Transkripsiyon Faktörleri ile fare embriyonik fibroblastlar yeniden programlama bir Hemogenic Programı tetikleyebilecek

Bu hemojenik indüksiyon protokolünün genel amacı, uzun süreli kültürde hematopoietik hücreler üreten in vitro hematopoietik öncü hücreler oluşturmak için transkripsiyon faktörü aşırı ekspresyonu yoluyla fare fibroblastlarında gelişimsel bir süreç başlatmaktır. Bu yöntem, hematopoetik programlama alanında, çok soylu ve aşılama yeteneğine sahip iyi niyetli HSC'ler de novo elde etmek için bir protokol geliştirilip geliştirilemeyeceği gibi temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin ana avantajı, minimal bir transkripsiyon faktörleri setinin aşırı ekspresyonu yoluyla, pluripotent bir ara ürün boyunca seyahat gerektirmeyen yeniden programlanmış hücrelerde gelişim sürecinin başlatılabilmesidir.

Fare embriyonik fibroblastlarını veya MEFS'yi kültürledikten ve metin protokolüne göre virüs ürettikten sonra, 6 oyuklu plakaları önceden kaplamak için PBS'de yüzde 0.1 jelatin kullanın. Jelatinin kuyunun tüm alanını kapladığından emin olmak. Plakaları en az 20 dakika boyunca 37 santigrat derece inkübatöre yerleştirin.