Name: Kanser kurulması İnsan Konvansiyonel Osteosarkom Hücre Kültürleri Kök (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 25 s
Description: Öğrenin, insan osteosarkom biyopsilerinden kanser kök hücrelerini izole etme yöntemini. Bu görsel protokol, sarkosfer oluşum analizi ve hücre kültürü tekniklerini göstererek yeni araştırmacılara kritik adımları anlama ve tekrarlama imkanı sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma ITT (Istituto Toscano Tumori) Hibe Önerisi 2010 tarafından desteklenmiştir.

<ol><li>Reddick, R. L., Michelitch, H. J., Levine, A. M., Triche, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteogenic+sarcoma%3A+a+study+of+the+ultrastructure%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Osteogenic sarcoma: a study of the ultrastructure.</a> Cancer. 45 (1), 64-71 (1980).</li>
<li>Gatta, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Childhood+cancer+survival+trends+in+Europe%3A+a+EUROCARE+Working+Group+study%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Childhood cancer survival trends in Europe: a EUROCARE Working Group study.</a> J. Clin. Oncol. 23 (16), 3742-3751 (2005).</li>
<li>Olstad, O. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+heterogeneity+in+human+osteosarcoma+demonstrated+by+enriched+mRNAs+isolated+by+directional+tag+PCR+subtraction+cloning%5BTitle%5D)+AND+%22Anticancer.+Res%22%5BJournal%5D)">Molecular heterogeneity in human osteosarcoma demonstrated by enriched mRNAs isolated by directional tag PCR subtraction cloning.</a> Anticancer. Res. 23 (3B), 2201-2216 (2003).</li>
<li>Geller, D. S., Gorlick, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteosarcoma%3A+a+review+of+diagnosis%2C+management%2C+and+treatment+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Adv+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Osteosarcoma: a review of diagnosis, management, and treatment strategies.</a> Clin Adv Hematol Oncol. 8 (10), 705-718 (2010).</li>
<li>Tang, N., Song, W. X., Luo, J., Haydon, R. C., He, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteosarcoma+development+and+stem+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Orthop.+Relat.+Res%22%5BJournal%5D)">Osteosarcoma development and stem cell differentiation.</a> Clin. Orthop. Relat. Res. 466 (9), 2114-2130 (2008).</li>
<li>Kempf-Bielack, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteosarcoma+relapse+after+combined+modality+therapy%3A+an+analysis+of+unselected+patients+in+the+Cooperative+Osteosarcoma+Study+Group+%28COSS%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Osteosarcoma relapse after combined modality therapy: an analysis of unselected patients in the Cooperative Osteosarcoma Study Group (COSS).</a> J. Clin. Oncol. 23 (3), 559-568 (2005).</li>
<li>Meyers, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteosarcoma%3A+a+randomized%2C+prospective+trial+of+the+addition+of+ifosfamide+and%2For+muramyl+tripeptide+to+cisplatin%2C+doxorubicin%2C+and+high-dose+methotrexate%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Osteosarcoma: a randomized, prospective trial of the addition of ifosfamide and/or muramyl tripeptide to cisplatin, doxorubicin, and high-dose methotrexate.</a> J. Clin. Oncol. 23 (9), 2004-2011 (2005).</li>
<li>Gorlick, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology+of+childhood+osteogenic+sarcoma+and+potential+targets+for+therapeutic+development%3A+meeting+summary%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Biology of childhood osteogenic sarcoma and potential targets for therapeutic development: meeting summary.</a> Clin. Cancer Res. 9 (15), 5442-5453 (2003).</li>
<li>Hayden, J. B., Hoang, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteosarcoma%3A+basic+science+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Orthop.+Clin.+North+Am%22%5BJournal%5D)">Osteosarcoma: basic science and clinical implications.</a> Orthop. Clin. North Am. 37 (1), 1-7 (2006).</li>
<li>Thomas, D., Kansara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+modifications+in+osteogenic+differentiation+and+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell.+Biochem%22%5BJournal%5D)">Epigenetic modifications in osteogenic differentiation and transformation.</a> J. Cell. Biochem. 98 (4), 757-769 (2006).</li>
<li>Araki, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+the+retinoblastoma+gene+in+primary+osteosarcomas+and+other+bone+and+soft-tissue+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Orthop.+Relat.+Res%22%5BJournal%5D)">Involvement of the retinoblastoma gene in primary osteosarcomas and other bone and soft-tissue tumors.</a> Clin. Orthop. Relat. Res. 270 (270), 271-277 (1991).</li>
<li>Chou, A. J., Gorlick, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemotherapy+resistance+in+osteosarcoma%3A+current+challenges+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Expert.+Rev.+Anticancer+Ther%22%5BJournal%5D)">Chemotherapy resistance in osteosarcoma: current challenges and future directions.</a> Expert. Rev. Anticancer Ther. 6 (7), 1075-1085 (2006).</li>
<li>Arndt, C. A. S., Crist, W. M. Common musculoskeletal tumorsof childhood and adolescence. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aArndt%2C+CAS+%22N.+Engl.+J.+Med%22">N. Engl. J. Med</a>. 341 (5), 342-352 (1999).</li>
<li>Longhi, A., Errani, C., De Paolis, M., Mercuri, M., Bacci, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+bone+osteosarcoma+in+the+pediatric+age%3A+state+of+the+art%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer.+Treat.+Rev%22%5BJournal%5D)">Primary bone osteosarcoma in the pediatric age: state of the art.</a> Cancer. Treat. Rev. 32 (6), 423-436 (2006).</li>
<li>Bacci, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+outcome+for+patients+with+nonmetastatic+osteosarcoma+of+the+extremity+treated+at+the+istituto+ortopedico+rizzoli+according+to+the+istituto+ortopedico+rizzoli%2Fosteosarcoma-2+protocol%3A+an+updated+report%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Long-term outcome for patients with nonmetastatic osteosarcoma of the extremity treated at the istituto ortopedico rizzoli according to the istituto ortopedico rizzoli/osteosarcoma-2 protocol: an updated report.</a> J. Clin. Oncol. 18 (24), 4016-4027 (2000).</li>
<li>Clarke, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+stem+cells-perspectives+on+current+status+and+future+directions%3A+AACR+workshop+on+cancer+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer.+Res%22%5BJournal%5D)">Cancer stem cells-perspectives on current status and future directions: AACR workshop on cancer stem cells.</a> Cancer. Res. 66 (19), 9339-9344 (2006).</li>
<li>Lapidot, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cell+initiating+human+acute+myeloid+leukaemia+after+transplantation+into+SCID+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A cell initiating human acute myeloid leukaemia after transplantation into SCID mice.</a> Nature. 367 (6464), 645-648 (1994).</li>
<li>Bonnet, D., Dick, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+acute+myeloid+leukemia+is+organized+as+a+hierarchy+that+originates+from+a+primitive+hematopoietic+cell%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Human acute myeloid leukemia is organized as a hierarchy that originates from a primitive hematopoietic cell.</a> Nat. Med. 3 (7), 730-737 (1997).</li>
<li>Visvader, J. E., Lindeman, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+stem+cells+in+solid+tumors%3A+accumulating+evidence+and+unresolved+questions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Cancer%22%5BJournal%5D)">Cancer stem cells in solid tumors: accumulating evidence and unresolved questions.</a> Nat. Rev. Cancer. 8 (10), 755-768 (2008).</li>
<li>Bapat, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+cancer+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Semin.+Cancer+Biol%22%5BJournal%5D)">Evolution of cancer stem cells.</a> Semin. Cancer Biol. 17 (3), 204-213 (2007).</li>
<li>Rubio, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+human+adult+stem+cell+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer.+Res%22%5BJournal%5D)">Spontaneous human adult stem cell transformation.</a> Cancer. Res. 65 (8), 3035-3039 (2005).</li>
