+on+brain+and+heart%5BTitle%5D)+AND+%22J+Matern+Fetal+Neonatal+Med%22%5BJournal%5D)">Newborn piglets exposed to hypoxia after nicotine or saline pretreatment: long-term effects on brain and heart.</a> J Matern Fetal Neonatal Med. 22, 161-168 (2009).</li>
<li>Munkeby, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resuscitation+with+100%25+O2+increases+cerebral+injury+in+hypoxemic+piglets%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+research%22%5BJournal%5D)">Resuscitation with 100% O2 increases cerebral injury in hypoxemic piglets.</a> Pediatric research. 56, 783-790 (2004).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Nedeniyle karmaşıklığına, açıklanan model sadece akredite tesislerde uygulanabilir ve hayvan araştırmalarında deneyimli. Yerel etik komiteler tarafından onaylanması öncesinde deneylerin başlamasından alınmalı ve optimum hayvan refahı her zaman sağlanmalıdır. Model test hayvanlarının hayatta kalma dayanmaktadır gibi, steril bir ortam enfeksiyonları önlemek için invazif prosedürler esnasında muhafaza edilmesi önemlidir. tüm anestezik ilaçların potansiyel nöro-koruyucu özelliklere varsa anestez...

Perinatal asfiksi Hipoksik-iskemik ensefalopati (HİE) ile ilişkili akut ve sıklıkla öngörülemeyen bir durumdur. Bu protokolün genel amacı, perinatal hipoksik iskemik ensefalopati bir domuz yavrusu hayatta kalma modeli ortaya koymaktır. Bu model yenidoğan beyin üzerinde ve kan, beyin omurilik sıvısı ve idrar gibi vücut sıvılarında nöropatolojisi deneysel tedaviler, manyetik rezonans görüntüleme ve spektroskopi (MRG ve MRS) ve biyobelirteçlerin hipoksi-iskemi çeşitli derecelerde etkisini araştırmak için kullanılabilir . modeli aynı zamanda küresel hipoksi-iskemi etkilenen bütün bunlar kardiyovasküler sistemi, solunum sistemi, böbrek ve karaciğer, soruşturma için yararlı olduğu kanıtlanmıştır. Perinatal asfiksi tehlikeye oksijen kaynağı intrapartum veya hemen doğum sonrası dönemde sonucudur. İntrapartum hipoksik olaylar dünyanın 2.9 değirmen yaklaşık dörtte, dünya çapında 0.660.000 ölüm her yıl için hesap2012 3 iyon neonatal ölümler. 2010 1,15 milyon bebeklerde doğum asfiksi 4 Aşağıdaki neonatal ensefalopati geliştiği tahmin edilmektedir. HIE gebelik 34 haftadan sonra doğan bebeklerde ensefalopati olarak tanımlanan sanayileşmiş dünyada 1-3 / 1000 canlı doğumda 5 oluşur ve 8.5 / 1000 canlı doğumda kadar gelişmekte olan ülkelerde 4. ölüm riski% 10-60 olduğunu ve hayatta kalanların% 30-100 6,7 nörolojik handikap riski. 50200000 sakatlık ayarlanmış yaşam yılları (DALY) intrapartum hipoksik olaylar 4 atfedilir. Halen HIE için destekleyici başka tek tedavi sonrası hipoksik hipotermi olduğunu. Böylece, tanı yöntemleri ve tedavi stratejileri gelişmeler HIE 8 yönetimini geliştirmek için gereklidir. Perinatal asfiksi ve neonatal beyin hasarı yönetiminde sonrası prognozu gelişmeler altta yatan hastalık mekanizmaları bilgisini genişleterek dayalı bird olası tedaviler. Farklı klinik olaylar HİE yol açabilir ve tek bir doğumevinde insidans düşük 5 olarak HIE hayvan modelleri özellikle yararlıdır. Prognostik ve tanılama araçları ve tedavi stratejileri, yeni test ederken biyolojik çeşitliliği etkisi minimize edilebileceği bir deney düzeneği, esastır. Bir hayvan modeli böylece uyarılan yaralanma ve hastalık ve İt&#39;s sonucu 9 katılan dinamik bir süreç altında yatan patolojik mekanizmaların anlaşılmasına katkıda, mümkün olduğunca yakından klinik durum yaklaştığı gerekir. Yenidoğan HIE hayvan modelleri kemirgenler, kuzu, domuz da dahil olmak üzere türlerin bir dizi ihtiva ederler. Buna karşılık, yeni doğmuş domuz yavrusu teslimat 11,12 zamanında boyutu ile ilgili olarak, kalp-damar sistemi 10 ve beyin vadeli insan bebeğe daha fazla benzerliği vardır. Piglet modelinde İzleme, enstrümantasyon ve sonuç değerlendirme tha benzerHİE ile bebeklerin klinik bakımda kullanılan t. Bu duruma göre, bu modelden yenidoğan bakım çevrilmesinden yüksek derecede vardır. Perinatal hipoksi ve HIE domuz yavrusu modelleri çok grup tarafından kullanılan ve alanda 13 bir