Name: Tüm Blood adlı ultrasensitive Protein Algılama için Tam Otomatik Santrifüj mikroakışkan Cihazı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-04-16T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 58 s
Description: Keşfedin femtomolar hassasiyetinde protein tespiti için tam otomatik santrifüj mikroakışkan cihazı. Titanyum dioksit nanofiber matlar kullanarak 10 µL tam kanda ELISA duyarlılığını artırın.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser Kore Ulusal Araştırma Vakfı (UÇK) hibeler (2013R1A2A2A05004314, 2012R1A1A2043747), Kore Hükümeti tarafından finanse edilen Kore Sağlık Teknoloji Ar-Ge Projesi, Sağlık ve Refah (A121994) ve IBS-R020-D1 Bakanlığı&#39;ndan bir hibe ile desteklenmiştir.

Not: Kan sağlıklı bireylerden alınmış ve bir kan toplama tüpü içinde toplanmıştır. Yazılı bilgilendirilmiş olur Tüm gönüllülerden elde edilmiştir. TiO2 NF Mat 1. Fabrikasyon <ol><li> Ön-madde 22 solüsyonuna hazırlanması <ol><li> Etanol (% 99.9, 3 mi) ve buzlu asetik asit (3 mi) içindeki bir karışımına titan tetraizopropoksit (TTIP), 1.5 g çözülür ve bir manyetik karıştırıcı ile 30 dakika boyunca oda sıcaklığında çözelti (25 ° C) karıştırılır. </li><li> etanol (% 99.9) 3.64 g polivinil pirolidon (PVP) ağırlık bakımından% 11 çözülür ve bir sıcak levha manyetik karıştırıcı kullanılarak 1 saat boyunca 65 ° C&#39;da, çözelti karıştırılır. </li><li> Birleştirin ve bir sıcak levha manyetik bir karıştırıcı ile 4 saat 65 ° C sıcaklıkta iki çözüm karıştırın. </li></ol></li><li> elektrospinning <ol><li> 200 um iç Diame bir paslanmaz çelik iğne bağlı bir şırınga içine hazırlanan çözelti yükter. dalgıç çıkardıktan sonra şırıngaya doğrudan çözüm dökün. </li><li> yüksek DC voltajı (15 kV) topraklanmış alt-tabaka üzerine yerleştirilmiş bir silisyum üzerinde 10 dakika süre ile 0.3 ml / st bir akış oranında (2 cm x 2 cm) sürekli solüsyonun verilmesini. Elektrospinning sırasında iğne ve 10 cm topraklı alt-tabaka arasındaki mesafeyi ayarlamak. </li></ol></li><li> NF mat kalsinasyon <ol><li> Bir fırın içinde NF koruyucu serin ve yüksek vakum koşullarında (5 x 10 -5 torr) altında 3 ° C / dk&#39;lık bir rampa oranında 500 ° C&#39;ye kadar sıcaklık kadar değişebilmektedir. </li><li> 3 saat 500 ° C sıcaklık muhafaza edin. fırın içinde oda sıcaklığında (25 ° C) örneklerinin sıcaklık soğutun. </li></ol></li></ol> Bir Santrifüj mikroakışkan Disc içine TiO 2. Entegrasyon 2 NF Mat <ol><li> Bir diskin Fabrikasyon <ol><li> 3D tasarım yazılımı (örneğin, Sol kullanınidWorks veya) benzer diskin her katmanın odaları, kanal, ya da vanaları tasvir. Kod üreten yazılım (örn EdgeCAM veya benzeri) kullanarak bilgisayar nümerik kontrol (CNC) kod tasarım dosyalarını dönüştürün. Talimatlara göre yazılımları kullanın manuel 23,24 Not:. Bu cihazda kullanılan tipik kanal boyutları x 0.3 mm (genişlik x derinlik) 1,0 mm&#39;dir. </li><li> (CNC freze makinesinin çalışma yazılımını açın, örneğin., DeskCNC veya benzeri) ve işletim yazılımı, CNC kodu yüklemek ve sırasıyla aşağıdaki tıklatın: &quot;AUTO&quot; -&gt; &quot;G KODU AÇIK&quot; -&gt; oluşturulan CNC kodu seçin. </li><li> CNC freze PC plakasını: Disk tabakası için üst tabaka ve 5 mm PC plakaları için 1 mm PC tabak kullanın. &quot;BAŞLAT&quot; butonuna tıklayarak diskin her katmanı kesmek için CNC freze makinesi çalıştırın. </li></ol></li><li> Diske TiO2 NF mat Transferi<ol><li> bir silikon alt-tabaka ve 40 uL (tridekaflor-1,1,2,2-tetrahydrooctyl), 30 dakika boyunca vakum altında bir vakum odasına -1-trichlorosilane ihtiva eden küçük bir Petri tabağına yerleştirin. fluorosilane buharlaşmakta ve alt tabaka üzerine kaplanmış olur. </li><li> Bir vakum odası 1 oranında ve gazını: 10 bir sertleştirici madde ile birlikte polidimetilsiloksan (PDMS) ön-polimer karıştırın. Spin-kat 60 saniye boyunca 650 rpm&#39;de bir silikon yüzeye PDMS. </li><li> 10 dakika yapışkan bir duruma ulaşmak için 65 ° C sıcaklıkta bir fırın içinde, silikon alt-tabaka üzerine kaplanmış PDMS Cure. Not: Kür süresi çevre koşullarına bağlı olarak değişebilir, ve yapışma kuvveti reometresi kullanılarak yapışma testi ile test edilebilir. </li><li> Bir cımbız kullanarak PDMS kaplı silikon üzerine elektrospinning ve kalsinasyon tarafından hazırlanan TiO2 NF mat aktarın. Daha sonra el (cam slayt, örneğin.) Düz bir nesneyle transfer TiO2 NF mat bir konformal baskı uygulamak ve nesneyi çıkartın. koymak4 saat 65 ° C ya da 1 saat boyunca 80 ° C&#39;de bir fırında Bu örnek tamamen PDMS tabakasını sertleştirmek için. </li><li> 20 ul PDMS / sertleştirici karışımı kullanılarak disk kaplayın bağlanma reaksiyonu odaları (10: 1), bir yapışkan tabaka olarak işlev yapar diske TiO2 NF mat takmak için. </li><li> PDMS katmanda TiO2 NF mat, etanol (% 99.9), 50 ul koyun, 6 mm çapında bir zımba deliği olan NF mat kesilmiş ve 20 ul ile kaplanmış bağlanma reaksiyonu odalarına TiO2 NF mat kesim transfer önceki adımda PDMS. NOT: Bu adımda, etanol Si substrat kesilmiş TiO2 NF mat ayırmak için yararlı olacaktır. </li><li> 1 saat tam PDMS tedavi etmek için 4 saat boyunca ya da 80 ° C &#39;de 65 ° C&#39; de fırında TiO2 NF MAT entegre disk inkübe edin. </li></ol></li><li> Diskte TiO2 NF mat yüzey modifikasyonu <ol><li> PEtanol (3-glisidoksipropil) metildietoksi silan (GPDES) onarılması% 1 h / h çözeltisi (% 99.9). </li><li> 140 W, 180 saniye boyunca 50 sccm oksijen akışı oksijen plazma ile TiO2 NF mat entegre disk davranın. Her bir nano mat GPDES çözeltisi 100 ul koyun ve 2 saat oda sıcaklığında (25 ° C) inkübe edilir. </li><li> Bir yıkama şişesi kullanılarak etanol (% 99.9) dağıtım yoluyla yüzeyler kısaca yıkayın, ardından diski tersini ve temiz karşı mendil lekeleme tamamen etanol çıkarın. 