<li>Burns, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumorigenic+heterogeneity+in+cancer+stem+cells+evolved+from+long-term+cultures+of+telomerase-immortalized+human+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer.+Res%22%5BJournal%5D)">Tumorigenic heterogeneity in cancer stem cells evolved from long-term cultures of telomerase-immortalized human mesenchymal stem cells.</a> Cancer. Res. 65 (8), 3126-3135 (2005).</li>
<li>Zhang, M., Rosen, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cells+in+the+etiology+and+treatment+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Genet.+Dev%22%5BJournal%5D)">Stem cells in the etiology and treatment of cancer.</a> Curr. Opin. Genet. Dev. 16 (1), 60-64 (2006).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+that+transgenes+encoding+components+of+the+Wnt+signaling+pathway+preferentially+induce+mammary+cancers+from+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Evidence that transgenes encoding components of the Wnt signaling pathway preferentially induce mammary cancers from progenitor cells.</a> Proc. Natl Acad. Sci. USA. 100 (26), 15853-15858 (2003).</li>
<li>Sell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+origin+of+cancer%3A+dedifferentiation+or+stem+cell+maturation+arrest%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Health+Perspect%22%5BJournal%5D)">Cellular origin of cancer: dedifferentiation or stem cell maturation arrest?</a> Environ Health Perspect. 101 (Suppl 5), 15-26 (1993).</li>
<li>Wernig, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+reprogramming+of+fibroblasts+into+a+pluripotent+ES-cell-like+state%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">In vitro reprogramming of fibroblasts into a pluripotent ES-cell-like state.</a> Nature. 448 (7151), 318-324 (2007).</li>
<li>Niwa, H., Miyazaki, J., Smith, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+expression+of+oct-3%2F4+defines+differentiation%2C+dedifferentiation+or+self-renewal+of+ES+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Genet%22%5BJournal%5D)">Quantitative expression of oct-3/4 defines differentiation, dedifferentiation or self-renewal of ES cells.</a> Nat. Genet. 24 (4), 372-376 (2000).</li>
<li>Hochedlinger, K., Jaenisch, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+reprogramming+and+pluripotency%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Nuclear reprogramming and pluripotency.</a> Nature. 441 (7097), 1061-1067 (2006).</li>
<li>Dean, M., Fojo, T., Bates, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+stem+cells+and+drug+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Cancer%22%5BJournal%5D)">Tumor stem cells and drug resistance.</a> Nat. Rev. Cancer. 5 (4), 275-284 (2005).</li>
<li>Ma, S., Lee, T. K., Zheng, B. J., Chan, K. W., Guan, X. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD133%2B+HCC+cancer+stem+cells+confer+chemoresistance+by+preferential+expression+of+the+Akt%2FPKB+survival+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">CD133+ HCC cancer stem cells confer chemoresistance by preferential expression of the Akt/PKB survival pathway.</a> Oncogene. 27 (12), 1749-1758 (2008).</li>
<li>Wu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Side+population+cells+isolated+from+mesenchymal+neoplasms+have+tumor+initiating+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer.+Res%22%5BJournal%5D)">Side population cells isolated from mesenchymal neoplasms have tumor initiating potential.</a> Cancer. Res. 67 (17), 8216-8222 (2007).</li>
<li>Ma, I., Allan, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+human+aldehyde+dehydrogenase+in+normal+and+cancer+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem.+Cell.+Rev%22%5BJournal%5D)">The role of human aldehyde dehydrogenase in normal and cancer stem cells.</a> Stem. Cell. Rev. 7 (2), 292-306 (2011).</li>
<li>Awad, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+ALDH+activity+identifies+chemotherapy-resistant+Ewing%27s+sarcoma+stem+cells+that+retain+sensitivity+to+EWS-FLI1+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">High ALDH activity identifies chemotherapy-resistant Ewing's sarcoma stem cells that retain sensitivity to EWS-FLI1 inhibition.</a> PLoS One. 5 (11), e13943(2010).</li>
<li>Fujii, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sphere-forming+stem-like+cell+populations+with+drug+resistance+in+human+sarcoma+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Sphere-forming stem-like cell populations with drug resistance in human sarcoma cell lines.</a> Int. J. Oncol. 34 (5), 1381-1386 (2009).</li>
<li>Di Fiore, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+and+molecular+characterization+of+the+human+osteosarcoma+3AB-OS+cancer+stem+cell+line%3A+a+possible+model+for+studying+osteosarcoma+origin+and+stemness%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Genetic and molecular characterization of the human osteosarcoma 3AB-OS cancer stem cell line: a possible model for studying osteosarcoma origin and stemness.</a> J. Cell. Physiol. 228 (6), 1189-1201 (2013).</li>
<li>Reynolds, B. A., Tetzlaff, W., Weiss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multipotent+EGF-responsive+striatal+embryonicprogenitor+cell+produces+neurons+and+astrocytes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A multipotent EGF-responsive striatal embryonicprogenitor cell produces neurons and astrocytes.</a> J. Neurosci. 12 (11), 4565-4574 (1992).</li>
<li>Reynolds, B. A., Weiss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+neurons+and+astrocytes+from+isolated+cells+of+the+adult+mammalian+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Generation of neurons and astrocytes from isolated cells of the adult mammalian central nervous system.</a> Science. 255 (5052), 1707-1710 (1992).</li>
<li>Gibbs, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem-like+cells+in+bone+sarcomas%3A+implications+for+tumorigenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Stem-like cells in bone sarcomas: implications for tumorigenesis.</a> Neoplasia. 7 (11), 967-976 (2005).</li>
<li>Beccari, N., Mazzi, V. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBeccari%2C+N+%22Manuale+di+tecnica+microscopic.+Casa+Editrice+Dr.+Francesco+Vallardi+Societ%C3%A0+Editrice+Libraria%22">Manuale di tecnica microscopic. Casa Editrice Dr. Francesco Vallardi Società Editrice Libraria</a>. , 99-100 (1966).</li>
<li>Majumdar, M. K., Thiede, M. A., Mosca, J. D., Moorman, M., Gerson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+and+functional+comparison+of+cultures+of+marrow-derived+mesenchymal+stem+cells+%28MSCs%29+and+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Phenotypic and functional comparison of cultures of marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) and stromal cells.</a> J. Cell. Physiol. 176 (1), 57-66 (1998).</li>
<li>Tirino, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+primary+bone+sarcomas+contain+CD133%2B+cancer+stem+cells+displaying+high+tumorigenicity+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Human primary bone sarcomas contain CD133+ cancer stem cells displaying high tumorigenicity in vivo.</a> FASEB J. 25 (6), 2022-2030 (2011).</li>
<li>Tirino, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+stem+cells+in+solid+tumors%3A+an+overview+and+new+approaches+for+their+isolation+and+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Cancer stem cells in solid tumors: an overview and new approaches for their isolation and characterization.</a> FASEB J. 27 (1), 13-24 (2013).</li>
<li>Martins-Neves, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+implications+of+an+enriched+cancer+stem-like+cell+population+in+a+human+osteosarcoma+cell+line%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">Therapeutic implications of an enriched cancer stem-like cell population in a human osteosarcoma cell line.</a> BMC Cancer. 12 (1), 139(2012).</li>
<li>Tang, Q. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enrichment+of+osteosarcoma+stem+cells+by+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Chin.+J.+Cancer%22%5BJournal%5D)">Enrichment of osteosarcoma stem cells by chemotherapy.</a> Chin. J. Cancer. 30 (6), 426-432 (2011).</li>
</ol>