dizi farklılık göstermektedir. Deneyin amacına göre, çok dikkat ilaçların seçimi ödenmelidir, hipoksi-iskemi, hakaret süresini ve şiddetini, post-hakaret resüsitasyon ve bakımı, ve sonuçları değerlendirme kontrol yöntemi uyarma yöntemi. Randomize bir çalışma tasarımı her zaman girişimsel çalışmalarda kullanılması gereken yanlılığı önlemek için. hipoksik iskemik yaralanma uyaran uygulanacak yöntem önemlidir. HİE giden küresel hipoksi sıklıkla beyin, kalp, akciğerler, böbrek ve karaciğer ile ilgili çoklu organ yetmezliği ile sonuçlanır. Değerlendirilen sonuçlarına göre, HIE modelleri fokal iskemi, örneğin güveniyor ziyade küresel hipoksi ve iskemi dayanmalıdır., Arabanın ligasyonu ileotid arterler 14. Ortalama kan basıncı&gt; 40 mm Hg 2 korurken yeni bir kağıt hipoksi kombinasyonu (FiO 2% 12) ve karotid arter sıkıştırma uyguladı. Başka bir grup negatif baz fazlalığı&gt; 20 mmol / L kadar% 8 O 2 küresel hipoksi kaynaklı veya arteriyel kan basıncı (MABP) &lt;15 mm Hg ortalama ve 4 saat 15 de hayvanların kurban. Hipoksi aynı zamanda kardiyak output ile titre edilmiştir MABP (bazal% 30-40) ve arteriyel pH (6,95-7,05), 16 (30-35 mm Hg). Bu raporda sunulan benzer aEEG bastırma ile titre küresel hipoksi-iskemi, modelleri elektrofizyolojik, klinik olarak ensefalopati gösterdi ve oksijensiz dönem bebek 17,18 bulunan durumuna nöropatolojik karşılaştırılabilir olması. indüklenen HIE derecesi önemlidir. HIE yararlı bir hayvan modeli, aynı zamanda, yeni dia test edilmesi için izin vermelidirusul ve tedavi seçenekleri gnostik. Bunu sağlamak için, modeller, yeni tedaviler değerlendirirken az alakalı olacağını çok az veya hiç tedavi potansiyeline sahip ciddi beyin hasarı gibi tedavi potansiyel var ılımlı HIE neden olmalıdır. Hipoksiye tolerans testi hayvanlar arasında önemli oranda değişmektedir. Önceki çalışmalar daha tutarlı bir beyin hasarı elde edilebileceğini göstermiştir ve daha fazla hayvan genlik entegre elektroensefalografi (aEEG) tarafından değerlendirilir her Piglet serebral yanıta göre uyarılan hipoksi bireyselleştirmekte ziyade boyunca bir dizi FiO 2 değeri kullanılarak 17,19 hayatta olduğunu hipoksik olayı. aEEG bastırma süresi 45 dakika aEEG bastırma &lt;artmaktadır 20 dk aEEG bastırma ve şiddetli nöbetler&gt; az sayıdaki histopatolojik değişikliklerle, beyin hasarının derecesine ilişkilidir. HİE için nöroprotektif tedavilerin bir yeni yorum davranışsal sonuç ölç sağlayan yaşam modelleri için ihtiyaç tespithayvan modellerinde 20 ures. Sunulan HIE Piglet modelinin sayısız avantajı vardır. Bu sonuç, insan fizyolojisine çevirmek için son derece muhtemeldir bir tür dayanmaktadır. AEEG Küresel hipoksi-iskemi modelleri çoklu organ yetmezliği ve hipoksi-iskemi titrasyon biyomarkerler, MR ve davranış ile ilgili zaman noktalarında değerlendirilebilir şekilde hayatta kalma klinik sonuçlarla ilgili beyin hasarı tutarlı bir derecede neden olur. Perinatal asfiksi ve HİE Piglet modelleri HIE patofizyolojisi içine geçerli içgörü önemli katkıda değil, aynı zamanda başarılı bir sonuçta insanlarda yeni tedaviler sonucu, klinik çalışmalar öncesinde var. Piglet model çalışmaları HIE 21 için bir tedavi olarak hipotermi kurulmasında önemli bir rol oynadı ve yenidoğan resüsitasyon araştırması 22 kullanılır. Asfiksi ve HİE, bir araştırma içinde yaparken çeşitli gruplar piglet modelleri kullanmışD çalışmaları hipotermi 23, a-melanosit uyarıcı hormon 24, kalp durması 25, tirozin hidroksilaz aktivitesi 26, tekrar hipoksik maruz 27, NMDA reseptör aktivitesi 14 içerir ve yakın kızıl ötesi spektroskopi 28. prosedür sırasında küçük ayarlamalar çok hafif ya da çok şiddetli beyin hasarı 29,2 ya sebep olabilir, bu raporda sunulan Piglet HIE modeli ile çalışmak teknik açıdan zor. Biz mevcut literatür önce yayınlanmış modeller üretmek için yeterli ayrıntı yoktu bulundu. Böylece, burada HIE çalışmaları için bu gelişmiş modeli kurmak için araştırmacıların sağlayan bu raporda bir domuz yavrusu 72 saat hayatta kalma modelinin kurulması için gerekli teknik prosedürlerin her adımını göstermektedir.

