Name: Baş-sabit Farelerde bıyık-sinyalini eyeblink Klasik Koşullanma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-30T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 14 s
Description: Öğrenin baş-sabit farelerde bıyık-sinyalli göz kırpma klasik koşullanması yöntemini. Bu teknik, öğrenme ve hafızanın nörobiyolojik mekanizmalarını kalsiyum görüntüleme ve elektrofizyoloji ile araştırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Savunma Bakanlığı (W81XWH-13-01-0243) ve Ulusal Sağlık Enstitüleri (R37 AG008796) tarafından finanse edildi. Biz kafa sabit silindir aparatı oluşturmak için Northwestern Üniversitesi Makine dükkanında Alan Baker teşekkür ederiz. Biz MATLAB ve Solidworks onun rehberlik Dr. Shoai Hattori teşekkür ederim. Biz deneyi kontrollü LabView yazılımı Dr. John Gücü teşekkür ederim.

fareler içeren tüm işlemler Ulusal Sağlık Enstitüsü tarafından yayınlanan yönergelere dayalı Northwestern Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanan protokoller çerçevesinde yapıldı. 1. Silindir (Şekil 2A) <ol><li> Chettih ve ark. Ve Heiney ve diğerleri tarafından tarif edildiği gibi silindir oluşturmak. Uzun bir köpük silindiri 14-15 arasında. silindirin 10 cm uzunluğunda kesin ve aks, çapı bir metal çubuk 12.7 mm (0.5.) sığdırmak için merkezi aracılığıyla bir delik açın. Heiney ve ark. Veya başka bir destek (ör Pleksiglas) 15 tarafından tarif edildiği gibi, bir metal, optik deneysel devre üzerinde kendi aksı silindiri monte edin. </li><li> Silindirin her iki tarafında çapı 12.7 mm olan iki dikey metal çubuklar dik. </li><li> metal çubuklar üzerine iki dik açılı bağlar takın. </li><li> dik açılı bağlar aracılığıyla (5 cm uzunluğunda, çapı 12.7 mm) iki çubuklar sabitleyin. Konik inciE bu çubuklar sona erer ve silindir (Şekil 2G) merkezinin üstünde onların biter düzeyinde. </li><li> Matkap ve yere (Şekil 2G) konektörü kanatlarını yapacak iki 4-40 makine vidaları uyacak şekilde çubuklar tesviye uçları bir delik dokunun. </li></ol> 2. Montaj Bıyık Stimülasyon Sistemi (Şekil 2B) <ol><li> düzenli bir saç tarağı gelen tarağın 10 diş segment kesebilirsiniz. </li><li> bir yarık kes yaklaşık 2-3 mm genişliğinde ve yaklaşık 5 mm 2 katmanlı dikdörtgen bükme çalıştırıcıyı kabul etmek tarak üst kısmında derin. </li><li> Bükme aktüatör her yüzeyine bir tel lehim. üretici tarafından sağlanan lehim ve akı kullanın. elektrik akımından fare ve kullanıcıyı korumak için elektrik bandı ile aktüatör ve lehim örtün. </li><li> bükme aktüatör şerit tarak düzlemine dik oturur, böylece tarak oyulmuş yarık içine aktüatör şeridi Kayma. Açı o 4&#39;te eğik şekilde tarak5 ° ve daha doğal fare yüzünün eğrisini izler. </li><li> hızlı ayar epoksi ile tarak üstüne aktüatör şeridinin ucunu sabitleyin. Not: bükme aktüatör şeridine lehimli teller aktüatör 40 volt sağlayan bir reosta bağlı olmalıdır. Önceki deneyler, 40 volt havalandırma için etkili olan, ancak herhangi bir irkilme yanıtı ortaya etmediğini göstermiştir. </li><li> bükme aktüatör ve hareketli bir montaj tarağı yerleştirin. Normal olarak, in vitro elektrofizyoloji kulesi için manyetik bir tabana bağlanan bir pipet tutucusu iyi çalışır. </li></ol> 3. Silindir üzerindeki Çubuklar için Mounts Connector Montaj (Şekil 2C, 2E) Not: bağlayıcı bir 3-D Weiss ve Disterhoft ve Galvez ark urgan için kullanılan Amphenol 221 serisi naylon şerit modellenmiş 7 delikli şerit baskılı olduğu 10,17. <ol><li> Bir 0-80 x-1 için şerit ilk delik dokunun&quot;Makine vida. Bu konnektörüne baş kısmını demirlemek için bir kilitleme vidası olarak hizmet verecek. Elle vidayı çevirerek kolaylaştırmak için siyonoakrilik tutkalla kilitleme vidasının kafasına bir 0-80 somunu yapıştırın. </li><li> (0-80 makine somun için oda sağlamak için) aday delik sonra boş bir delik bırakın ve kalan beş deliklerden beş altın kaplama Relia-tac yuvalarını itin. </li><li> prizlere uçlarına beş uzun teller (Ethernet kablosu elde edilen teller) ve lehim kapalı kaplama şerit. Not: İlk iki tel bir amplifikatör sinyal filtreleme ve yükseltme takiben bir eyeblink yanıtı algılar elektromiyografi (EMG) sinyalleri kaydetmek için kullanılacaktır. İkinci iki bir uyarıcı izolatör şok sinyali verir. Geçen tel topraklama bağlantısı olarak görev yapacak. Bu teller zamanlı CS-ABD teslimat için kullanılan sistemlere bağlı olacak. </li><li> Bir mult ile teller ve prizler arasındaki elektrik bağlantı sağlamakimeter. süreklilik ayarında multimetre koyun ve tel elimden uçlarına pim ve diğer prob prob birini basılı tutun. direnci düşüktür ve multimetre bir ton sesi yayar zaman pimleri ve telleri elektriksel olarak birbirlerine bağlı bulunmaktadır. <ol><li> multimetre bir süreklilik ayarı yoksa, alternatif olarak, pimleri ve telleri arasındaki direnci ölçün. ölçülen çok az direnç varsa elektriksel devamlılık vardır. </li></ol></li><li> İki TO-220 tarzı transistörlerin gelen konnektörü kanatlarını hazırlayın. transistörün emiter, baz ve kollektör uçlarının kes ve konnektörüne yapıştırılmış böylece yüzey seviyesi. </li><li> Sekme vida başı altına kayabilir böylece deliği ihlal montaj sekmesinin kenarını kesin. </li><li> konnektörüne transistörleri epoksit. Montaj sekmesinde