Her organizmanın gelişimi, DNA'sında kodlanmış genetik bilgi tarafından yönlendirilir. Gelişimsel genetik alanındaki bilim adamları, genlerin hücre göçü ve farklılaşması gibi gelişimsel süreçleri nasıl kontrol ettiğini inceleyerek, çok hücreli organizmaların karmaşık yapılarının nasıl oluştuğunu daha iyi anlamaya çalışıyorlar.
Bu video, bu alandaki bazı önemli keşifleri, gelişimsel genetikçiler tarafından sorulan bir dizi temel soruyu, bilim adamlarının bu soruları cevaplamak için kullandıkları başlıca araçları ve son olarak günümüzde gelişimsel genetik üzerine yürütülen özel çalışmaları sunacaktır.
Gelişimsel genetik alanını şekillendiren bazı önemli keşifleri gözden geçirerek başlayalım.
1865 yılında Avusturyalı bir keşiş olan Gregor Mendel, bezelye ile üreme deneyleri yaptı. Bezelyenin görünür özelliklerinin veya tohum rengi gibi "fenotiplerinin" tutarlı kurallara göre miras alındığını gözlemledi. Mendel, bu fenotiplerin aslında bazı görünmez, ayrık kalıtım faktörleri tarafından kontrol edildiğini öne sürerek, genetik alanının tohumlarını ekti.
Bu kalıtım faktörleri, 1909'da Danimarkalı botanikçi Wilhelm Johannsen tarafından "genler" olarak adlandırıldı. Daha sonra, 1910'da Thomas Hunt Morgan ve öğrencileri, genlerin kromozom adı verilen hücre çekirdeğindeki fiziksel yapılarda bulunduğunu keşfetmek için meyve sineği Drosophila'yı model organizma olarak kullandılar.
1938'de Salome Gluecksohn-Waelsch, notokord olarak bilinen embriyonik bir yapının gelişimi için belirli bir genin gerekli olduğunu gösterdi. Bu, genlerin erken gelişimsel süreçleri kontrol ettiğine dair en eski kanıtlar arasındaydı.
1940 yılında Conrad Hal Waddington, bir embriyodaki hücrelerin, genler tarafından kontrol edilen yollar veya "kaderler" boyunca farklılaştığını öne sürdü. Önümüzdeki 17 yıl boyunca rafine edilen bu süreç için bir metafor formüle etti ve bir hücrenin farklı hücre kaderlerine doğru bir yamaçtan yuvarlanan bir mermer olarak görüldüğü "epigenetik manzara" olarak adlandırıldı. Hücrenin izlediği yollar, manzaradaki sırtları ve vadileri takip eder ve bunlar da genler ve onların ifade kalıpları tarafından kontrol edilir.
1952'de Wolfgang Beermann, bir organizmadaki farklı hücrelerin aynı genetik içeriğe sahip olmasına rağmen, kromozomların farklı bölgelerinin aktif olduğunu ve bu diferansiyel gen ifadesinin hücre kimliğini tanımladığını doğruladı.
Gen ekspresyonunun gelişimi etkilediği belirlendikten sonra, bir sonraki soru şuydu: Hangi genler? Buna cevap vermek için, 1970'lerde Edward B. Lewis, Christiane Nusslein-Volhard ve Eric Weischaus, meyve sineklerindeki genleri rastgele mutasyona uğratmak için kimyasallar kullandılar. Bu mutasyon ekranları sayesinde, bilim adamları gelişim sürecinin her adımını kontrol eden çok sayıda gen belirlediler.
2007 yılında, uluslararası bir bilim insanı konsorsiyumu, her bir genin, her farede bir tane olmak üzere, silindiği veya "nakavt edildiği" bir fare koleksiyonu oluşturmak için çalışmaya başladı. Bu farelerin her birinin fenotipi şu anda karakterize edilmektedir ve bize bir memelideki tüm genlerin işlevinin ilk kataloğunu verecektir.