<table><tbody><tr><td>Sıcak dokunuşlu pediatrik battaniye</td><td>Covidien</td><td>5030840</td><td></td></tr><tr><td>Yapıştırıcı Apertrue Örtü</td><td>Bariyer</td><td>915447</td><td></td></tr><tr><td>Örtü (steril) 75x80 cm</td><td>Bariyer</td><td>800530</td><td></td></tr><tr><td>Neoflon</td><td>BD - Luer</td><td>391350</td><td></td></tr><tr><td>Laringoskop Miller</td><td></td><td>85-0045</td><td></td></tr><tr><td>Endotrakeal tüp 2,5 mm&nbsp;</td><td>Covidien</td><td>111-25</td><td></td></tr><tr><td>Endotrakeal tüp 3.0 mm manşetli</td><td>Unomedical</td><td>MM61110030</td><td></td></tr><tr><td>Endotrakeal tüp 3.5 mm manşetli</td><td>Unomedical</td><td>MM61110035</td><td></td></tr><tr><td>Anestezi makinesi</td><td>GE Healthcare</td><td>1009-9002-000</td><td></td></tr><tr><td>EEG - elektrotlar/tek kullanımlık deri altı iğne elektrodu</td><td>Cephalon</td><td>ACCE120550</td><td></td></tr><tr><td>EKG - elektrotlar</td><td>medtronic</td><td>3010107-003</td><td></td></tr><tr>MR <td>philips</td><td>ACCE120550</td><td></td><td>için EKG elektrotları</td></tr><tr><td>Arteriyel kan örnekleyici - aspiratör</td><td>Radyometre tıbbi ApS</td><td>956552</td><td></td></tr><tr><td>Poliüretan Umbilikal ven kateteri (5 Fr/Ch)</td><td>Covidien</td><td>8888160341</td><td></td></tr><tr><td>Poliüretan Umbilikal ven kateteri (3,5 Fr/ch)</td><td>Covidien</td><td>8888160333</td><td></td></tr><tr><td>Sütür seti (boyut 3-0)</td><td>Covidien</td><td>8886 623341</td><td></td></tr><tr><td>BD Omurga iğnesi 0.7x38mm</td><td>BD iğneleri</td><td>405254</td><td></td></tr><tr><td>%96 Azot / %4 oksijenli</td><td>Gaz Hava Sıvısı</td>, <td>sipariş</td><td></td>üzerine yapılır</tr><tr><td>NeuroMonitor (CFM) sistemi Natus</td><td>Medical Incorporated</td><td>OBM70002</td><td></td></tr></tbody></table>

