Name: CNS içine Hedeflenen Madde Teslimat için Fare Mikrocerrahi İnfüzyon Tekniği yoluyla İç Karotis Arter (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-31T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 41 s
Description: Keşfedin fare mikrocerrahi infüzyon tekniği kullanarak iç karotis arter yoluyla beyine madde teslimatı. Bu yöntem nöron ağ bütünlüğünü korurken yüksek konsantrasyon sağlar ve nörobilim araştırmaları için minimal travma sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu modelin laboratuvarımızda kullanımını ilk kez kuran Dr. Lei Chen'e (Mount Sinai, NY'deki Icahn Tıp Okulu) ve tekniği laboratuvarımızda yaygınlaştırdığı için Dr. Gretchen Wolff'a (Alman Kanser Araştırma Merkezi, Heidelberg, Almanya) teşekkür ederiz. Kısmen HL126559, DA039576, MH098891, MH63022, MH072567, DA027569 ve NSC 2015/17/B/NZ7/02985 tarafından desteklenmektedir.

Aşağıdaki protokolde yer alan işlemler Miami Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi Üniversitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır. Buna ek olarak, tüm işlemler laboratuvar Animal Care International Değerlendirme ve Akreditasyon Derneği (AAALAC) tarafından onaylanan tesislerinde yürütülmektedir. Cerrahi Farelerin 1. Hazırlık <ol><li> Bir laboratuvar anestezi sistemi kullanılarak, oksijen ile karışık izofluran ile fare anestezisi. 2 L% ve oksijen akışı 4-5 arasında ayarında izofluran kullanın / ticari makinede dak (Malzeme Tablosu bakınız). Bir stereomikroskop altında, cerrahi yüzeyine hayvan aktarın ve bir burun konisi kullanılarak anestezi sürdürmek (- 2 L / dk 2.5 ve oksijen akışını 1.5 ayarını izofluran kullanın). <ol><li> nefes nefese kalmadan 2 solunum / sn - fare solunum hızı 1 civarında olduğundan emin olun. Buna ek olarak, hayvan bıyık stimülasyon reaksiyonu ve pedal r sergilemez sağlamakeflex (ayak tutam). Ameliyat sırasında en az her 5 dk solunum hızı ve çaba izleyin. Kemirgen anestezi izlenmesi için özel Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi ve veteriner kurallara uyun. </li></ol></li><li> kuruluğunu önlemek amacıyla steril bir bez kullanılarak her bir göze göz kayganlaştırıcı bir damla uygulayın. anti-enflamatuar ve rahatsızlığı azaltmak için analjezik uygulanması tavsiye edilir. </li><li> Hayvan sırtında yatarken ile bir burun konisi kullanılarak anestezi korumak. </li><li> parkı etanol% 70 ve klorheksidin ile üç kez silerek hayvanın boyun bölgesini temizleyin. (Aşağıda ayrıntılı) bir jilet kullanarak hayvanın ameliyat alanını tıraş. </li></ol> Ortak Karotis Arter 2. Diseksiyon (CCA) <ol><li> Bir stereomikroskop altında tüm mikrocerrahi prosedürü uygulayın. Cerrahi makas kullanarak ve forseps göğüs yukarıdan t altına, boyun sığ bir ensizyon gerçekleştirinO (yaklaşık 3 ila 4 cm) çene. </li><li> Forseps dikkatle ayrı yağlı ve bağ dokusu kullanılarak trakea ortaya çıkarmak. </li><li> bölgeyi daha fazla açığa boyun uzatmak için farenin ensesine bir yastık (yuvarlak nesneyi, çapı yaklaşık 0.5 cm) yerleştirin. </li><li> Bir doku retraktörü veya kanca kullanarak doku ayırın. </li><li> trakea hayvanın sol tarafında dikkatle sol CCA maruz bağ dokusu ayrı tweeze. </li><li> Forseps dikkatle CCA çatallanma ortaya çıkarmak için tüm bağ dokusu, hem dış ve iç karotid arterlerin başlangıcını kaldırın. </li></ol> Madde İnfüzyon için CCA 3. hazırlanması <ol><li> forseps kullanarak, eksternal karotid arter altında naylon sütür (yaklaşık 1 cm her) iki kesimleri (ECA) yerleştirin. </li><li> ECA mümkün olan en yüksek noktasında kalıcı bir düğüm yerleştirin. </li><li> ECA mümkün olan en düşük noktası, hemen CCA çatallanma üzerinde yer atçıkarılabilir düğüm. Bu düğüm, üst düğüm kıyasla gevşek olmalıdır. </li><li> mümkün olan en düşük noktada, bir gemi klibi kullanarak CCA kapatın. </li><li> Bir gemi klibi kullanarak internal karotis arter (ICA) kapatın. </li><li> Kullanılarak mikrodisseksiyon yaylı makas, iki düğüm arasındaki ECA (yaklaşık 2 mm) küçük bir kesim yapmak. </li></ol> ICA aracılığıyla 4. Madde İnfüzyon <ol><li> bir infüzyon sistemi monte edin. Kılcal boru (6 inç doğru boyutları: 2.5 mm x 1.2 mm) takın maddenin 250 ul ihtiva eden bir tüberkülin şırıngaya (ilaçlar, patojenler, diğerleri arasında hücre dışı veziküller) aşılanmış ve yapılan kesi içine yavaşça kılcal ucu eklemek için adım 3.6. </li><li> o çatallanma ve CCA kapanış klibi arasında bir orta nokta ulaşıncaya kadar kılcal aşağı kaydırmaya devam edin. </li><li> Alt ECA düğüm aşağı kravat. düğüm kılcal akışkanlığını sağlayacak kadar gevşek ve Leakin önlemek için yeterince sıkı olduğundan emin olunörn. </li><li> ICA klipsi çıkartın. </li><li> Yavaşça şırınga pistonu sağlayan madde infüzyon saniyede yaklaşık 10 ul baskı uygulamak. </li></ol> 5. Mesaj İnfüzyon Prosedürleri <ol><li> Yeri ICA geri klibi. </li><li> Yavaşça kılcal boru kaldırın. </li><li> tamamen alt ECA düğüm aşağı kravat. </li><li> ICA ve CCA klipleri çıkarın. </li></ol> 6. Kesi Kapanış ve Post-operatif Bakım <ol><li> toplayıcı veya doku kanca ve yastık çıkarın. </li><li> steril serum fizyolojik ile temizleyin dikiş alanı. </li><li> naylon sütür / iğne ve forseps kullanarak kesi kapatın. </li><li> anti-enflamatuar ve analjezik ameliyat sonrası rahatsızlığı azaltmak için uygulayınız. </li><li> en az 1 saat ve monitör kurtarma için ısıtma pedi üzerine yerleştirilir kafeste hayvan yerleştirin. </li></ol>