Artık alanın köklerini gözden geçirdiğimize göre, gelişimsel genetikçilerin cevaplamaya çalıştığı birkaç temel soruya bakalım.
Bazı araştırmacılar, döllenmiş yumurtaların veya zigotların çok hücreli embriyolara dönüşümü sırasındaki erken olaylara odaklanmaktadır. Bu olaylar, "anne katkısı" veya "anne etkisi" olarak bilinen bir fenomende anne tarafından yumurtada biriken RNA'lara ve proteinlere bağlıdır. Bilim adamları, bir annenin genotipinin bir embriyonun fenotipini nasıl etkilediğini öğrenmekle ilgileniyorlar.
Gelişimsel genetikteki bir diğer merkezi soru şudur: Genetik olarak özdeş hücreler farklı hücre kaderlerini nasıl benimser? Bilim adamları, gelişim sırasında hücreye hangi genleri ifade edeceğini ve ne zaman ifade edeceğini söyleyen sinyal yolları da dahil olmak üzere, farklı hücreler arasındaki diferansiyel gen ekspresyonunu kontrol eden birçok faktörü belirliyorlar.
Son olarak, bilim adamları, amorf bir hücre kütlesi olan erken embriyonun, farklı, işlevsel parçalara sahip karmaşık bir organizmaya nasıl dönüştüğünü de soruyorlar. Bu vücut planının oluşumuna morfogenez denir ve bilim adamları bu süreci yöneten genleri ve yolları tanımlamaya çalışıyorlar.
Artık gelişimsel genetikçilerin sorduğu bazı soruları bildiğinize göre, bu soruları cevaplamak için kullandıkları teknikleri gözden geçirelim.
Bilim adamları, ifadelerini bozarak belirli genlerin gelişimdeki rolünü inceleyebilirler. Bunu yapmanın bir yolu, mutasyonları tanıtarak veya onu işlevsel olmayan DNA ile değiştirerek organizmanın DNA'sındaki geni "nakavt etmek" tir. Alternatif olarak, hedef mRNA dizilerine bağlanacak ve fonksiyonel proteinlerin üretimini önleyecek oligonükleotidler eklenerek gen ekspresyonu "yıkılabilir".
Belirli fenotiplerden hangi genlerin sorumlu olduğunu belirlemek için, bilim adamları genetik taramalar yapabilirler. İleri bir genetik ekranda, mutasyonlar organizmalarda radyasyon veya mutajenler olarak bilinen kimyasallar tarafından rastgele üretilir. Bir mutantın ilgilenilen bir fenotip sergilediği tespit edildiğinde, mutasyona uğramış olan bilinmeyen gen daha sonra tanımlanabilir. Karşıt yaklaşım, bilim adamlarının önce bozulma için çok sayıda spesifik aday geni hedeflediği ve daha sonra mutantların ortaya çıkan fenotiplerine baktığı ters bir genetik ekrandır.
Son olarak, biyologlar farklı gelişim aşamalarında gen ekspresyonunu belirlemekle de ilgilenirler. Gen ekspresyonunu ölçmek için bir araç, test edilecek genlerin dizilerini içeren oligonükleotidlerle noktalı bir çip olan mikrodizidir. Tipik bir deneyde, iki farklı gelişim aşamasındaki organizmalardan ekstrakte edilen RNA, daha sonra mikrodiziye hibritlenen iki farklı floresan etiketli prob seti oluşturmak için kullanılır. Gen ifadesindeki değişiklikler daha sonra dizideki her noktadaki floresan sinyalinden yorumlanabilir.
Bu deneysel teknikleri göz önünde bulundurarak, araştırmacıların bunları gelişimsel genetiği incelemek için nasıl uyguladıklarına bir göz atalım.