delik silindir üzerinde çubuklara konnektörü sabitlemek için kullanılır. </li><li> pr tellerin tabanına epoksi uygulasoketleri otruding ve epoksi kurumaya bırakın. Epoksi yalıtımı ve bağlantıları koruyacaktır. </li></ol> 4. başlık hazırlanması (Şekil 2D, 2E) Not:. Headpiece şeridi bir 3-D Weiss ve Disterhoft ve Galvez ark 10,17 tarafından headpiece için kullanılan Amphenol 221 serisi naylon şerit modellenmiş 7 delikli şerit baskılı olduğunu. Bu parça artık ticari üretilmektedir. Yazıcı dosyası bu derginin web sitesinden indirilebilir. <ol><li> Bir 0-80 x 1 &quot;makine vida için şerit ilk delik dokunun ve ilk delik sonra boş bir delik bırakın. </li><li> (Dar uçlarından aracılığıyla) kalan beş deliklerin altından geçerek beş altın kaplama işaretçilerine itin. eşit şerit içine işaretçilerine iterek kolaylaştırmak için bir mengene kullanın. </li><li> termal striptizci kullanarak, (çap. 0,005) bir paslanmaz çelik tel ucundan polimid kaplama yaklaşık 0.5 cm kaldırmak w soyulmuş ucunu lehimpim birinin açılması ire ve 0.6-0.7 cm tel kesme. </li><li> hayvana geçmesine güncel izin telin ucundan yaklaşık 0.2 cm şerit. </li><li> Kalan üç tel için 4.3-4.4 adımları tekrarlayın. Not: İkinci iki hayvana bir şok hizmet ederken ilk iki tel EMG yanıtları kaydeder. </li><li> son (beşinci) tel topraklama kablosu olarak görev yapacak kadar, (0.005. çap) kaplanmamış paslanmaz çelik tel yaklaşık 5 cm kesilmiş ve kalan pin lehim. </li><li> teller ve bir multimetre ile pimleri arasındaki sürekliliğini sağlamak. (Kaplanmamış olan topraklama kablosunun, durumunda, multimetre prob tel boyunca herhangi bir yere yerleştirilebilir.) </li></ol> 5. Cerrahi Hazırlık (Şekil 2F) <ol><li> headpiece dahil olmak üzere tüm cerrahi aletler sterilize edin. alkol iliklerine ve daha sonra steril tuzlu su ile durulayarak başlık parçası sterilize edin. </li><li> % 3-4 v indüksiyon odasında fare anestezisidakikada oksijen 1-2 L bir akış oranında karıştırılır izofluran aporized. </li><li> hayvan ayak tutam tam anestezi olduğunu teyit edin. o ayak tutam refleks yanıt vermiyor fare tam anestezi olduğunu. </li><li> Hayvan tamamıyla anestezi yapıldıktan sonra, hayvanın kafası üst tıraş bir analjezik (0.05-2 mg / kg, sc) halinde buprenorfin hidroklorid doz enjekte stereotaksik çerçeve bazında kapalı bir ısıtma yastığı üzerine yerleştirin hayvan tam anestezi olduğunu tespit ve çerçeveye başını sabitleyin. dakikada oksijen 1-2 L bir akış oranında% 2 geçiş, hayvana buharlaştırılmış izofluran akışını korur. kornealar oftalmik merhem küçük bir miktar uygulayın. </li><li> ikisi arasında değişen, povidon-iyot ve alkol üç kez, her ile kafa derisi dezenfekte edin. </li><li> Bir numara 10 veya 15 neşter bıçağı ile, t önüne gelen kafatası açığa kafa derisi orta hat boyunca bir kesi yapmakinterparietal kemik (~ 1.5-2 cm) geçmiş yılları gözleri. </li><li> Mikro klipleri ile cilt kanatlarının geri tutun. Bilateral kafatasının arka (yani, bütün altı klipleri kullanın) az bir gözünün üstünde klibi, rostral-kaudal eksen ortası boyunca bir ve bir tane koyun. başlık avulsiyon önlemek için, yan ve arka olmak üzere, mümkün olan kafatası kadar maruz kalmaktadır. Bu yapışkan siman uygulanması için yüzey alanını arttırır. </li><li> neşter kullanılarak, periost kaldırmak ve temiz ve kuru bir çalışma yüzeyini sağlamak için kafatasının üst kısmında kazıyın. % 3 hidrojen peroksit ile üç kez kafatasının üst temizleyin. </li><li> 00-90 vidaları kabul etmek için bir boyut 34 ters koni çapak veya 1,6 mm gravür kesici matkap ucu ile (içinde 0.0625. Uzunluğunda) kafatası içine iki delik delin. vidalar elektrik toprak bağlantısı sağlayacak. ne zaman righ Klima bir bregma önünde delik ve Lambda önünde diğer koyun, orta hat solt gözü. Her deliğe bir vida yerleştirin. her tam dönüş için kafatası içine vidayı 0.28 mm indirin; iki tam tur yeterlidir. </li><li> Çimento yüzey alanı ve kavrama gücünü artırmak amacıyla kafatası üzerinde çapı yaklaşık 0,75 mm birkaç küçük divots oluşturun. </li><li> tamamlanmış baş kısmını alın ve iki vida etrafında bir figür sekiz konfigürasyonunda topraklama kablosu rüzgar. topraklama tel başlık düzgün, daha sonra yerleştirilebilir, böylece biraz mola (baş kısmının ve vida arasında 1,5 cm ~) izin verir. Not: sekiz rakamı genellikle tel ve topraklama vidalar arasında iyi bir elektrik bağlantısı sağlar. tel de bir elektrik bağlantısı sağlamak için vida lehimlenebilir. </li><li> Yapışkan yapıştırma çimento uygulayın. Yapışkan yapıştırma çimento karıştırma için üreticinin talimatlarına uyun ya da soğuk seramik karıştırma kabına L-Toz karışımı 4 kaşık toz, baz 8 damla ve katalizör 2 damla karıştırın (sıcaklık şerit o sağlamakn karıştırma çanağı tamamen siyah.) soğuk sıcaklık çimento çalışma süresini uzatır. <ol><li> Coat kafatası ve yapıştırma çimento ile liberal vidalar ve çimento kurumasını bekleyin. Bu sadece bir kaç dakika sürer. </li></ol></li><li> Çimento kuruduktan sonra, pim kafatası üzerinde, ayakta olan, dikey baş kısmını yerleştirin. konnektörüne benzer bir tutucu ile yerde baş kısmını tutun Not: headpiece işaretçilerine alabilmek için olmak -The tutucu sadece gerek &quot;Connector Montaj 3.