1 saat boyunca 80 ° C&#39;de tedavi. Yukarıda belirtildiği gibi, fiziksel olarak adsorbe edilmiş ve bağlanmamış GPDES molekülleri uzaklaştırmak için, aynı şekilde, etanol (% 99.9) ile iki kez yıkanır. </li><li> Kuru vakum altında, bir azot akımı ile kurutma. NOT: Disk kullanılıncaya kadar RT (25 ° C) kapalı bir kapta saklanabilir. </li></ol></li><li> Yüzey üzerindeki antikorların immobilizasyonu <ol><li> antikorlarla 200 ug / ml &#39;lik bir solüsyonu (monoklonal fare anti yapmakİnsan hsCRP ya da bir fosfat tamponlu tuzlu su (PBS), tampon (pH 7.4) sahip antikorlar seyreltilmesiyle monoklonal fare anti-cTnI). bir mikropipet kullanarak bir diskin her NF hasır üzerine çözeltinin 5 ul koyun. antikorlar hakkında daha fazla bilgi için malzeme listesine bakın. </li><li> nemli bir oda içinde diskleri tutmak ve 4 saat 37 ° C&#39;de inkübe edin. % 0.1 BSA-PBS tamponuyla NF MAT kaplanmış antikorları yıkayın. bir mikropipet kullanarak yıkama tamponu 100 ul ile odasını doldurmak, aspire veya boşaltma yoluyla tampon kaldırmak. Son olarak, diski ters çevirin ve temiz bir mendil karşı kurulayın ve ardından diski monte edin. </li></ol></li><li> disk montaj <ol><li> Bir paket program (örn AutoCAD veya benzeri) kullanılarak, çift taraflı yapışkan bant ile disk tasarımı çizin. Kesme plotter CAD tasarım yükleyin. </li><li> kesim plotter kullanarak çift taraflı yapışkan bant kesti. çift ​​yapışkan bant bir koruma tabakası soyulabilir ve i takmakDisk tabakanın üzerine t. diğer koruma katmanı soyulabilir ve disk katman üzerinde üst tabaka ekleyin. </li><li> presleme makinesinde ön monte disk yerleştirin ve tam her valf, kanal ve odaları bağlamak için her katmanda hizalama işaretleri kullanarak üst / yapışkan / disk katmanı hizalamak. presleme makinesi kullanılarak konformal basınç uygulayın. </li></ol></li></ol> 3. İmmunoassay <ol><li> Mikropipet kullanılarak% 1 BSA-PBS tamponuyla odaları doldurun ve 1 saat 37 ° C&#39;de inkübe diski. bir mikropipet kullanarak aspirasyon ile tamponu çıkarın. reaksiyona girmemiş siteleri engellemek için bir diskin proteinin spesifik olmayan adsorpsiyon azaltmak için bu adım gerçekleştirin. </li><li> doldurma ve bir mikropipet kullanılarak odaları aspire% 0.1 BSA-PBS ile iki kez yıkanır. NOT: Bu aşamada, disk, kullanılana kadar 4 ° C &#39;de muhafaza edilebilir. </li><li> Bir micropipett kullanarak disk üzerinde CRP tespiti için antijen-çivili tam kan ya da CRP serbest serum yük 10 ule. Kalibrasyon grafikler yapmak için, 100 ng / ml, 1 ug / ml CRP konsantrasyonları kullanır; ve cTnl 10 ug / ml ila 100 ng / ml olmuştur. Not: uM aralığında genellikle tam kan içinde daha yüksek CRP seviyeleri nedeniyle, CRP içermeyen serumu cihazın düşük algılama sınırı göstermek için kullanılmıştır. </li><li> kırmızı kan hücreleri ayırmak için 60 saniye boyunca 3600 rpm (391 xg) diski Spin. </li><li> Açık valf lazer ışınlama ile 1. ve aktarım 3 sn 2,400 rpm&#39;de diski iplik HRP ile konjuge antikorları tespit 8 ul içeren odasına süpernatant plazma 4 ul. Not:. Valf harekete ve disk işlemi görselleştirilmesi için genel işlemler önceki raporunda ayrıntılı olarak anlatılmıştır 21 </li><li> Protein ve tespit antikorlarının bağlanma için, 5 saniye süreyle bir karıştırma modu (15Hz s-1, 15 °) uygulanır. </li><li> Valf # 2 ve bağlanma reaksiyonu odasına aşama 6&#39;da elde edilen karışım transferi (2400 rpm3 sn). Daha sonra, karışım ve TiO2 UF bağlayıcı antikorlar arasında bir immunoreaksiyonunu elde etmek için 20 dakika boyunca bir karıştırma modu (60 Hz s-1, 2 °) uygulanır. ve reaksiyon açık valf 3. sonra atık haznesi (2400 rpm, 10 sn) rezidüel karışımı aktarın. </li><li> Valf 4. açılması ve disk (2400 rpm, 4 sn) iplik bağlama reaksiyon odasına yıkama tamponu (600 ul) aktarın. Ardından odasında TiO2 UF&#39;lerini yıkamak için 120 saniye boyunca bir karıştırma modu (30 Hz s -1, 30 °) uygulanır. </li><li> Adım 3.8 aynı durumu takip ederek iki kez daha TiO2 UF&#39;lerini yıkayın ve 20 saniye boyunca 2400 rpm&#39;de diski iplik tamamen kalıntı yıkama tamponu çıkarın. Ardından, vana 5. kapatın. </li><li> Kemilüminesan reaksiyon için, kapak 6 ve eğirme açarak bağlanma reaksiyonu odasına kemilüminesan substrat çözeltisi aktarıldıktan sonra 1 dakika boyunca bir karıştırma modu (30 Hz s-1, 2 °) uygulanırdaha sonra 10 saniye boyunca 2400 rpm&#39;de disk. </li><li> Valf 7. açılması ve 10 saniye boyunca 2400 rpm&#39;de diski iplik algılama odalarına tepki substrat çözüm aktarın. </li><li> Bir photomultiplier tüp (PMT) modülü donanımlı algılama sistemi kullanarak tepki gösterdi substrat çözeltisinden kemilüminesans sinyalleri ölçün. NOT: step motor, optik-bileşenler, çeviri aşamaları ve piyasada mevcut PMT: algılama sistemi aşağıdaki parçaları kullanarak özel inşa edilmiş bir makinedir. optomechanical parçalar ve step motor cihazı tutmak için monte edilir ve motor diski döndürebilirsiniz. algılama optik-parça sabit PMT tarafından gerçekleştirilir ve bu cihazın algılama odası üzerinde yer almaktadır. adım motor manipüle ederek, algılama odaları sağ PMT algılama bölgesi altında hizalanır. </li></ol>