Yazarlar, rekabet eden herhangi bir mali çıkarları olmadığını beyan ederler.

CSCS tümör toplu olarak bu özel hücre alt kümesi tanımlanmasına izin birçok özelliklere sahip. Bu ekspresyon için, ATP-bağlayıcı kaset çoklu ilaç akış taşıyıcıları 28, 32, 33, ya da ALDH 32 arındırma enzimlerin ekspresyonunun yukarı doğru düzenleme için aşırı ekspresyonu için kemoterapi maddeleri sitotoksik kazanılmış direnç gibi, bu özelliklere dayanarak CSCS izole etmek için örneğin CD133, CD44, CD34, CD90, ve diğerleri, 30, 34, 35, 41, çeşitli yöntemler gibi belirli bir yüzey işaretleyici, bir 42-44 geliştirilmiştir. Bu tekniklerden biri, yapışmayan koşullarda büyümeye CSCS kapasitesine dayanan küre formasyonu tahlilidir. Küreler oluşturmak için doku kök hücreleri ve CSCS kabiliyeti ilk Reynolds ve arkadaşları. 37 nöral kök hücrelerin tanımlanmasına çalışmalarında tanımlanmıştır. Daha sonra, Gibbs ve diğ. 38 biziBu çalışmalar, Ed kemik sarkomları arasında, özellikle, bir katı tümörlerden CSCS izole başlayacak. Biz Gibbs ve arkadaşları tarafından gösterilen küre oluşumu tahlil yöntemi kullanmak. Geleneksel OS biyopsi alınan OSA hücre hatları CSCS izole etmek için karar verdik. Orijinal yöntemi Bu tahlilin sonuçları geliştirmek ve diğer kanser hücre çizgileri için yeniden üretimi kolaylaştırmak için adapte edilmiştir. Küre oluşum analizinde kurulması değini ile, 40.000 hücre kaplama / kuyucuk başına izole hücreleri korumak için iyi bir uygulama olduğu belirlenmiş. Bu hile küresel koloniler hücresel toplama gelen ve yapışmayan koşullar altında büyümek ve küresel koloni oluşturmak için tek bir CSC özel ve seçkin kapasite kaynaklanan olasılığını önlemek için çok önemlidir. Bu özellik, bu tahlilde özellikle kritik bir noktadır. Biz de küre oluşumu iyi bir oran elde etmek için bu sertifikalı, Orijinal bir yöntem de tarif edildiği gibi, her gün büyüme faktörlerinin tam bölünen miktarları, her 3 D olup yenilemek için yeterlidir. Bu çalışmada, aynı zamanda kurulmuş ve geniş bir yapışmayan koşullar altında kültüre edildiği zaman meydana küresel koloniler izole edilmesi için iyi bir yöntem tarif. de zarar vermeden her birinde oluşan olası küre kadar saptayabilmek için çok önemli olduğundan, bu adım, bu deneyde çok önemlidir. Sadece küreler olup deneyi süresince süspansiyon kalabileceklerini tek hücre izole etmek de önemlidir. Bu kritik noktalar aşmak için, yukarıda gösterildiği gibi, CSC izolasyonu için iyi sonuçlar vermiştir, belirli bir izolasyon yöntemi geliştirdik. Açıkçası, orada oluşan tüm küreler elde edilebilir değil olasılık, ama kayıp yüzdesi çok düşüktür. Nitekim, biz de onlar (form büyük olduktan sonra küreler izole etmek için 40 mikron gözeneklere sahip bir filtre kullanmak olanağına sahiped yaklaşık 100-200 hücreleri). Bu izolasyon küre oluşumunu durdurur ancak tek hücre, metilselüloz artığının bir kısmı ve en küçük küreler süzüldü sağlar. protokolde tarif edildiği gibi ortadan kaldırılması ayrıntılı süzme ile gerçekleştirilir. Ayrıca, küçük küresel kolonilerin sonucu kaybı ile 40 mikron örgü ile büyük küresel kolonilerin seçimi bir küresel koloniler oluşturmak için yüksek kapasiteli ve daha stemness ile CSCS seçmenize olanak sağlar. Bu modifikasyonların tümü deney geliştirmek ve anlamak ve küre oluşum analizinde orijinal yöntemin en önemli adımı üretmek için CSCS çalışan araştırmacılar yardımcı yapıldı. Izole CSCS için in vitro yöntemleri ile ilgili olarak çalışmalar arasında bu çalışma gelen CSCS izole etmek için bu uyarlanmış küre oluşumu tahlil iyi bir yöntem olabilir anlatmayı amaçlamaktadırOUA&#39;nın hücre çizgileri. Orijinal yöntem ve detaylı izolasyon tekniği uyarlamalar etkinliğini artırmak nitelendirdi. Kısa bir süre içinde, CSCS iyi sayısı elde edilebilir ve çeşitli deneylerde kullanılır. Nedenle, hızlı bir şekilde OS CSCS karakterize çift mil benzeri fenotip çalışma, özellikle, kök benzeri fenotipleri onaylamak mümkündür. Bu nedenle, bu değiştirilmiş deney CSCS izole edilmesi ve bunların biyoloji çalışmaları için iyi bir teknik olabilir. Gelecekte, bu yöntem, ilave uyarlamalarla, nadirdir katı tümörlerin biyopsi ile elde edilen başka bir sonlu kanser hücre hatları CSCS izole etmek için kullanılabilir. Bu işletim sistemi gibi nadir katı tümörler, gelen CSCS ayırma olasılığı, sadece bu özel kanser ile ilgili çalışmaların gelişme sağlar ama aynı zamanda izolasyon için daha iyi yöntemleri geliştirmek için farklı kanser tiplerinin çalışmalara ve biyoloji gelecek çalışmalara uzanır Bu önemli hücresel alt kümesi. Bu nedenle, biz olarakBu çalışmada yapmış, muhtemelen sorumlu olan bu özel hücre alt kümesi yönelik çok özel bir antikanser terapisi, moleküler hedeflerin bulma ve geliştirme nihai amacı ile, CSC biyoloji çalışma ile CSC izolasyon yöntemleri geliştirmek için önemlidir primer tümör bakım, bunun tekrar gelişimi, ve çeşitli organlarda metastaz kökeni. CSC biyoloji çalışma aynı zamanda neoadjuvan tedavi sonrası hayatta kalma oranı çok kötü kaldığı için böyle OS kanser, tedavisindeki isabetli olabilir tedaviler bulmak için çok önemlidir.