&quot; altın kaplama soketli bir beş delikli şeridi bakın. tutucu stereotaksik çerçeveye bir kola bağlanmıştır. tutucu ve kol kullanımı baş kısmının ve tellerin yerleştirilmesini kolaylaştırır. </li><li> başlık yerleştirildikten sonra, periorbital alanı çevresinde cilt geri soyma ve bitiş elimden 0.2 cm ey doğrudan kaudal cilt altına dinlenme ve yaklaşık 2-4 mm izin vermek için iki şok telleri konumlandırmake. İki tel uçları birbirine temas etmesine izin vermeyin. göz çukurlarının üzerinde muskularis orbikularis iki EMG teller yerleştirin. <ol><li> Onlar çok uzun ve yörüngeye çizilmeye ve enfeksiyona neden doğrudan olabilir sanki görünüyor eğer Gerekirse, tellerin uçları kesilmiş. tel uçlarını keserek varsa, maruz yeterince çıplak tel olduğundan emin olun. teller çok uzun görünüyor Alternatif olarak, geri onlar headpiece dışarı uzatmak dibinde tel viraj. </li><li> Tellerin tabanını Çimento (yani, baş kısmını yakın sonu) yapıştırıcı yapıştırıcı siman küçük bir yayılması ile kafatası üzerinde yer ve (daha önce açıklanan kısmının kullanılması yarısı) kurumasını bekleyin. </li></ol></li><li> Mikro klipleri kaldırın ve yavaşça geri çimento üzerinde deri kapaklarını katlayın. Göz kapağı bozulmasını önlemek için cilt için cildin herhangi bir kısmında gerginlik önlemek için doğal yerleşmesine izin, eyeblink tepki önlenmesi,ve hayvan sıkıntı. </li><li> çimento ile headpiece üst kenarına kazıma cilt her şeyi kapsayan, diş çimento ile maruz kalan alanı mühür. gözlerin veya headpiece pimleri üzerine çimento damlayan önlemek için ekstra özen gösterin. Kısmen tedavi çimento düzeltti ve diş çimento çözücü ile nemlendirilmiş bir pamuklu çubuk ile manipüle edilebilir. çimento başlık tutucu çıkarmadan önce tamamen kurumasını bekleyin. </li><li> hayvan kafesine geri hayvan değiştirmeden önce bir ısıtılmış yüzey üzerinde anestezi kurtarmak için izin verin. Metacam (1 mg / kg, SQ) verilmesini ve daha sonra tekrar kafesine hayvan. </li><li> test veya eğitim öncesi hayvana kurtarma 5-7 gün izin verin. kurumunuzun kurallarına göre hayvana standart post-operatif bakım koruyun. ameliyat kurtularak iyileşmiş olmasından sonra, hayvan en azından günde bir kez kontrol edilmelidir. fakir beslenme ve / veya içme ve dikkatsiz davranışı belirtileri izleyin. ağrı varsahafifletilebilir kadar şüphelenilen, Metacam her 24 saat (post-ameliyat sonunda aynı doz) sağlarlar. Lidokain lokal hayvan çizilmesi veya rahatsızlık belirtisi gösteren ise yaraya tatbik edilebilir. </li></ol> 6. Silindir ve Eğitim (Şekil 2G) Mouse Yerleştirme <ol><li> silindirin üzerine fareyi yerleştirmek için, diğer işaret parmağı ve başparmak ile omuzlar geride fare açgözlü sonra tek elle kuyruk tutarak ve kısaca bir el ile fare dizginlemek. Farenin karın ve gövde etrafında kalan parmaklarını sarın. </li><li> El fare frenleyici değil beraber, farenin kafasına headpiece Konnektörü takın ve kilitleme vidasını çevirin. </li><li> silindir üzerinde hafifçe fare koyun ve çerçeveye konektörü takarken yerde tutun. silindire yukarıdaki barlar konnektörü tutturmak için iki vidayı kullanın. </li><li> bağlayıcı silindir çerçevesine tespit edildikten sonra, serbest bırakılanFare beklemeye ase. fareyi silindire alışkanlık iki seans bir gün verin. Her alışkanlık oturumuna her klima oturumu aynı süreyi izin verin. <ol><li> Tutanak spontan göz kırpma habituation sırasında hızı ve ön maruz irkilme yanıtların oluşumunu en aza indirmek için bıyık titreşim CS fareler. gerçek bir klima oturumu sırasında olduğu gibi CS uygulayın, ancak elektrik olmadan ABD şok. </li><li> Bireysel bıyıkları üzerinde tarağın dişleri kaymasını ederken, fare şartına tarafına Piezo sistem yakın (yaklaşık 0.5 cm) (sağ taraf) koyarak bıyık uyarımı CS uygulayın. Aynı bıyıkları günden güne aynı pozisyonda Piezo sistemini yerleştirerek günden güne uyarılır emin olun. </li></ol></li><li> klasik koşullama fare eğitim başlayın. Beş gün boyunca günde eğitim iki seans sunun. Her antrenmandan arasında yaklaşık iki saat bekletin. <ol><li> klimalı grup, deli(- Bir TEFE A385R uyaran izolatör teslim 3 mA, 0.3 mA) 100 msn uzun elektrik darbe ABD ile eşleştirilmiş bir 250 msn uzun bıyık titreşim CS (60 Hz) ve seans başına otuz çalışmalarda ver. (Şekil 1) 23 hipokampus görev bağımlı hale getirmek için 250 msn uzun uyaran ücretsiz iz aralığı ile CS ve ABD ayırın. </li><li> Bir göz kırpma uyarılmış böylece her hayvan için elektrik çarpması yoğunluğunu ayarlayın. 30-60 saniyelik bir rasgele intertrial arayla ayrı denemeler (45 sn, seans başına 30 dakika toplam süresi ortalama.) </li><li> Tek başına otuz eşleşmemiş CS sunun ve ABD tek başına çalışmalar her klimalı grup için belirtilen aynı uyaran parametreleri kullanarak pseudoconditioned gruba, (altmış çalışmaların toplam). hiçbir uyarıcı arka arkaya iki kez daha fazla sunulmaktadır olduğunu CS&#39;nin tek başına ve ABD tek başına çalışmalar gibi pseudorandomized emin olun. 22.5 sn ortalama intertrial aralıklarla her deneme ayırın. </li></ol></li><li> desırayla alışkanlık ve eğitim boyunca 65 dB karaciğer arka plan gürültü bıyık stimülatörü tarafından oluşturulan titreşim herhangi bir gürültü maskelemek için. </li></ol>