<ol><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanomaterials+for+Ultrasensitive+Protein+Detection%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Mater%22%5BJournal%5D)">Nanomaterials for Ultrasensitive Protein Detection.</a> Adv. Mater. 25 (28), 3802-3819 (2013).</li>
<li>Hu, W., Li, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanomaterial-based+advanced+immunoassays%5BTitle%5D)+AND+%22Wiley+Interdiscip.+Rev.+Nanomed.+Nanobiotechnol%22%5BJournal%5D)">Nanomaterial-based advanced immunoassays.</a> Wiley Interdiscip. Rev. Nanomed. Nanobiotechnol. 3 (2), 119-133 (2011).</li>
<li>Yang-Kyu, C., Chang-Hoon, K. Silicon Nanowire Biosensor for Cancer Markers. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aYang-Kyu%2C+C+%22Biosensors+and+Cancer%22">Biosensors and Cancer</a>. , Science Publishers. 164-183 (2012).</li>
<li>Baltazar, R., Vistas, C. R., Ferreira, G. M. Biosensing Applications Using Nanoparticles. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBaltazar%2C+R+%22Nanocomposite+Particles+for+Bio-Applications%22">Nanocomposite Particles for Bio-Applications</a>. , Pan Stanford Publishing. 265-282 (2011).</li>
<li>Roy, P., Berger, S., Schmuki, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TiO2+Nanotubes%3A+Synthesis+and+Applications%5BTitle%5D)+AND+%22Angew.+Chem.+Int.+Ed%22%5BJournal%5D)">TiO2 Nanotubes: Synthesis and Applications.</a> Angew. Chem. Int. Ed. 50 (13), 2904-2939 (2011).</li>
<li>Yang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrospun+Nanofibrous+Membranes%3A+A+Novel+Solid+Substrate+for+Microfluidic+Immunoassays+for+HIV%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Mater%22%5BJournal%5D)">Electrospun Nanofibrous Membranes: A Novel Solid Substrate for Microfluidic Immunoassays for HIV.</a> Adv. Mater. 20 (24), 4770-4775 (2008).</li>
<li>Chantasirichot, S., Ishihara, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrospun+phospholipid+polymer+substrate+for+enhanced+performance+in+immunoassay+system%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens.+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">Electrospun phospholipid polymer substrate for enhanced performance in immunoassay system.</a> Biosens. Bioelectron. 38 (1), 209-214 (2012).</li>
<li>Zhang, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrospun+TiO2+Nanofiber-Based+Cell+Capture+Assay+for+Detecting+Circulating+Tumor+Cells+from+Colorectal+and+Gastric+Cancer+Patients%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Mater%22%5BJournal%5D)">Electrospun TiO2 Nanofiber-Based Cell Capture Assay for Detecting Circulating Tumor Cells from Colorectal and Gastric Cancer Patients.</a> Adv. Mater. 24 (20), 2756-2760 (2012).</li>
<li>Ali, M. A., Mondal, K., Singh, C., Dhar Malhotra, B., Sharma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-epidermal+growth+factor+receptor+conjugated+mesoporous+zinc+oxide+nanofibers+for+breast+cancer+diagnostics%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale%22%5BJournal%5D)">Anti-epidermal growth factor receptor conjugated mesoporous zinc oxide nanofibers for breast cancer diagnostics.</a> Nanoscale. 7 (16), 7234-7245 (2015).</li>
<li>Mondal, K., Ali, M. A., Agrawal, V. V., Malhotra, B. D., Sharma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+Sensitive+Biofunctionalized+Mesoporous+Electrospun+TiO2+Nanofiber+Based+Interface+for+Biosensing%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Appl.+Mater.+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Highly Sensitive Biofunctionalized Mesoporous Electrospun TiO2 Nanofiber Based Interface for Biosensing.</a> ACS Appl. Mater. Interfaces. 6 (4), 2516-2527 (2014).</li>
<li>Tu, W., Dong, Y., Lei, J., Ju, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-Potential+Photoelectrochemical+Biosensing+Using+Porphyrin-Functionalized+TiO2+Nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Low-Potential Photoelectrochemical Biosensing Using Porphyrin-Functionalized TiO2 Nanoparticles.</a> Anal. Chem. 82 (20), 8711-8716 (2010).</li>
<li>Liu, S., Chen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coadsorption+of+Horseradish+Peroxidase+with+Thionine+on+TiO2+Nanotubes+for+Biosensing%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Coadsorption of Horseradish Peroxidase with Thionine on TiO2 Nanotubes for Biosensing.</a> Langmuir. 21 (18), 8409-8413 (2005).</li>
<li>Portan, D. V., Kroustalli, A. A., Deligianni, D. D., Papanicolaou, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+biocompatibility+between+TiO2+nanotubes+layer+and+human+osteoblasts%5BTitle%5D)+AND+%22J.Biomed.Mater.Res.+Part+A%22%5BJournal%5D)">On the biocompatibility between TiO2 nanotubes layer and human osteoblasts.</a> J.Biomed.Mater.Res. Part A. 100 (10), 2546-2553 (2012).</li>