<ol><li>Chen, L., Swartz, K. R., Toborek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vessel+microport+technique+for+applications+in+cerebrovascular+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Vessel microport technique for applications in cerebrovascular research.</a> J Neurosci Res. 87 (7), 1718-1727 (2009).</li>
<li>Frisella, W. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracranial+injection+of+recombinant+adeno-associated+virus+improves+cognitive+function+in+a+murine+model+of+mucopolysaccharidosis+type+VII%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Intracranial injection of recombinant adeno-associated virus improves cognitive function in a murine model of mucopolysaccharidosis type VII.</a> Mol Ther. 3 (3), 351-358 (2001).</li>
<li>Wei, L., Erinjeri, J. P., Rovainen, C. M., Woolsey, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collateral+growth+and+angiogenesis+around+cortical+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Collateral growth and angiogenesis around cortical stroke.</a> Stroke. 32 (9), 2179-2184 (2001).</li>
<li>Wu, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+delivery+of+methotrexate+to+epidermal+growth+factor+receptor-positive+brain+tumors+by+means+of+cetuximab+%28IMC-C225%29+dendrimer+bioconjugates%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">Targeted delivery of methotrexate to epidermal growth factor receptor-positive brain tumors by means of cetuximab (IMC-C225) dendrimer bioconjugates.</a> Mol Cancer Ther. 5 (1), 52-59 (2006).</li>
<li>Pignataro, G., Studer, F. E., Wilz, A., Simon, R. P., Boison, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotection+in+ischemic+mouse+brain+induced+by+stem+cell-derived+brain+implants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Neuroprotection in ischemic mouse brain induced by stem cell-derived brain implants.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 27 (5), 919-927 (2007).</li>
<li>Sugiyama, Y., Kusuhara, H., Suzuki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetic+and+biochemical+analysis+of+carrier-mediated+efflux+of+drugs+through+the+blood-brain+and+blood-cerebrospinal+fluid+barriers%3A+importance+in+the+drug+delivery+to+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Kinetic and biochemical analysis of carrier-mediated efflux of drugs through the blood-brain and blood-cerebrospinal fluid barriers: importance in the drug delivery to the brain.</a> J Control Release. 62 (1-2), 179-186 (1999).</li>
<li>Pardridge, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+and+gene+delivery+to+the+brain%3A+the+vascular+route%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Drug and gene delivery to the brain: the vascular route.</a> Neuron. 36 (4), 555-558 (2002).</li>
<li>Vantyghem, S. A., Postenka, C. O., Chambers, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrous+cycle+influences+organ-specific+metastasis+of+B16F10+melanoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Estrous cycle influences organ-specific metastasis of B16F10 melanoma cells.</a> Cancer Res. 63 (16), 4763-4765 (2003).</li>
<li>Huang, R. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+gene+delivery+targeted+to+the+brain+using+a+transferrin-conjugated+polyethyleneglycol-modified+polyamidoamine+dendrimer%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Efficient gene delivery targeted to the brain using a transferrin-conjugated polyethyleneglycol-modified polyamidoamine dendrimer.</a> FASEB J. 21 (4), 1117-1125 (2007).</li>
<li>Liu, R., Martuza, R. L., Rabkin, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracarotid+delivery+of+oncolytic+HSV+vector+G47Delta+to+metastatic+breast+cancer+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Intracarotid delivery of oncolytic HSV vector G47Delta to metastatic breast cancer in the brain.</a> Gene Ther. 12 (8), 647-654 (2005).</li>
<li>Kumar, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transvascular+delivery+of+small+interfering+RNA+to+the+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Transvascular delivery of small interfering RNA to the central nervous system.</a> Nature. 448 (7149), 39-43 (2007).</li>
<li>Wrobel, J. K., Wolff, G., Xiao, R., Power, R. F., Toborek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+Selenium+Supplementation+Modulates+Growth+of+Brain+Metastatic+Tumors+and+Changes+the+Expression+of+Adhesion+Molecules+in+Brain+Microvessels%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Trace+Elem+Res%22%5BJournal%5D)">Dietary Selenium Supplementation Modulates Growth of Brain Metastatic Tumors and Changes the Expression of Adhesion Molecules in Brain Microvessels.</a> Biol Trace Elem Res. , (2015).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Burada anlatılan infüzyon mikrocerrahi gövdesi 1, 12 boyunca istenmeyen yayılmasını önleyerek, CNS içine çeşitli biyolojik özellikleri eksojen maddelerin teslim çok başarılı olduğu kanıtlanmıştır. Kan-beyin bariyerinin bozulması çok merkezi sinir sistemi ile ilgili hastalıkların patolojik özelliğidir; Bu nedenle, kan-beyin bariyeri ile ekzojen maddelerin ilişkisini değerlendirmek büyük önem ve ilgi konusudur. Sunulan bu cerrahi model...