<ol><li>Clark, R. E., Squire, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classical+conditioning+and+brain+systems%3A+the+role+of+awareness%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Classical conditioning and brain systems: the role of awareness.</a> Science. 280 (5360), 77-81 (1998).</li>
<li>Thompson, R. F., Kim, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Memory+systems+in+the+brain+and+localization+of+a+memory%5BTitle%5D)+AND+%22PNAS%22%5BJournal%5D)">Memory systems in the brain and localization of a memory.</a> PNAS. 93 (24), 13438-13444 (1996).</li>
<li>Solomon, P. R., Vander Schaaf, E. R., Thompson, R. F., Weisz, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampus+and+trace+conditioning+of+the+rabbit%27s+classically+conditioned+nictitating+membrane+response%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Hippocampus and trace conditioning of the rabbit's classically conditioned nictitating membrane response.</a> Behav Neurosci. 100 (5), 729-744 (1986).</li>
<li>Moyer, J. R., Deyo, R. A., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampectomy+disrupts+trace+eye-blink+conditioning+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Hippocampectomy disrupts trace eye-blink conditioning in rabbits.</a> Behav Neurosci. 104 (2), 243-252 (1990).</li>
<li>Weiss, C., Bouwmeester, H., Power, J. M., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+lesions+prevent+trace+eyeblink+conditioning+in+the+freely+moving+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Hippocampal lesions prevent trace eyeblink conditioning in the freely moving rat.</a> Behav Brain Res. 99 (2), 123-132 (1999).</li>
<li>Weiss, C., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+prefrontal+cortical+memory+mechanisms+with+eyeblink+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Exploring prefrontal cortical memory mechanisms with eyeblink conditioning.</a> Behav Neurosci. 125 (3), 318-326 (2011).</li>
<li>Aiba, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficient+cerebellar+long-term+depression+and+impaired+motor+learning+in+mGluR1+mutant+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Deficient cerebellar long-term depression and impaired motor learning in mGluR1 mutant mice.</a> Cell. 79 (2), 377-388 (1994).</li>
<li>Skelton, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+cerebellar+lesions+disrupt+conditioned+eyelid+responses+in+unrestrained+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Bilateral cerebellar lesions disrupt conditioned eyelid responses in unrestrained rats.</a> Behav Neurosci. 102 (4), 586-590 (1988).</li>
<li>Takehara, K., Kawahara, S., Takatsuki, K., Kirino, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-limited+role+of+the+hippocampus+in+the+memory+for+trace+eyeblink+conditioning+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Time-limited role of the hippocampus in the memory for trace eyeblink conditioning in mice.</a> Brain Res. 951 (2), 183-190 (2002).</li>
<li>Weiss, C., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evoking+blinks+with+natural+stimulation+and+detecting+them+with+a+noninvasive+optical+device%3A+A+simple%2C+inexpensive+method+for+use+with+freely+moving+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Meth%22%5BJournal%5D)">Evoking blinks with natural stimulation and detecting them with a noninvasive optical device: A simple, inexpensive method for use with freely moving animals.</a> J Neurosci Meth. 173, 108-113 (2008).</li>
<li>Royer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+timing%2C+rate+and+bursts+of+hippocampal+place+cells+by+dendritic+and+somatic+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Control of timing, rate and bursts of hippocampal place cells by dendritic and somatic inhibition.</a> Nature. 15 (5), 769-775 (2012).</li>
<li>Goldey, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Removable+cranial+windows+for+long-term+imaging+in+awake+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protoc%22%5BJournal%5D)">Removable cranial windows for long-term imaging in awake mice.</a> Nature Protoc. 9 (11), 2515-2538 (2014).</li>
<li>Lovett-Barron, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendritic+inhibition+in+the+hippocampus+supports+fear+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Dendritic inhibition in the hippocampus supports fear learning.</a> Science. 343 (6173), 857-863 (2014).</li>
<li>Chettih, S. N., McDougle, S. D., Ruffolo, L. I., Medina, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptive+timing+of+motor+output+in+the+mouse%3A+the+role+of+movement+oscillations+in+eyelid+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Front+in+Integ+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Adaptive timing of motor output in the mouse: the role of movement oscillations in eyelid conditioning.</a> Front in Integ Neurosci. 5 (72), (2011).</li>
<li>Heiney, S. A., Wohl, M. P., Chettih, S. N., Ruffolo, L. I., Medina, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebellar-Dependent+Expression+of+Motor+Learning+during+Eyeblink+Conditioning+in+Head-Fixed+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cerebellar-Dependent Expression of Motor Learning during Eyeblink Conditioning in Head-Fixed Mice.</a> J Neurosci. 34 (45), 14845-14853 (2014).</li>
<li>Siegel, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trace+Eyeblink+Conditioning+in+Mice+is+Dependent+upon+the+Dorsal+Medial+Prefrontal+Cortex%2C+Cerebellum%2C+and+Amygdala%3A+Behavioral+Characterization+and+Functional+Circuity%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">Trace Eyeblink Conditioning in Mice is Dependent upon the Dorsal Medial Prefrontal Cortex, Cerebellum, and Amygdala: Behavioral Characterization and Functional Circuity.</a> eNeuro. , (2015).</li>
<li>Galvez, R., Weiss, C., Cua, S., Disterhoft, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+precisely+timed+stimulation+of+mouse+whiskers+in+a+freely+moving+preparation%3A+application+for+delivery+of+the+conditioned+stimulus+in+trace+eyeblink+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Meth%22%5BJournal%5D)">A novel method for precisely timed stimulation of mouse whiskers in a freely moving preparation: application for delivery of the conditioned stimulus in trace eyeblink conditioning.</a> J Neurosci Meth. 177 (2), 434-439 (2009).</li>
<li>Gruart, A., Sánchez-Campusano, R., Fernández-Guizán, A., Delgado-Garcìa, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Differential+and+Timed+Contribution+of+Identified+Hippocampal+Synapses+to+Associative+Learning+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cereb+Cortex%22%5BJournal%5D)">A Differential and Timed Contribution of Identified Hippocampal Synapses to Associative Learning in Mice.</a> Cereb Cortex. , (2014).</li>
<li>Weiss, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+Eyeblink+Conditioning+and+Decreased+Hippocampal+Volume+in+PDAPP+V717F+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Impaired Eyeblink Conditioning and Decreased Hippocampal Volume in PDAPP V717F Mice.</a> Neurobiol Dis. 11 (3), 425-433 (2002).</li>
<li>Galvez, R., Weiss, C., Weible, A. P., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vibrissa-signaled+eyeblink+conditioning+induces+somatosensory+cortical+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Vibrissa-signaled eyeblink conditioning induces somatosensory cortical plasticity.</a> J Neurosci. 26 (22), 6062-6068 (2006).</li>
<li>Galvez, R., Weible, A. P., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+barrel+lesions+impair+whisker-CS+trace+eyeblink+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Learn+%26+Memory%22%5BJournal%5D)">Cortical barrel lesions impair whisker-CS trace eyeblink conditioning.</a> Learn & Memory. 14 (1), 94-100 (2007).</li>
<li>Johnson, K. R., Zheng, Q. Y., Erway, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Major+Gene+Affecting+Age-Related+Hearing+Loss+Is+Common+to+at+Least+Ten+Inbred+Strains+of+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genomics%22%5BJournal%5D)">A Major Gene Affecting Age-Related Hearing Loss Is Common to at Least Ten Inbred Strains of Mice.</a> Genomics. 70 (2), 171-180 (2000).</li>
<li>Tseng, W., Guan, R., Disterhoft, J. F., Weiss, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trace+eyeblink+conditioning+is+hippocampally+dependent+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Trace eyeblink conditioning is hippocampally dependent in mice.</a> Hippocampus. 14 (1), 58-65 (2004).</li>
<li>Joachimsthaler, B., Brugger, D., Skodras, A., Schwarz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spine+loss+in+primary+somatosensory+cortex+during+trace+eyeblink+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Spine loss in primary somatosensory cortex during trace eyeblink conditioning.</a> J Neurosci. 35 (9), 3772-3781 (2015).</li>
<li>Boele, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebellar+and+extracerebellar+involvement+in+mouse+eyeblink+conditioning%3A+the+ACDC+model%5BTitle%5D)+AND+%22Front+in+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cerebellar and extracerebellar involvement in mouse eyeblink conditioning: the ACDC model.</a> Front in Cell Neurosci. 3 (19), (2010).</li>
<li>Koekkoek, S. K. E., Den Ouden, W. L., Perry, G., Highstein, S. M., De Zeeuw, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+kinetic+and+frequency-domain+properties+of+eyelid+responses+in+mice+with+magnetic+distance+measurement+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Monitoring kinetic and frequency-domain properties of eyelid responses in mice with magnetic distance measurement technique.</a> J Neurophysiol. 88 (4), 2124-2133 (2002).</li>
<li>Ward, R. L., Flores, L. C., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infragranular+barrel+cortex+activity+is+enhanced+with+learning%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Infragranular barrel cortex activity is enhanced with learning.</a> J Neurophysiol. 108 (5), 1278-1287 (2012).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarları olduğunu beyan ederim.