Sarkomlar embriyonik mezodermden 1 ağırlıklı olarak köken nadir görülen malign bağ dokusu tümörleri heterojen bir grup. farklı kemik sarkomu ve yumuşak doku sarkomu içerir. Kemik sarkomları, nispeten nadir primer tümörlerin grubu, osteosarkom (OS) dahil olmak üzere çeşitli alt tipleri, oluşur. OS kemiğin en sık primer tümörlerin biri, yoğun klinik, histolojik ve moleküler farklılıklarını 2, 3 sergileyen bir mezenkimal malignitedir. Ne yazık ki, OS 5, çocuklarda ve genç erişkinlerde 4 ağırlıklı olarak oluşur ve% 60 temsil çocukluk çağında kemik sarkomu ortak histolojik alt tipler 6, 7. OS genellikle etkileyen hızlı kemik büyümesi ile karakterize edilir iskelet alanlar, (örneğin, uzun kemiklerin metafiz). Ayrıca medüller veya merkezi işletim sistemi olarak adlandırılan işletim sistemi, geleneksel işletim sistemi, histolojik farklı alt tipleri arasında, malignite yüksek dereceli ve kota SHA vardır% 80, 8: Yeniden. Bu% 80% 60, geleneksel osteoblastik OS,% 10 kondroblastik OS ve 10% fibroblastik OS 6, 8-10 oluşmaktadır. Diğer işletim alt tipleri anaplastik, telenjiektazik, dev hücre açısından zengin ve küçük hücreli OS sayılabilir. Kombine cerrahi ve OS yönetimindeki kemoterapi ilerlemelere rağmen, sonuç metastazı 11, 12 olmayan hastalarda% 65-70 arasında bir uzun süreli sağkalım oranı ile, zayıf kalmaktadır. Uzak nüks sık metastaz olarak, ya da, daha az sıklıkla akciğer metastazları olarak ortaya uzak kemikleri ve lokal nüks 13. Metastaz, genellikle geleneksel tedavilere karşı dirençlidir. Bu direnç 10 yıllık hastalıksız sağkalım tanı 14, 15 metastatik hastalığı olan hastalarda yaklaşık% 30 olmasının nedeni de budur. Normal doku ile de, kanser, doku hücre tipleri heterojen bir toplanması oluşmaktadır. tümör içindeki hücrelerin farklı gelişim aşamalarında karşılık görünüyor. her bir N içindeormal dokusu ve böylece doku homeostazında için progenitörleri ve olgun hücreler sağlayan selfrenew yeteneği ile hücrelerin bir alt bulunur. Benzer bir şekilde, kanser çoğalması ve tümör oluşturucu potansiyeli farklı derecelerde, farklı gelişim safhalarında hücrelerin benzer bir heterojen popülasyonda oluşmaktadır. Bu, kanser hücrelerinin bir alt kümesi, Cancer kök hücreler (rulmanları), tümör kitlesinin 16 oluşturan farklı hücre soyları bu nedenle, tümör malign potansiyelini selfrenew ve korumak için özel bir yetenek ile hücrelerin selfsustaining üreten bir rezervuar oluşturan olarak adlandırılır. 1990&#39;lı yıllarda, akut myeloid lösemi çalışmaları CSC alt popülasyonlar 17, 18 varlığı için ilk güçlü kanıtlar sunmuştur. CSCS beri böylece kanser araştırmalarında en çok araştırılan konulardan biri haline solid tümörlerin 19 çok sayıda izole edilmiştir. CSCS gerçekten normal bir hale genlerdeki mutasyonlarla, normal kök hücrelerinin doğabilecek20-23 kanserli kök hücreler. mikroçevresinin ile birden dönüştüren mutasyonlar ve etkileşimleri de CSCS simgelemek selfrenewal kapasite ve ölümsüzlüğü elde sağlıklı atalarıdır ve olgun hücrelere katkıda bulunabilir. Bu dönüşümle ilgili çeşitli hipotezler vardır. Sağlıklı progenitörler sağlıklı, olgun hücreler ve kanser hücrelerinin, selfrenewal ilişkili genlerin 24-28 aktive bir mil benzeri fenotip elde edilmesi, kök hücrelerin dediferansiye olabilir. Yapılan son araştırmalara rağmen, CSCS kökenleri henüz keşfedilmeyi var. CSCS belirgin bir özelliği, kapasite farklı ilaçlar ile birlikte cerrahi ve kemoterapi oluşur çoklu tedavi yaklaşımı, karşı olmasıdır. Son çalışmalar CSCS da kemoterapi ajanları sitotoksik sonradan dirençli hale gelebilir göstermiştir. Bu direnç için mümkün açıklamalar ATP-bağlayıcı kaset (ABC) çoklu ilaç taşıyıcı aşırı ekspresyonu dahil (yani,MDR1 ve BCRP1), örneğin aldehit dehidrogenazın 1 (ALDH1), ve / veya hücre döngüsü kinetiği 30-33 değişiklikler gibi kemoterapi metabolize edici enzimlerin aşırı. şimdiye kadar tarif edilmiştir tüm bu kavramların doğrudan sonucu CSC ICSI&#39;nin tamamen ortadan kaldırıldı yalnızca hatta tek CSC hayatta ise lokal nüks veya uzak metastaz oluşabilir iken kanser tedavisi, verimli olacaktır olmasıdır. Hastaların daha sonra nüks birçok tedavi başlangıçta etkili gibi görünmektedir neden olarak olası bir açıklama, ancak, çünkü insan sarkomlardan 34, özellikle OS 35 veya başka herhangi bir kemik ve yumuşak doku kanserlerinde, içinde CSCS bulunması büyük klinik öneme sahiptir. Bu nedenle, geleneksel işletim karşı gelecek savaş için umut bu alt moleküler karakterizasyonu OS-CSCS sayesinde yönelik yenilikçi ilaçların geliştirilmesi dayalı yeni ve özel hedefli tedaviler bulmak içinNüfus ve CSC biyoloji çalışmaya. 1992 yılında, kök hücrelerinin bir alt kümesi, yetişkin memeli beyninde mevcut olup olmadığını araştıran edildi Reynolds ve arkadaşları, kök benzeri hücreler 36, 37 olduğundan şüphelenilen hücreleri izole etmek için bir yöntem geliştirdi. Bu yöntem özellikle yeteneğine dayanır yapışmayan koşullar altında yetiştirilen bu hücreler küresel koloniler oluşturmak için. Benzer teknikler kemik sarkomlarında 38 kök benzeri hücrelerin bir ICSI&#39;nin incelemek için 2005 yılında Gibbs ve arkadaşları tarafından istihdam edildi. izole edilmesi ve geleneksel bir işletim sisteminin farklı türde birincil hücre kültürlerinden OS CSCS karakterize etmek için, işletim hücre hatları için bu tekniği adapte verdi. Burada, alışılmış OS insan biyopsilerinden elde edilen sonlu birincil hücre hatları OS CSCS izole etmek için kullanılabilir &quot;sarcosphere deney&quot; olarak adlandırılan alan oluşum analizinde uyarlanmış bu yöntem, tarif eder. Biz de tüm teknikleri u tarifBu deneyde ile izole edilmiş hücre çizgilerinin mil benzeri CSC fenotipi doğrulamak sed: ve CSCS bir göstergesi olan CD133 geninin) pluripotent kök hücreleri (ESCs karakterize genlerin sentezlenmesinin 1) değerlendirilmesi; 2) koloni oluşturan birimi (CFU) deneyi; 3), uygun koşullar altında farklılaşma osteoblast ve adipositlere ayırt etmek için, bu hücrelerin yeteneğinin değerlendirilmesi; Immünofloresan boyama ile ve akım sitometri analizi ile Mezenkimal Kök Hücre yüzey belirteçleri (MKH) (yani, CD44, CD105 ve Stro-1) 4) çalışması; Bu hücrelerin ALDH aktivitesinin 5) değerlendirilmesi.

