11 Nisan 2016
Pulmoner arteriyel hipertansiyon (PAH), pulmoner arteriyollerin obliterasyonuna ve sağ ventrikül yetmezliği gelişmesine yol açan bir hastalıktır. PAH'ın kemirgen modelleri, PAH'ın patofizyolojisini anlamada kritik öneme sahiptir. Burada fare ve sıçanlarda sağ kalp kateterizasyonu ve ekokardiyografi ile hemodinamik karakterizasyonu gösterildi.
Kemirgenlerde ekokardiyografi ve sağ kalp kateterizasyonunun genel amacı, çeşitli kardiyak ve pulmoner hastalık modellerinde sağ kalbin fonksiyonunu belirlemektir. Bu yöntem, kardiyovasküler fizyoloji araştırmalarında, genetik manipülasyonların veya ilaç etkilerinin pulmoner hipertansiyon gelişimi üzerindeki etkileri nelerdir gibi temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, bu kardiyak ve pulmoner hastalık modellerinde sağ kalp fonksiyonunun kapsamlı bir analizini sağlamasıdır.
Bir kemirgen kalbinin parasternal uzun eksenini görmek için, anestezi uygulanmış bir kemirgeni sırtüstü pozisyona getirerek başlayın. Ayak parmağınızı çimdikleyerek uygun sedasyon seviyesini onaylayın ve hayvanın gözlerine veteriner merhemi sürün. Sonra, göğsü tıraş edin ve ultrason jeli uygulayın.
2D canlı görüntü yansıtmak için B Modunu seçin. Ardından, bir ultrason dönüştürücüsünü uygun frekansla sol parasternal çizgiye hizalayın. Prob göstergesi kaudal yönü gösterecek şekilde dönüştürücüyü saat yönünün tersine 30 derece çevirin.
Ardından, ekranın ortasında tam bir sol ventrikül odası görünümü elde etmek için cihazı dönüştürücünün kısa ekseni boyunca aynı tomografik düzlemde sallayarak dönüştürücüyü hafifçe eğin. Sol ventrikülün lümenini, interventriküler septumu, sağ ventrikülün lümenini, çıkan aortu ve sol atriyumu bulun ve görüntüleyin. Parasternal kısa ekseni aort seviyesinde görüntülemek için, B Modunda, dönüştürücüyü 90 derece döndürün ve aort kapak kesitini tanımlamak için dönüştürücüyü kafatasına doğru açın.
Ardından, dönüştürücüyü aynı konumda sabit tutarak Darbe Dalgası Doppler moduna geçin. Ardından, numune hacmini sağ ventrikül çıkış yolunun ortasındaki pulmoner kapak seviyesine yakın olacak şekilde yerleştirin ve imleci damardan geçen kan akış yönüne paralel olarak konumlandırın. İyi bir doppler zarfı, yani laminer kan akışını gösteren beyaz kenarlıklı ve içi koyu renkli bir oyuk olan bir görüntü elde etmek için ölçeği kan akış yönü boyunca gerektiği gibi ayarlayın ve doppler izlemesini kaydedin.
Kapalı bir göğüs sağ kalp kateterizasyonu yapmak için, anestezi uygulanmış kemirgeni bir diseksiyon mikroskobu altına yerleştirin ve cildi mandibuladan sternuma kadar kesin. Servikal alanı tamamen ortaya çıkarmak için insizyonun her iki tarafına bir çift ekartör yerleştirin. Daha sonra, tükürük bezlerini künt diseksiyon ile ayırın, ardından sağ dış juguler veni ortaya çıkarmak için ince, künt uçlu forseps kullanın.
Sağ dış juguler veni çevredeki bağ dokusundan dikkatlice izole edin ve sağ dış juguler venin altına iki parça ipek sütür yerleştirin. Damarı mandibulaya mümkün olduğunca yakın distal olarak bağlayın ve proksimal olarak gevşek bir düğüm atın. İris makası kullanarak, distal bağlı düğümün proksimalinde dış juguler vende küçük bir kesi yapın.
Daha sonra, kateteri kabaca dış juguler venden kalbe kadar olan uzunluğa karşılık gelen bir uzunlukta işaretleyin. Daha sonra forseps kullanarak kateteri insizyona yerleştirin ve proksimal düğümü sıkın. Kateteri nazikçe sağ kalbe itin, kateter üzerindeki işarete göre ilerleme derinliğini izleyin ve bilgisayar monitöründeki basınç takibi ile kateterin yerinde konumunu doğrulayın.
Sağ ventrikül basıncı izlemesi tanımlandıktan sonra, veri toplama için kateteri stabilize edin. Sağ ventrikül basınç hacmi döngülerini elde etmek için, daha sonra kemirgeni entübe edin. Ardından, ksifoid işleminin altında bir kesi yapın ve cildi yanlara doğru makasla iki taraflı olarak inceleyin.