Bilim adamları, gelişimi etkileyen genleri aramak için C. elegans gibi model organizmalarda büyük ölçekli genetik taramalar yapıyorlar. Bu genellikle RNA girişimi veya RNAi, genlerin küçük RNA molekülleri kullanılarak susturulduğu bir süreç yoluyla yapılır. Burada bilim adamları, solucanları çok sayıda solucan genine karşı tasarlanmış bir RNAi kütüphanesi içeren bakterilerle beslediler ve gen yıkımının hayvanların gelişimi üzerindeki etkisini analiz ettiler.
Diğer araştırmacılar, gelişimsel fenotipleri tanımlamak için rastgele mutajenez kullanarak ileri genetik taramalar yapıyorlar. Bu deneyde, araştırmacılar zebra balığı embriyolarını mutajize etmek için gen tuzağı tekniğini kullandılar, burada bir raportör yapısı rastgele gen intronlarına hedeflenir ve onları işlevsiz hale getirir. Bilim adamları daha sonra raportör sinyalini arayarak genin başarılı bir şekilde bozulduğu hayvanları kolayca tanımlayabilir ve gelişimsel bir kusur sergileyenler sorumlu geni tanımlayabilir.
Son olarak, gelişmekte olan bir organizmadaki farklı hücre tiplerinin gen ekspresyonu, hücre farklılaşması ve uzmanlaşması sırasında hangi genlerin açılıp kapatıldığını belirlemek için mikrodiziler tarafından profillenebilir. Bu çalışmada, gelişmekte olan retinadan farklı hücre tiplerine ait tek nöronal hücreler izole edildi. RNA daha sonra, her bir spesifik hücre tipinin gelişiminde rol oynayan genleri tanımlamak için mikrodizi analizi için bu hücrelerden ekstrakte edildi.
JoVE'nin gelişimsel genetikle tanışma sürecini az önce izlediniz. Bu video, bu alanın bazı tarihsel olaylarını, gelişimsel genetikçiler tarafından sorulan büyük soruları, şu anda laboratuvarlarda kullanılan öne çıkan yöntemlerden birkaçını ve bu yaklaşımların gelişim biyolojisini incelemek için özel uygulamalarını gözden geçirdi. Her zaman olduğu gibi, izlediğiniz için teşekkürler!
Gelişim, tek hücreli bir embriyonun çok hücreli bir organizmaya dönüştüğü karmaşık bir süreçtir. Gelişimsel süreçler, bir organizmanın DNA'sında kodlanan bilgiler tarafından yönlendirilir ve genetikçiler bu bilginin nasıl tam olarak oluşmuş bir organizmaya yol açtığını anlamaya çalışırlar.
Bu video, çeşitli embriyonik süreçleri kontrol eden belirli genlerin tanımlanması da dahil olmak üzere gelişim biyolojisi alanındaki ufuk açıcı araştırmaları gözden geçirmektedir. Gelişimsel genetikçiler tarafından sorulan başlıca sorulara ve bunları cevaplamak için kullanılan öne çıkan yöntemlere bir giriş de sağlanmaktadır. Son olarak, bu alanda şu anda gerçekleştirilmekte olan belirli deneyleri göstermek için bu öne çıkan yöntemlerin çeşitli uygulamaları tartışılmaktadır.
Her organizmanın gelişimi, DNA'sında kodlanmış genetik bilgi tarafından yönlendirilir. Gelişimsel genetik alanındaki bilim adamları, genlerin hücre göçü ve farklılaşması gibi gelişimsel süreçleri nasıl kontrol ettiğini inceleyerek, çok hücreli organizmaların karmaşık yapılarının nasıl oluştuğunu daha iyi anlamaya çalışıyorlar.
Bu video, bu alandaki bazı önemli keşifleri, gelişimsel genetikçiler tarafından sorulan bir dizi temel soruyu, bilim adamlarının bu soruları cevaplamak için kullandıkları başlıca araçları ve son olarak günümüzde gelişimsel genetik üzerine yürütülen özel çalışmaları sunacaktır.