<li>Dettin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Covalent+surface+modification+of+titanium+oxide+with+different+adhesive+peptides%3A+Surface+characterization+and+osteoblast-like+cell+adhesion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Mater.+Res.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Covalent surface modification of titanium oxide with different adhesive peptides: Surface characterization and osteoblast-like cell adhesion.</a> J. Biomed. Mater. Res. Part A. 90 (1), 35-45 (2009).</li>
<li>Kim, W. -J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+Protein+Immobilization+Efficiency+on+a+TiO2+Surface+Modified+with+a+Hydroxyl+Functional+Group%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Enhanced Protein Immobilization Efficiency on a TiO2 Surface Modified with a Hydroxyl Functional Group.</a> Langmuir. 25 (19), 11692-11697 (2009).</li>
<li>Son, K. J., Ahn, S. H., Kim, J. H., Koh, W. -G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graft+Copolymer-Templated+Mesoporous+TiO2+Films+Micropatterned+with+Poly%28ethylene+glycol%29+Hydrogel%3A+Novel+Platform+for+Highly+Sensitive+Protein+Microarrays%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Appl.+Mater.+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Graft Copolymer-Templated Mesoporous TiO2 Films Micropatterned with Poly(ethylene glycol) Hydrogel: Novel Platform for Highly Sensitive Protein Microarrays.</a> ACS Appl. Mater. Interfaces. 3 (2), 573-581 (2011).</li>
<li>Kar, P., Pandey, A., Greer, J. J., Shankar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrahigh+sensitivity+assays+for+human+cardiac+troponin+I+using+TiO2+nanotube+arrays%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Ultrahigh sensitivity assays for human cardiac troponin I using TiO2 nanotube arrays.</a> Lab Chip. 12 (4), 821-828 (2012).</li>
<li>Agarwal, S., Wendorff, J. H., Greiner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+electrospinning+technique+for+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Polymer%22%5BJournal%5D)">Use of electrospinning technique for biomedical applications.</a> Polymer. 49 (26), 5603-5621 (2008).</li>
<li>Ding, B., Wang, M., Wang, X., Yu, J., Sun, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrospun+nanomaterials+for+ultrasensitive+sensors%5BTitle%5D)+AND+%22Mater.+Today%22%5BJournal%5D)">Electrospun nanomaterials for ultrasensitive sensors.</a> Mater. Today. 13 (11), 16-27 (2010).</li>
<li>Liu, Y., Yang, D., Yu, T., Jiang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incorporation+of+electrospun+nanofibrous+PVDF+membranes+into+a+microfluidic+chip+assembled+by+PDMS+and+scotch+tape+for+immunoassays%5BTitle%5D)+AND+%22ELECTROPHORESIS%22%5BJournal%5D)">Incorporation of electrospun nanofibrous PVDF membranes into a microfluidic chip assembled by PDMS and scotch tape for immunoassays.</a> ELECTROPHORESIS. 30 (18), 3269-3275 (2009).</li>
<li>Lee, W. S., Sunkara, V., Han, J. -R., Park, Y. -S., Cho, Y. -K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrospun+TiO2+nanofiber+integrated+lab-on-a-disc+for+ultrasensitive+protein+detection+from+whole+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Electrospun TiO2 nanofiber integrated lab-on-a-disc for ultrasensitive protein detection from whole blood.</a> Lab Chip. 15 (2), 478-485 (2015).</li>
<li>Li, D., Xia, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+of+Titania+Nanofibers+by+Electrospinning%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Lett%22%5BJournal%5D)">Fabrication of Titania Nanofibers by Electrospinning.</a> Nano Lett. 3 (4), 555-560 (2003).</li>
<li>Lombard, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLombard%2C+M+%22SolidWorks+2013+BIBLE%22">SolidWorks 2013 BIBLE</a>. , John Wiley & Sons Inc. Indianapolis, IN. (2013).</li>
<li>Tickoo, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTickoo%2C+S+%22EdgeCAM+11.0+for+Manufacturers%22">EdgeCAM 11.0 for Manufacturers</a>. , CADCIM Technologies. Schererville, IN. (2007).</li>
<li>Zhu, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+adhesion+of+interconnected+TiO2+nanofiber+network+on+conductive+substrate+and+its+application+in+polymer+photovoltaic+devices%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Phys.+Lett%22%5BJournal%5D)">Improved adhesion of interconnected TiO2 nanofiber network on conductive substrate and its application in polymer photovoltaic devices.</a> Appl. Phys. Lett. 93 (1), 013102(2008).</li>
<li>Song, M. Y., Ahn, Y. R., Jo, S. M., Kim, D. Y., Ahn, J. -P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TiO2+single-crystalline+nanorod+electrode+for+quasi-solid-state+dye-sensitized+solar+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Phys.+Lett%22%5BJournal%5D)">TiO2 single-crystalline nanorod electrode for quasi-solid-state dye-sensitized solar cells.</a> Appl. Phys. Lett. 87 (11), 113113(2005).</li>
<li>Katsuhiro, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrospinning+processed+nanofibrous+TiO2+membranes+for+photovoltaic+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nanotechnology%22%5BJournal%5D)">Electrospinning processed nanofibrous TiO2 membranes for photovoltaic applications.</a> Nanotechnology. 17 (4), 1026-1031 (2006).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