yenidoğan hipoksik-İskemik ensefalopati a piglet modeli

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

Hipoksik-iskemik ensefalopati (HİE) neden Doğum asfiksi, dünya çapında 0.660.000 ölüm her yıl, dünyanın en 2,9 milyon neonatal ölümlerin yaklaşık dörtte oluşturuyor. HİE hayvan modelleri HIE patofizyoloji anlaşılmasına katkıda bulunmuştur ve bağlı perinatal asfiksi beyin hasarı meydana dinamik bir süreç sermiştir. Bu nedenle, hayvan çalışmaları taciz sonrası tedavi stratejileri için bir zaman penceresi sürmüşlerdir. Hipotermi pdiglet modellerinde HIE için bir tedavi olarak test edilmiştir ve daha sonra, klinik testlerde de etkili olmuştur. Modelin Varyasyonları adjuvan nöro-koruyucu yöntemler ve ksenon ve melatoninin domuz yavrusu çalışmaları çalışmada uygulanmıştır klinik faz yol açmıştır I ve II çalışmalarda 1,2. domuz yavrusu HİE modeli daha yenidoğan resuscitation- ve hemodinamik çalışmalar hem de hücresel seviyede serebral hipoksi araştırmalarda kullanılır. Bununla birlikte, teknik olarak zorprotokolde modeli ve varyasyonları ya çok hafif ya da çok şiddetli beyin yaralanmaya neden olabilir. Bu yazıda, yenidoğan HIE istikrarlı bir domuz yavrusu modelinin kurulması için gerekli teknik prosedürleri göstermektedir. İlk olarak, yenidoğan piglet (&lt;24 saat eski, ortanca ağırlık 1500 gr), anestezi entübe ve yenidoğan yoğun bakım ünitesinde bulunan kıyaslanabilir bir kurulumda izlenir. Küresel hipoksi-iskemi küresel hipoksi, hipotansiyon ile iskemi ve serebral hipoksi gösteren düz bir iz genlik entegre EEG (aEEG) ulaşmak için inspirasyon oksijen fraksiyonu düşürerek indüklenir. Hayatta kalma aEEG tepki ve kan basıncına göre oksijen ayarlayarak teşvik edilmektedir. Beyin hasarı 72 saat sonra histopatolojik ve manyetik rezonans görüntüleme ile ölçülür.

kaynaklı hakaret sırasında meydana beyinde hipoksi-iskemi etkileri aEEG izini kaydedilerek belgelenmiştir. Temsili aEEG izi, Şekil 6&#39;da gösterilmiştir. <img alt="Şekil 6," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig6.jpg" /> Şekil 6. Temsilcisi aEEG iz. Nedeniyle hipoksi-iskemi Düşük genlik. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52454/52454fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lüt...

