Ven interpozisyonu Model: baypas açıklığının Eğitim için uygun bir model
January 15th, 2017
Bu video, sıçanlarda venöz interpozisyon cerrahisi sonrası miyointimal hiperplazi gelişimini incelemek için bir model göstermektedir.
Bu prosedürün genel amacı, bir sıçan ven interpozisyon modelinde baypas greft açıklığını incelemektir. Bu yöntem, baypas tıkanıklığı sırasında biyolojik ve fizyolojik süreçlerin altında yatan yol gibi baypas cerrahisi alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, cerrahi prosedürün kolay ve hızlı olmasıdır, bu da yeni terapötikler ve yollar in vivo olarak çalışmak için kullanılabilir.
Tekniği göstermek, laboratuvarımızdan bir mikro cerrah olan Grigol Tediashvili olacak. Ameliyattan önce, farenin arka ayaklarını sıkıştırarak ve refleks olmadığını doğrulayarak yeterli anestezi derinliğini kontrol edin. Ardından, anestezi altındayken kuruluğu önlemek için gözlere biraz veteriner merhemi sürün.
Ardından, arka ayakları açın ve pozisyonlarını bant kullanarak sabitleyin. Daha sonra kasık kıllarını bir saç düzeltici ile tıraş edin, ardından povidon-iyot ve ardından %80 alkol kullanarak bölgeyi geniş çapta dezenfekte edin. Bu alternatif fırçalamaları toplam üç kez tekrarlayın.
Şimdi bir mikroskop altında, linea inguinalis boyunca dikey bir kesi yapın. Daha sonra, deri altı dokuları nazikçe ayırmak için iki forseps kullanın ve yüzeysel epigastrik veni femoral ven üzerindeki kökenine kadar ortaya çıkarın. Damar kırılgan olduğu için bunu çok dikkatli bir şekilde yapın.
Daha sonra, iki kelepçe kullanarak yüzeysel epigastrik ven boyunca kan akışını durdurun. Şimdi, damarın bir bölümünü hasat edin. İzole edilmiş damarı dikkatlice kaldırın ve mikro makas kullanarak damarı kesin.
Daha sonra damar segmentini steril gazlı bez üzerine yerleştirin. Orada, 30 gauge bir iğneyi dikkatlice bir ucuna kaydırın ve damarı heparinle yıkayın. Daha sonra damarı %1 lidokaine aktarın ve spazmları önlemek için buz üzerinde tutun.
Şimdi, anesteziyi% 5 izoflurana yükselterek donör fareye ötenazi yapın. Daha sonra, anastamozlara hazırlık olarak, alıcı fareyi, donör fareyle aynı şekilde tıraş adımına kadar hazırlayın. İki ila üç dakika% 5 izoflurandan sonra, donör farenin karnını linea alba boyunca açın, diyaframı kesin ve dolaşımı durdurmak için kalbi çıkarın.
Alıcı fareyi ameliyat için hazırlamaya devam edin. Bacakların medial tarafını bir saç düzeltici ile tıraş edin ve cildi üç alternatif povidon-iyot ve% 80 etanol fırçası ile dezenfekte edin. Daha fazla ilerlemeden önce, anesteziyi izlemek için başka bir ayak parmağını sıkıştırın.
Şimdi, dizden kasık kıvrımına kadar medyan bir femoral insizyon yapın. Mikroskop altında, femoral arteri çevresinden ayırmak için iki forseps kullanın. Ardından, kan akışını durdurmak için iki mikro kelepçe kullanın ve önce proksimal kelepçeyi yerleştirin.
Daha sonra, klemplenmiş femoral arterin kısa bir bölümünü kesin ve atın. Damar greftinden bir ila iki milimetre daha büyük bir boşluk bırakmak için kalan arteriyel kütüğü kısaltın. Ardından, arteriyel kütüğü 30 gauge bir iğneden heparin ile yıkayın.
Eğer adventitia damar kütüğünün biraz dışına taşarsa, adventitia'yı damarın ucundan hafifçe çekmek için forseps kullanın ve ardından bir parça adventitia'yı çıkarın. Şimdi, hasat edilen damar segmentini arteriyel kütükler arasına doğru yönde yerleştirin ve iyi bir uyum için boşluk boyutunu ayarlayın. Şimdi, önce 10-0 prolen sütür kullanarak proksimal anastomozu gerçekleştirin.
Her bir yan tarafa dikiş atmakla başlayın, ardından ventral tarafa üç dikiş daha ekleyin. Sırt tarafında üç dikişle bitirin. Daha sonra, aynı tekniği kullanarak distal damarları bağlayın, her iki yan tarafta bir sütür ile başlayın, ardından ventral tarafta üç sütür ile devam edin ve daha sonra dorsal tarafta bitirin.
Anastomozları tamamladıktan sonra, fibrin tutkal bileşenleri ile iki adet bir mililitrelik şırınga yükleyin. Daha sonra grefti forseps ile dikkatlice kaldırın ve greftin altına yaklaşık 100 mikrolitre birinci bileşen, ardından 100 mikrolitre ikinci bileşen uygulayın. İki bileşen her zaman aynı birimlere eklenmelidir.
Şimdi, grefti tekrar yerine yerleştirin ve grefti ve anastomozu tamamen kaplamak için greftin üzerine her bileşenden 100 mikrolitre uygulayın. Bu, anastomoz yetmezliğini ve ven greftinin aşırı şişkinliğini önler. Şimdi, distal klempten başlayarak kelepçeleri dikkatlice açın.
Ardından, nakledilen damarda ve greftin distal arterinde görünür bir nabız olup olmadığını kontrol ederek başarılı bir ameliyatı onaylayın. Cildi kapatmadan önce, kapanmayı engelleyebilecek fazla yapıştırıcıyı çıkarın. Daha sonra 5-0 prolene dikişler kullanarak cilt katmanlarını kapatın.
Sıçan uyanmadan önce, deri altına kilogram başına dört ila beş miligram carprofen enjekte edin. Sternal yaslanmayı sürdürmek için yeterli bilinci yeniden kazanana kadar hayvana göz kulak olun. Ardından, fareye başka hayvanlar olmadan bir ev kafesi verin.
Önümüzdeki üç gün boyunca, içme suyunda metamizol sağlayın ve farenin iyileşmesini günlük olarak kontrol edin. Tamamen iyileştikten sonra, sıçan diğer sıçanlarla birlikte barındırılabilir. Hayvanlar ameliyattan sonra iyi bir şekilde iyileşir ve ameliyat sonrası mükemmel fiziksel durum gösterir.
Transplantasyon sonrası venin femoral artere başarılı bir şekilde entegrasyonu ve greft açıklığı dupleks sonografi kullanılarak noninvaziv olarak doğrulandı. Ilık pozitif bir sıçanın damarını ılık negatif bir sıçana naklederek, greftin varlığını izlemek için biyolüminesans görüntüleme kullanıldı. Miyointimal hiperplazinin greftte zamanla ilerleyici olarak geliştiği bulunmuştur.
Masson trikrom ile histolojik boyama, iç elastik lamina içinde miyointimal oluşumu gösterir. Modelin miyointimal hiperplazinin dinamiklerini yeniden ürettiğini doğrulamak için luminal obliterasyon ölçüldü. Ameliyattan yedi gün ila 28 gün sonra kademeli bir greft açıklığı kaybı kaydedildi, bu da modele güzel bir şekilde uyuyor.
Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa 20 dakika içinde yapılabilir. İzlediğiniz için teşekkür ederiz ve deneylerinizde iyi şanslar.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Genel Bakış
Bu video, sıçanlarda venöz interpozisyon cerrahisinden sonra miyointimal hiperplazinin gelişimini incelemek için bir modeli göstermektedir. Prosedür, bypass graft açıklığı ve bypass tıkanması sırasında yer alan biyolojik süreçleri araştırmayı amaçlamaktadır.
Çalışmanın Temel Bileşenleri
Bilim Alanı
- Nörobilim
- Vasküler Biyoloji
- Cerrahi Teknikler
Arka Plan
- Miyointimal hiperplazi, damar cerrahisinde önemli bir endişedir.
- Bypass graft açıklığını anlamak, cerrahi sonuçları iyileştirmek için kritik öneme sahiptir.
- Sıçan ven interpozisyon modeli bu süreçler hakkında bilgiler sağlar.
- Bu teknik, yeni tedavilerin in vivo olarak çalışılmasını sağlar.
Çalışmanın Amacı
- Miyointimal hiperplazinin gelişimini araştırmak.
- Kontrollü bir modelde bypass graftlarının açıklığını değerlendirmek.
- Bypass tıkanması sırasında biyolojik ve fizyolojik tepkileri keşfetmek.
Kullanılan Yöntemler
- Cerrahi prosedürler için sıçan ven interpozisyon modeli.
- Cerrahiden önce anestezi derinliğinin değerlendirilmesi.
- Anestezi sırasında göz kuruluğunu önlemek için veteriner merhem uygulaması.
- Eğitimli bir mikro-cerrah tarafından cerrahi tekniklerin gösterimi.
Ana Sonuçlar
- Miyointimal hiperplazi çalışması için başarılı bir modelin kurulması.
- Cerrahi prosedürün verimliliği ve kolaylığının gösterimi.
- Bypass tıkanması sırasındaki biyolojik süreçlere ilişkin bilgiler.
- Gelecekteki yeni tedaviler üzerinde yapılacak çalışmalar için potansiyel.
Sonuçlar
- Sıçan ven interpozisyon modeli, vasküler tepkileri incelemek için etkilidir.
- Bu teknik, bypass cerrahisinde araştırmayı kolaylaştırabilir.
- Bulgular üzerinde yapılacak daha ileri çalışmalar, cerrahi sonuçları iyileştirmek için kullanılabilir.
Sıkça Sorulan Sorular
Executive Industry Relevance
This rat vein interposition model provides a cost-effective and scalable system to study bypass graft patency loss, a critical challenge in vascular therapeutics development. By enabling longitudinal assessment of myointimal hyperplasia—the primary cause of graft failure—it supports mechanistic de-risking of novel interventions targeting vascular remodeling pathways. The model’s compatibility with duplex sonography and histological analysis allows for quantitative, translatable readouts that inform go/no-go decisions in preclinical pipelines.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of therapeutic hypotheses related to vascular injury response and neointima formation mechanisms.
- Operational Value: Facilitates biological de-risking of targets through reproducible induction of graft patency loss in a disease-relevant system.
- Predictive Value: Supports target confidence by modeling progressive luminal obliteration over time, aligning with clinical timelines of restenosis.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Prepares validated venous grafts for compound testing by establishing a consistent baseline of patency loss progression.
- Operational Value: Delivers quantitative duplex sonography outputs and histological metrics suitable for assay standardization and inter-laboratory reproducibility.
- Scalability: Permits sufficient tissue yield for multimodal analysis, supporting medium-throughput screening of pharmacological or genetic modifiers.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Recapitulates human-like myointimal hyperplasia dynamics, enhancing translational biomarker relevance for vascular proliferation pathways.
- Operational Value: Bridges discovery and preclinical stages by providing a continuous readout of graft integrity from acute surgery to chronic failure.
- Risk Mitigation: Informs preclinical advancement decisions by quantifying time-dependent patency loss, reducing failure risk in later-stage vascular device or drug evaluation.
Pipeline & Workflow Integration
The model fits within the discovery-to-preclinical continuum, particularly for vascular biology programs focused on restenosis, graft failure, or anti-proliferative therapies.
- Discovery Biology: Supports pathway clarification and target validation by enabling controlled study of smooth muscle cell proliferation and extracellular matrix deposition in venous grafts.
- Screening: Provides assay-ready grafts with measurable patency endpoints via duplex sonography, allowing reliable compound effect assessment.
- Analytics: Generates quantitative luminal area measurements and histological scoring that help compare therapeutic conditions and mechanism of action.
- Translational Research: Aligns with preclinical validation by modeling progressive graft failure observed in clinical saphenous vein bypass grafts.
- Enterprise Reuse: Represents a reusable vascular surgery platform adaptable to multiple therapeutic modalities, including siRNA, small molecules, or tissue-engineered grafts.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Delivers predictive confidence in target validation by modeling a clinically relevant mechanism of graft failure.
- Operational Value: Ensures standardization and reproducibility through defined surgical steps, anesthesia protocols, and non-invasive imaging validation.
- Strategic Value: Improves capital efficiency by enabling early go/no-go decisions based on quantifiable patency outcomes, reducing late-stage attrition.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of vascular programs by providing mechanistic insight into neointima formation modifiers.
Implementation Considerations
- Requires microsurgical expertise and access to stereomicroscopes, micro-instruments, and vascular sutures.
- Dependent on duplex sonography equipment for longitudinal patency monitoring and histological processing infrastructure for endpoint analysis.
- Necessitates cross-team standardization between surgery, imaging, and histology teams to ensure consistent data collection.
- Adaptation to other rodent models or vascular beds may require technical adjustments due to vessel size and hemodynamic differences.
- Practical limitations include the need for aseptic technique, postoperative analgesia protocols, and controlled housing to minimize confounding variables in recovery and graft assessment.