TiO2 NF entegre disk üzerinde deney kan çok düşük hacimde, düşük fazla proteinler arasında derece hassas saptanması için hızlı, ucuz ve kullanışlı bir yöntemdir. Bu teknik, küçük örnek hacimlerini (10 ul) kullanılarak avantajı vardır ve aynı anda birden fazla numune analiz için elverişlidir. Bu bir çoklayıcı immunoassay cihazı olarak büyük bir potansiyel sunmaktadır. Cihaz, geleneksel ELISA gereklidir plazma ayrılması gibi örnek ön-işlem aşamaları gerekli değildir ilave bir avantajı vardır. Ayrıca, cihaz saye...

Hastalık tanısı için çeşitli platformlar 1,2 gibi nanotellerin, 3 nanopartiküller, 4 nanotüpler, 5 ve nano (NF&#39;ler) 6-8 olarak nano ölçekli malzemelere dayanan geliştirilmiştir. Bu nano kendi benzersiz fizikokimyasal özellikleri nedeniyle son derece hassas biyoanalizlere için yeni teknolojilerin tasarımı mükemmel umutları sunuyoruz. Örneğin, gözenekli bir çinko oksit nanolifler meme kanseri biyobelirteçlerinin femto-mol hassas bir şekilde tespit kullanılmaktadır. 9. Son zamanlarda, kimyasal stabilitesini göz önüne biyoanalitik edecektir 10 araştırılmıştır (TiO2) titanyum dioksit esaslı sol-jel, 11 ihmal edilebilir protein denatürasyonu 12 ve ek olarak biyouyumluluk. 13, TiO2 yüzeyi üzerindeki hidroksil grupları kimyasal modifikasyon biyomoleküllerin kovalent bağlanmasını kolaylaştırır. 14,15 Desenli TiO2 thin, filmler 16 veya TiO2 17 yüzey alanını arttırarak, bir hedef proteinin algılama hassasiyetini artırmak için kullanılmıştır nanotüpler, Ancak, üretim süreci oldukça karmaşık ve pahalı ekipman gerektirir. Öte yandan, electrospun NF&#39;ler basit ve düşük maliyetli üretim süreci yanı sıra nedeniyle yüksek yüzey alanı dikkatini alıyorsanız, 18,19 henüz electrospun TiO2 NF mat kırılgan ya da gevşek özelliği işlemek için zorlaştırır ve mikroakışkan cihazlar ile entegre. 6,20 nedenle, TiO2 NF paspaslar nadiren biyoanalitik uygulamalarda sert yıkama koşulları gerektiren özellikle kullanılmıştır. Bu çalışmada, bu sınırlılıkların üstesinden gelmek için, ince bir polidimetilsiloksan (PDMS) yapışkan tabaka kullanarak, herhangi bir hedef alt-tabakanın yüzeyi üzerine, NF halılar electrospun aktarmak için yeni bir teknoloji geliştirilmiştir. furthermore, başarılı polikarbonat (PC) yapılan bir santrifüj mikroakışkan cihaz üzerine electrospun TiO NF paspaslar 2 entegrasyonunu gösterdi. Bu cihazı kullanarak, C-reaktif protein, hassas bir yüksek tam otomatik ve entegre (CRP) ve kardiyak troponin I (cTnl) tam kan sadece 10 uL, 30 dakika içinde elde edilmiştir. 21 nedeniyle birleştirilebilir UF ve merkezkaç platformun özelliklerinin avantajları, deney alt saptama sınırı 100 ng / ml (~ 12:08) 1 ug / ml (~ 8 FM) den altı mertebe geniş bir dinamik aralık sergilemiştir CRP ve 37 pg / ml (~ 01:05) içindeki bir saptama sınırı 100 ng / ml (~ 4 nM), 10 pg / ml (~ 12:04) bir dinamik aralık için 0.8 ug / ml (~ 6 FM) ve cTnI için. Bu tespit limitleri ~ 300 ve 20 Hangi kat bunlara karşılık gelen geleneksel ELISA sonuçlarına göre daha düşük. Bu teknik, uygun antikorlar ile, herhangi bir hedef proteinlerin tespiti için uygulanabilir. Genel olarak, bu cihaz coörneğin, tam kan 10 ul; biyolojik numunelerin çok küçük miktarlarda bile büyük bir hassasiyetle hedef proteinlerin nadir miktarlarda algılayabilir beri uld in vitro diagnostik ve biyokimyasal tahliller büyük katkı. Biz sadece bu çalışmada ELISA kullanılarak serum protein algılama gösterdi rağmen, mikroakışkan cihazlar ile electrospun UF&#39;lerin transferi ve entegrasyon teknolojisi daha geniş yüksek algılama hassasiyeti için büyük bir yüzey alanı gerektiren diğer biyokimyasal reaksiyonlarda uygulanabilir.

<table><tbody><tr><td>Si gofret</td><td>LG SILTRON</td><td>Cilalı Gofret, test sınıfı</td><td>Çap (mm) = 150, oryantasyon = < 100>, katkı maddesi = bor, RES(Ohm-cm) = 1 - 30, kalınlık (&mu; m) = 650 - 700</td></tr><tr><td>Polikarbonat (PC)&nbsp;</td><td>Daedong Plastik</td><td>PCS # 6900</td><td>Kalınlık (mm) = 1 ve 5&nbsp;</td></tr><tr><td>Titanyum tetraizopropoksit, %98,Sigma-Aldrich</td><td></td> <td>205273</td><td></td></tr><tr><td>Polivinilpirolidon, Mw = 1.300.000</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>437190</td><td></td></tr><tr><td>Asetik asit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>320099</td><td></td></tr><tr><td>Susuz etanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>459836</td><td></td></tr><tr><td>Tridecafluoro-1,1,2,2-tetrahidrooktil)-1-triklorosilan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>448931</td><td></td></tr><tr><td>PDMS ve kürleme maddesi</td><td>Dow Corning</td><td>SYLGARD 184</td><td></td></tr><tr><td>GPDES</td><td>Gelest Inc</td><td>SIG5832.0&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>JT Baker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>FE-SEM</td><td>FEI</td><td>Nova NanoSEM</td><td></td></tr><tr><td>X-ışını fotoelektron spektroskopisi</td><td>ThermoFisher</td><td>K-alpha</td><td></td></tr><tr><td>3D modelleme makinesi</td><td>M& Ben CNC Laboratuvarı, Kore</td><td></td><td>CNC freze makinesi</td></tr><tr><td>Balmumu dağıtma makinesi</td><td>Hanra Precision Eng. Co. Ltd., Kore</td><td></td><td>Özelleştirilmiş</td></tr><tr><td>Çift taraflı yapışkan bant</td><td>FLEXcon, ABD</td><td>DFM 200 şeffaf 150 POLY H-9 V-95</td><td></td></tr><tr><td>Kesme plotter</td><td>Graphtec Corporation, Japonya</td><td>Graphtec CE3000-60 MK2</td><td></td></tr><tr><td>Spin kaplayıcı</td><td>MIDAS</td><td>SPIN-3000D</td><td></td></tr><tr><td>Fırın (kalsinasyon)</td><td>R. D. WEBB COMPANY</td><td>WEBB 99</td><td></td></tr><tr><td>Reometre (Yapışma testi)</td><td>Thermo Scientific</td><td>Haake MARS&nbsp; III - ORM Paketi</td><td></td></tr><tr><td>Oksijen plazma sistemi</td><td>FEMTO</td><td>SEVIMLI</td><td></td></tr><tr><td>Monoklonal fare anti-human hsCRP</td><td>Hytest Ltd., Finlandiya</td><td>4C28</td> <td>(klon # C5)</td></tr> <tr><td>Monoklonal fare anti-cTnI</td><td>Hytest Ltd., Finlandiya</td><td>4T21</td> <td>(klon # 19C7)</td></tr> <tr><td>HRP konjuge keçi poliklonal anti-hsCRP</td><td>Abcam plc., MA</td><td>ab19175</td><td></td></tr><tr><td>HRP konjuge fare monoklonal anti-cTnI</td><td>Abcam plc., MA</td><td>ab24460</td> <td>(klon # 16A11)</td></tr> <tr><td>hsCRP</td><td>Abcam plc., MA</td><td>ab111647</td><td></td></tr><tr><td>cTnI</td><td>Fitzgerald, MA</td><td>30-AT43</td><td></td></tr><tr><td>Sığır Albümini</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7906</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Amresco Inc</td><td>E404</td><td></td></tr><tr><td>Kan alma tüpleri</td><td>BD vacutainer</td><td>367844</td><td>K2 EDTA 7.2 mg artı kan toplama tüpleri</td></tr><tr><td>SuperSignal ELISA femto</td><td>Invitrogen</td><td>37074</td><td></td></tr><tr><td>Modüler çok etiketli plaka okuyucu</td><td>Perkin Elmer</td><td>Envision 2104</td><td></td></tr><tr><td>Disk işletim makinesi</td><td>Hanra Precision Eng. Co. Ltd., Kore</td><td></td><td>Özelleştirilmiş</td></tr><tr><td>Fotoçoğaltıcı tüp (PMT)</td><td>Hamamatsu Fotonik</td><td>H1189-210</td><td></td></tr><tr><td>AutoCAD</td><td>AutoDesk</td><td>Sürüm 2012</td><td>Tasarım yazılımı</td></tr><tr><td>SolidWorks 3D CAD yazılımı&nbsp;</td><td>SOLIDWORKS A.Ş.</td><td>Sürüm 2013</td><td>3D Tasarım yazılımı,</td></tr> <tr><td>Edgecam</td><td>Vero yazılım</td><td>sürümü 2009.01.06928</td><td>Kod üreten yazılım</td></tr><tr><td>DeskCNC</td><td>Carken Co.</td><td>Sürüm 2.0.2.18</td><td>CNC freze makinesi yazılımı</td></tr></tbody></table>