Perinatal asfiksiyi takiben hipoksik-iskemik ensefalopati hayvan modelleri kullanılarak incelenebilir. Yenidoğan hipoksik-iskemik ensefalopatisinin bir domuz yavrusu modeli oluşturmak için gerekli prosedürleri gösteriyoruz.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Aşağıdaki deneyin genel amacı, perinatal hipoksik iskemik ensefalopati domuzcuk modelini göstermektir. Bu model daha sonra neonatal beyin hasarının araştırılmasında kullanılabilir. İlk olarak, domuzcuklar neonatal yoğun bakım ünitesine benzer bir düzende sedate edilir, ventile edilir ve izlenir.Bu makalede açıklanan teknik, hipoksiyi titre etmek için genlik entegre EEG kullanmaktadır. Her bir bireysel çalışmanın dayanıklılığına göre, hayatta kalma sağlanırken genlik entegre EEG baskılanmış halde tutularak hayvanlarda kontrollü bir şekilde hipoksi indüklenir. Bu dört günlük hayatta kalma modelinde, hayvanlar hipoksiden 72 saat sonra ötenazi ile uyutulur.Son olarak, deneyin amacına bağlı olarak; manyetik rezonans görüntüleme, nöropatoloji ve vücut sıvıları ile organların analizi kullanılarak serebral ve diğer sonuçlar değerlendirilebilir. Bu çalışmada, neonatal hipoksik iskemik ensefalopati domuz yavrusu modelini kurmak için gerekli olan teknik prosedürleri adım adım görselleştiriyoruz. Sinir gelişim sonucu, neonatal yoğun bakımın tüm alanlarında temel bir konudur.Yenidoğan beyin hasarının yönetimini iyileştirmek için iyi hayvan modelleri esastır. Görmek üzere olduğunuz model, hipoksi iskeminin klinik seyriyle iyi bir yakınlık göstermektedir. Bu nedenle, burada sunulan modelde sonuçlar klinik ortama iyi bir şekilde aktarılmaktadır; hipoksik insultun şiddetini ve zamanlamasını kontrol ederek biyolojik varyasyonu minimize ediyoruz.Klinik çalışmaların yorumlanmasını zorlaştıran bir unsur olarak, doğum sonrası 18 ila 24 saatlik Danimarka land race domuz yavrularını kullanıyoruz. Bunlar ortalama 1000 ila 2000 gram ağırlığındadır ve fizyolojileri birçok açıdan yeni doğan bebeklerinkiyle kıyaslanabilir. Bu model; manyetik rezonans görüntüleme, nöropatoloji ve beyin omurilik sıvısı, idrar ve kan gibi vücut sıvılarındaki biyobelirteçler üzerindeki tedavi etkilerini araştırmak için kullanılabilir.Çalışılması teknik açıdan zorlayıcı bir modeldir. Aşağıda, modelin tamamlanması için gerekli olan her bir adımı gösteriyoruz. Anestezinin başlatılması için gereken ekipmanlar; sevofluran uygulaması için bir maske, periferik ven kateteri, salin içeren şırıngalar, propofol, fentanil, kas gevşetici ve penisilindir.Ağzı açık tutmak için bir askı, pamuk uçlu bir sürücü, düz bıçaklı veteriner laringoskopu, Sloane sprey manşetli endotrakeal tüpler (SIIS 3 0 2 0.5), iki adet kendiliğinden şişen balon, manşet şişirme için enjektör ve stetoskop kullanılır. Maske yardımıyla VO florini uygulanır ve anestezinin derinliği izlenir. Protokole uygun olarak, bir kulak venine periferik ven kateteri yerleştirilir ve salan ile yıkanır.Bu aşamada hayvan sedatize edilmiştir ancak spontan olarak nefes almaktadır. İntravenöz anesteziye, kilo başına 30 mikrogram fentanyl verilerek başlanır ve entübasyondan hemen önce kilo başına beş miligram propofol ile kilo başına bir miligram broon uygulanır. Entübasyon işlemi için domuz yavrusu sırtüstü pozisyona getirilir.Endotrakeal tüpün uzunluğu, burun ucundan sternal çıkıntının üzerine kadar ölçülür. Tipik olarak 13 santimetre civarında olan bu işlemde, uzun epiglotu öne çekmek ve böylece kaldırılabilmesini sağlamak için bir pamuklu çubuk kullanılır. Laringoskop kullanımı, ses tellerindeki adenoid kıkırdakların tam olarak görülmesini sağlar.Spazmı önlemek için larinkse lokal olarak lidokain sprey uygulanır. Endotrakeal tüp, ses tellerinden yavaşça ilerletilir; önceden ölçülen mesafeye göre ilerletilen endotrakeal tüp, manuel ventilasyon için kendiliğinden şişen bir balona bağlanır. Endotrakeal