Düzlemsel Örnekleri Manyetik tanecikler Görüntüleme Manyetik algılama Tarayıcı Karıştırma frekansı

Bu prosedürün genel amacı, nanomanyetik parçacıklar içeren ince biyolojik numuneleri analiz etmek için iki boyutlu karışık manyetik algılama taramaları kullanmaktır. Bu yöntem, biyokimya ve tıbbi teşhis alanında, nanomanyetik parçacıkların tesviye bileşiği olarak kullanıldığı doku kesitlerinin analizi gibi temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, nanomanyetik parçacık dağılımının buluşmasına izin vermesidir.

Prosedürün kanıtı, laboratuvarımdan üç araştırmacı olan Eul-Gyoon Lim, Jae-chan Jeong ve Jiho Chang olacak. p-FMMD ölçüm kafası metin protokollerine uygun olarak tasarlanmalıdır. Tüm kablolama ve sarma özellikleri hakkında ayrıntılar verilmiştir.

Montaj ve kurulum metin protokolünde detaylandırılmıştır. Bu, yüksek frekans dengesinin ve indüklenen voltajın ayarlanmasını içerir. Daha sonra, uyarma bölümünü, düşük ve yüksek frekanslı sürücü bölümlerini ve FMMD'nin algılama bölümünü içeren ölçüm elektroniği kurulur.

Bunu takiben, ön amplifikatör, birinci demodülatör, filtrelemeli ara amplifikatör, ikinci demodülatör ve filtrelemeli son amplifikatörün tümü kurulur. Son olarak, 2D tarayıcı monte edilir ve bir bilgisayar kontrolü ile arayüzlenir. Bu prosedür için, 50 nanometre ve 100 nanometre çapında manyetit parçacıklarına ve 1 mikron çapında maghemit parçacıklarına sahip olun.

Parçacık stok çözeltilerini suda yıkayın ve parçacıkları bir mıknatıs kullanarak toplayın. Suyu atın ve her birini iki kez daha yıkayın. Daha sonra, parçacıkları damıtılmış su kullanarak mililitre çözeltiler başına 25 miligram halinde seyreltin.

100 nanometre parçacık çözeltisinden, mililitre başına beş, bir, 0.2 ve 0.04 miligram konsantrasyonlar için beş katlı bir seyreltme serisi yapın. Ardından, bir biyopsi zımbası kullanarak emici kurutma kağıdı parçalarını delin. Ardından, kağıt zımbalarını farklı 100 nanometre parçacık çözeltilerinde 30 saniye bekletin.

Islatıldıktan sonra, kağıt zımbaların kurumasına izin verin. Ardından, iki x 18 milimetre boyutlarında kesilmiş nitroselüloz parçaları hazırlayın. Bir parça nitroselülozu seyreltilmemiş bir mikron çapında parçacık çözeltisinde 10 ila 15 saniye bekletin ve ısıtılmamış hava kullanarak kurutun.

Diğer nitroselüloz parçasını, bir konsantrasyon gradyanı oluşturmak için farklı konsantrasyonlarda iki çözeltiye batırın ve diğeri gibi kurutun. Son olarak, kılcal hareket kullanarak, 30 mikrolitre seyreltilmemiş 50 nanometre çapında parçacık çözeltisi içeren bir kılcal tüp yükleyin. Daha sonra, aynı parçacıkların 20 kez seyreltilmiş 10 mikrolitrelik ikinci bir kılcal damar yükleyin.

Tarama yönü, iki düzlemsel boyuttan daha kısa olmalıdır. Palet üzerindeki cetvel işaretlerini kullanarak başlangıç noktasını ve tarama uzunluğunu ayarlayın. Bu değerleri tarama yazılımına girin, ardından tarama ofsetini ulaşılabilir uzamsal çözünürlükten biraz daha küçük olacak şekilde ayarlayın.

Ardından, düşük geçişli filtreleme nedeniyle meydana gelen sinyal azalmasını dikkate alarak tarama hızını ayarlayın. Saniyede bir ile yedi milimetre arasında bir değer kullanın. Şimdi, adım mesafesini ayarlayın.

Toplam tarama süresi, metin protokolünde sağlanan bir formül kullanılarak hesaplanır. Taramadan önce numuneyi yapışkan bantla sabitleyin. Tarama için, hareket kontrol programı için bir NVD dosyası oluşturun.

PMC hareket kontrol programını açın ve NVD dosyasını yükleyin. Mekanik başlangıç noktalarını ayarlamak için Ana Ekran düğmesine basın. Hareket kontrol programını kapatın ve tarayıcı programına geri dönün.

Ardından, taramaları yürütün. Bu taramalar için, sinyal yoğunluğu manyetik boncukların konsantrasyonunun bir fonksiyonu olarak analiz edildi ve tarama hızı dakikada 10 milimetre idi. Boncuk konsantrasyonu ile sinyal arasında güçlü bir korelasyon bulundu.

Tarama aşamasının hızı ile sinyal yoğunluğu arasındaki ilişki, manyetik boncuklarla ıslatılmış kağıt topaklar kullanılarak kontrol edildi. Daha düşük tarama hızlarında daha yüksek sinyaller elde edildi. P-FMMD taramasının nitroselüloz membran numunesinin optik görüntüsü ile karşılaştırılması, p-FMMD'nin bir MPI tarayıcısı olarak faydasını açıkça gösterdi.

Taramanın genişliği, esas olarak ölçüm kafasının hassasiyet profilinden kaynaklanmaktadır. Benzer şekilde, farklı manyetik parçacık konsantrasyonları ile dolu iki kılcal damar p-FMMD ile fotoğraflandı ve tarandı. Açıkçası, 20 faktörü ile farklılık gösteren konsantrasyonlar kolayca ayırt edilebilir.

Bu videoyu izledikten sonra, nanomanyetik parçacıklar içeren 10 numunenin FMMD tekniği ile nasıl analiz edileceğini iyi anlamış olmalısınız. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik düzgün bir şekilde yapılırsa yaklaşık bir saat içinde yapılabilir. Geliştirilmesinden sonra, bu teknik, biyokimya ve tıbbi teşhis alanındaki araştırmacıların, organ sistemindeki spesifik antikorları daha çok alıntılayan nanomanyetik parçacıkların dağılımını keşfetmesinin yolunu açtı.