tüm blood adlı ultrasensitive protein algılama için tam otomatik santrifüj mikroakışkan cihazı

Fully Automated Centrifugal Microfluidic Device for Ultrasensitive Protein Detection from Whole Blood

Enzime bağlı immünosorbent testi (ELISA), biyolojik örneklerde az miktarda proteini tespit etmek için umut verici bir yöntemdir. Azaltılmış numune hacmi ve test süresinin yanı sıra tam otomasyon için bir platform sağlayan cihazlar, hasta başı teşhisinde potansiyel kullanım için gereklidir. Son zamanlarda, TiO2 nanoliföz (NF) matlardan oluşan bir disk üzerinde laboratuvar kullanarak serum proteinleri, C-reaktif protein (CRP) ve kardiyak troponin I'in (cTnI) ultra hassas tespitini gösterdik. 30 dakika içinde küçük bir tam kan hacminden femto molar (fM) algılama hassasiyeti ile geniş bir dinamik aralık gösterdi. Cihaz, düşük numune hacimlerinden daha fazla hassasiyet için otomatikleştirilmiş kan ayırma, ölçme, karıştırma ve yıkama için çeşitli bileşenlerden oluşur. Burada, video gösteriminde, NF'lerin yanı sıra diskin imalatı, entegrasyonu ve çalışması için deneysel protokolleri ve teknik bilgileri aşağıdaki sırayla gösteriyoruz: TiO2 NF matı hazırlama süreçleri; TiO2 NF matının diske aktarılması; immün reaksiyonlar, disk montajı ve çalışması için yüzey modifikasyonu; İmmünoassay için disk üzerinde algılama ve temsili sonuçlar. Bu cihazın kullanımı, minimum numune ve reaktif tüketimi ile çoğullanmış analiz sağlar. Avantajları göz önüne alındığında, cihaz çok çeşitli uygulamalarda kullanım bulmalı ve düşük miktarda bulunan proteinlerin analizini kolaylaştırmada faydalı olmalıdır.

Bu protokol, yüksek hassasiyet hazırlanan ile tam kandan protein tespiti için tam otomatik santrifüj mikroakışkan cihaz kullanarak. TiO2 NF paspaslar Elektrospinning ve kalsinasyon işlemleri ile hazırlanmıştır. Bu akış hızı, voltaj ve eğirme süresi gibi koşullar, Elektrospinning, arzu edilen çapta, morfoloji ve kalınlığı UF&#39;lerini imal etmek için optimize edilmiştir. koşulları optimize değildi zaman, oluşan UF&#39;lerden kalitesi kötü. Özellikle, UF&#39;ler düşük voltaj (5...

Bu protokol, 30 dakika içinde 10 μL tam kandaki proteinlerin femto molar algılama duyarlılığının nasıl elde edileceğini göstermektedir. Bu, yüksek yüzey alanının yanı sıra gelişmiş sinyal-gürültü oranı için etkili karıştırma ve yıkama sunan bir disk üzerinde laboratuvara entegre edilmiş elektroeğrilmiş nanolifli matlar kullanılarak elde edilebilir.

Tüm Blood adlı ultrasensitive Protein Algılama için Tam Otomatik Santrifüj mikroakışkan Cihazı

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is a promising method to detect small amount of proteins in biological samples. The devices providing a platform ...