tüp yerleşimi, simetrik göğüs hareketlerinin gözlemlenmesi, stetoskop ile oskültasyon, tüp içindeki buharın görsel olarak doğrulanması ve monitörde beyaz renkte görülen tid CO2 eğrisi ile teyit edilir.Son olarak, güvenli bir havayolu sağlamak için kaf şişirilir. Endotrakeal tüp, mekanik ventilasyon için bir ventilatöre bağlanır. Son olarak, kilogram başına saatte beş miligram propofol ve fentanil infüzyonu uygulanır.Saatlik kilo başına 10 mikrogram hızında başlanır. Ventilatör, kilo başına 10 mililitre tidal volüm verecek şekilde hacim kontrollü moda ayarlanır. Domuzcuğa EKG elektrotları, nabız oksimetresi, rektal sıcaklık probu ve izleme ekipmanları yerleştirilir.Santral arteriyel basınç izlemi için öncelikle nabız oksimetresi yerleştirilir, ardından rektal sıcaklık probu takılır. Elektrotların yerleştirilmesinden önce göğüs bölgesi tıraş edilir. Ekran; EKG, kalp hızı, santral arteriyel basınç ve oksijen satürasyonunu görüntüler.Umbilikal kateter yerleştirme için gerekli ekipmanlar; steril örtüler, bistüri, mikro enstrümanlar, 3.5 French boyutunda umbilikal kateterler, kan örneği alma ve yıkama için beş French şırıngalar ve umbilikal damarların görüntülenmesi için sütur setidir. Kordon cilt seviyesinden kesilir. Umbilikal ven resmin sağında, iki umbilikal arterden biri ise solda görülmektedir.İlk olarak, arter kateteri, domuzcuğun kilo cinsinden ağırlığının üçle çarpımına 10 santimetre eklenerek hesaplanan derinliğe kadar yerleştirilir. Doğru konumlandırma, kan geri çekilerek doğrulanır. Ardından, venöz kateter beş santimetrelik bir derinliğe yerleştirilir.Kateterler sütürle sabitlenir. Elektrotların yerleştirilmesi için üçlü sütür kullanılarak kafa tıraş edilir. Genlik entegre EEG izlemi için parietal elektrotlar aralarında en az iki ila dört santimetre olacak şekilde, referans elektrot orta hatta ve toprak elektrotu ise kafanın herhangi bir yerine yerleştirilmelidir.Empedans testi, iyi sinyal-gürültü oranına sahip, doğru yerleştirilmiş dört elektrot olduğunu göstermektedir. Ekranın alt kısmında gerçek zamanlı EEG görüntülenirken, üst ekran zamanla sıkıştırılmış genlik entegre EEG'yi göstermektedir; domuz yavrusunun hipoksi indüksiyonu öncesinde 60 dakika boyunca dinlenmesine izin verilir. Hipoksi, nitrojen ve %4 oksijen karışımı ileten bir ventilatöre geçilerek başlatılır.Belirgin hipoksiye karşılık gelen genlik entegre EEG'de düz bir iz elde etmek ortalama iki dakika sürer. Beyinde 45 dakika boyunca lösemi. Solunan oksijen fraksiyonu düzenlenir.Hipoksi sırasında düz bir EEG amplitüdünü yedi mikrovoltun altında tutmak için, domuz yavrusu başlangıçta kalp atış hızını artırarak kompanse eder. Hipoksi devam ettikçe, domuz yavrusu dekompanse olmaya başlar ve ortalama arteriyel basınç düşer. Bu noktada, sağkalımı sağlamak için inspire edilen oksijen fraksiyonunun ayarlanması kritiktir.45 dakika sonra, solunan oksijen fraksiyonu %21'e yükseltilerek beyin aktivitesinin artması sağlanır. Hipoksi sonrası domuzcuk ekstübe edilir ve sonraki dört gün boyunca uyanmasına izin verilir. Domuzcuk, beslemesini gerçekleştiren ve günlük olarak nörolojik skorlamasını yapan deneyimli bir hayvan teknisyeni tarafından bakılır.Yedi buçuk saat sonra, domuza sedasyon uygulanır ve ventile edilir. Beynin incelenmesinde manyetik rezonans görüntüleme ve spektroskopi yeniden güçlü araçlar olarak kullanılır. Manyetik rezonans görüntüleme, nöropatolojik inceleme ile tamamlanır.Beynin her bölgesi, deneyimli bir nöropatolog tarafından dikkatle diseke edilerek incelenir. Bu videoyu izledikten sonra, neonatal hipoksik iskemik ensefalopati domuz yavrusu modelinin nasıl oluşturulacağı konusunda iyi bir anlayış kazanmış olmalısınız. Bu model ile neonatal beyin hasarının teşhis ve tedavisine ilişkin ilgili sorular araştırılabilir.Nihayetinde, etkilenen bebeklerin yönetiminin optimize edilmesi.