Merkezi sinir sisteminin in vivo modellerde (CNS) hastalıkları, beyin bu tür ilaçlar, patojenlerin veya eksozom gibi eksojen madde, etkili bir teslim gerektirir. Bu nedenle, ideal bir dağıtım yöntemi, hayvana en az travmaya neden nöronal ağ bütünlüğünü korumak ve beyin 1 yüksek madde konsantrasyonları elde etmelidir. Yerel madde sağlama çeşitli cerrahi yöntem içi kılıf, intraserebral, intraventriküler enjeksiyonlar veya implantlar, 2, 3, 4, 5 de dahil olmak üzere tarif edilmiştir. Bu yaklaşımlar, ancak, CNS travmatik kabul ve ilgi maddenin sadece düşük hacimli yönetimine izin vardır. Ayrıca, dış kaynaklı maddelerin hızlı bir şekilde beyin omurilik sıvısı 6 çıkarılabilir ileri sürülmüştür </skadar&gt;, ve yukarıda belirtilen teknikler kullanıldığı zaman beyin parankiması için düşük penetrasyon aralığı 7 gözlenmiştir. Bunlar merkezi sinir sistemine maddeleri sunan düşük etkinliği sergileyen ancak örneğin oral, akciğer, deri altı ve damar içi yollar gibi sistemik uygulama yöntemleri, daha yaygın olarak diğer organlarda 8, 9 alımı nedeniyle, hayvan modelleri kullanılmaktadır. Bu nedenle, teslimat bu rotalar yan etki ve toksisite 10, 11 riskini artıran, yönetilen maddelerin yüksek dozda gerektirir. Burada, etkili doğrudan internal karotid arter yoluyla beyine maddeleri sağlayan bir fare infüzyon mikrocerrahi tekniği, açıklar. CNS teslimat hedeflemenin yanı sıra, bu teknik, normal fizyolojik engelleri aşmak ve bu nedenle biologica son derece alakalı değilbeyne terapötik veya patojenlerin pasajlar yer l süreçleri.