Klasik eyeblink klima öğrenme ve bellek altında yatan nöral substratları anlamak için yararlı bir araçtır ilişkisel öğrenme şeklidir. fare gibi kemirgenlerde eyeblink klima için kullanılan Önceki yöntemler hayvan hakkında serbestçe hareket etmesine izin veren bir odayı çıkıyor. Siegel ve ark., Işık uyarılmış izleme eyeblink şartlandırma Chettih ve ark., Ve Heiney ve ark. Ve en son kullanılan tarafından tanımlanan cihaz kullanılarak farelerde eyeblink iyileştirilmesi için bir kafa sabit hazırla...

Eyeblink klima Pavlovyan klima şeklidir ve birleştirici öğrenme ve hafıza nöral mekanizmaları araştırmak için bir model sistem. İnsanlarda, tavşan, kedi, sıçanlar ve fareler dahil olmak üzere çeşitli türlerin, araştırılmıştır. Paradigma iki eşleştirilmiş uyaranlara sunumunu içerir: nötr koşullandırılmış uyaran (CS, örneğin, bir ses, bir ışık flaş veya bıyık stimülasyon) ve çarpıcı koşulsuz uyaran (ABD; örneğin, göz bir hava puf ya da periorbital şok). ABD koşulsuz, dönüşlü eyeblink tepkisi (yani, UR) ortaya çıkarır. Sonunda, eşleştirilmiş CS-ABD birkaç sunumların ardından, konu ABD ile CS ilişkilendirmek öğrenir. Bu öğrenme durumunu yanıt (CR), ABD&#39;nin sunumu öncesinde yalnız CS tarafından ortaya bir eyeblink şeklinde kendini gösterir. izleme şeklinde eyeblink Tertibatı bir kaç saatlik bir uyarı içermeyen aralığını kapsarCS ve ABD (Şekil 1) ayıran undred milisaniye. O uyaran şarta 1 bilincini gerektirir çünkü iz klima bildirimsel öğrenme şeklidir. Zamansal boşluk 1-6 ilişkili olma ABD ve CS sırayla hipokampus gibi ön beyin bölgelerinde CS nöral &#39;iz&#39; tutmak için hayvan gerektirir. Ön beyin bölgeleri ile birlikte, izleme Tertibatı serebellumda 7 bağlıdır. Eyeblink klima, bu nedenle, satın alma, konsolidasyon ve alma da dahil olmak üzere bellek çoklu yönleriyle, soruşturma için yararlı bir paradigma. eyeblink klima sırasında, hayvanların bir kontrol grubu ABD sunumu yalnız ziyade öğrenilen CS-ABD dernek neden olabilir CS pseudoconditioning veya hassaslaştırılmış yanıtlar için test etmek rasgele sırayla eşleşmemiş uyaranlara ile sunulmaktadır. Yaygın olarak kullanılan bir cihatus kemirgenler eyeblink klima soruşturma kemirgenler eğitim sürecinde 8-10 sırasında yaklaşık serbestçe hareket etmesine izin verilen bir bölme olduğunu. düzeneğin bu tür ile, bir bağlama ipi normalde kemirgen kafatasına takılan bir başlık parçası eklenir. Halata ABD (ve bazen de CS) verilmesi için ve bu uyaranlara (örn eyeblink tepki) 10 hayvanın tepki iletmeye olanak sağlar. bağlama kendisinin teslim uyaranlara türüne bağlı olarak değiştirilebilir ve eyeblink tepkisi kadar kaydedilir. eyeblink klima için &quot;özgürce hareket&quot; gergin fareler kullanılmasının nedeni fareler kısıtlama karşı mücadele olmasıdır. Diğer türler bağlama için daha uygun olabilir de, eyeblink Tertibatı deneylerde fareler kullanılarak en büyük avantajı, mevcut genetik olarak modifiye edilmiş mutant çoğunluğu fare soyları olmasıdır. mücadele tam Res ilavetenFarelerin TRAINT akut stres ile sonuçlanır. stresi en aza indiren bir kafa sabit fare hazırlık eyeblink klima sırasında elde edilebilir fizyolojik bilgileri artacaktır. Örneğin bu sistem, 2 foton mikroskopi 11 kortikal nöronlar görüntüleme izin verir. Genel sabit preparatlar ve ayrıca farelerde 11 eyeblink havalandırma için bir platform, Tetrode dizileri, iki foton kalsiyum görüntüleme ile kemirgen beyin in vivo elektrofizyolojik kayıtları, kaldırılabilir kranyal implantlar vasıtasıyla korteks optik görüntüleme için daha önceki deneylerde kullanılmış -16. Kafa sabit sistemde, güvenilir uyarılması ve kayıtları fare (Şekil 2) tam kısıtlama olmaksızın sağlanmaktadır. serbestçe hareket sisteminde kullanılan gibi bir başlık farenin kafatasına yapıştırılmıştır. eğitim sırasında, baş kısmının içinde çubuklarına bağlı bir bağlayıcı yapıştırılmıştıramacıyla silindirik bandı kemirgen kafa (Şekil 2A) stabilize etmek için. Silindirik koşu bandı fare rahatça dinlenmek için izin verir, ancak fare eğer isterse, aynı zamanda çalıştırmak için ya da yürümek için izin verir. Bu sistemin kullanımı ile, fareler CS ve ABD gibi hafif bir periorbital elektrik çarpması gibi bıyık titreşim (Şekil 1) eğitilmiş olabilir. ABD cerrahi göze cilt yanal altına yerleştirilen teller aracılığıyla teslim edilir. CS, 2-tabakalı bir dikdörtgen bükme aktüatör (Şekil 2B) bağlanmış olan bir tarak ile teslim edilir. Tarak ve bükme ayar elemanı daha sonra eğitim sırasında düzgün bir pozisyonda taşınır ve her bir hayvan için en uygun dağıtımı için ayarlanır manyetik bir baz eklenir. tarak seçilen bıyıkları apışıp kalmak için konumlandırılmış. CS doğum sırasında, bir sinyal tarağı yerinden ve bıyık 17 titreşim yol açar bükme aktüatör gönderilir. 16,18,19 farelerde etkin bir koşullu uyaran olarak kullanılmıştır. nedeni bıyık stimülasyon Bu deneysel paradigma CS için seçilen keşif sırasında somatosensoriyel bilgi girişi için kendi burun kılı üzerinde fare hayvanların bağımlılığıdır. Bıyık uyarım, güvenilir ve etkili bir CS 20 olduğu gösterilmiştir. CS eyeblink klima 20,21 öğrenme ile ilişkili kortikal değişiklikler ve plastisite haritalama için zarif bir araç sağlar Dahası, burun kılı sistemi (yani, varil korteks), bıyık stimülasyon köklü ve organize kortikal substrat verilen. Bir baş-sabit sistem uyarılır nöronlar ve olmayan uyarılan bıyıkları girişlerini alan nöronlar arasındaki cevapları karşılaştırmak için seçilen bıyıkları kesin uyarılması için izin verir. Son olarak, farelerin birçok suşları yaşa bağlı işitme kaybı gibi nispeten genç yetişkinleri sergilemek <su(görsel CS irkilme yanıtları 16 ile ilgili sorunları düzeltmek rağmen) şartına yanıp sırasında p&gt; 22 ve gözkapağı kapatma görsel CS değiştirir. Bıyık stimülasyonu, bu komplikasyonların ya da etkilenmez. eşsiz ve önemli CS ve ABD teslimat için yöntemler de dahil olmak üzere eyeblink klima, diğer kafa sabit hazırlıkları üzerine modifikasyonlar ve eyeblink yanıt edinimi burada sundu. Bu cihaz ve eyeblink klima eğitim paradigma güvenilirliği şartlandırılmış farelerde ve pseudoconditioned kontrol hayvanları (Şekil 7A) bir nispeten düz bir öğrenme eğrisi ile ilgili öğrenme eğrileri gösterilmiştir.