Gelişimsel genetik alanını şekillendiren bazı önemli keşifleri gözden geçirerek başlayalım.
1865 yılında Avusturyalı bir keşiş olan Gregor Mendel, bezelye ile üreme deneyleri yaptı. Bezelyenin görünür özelliklerinin veya tohum rengi gibi "fenotiplerinin" tutarlı kurallara göre miras alındığını gözlemledi. Mendel, bu fenotiplerin aslında bazı görünmez, ayrık kalıtım faktörleri tarafından kontrol edildiğini öne sürerek, genetik alanının tohumlarını ekti.
Bu kalıtım faktörleri, 1909'da Danimarkalı botanikçi Wilhelm Johannsen tarafından "genler" olarak adlandırıldı. Daha sonra, 1910'da Thomas Hunt Morgan ve öğrencileri, genlerin kromozom adı verilen hücre çekirdeğindeki fiziksel yapılarda bulunduğunu keşfetmek için meyve sineği Drosophila'yı model organizma olarak kullandılar.
1938'de Salome Gluecksohn-Waelsch, notokord olarak bilinen embriyonik bir yapının gelişimi için belirli bir genin gerekli olduğunu gösterdi. Bu, genlerin erken gelişimsel süreçleri kontrol ettiğine dair en eski kanıtlar arasındaydı.
1940 yılında Conrad Hal Waddington, bir embriyodaki hücrelerin, genler tarafından kontrol edilen yollar veya "kaderler" boyunca farklılaştığını öne sürdü. Önümüzdeki 17 yıl boyunca rafine edilen bu süreç için bir metafor formüle etti ve bir hücrenin farklı hücre kaderlerine doğru bir yamaçtan yuvarlanan bir mermer olarak görüldüğü "epigenetik manzara" olarak adlandırıldı. Hücrenin izlediği yollar, manzaradaki sırtları ve vadileri takip eder ve bunlar da genler ve onların ifade kalıpları tarafından kontrol edilir.
1952'de Wolfgang Beermann, bir organizmadaki farklı hücrelerin aynı genetik içeriğe sahip olmasına rağmen, kromozomların farklı bölgelerinin aktif olduğunu ve bu diferansiyel gen ifadesinin hücre kimliğini tanımladığını doğruladı.
Gen ekspresyonunun gelişimi etkilediği belirlendikten sonra, bir sonraki soru şuydu: Hangi genler? Buna cevap vermek için, 1970'lerde Edward B. Lewis, Christiane Nusslein-Volhard ve Eric Weischaus, meyve sineklerindeki genleri rastgele mutasyona uğratmak için kimyasallar kullandılar. Bu mutasyon ekranları sayesinde, bilim adamları gelişim sürecinin her adımını kontrol eden çok sayıda gen belirlediler.
2007 yılında, uluslararası bir bilim insanı konsorsiyumu, her bir genin, her farede bir tane olmak üzere, silindiği veya "nakavt edildiği" bir fare koleksiyonu oluşturmak için çalışmaya başladı. Bu farelerin her birinin fenotipi şu anda karakterize edilmektedir ve bize bir memelideki tüm genlerin işlevinin ilk kataloğunu verecektir.
Artık alanın köklerini gözden geçirdiğimize göre, gelişimsel genetikçilerin cevaplamaya çalıştığı birkaç temel soruya bakalım.
Bazı araştırmacılar, döllenmiş yumurtaların veya zigotların çok hücreli embriyolara dönüşümü sırasındaki erken olaylara odaklanmaktadır. Bu olaylar, "anne katkısı" veya "anne etkisi" olarak bilinen bir fenomende anne tarafından yumurtada biriken RNA'lara ve proteinlere bağlıdır. Bilim adamları, bir annenin genotipinin bir embriyonun fenotipini nasıl etkilediğini öğrenmekle ilgileniyorlar.