Bu prosedürün genel amacı, doğal eğrilmiş nanofiberler kullanarak ELISA'nın algılama hassasiyetini iyileştirmektir. Bu video, 30 dakika içinde 10 mikrolitre tam kan örneğinde proteinlerin femtomolar tespit duyarlılığının nasıl elde edileceğini göstermektedir. Disk üzerinde laboratuvar platformunda, sıvıyı odacıklardan aktarmak için merkezkaç kuvveti kullanılır ve toplam süreç tamamen otomatiktir.Algılama hassasiyeti, nanofiberlerin entegrasyonu ile oldukça arttırılabilir. Ancak sorun, nanofiberin çok kırılgan ve kullanımı zor olmasıydı. Bu videoda, kırılgan titanyum dioksit nanofiber paspasları plastik bir diske takmak için basit bir işlem sunuyoruz.Elektrospinning ile silikon substrat üzerinde titanyum dioksit nanofiber paspaslar üretmek için, silikon substrat önce silanize edilir, PDMS ile kaplanır ve önceden kürlenir. Daha sonra bu önceden hazırlanmış PDMS'ye bir nanofiber mat aktarılır ve bu ürün, tutturma için dairesel bir parça üretmek üzere delinir. Reaksiyon odasını yapıştırıcı olarak bir damla PDMS ile kaplayın ve dairesel parçayı odanın dibine yapıştırın.Ardından, PDMS'yi fırında kürleyin. Son olarak, disk katmanlarını ELISA için eksiksiz bir cihazda birleştirin. Bu nanolif transfer tekniği, biyoanaliz için nanoliflerin yüksek yüzey alanını kullanmamızı sağlar.Santrifüj mikrofilitik cihaz, ELISA'da gerekli olan tüm süreçlerin tam entegrasyonunu ve otomasyonunu sunar. Bu tekniğin diğer mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, sadece 10 mikrolitre tam kandan femtomolar protein konsantrasyonlarını tespit edebilmesidir. Öncü çözeltileri, ekteki test protokolünde açıklandığı gibi hazırlayın.Daha sonra çözeltiyi elektro döndürücüye yükleyin ve en uygun koşulları kullanarak nanolifleri elektro eğirme ile üretin. Polimer nanofiber paspaslar hazırlandığında, bunları vakum altında bir fırında kalsine edin. Kalsinasyondan sonra, titanyum dioksit nanofiber paspaslar nihayet hazırlanır.SOLIDWORKS gibi 3D tasarım yazılımlarını kullanarak mikrofilik düzeni hazırlayın ve tasarımı CNC freze makinesine aktarın. Diski kanallar ve haznelerle imal etmek için CNC freze makinesini çalıştırın. Disk ve nanofiber mat artık entegre edilmeye hazırdır.Bir vakum odası, silikon substrat ve florosilan hazırlayın. Silikon substratı 30 dakika boyunca vakum altında florosilan ile silanize edin. 10'a bir oranında bir kürleme maddesi ile prepolimer hazırlayarak konuk PDMS'yi hazırlayın ve kaplamayı 650 saniye boyunca 60 RPM'de silanize silikon substrat üzerine sıkın.Silanize gofret üzerine kaplanmış PDMS'yi yapışkan hale getirmek için 65 santigrat derecede 10 dakika kürleyin. Şimdi bu nanofiber paspasları, cam slayt gibi düz bir nesne kullanarak uygun basınç uygulayarak PDMS kaplı silikonun üzerine aktarın. Yapışkan PDMS'yi tamamen kürlemek için numuneyi 80 santigrat derecede bir saat pişirin.PDMS katmanına tutturulmuş nanofiber paspasların üzerine birkaç damla etanol dağıtın ve bir PunchIt kullanarak altı milimetre çapında bir delik açın. Daha sonra, silikon alt tabakadan PDMS üzerine tutturulmuş delikli nanofiber paspasların soyun. Daha sonra, diskteki bağlanma reaksiyon odasını yaklaşık 20 mikrolitre PDMS karışımı ile kaplayın ve PDMS üzerine tutturulmuş nanofiberleri odalara yerleştirin.Ardından, nanofiber mat entegre diski bir saat boyunca 80 santigrat derecede inkübe edin. Etanol içinde GPDES'in hacim başına% 1 hacim hazırlayın. Daha sonra, diskteki nanofiberleri oksijen plazması ile tedavi edin.Her nanofiber mat üzerine 100 mikrolitre GPDES çözeltisi dağıtın ve kapalı bir kapta iki saat boyunca oda sıcaklığında inkübe edin. İnkübasyondan sonra, diski bir sileceğe hafifçe vurarak GPDES solüsyonunu çıkarın. Etanol ile yıkayın, çıkarın ve 80 derecede bir saat pişirin.Pişirdikten sonra etanol ile yıkayın ve çıkarmak için hafifçe vurun. Bu işlemi tekrarlayın ve bir nitrojen akışı ile kurutun. Antikor immobilizasyonu için, seyreltilmiş yakalanan antikor çözeltisini dağıtın.Diskleri nemlendirilmiş bir odada tutun ve dört saat boyunca 37 derecede inkübe edin. Kalan çözeltiyi yıkama tamponu ile yıkayın. Şimdi, diski çift taraflı bir yapışkan bant kullanarak birleştirin.Katmanları tam bir diskte birleştirmek için makul bir basınç uygulayın. Bağlayıcı reaksiyon odalarını bloke edici tampon ile doldurun ve bir saat boyunca 37 santigrat derecede inkübe edin. Yıkama tamponu ile iki kez yıkayın ve diski kullanana kadar 40 santigrat derecede saklayın.Reaktifleri, yıkama tamponlarını ve 10 mikrolitre tam kanı reaktif ve numune odalarına yükleyin. Otomatik immünolojik test için diski özel olarak oluşturulmuş bir görselleştirme makinesine yerleştirin. Görselleştirme sistemi, otomatik disk çalışması için bir bilgisayara bağlı bir rotorun yanı sıra bir flaş ışığı ve görüntü almak için bir CCD kamera içerir.Kırmızı kan hücrelerini ayırmak için diski 60 saniye boyunca 3.600 RPM'de döndürün. Plazmayı tespit antikorları ile karıştırın. Karışımı titanyum dioksit nanofiber mat ile entegre reaksiyon odasına aktarın.İmmünoreaksiyondan sonra, yıkama tamponunu reaksiyon odasına aktararak nanolifleri yıkayın. Daha sonra, kemilüminesan substrat çözeltisini bağlayıcı reaksiyon odasına aktarın ve bir dakika boyunca bir karıştırma modunda inkübe edin. Son olarak, reaksiyona sokulmuş substrat çözeltisini algılama odasına aktarın.Tüm reaksiyon bittiğinde, diski bir algılama sistemine aktarın ve özel olarak oluşturulmuş yazılımı kullanarak kemilüminesan sinyali okuyun. Disk çalışması ve algılama sistemi tek bir platforma entegre edilebilir. Voltajı ve floratı optimize ederek, bu SEM görüntüsünde gösterildiği gibi tek tip nanofiber matlar elde edildi.PDMS kürleme süresini optimize etmek için yapışma kuvveti ölçüldü. Çok kısaysa, nanofiber mat PDMS'ye gömüldü veya çok uzunsa soyuldu. Optimizasyondan sonra, nanofiber mat daha sonra PDMS'ye sabit bir şekilde tutturuldu.İki platformdan C-reaktif protein tespiti için doğrusal aralık bu grafikte gösterilmiştir. Diskteki nanofiber bütünlük laboratuvarını kullanarak, 30 dakika içinde sadece 10 mikrolitre serumdan C-reaktif proteinin yüksek derecede gelişmiş algılama hassasiyetini elde edebildik. 96 kuyulu plaka bazlı ELISA gibi şu anda mevcut olan teknolojiler, daha büyük bir numune hacmi ve daha uzun bir algılama süresi gerektirir.Genel olarak, nanofiber entegre disk tabanlı ELISA, altı femtomol C-reaktif protein tespit limiti ile altı büyüklük mertebesinde geniş, dinamik bir aralık gösterdi. Diske entegre nanofiber tarafından sağlanan yüksek yüzey alanı ile desteklenen bu algılama hassasiyeti, 2.000 femtomol ile sınırlı olan geleneksel ELISA'nınkini aştı. Bu videoyu izledikten sonra, santrifüjlü mikrofilitik cihazın nasıl hazırlanacağını, fazal nanofiberlerin nasıl entegre edileceğini ve ELISA kullanılarak protein tespitine nasıl uygulanacağını iyi anladığınızı umuyoruz.Bu teknik, çok az miktarda biyolojik numunede düşük bağlı proteinleri tespit etmek için yararlı olabilir.

fully-automated-centrifugal-microfluidic-device-for-ultrasensitive

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Elektrik alanların uygulama tarafından bir dizi elektrot - Dijital Mikroakiskan ayrık damlacıklar (ml ~ nL) manipülasyon ile karakterize bir tekniktir. Hızlı, sıralı, minyatür otomatik biyokimya testleri yürütmek için çok uygundur. Burada, birkaç proteomik işlem adımlarını otomatik olarak yetenekli bir platform raporu.

