Epoch Kablosuz Verici Sisteminin Kullanılması İnsan Hastalığı Küçük Kemirgen Modelleri Uzun süreli Sürekli EEG İzleme

Bu prosedürün genel amacı, sıçanlar ve fareler gibi kemirgenlerde yüksek kaliteli EEG kaydetmek için epik vericiyi etkili bir şekilde implante etmektir. Bu, önce kafatasının yüzeyinin açığa çıkarılması ve kurutulmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adım, vericinin, elektrotların ve gerekli kemik vidalarının yerleştirilmesi için kafatasında delikler açmaktır.

Daha sonra kemik vidaları yerleştirilir ve verici elektrotlar hizalanır. Son adım, elektrotları yerleştirmek ve vericiyi akrilik yapıştırıcılarla kafatasına sabitlemektir. Sonuç olarak, nöbetler ve interiktal sivri uçlar gibi tüm EEG olaylarını yakalamak için EEG aktivitesini 7/24 izlemek için veri toplama videosu ve inceleme yazılımı kullanılır.

İmplantasyon adımlarının öğrenilmesi zor olduğu için bu yöntemin görsel gösterimi çok önemlidir. Kemirgen kafatasının boyutu, karmaşık ancak eğitilebilir bir cerrahi prosedürle sonuçlanır. Bu sunumun temel amacı, bu implantasyon prosedürünü basitleştirmek ve kolayca tekrarlanabilir hale getirmektir.

Bu yöntem için ilk olarak, epilepsi hayvan modellerinden uzun süreli elektrografik kayıtlar yapmakta zorluk çektiğimizde aklımıza geldi. Konvülsif nöbetler sırasında, kablolu kayıtlar elektriksel artefaktlara ve elektrot kafatası arayüzü üzerinde istenmeyen strese eğilimlidir. Kablolu kayıt sistemleri, hayvanın ipi çiğnemesi ve implantı kaşıması nedeniyle arızalanabilir.

Bu kablosuz sistem, altı aya kadar kesintisiz EEG kayıtları sağlarken tüm bu sorunları giderir. Ameliyata hazırlanırken, vericiyi tamamen sterilize ettiğinizden, %70 etanole batırdığınızdan, steril tuzlu suya batırdığınızdan ve steril tuzlu suya batırdığınızdan emin olun. İhtiyaç duyulana kadar orada bırakın.

Son hazırlık, ameliyat bölgesindeki her şeyin sterilize edildiğinden emin olmaktır. Çevredeki alanı ve ekipmanı %70 etanol ile püskürtün ve silin. Hayvanı uyuşturduktan sonra, hayvan uyuşturulurken ameliyata başlamadan önce ayak parmağındaki bir çimdiklemeye yanıt verilmediğini doğruladığınızdan emin olun.

Bunu her 15 dakikada bir yapın. Anestezi uygulanan hayvan önce stereotaksik bir çerçevede yerine sabitlenmelidir. Kulak çubukları kullanın, ancak genç yavruların cildi çok yumuşak olduğu için çok fazla sıkmayın.

Sabitlendikten sonra, %3 iso flor vermek için bir burun konisi uygulayın. Hayvanı sıcak tutmak için, altında 37 santigrat derecede bir ısıtma yastığı bulundurun. Yetişkin hayvanlar için Ayrıca gözleri yağlayın.

Şimdi kesi bölgesini sterilize edin Önce kafa derisini% 70 etanol ile temizleyin ve ardından Betadine ile cildi dairesel hareketlerle ovalayın. Sonra hayvanı örtün. Kafa derisinde, kulakların biraz arkasında, orta hat boyunca çok dikkatli bir şekilde bir kesi yaparak başlayın.

Kesiği yaklaşık iki santimetre uzatın. Genç yavrular çok yumuşak kafatasıdır. Ayrıca, bu kesiyi tek bir kesikte yapın, böylece daha hızlı iyileşir.

Böylece kafatasını ortaya çıkarın. Daha sonra, anevrizma klipslerini kullanarak kafatasını kavrayın ve vericinin takılacağı bir alanı açığa çıkarın ve kurulayın. Unutmayın, genç yavrularda kafatası kemikleri kaynaşmaz.

Ardından vericinin takılacağı yerde kafatasını kurutun Güçlü bir yapışkan bağ için, kafatasındaki kanamayı durdurmak için bir elektrokoter kalemi kullanın. Şimdi anatomik işaretler ve bir beyin atlası kullanarak, kayıt için frez deliğini yerleştirmek için kafatası konumunu belirleyin. Daha sonra Dremel ve frez tipi bir uç kullanarak, kayıt konumunda çapı 300 mikrondan fazla olmayan iki delik oluşturun.