Gelişimsel genetikteki bir diğer merkezi soru şudur: Genetik olarak özdeş hücreler farklı hücre kaderlerini nasıl benimser? Bilim adamları, gelişim sırasında hücreye hangi genleri ifade edeceğini ve ne zaman ifade edeceğini söyleyen sinyal yolları da dahil olmak üzere, farklı hücreler arasındaki diferansiyel gen ekspresyonunu kontrol eden birçok faktörü belirliyorlar.
Son olarak, bilim adamları, amorf bir hücre kütlesi olan erken embriyonun, farklı, işlevsel parçalara sahip karmaşık bir organizmaya nasıl dönüştüğünü de soruyorlar. Bu vücut planının oluşumuna morfogenez denir ve bilim adamları bu süreci yöneten genleri ve yolları tanımlamaya çalışıyorlar.
Artık gelişimsel genetikçilerin sorduğu bazı soruları bildiğinize göre, bu soruları cevaplamak için kullandıkları teknikleri gözden geçirelim.
Bilim adamları, ifadelerini bozarak belirli genlerin gelişimdeki rolünü inceleyebilirler. Bunu yapmanın bir yolu, mutasyonları tanıtarak veya onu işlevsel olmayan DNA ile değiştirerek organizmanın DNA'sındaki geni "nakavt etmek" tir. Alternatif olarak, hedef mRNA dizilerine bağlanacak ve fonksiyonel proteinlerin üretimini önleyecek oligonükleotidler eklenerek gen ekspresyonu "yıkılabilir".
Belirli fenotiplerden hangi genlerin sorumlu olduğunu belirlemek için, bilim adamları genetik taramalar yapabilirler. İleri bir genetik ekranda, mutasyonlar organizmalarda radyasyon veya mutajenler olarak bilinen kimyasallar tarafından rastgele üretilir. Bir mutantın ilgilenilen bir fenotip sergilediği tespit edildiğinde, mutasyona uğramış olan bilinmeyen gen daha sonra tanımlanabilir. Karşıt yaklaşım, bilim adamlarının önce bozulma için çok sayıda spesifik aday geni hedeflediği ve daha sonra mutantların ortaya çıkan fenotiplerine baktığı ters bir genetik ekrandır.
Son olarak, biyologlar farklı gelişim aşamalarında gen ekspresyonunu belirlemekle de ilgilenirler. Gen ekspresyonunu ölçmek için bir araç, test edilecek genlerin dizilerini içeren oligonükleotidlerle noktalı bir çip olan mikrodizidir. Tipik bir deneyde, iki farklı gelişim aşamasındaki organizmalardan ekstrakte edilen RNA, daha sonra mikrodiziye hibritlenen iki farklı floresan etiketli prob seti oluşturmak için kullanılır. Gen ifadesindeki değişiklikler daha sonra dizideki her noktadaki floresan sinyalinden yorumlanabilir.
Bu deneysel teknikleri göz önünde bulundurarak, araştırmacıların bunları gelişimsel genetiği incelemek için nasıl uyguladıklarına bir göz atalım.
Bilim adamları, gelişimi etkileyen genleri aramak için C. elegans gibi model organizmalarda büyük ölçekli genetik taramalar yapıyorlar. Bu genellikle RNA girişimi veya RNAi, genlerin küçük RNA molekülleri kullanılarak susturulduğu bir süreç yoluyla yapılır. Burada bilim adamları, solucanları çok sayıda solucan genine karşı tasarlanmış bir RNAi kütüphanesi içeren bakterilerle beslediler ve gen yıkımının hayvanların gelişimi üzerindeki etkisini analiz ettiler.