a-piglet-model-of-neonatal-hypoxic-ischemic-encephalopathy

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Hipoksik-iskemik beyin hasarı için postnatal sıçan modelinde, insan yenidoğan hipoksik iskemik ensefalopati (HIE) köklü bir model. Bu makalede, doğum sonrası sıçan Yavrularda HIE modeli açıklanmaktadır.

Perinatal İskemi Hipoksik İskemik Ensefalopati Modeli

Büyük hayvan modellerinde neonatal asfiksi fizyoloji ve farmakoloji sınavında iyi translasyonel değerlere sahiptir. Yenidoğan domuz kullanarak, sistemik ve bölgesel hemodinami, biyokimyasal ve patolojik yollar ve korelasyon ile oksijen taşınması eğitim avantajlarına sahip neonatal asfiksi taklit etmek için bir deney protokolü geliştirmektir.

Yenidoğan Asfiksi Bir Domuz Modeli

Video, yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarını incelemek için bir fare modeli oluşturma prosedürünü göstermektedir. Cerrahi olarak iskemiyi indükleme ve beyin hasarını şiddetlendirmek için hayvanı hipoksiye maruz bırakma adımlarını ana hatlarıyla belirtir. Son olarak, ortaya çıkan beyin lezyonlarının nasıl değerlendirileceğini gösterir ve fare modelinin daha fazla bilimsel araştırma için hazırlanmasını sağlar.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Beyin Hasarının Fare Modelinin Oluşturulması

Kaynak: Jantzie, L. L., et. al. Sıçanlarda Prenatal Hipoksi-iskemi ile İntramniyotik Lipopolisakkarit Kullanılarak Prematüre Ensefalopatisinin Modellenmesi. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, uterus kan akışını kısıtlayarak ve LPS enjekte ederek, erken doğum çalışmalarıyla ilgili nöroinflamasyonu ve bozulmuş beyin gelişimini modelleyerek fetal sıçanlarda hipoksik-iskemik ve inflamatuar durumları indüklemek için bir protokol göstermektedir.