<table><tbody><tr><td>Anestezi aleti</td><td>Vetequip</td><td>901806</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi makas</td><td>Güzel Bilim Aracı</td><td>14558-09</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi forseps düz uçlu</td><td>Güzel Bilim Aracı</td><td>00108-11</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi forseps açılı uç</td><td>Güzel Bilim Aracı</td><td>00109-11</td><td></td></tr><tr><td>Yaylı makas</td><td>Güzel Bilim Aracı</td><td>15000-08</td><td></td></tr><tr><td>Naylon sütür</td><td>Braintree Scientific</td><td>SUT-S 104</td><td></td></tr><tr><td>Kılcal boru (Mikro-Renatan 0.010" x 0.005" / ft.)&nbsp;</td><td>Braintree Scientific</td><td>MRE01050</td><td></td></tr><tr><td>Kapanış sütürü</td><td>VWR</td><td>95057-036</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Piramal</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-Trifeniltetrazolyum klorür</td><td>FisherScientific</td><td>50-121-8005</td><td></td></tr></tbody></table>

cns içine hedeflenen madde teslimat için fare mikrocerrahi İnfüzyon tekniği yoluyla İç karotis arter

Mouse Microsurgery Infusion Technique for Targeted Substance Delivery into the CNS via the Internal Carotid Artery

Merkezi sinir sistemi (MSS) hastalıklarının ve buna bağlı olarak kan-beyin bariyeri bozulma hastalıklarının hayvan modelleri, ekzojen maddelerin beyne verilmesini gerektirir. Bu ekzojen maddeler zararlı etkiye neden olabilir veya terapötik strateji oluşturabilir. Ekzojen maddelerin beyne en yaygın verilme yöntemleri, deri altı veya intravenöz yollar gibi sistemik doğumlara dayanır. Yaygın olarak kullanılmasına rağmen, bu yaklaşımların beyne düşük iletim etkinliği de dahil olmak üzere çeşitli sınırlamaları vardır. Buna karşılık, maddeleri CNS'ye lokal olarak veren cerrahi yöntemler daha spesifiktir ve eksojen maddelerin diğer organlar tarafından alınmasını önler. CNS uygulaması için çeşitli cerrahi yöntemler mevcuttur; Ancak, çok travmatik olma eğilimindedirler. Burada, maddeleri internal karotis arter yoluyla beyne etkili bir şekilde veren, minimal travma ile ve normal CNS işlevselliğine müdahale etmeyen bir fare infüzyon mikrocerrahi tekniğini tarif ediyoruz.

Burada tarif edilen fare infüzyon mikrocerrahi tekniği çok yönlüdür ve beyin metastaz oluşumunun 1, 12 ait temsili bir modelinde tümör hücrelerinin verilmesi de dahil olmak üzere, doğrudan beyin içine farklı maddelerin aktarılması için kullanılmıştır. Bu teknik aynı zamanda CNS farklı patojenlerin patolojik açıdan değerlendirmek için uygundur. HIV enfeksiyonu olan bir ...

Mevcut protokol, maddeleri internal karotis arter yoluyla doğrudan beyne etkili bir şekilde ileten bir fare mikrocerrahi infüzyon tekniğini tanımlamaktadır.