Diğer araştırmacılar, gelişimsel fenotipleri tanımlamak için rastgele mutajenez kullanarak ileri genetik taramalar yapıyorlar. Bu deneyde, araştırmacılar zebra balığı embriyolarını mutajize etmek için gen tuzağı tekniğini kullandılar, burada bir raportör yapısı rastgele gen intronlarına hedeflenir ve onları işlevsiz hale getirir. Bilim adamları daha sonra raportör sinyalini arayarak genin başarılı bir şekilde bozulduğu hayvanları kolayca tanımlayabilir ve gelişimsel bir kusur sergileyenler sorumlu geni tanımlayabilir.
Son olarak, gelişmekte olan bir organizmadaki farklı hücre tiplerinin gen ekspresyonu, hücre farklılaşması ve uzmanlaşması sırasında hangi genlerin açılıp kapatıldığını belirlemek için mikrodiziler tarafından profillenebilir. Bu çalışmada, gelişmekte olan retinadan farklı hücre tiplerine ait tek nöronal hücreler izole edildi. RNA daha sonra, her bir spesifik hücre tipinin gelişiminde rol oynayan genleri tanımlamak için mikrodizi analizi için bu hücrelerden ekstrakte edildi.
JoVE'nin gelişimsel genetikle tanışma sürecini az önce izlediniz. Bu video, bu alanın bazı tarihsel olaylarını, gelişimsel genetikçiler tarafından sorulan büyük soruları, şu anda laboratuvarlarda kullanılan öne çıkan yöntemlerden birkaçını ve bu yaklaşımların gelişim biyolojisini incelemek için özel uygulamalarını gözden geçirdi. Her zaman olduğu gibi, izlediğiniz için teşekkürler!
Her organizmanın gelişimi, DNA'sında kodlanmış genetik bilgi tarafından yönlendirilir. Gelişimsel genetik alanındaki bilim adamları, genlerin hücre göçü ve farklılaşması gibi gelişimsel süreçleri nasıl kontrol ettiğini inceleyerek, çok hücreli organizmaların karmaşık yapılarının nasıl oluştuğunu daha iyi anlamaya çalışıyorlar.
Bu video, bu alandaki bazı önemli keşifleri, gelişimsel genetikçiler tarafından sorulan bir dizi temel soruyu, bilim adamlarının bu soruları cevaplamak için kullandıkları başlıca araçları ve son olarak günümüzde gelişimsel genetik üzerine yürütülen özel çalışmaları sunacaktır.
Gelişimsel genetik alanını şekillendiren bazı önemli keşifleri gözden geçirerek başlayalım.
1865 yılında Avusturyalı bir keşiş olan Gregor Mendel, bezelye ile üreme deneyleri yaptı. Bezelyenin görünür özelliklerinin veya tohum rengi gibi "fenotiplerinin" tutarlı kurallara göre miras alındığını gözlemledi. Mendel, bu fenotiplerin aslında bazı görünmez, ayrık kalıtım faktörleri tarafından kontrol edildiğini öne sürerek, genetik alanının tohumlarını ekti.
Bu kalıtım faktörleri, 1909'da Danimarkalı botanikçi Wilhelm Johannsen tarafından "genler" olarak adlandırıldı. Daha sonra, 1910'da Thomas Hunt Morgan ve öğrencileri, genlerin kromozom adı verilen hücre çekirdeğindeki fiziksel yapılarda bulunduğunu keşfetmek için meyve sineği Drosophila'yı model organizma olarak kullandılar.
1938'de Salome Gluecksohn-Waelsch, notokord olarak bilinen embriyonik bir yapının gelişimi için belirli bir genin gerekli olduğunu gösterdi. Bu, genlerin erken gelişimsel süreçleri kontrol ettiğine dair en eski kanıtlar arasındaydı.
