RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/52927-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Burada, dişi ergen farelerde aktiviteye dayalı anoreksiyayı (ABA) indüklemek için bir protokol sunuyoruz. ABA, çalışan bir tekerleğe erişimi olan kemirgenlere gıda kısıtlaması getirilerek uyandırılan bir hiperaktivite durumudur. Bu fenomen, anoreksiya nervozanın altında yatan nörobiyolojiyi incelemek için bir model olarak kullanılmaktadır.
Bu prosedürün genel amacı, ergen dişi farelerde aktiviteye dayalı anoreksiyayı indüklemektir. Bu, önce fareleri bir koşu tekerleğine sokarak ve en az üç gün boyunca koşu tekerleği aktivitelerini sürekli olarak izleyerek gerçekleştirilir. Daha sonra, M'ler kısıtlı bir gıda erişim programına alınır ve gönüllü tekerlek çalışmalarındaki değişiklikler kaydedilir.
Sonuç olarak, bu aktiviteye dayalı anoreksiya modeli, nörobiyolojik değişikliklerin, yiyeceğe kısıtlı erişim verildiğinde bir hayvanın davranışındaki değişikliklerle ilişkili olduğunu gösterebilir. Bu aktiviteye dayalı anoreksiya modelinin, anoreksiya nervoza tedavisinin iyileştirilmesine yardımcı olacağını umuyorum, çünkü anoreksiya nervozaya karşı direnç ve savunmasızlığın altında yatan nörokimya ve nöroanatomideki ayrı bireysel farklılıkları tanımlayacaktır. Bu yöntem anoreksiya nervoza hakkında bilgi verebilse de, anksiyete ile komorbiditesi olan diğer hastalıklara da uygulanabilir.
Genel olarak, bireysel gelir, bu yöntem mücadele edecektir çünkü her hayvanın AIA'ya dayalı aktiviteye karşı savunmasızlığı oldukça değişkendir. Bu nedenle, hayvanın kilo kaybını, yemeğini ve aktivitesini yakından izlemek gerekir veya hayvanlar kuruluma başlamak için başına yapabilir. Bilgisayarı ve USB hub'ı hayvan odasına, akan su ve yaya trafiğinden uzağa, ancak çalışan tekerleklerin verici menziline koyun.
Ayrıca, hub üzerindeki anahtarları kullanarak bilgisayar ve USB hub'ı için bir yedek güç kaynağı kullanın. Kanal numaralarını, izleyeceği tüm koşu tekerleklerinin kanal numaralarına karşılık gelecek şekilde ayarlayın. Şimdi koşu tekerleği yöneticisi yazılımını başlatın ve yazılımın her vericiyi tanıdığını onaylayın.
Her tekerlek program penceresinde listelenecektir. Tekerlek sensörleri başlığı altında. Yazılım, her tekerleğe otomatik olarak bir kimlik numarası verecektir.
Bu numarayı direksiyona not etmek faydalı olabilir. Bir tekerlek tanınmazsa, tekerleğin pillerini değiştirin. Daha sonra, her fare deneği için yatak takımı, yuvalar, suya ücretsiz erişim ve çalışan bir tekerlek ile bir kafes hazırlayın.
Koşu tekerleği kafes duvarlarına, yiyecek sepetine veya kafes üstüne dokunmadan serbestçe hareket etmelidir. Ayrıca, yazılımın tekerlek sayılarını güncellediğinden emin olun. Hayvanları alıştırmak için, her fareyi ayrı ayrı çalışan bir tekerleği olan bir kafese yerleştirin ve kafeste yaklaşık 100 gram kuru mamaya ve 50 gram ıslak mamaya erişin.
Yazılımda. Alımı başlat'ı seçerek veri alımına ve depolamaya başlayın. Dosya menüsünden, durdurulana kadar verilerin kaydedileceği dizini seçin.
Yazılım, ışık döngüsünün karanlık aşamasının başlamasından hemen önce her gün sürekli olarak kayıt yapacaktır. Hayvanı tartın, ıslak mamayı tartın ve kuru mamayı tartın. 50 gramın altında içeriyorsa kuru gıda kabını tekrar doldurun ve ıslak gıda kabını değiştirin.
Yiyecekler kurursa veya yatak takımlarıyla kirlenirse, aynı anda tekerlek sayısını manuel olarak kaydedin. Yiyecek kısıtlamasının ilk gününde dijital verileri yedeklemek için, günün ışık döngüsü bölümünün ortasında tüm ıslak ve kuru yiyecekleri kafesten çıkarın. Daha sonra karanlık zamanın başlangıcında, hayvanın ağırlığını ve tekerlek sayısını kaydedin.
