Bir Kullanarak Altın Nanopartiküller Verimli Radyoaktif bir Optimize Protokolü ¹²⁵ I-etiketli Azid Protez Grubu

Bu protokolün genel amacı, suş destekli bakır serbest tıklama reaksiyonunu kullanarak radyoaktif iyot etiketli altın nano parçacıklar için verimli ve hızlı bir sentetik yöntem sağlamaktır. Bu yöntem, yaklaşık üç yıl etiketli radyo izotopunun sentezi ve ped veya spec görüntüleme çalışmaları için düzenli görüntüleme probları gibi radyokimya alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, mükemmel radyokimyasal verim ve radyokimyasal saflığa sahip azid protez grubunun kullanılmasıyla altın parçacıkları ile etiketlenmiş bir ila beş iyotun verimli bir şekilde sentezlenebilmesidir.

Radyo değerlendirme adımlarının öğrenilmesi zor olduğu için bu yöntemin görsel gösterimi çok önemlidir. Bu tür prosedürler uygun bir tesis gerektirdiğinden ve radyo etiketleme deneyimini ele aldığından. Çalışmanın yanı sıra, radyo öğrencisi Ha Eun Shim prosedürü gösterecek.

Radyo iyotlama reaksiyonunu gerçekleştirmek için 1.5 mL'lik bir tüpe öncü bir çözelti ekleyin. Oda sıcaklığında öncü çözeltiye 10 mikrolitre asetik asit ekleyin. Daha sonra reaksiyon karışımına 50 mikrolitrede 150 mega bekarel iyot 125, 0.1 molar sodyum hidroksit ekleyin.

Bir kloramin T çözeltisi ekleyin ve reaksiyon karışımını içeren mikrosantrifüj tüpünü kapatın. Reaksiyon karışımını, radyo iyotlama reaksiyonu tamamlanana kadar oda sıcaklığında on beş dakika inkübe edin. Daha sonra, radyo iyotlama reaksiyonunu söndürmek için reaksiyon karışımına bir sodyum metabisülfit çözeltisi ekleyin.

Ham üründen 0,2 mikrolitre çekin ve ardından yüksek performanslı sıvı kromatografisi veya HPLC analizi için su içinde 100 mikrolitre% 50 aseto nitril ile seyreltin. Seyreltilmiş ham ürünü, ters fazlı bir analitik radyo HPLC kullanarak analiz edin. Tüm reaksiyon karışımını bir HPLC şişesine aktarın.

Reaksiyon tüpünü 0.5 mL aseto nitril ile durulayın ve durulamayı aynı enjeksiyon şişesine ekleyin. Toplanan çözeltiyi bir mL su ile seyreltin. Ham ürünü onarıcı HPLC ile saflaştırmak için, ham ürünü bir hazırlayıcı radyo HPLC'ye enjekte edin.

İyot 125 etiketli azidi temsil eden radyoaktif zirveyi bir cam test tüpünde toplayın. Fraksiyonun radyo kimyasal verimini, üreticinin protokolüne göre bir radyoaktivite doz kalibratörü kullanarak ölçün. Daha sonra saflaştırılmış ürünü, ürünün radyo kimyasal saflığını belirlemek için aynı HPLC koşullarını kullanarak analitik bir radyo HPLC'ye enjekte edin.

Ürünün katı faz ekstraksiyonunu gerçekleştirmek için, istenen ürünü içeren fraksiyonu 40 mL saf su ile seyreltin. Seyreltilmiş çözeltiyi önceden koşullandırılmış bir TC18 kartuşuna ekleyin. Kartuşu ilave 15 mL su ile yıkayın.

2 mL aseton ile kartuşta sıkışan ürünü, kurşun bir kalkanla korunan 10 mL'lik bir cam şişeye boşaltın. Ayrıştırılan ürünün radyoaktivitesini, üreticinin protokolüne göre radyoaktivite doz kalibratörü kullanarak ölçün. Asetonu buharlaştırdıktan sonra, bir sonraki radyo etiketleme adımı için kalıntıyı 100 ila 200 mikrolitre DMSO ile çözün.

Metin protokolünde açıklandığı gibi DBCO grubu modifiye altın nanopartiküllerinin sentezini gerçekleştirin. Santrifüjleme kullanarak DBCO grubu modifiye altın nanopartiküllerin konsantre bir çözeltisini hazırlayın. Ve altın nano parçacıkların konsantrasyonunu iki mikro molar ile ayarlayın.

5 mikrolitre DMSO'da 4.1 mega bekarel iyot 125 etiketli azid, 50 mikrolitre 2 mikro molar altın nanopartikül süspansiyonuna ekleyin. Elde edilen reaksiyon karışımını 40 santigrat derecede 60 dakika inkübe edin. Ham üründen 0.2 mikrolitrelik bir alloquot çekin ve silika kodlu bir ince tabaka kromatografisi veya TLC plakası üzerine uygulayın.

Mobil faz olarak etil asetat kullanarak TLC plakasını geliştirin. TLC plakasını bir radyo TLC tarayıcısına yerleştirin ve üreticinin protokolüne göre radyo etiketleme reaksiyonunu izlemek için tarayıcıyı çalıştırın. İyot 125 etiketli altın nanopartikülleri içeren reaksiyon karışımını santrifüjleme ile saflaştırın.

Süpernatanı boşaltın ve altın nanoparçacık peletlerinin yeniden süspansiyonu için saf su ekleyin. Saflaştırılmış üründen 0.2 mikrolitrelik bir alloquot çekin ve silika kaplı bir TLC plakasına uygulayın. Mobil faz olarak etil asetat kullanarak TLC plakasını geliştirin.

TLC plakasını bir radyo TLC tarayıcısına yerleştirin ve üreticinin protokolüne göre iyot 125 etiketli altın nanopartiküllerin radyokimyasal verimini ve radyokimyasal saflığını belirlemek için tarayıcıyı çalıştırın. İyot 125 etiketli azid protez grubunun temsili sonuçları burada gösterilmektedir. Bir radyoaktivite doz kalibratörü kullanılarak %75'lik bir radyokimyasal verim belirlendi.

Analitik radyo HPLC sonucu, ürünün mükemmel radyokimyasal saflığını gösterir. İyot 125 etiketli altın nanopartikülün temsili sonuçları burada gösterilmektedir. Radyo TLC analizi, saflaştırılmış altın nano parçacığın hem radyokimyasal veriminin hem de saflığının %95'ten fazla olduğunu göstermektedir.Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde gerçekleştirilirse üç saat içinde yapılabilir.

Bu tekniğin etkileri, nükleer görüntüleme terapötik amaçları için çeşitli moleküler probların hazırlanmasına kadar uzanmıştır, çünkü mevcut yöntemdeki etiketleme kimyası oldukça verimli ve basittir. Radyoaktif iyotla çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve bu işlemi gerçekleştirirken her zaman daha hafif tuğlalar veya daha hafif ayakkabılar gibi önlemlerin alınması gerektiğini unutmayın.