1940 yılında Conrad Hal Waddington, bir embriyodaki hücrelerin, genler tarafından kontrol edilen yollar veya "kaderler" boyunca farklılaştığını öne sürdü. Önümüzdeki 17 yıl boyunca rafine edilen bu süreç için bir metafor formüle etti ve bir hücrenin farklı hücre kaderlerine doğru bir yamaçtan yuvarlanan bir mermer olarak görüldüğü "epigenetik manzara" olarak adlandırıldı. Hücrenin izlediği yollar, manzaradaki sırtları ve vadileri takip eder ve bunlar da genler ve onların ifade kalıpları tarafından kontrol edilir.
1952'de Wolfgang Beermann, bir organizmadaki farklı hücrelerin aynı genetik içeriğe sahip olmasına rağmen, kromozomların farklı bölgelerinin aktif olduğunu ve bu diferansiyel gen ifadesinin hücre kimliğini tanımladığını doğruladı.
Gen ekspresyonunun gelişimi etkilediği belirlendikten sonra, bir sonraki soru şuydu: Hangi genler? Buna cevap vermek için, 1970'lerde Edward B. Lewis, Christiane Nusslein-Volhard ve Eric Weischaus, meyve sineklerindeki genleri rastgele mutasyona uğratmak için kimyasallar kullandılar. Bu mutasyon ekranları sayesinde, bilim adamları gelişim sürecinin her adımını kontrol eden çok sayıda gen belirlediler.
2007 yılında, uluslararası bir bilim insanı konsorsiyumu, her bir genin, her farede bir tane olmak üzere, silindiği veya "nakavt edildiği" bir fare koleksiyonu oluşturmak için çalışmaya başladı. Bu farelerin her birinin fenotipi şu anda karakterize edilmektedir ve bize bir memelideki tüm genlerin işlevinin ilk kataloğunu verecektir.
Artık alanın köklerini gözden geçirdiğimize göre, gelişimsel genetikçilerin cevaplamaya çalıştığı birkaç temel soruya bakalım.
Bazı araştırmacılar, döllenmiş yumurtaların veya zigotların çok hücreli embriyolara dönüşümü sırasındaki erken olaylara odaklanmaktadır. Bu olaylar, "anne katkısı" veya "anne etkisi" olarak bilinen bir fenomende anne tarafından yumurtada biriken RNA'lara ve proteinlere bağlıdır. Bilim adamları, bir annenin genotipinin bir embriyonun fenotipini nasıl etkilediğini öğrenmekle ilgileniyorlar.
Gelişimsel genetikteki bir diğer merkezi soru şudur: Genetik olarak özdeş hücreler farklı hücre kaderlerini nasıl benimser? Bilim adamları, gelişim sırasında hücreye hangi genleri ifade edeceğini ve ne zaman ifade edeceğini söyleyen sinyal yolları da dahil olmak üzere, farklı hücreler arasındaki diferansiyel gen ekspresyonunu kontrol eden birçok faktörü belirliyorlar.
Son olarak, bilim adamları, amorf bir hücre kütlesi olan erken embriyonun, farklı, işlevsel parçalara sahip karmaşık bir organizmaya nasıl dönüştüğünü de soruyorlar. Bu vücut planının oluşumuna morfogenez denir ve bilim adamları bu süreci yöneten genleri ve yolları tanımlamaya çalışıyorlar.
Artık gelişimsel genetikçilerin sorduğu bazı soruları bildiğinize göre, bu soruları cevaplamak için kullandıkları teknikleri gözden geçirelim.
Bilim adamları, ifadelerini bozarak belirli genlerin gelişimdeki rolünü inceleyebilirler. Bunu yapmanın bir yolu, mutasyonları tanıtarak veya onu işlevsel olmayan DNA ile değiştirerek organizmanın DNA'sındaki geni "nakavt etmek" tir. Alternatif olarak, hedef mRNA dizilerine bağlanacak ve fonksiyonel proteinlerin üretimini önleyecek oligonükleotidler eklenerek gen ekspresyonu "yıkılabilir".
