Erkek Fare Ultrasonik Seslendirme (USV) Şarkılarından Yararlanma ve Analiz Etme

Bu prosedürün genel amacı, çeşitli sosyal bağlamlarda yetişkin bir erkek fare ultrasonik seslendirmeleri veya USV'leri güvenilir bir şekilde toplamak ve akustik bir analiz yapmaktır. Bu yöntem, sesli iletişim ve ilişkili bozukluklarla ilgili temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Fare modellerini kullanarak nöro-psikiyatrik bozukluklar ve otistik bozukluklar dahil.

Bu tekniğin ana avantajlarından biri, çeşitli bağlamlarda USV'leri ortaya çıkarmak için bir araç sağlamasıdır. Genel olarak, bu yönteme yeni olan kişiler farelerinin davranmasını sağlamak için mücadele edebilir, bu nedenle farelerinizi şarkı söylemelerini sağlamak için dikkatli ve nazik bir şekilde tutmanız gerekir. Bu protokol için standart hayvan barınağı yeterlidir.

Nötr kafeslerde kayıt yapmadan üç gün önce, erkekleri gece boyunca cinsel olarak olgun bir kadına maruz bırakın. Her kafeste en fazla üç erkek bir dişi ile eşleştirilebilir. Ertesi gün dişileri çıkarın.

İlk kayıt seansından önce erkekleri en az iki gün daha gruplarında tutun. Hazırlanmış bir erkekten USV'leri kaydetmek için, hayvanı kuyruğundan yavaşça yataksız temiz bir kafese aktarın. Bu kafesi ses geçirmez bir kutuya yerleştirin.

Ardından kafesi açık kablolu kapakla örtün. Kutuyu kapatın ve hayvanın 15 dakika boyunca alışmasına izin verin: Bu arada, aşağıdaki bölümde anlatıldığı gibi tahlil için bir uyarıcı hazırlayın. Taze idrar örnekleri kullanmak için, bunları kayıt oturumundan sonraki beş dakika içinde toplayın.

İlk olarak, bir ilaç enjeksiyonu için olduğu gibi bir fareyi ensesinden tutun. Daha sonra, cımbızla tutulan bir pamuk ucu kullanarak, bir damla idrarı çıkarmak için hayvanın mesanesini hafifçe ovalayın ve itin ve pamukla tamamen ıslatın. Ardından, farklı bir kafesten bir fare seçin ve aynı pamuk ucunu kullanarak işlemi tekrarlayın.

Taze idrar karışımı kullanmak önemlidir. Pamuk ucunu ihtiyaç duyulana kadar temiz bir tabakta saklayın Uyarıcı bir dişi hazırlamak için, kızgınlık öncesi veya kızgınlık aşamasında olan birini seçin. Fare geniş bir vajinal açıklığa ve pembe çevre dokuya sahip olacaktır.

İhtiyaç duyulana kadar böyle bir dişiyi izole edin. Anestezi uygulanmış bir fare hazırlamak için, her zamanki gibi anestezi sağlayın. Anestezi durumunu bir ayak parmağı tutamıyla onaylayın ve oftalmik merhem sürün.

İhtiyaç duyulana kadar, anestezi uygulanan hayvanı, ısıyı en aza indirecek şekilde kafesin altında bir ısı yastığı bulunan bir kağıt havlu üzerinde temiz bir kafeste tutun. Hayvanların solunumunu ve vücut ısısını düzenli olarak kontrol ettiğinizden emin olun. Anestezi uygulanmış fare, art arda üç seansa kadar kullanılabilir.

Kaydetmeye hazır olduğunuzda, aynı anda uyaranı sunarken yazılımdaki kayıt düğmesine tıklayın. İdrar veya canlı bir hayvan sunmak için, her ikisini de kafesin içine yerleştirmeniz yeterlidir. Bununla birlikte, anestezi uygulanmış bir hayvanı sunmak için, onu kafes kapağının üzerine yerleştirin.

Ardından kutuyu sessizce kapatın ve USV'leri beş dakika kadar kaydedin. Bir kaydı sonlandırmak için yazılımdaki durdurma karesine basın. Anestezi uygulanan hayvanı en az 15 dakikada bir kontrol edin.