<table><tbody><tr><td>Exervo TeraNova Köpük Rulo 36" x 6" &nbsp;</td><td>Amazon</td><td>B002ONUM0E</td><td>Silindir</td></tr><tr><td>Pleksiglas</td><td></td><td></td><td>için Özel yapım; 1 cm kalınlığında</td></tr><tr><td>Metal Çubuklar (12.7&nbsp; mm çap)</td><td></td><td></td> <td>Ismarlama</td></tr><tr><td>4-40 makine vidası (.25 & nbsp; içinde. uzun)</td> <td>Amazon Tedarik</td><td>B00F33Q8QO</td><td>Silindir için</td></tr><tr><td>Klasik Tasarım Saç Tarağı</td><td>Conair</td><td>93505WG-320</td><td>Bıyık stimülasyonu için</td></tr><tr><td>2 Katmanlı Dikdörtgen Bükme Aktüatörü</td><td>Piezo Sistemleri</td><td>T220-A4-303X&nbsp;</td><td>Bıyık stimülasyonu için</td></tr><tr><td>Lehim ve Akı Kiti</td><td>Piezo Sistemleri</td><td>MSF-003-NI</td><td>Bıyık stimülasyonu için</td></tr><tr><td>Manyetik Taban</td><td>Thor Labs</td><td>MB175</td><td>Bıyık stimülasyonu için</td></tr><tr><td>Manyetik taban</td><td></td><td></td> için dişli çubuk <td></td></tr><tr><td>Electronic Connector Corp.'un 221 serisi naylon şerit konektörlerine dayalı</td> ısmarlama Şeritler.<td></td><td></td><td>Weiss ve Disterhoft'a dayalı ısmarlama, 2008</td></tr><tr><td>TO-220 Stil Transistör</td><td>Amazon Supply</td><td>B0002ZPZYO&nbsp;</td><td>Konektör için; kanatlar için</td></tr><tr><td>Relia-Tac Soketler</td><td>Elektronik Konnektör A.Ş.</td><td>220-S02</td><td>Konnektör</td></tr><tr><td>için Relia-Tac Pinleri</td><td>Elektronik Konnektör A.Ş.</td><td>220-P02</td><td>Başlık</td></tr><tr><td>için 0-80 paslanmaz çelik makine vidası (1 inç uzunluğunda)</td><td>Amazon Tedarik</td><td>B000FN68EE</td><td>Kilitleme Vidası</td></tr><tr><td>0-80 paslanmaz çelik makine vidası altıgen somun (5/32 inç kalınlığında)</td><td>Amazon Supply</td><td>B000N2TK7Y</td><td>Kilitleme Vidası</td></tr><tr><td>Başlı Loctite Süper Tutkal-Sıvı</td><td>Loctite</td><td>1365896</td><td>Siyanoakrilik yapıştırıcı; kilitleme vidası için</td></tr><tr><td>Hızlı Ayar Epoksi</td><td>Ace Donanım</td><td>18613</td><td>Konektör ve bıyık stimülasyon sistemi için</td></tr><tr><td>Ethernet Kablosu Telleri</td><td></td><td></td><td>Ethernet kablosu, konektör için ayrı kabloları kullanmak üzere ayrılabilir:</td></tr><tr><td>Poliimid kaplı paslanmaz çelik teller (2&nbsp; içinde. uzun, .005 inç. çap)</td> <td>PlasticsOne</td><td>005sw / 2.0 37365 S-S & nbsp;</td><td>Başlık, EMG ve şok telleri için</td></tr><tr><td>Paslanmaz çelik kaplamasız tel (.005&nbsp; içinde. çapı)</td> <td>Sistemleri</td><td>792800</td><td>Başlık, topraklama kabloları için</td></tr><tr><td>Tenma Değişken Ototransformatör</td><td>Tenma</td><td>72-110</td><td>Bıyık stimülasyonu için; bükme aktüatörüne akımı ayarlamak için reosta</td></tr><tr><td>Amplifikatör</td><td>A-M Sistemleri</td><td>1700</td><td>EMG sinyallerini filtrelemek ve yükseltmek için amplifikatör</td></tr><tr><td>WPI A385R uyaran izolatörü</td><td>Dünya Hassas Aletler</td><td>31405</td><td>için elektrik çarpması</td></tr><tr><td>İzothesia (Isoflurane)</td><td>Henry Schein: Hayvan Sağlığı</td><td>50031</td><td>Ameliyat için; anestezi</td></tr><tr><td>Buprenex Enjekte Edilebilir CIII</td><td>Reckett Benckiser İlaç A.Ş</td>. <td>NDC 12496-0757-1</td><td>Ameliyat için; analjezik</td></tr><tr><td>Akwa Gözyaşları: Kayganlaştırıcı Oftalmik Merhem&nbsp;</td><td>Akorn</td><td>NDC 17478-062-35</td><td>Anestezi altındayken göz kuruluğunu önlemek için yapay gözyaşı merhemi</td></tr><tr><td>Povidin-İyot Hazırlık Pedleri</td><td>PDI</td><td>NDC 10819-3883-1</td><td>Ameliyat için; antiseptik</td></tr><tr><td>Alkol Hazırlama Pedleri</td><td>Herhangi bir standart eczaneden satın alınabilir</td>Paslanmaz çelik cerrahi neşter kolları <td></td><td></td></tr><tr><td>(no.3)</td> <td>Integra Miltex&nbsp;</td><td>4-7.Ameliyat</td> <td>için</td></tr><tr><td>Paslanmaz çelik cerrahi neşter bıçakları</td><td>Integra Miltex</td><td>4-310 veya 4-315</td><td>Ameliyat için; 10 veya 15 numara neşter bıçağı</td></tr><tr><td>%3 Hidrojen Peroksit</td><td></td><td></td><td>Herhangi bir standart eczaneden satın alınabilir</td></tr><tr><td>Micro Clip</td><td>Roboz</td><td>RS-5459</td><td>Ameliyat için, cildi geri tutmak için</td></tr><tr><td>00-90 paslanmaz çelik makine vidası (0.0625&nbsp; içinde. uzun)</td><td>Amazon Tedarik</td><td>B002SG89X4&nbsp;</td><td>Ameliyat için, topraklama telini etrafına sarmak için</td></tr><tr><td>Profesyonel Döner Alet</td><td>Ceviz İçi Boş</td><td>29637</td><td>Ameliyat için el matkabı, kafatasında delik açmak için</td></tr><tr><td>Ters Koni Çapak</td><td>Roboz</td><td>RS-6282C-34</td><td>Ters koni çapak boyutu 34; ameliyat için, kafatasında delikler açmak için</td></tr><tr><td>Gravür Kesici Matkap Ucu</td><td>Dremel</td><td>106</td><td>Gravür kesici; 1,6 mm bit; ameliyat için, kafatasında delikler açmak için</td></tr><tr><td>C& B Metabond-Hızlı! Çimento Sistemi "B" Hızlı Taban</td><td>Parkell</td><td>S398</td><td>Ameliyat için; yapıştırıcı yapıştırma çimento sistemi; başlık avülsiyonunu önlemek için önemlidir</td></tr><tr><td>C & B Metabond-Hızlı! Çimento Sistemi Şeffaf L-Toz</td><td>Parkell</td><td>S399</td><td>Ameliyat için; yapıştırıcı yapıştırma çimento sistemi; Başlık avülsiyonunu önlemek için önemlidir</td></tr><tr><td>C & B Metabond-Hızlı! Çimento Sistemi "C" Üniversal TBB Katalizörü 0.7 ml</td><td>Parkell</td><td>S371</td><td>Ameliyat için; yapıştırıcı yapıştırma çimento sistemi; başlık avülsiyonunu önlemek için önemlidir</td></tr><tr><td>C& B Metabond-Hızlı! Çimento Sistemi Sıcaklık şeritli Seramik Karıştırma Kabı</td><td>Parkell</td><td>S387</td><td>Ameliyat için; yapıştırıcı yapıştırma çimento sistemi; Başlık avülsiyonunu önlemek için önemli</td></tr><tr><td>İsviçre Cımbız, stil #5</td><td>Dünya Hassas Aletler</td><td>504506</td><td>Ameliyat için</td></tr><tr><td>Püriten Pamuk Uçlu Aplikatörler</td><td>VWR International</td><td>10806-005&nbsp;</td><td>Ameliyat için</td></tr><tr><td>Dental Kalafat Kavrama Çimento Kiti</td><td>Dentsply</td><td>675570</td><td>Ameliyat için; diş çimentosu</td></tr></tbody></table>

baş-sabit farelerde bıyık-sinyalini eyeblink klasik koşullanma

Whisker-signaled Eyeblink Classical Conditioning in Head-fixed Mice

Göz kırpma koşullandırması, öğrenme ve hafızanın altında yatan sinirsel mekanizmaları araştırmak için yaygın bir paradigmadır. Hücresel düzeyde öğrenme ve hafızayı incelemek için mevcut olan kapsamlı bilimsel teknikler repertuarını daha iyi kullanmak için, istikrarlı bir kraniyal platforma sahip olmak idealdir. Fareler kısıtlamaya kolayca tahammül edemedikleri için, genellikle bir odada serbestçe hareket ederken eğitilirler. Koşullu uyaran (CS) ve koşulsuz uyaran (US) bilgileri iletilir ve göz kırpma yanıtları, farenin kafasına bağlı bir ip aracılığıyla kaydedilir. Burada sunulan kafaya sabitlenmiş aparatta, deneyi kolaylaştırmak için kafaları sabitlenirken farelerin istedikleri gibi koşmalarına izin verilir. CS olarak bıyık stimülasyonunun, US olarak periorbital bir elektrik şokunun verilmesine ve göz kırpma tepkilerini tespit etmek için göz kapağından elektromiyografik (EMG) aktivitenin analizine izin veren bu eğitim cihazı ile göz kırpma yanıtının güvenilir bir şekilde koşullandırılması elde edilir.

8-10 haftalık erkek C57BL6 / J fareleri kafa sabit silindirik koşu bandı aparatı üzerinde iz eyeblink klima konusunda eğitilmiştir. 8 fare eşleştirilmiş CS-ABD sunumlar (klimalı grup) ve 9 fareler ile eğitilmiş eşleştirilmemiş CS ve ABD sunumlar (pseudoconditioned grup) ile eğitilmiştir. Bir şartlı fare şartlı yanıt Örnek EMG kayıtları, Şekil 3 ve 4&#39;te gösterilmiştir. Her deneme için EMG k...