Prenatal Sıçanlarda Ensefalopatiyi Modellemek için Hipoksik-İskemik ve İnflamatuar Durumların İndüklenmesi

Prematüre ensefalopatisi, erken doğumdan kaynaklanan yaralanma ile ilişkili merkezi sinir sistemi anormalliklerini kapsar. Bu rapor, koryoamniyoniti taklit eden in utero geçici sistemik hipoksi-iskemi ve intra-amniyotik lipopolisakkarit uygulamasının (LPS) klinik olarak anlamlı bir sıçan modelini ve enfeksiyöz uyaranların ve plasental underperfüzyonun CNS gelişimi üzerindeki ilişkili etkisini açıklamaktadır.

Prematüre Modelleme Ensefalopati Sıçanlarda İçi amniyotik Lipopolisakkarid ile Prenatal Hipoksi-iskemi kullanma

Anesteziye bağlı gelişme nörotoksisitesi (AIDN) araştırmaları, insanlar için geniş ölçüde uygulanmayan kemirgenler üzerine yoğunlaşmıştır. İnsan olmayan primat modelleri daha alakalı, ancak maliyet önleyici ve deney için kullanımı zor. Domuz yavrusu aksine, anestezik nörotoksisite çalışması için klinik açıdan önemli, pratik bir hayvan modeli idealdir.

Anesteziye Bağlı Gelişimsel Nörotoksisite (AIDN) Çalışması İçin Bir Piglet Modelinin Kullanımı: Bir Translasyonel Sinirbilimi Yaklaşımı

Bu makalede hipoksi-iskemi geçiren yenidoğan farelerde birden fazla derinlik elektrodu kullanılarak sürekli video EEG kayıtları için bir yöntem açıklanmaktadır.

Yenidoğan Farelerde Hipoksi-İskemi Sırasında Sürekli Video Elektroensefalogram

Bu domuz yavrusu modeli, cerrahi enstrümantasyon, kalp durmasına kadar boğulma, resüsitasyon ve resüsitasyon sonrası gözlemi içerir. Model, hayvan başına çoklu örneklemeye izin verir ve sürekli invaziv arteriyel kan basıncı, EKG ve non-invaziv kardiyak debi monitörizasyonu kullanarak, perinatal asfiksi ve yenidoğan kardiyopulmoner resüsitasyonunda hemodinamik ve kardiyak patofizyoloji hakkında bilgi sağlar.

Kardiyak Arrest, Resüsitasyon ve Spontan Dolaşımın Geri Dönüşü Sonrası Kardiyak Hasar ve Hemodinamiği İncelemek İçin Bir Domuz Yavrusu Perinatal Asfiksi Modeli

Bu protokol, bronkopulmoner displazinin moleküler tetikleyicilerinin anlaşılmasını kolaylaştırmak ve terapötik translasyonu geliştirmek için yetersiz yüzey aktif madde miktarı, hiperoksi, yüksek basınçlı ventilasyon ve inflamasyon dahil olmak üzere erken akciğerde meydana gelen erken patojenik olayları modelleyen akut akciğer hasarının yenidoğan domuz yavrusu modelinin geliştirilmesini açıklar.

Prematüre Bebek Akciğerlerinin Erken Ortamını Yeniden Yaratan Yenidoğan Domuz Yavrusu Akut Akciğer Hasarı Modelinin Geliştirilmesi

Kronik prostatit / kronik pelvik ağrı sendromu bir klinik öncesi modelini teşvik etmek amacıyla yenidoğan anne ayrılık, - Biz bir erken yaşam stresi paradigmasını uygulanan erkek C57BL / 6 farelerin prostat perigenital mekanik duyarlılık ve mast hücre aktivasyonunu ölçüyorlar.

Yenidoğan Anneden Ayrılma Fare Modelinde perigenital Duyarlılık ve Prostat Mast Hücre aktivasyonu Değerlendirilmesi

Öğrenin yenidoğan hipoksik-iskemik ensefalopati için domuz yavrusu modeli kurmayı. Amplitude integrated EEG ile kontrollü hipoksi indüksiyonu ve beyin aktivitesi izleme yöntemlerini keşfedin.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

Daha fazla video keşfet