Otomatik Proteomik İşleme Dijital Mikroakiskan

Çekirdekli hücre zenginleştirme hücre kaybı olmadan yüksek kaliteli örnek izolasyonu sağlar eritrosit lizis ile periferik kan dolaşımını sağlamak için otomatik bir mikroakışkan cihaz geliştirildi.

Çekirdekli Hücreler Sirkülasyon zenginleştirilmesi için Otomatik mikroakışkan Kan Lizis Protokolü

Bu video, insan kan trombositlerinden amyotrofik lateral skleroz (ALS) ile ilişkili bir protein biyobelirtecini tespit etmek için bir kılcal elektroforez immünolojik test protokolünü göstermektedir. ALS biyobelirteç proteininin varlığının doğrulanması, trombosit proteinlerinin boyuta dayalı olarak ayrılması ve ardından kemilüminesan tespiti ile elde edilir.

Protein Biyobelirteç Tespiti için Bir Kapiller Elektroforez İmmünoassay

Bu video, manyetik nanoparçacık tabanlı bir immünolojik test için bir mikroakışkan sistemi göstermektedir. Algılama sistemi, kanalları içinde manyetik bir tuzak içeren bir mikroakışkan cihaz kullanır. Primer ve peroksidaz konjuge sekonder antikorlara bağlı antijen kaplı manyetik nanopartiküllerden oluşan önceden oluşturulmuş immünokompleksler kanallara sokulur. İmmünokompleksler, harici bir manyetik alan uygulandıktan sonra gözenekli manyetik tuzakta yakalanır. Peroksidazlar tarafından kataliz...

Mikroakışkan Bir Cihaz Kullanan Manyetik Nanopartikül Bazlı Bir İmmünoassay

Bu yazıda tek bir hücre analizi için bir mikroakışkan çip sunuyoruz. Bu sağlar: hücre içi proteinler, enzimler, kofaktörler, ve floresan deneyleri veya bağışıklık aracılığıyla ikinci haberciler miktar.

Tek Hücrelerinin yönlü Kimyasal Analiz için mikroakışkan Chip

Bu protokol, sağlam tekrarlanabilirlik ile, bütün haldeki kan, bir damla, insan nötrofil kemotaksisi ölçmek için tasarlanmış bir tahlil göstermektedir. Bu yaklaşım, nötrofil ayrılması için ihtiyaç dışı eden ve deney hazırlama zaman sadece birkaç dakika gerektirir. Mikroakışkan çip bebeklerde veya örnek hacmi sınırlıdır küçük memeliler, zamanla nötrofil kemotaksisinin tekrarlanan ölçü sağlar.

İşlenmemiş kandan Nötrofil Kemotaksis Ölçüm mikroakışkan Platformu

Bu protokol, bir mikroakışkan cihaz kullanarak otomatik küçük hacimli (0,15–1,5 ml) parçacık ayırma işlemleri gerçekleştirmek için bir sistem mimarisini tanımlar ve akustoakışkan cihaz performansını ve çalışmasını optimize etme yöntemlerini tartışır.

Bir mikroakışkan Hassas Küçük hacimli Numune İşleme Platformu ve Akustik mikrocihazda Ayrı Biyolojik Parçacıklar Boyutu Kullanımı

Burada, kılcal bazlı santrifüjlü bir mikroakışkan cihaz kullanarak, boyutu kontrol edilebilir, monodispers, yağda su (W/O) mikro damlacıkları için basit bir üretim yöntemi gösteriyoruz. Bu yöntem sadece küçük bir numune hacmi gerektirir ve yüksek verimli üretim sağlar. Bu yöntemin hızlı biyokimyasal ve hücresel analizler için faydalı olacağını umuyoruz.

Tek dağılımlı mikro damlacıklar boyutu kontrollü Formasyonu için Kılcal tabanlı Santrifüj mikroakışkan Cihaz

Bir mikrosıvısal Biyoalgılayıcı platform tasarlanmıştır ve çeşitli analitlerin hızlı ve hassas miktar için düşük maliyetli kuru film fotorezist teknolojisi kullanılarak imal edilmiştir. Bu tek kullanımlık sistem-küçük parça-immobilize enzim bağlı deneyleri elektrokimyasal göstergesi için stop-akış tekniği yoluyla sağlar.

Kuru zar elektrokimyasal mikrosıvısal Biyoalgılayıcı fotorezist tabanlı Platform: Cihaz imalat, On-chip tahlil hazırlama ve sistemin çalışması

Elektrowetting tabanlı dijital mikroakışkan, manipülasyonunu kolaylaştırmak için mikrolitre hacimli damlacıkların görünür temas açısında voltaj güdümlü bir değişiklik kullanan bir tekniktir. Bunu fonksiyonel manyetik boncuklarla birleştirmek, enzime bağlı İmmünosorbent Test (ELISA) kullanılarak numune hazırlama ve patojenlerin tanımlanması için birden fazla laboratuvar ünitesi operasyonunun entegrasyonunu sağlar.

Otomatik Enzimbağlantılı İmmünosorbent Assay için Elektrowetting tabanlı Dijital Mikroakışkanplatformu

Mikroakışkanlar, tanısal testlerin geliştirilmesi için güçlü bir araçtır. Bununla birlikte, pahalı ekipman ve malzemelerin yanı sıra zahmetli imalat ve taşıma teknikleri de sıklıkla gereklidir. Burada, manyetik mikro ve nanopartikül bazlı immünotahliller için akrilik bir mikroakışkan cihazın üretim protokolünü düşük maliyetli ve kullanımı kolay bir ortamda detaylandırıyoruz.

Manyetik Nanopartikül Bazlı İmmünoassaylar için Kademeli Bir Kısıtlama ile Mikroakışkan Akrilik Cihazın Bilgisayar Sayısal Kontrol Mikrofrezelenmesi

Keşfedin femtomolar hassasiyetinde protein tespiti için tam otomatik santrifüj mikroakışkan cihazı. Titanyum dioksit nanofiber matlar kullanarak 10 µL tam kanda ELISA duyarlılığını artırın.

Tüm Blood adlı ultrasensitive Protein Algılama için Tam Otomatik Santrifüj mikroakışkan Cihazı

Daha fazla video keşfet