<table><tbody><tr><td>Dulbecco'nun Fosfat Tamponlu Salin Ca2+ ve Mg2+< > (DPBS) (DPBS)</td><td>LONZA</td><td>BE17-513F</td><td>_</td></tr><tr><td>Dulbecco'nun Fosfat Tamponlu Salin&nbsp; Ca2+ ve Mg2+ (DPBS) olmadan</td> <td>LONZA</td><td>BE17-512F</td><td>_</td></tr><tr><td>Domuz Tripsin 1:250</td><td>BD Difco</td><td>215310</td><td>Çözücü: DPBS'yi seçin. Stok konsantrasyonu: Toz</td></tr><tr><td>Etilendiamin tetraasetik asit disodyum tuzu dihidrat (EDTA)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>E4884</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu:</td></tr><tr><td>Clostridium histolyticum</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0130'dan</td> Toz Kollajenaz <td>Çözücü: Tampon Çözelti, pH 7.4. Stok konsantrasyonu: Toz</td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit (DMSO)</td> <td>BDH Kimyasalları-VWR</td><td>10323</td><td>_</td></tr><tr><td>Besin Karışımı F-12 Jambon</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F6636</td><td>Çözücü: Ultra saf dH2O. Stok konsantrasyonu: Toz</td></tr><tr><td>2-Fosfo-L-askorbik asit trisodyum tuzu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>49752</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: 5 mg / mL</td></tr> <tr><td>ve beta; -Gliserol fosfat disodyum tuzu pentahidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>50020</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: 1 M</td></tr><tr><td>İnsülin. İnsan Rekombinant</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>91077</td><td>Çözücü: NaOH 0.1 M. Stok konsantrasyonu: 10 mM</td></tr><tr><td>3-İzobutil-1-metilksantin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I5879</td><td>Çözücü: DMSO. Stok konsantrasyonu: 500 mM</td></tr><tr><td>İndometasin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I7378</td><td>Çözücü: DMSO. Stok konsantrasyonu: 200 mM</td></tr><tr><td>Deksametazon</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4902</td><td>Çözücü: DMSO. Stok konsantrasyonu:&nbsp; 1 mM / 100 &micro;M. Biyolojik aktiviteyi korumak için sıvı nitrojen içinde saklayın</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu (FBS)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F7524</td><td>_</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu Güney Amerika&nbsp;</td><td>EUROCLONE</td><td>ECS0180L</td><td>_</td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin (PEN-STREP) 10.000 U/mL</td><td>LONZA</td><td>DE17-602E</td><td>_</td></tr><tr><td>Metil selüloz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>274429</td><td>Çözücü: Ultra saf dH2O. Stok konsantrasyonu: %2</td></tr> <tr><td>Putresceine dihidroklorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5780</td><td>Çözücü: Ultra saf dH2O. Stok konsantrasyonu: Toz</td></tr><tr><td>apo-Transferrin&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T-1147</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: 25 mg / mL</td></tr><tr><td>İnsan Epidermal Büyüme Faktörü (EFGF)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>E5036</td><td>Çözücü: DPBS pH 7.4. Stok konsantrasyonu: 10 & g / mL</td></tr><tr><td>Fibroblast Büyüme Faktörü-Temel İnsan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F0291</td><td>Çözücü: DPBS +% 0.2 BSA. Stok konsantrasyonu: 25 & mikro; g/mL</td></tr><tr><td>Selenöz Asit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>211176</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: 30 mM</td></tr><tr><td>Progesteron</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P8783</td><td>Çözücü: ETOH. Stok konsantrasyonu: 10 mM</td></tr><tr><td>Toluidin Mavi O</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>198161</td><td>Çözücü: Ultra saf dH2O. Stok konsantrasyonu: Toz</td></tr><tr><td>Yağ Kırmızı O</td><td>ICN Biyokimyasallar</td><td>155984</td><td>Çözücü: 2-Propanol. Stok konsantrasyonu: Toz</td></tr><tr><td>Naftol AS-MX Fosfat Disodyum Tuzu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>N5000</td><td>Çözücü: DMSO. Stok konsantrasyonu: Toz</td></tr><tr><td>Fast Blue BB Tuz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F3378</td><td>Çözücü: Tris HCL, pH 9.0. Stok konsantrasyonu: Toz</td></tr><tr><td>Hızlı Kırmızı Menekşe LB Tuz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F3381</td><td>Çözücü: Tris HCL, pH 9.1. Stok konsantrasyonu: Toz Sığır</td></tr><tr><td>Serumu Albümini, Fraksiyon V (BSA)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>A-4503</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: %2</td></tr> <tr><td>Alizarin Red S</td><td>ICN Biyokimyasallar</td><td>100375</td><td>Çözücü: Ultra saf dH2O. Stok konsantrasyonu: Toz</td></tr><tr><td>Formaldehit çözeltisi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>533998</td><td>%4</td></tr> <tr><td>Triton-100X</td><td>MERCK</td><td>11869</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: %0,2. Tehlike - Sadece kimyasal başlık altında kullanın</td></tr><tr><td>Calcein</td><td>MERCK</td><td>2315</td><td>Solvent: DPBS . Stok konsantrasyonu: 200 ve mikro; g/mL</td></tr><tr><td>2-Propanol</td><td>MERCK</td><td>109634</td><td>Tehlike - Sadece kimyasal başlık altında kullanın</td></tr><tr><td>Ab-CD105&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; (Fare monoklonal [SN6] ila CD105 (FITC)</td><td>Abcam</td><td>ab11415</td><td>Sıvı. Uygulama:&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Flow Sitometri (Flow Cyt)</td></tr><tr><td>Ab-CD44&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; (Fare monoklonal&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; [F10-44-2] - CD44 (PE/CY7&reg;) )</td><td>Abcam</td><td>ab46793</td><td>Sıvı. Uygulama:&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Flow Sitometri (Flow Cyt)</td></tr><tr><td>Ab-CD45&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; (Fare monoklonal&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; [MEM-28] ila CD45 (PerCP))&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>ab65952</td><td>Sıvı. Uygulama:&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Flow Sitometri (Flow Cyt)</td></tr><tr><td>Ab-CD105&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; (İnsan CD105 Saflaştırılmış Antikoru)&nbsp;</td><td>Canlandırıcı</td><td>MHCD10500</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: Liyofilize. Uygulama: İmmünofloresan boyama (IF)</td></tr> <tr><td>Ab-CD44&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; (Anti-CD44 Antikoru)&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>EPR1013Y(ab51037)</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: Liyofilize. Uygulama: İmmünofloresan boyama (IF)</td></tr> <tr><td>Ab-Stro-1&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; (Fare anti-STRO-1)&nbsp;</td><td>Canlandırıcı</td><td>398401</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: Liyofilize. Uygulama:&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Flow Sitometri (Flow Cyt)&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; İmmünofloresan boyama (IF)</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; (Anti-Tavşan IgG (Alexa Fluor 488 Eşek Anti-Tavşan IgG (H + L))</td><td>Invitrogen</td><td>A-21206</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: Liyofilize. Uygulama: İmmünofloresan boyama (IF)</td></tr> <tr><td>FITC Anti-Mouse IG (FITC-Tavşan Anti Fare IgG (H + L))</td> <td>Invitrogen</td><td>61-6511</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: Liyofilize. Uygulama:&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Flow Sitometri (Flow Cyt)&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; İmmünofloresan boyama (IF)</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 635 Phalloidin&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>A34054</td><td>Çözücü: DPBS. Stok konsantrasyonu: Liyofilize. Uygulama: İmmünofloresan boyama (IF)</td></tr> <tr><td>AutoMACS & trade; Çalışan Tampon MACS Ayırma Tamponu</td><td>Miltenyi</td><td>130,091,221</td><td>sıvı. 4 & derecede saklayın; C</td></tr><tr><td>QIAzol&reg; Lizis Reaktifi</td><td>QIAGEN</td><td>79306</td><td>Tehlike - Yalnızca kimyasal başlık altında kullanın</td></tr><tr><td>QUANTITECT&reg; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Ters Transkripsiyon Kiti</td><td>QIAGEN</td><td>205314</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Kloroform</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C2432</td><td>Sıvısı. Tehlike - Sadece kimyasal başlık altında kullanın</td></tr><tr><td>Laminer akış başlığı</td><td>GELAIRE</td><td>BSB6A</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Kimyasal başlık</td><td>ARREDI TEKNİ&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Villa</td><td>Modello&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; DİNAMİK</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>EPPENDORF</td><td>5415R</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Lazer Taramalı Konfokal Mikroskopi LSM 5109 Meta&nbsp;</td><td>ZEISS_</td><td>&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>iCycler PCR Termal Döngüleyici ve nbsp;</td><td>BIORAD</td><td>_&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>CyFlow&reg; UZAY&nbsp;</td><td>(PARTEC)</td><td>_&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Ters Mikroposkop Eksen 200M&nbsp;</td><td>ZEISS_</td><td>&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Dondurma kabı</td>, <td>Nalgene</td><td>_&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Orijinal Pipet Yardımcısı</td><td>pbiBrand</td><td>_&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Mikropipetler</td><td>EPPENDORF_</td><td>&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Cam Pastör Pipeti</td><td>SIGMA_</td><td>&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>VICTOR3 ve ticaret; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>PERKIN ELMER_</td><td>&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Konik borular&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; (15 ve 50 mL)&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>BD FALCON</td><td>352096 (15 mL için)&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 352070 (50 mL için)</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>24 Kuyulu Şeffaf Düz Tabanlı TC ile İşlem Görmüş Çok Kuyulu Hücre Kültürü Plakası</td><td>BD FALCON</td><td>353047</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>6 Kuyulu Şeffaf Düz Tabanlı Ultra Düşük Ataşman Çoklu Kuyulu Plakalar</td><td>CORNING</td><td>3471</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Serolojik pipetler&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; (5 ve 10 mL)&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>BD FALCON</td><td>357543 (5 mL için)&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 357551 (10 mL için)</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Şırınga (5mL)&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>B|BRAUN</td><td>4617053V</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Petri kabı 100X20 mm&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>BD FALCON</td><td>353003</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>R&ouml; hren Tüpler&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; (3.5 mL, 55x12mm, PS)&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>SARSTEDT</td><td>55,484</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Petri kabı 60X15 mm&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>BD FALCON</td><td>353004</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Kriyoviyaller 1.5 mL&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>NALGENE</td><td>5000-1020</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Hücre Kültürü Şişeleri 25 cm&sup2; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>BD FALCON</td><td>353014</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Naylon Net Filtre, Hidrofilik</td><td>MERCK</td><td>NY4104700</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Swinnex Filtre Tutucu</td><td>MERCK</td><td>SX0002500</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Perry cımbız&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Neşter</td><td>_&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td><td>_&nbsp;</td></tr><tr><td>Dounce</td><td>_</td><td>_</td><td>_</td></tr></tbody></table>

