Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

Aşağıdaki deneyin genel amacı, perinatal hipoksik iskemik ensefalopatinin bir domuz yavrusu modelini göstermektir. Bu model daha sonra yenidoğan Beyin hasarının araştırılması için kullanılabilir. İlk olarak, Domuz yavruları yenidoğan yoğun bakım ünitesininkiyle karşılaştırılabilir bir kurulumda sakinleştirilir, havalandırılır ve izlenir.

Bu makalede açıklanan teknik, hipoksiyi titre etmek için genlik entegre EEG'yi kullanır. Her bir çalışmanın esnekliğine göre, hayvan hipoksisi kontrollü bir şekilde indüklenir, genlik entegre tutulur, hayatta kalmayı sağlarken EEG baskılanır. Bu dört günlük hayatta kalma modelinde, hayvanlar hipoksiden 72 saat sonra ötenazi yapılır.

Son olarak, deneyin amacına göre, manyetik rezonans görüntüleme, nöropatoloji ve vücut sıvılarının ve organlarının analizi kullanılarak serebral ve diğer sonuçlar değerlendirilebilir. Bu çalışmada, neonatal hipoksik iskemik ensefalopatinin bir domuz yavrusu modelini oluşturmak için gerekli teknik prosedürleri adım adım görselleştiriyoruz. Sinir gelişimsel sonuçları, yenidoğan yoğun bakımının tüm alanlarında önemli bir endişe kaynağıdır.

Yenidoğan beyin hasarının yönetimini iyileştirmek için iyi hayvan modelleri şarttır. Birazdan göreceğiniz model, hipoksi isch'in klinik seyrine iyi bir yaklaşımdır. Bu nedenle, sonuçlar burada sunulan modeldeki klinik ortama iyi bir şekilde çevrilir, hipoksik hakaretin şiddetini ve zamanlamasını kontrol eder, böylece biyolojik varyasyonu en aza indiririz.

Klinik çalışmaların yorumlanmasını zorlaştırarak, doğum sonrası 18 ila 24 saat arasında Danimarka kara yetiştirme domuz yavrularını kullanıyoruz. Ortalama 1000 ila 2000 gram ağırlığındadırlar ve fizyolojileri birçok yönden yeni doğan bebeğinkiyle karşılaştırılabilir. Bu model, beyin omurilik sıvısı, idrar ve kan gibi vücut sıvılarındaki manyetik rezonans görüntüleme, nöropatoloji ve biyobelirteçler üzerindeki tedavi etkilerini araştırmak için kullanılabilir.

Çalışmak için teknik olarak zorlu bir modeldir. Aşağıda, modelin tamamlanması için gerekli olan her adımı gösteriyoruz. Anesteziyi başlatmak için gerekli ekipman, sevo flor uygulaması için bir maske, salin, propofol, fentanil, kas gevşetici ve penisilin içeren periferik ven kateter şırıngalarıdır.

Ağzı açmak için bir askı, pamuk uçlu bir takas ve düz bıçaklı veteriner laringoskopu Sloane sprey manşetli endotrakeal tüpler, SIIS 3 0 2 0.5 ve manşet şişirme ve stetoskop için iki oh kendiliğinden şişen torba şırıngası. VO flor bir maske kullanılarak uygulanır ve anestezi derinliği izlenir. Protokole göre, bir kulak damarına periferik ven kateteri yerleştirilir ve salan ile yıkanır.

Bu noktada, hayvan sakinleştirilir, ancak kendiliğinden nefes alır. İntravenöz anestezi, entübasyondan hemen önce kilo başına 30 mikrogram fentanil, ardından propofol, kilo başına beş miligram ve broon kilo başına bir miligram verilerek başlatılır. Entübasyon için, domuz yavrusu sırtüstü pozisyonda yer değiştirir.

Endotrakeal tüpün uzunluğu, burnun ucundan sternal dürtmenin üstüne kadar ölçülür. Tipik olarak yaklaşık 13 santimetre, uzun epiglotu kaldırılabilmesi için öne doğru çekmek için bir pamuk takası kullanılır. Ses tellerindeki geniz eti kıkırdaklarının tam olarak görülmesini sağlayan laringoskopta kullanılır.

Spazmı önlemek için sinüs spreyi gırtlakta lokal olarak uygulanır. Endotrakeal tüp, ilerletildiğinde ses telleri boyunca yavaşça ileri sürülür, önceden ölçülen mesafeye göre, endotrakeal tüp manuel ventilasyon için kendi kendine şişen bir torbaya bağlanır, doğru. Endotrakeal tüp yerleşimi, simetrik göğüs hareketi, stetoskop ile oskülasyon, tüpteki sisin görsel olarak doğrulanması ve monitörde beyaz olarak görüldüğü gibi tid CO2 eğrisi gözlemlenerek doğrulanır.