CNS içine Hedeflenen Madde Teslimat için Fare Mikrocerrahi İnfüzyon Tekniği yoluyla İç Karotis Arter

Animal models of central nervous system (CNS) diseases and, consequently, blood-brain barrier disruption diseases, require the delivery of exogenous ...

Bu cerrahi tekniğin genel amacı, kafatasına nüfuz etmeden fare beynine eksojen maddeler vermektir. Bu yöntem, beyindeki ilaçların, patojenlerin ve eksozomların etkisiyle ilgili sinirbilimdeki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, hayvanda minimal travmaya neden olması, nöronal ağın bütünlüğünü koruması ve beyindeki maddenin yüksek konsantrasyonlarına ulaşmasıdır.Fareyi bir indüksiyon odasında uyuşturmak için oksijenle karıştırılmış izofluran uygulayarak başlayın. Anestezi indüksiyonundan sonra, hayvanı stereo mikroskop altında cerrahi yüzeye aktarın ve cerrahi bir anestezi düzlemini korumak için burun konisini yerleştirin. Solunum hızının nefes nefese kalmadan saniyede bir ila iki solunum mesafesinde olduğundan emin olun.Ek olarak, hayvanın bıyık stimülasyonuna veya ayak parmağı tutamına tepki vermediğinden emin olun. Kuruluğu önlemek için her göze bir damla oftalmik kayganlaştırıcı uygulamak için steril bir çubuk kullanın. Ameliyat bölgesini jiletle tıraş ettikten sonra, alanı %70 etanol ve klorheksidin ile hazırlayın.Stereo mikroskoptan bakarken, boyunda göğüs kemiğinin üstünden çenenin altına kadar orta hat kesisi oluşturmak için cerrahi makas ve forseps kullanın. Trakeayı ortaya çıkarmak için yağ ve bağ dokusunu dikkatlice ayırmak için forseps kullanın. Ardından, boynu uzatmak ve alanı daha fazla ortaya çıkarmak için boynun arkasına yaklaşık sıfır nokta beş santimetre çapında yumuşak, yuvarlak bir nesne yerleştirin.Daha sonra, kancalar veya bir doku ekartörü kullanarak trakea etrafındaki dokuyu ayırın. Trakeanın sol tarafında, sol ortak karotis arteri veya CCA'yı ortaya çıkarmak için bağ dokusunu dikkatlice cımbızlayın. Forseps kullanarak, hem dış hem de iç karotis arterlerin başlangıcında CCA çatallanmasını ortaya çıkarmak için tüm bağ dokusunu dikkatlice çıkarın.ECA ve ICA açığa çıktıktan sonra, dış karotis arterin altına bir santimetrelik naylon sütür segmenti yerleştirmek için forseps kullanın. Ardından bir santimetrelik ikinci bir segment yerleştirin. Ardından ECA'nın mümkün olan en yüksek noktasına kalıcı bir düğüm atın.ECA'nın mümkün olan en alçak noktasında, CCA çatallanmasının hemen üzerinde, daha gevşek, çıkarılabilir bir düğüm atın. Ardından, CCA'yı mümkün olan en düşük noktada kapatmak ve ICA'yı kapatmak için damar klipslerini kullanın. Dış karotis arterde küçük bir kesi yapmadan önce iç karotis arterin düzgün bir şekilde kapatılması kanamayı önleyecektir.Şimdi, mikrodiseksiyon yayı makası kullanarak, ECA'da iki düğüm arasında iki milimetrelik bir kesim yapın. Kesikleri küçük tutmak önemlidir, çünkü büyük bir kesik demlenecek maddenin sızmasına neden olacaktır. İnfüzyon sistemini, infüze edilecek maddenin 250 mikrolitresini içeren bir tüberkülin şırıngasına altı inçlik kılcal boru takarak monte edin.Ardından, kılcal borunun ucunu ECA'daki kesiğe yavaşça sokun. Ucu, çatallanma ile CCA üzerindeki klips arasındaki yarıya ulaşana kadar ilerletmeye devam edin. Alt ECA düğümünü bağlayın.Düğümün kılcal akışkanlığa izin verecek kadar gevşek ve sızıntıyı önleyecek kadar sıkı olduğunu doğrulayın. Ardından, klibi ICA'dan çıkarın. Şırınga pistonuna hafifçe basınç uygulayın ve saniyede yaklaşık 10 mikrolitre madde infüzyonuna izin verin.Test maddesinin infüzyonunu takiben, klipsi tekrar ICA'ya yerleştirin. Kılcal boruyu yavaşça çıkarın. Ardından, alt ECA düğümünü tamamen bağlayın.Klipsi ICA ve CCA'dan çıkarın. Ardından ekartörü veya doku kancalarını ve yastığı çıkarın. Dikilecek bölgeyi steril tuzlu su ile temizleyin ve ardından naylon dikişler kullanarak kesiyi kapatın.Ameliyat sonrası rahatsızlığı hafifletmek için onaylanmış bir anti-enflamatuar ajan ve analjezik uyguladıktan sonra, hayvanı en az bir saat boyunca bir ısıtma yastığı üzerinde bir kafese koyun ve iyileşmeyi izleyin. Bu histogram, sol internal karotis arter yoluyla viral infüzyondan yedi gün sonra gerçek zamanlı PCR'lerle HIV tespitini göstermektedir. Beklendiği gibi, virüsün seviyeleri sol yarımkürede daha yüksektir.Bu immünofloresan görüntü, iç karotis arter yoluyla hücre dışı vezikül infüzyonundan sonra bir eksozom belirteci olan GFP etiketi CD63'ü gösteren bir fare beyin bölümünü göstermektedir. Yeşil renkle gösterilen hücre dışı vezikülleri ifade eden CD63, fare beyni mikro damarı ile ilişkilidir. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa 20 dakika içinde yapılabilir.Geliştirilmesinden sonra bu teknik, nörodejeneratif hastalıklar alanındaki araştırmacıların farelerde ilaç, patojenler ve eksozom etkileşimlerini keşfetmelerinin yolunu açtı.