Ardından, beyinciğin üzerine ve Lambda'nın arkasına bir frez deliği yerleştirin. Referans elektrodu için, vericinin kablolarının frez deliklerine hizalandığını kontrol edin. Değilse, vericinin oturup oturmadığını kontrol edin ve ince uçlu forseps kullanarak elektrotları deliklerle aynı hizaya gelecek şekilde hafifçe bükün.

Şimdi bunları cerrahi makas kullanarak istenen uzunlukta kesin. EEG kayıtları için duranın üzerine kadar uzanmalı veya tanımlanmış beyin yapılarına kadar nüfuz etmelidirler. Şimdi, elektrotları kaplamadan, vericiye tamamen kaplayacak kadar siyanoakrilat uygulayın.

Sadece elektrotların üzerine tutkal almayın. Verici yüzey kayıtları alacaksa, vericiyi deliklere indirin ve hafif bir basınç uygulayarak yaklaşık bir dakika yerinde tutun. Kayıt derin beyin yapılarından alınacaksa, vericiyi bir kanül tutucuya monte edin ve stereotaksik bir kol üzerine yerleştirin.

Verici elektrotlarını tutkal kontaminasyonu olmadan frez deliklerine yerleştirmek çok önemlidir. Kirlenme, sinyalin bozulmasına neden olur. Ardından, vericinin ekini sağlamlaştırmak için daha fazla siyanoakrilat jel ekleyin.

Yapıştırıcıyı vericinin duvarlarını kaplayan daireler halinde uygulayın. Antenin üzerini kapatmadığınızdan emin olun. Ardından, bir şırıngadan vericinin tabanının etrafına 100 mikrolitre kimyasal hızlandırıcı uygulayın.

Çevre dokularla temasını önleyin. Hızlandırıcıyı çıkarmak için, alanı yarım mililitre steril tuzlu su ile iyice yıkayın. Şimdi vericinin etrafındaki cildi örtmeden dikin.

Vericinin üst kısmı harici hale getirilmelidir. İyi sinyal iletimi için Vicryl veya ipek sütür kullanın. Hassas yavrularla çalışırken, cilt, verici ve çevresindeki yapıştırıcı etrafında makul ölçüde sıkı olmalıdır.

Şimdi hayvanı çerçeveden ılık bir battaniyeye aktarın İyileşme için, ameliyat sonrası bakım detayları metin protokolünde verilmiştir. İmplante edilmiş tek bir hayvanı bir kayıt odasına aktarın. Bir seferde yalnızca bir implante edilmiş hayvan izlenebilir, ancak implante edilmemiş diğer hayvanlar da onunla birlikte olabilir.

Kayıt cihazını kurmak için güç kaynağını alıcı tabanına bağlayın. Ardından, tabanı BNC'ler aracılığıyla bir veri toplama sistemine bağlayın. Şimdi kafesi sinyal alıcı tabanına yerleştirin.

Sinyal lambası yanmalıdır. Veriler artık kaydedilebilir. İlk olarak, alıcı tabanını bir reklam dönüştürücüye bağlayın ve dönüştürücüyü bir bilgisayara bağlayın.

Yazılım ayarlarını kullanarak, kaydın örnekleme hızını saniyede 500 olarak ayarlayın. Verici, 0.1 ila 100 hertz arasında EEG sinyalleri gönderir ve her iki uçta da VE roll-off başına sekiz desibel ile Nyquist'in üzerinde uygun bir örnekleme hızı ayarlamak çok önemlidir. Saniyede 500 numune öneriyoruz Hayvanlar kaydedilirken stres ve dehidrasyon belirtileri için saat.

Yavrular odada iki saatten fazla kalmamalıdır. Verici, minimum zarar veren bir form faktörü ile tasarlanmıştır ve uzun pil ömrü, pil kapasitesine bağlı olarak altı ay boyunca sürekli olarak kayıt yapılabilir. P 12 ve daha büyük fareler, P altı kadar genç sıçanlar gibi vericiyi çok iyi tolere etti.

Kafatasına siyanoakrilat bağlanması, hayvanın gelişimi boyunca yetişkinliğe kadar sürekli veri toplanmasına izin veren gelişimi engellemedi Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa sadece birkaç dakika içinde yapılabilir. Bu prosedürü takiben elektrotları tutkal kontaminasyonundan uzak tutmanın önemli olduğunu unutmayın. Kantitatif nöbet tespit analizi gibi diğer yöntemler, status epileptikusun zaman, seyri ve şiddeti gibi ek soruları yanıtlamak için gerçekleştirilebilir.

Bu teknik, epilepsi araştırmacılarının yenidoğan nöbetlerini ve perinatal inmenin kemirgen modellerini incelemelerinin önünü açacaktır.