Karın boşluğunu karın duvarından açmak için, diyaframın altındaki karın duvarından iki taraflı bir diseksiyon yapın. Ardından, kalbin tepesini ortaya çıkarmak için diyaframı açın ve göğüs kafesini iki taraflı olarak kesin. İnferior vena kava'yı çevredeki bağ dokusundan dikkatlice izole edin ve normal tuzlu suya batırılmış steril gazlı bezi karın boşluğu ve entübasyon bölgelerine yerleştirin.
Daha sonra, küçük bir PE 60 boru parçası kullanarak, iletkenlik kateterinin delinmesini sağ ventrikül tepesine yönlendirin ve kateter ucunu, tüm elektrotlar ventrikülün içine girene kadar bıçak yarasından geçirin. Şimdi, gerektiğinde önemli solunum varyasyonu göstermeyen tutarlı şekilli döngüler elde etmek için kateterin konumunu ayarlayarak yazılımdaki basınç hacmi döngüsünü izleyin. Bir basınç hacmi döngüleri ailesi elde etmek için, sağ ventrikül dolgusunu azaltmak için inferior vena kavaya hafifçe basınç uygulayın.
Daha sonra bu verilerden bir dizi hemodinamik parametre hesaplanabilir. Akciğerin şişirme perfüzyonunu gerçekleştirmek için önce şişirme tüpünü bir halka standına bağlayın. Daha sonra, trakeayı çevreleyen kas ve bağ dokusundan künt bir şekilde inceleyin ve trakeanın etrafına bir parça ipek sütür yerleştirin.
Daha sonra dikişe gevşek bir düğüm atın, trakeayı hafifçe germek için başa bastırın ve trakea çevresinin mandibulaya yakın% 70'ini kesin. Trakeayı gergin tutarak, bir trakeal kanül yerleştirin ve kanülü bir dikişle sabitleyin. Kanülü şişirme tüpüne bağlayın, ardından PBS ile doldurulmuş 10 mililitrelik bir şırınga ile sağ ventrikülsüz duvarı bıçaklayın ve pulmoner artere doğru enjekte ederek akciğerleri yıkayın.
Akciğerler ağartmaya başladığında, sol atriyuma bir kez çentikleyin. Ardından, kalbi hasat etmek için aortun kökünü kesin. Son olarak, akciğeri beş dakika boyunca% 10 tamponlu nötr formalin ile şişirin ve trakeal kanülü çıkarın.
Daha sonra trakeayı bağlayın, akciğeri torakstan çıkarın ve akciğer dokusunu taze% 10 tamponlu nötr formalin ile sabitleyin. Aort seviyesinde parasternal kısa eksen görünümü kemirgenlerde kolayca görselleştirilebilir ve şekilleri pulmoner hipertansiyon derecesi ile ilişkilendirilen pulmoner arteriyel doppler izlemelerinin kaydedilmesini ve ölçülmesini sağlar. Kronik hipoksiye maruz kalan bir farenin kapalı göğüs sağ kalp kateterizasyonunda, sağ ventrikül sistolik basıncı, önemli pulmoner hipertansiyon ile tutarlı olarak 45 milimetre cıvaya yükseltilir.
Normal bir sıçanın açık göğüs sağ kalp kateterizasyonunda, sağ ventrikül sistolik basıncı, 27 milimetre cıva gibi önemli ölçüde daha düşük bir seviyede gözlenir. Tekniğe hakim olunabilir ve düzgün bir şekilde gerçekleştirilebilirse, prosedür birkaç dakika içinde tamamen olabilir. Bu prosedürü denerken, kemirgenin yeterince uyuşturulduğundan ve hipervolemiye neden olabilecek önemli bir kanama veya doku kuruması kaynağı olmadığından emin olmayı unutmamak önemlidir.
Bu videoyu izledikten sonra, sağ kalbin kapsamlı bir hemodinamik karakterizasyonunun nasıl gerçekleştirileceğini iyi anlamış olmalısınız. Pratik, bu tekniklere hakim olmak için çok önemlidir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Pulmoner arteriyel hipertansiyon (PAH), pulmoner arteriolleri etkileyen ve sağ ventrikül yetmezliğine yol açan ciddi bir durumdur. Bu çalışma, PAH ile ilişkili hemodinamiyi incelemek için kemirgen modellerinde ekokardiyografi ve sağ kalp kateterizasyonu kullanmaktadır.
Pulmoner arteriyel hipertansiyonun (PAH) kemirgen modellerinde kapsamlı hemodinamik karakterizasyon, erken evre kardiyovasküler ilaç keşfindeki risklerin azaltılması ve hastalık mekanizmalarının doğrulanması için temel teşkil eder. Sağ ventrikül fonksiyonunun ve basınç-hacim ilişkilerinin kantitatif değerlendirmesi, hedef modülasyonunda öngörüsel güvenilirlik sağlar ve preklinik modellerden insan hastalıklarına geçişte translasyonel sürekliliğe olanak tanır. Bu yetkinlikler, portföy önceliklendirmesini destekler ve PAH terapötik programları için devam/dur kararlarına temel oluşturur.
Bu metodoloji, kardiyovasküler ilaç geliştirme süreçlerinde erken keşif aşamasından öncü bileşik tanımlama ve preklinik doğrulamaya kadar olan süreçleri entegre eder.