Başa sabitlenmiş farelerde bıyık işaretli göz kırpma koşullandırması için burada sunulan hazırlık, farelerin silindirik bir koşu bandı üzerinde yürümesine izin verirken belirli bıyıkları hassas bir şekilde uyarır. Periorbital şok koşulsuz uyaran (US) ile eşleştirilmiş bir bıyık stimülasyonu koşullu uyaran (CS), bu aparat üzerinde güvenilir ilişkisel öğrenme ile sonuçlanır.

Baş-sabit Farelerde bıyık-sinyalini eyeblink Klasik Koşullanma

Eyeblink conditioning is a common paradigm for investigating the neural mechanisms underlying learning and memory. To better utilize the extensive ...

Bu protokolün genel amacı, farelerdeki genetik ilerlemeleri ve bıyık sistemine dair anlayışımızı kullanarak, öğrenme ve belleği incelemek için dönüştürülebilir bir paradigma olan göz kırpma koşullanmasının nörobiyolojik temellerini araştırmaktır. Bu yöntem, koşullanma sırasında belirli bıyıklar uyarılırken, genetik olarak manipüle edilmiş farelerde kalsiyum görüntüleme ve elektrofizyoloji kullanarak öğrenme ve bellekteki mekanistik soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, farelerin silindirik bir koşu bandı üzerinde kendi hızlarında hareket etmelerine izin vererek stresi minimize ederken fare başlarının sabitlenmesini sağlayabilmesidir.Bu tekniğin etkileri, normal yaşlanma ve Alzheimer hastalığı ile ilişkili olanlar da dahil olmak üzere, hafıza kaybı için potansiyel tedavilere kadar uzanmaktadır. Silindirin ve bıyık stimülasyon sisteminin hazırlanışı metin protokolünde ayrı ayrı ele alınmıştır. Bu bölüm, başlığın hazırlanışını kapsamaktadır.Başlık şeridi, artık ticari olarak üretilmeyen Amphenol 221 serisi naylon şerit temel alınarak modellenmiş, 3D yazıcıyla basılmış yedi delikli bir şerittir. 3D basılan parçanın üzerindeki ilk deliği, 0-80 bir inçlik makine vidası için kılavuzlayın ve ilk delikten sonra bir deliği boş bırakın. Ardından, bir mengene kullanarak geri kalan beş deliğe beş adet altın kaplama pin yerleştirin.Pinleri plastikteki daha dar deliklerden itin. Ardından, termal bir soyucu kullanarak poliimid kaplamanın yarım santimetresini soyun. Daha sonra, soyulmuş ucu, pinin bir açıklığı olduğu pinlerden birine lehimleyin.Lehimlenmiş teli altı ile yedi milimetre arasında bir uzunlukta kesin ve telin yaklaşık iki milimetrelik kısmını soyun. Şimdi, beş pine toplam dört tel takmak için bu işlemi tekrarlayın. İlk iki tel göz kapağı EMG yanıtlarını kaydederken, diğer iki tel periorbital bölgeye elektriksel stimülasyon uygulayacaktır.Beşinci pine, elektriksel toprak hattı görevi görmesi için yalıtımsız beş santimetrelik bir paslanmaz çelik tel lehimleyin. Tüm bağlantıları yaptıktan sonra, elektriksel iletkenliklerinden emin olmak için her birini bir multimetre ile kontrol edin. Ayak parmağı sıkıştırma testi ile onaylanmış, tamamen anestezi uygulanmış bir hayvanla başlayın.Analjezik olarak bir doz buprenorphine hydrochloride enjekte edin. Ardından kornealara az miktarda oftalmik pomad uygulayın ve hayvanın başının üst kısmını tıraş edin. Sonrasında, hayvanın başını stereotaksik bir çerçeveye sabitleyin ve kafa derisini ardışık olarak üç kez povidone iodine ve alkol ile temizleyerek dezenfekte edin.10 veya 15 numara bistüri ucu ile kafa derisinin orta hattı boyunca, gözlerin önünden interparietal kemiğin ötesine kadar kafatasını açığa çıkaracak bir insizyon yapın. Deri fleplerini altı adet mikroklips ile geri çekerek yanlar ve arka kısım da dahil olmak üzere kafatasının mümkün olduğunca büyük bir kısmını açığa çıkarın. Ardından, periostu kafatasından sıyırmak için bistüriyi kullanın.Ardından kafatasının üst kısmını %3 hidrojen peroksit ile üç kez temizleyin. Kafatası kuruduktan sonra, beyne zarar vermemeye dikkat ederek 34 numara ters konik frez ile iki delik açın. Bir deliği bregmanın önüne, diğer deliği ise sağ göz koşullandırılırken orta hattın soluna veya tersi durumda sağ tarafına, lambdanın önüne yerleştirin.Bu delikler, vidaların sığması için dikkatli bir şekilde açılmalı ve beynin zarar görmemesi için azami özen gösterilmelidir. Elektrik bağlantıları için vidaları deliklere yerleştirin. Her tam tur vidayı 0,28 milimetre indirecektir, bu nedenle iki tam tur yeterlidir.Ardından, çimentonun tutunacağı yüzey alanını artırmak için kafatasında birkaç küçük oyuk oluşturun. Tamamlanan başlığın iki vidası etrafına toprak telini sekiz şeklinde sarın. Başlığın düzgünce konumlandırılabilmesi için toprak telinde bir miktar boşluk bırakın.Şimdi, soğuk lütleme simanı uygulayın. Kafatası ve vidaları bolca kaplayın ve simanın kurumasına izin verin. Siman kuruduktan sonra, başlığı, pimler kafatasının üzerinde dik duracak şekilde dikey olarak konumlandırın.Başlığı, şasiden gelen bir kola bağlı bir tutucu ile sabitleyin. Tutucunun, başlığın pinlerini kabul edecek beş adet altın kaplama sokete sahip olması gerekir. İki EMG telini, göz çukurunun üzerindeki muscularis orbicularis oculi kası üzerine yerleştirin.Ardından, iki stimülasyon telini yerleştirin. Soyulmuş uçları gözün hemen kaudal kısmına, iki ila dört milimetre mesafeyle deri altına yerleştirin. Uçların birbirine değmesine izin vermeyin.Teller, hayvanın gözünü çizebilecek kadar uzunsa, onları kısaltın veya geriye doğru bükün. Bir miktar çıplak tel açıkta kalmalıdır. Şimdi, tellerin tabanını biraz daha luting cement ile kafatasına sabitleyin ve kurumasını bekleyin.Önceki kullanımın yaklaşık yarı hacminde miktar kullanın. Devam etmek için mikro klipleri çıkarın ve cildi yeniden konumlandırın. Göz kapağını deforme ederek kırpma işlemini engelleyecek ve böylece deneyi bozacak cilt gerginliğini önlemek için cildin doğal olarak yerleşmesine izin verin.Deri yerleştiğinde, başlık tutucuyu çıkarın ve açıkta kalan bölgeyi diş çimentosu ile mühürleyin. Gözlerin veya başlığın pinlerinin üzerine çimento damlatmaktan kaçının. Ardından, gerektiğinde kısmen kürlenmiş çimentoyu düzeltmek ve şekillendirmek için diş çimentosu çözücüsü ile nemlendirilmiş bir pamuklu çubuk kullanın.Çimento tamamen kuruduktan sonra hayvanı stereotaksik çerçeveden çıkarın ve ana kafesine geri döndürmeden önce sıcak bir yüzeyde iyileşmesine izin verin. Farelerin alıştırma sürecine, en az beş günlük iyileşme süresi geçirdikten sonra başlayın. Fareyi sabitlemek için, omuzlarının arkasından kavrayarak kuyruğundan kısa süreliğine tutun.Ardından fareyi karın ve gövde altından kaldırın. Sonra, başlığa bir konnektör takın ve kilitleme vidasını çevirin. Daha sonra, fareyi nazikçe silindirin üzerine yerleştirin ve konnektörü silindirin üzerindeki çubuklara iki vida ile sabitlediğiniz sırada fareyi hareketsiz tutun.Ardından fareyi serbest bırakın. İlk iki oturumda, farenin silindire bir şartlandırma oturumuyla aynı süre boyunca alışmasını sağlayın. Alıştırma süresince, spontan kırpma hızını kaydedin.Ayrıca, fareleri elektriksel stimülasyon uygulamadan bıyık vibrasyon stimülatörüne önceden maruz bırakın. Piezo sistemi koşullandırılan tarafa yakınken, tarağın dişlerini tek tek bıyıkların üzerine geçirin. Her seans için aynı bıyıkları seçin.Ardından, metinde sunulan klasik koşullanma eğitimine geçin. Sekiz ila on haftalık erkek C57 Black 6J fareleri, başı sabitlenmiş silindirik koşu bandında iz bırakan göz kırpma koşullanması ile eğitilmiştir. Her denemenin EMG kayıtları alınmıştır.EMG'ler, 10 milisaniyelik bir zaman sabiti ile doğrultulmuş ve entegre edilmiş, ardından tüm denemeler üzerinden ortalamaları alınmıştır. 10 eğitim seansı boyunca koşullu yanıtların gelişimi, yanıt genliğinin kademeli olarak arttığını ve yanıt latansının kısaldığını göstermektedir. Bu gelişim, uyaranların rastgele sırayla sunulduğu yalancı koşullandırılmış farelerin yanıtlarında görülmemektedir.İyi zamanlanmış ve dolayısıyla iyi öğrenilmiş koşullu yanıtların evrimi, CS başlangıcını takip eden yanıtın zirveye ulaşma süresinin histogramlarında da görülebilir. Bu videoyu izledikten sonra; baş sabit göz kırpma koşullandırması için başlığın nasıl hazırlanacağı, başlığın bir fareye cerrahi olarak nasıl implant edileceği ve farenin silindirik koşu bandına nasıl yerleştirileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. Fareleriniz, koşullanmayı edindikçe günler boyunca iyi bir öğrenme eğrisi sergilemelidir.Bu teknik bir kez kavrandığında, uygun şekilde uygulandığı takdirde bir saat içinde tamamlanabilir. Bu prosedür gerçekleştirilirken, hayvanlardaki herhangi bir stres belirtisini gözlemleme konusunda dikkatli olunması önemlidir. Hayvanların stresini minimize etmek için uygun adımlar atılmalıdır.

whisker-signaled-eyeblink-classical-conditioning-in-head-fixed-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Bu protokol, fareler öğrenme ve hafıza görevleriyle meşgulken ayrı beyin bölgelerindeki nöronal aktivitenin geçici olarak ve uzaktan nasıl susturulacağını açıklar. Yaklaşım, farmakogenetiği (Tasarımcı-Reseptörler-Özel-Tasarımcı-Tarafından-Aktive Edilen-İlaçlar), öğrenmenin farklı bileşenlerini ayırt etmek için tasarlanmış davranışsal bir paradigma (duyusal ön koşullandırma) ile birleştirir.

Öğrenmenin Ayrık Aşama sırasında Kemirgenler uzaktan suskunluğu Sinir Aktivitesi Bir Yöntem

Değerlendirmek için kullanılan izleme eyeblink Klasik koşullanma (ECC) bağımlı Hipokampal ilişkisel öğrenme edildi yetişkin Sıçanlarda yönetilen yüksek yoğunlukta (% 11,9 v/v) alkol erken neonatal beyin gelişimi sırasında. Genel olarak beyin işlev bozukluğu birçok psikolojik ve Biyomedikal ayarlarını algılamak için ses tanılama araçları ECC işlemlerdir.

Hipokampal disfonksiyon Fetal alkol spektrum bozuklukları, fare modeli değerlendirmek için izleme Eyeblink Klasik koşullanma kullanımı

Laboratuvar fareleri için yeni iyileştirme stratejilerinin geliştirilmesi, 3R ilkesinin yerine getirilmesine katkıda bulunan zorlu bir görevdir. Bu protokol, laboratuvar fareleri için bilişsel zenginleştirme programı olarak clicker eğitimini tanıtır.

Laboratuvar Fareler için Bilişsel Zenginleştirme olarak Clicker Eğitim Tanıtımı

Bu iletişim kuralı bir eyeblink paradigma deneyleri için uygun bir yaşındaki bebekler ile Klima açıklar. Ticari veya özel yapım donanımları uyaranlara sunmak için kullanılabilir ve veri toplama ve analizi üzerinde video kayıtları yapılmalıdır.

Bir yaşındaki çocuklarda klasik kısa gecikme Eyeblink Klima

Burada açıklanan üç oda testi için bir alternatif sunan ve aynı zamanda çeşitli uyarılar çözer yeni bir otomatik deneysel sistemdir. Bu sistem, sosyal tercih ve sosyal yenilik tercihi testleri sırasında küçük kemirgen davranış dinamiklerinin titizlikle analizini sağlayan birden fazla davranışsal parametre sağlar.

Küçük Kemirgenlerde Sosyal Tercih Davranışının Dinamiklerini İzleme Sistemi

İki tırmanma elyafına bağımlı ilişkisel öğrenme görevi sırasında hayvan davranışlarını izlemek için tek bir platform geliştirdik. Düşük maliyetli tasarım, fiber ile ilişkili serebellar aktiviteye tırmanmaya yönelik optogenetik veya görüntüleme deneyleriyle entegrasyona izin verir.

Beyinciğe Bağımlı Duyusal İlişkisel Öğrenmeyi İzlemek için Esnek Bir Platform

Uçuş davranışlarını korkulu bir bağlamda incelemek için, değiştirilmiş bir korku koşullandırma protokolü sunuyoruz. Bu protokol, farelerin korku koşullandırmasında işaret sunumu sırasında sürekli olarak uçuş davranışları sergilemesini sağlar.

Farelerde Uçuş Davranışlarını İndüklemek için Değiştirilmiş Korku Koşullandırması

Gözlemsel korku paradigması, kemirgenlerde dolaylı donmayı duygusal empati için bir model olarak değerlendirir. Bu prosedür, gözlemci kemirgenlerin, empatik donma tepkileri ortaya çıkarmak için caydırıcı ayak şokları alan belirli göstericilere maruz bırakılmasını gerektirir. Araştırmacılar, gözlemsel korku tahlillerini kullanarak, duygusal empatinin altında yatan sinirsel mekanizmaları araştırabilirler.

Farelerde Duygusal Empati Modeli Olarak Gözlemsel Korku

Bu protokol, zaman kilitlemeden nörofizyolojik önlemlere uyumlu bir şekilde kemirgenlerde otomatik göz şaşılığının zaman içinde izlenmesi için bir yöntem sağlar. Bu protokolün, migren gibi ağrı bozukluklarının mekanizmalarını inceleyen araştırmacılar için yararlı olması beklenmektedir.

Fare Ağrısı Çalışmalarında Zaman Senkronizasyonu Davranışı ve Beyin Dinamikleri için Otomatik Bir Şaşılık Yöntemi

Protokol, insan makulasına benzeyen retina özelliklerine sahip koni baskın bir tür olan 13 çizgili yer sincaplarında optomotor tepkinin nasıl ölçüleceğini açıklar. Platform tasarımı, kullanımı geliştirir ve kaygıyı azaltır, hayvanın yükseltilmiş platformda kalma yeteneğini geliştirir ve görsel işlevdeki değişikliklerin invaziv olmayan bir şekilde değerlendirilmesini sağlar.

Yer sincaplarında optomotor refleksin kaydedilmesini sağlayan caydırıcı olmayan hayvan kısıtlaması

Öğrenin baş-sabit farelerde bıyık-sinyalli göz kırpma klasik koşullanması yöntemini. Bu teknik, öğrenme ve hafızanın nörobiyolojik mekanizmalarını kalsiyum görüntüleme ve elektrofizyoloji ile araştırır.

Baş-sabit Farelerde bıyık-sinyalini eyeblink Klasik Koşullanma

Daha fazla video keşfet