mouse-microsurgery-infusion-technique-for-targeted-substance-delivery

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Nörobilim soruşturma hale geldikçe, daha sofistike, beyin yapılarının incelenmesi ve devreleri, doğruluk ve daha yüksek çözünürlük gelişmiş düzeyde gerektirir. Biz bir ucu çapı 50 mikron ile borosilikat mikrokanül kullanarak beynin içinde kronik bir infüzyon sistemi hazırlanması ve implantasyon için bir yöntem geliştirdiler.

Nöroaktif Acenteleri Sürekli teslim için bir mikroinfüzyon Sistemi İnşaat ve İmplantasyon.

Kaynak: Zamboni, M., et al., İntrasisternal Enjeksiyon Yoluyla Leptomeningeal Hücre Modifikasyonunun İndüksiyonu. J. Vis. Uzm. (2020)Bu video, anestezi uygulanmış bir farenin cisterna magnasına bir indükleyici ilacın verilmesi prosedürünü göstermektedir. Enjeksiyon, floresan görüntüleme ile onaylanan, beyin omurilik sıvısı yoluyla erişilebilen beyin yüzey hücrelerinde seçici olarak floresan işaretleyici ekspresyonunu indükler.

Cisterna Magna Enjeksiyonu ile Bir Fare Modelinde Hedefe Yönelik İlaç Verilmesi

Kaynak: Lim, M.,  et al. Kanser hücrelerinin iç karotis arter enjeksiyonu ile beyin metastazının modellenmesi. J. Vis. Uzm.  (2022)Bu videoda, anestezi uygulanmış bir fare, beyne hedeflenen iletimi kolaylaştırmak için kanser hücrelerinin ortak karotis artere (CCA) enjekte edildiği cerrahi bir prosedürden geçiyor. Prosedür, enjekte edilen hücreleri iç karotis artere (ICA) yönlendirmek için karotis arterlerin hassas bir şekilde dikilmesini ve manipüle edilmesini içerir ve zamanla beyinde tümör...

Kanser Hücrelerinin İnternal Karotis Arter Enjeksiyonu ile Beyin Tümörü Metastazının Modellenmesi

Kaynak: Leda, AR ve ark. İç Karotis Arter Yoluyla CNS'ye Hedefe Yönelik Madde İletimi için Fare Mikrocerrahi İnfüzyon Tekniği. J. Vis. Uzm. (2017)Bu video, bir test maddesinin iç karotis arter (ICA) yoluyla beyne hedeflenen infüzyonunu kolaylaştırmak için tasarlanmış bir mikrocerrahi prosedürü göstermektedir. Prosedür, kan akışını geçici olarak kısıtlamak ve kontrollü teslimatı sağlamak için hassas dikiş ve vasküler manipülasyonu içerir. Dış karotis artere (ECA) bir kılcal tüp yerleştirilir ve...

İç Karotis Arterine İnfüzyon Yoluyla Fare Beynine Hedeflenen Madde Verilmesi

Kan-beyin bariyeri bozulması, beyin bazı ilaçların ulaştırılması, yardımcı olur. Mannitol fiziksel bariyer düzenini bozacak içi arterially kan damarları çevreleyen daralır hücreleri teslim.

Kan-beyin bariyer bozulması arasında Rat Modeli Nörovasküler Therapeutics Hedefli izin ver için

tedavi seçenekleri palyatif kalmıştır ise görülme sıklığı artmıştır olarak beyin metastazı acil karşılanmamış tıbbi ihtiyaç haline gelmiştir. Kanser hücrelerinin intracarotid arteriyel enjeksiyon yoluyla beyin metastazı deneysel hayvan modelleri oluşturma yeni müdahale rejimlerinin hastalığın biyolojisi ve değerlendirilmesi mekanik çalışmaları kolaylaştırır.

Intracarotid Kanser Hücre Enjeksiyon Beyin metastaz Fare modelleri üretmek için

Iskemik inme sonrası yaygın karotis arter (fare) veya eksternal karotis arter (sıçan) yoluyla, enjekte çözeltileri veya süspansiyonlar için uyarlanabilir nöral kök hücreleri teslim etmek için bir yöntem bildirilmiştir. Enjekte edilen hücreler beyin parankim boyunca geniş bir şekilde dağıtılır ve doğumdan sonra 30 d'ye kadar tespit edilebilir.

Nöral Kök Hücrelerin Sıçan ve Fare Beynine İntra-Arteriyel Teslimatı: Serebral İskemiye Uygulama

Beyin metastazı kanser hastalarında ciddi morbidite ve mortalite nedenidir. Çoğu beyin metastazı fare modeli, mortalite ve terapötik müdahale sonuçlarının kafa karıştırıcı analizini karıştıran sistemik metastazlar ile karmaşıktır. Burada, minimal sistemik tümörlerle tutarlı intrakraniyal tümörler üreten kanser hücrelerinin internal karotis enjeksiyonu için bir protokol sunulmaktadır.

Kanser Hücrelerinin İç Karotis Arter Enjeksiyonu ile Beyin Metastazının Modellenmesi

Enjeksiyondan sonra bir fare modelinde intrakarotis arterin onarımı, enjekte edilen materyalin dağılımını olumsuz etkilemeden kan akışını artere geri döndürür. Enjeksiyon bölgesi onarımı, aynı arterden sonraki enjeksiyonları kolaylaştırır ve tam bir Willis Çemberi olmayan fare suşlarında serebral iskemiyi önler.

Fare Modellerinde Tekrarlanan İntrakarotis Enjeksiyonlarının Yeni Bir Enjeksiyon Alanı Onarım Tekniği ile Kolaylaştırılması

Burada, mini inme modelinde akış sitometrik analizi kullanarak iskemik inme sonrası immün hücre fonksiyonunu değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz. Bu yöntem, nöroimmün etkileşimlerin ayrıntılı olarak incelenmesini sağlar ve diğer nörodejeneratif hastalıkları incelemek için uyarlanabilir ve inme patolojisindeki immün yanıtları anlamamızı geliştirir.

Mini İnme Murin Modelinde Nöroimmün Etkileşimlerin İzolasyonu ve Flow Sitometrik Değerlendirmesi

Keşfedin fare mikrocerrahi infüzyon tekniği kullanarak iç karotis arter yoluyla beyine madde teslimatı. Bu yöntem nöron ağ bütünlüğünü korurken yüksek konsantrasyon sağlar ve nörobilim araştırmaları için minimal travma sunar.

CNS içine Hedeflenen Madde Teslimat için Fare Mikrocerrahi İnfüzyon Tekniği yoluyla İç Karotis Arter

Daha fazla video keşfet