Sternal yaslanma geri kazanana kadar. Daha sonra ev kafesine geri dönebilir. Testler arasında test kafesini %70 alkol ve damıtılmış su ile temizleyin.

Fare şarkı analizörü yazılımını kullanarak akustik kayıtları işleyin. Heceleri, akustik yapıları ve sözdizimleri böylece analiz edilebilir ve gerektiğinde oynatma için yeniden yapılandırılabilir. Önce oynatma aparatını %70 alkolle ve ardından damıtılmış suyla yıkayın.

30 santimetre kolları olan siyah renkli, opak bir y labirenti kullanın. İki kolun en uç ucunda, ultrason hoparlörlerine uyan zemin seviyesinde açılmış delikler vardır. Yıkadıktan sonra labirenti havluyla kurulayın.

Kuruduktan sonra, oynatma hoparlörleri ve monte edilmiş baş üstü video kamera ile kurun. Teste başlamak için önce dişiyi 10 dakikalık bir alışma süresi boyunca labirente yerleştirin. 10 dakika sonra, dişi başlangıç kolunda değilse, onu yavaşça başlangıç koluna geri itin ve plastik ayırma penceresini nazikçe kapatın.

Ardından video kaydını başlatın ve ses kayıtlarını döngülü oynatmada başlatın. Örneğin, bir koldaki idrar stimülasyonundan yakalanan bir şarkıyı çalın ve diğer koldaki kadın stimülasyonundan yakalanan şarkıyı çalın. Şimdi dişinin labirenti beş dakika boyunca keşfetmesine izin verin.

Bu bir oturumu oluşturur. Beş dakika sonra kaydı durdurun ve dişiyi başlangıç koluna geri koyun. Herhangi bir idrar veya dışkıyı çıkarmak için damıtılmış su kullanarak temizlerken onu bir dakika orada tutun.

Bunu tüm oturumlar arasında yapın. İkinci seans için, kaydedilen oynatmayı karşı kollara geçirin ve bu senaryoyu keşfeden kadını beş dakika boyunca kaydedin. Üçüncü ve dördüncü oturumlar için, toplam 20 dakikalık test kayıtları için önceki iki oturum parametresini tekrarlayın.

Tüm oturumların sonunda video kaydını her zaman durdurun. Bir hafta sonra, aynı hayvan kohortu üzerinde başka bir test yapın. Ancak farklı şarkı örnekleri kullanın.

Bulguların güvenilirliğini artırmak için bunu yapın. Analiz için, her seans için dişilerin her bir kolda geçirdiği zamanı ölçün. Sunulan protokol kullanılarak, erkek B6D2F1J farelerin vokal davranışındaki ve sözdizimindeki değişiklikler karakterize edildi.

Beş dakikalık bir kayıt seansı sırasında, ortalama bir erkek üç uyarana çok farklı tepki verdi. Erkekler ayrıca repertuarlarını bağlam genelinde değiştirdiler. Örneğin, taze idrara yanıt olarak, erkekler şarkılarında çok heceli seslendirmelerin önemli ölçüde daha yüksek bir kısmını üretti.

Erkekler ayrıca bağlam boyunca tek tek hecelerin akustik özelliklerini de değiştirdiler. Örneğin, kadın idrarı bağlamında belirli heceleri daha yüksek bir genlik ve bant genişliğinde söylediler. Ve uyanık kadın bağlamında daha yüksek spektral saflıkta.

Bir şarkı tercihi testinde, bir y labirentindeki kadınlar, iki veya daha fazla çok heceli seslendirme içeren karmaşık şarkılarla kolda daha fazla zaman geçirmeyi seçtiler. Sadece basit şarkıların çalındığı karşı kolun aksine. Bu videoyu izledikten sonra, fare USV'lerini çeşitli sosyal bağlamlarda nasıl toplayacağınızı, farelere nasıl oynatacağınızı ve seslendirmelerinin akustik ve dizi analizini nasıl yapacağınızı iyi anlamış olmalısınız.

Bir kez ustalaştıktan sonra, davranış kayıtları fare başına beş ila 10 dakika içinde yapılabilir. Analiz için birkaç saat izin vermelisiniz. Ve davranışsal tepkileri değiştirmemek için fareleri dikkatli bir şekilde kullandığınızdan emin olun.