kanser kurulması İnsan konvansiyonel osteosarkom hücre kültürleri kök

Establishment of Cancer Stem Cell Cultures from Human Conventional Osteosarcoma

osteosarkom (OS) karşı tedavide güncel gelişmeler kanser hastalarının hayatlarını uzun süreli, ancak metastaz meydana geldiğinde beş yıl hayatta kalma oranı yetersiz kalmaktadır. Kanser Kök Hücre (CSC) teorisi tümörü korumak ve çoklu ilaç kemoterapi karşı kapasitesi dahil olmak üzere kök benzeri özelliklere sahip tümör içindeki tümör hücrelerinin bir alt kümesi olduğunu tutar. Bu nedenle, işletim sistemi biyoloji ve patogenezi daha iyi anlaşılması bu özel alt kümesini ortadan kaldırmak için ve hastalar arasında morbidite ve mortalitenin azaltılması için hedeflenen tedavilerin gelişimini ilerletmek için gereklidir. , CSCS Yalıtımlı CSCS hücre kültürleri kurulması ve onların biyoloji okuyan OS biyoloji ve patogenezi daha iyi anlamamızı sağlayan önemli adımlardır. OS biyopsileri insan kaynaklı OS CSCS kurulması nonadhere altında 3 boyutlu kök hücre kültürleri oluşturmak için kapasite de dahil olmak üzere çeşitli yöntemlerle mümkün olmuşturnt koşulları. Bu koşullar altında, CSCS kızı kök hücreler tarafından oluşturulan küresel yüzen koloniler oluşturmak edebiliyoruz; Bu koloniler &quot;hücresel küreler&quot; olarak adlandırılmaktadır. Burada, işletim biyopsi elde edilen geleneksel OS&#39;nin primer hücre kültürlerinden CSC kültürleri kurmak için bir yöntem açıklanmaktadır. Biz açıkça CSCS izole etmek ve karakterize etmek gerekli birkaç pasajlar açıklanmaktadır.

Kemik sarkomlarda kanser kök hücrelerinin varlığı (rulmanları) son zamanlarda onların patogenezi ile bağlantılı olmuştur. Bu makalede, yapışmayan koşullarda büyümeye CSCS yeteneğini kullanılarak geleneksel osteosarkoma (OS) insan biyopsilerinden elde edilen birincil hücre kültürlerinden CSCS izole sunulmuştur.