Son olarak, güvenli bir hava yolu sağlamak için manşet şişirilir. Endotrakeal tüp şimdi mekanik ventilasyon için bir ventilatöre bağlanmıştır. Son olarak, propofol infüzyonu, saatte kilo başına beş miligram ve fentanil.

Saatte kilo başına 10 mikrogram başlatılır. Ventilatör, izleme için kilo başına ekipman başına 10 mililitrelik tidal hacimler sağlayan hacim kontrollü bir moda ayarlanmıştır. Domuz yavrusu, EKG elektrotları, nabız oksimetresi, rektal sıcaklık probu ve ekipmandır.

Merkezi arteriyel basıncın izlenmesi için, nabız oksimetresi yerleştirilir, ardından bir rektal sıcaklık probu yerleştirilir. Elektrot yerleştirilmeden önce göğüs tıraş edilir. Ekranda EKG ve kalp atış hızı, merkezi arter basıncı ve oksijen satürasyonu görüntülenir.

Göbek kateterlerinin yerleştirilmesi için gerekli ekipmanlar steril örtü neşteri, mikro aletler, göbek kateterleri boyutu 3.5 Fransız ve kan örneklemesi için beş Fransız şırınga ve göbek damarlarının görüntülenmesi için kızarma sütürü setidir. Kordon cilt hizasında kesilir. Resmin sağında göbek damarı, solunda ise iki göbek atardamarından biri görülmektedir.

İlk olarak, arteriyel kateter, domuz yavrusunun kilo çarpı üç artı 10 santimetre cinsinden ağırlığına eşit bir derinliğe yerleştirilir. Kanın geri çekilmesiyle doğru pozisyon doğrulanır. Daha sonra, venöz kateter beş santimetre derinliğe yerleştirilir.

Kateterler dikilerek sabitlenir. Üç sanatlı bir sütür kullanılarak, elektrotların yerleştirilmesi için kafa traş edilir. Genliğe entegre EEG monitörizasyonu için, parietal elektrotlar aralarında en az iki ila dört santimetre olacak şekilde, referans elektrot orta hatta ve toprak elektrodu başın herhangi bir yerine yerleştirilmelidir.

İktidarsızlık testi, iyi bir sinyal-gürültü oranına sahip, doğru yerleştirilmiş dört elektrotu ortaya çıkarır. Ekranın alt kısmı gerçek zamanlı EEG'yi gösterirken, üst ekran zaman sıkıştırılmış genlik entegresini, EEG'yi gösterir, domuz yavrusunun hipoksi indüksiyonundan önce 60 dakika dinlenmesine izin verilir. Hipoksi, nitrojen ve% 4 oksijen karışımı sağlayan bir ventilatöre geçilerek başlatılır.

Önemli hipoksiye karşılık gelen amplitüd entegre EEG'de düz bir iz elde etmek ortalama iki dakika sürer. 45 dakika boyunca beyinde lösemi. İnspira edilen oksijenin fraksiyonu düzenlenir.

Hipoksi sırasında yedi mikrovoltun altında düz bir EEG genliğini korumak için, domuz yavrusu başlangıçta kalp atış hızını artırarak telafi eder. Hipoksi devam ettikçe, domuz yavrusu dekompanse olmaya başlar ve ortalama malzeme basıncı düşer. Bu noktada, hayatta kalmayı sağlamak için solunan oksijenin fraksiyonunu ayarlamak çok önemlidir.

45 dakika sonra, solunan oksijenin oranı %21'e yükselir ve bu da beyin aktivitesinin artmasına neden olur. Hipoksiyi takiben, domuz yavrusu ekstübe edilir ve önümüzdeki dört gün boyunca uyanmasına izin verilir. Domuz yavrusu, domuzu besleyen ve günlük olarak nörolojik olarak puanlayan deneyimli bir hayvan teknisyeni tarafından bakılır.

Yedi iki saatte, domuz sakinleştirilir ve havalandırılır. Yine, genetik rezonans görüntüleme ve spektroskopi beyni incelemek için güçlü araçlardır. Manyetik rezonans görüntüleme nöropatolojik inceleme ile tamamlanır.

Beyin, deneyimli bir nöropatolog tarafından araştırılan her alanda dikkatlice incelenir. Bu videoyu izledikten sonra, yenidoğan hipoksik iskemik ensefalopatisinin domuz yavrusu modelinin nasıl oluşturulacağını iyi anlamış olmalısınız. Bu model ile neonatal beyin hasarının tanı ve tedavisi ile ilgili sorular araştırılabilir.

Sonuç olarak, etkilenen bir Bebeğin yönetimini optimize etmek.