Daha sonra hazneye yaklaşık 50 gram kuru yiyecek koyun ve bir teknede beş gram ıslak yiyecek sağlayın. Ardından, her hayvan için yatak takımları ve yuvalar içeren yeni bir kafes hazırlayın. Yemek transferi ile iki saat sonra, çalışan tekerlek ve hazırlanan kafese birkaç avuç kirli yatak takımı.
Fareleri yiyeceksiz yeni kafeslere aktarın. Yiyeceğe erişim süresinin sonunda, UNE gıdalarının ağırlığını ve tekerlek sayısını kaydedin. Deney süresince bu işlemi günlük olarak tekrarlayın.
Herhangi bir noktada bir hayvan başlangıç ağırlığının %75'inin altına düşerse, onu deneyden çıkarın. Hayvanın deneyden çıkarılması gerektiğini gösterecek aşırı açlığın diğer belirtileri arasında kambur bir duruş ve kafesin etrafında hareket edememe yer alır. Hayvan dokunulamayacak kadar soğuk olabilir ve iki saatlik yiyecek erişimi sırasında yemek yiyemez.
Üç günlük yiyecek kısıtlamasından sonra deneyi sonlandırın. Ya dokuları toplamak için hayvana ötenazi yapın ya da hayvanların iyileşmesine izin verin. Yazılımda daha fazla davranışsal test için, dosya menüsü altındaki edinimi sonlandır seçeneğini tıklayın.
Veriler şimdi seçilen dizinde bir WLS dosyasına kaydedilir Deneyin başlangıcında, yürüyen tekerlekleri kafeslerden çıkarın ve ardından pillerini çıkarın. İyileşen hayvanlara libido, yiyeceğe erişim izni verilmelidir. Şimdi, verileri bir elektronik tabloya aktarın.
Dosya menüsünde dışa aktarma seçeneğini seçin ve kaynak veri dosyası seçeneğinde istediğiniz WLS dosyalarını seçin. Ardından, başlangıç ve bitiş tarihini ve saatini seçin ve son olarak dışa aktarma için her bir tekerlek sensörünü seçin. Tekerlek sensörleri listesinde, veriler daha sonra bir b'nin etkisini incelemek için gerektiği gibi analiz edilebilir.
İnsan anoreksiya nervozasına benzer bir popülasyonda, dişi ergen fareler P 36'da tekerleğe alıştırıldı. Ergenliğin başlamasından kısa bir süre sonra, P 40'ta gıda yoksunluğu başladı ve vücut ağırlıkları keskin bir şekilde azaldı, kontrol hayvanlarının koşu tekerlekleri veya yiyecek kısıtlamaları yoktu. Açlıktan ölmek üzere olan hayvanlar, gıda kısıtlamasının başlamasından sonra aşırı derecede koştu.
Tekerlek aktivitesinin ayrıntılı analizi sirkadiyen bir model gösterdi. İlginçtir ki, yiyeceğe erişim sırasında bile, açlıktan ölmek üzere olan hayvanlar koşu tekerleğini kullanmayı seçti. Yiyecek kısıtlaması başladıktan sonra, bazı hayvanlar beslenme zamanından hemen önce aktivitede bir artış gösterdi, bu da gıda olarak adlandırılabilir Beklenti aktivitesi Aktiviteye dayalı bir senaryodan geçmek için bir kohort kurma ustası, uygun şekilde gerçekleştirilirse birkaç saat içinde elde edilebilir.
Bu prosedürü denerken, tekerlek sayımlarını günde en az bir kez manuel olarak kaydetmeyi unutmamak önemlidir. Güç hattının beklenmedik bir şekilde bozulması veya pillerin bitmesi, bilgisayar tarafından oluşturulan tekerlek sayımını bozabilir Bu prosedürün ardından. Aktiviteye dayalı anoreksiya indüksiyonunun beyin anatomisini, biyofiziksel özelliklerini ve davranışını nasıl etkilediği gibi ek soruları yanıtlamak için immünosito kimyası, elektrofizyoloji ve davranışsal testler gibi diğer yöntemler de gerçekleştirilebilir.
Related Videos
05:57
Related Videos
13.8K Views
09:29
Related Videos
15.9K Views
10:05
Related Videos
15K Views
08:26
Related Videos
13.2K Views
04:48
Related Videos
11.7K Views
09:10
Related Videos
11.7K Views
05:15
Related Videos
1.8K Views
04:42
Related Videos
1.5K Views
19:15
Related Videos
88.1K Views
07:54
Related Videos
14.8K Views