Kanser kurulması İnsan Konvansiyonel Osteosarkom Hücre Kültürleri Kök

The current improvements in therapy against osteosarcoma (OS) have prolonged the lives of cancer patients, but the survival rate of five years remains ...

Bu makalenin genel amacı, insan osteosarkomlarından elde edilen sonlu bir hücre hattından kanser kök hücrelerini izole etmektir. Bu çalışmanın temel avantajı, onkoloji alanındaki diğer araştırmacılara kanser kök hücrelerinin in vitro ortamda nasıl izole edileceğini açıkça göstermektir. Bu hücreler daha sonra osteosarkoma ve diğer katı tümörlere karşı terapilerin araştırılmasında kullanılabilir.Genellikle, bu konuya yeni başlayan kişiler sarkom kolonilerini nasıl izole edeceklerini bilmedikleri takdirde zorluk yaşayacaklardır. İzolasyon adımını gerçekleştirmek ve anlamak zor olduğundan, bunun görsel olarak gösterilmesi kritik önem taşımaktadır. Bu teknikle ilgili ilk fikri, küre oluşum deneyi hakkında okuduğumuzda edindik.Gypsum ve çalışma arkadaşları tarafından tanımlanmıştır. Prosedürü, doktora öğrencisi Dr. Gaia Palmini ve laboratuvarımdan teknisyen Dr. Roberto Zonefrati gösterecekler. Başlamak için, gerekli tüm kültür ortamlarını hazırlayın.Sindirici tamponlar ve prosedür için gerekli olacak diğer çözeltiler. Ardından, doğrulanmış bir iğne veya cerrahi biyopsiden osteosarkom izole ederek bir osteosarkom sonlu hücre hattı oluşturun. Ve elde edilen hücreleri eşlik eden metin makalesinde açıklandığı şekilde alt kültür edin.Osteosarkom hücre kültürü oluşturulup plaka konfluensa yaklaştığında, ortamı aspirasyonla uzaklaştırın ve hücreleri plakadan ayırmak için tripsinizasyon uygulayın. Hücreleri yeni bir tüpe aktarın ve hücre kümelerini dağıtmak için hücre süspansiyonunu pipetle nazikçe yukarı aşağı çekin.Ardından, hücre süspansiyonundan 10 µL alarak bir hemositometre odasına aktarın. Hemositometre odasını bir faz kontrast mikroskobunun altına yerleştirin ve süspansiyondaki hücre konsantrasyonunu hesaplayın. Daha sonra, metoseluloz içeren 35 mL sarkosfer büyüme ortamına 280.000 hücre ekleyin ve olası topaklanmaları dağıtmak için çözeltiyi bir pipet kullanarak nazikçe karıştırın.Hücre karışımının beş mililitresini, altı kuyucuklu ultra düşük tutunma plakalarının her bir kuyucuğuna aktarın. Ekim yapıldıktan sonra, hücrelerin görünümünü ve iyi izole edilip edilmediklerini gözlemlemek için ters mikroskop kullanın. Hücreleri 37 °C ve %5 CO₂ içeren bir inkübatörde inkübe edin.Büyüme faktörlerinin konsantrasyonunu yenilemek için her üç günde bir, her kuyucuğa taze beta FGF ve EGF alkolözleri ekleyin. Sarkosfer analizinin ilerleyişini; 7, 14, 20, 21 ve 28. günlerde hücreleri mikroskop altında inceleyerek gözlemleyin. Kuyucuğun merkezinde toplanmış büyük siyah sarkosferlerin varlığını gözlemlediğinizde, kültürleme işlemini durdurun ve izolasyon sürecine başlayın.Sarkosferlerin izole edilme zamanı geldiğinde, sarkosferleri içeren medyumun, steril bir membran filtre tutuculu şırıngaya aktarılması için steril 1.000 µL'lik bir pipet kullanın. Sarkosferleri içeren medyum tamamen uzaklaştırıldıktan sonra, kuyuya beş mL büyüme medyumu ekleyin ve emin olmak için kuyuyu durulayın. Kalan tüm sferleri toplayın.Ardından, tüm sarkosferlerin geri kazanılıp kazanılmadığını onaylamak için bir mikroskop kullanın. Eğer kazanılmadıysa, kürelerin toplanması tamamlanana kadar kuyucuğu tekrar yıkayın. Sonrasında, kürelere zarar vermemek için süspansiyonu yerçekimi yardımıyla membran filtre tutucudan süzün ve hiçbir sarkosferin filtreden geçmediğinden emin olun.Bu işlem sırasında, steril bir cam pastör pipeti yardımıyla nazikçe hava kabarcıklarını giderin. Tüm sarkosferlerin filtrasyonu tamamlandığında, tekil hücrelerin tamamen elendiğinden emin olmak için şırıngaya doğrudan on mililitre büyüme ortamı ekleyerek ve basınç uygulamadan filtreleyerek filtrasyon ünitesini yıkayın. Sarkosfer süspansiyonu filtre edildikten sonra, sıvı filtresini atmak ve ağ filtreye dolanmış olan sarkosferlerin geri kazanımına ciddi şekilde dikkat etmek gerekir.Bu aşamada, filtre ünitesini şırıngadan ayırarak çıkarın. Ardından bunu 100 milimetrelik bir petri kabına yerleştirin. Bir çift steril pens kullanarak ağ filtreyi membran filtre tutucudan çıkarın.Ardından filtreyi yeni bir 60 milimetrelik petri kabına aktarın. Sonra, sarkosferleri membranın karışıklığından kurtarmak için beş mililitre büyüme ortamı ekleyerek ağ filtreyi nazikçe sallayıp yıkayın.Ardından, membranı bir kuyuya yerleştirin ve mikroskobik gözlemle membran içinde dolaşan başka küre kalmadığını doğrulayın. Membranı tekrar yıkayın ve eğer hala membranda dolaşan küreler varsa membranı mikroskop altında yeniden kontrol edin. Membran içinde artık küre kalmadığında, sarkosferlerin tek bir tabaka halinde büyümesi için onları büyüme ortamında inkübe edin.Sarkosferlerden elde edilen osteosarkom kanser kök hücrelerinin büyümesini, 60 milimetrelik bir petri kabında, hücreler yaklaşık %90 konfluensa ulaşana kadar izleyin. Bu makalede yer alan çok sayıda standart protokole ek olarak; farklılaşma kapasitesinin değerlendirilmesi, ALDH aktivitesi, akış sitometrisi, immünofloresan ve RTPCR analizlerine yönelik yöntemler, beraberindeki metin protokolünde ayrıntılı olarak sunulmuştur.Osteosarkom örnekleri, iğne aspirasyonu veya cerrahi over-sekte ile elde edilir. Uygun şekilde işlendiklerinde, primer kültürlerin 100 mm'lik bir petri kabında konfluense ulaşması yaklaşık bir ay sürer. Ekspansiyonun ardından, sarkosfer analizi başlatmak amacıyla hücreler altı kuyucuklu ultra düşük tutunma plaklarına ekilir.Bu plaka, hücreleri süspansiyon durumunda tutar ve substrata tutunmayı önler. Yedi gün sonra, tekil hücrelerle çevrili birkaç küçük küresel koloni gözlemlenir. 28 gün sonra ise birkaç büyük sarkosfer gözlemlenir.Sferik koloniler izole edildikten sonra, tekil sarkosferler normal yapışma plaklarına yerleştirilerek kök hücre benzeri kanser hücreleri çoğaltılabilir. İmmünofloresan boyamalar, çoğaltılan hücrelerin CD44 ve CD105 için pozitif, Stro-1 için ise orta derecede pozitif olmasıyla mezenkimal kök hücre benzeri fenotipi göstermiştir. RT-PCR, üç embriyonik kök hücre marker geninin ekspresyonu ile embriyonik kök hücre fenotipini de pozitif olarak göstermiştir.Nanog, Oct 3/4 ve Sox2. Ve osteosarkom kanser kök hücreleri için bir belirteç olan CD133 geni. Bu videoda gösterdiğimiz ayrıntılı izolasyon tekniği, küre oluşum analizi'nin en kritik adımlarının nasıl anlaşılacağını ve yeniden üretileceğini göstererek diğer araştırmacıların kanser kök hücrelerini incelemesine yol açacaktır.Bu modifiye edilmiş analiz, kanser kök hücrelerini izole etmek ve biyolojilerini incelemek için iyi bir tekniktir. Bu yöntem, ek adaptasyonlarla, katı tümör biyopsilerinden elde edilen diğer sonlu kanser hücre hatlarından kanser kök hücrelerini izole etmek için de kullanılabilir.Sonuç olarak, çeşitli tümör tiplerinden kanser kök hücrelerinin izole edilmesi, bu hücrelerin biyolojisinin incelenmesine olanak tanıyacaktır. Buradaki nihai hedef, moleküler hedeflerin belirlenmesi ve belirli hücresel alt gruplara yönelik oldukça spesifik anti-kanser tedavilerinin geliştirilmesidir.

establishment-cancer-stem-cell-cultures-from-human-conventional

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Bu makale, birincil hücre kültürleri ve nasıl tümör hücrelerinden eritrositler ve fibroblastların kirlilikler çıkarmak için taze olarak elde edilen melanom doku hazırlanmasını tarif etmektedir. Son olarak, biz nasıl tarif...

Hasta Türetilen Hücre Kültürü ve CD133 İzolasyonu<sup&gt; +</supMelanom dan&gt; sağlayan olası Kanser Kök Hücreleri

Doğrudan insan dokularından kanser kök hücreler (rulmanları) izolasyonu biyolojik karakterizasyonu için bir koşuldur. Ayrıca zor sorun giderme adımları konusunda ipuçları sağlarken Bu makale, insan dokularından prostat CSCS izolasyonu için bir yöntem anlatılmaktadır.

İnsan Prostat Kanseri Örneklerinden Kanser Kök Hücreleri İzolasyon

Kanser kök hücreleri (rulmanları) nedeniyle kemoterapi direncinin tümör nüks sorumlu tutulmaktadır. Biz seçimi ve yumurtalık kanseri hücre hatları CSCS genişlemesi için bir protokol optimize ettik. Kemoterapötik Sisplatin ile hücrelerin tedavisi ve biz yapışmayan CSC kültürler için zenginleştirmek medyayı teşvik kök hücre kültürleme tarafından.

İnsan Hücre Lines Kemorezistans Yumurtalık Kanser Kök Hücreleri Zenginleştirme

İn vitro küre testleri, kanser kök hücrelerini tanımlamak için yaygın olarak kullanılır. Burada tek ve çok hücreli küre tahlillerini karşılaştırıyoruz. Daha zahmetli tek hücre bazlı tahliller veya metilselüloz takviyesi daha doğru sonuçlar verirken, sıvı ortamda gerçekleştirilen çok hücreli bazlı tahliller hücre yoğunluğundan büyük ölçüde etkilenebilir.

Çoklu ve tek hücre bazlı küreler tahliller kullanılarak, insan yumurtalık karsinoma hücrelerinde Kök Hücre Özelliklerinin Değerlendirilmesi

Aşağıdaki iletişim kuralı hasta elde edilen yumuşak doku sarkomu (STS) birincil kültürünün kurulması üzerinde duruluyor. Bu model bize moleküler arka plan ve bu nadir maligniteler farmakolojik profil daha iyi anlamak için yardımcı ve daha fazla STS yönetimi iyileştirme amaçlı araştırma için bir başlangıç noktası temsil edebilir.

Hasta elde edilen yumuşak doku sarkomu birincil kültürünün kurulması

Tümör Başlatan hücrelerin insan sarkomu hasta türevi xenograflarından floresan-aktif hücre sıralama ile yalıtılması için ayrıntılı bir protokol tanımlayarak, insan lökosit antijen-1 (HLA-1) ' i negatif bir işaret olarak kullanarak ve daha fazla doğrulama ve Bu HLA-1-negatif tümör başlatma hücrelerinin karakterizasyonu.

Sarkom hasta türevi xenografts tümör-başlatma hücrelerinin yalıtım ve karakterizasyonu

Uyuyan ve aktif kanser hücre fenotipleri nicel faz Imaging'i kullanma ile karakterize. Hücre çoğalması, geçiş ve Morfoloji deneyleri entegre ve basit bir yöntem ile analiz edildi.

Hızlandırılmış, etiket içermeyen, nicel faz uyuyan ve aktif insan kanser hücrelerinin çalışma görüntüleme

Burada, bir protokol indüklenmiş pluripotent kök hücreler (iPSCs) üretimi için Li-Fraumeni sendromu (LFS) hasta türetilmiş fibroblastlar, iPSCs mezenkimal kök hücre (MSCs) yoluyla farklılaşma üzerinden dokusunu ve modelleme içinde vivo mevcut LFS hasta kaynaklı dokusunu kullanarak tumorigenesis.

Li-Fraumeni sendromu hasta kaynaklı indüklenmiş Pluripotent kök hücreler kullanılarak osteosarkom modelleme

Bu metodolojinin amacı, kanser hücre hatlarındaki kanser kök hücrelerini (CSC) ve primer insan tümör örneklerini küre oluşturma protokolü ile sağlam bir şekilde, fonksiyonel tahliller ve akış sitometrisi ve Batı ile henotypik karakterizasyon kullanarak tanımlamaktır. Leke.

Jinekolojik ve Meme Kanseri Tümörlerinden Kanser Kök Hücre Kürelerinin Alınması

Mevcut protokol, insan osteosarkom dokusu kullanılarak hasta kaynaklı bir ksenogreft (PDX) fare modeli oluşturma yöntemini açıklamaktadır.

İnsan Osteosarkom Dokuları ile Hasta Kaynaklı Ksenogreft Fare Modelinin Kurulması

Öğrenin, insan osteosarkom biyopsilerinden kanser kök hücrelerini izole etme yöntemini. Bu görsel protokol, sarkosfer oluşum analizi ve hücre kültürü tekniklerini göstererek yeni araştırmacılara kritik adımları anlama ve tekrarlama imkanı sunar.

Kanser kurulması İnsan Konvansiyonel Osteosarkom Hücre Kültürleri Kök

Daha fazla video keşfet