Belirli fenotiplerden hangi genlerin sorumlu olduğunu belirlemek için, bilim adamları genetik taramalar yapabilirler. İleri bir genetik ekranda, mutasyonlar organizmalarda radyasyon veya mutajenler olarak bilinen kimyasallar tarafından rastgele üretilir. Bir mutantın ilgilenilen bir fenotip sergilediği tespit edildiğinde, mutasyona uğramış olan bilinmeyen gen daha sonra tanımlanabilir. Karşıt yaklaşım, bilim adamlarının önce bozulma için çok sayıda spesifik aday geni hedeflediği ve daha sonra mutantların ortaya çıkan fenotiplerine baktığı ters bir genetik ekrandır.
Son olarak, biyologlar farklı gelişim aşamalarında gen ekspresyonunu belirlemekle de ilgilenirler. Gen ekspresyonunu ölçmek için bir araç, test edilecek genlerin dizilerini içeren oligonükleotidlerle noktalı bir çip olan mikrodizidir. Tipik bir deneyde, iki farklı gelişim aşamasındaki organizmalardan ekstrakte edilen RNA, daha sonra mikrodiziye hibritlenen iki farklı floresan etiketli prob seti oluşturmak için kullanılır. Gen ifadesindeki değişiklikler daha sonra dizideki her noktadaki floresan sinyalinden yorumlanabilir.
Bu deneysel teknikleri göz önünde bulundurarak, araştırmacıların bunları gelişimsel genetiği incelemek için nasıl uyguladıklarına bir göz atalım.
Bilim adamları, gelişimi etkileyen genleri aramak için C. elegans gibi model organizmalarda büyük ölçekli genetik taramalar yapıyorlar. Bu genellikle RNA girişimi veya RNAi, genlerin küçük RNA molekülleri kullanılarak susturulduğu bir süreç yoluyla yapılır. Burada bilim adamları, solucanları çok sayıda solucan genine karşı tasarlanmış bir RNAi kütüphanesi içeren bakterilerle beslediler ve gen yıkımının hayvanların gelişimi üzerindeki etkisini analiz ettiler.
Diğer araştırmacılar, gelişimsel fenotipleri tanımlamak için rastgele mutajenez kullanarak ileri genetik taramalar yapıyorlar. Bu deneyde, araştırmacılar zebra balığı embriyolarını mutajize etmek için gen tuzağı tekniğini kullandılar, burada bir raportör yapısı rastgele gen intronlarına hedeflenir ve onları işlevsiz hale getirir. Bilim adamları daha sonra raportör sinyalini arayarak genin başarılı bir şekilde bozulduğu hayvanları kolayca tanımlayabilir ve gelişimsel bir kusur sergileyenler sorumlu geni tanımlayabilir.
Son olarak, gelişmekte olan bir organizmadaki farklı hücre tiplerinin gen ekspresyonu, hücre farklılaşması ve uzmanlaşması sırasında hangi genlerin açılıp kapatıldığını belirlemek için mikrodiziler tarafından profillenebilir. Bu çalışmada, gelişmekte olan retinadan farklı hücre tiplerine ait tek nöronal hücreler izole edildi. RNA daha sonra, her bir spesifik hücre tipinin gelişiminde rol oynayan genleri tanımlamak için mikrodizi analizi için bu hücrelerden ekstrakte edildi.
JoVE'nin gelişimsel genetikle tanışma sürecini az önce izlediniz. Bu video, bu alanın bazı tarihsel olaylarını, gelişimsel genetikçiler tarafından sorulan büyük soruları, şu anda laboratuvarlarda kullanılan öne çıkan yöntemlerden birkaçını ve bu yaklaşımların gelişim biyolojisini incelemek için özel uygulamalarını gözden geçirdi. Her zaman olduğu gibi, izlediğiniz için teşekkürler!
Chapters in this video
0:00
Overview
0:46
Historical Highlights
3:34
Key Questions
4:56
Prominent Methods
6:49
Applications
8:36
Summary
Videos from this collection: