Name: Kol tekniği aort transplantasyonu - eğitici bir Video bir fare Model kullanma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 55 s
Description: Öğrenin fare modelinde kol tekniği ile ortotopik aort transplantasyonunu. Bu hızlı anastomoz yöntemi, vasküler hastalıkların araştırılmasında genetik olarak modifiye edilmiş farelerde kullanılabilir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Roma Wieczorek ve onların mükemmel düzenleme yardım için Peter Kurdybacha ve Leon Decker ve Uli Heuter onların mükemmel teknik destek için teşekkür etmek istiyorum.

hayvan konular içeren yordamlar onaylanan kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) tarafından RWTH Aachen Üniversitesi, AZ 84-02.04.2012.A234.
 Not: yordamı farelerde yetişkin erkek yaban tip CD1 arka plan ile kullanma uygulaması gösterilmiştir. Fareler önce ve yemek, özel veteriner kontrol ve tedavi için uygun erişimi temin ameliyattan sonra bir özel laboratuvar biriminde tutmak. Hayvanlar üzerinden aldıysanız dışında bir haftalık iklimlendirme ameliyat gerçekleştirmeden önce izin.
 1. donör hazırlanması <ol><li>steril malzeme ve aletleri steril koşullar enfeksiyonları önlemek için ameliyat sırasında korumak için kullanın.</li>
	<li>Her fare % 1.5 karışımı ile birim isoflurane ve % 100 oksijen bir yüz maskesi ile anestezi. Fare sırtüstü pozisyon ve teyp bir platformda ayakları için ameliyat masasına yattı. Onun refleksleri fare yeterince anestezi emin olmak için arka ayaklarına pinching tarafından kontrol edin. İşlem sırasında kurutma önlemek için göze oftalmik merhem yerleştirin.</li>
	<li>Tüm saç depilatory bir jel kullanarak karından kaldırın veya bir tıraş makinesi kullanın. Steril koşullarda işlemini gerçekleştirin. Scrubs klorheksidin ve steril su alternatif ile karın dezenfekte.</li>
	<li>Makas veya neşter ile donör aort Ensizyon karın üzerinden kaldırın. Bağırsak el ile sağa doğru çekin. Hafifçe el ile bağırsak üzerinde toz ücretsiz eldiven kullanarak yan yansıtır.
	<ol><li>Bağırsak nemli tutmak için serum ıslak gazlı bez bir parça yerleştirin.</li>
		<li>Uzağa--dan çok dikkatli bir künt diseksiyon cımbızla kullanarak çevreleyen doku abdominal aort teşrih.</li>
		<li>Renal arterler ve onun çatallanma vena kava üzerinden arasında aorta segment cımbızla ayırın.</li>
		<li>Bu segmentte çok dikkatli bir şekilde 11-0 monofilament tek dikiş kullanarak tüm küçük dalları güvenli.</li>
		<li>Aort kaldırmadan önce 0.5 ml (mL) tuzlu çözüm inferior vena kava 50 U heparin içeren enjekte.</li>
		<li>Aorta segment kaldırıldıktan sonra exsanguinate donör hayvanın izin.</li>
		<li>Dokuları tam olarak serum fizyolojik ile durulayın ve buz gibi Salin bir kaba hemen transfer.</li>
	</ol></li></ol> 2. Alıcının hazırlanması <ol><li>% 1.5 karışımı ile alıcı hayvan birimi isoflurane ve % 100 oksijen bir yüz maskesi ile anestezi sonra saç kaldırmak ve (Bölüm 1) dezenfekte. Bir neşter ile leğen kemiği için xiphoid gelen bir orta hat kesi yapmak ve karın duvarları geri çek. Gözlerde kuruluk işlem sırasında önlemek için oftalmik merhem yerleştirin.</li>
	<li>Tuzlu çözüm bağırsaklarında ıslatılmış gazlı bez ve çok yavaşça yerinden hayvan için şal &#39; yolunda.</li>
	<li>İnfrarenal aortada ücretsiz renal arterler arasında proksimale teşrih ve cımbız ile klemple çatallanma.</li>
	<li>Bu segmentte çok dikkatli bir şekilde 11-0 monofilament tek dikiş kullanarak tüm küçük dalları güvenli.</li>
	<li>6-0 tek ipek dikiş ile aort proksimal ve distal kısımları kelepçe.</li>
	<li>Kelepçeler arasında orta aort bölmek ve Lümen açık temizlemek için heparinized serum fizyolojik ile kesme biter sulamak.</li>
	<li>Greft aort herhangi bir burulma düzgün donör ve alıcı (yerleştirerek önlemek için dikkat çekici 11-0 monofilament ile dikiş tarafından takip alan gemi eklenen besleme gemi ucuyla orthotopic bulunduğu yer şekil 1) 10.</li> <li>dikkatle bitişik harfler bir izlenebilirliği anastomoz yürütülmesi sonra serbest bırakmak. Distal klempi piyasaya çıkış tarihi. Alçak basınç birlikte proksimal yüksek basınç yan bırakmadan önce duvarlar tutan bu sonuç.</li>
	<li>Greft hemen sıvı ve görünür nabzını kontrol edin. Yavaşça ipek kalıntıları çıkarmak. 1-2 mm en iyi örtüşme uzunluğudur donör ve alıcı aort arasında.</li>
	<li>Karın karın boşluğu döndürmek ve bütün kapatmak ile çalışan 3-0 Poliglikolik asit dikiş yarası.</li>
	<li>Fare buprenorfin vermek (0,05 mg/kg vücut ağırlığı subkutan (SC)) anestezi sonlandırmadan önce.</li>
	<li>Bir hayvan, tamamen bilinçli kadar sahipsiz bırakmayın. Ağrı yönetmek terapi buprenophine 0,05 mg/kg vücut ağırlığı ile yönetilen SC ameliyat sonrası üç gün boyunca günde üç kere Kurumsal Gözetim vücut tarafından onaylanmış.</li>
	Yukarıda açıklanan <li>hasat, doku anestezi için olarak alıcı fareler ve floş gemi fosfat tamponlu tuz çözeltisi (PBS) ile % 4 formaldehit/PBS tarafından takip (pH 7.4 =) kardiyak ponksiyon tarafından. Greftler yavaşça çıkarın. %4 formaldehit/PBS gecede fiksasyonu sonra işlem örnekleri daha fazla ve parafin içinde embed.</li>
</ol>

<ol><li>Rowinska, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-+invasive+in+vivo+analysis+of+a+murine+aortic+graft+using+high+resolution+ultrasound+microimaging%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Radiol%22%5BJournal%5D)">Non- invasive in vivo analysis of a murine aortic graft using high resolution ultrasound microimaging.</a> Eur J Radiol. 81 (2), 244-249 (2012).</li>
<li>Daugherty, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Mouse models of atherosclerosis.</a> Am J Med Sci. 323 (1), 3-10 (2002).</li>
<li>Xu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+arteriosclerosis%3A+from+arterial+injuries+to+vascular+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Mouse models of arteriosclerosis: from arterial injuries to vascular grafts.</a> Am J Pathol. 165 (1), 1-10 (2004).</li>
<li>Daugherty, A., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+abdominal+aortic+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+.Biol%22%5BJournal%5D)">Mouse models of abdominal aortic aneurysms.</a> Arterioscler Thromb Vasc .Biol. 24 (3), 429-434 (2004).</li>
<li>Zernecke, A., Shagdarsuren, E., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemokines+in+atherosclerosis%3A+an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Chemokines in atherosclerosis: an update.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28 (11), 1897-1908 (2008).</li>
<li>Chereshnev, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+heterotopic+aortic+arch+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse model of heterotopic aortic arch transplantation.</a> J Surg Res. 111 (2), 171-176 (2003).</li>
<li>Koulack, J., McAlister, V. C., Giacomantonio, C. A., Bitter-Suermann, H., MacDonald, A. S., Lee, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+mouse+aortic+transplant+model+of+chronic+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Development of a mouse aortic transplant model of chronic rejection.</a> Microsurgery. 16 (2), 110-113 (1995).</li>
<li>Engelbrecht, G., Kahn, D., Duminy, F., Hickman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+rapid+technique+for+renal+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">New rapid technique for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 13 (6), 340-344 (1992).</li>
<li>Baxter, K., Hao, P. M., Howden, B. O., Saunder, A., Jablonski, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+technique+of+abdominal+heart+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Modified technique of abdominal heart transplantation in the rat.</a> J Heart Lung Transplant. 17 (11), 1057-1064 (1998).</li>
<li>Dambrin, C., Calise, D., Pieraggi, M. T., Thiers, J. C., Thomsen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+aortic+transplantation+in+mice%3A+a+new+model+of+allograft+arteriosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Orthotopic aortic transplantation in mice: a new model of allograft arteriosclerosis.</a> J Heart Lung Transplant. 18 (10), 946-951 (1999).</li>
<li>Siemionow, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathology+of+microarterial+anastomoses%3A+end-to-end+versus+end-in-end+%28sleeve%29+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hand+Surg+Am%22%5BJournal%5D)">Histopathology of microarterial anastomoses: end-to-end versus end-in-end (sleeve) technique.</a> J Hand Surg Am. 15, 619-625 (1990).</li>
<li>Charo, I. F., Ransohoff, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+many+roles+of+chemokines+and+chemokine+receptors+in+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">The many roles of chemokines and chemokine receptors in inflammation.</a> N Engl J Med. 354 (6), 610-621 (2006).</li>
<li>Sun, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+surgical+technique+for+the+establishment+of+a+murine+model+of+aortic+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation.</a> Microsurgery. 18 (6), 368-371 (1998).</li>
<li>Guo, L., Agarwal, A., George, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+aortic+transplantation+in+mice+for+the+study+of+vascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Orthotopic aortic transplantation in mice for the study of vascular disease.</a> J Vis Exp. (69), e4338(2012).</li>
</ol>

Yazarlar onlar rakip hiçbir mali çıkarları var bildirin.

Bu çalışmada önce çeşitli diğer nakli modelleri farelerde iyice analiz3,6,7,10,13,14vardı. O bizim ölçütleriyle eşleşen ve kol anastomoz geleneksel uçtan uca dikiş yöntemleri ile karşılaştırıldığında yüksek bir güvenilirlik gösterdi aort nakli Dambrin vd tarafından değişiklikleri ile kol tekniği kullanarak model seçildi 1 , 10.
Bu önemli ölçüde azaltılmış çapraz klemp süresi ameliyat sırasında aorta zarar en aza ile birçok yönden olumlu bir tekniktir. Tromboz sıklığı düşük gemi kalibre donör ve alıcı arasında bir potansiyel uyumsuzluk kaçınarak ek olarak gözlendi. Yukarıdaki gözlemleri bu teknik son derece aort nakli farelerde vasküler hastalığı araştırma için uygun olun.
Bir takip çalışması bir ultrason nakli sonra 8 hafta gerçekleştirildiği, herhangi bir önemli değişiklik algılanmadı. Bu varsayımlar aort cerrahisi sırasında herhangi bir hasar en az1olacağını doğruladı.
Bu makalede sunulan aşılama yordam hiçbir bozulma greft bütünlüğü ve işlevi hem de güvence altına alır. Bu nedenle, bu deneysel nakli model dejeneratif damar hastalığı genetik farelerde gelecekteki moleküler ve farmakolojik araştırmalar için değerli bir araç olarak hizmet söylenebilir.
İnanıyoruz video rehber bu basit arterio-arter modeli kullanımını gösteren malzeme öğretim olarak işlev görebilir ve daha verimli tartışma vasküler patolojiler birçok önemli konularda katkıda bulunacaktır. Bu çok hızlı anastomoz yöntem genetiği farelerde damar hastalıkları eğitim için kullanılabilir. Bir değişiklik ile ekimi kombine anevrizma modeli olarak da kullanılabilir.
İşlem sırasında kritik noktaları vardır. Dikiş yerleştirilmesi en önemli adım olduğunu. Cerrah tarafından donör ve alıcı doğru hizalaması herhangi bir burulma aort önlemek için dikkat çekmek vardır. Kelepçeler dikkatle anastomoz muayene sonra kaldırılır. Distal klempi her zaman ilk alçak basınç duvarlar birlikte önce proksimal yüksek basınç yan yayın holding sonuçlanan piyasaya sürülmelidir. Düzgün bir şekilde yayın dizisi takip sonucu kanasın.

Bir önceki çalışmada belirttiği gibi büyük ilgi belirli vasküler yanıt greft tarafından neden olduğu ve arteriogenic çevre ile bağlı bazı sistemik faktörler arasında ayrımcılık sağlayan fare aort nakli modelleri için ödenen 1 , 2 , 3. eleme ve transgenik fareler durumu önemli bir rol oynar en büyük etken olduğunu. Böyle bir model onların katılımı belirlenmesi ve ateroskleroz ve anevrizma oluşumu4, gibi dejeneratif damar hastalığı gelişimi ile ilişkili yeni patofizyolojik yolları belirleme imkanı sunuyor 5.
Bu bir iç iskemi/reperfüzyon aşılama sırasında yaralanma nakli için amaçlanan damarları görünebilir dikkati çekiyor. Bu nedenle, greft bütünlüğü veya ameliyat sonrası dönemde beklenmeyen bir enflamatuar reaksiyon ile belirli sorunları oluşumunu muhtemelen dejeneratif vasküler hastalıklar3 patofizyolojik değişiklikler iyileştirmelerden dışarıda bırakılamaz ,4,5,6,7. Kol anastomoz damarları arter anastomoz az bir milimetre çapında için alternatif sıra içinde yöntemidir ve başarılı bir şekilde daha sonra adapte böbrek ve kalp nakli Sıçanlarda aort için uygulanmıştır Dambrin ve ark. tarafından farelerde nakli 8 , 9 , 10 , 11.
Aort hasar kol nakli tekniği kullanılarak bu ortalama sadece 20 dakika süren nedeniyle bir çok düşük teknik başarısızlık oranı ile en aza indirgemek. Önceki sonuçlarımız kol tekniği1kullanarak nakli sonra bir isograft vivo içinde mükemmel fonksiyonel ve yapısal özelliklerini gösterdi. Dambrin ve ark. tarif bu kısa bir öğrenme eğrisi başarı oranı % 78'i şey bitti sonra10. Örneğin8sıçan böbrek nakli kol teknikle trombozu Engelbrecht vd gözlemlemek değil tromboz gibi komplikasyonlar nadirdir.
Fare aort nakli modeli ile kol anastomoses ISO/homogreft reaksiyonlar transplante gemi içinde çalışmak için hızlı ve kolay bir araçtır. Bu video bizim laboratuvarda yapılan aort nakli yordamı gösterir. Bu nakli model vasküler hastalık altta yatan patolojik mekanizmaları tanımlamada yararlı olabilir ve moleküler ve farmakolojik müdahaleler12daha fazla değerlendirilmesi için katkıda bulunabilir.

<table><tbody><tr><td>Halsey İğne Tutucu</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>12001-13</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Forseps -</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11254-20</td><td></td></tr><tr><td>Lexer-Bebek Makası</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>14079-10</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Mikro İğne Tutucu</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>12060-01</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Makas</td><td>Aesculap, Almanya</td><td>Typ OC498R</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Sütür Forseps</td><td>Geuder, Almanya</td><td>19015</td><td></td></tr><tr><td>6-0 ipek siyah (İpek)</td><td>Deknatel, Research Triangle Park NC, ABD</td><td>18020-60- FST</td><td></td></tr><tr><td>11-0 monofilament (Ethilon)</td><td>Ethicon, Norderstedt, Almanya</td><td>EH7438G</td><td></td></tr><tr><td>3-0 poliglikolik asit sütür (Serafit)</td><td>Serag-Wiessner, Naila, Almanya</td><td>60203214</td><td></td></tr><tr><td>İzofloran</td><td>Herhangi bir genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Herhangi bir genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>%0.9 salin</td><td>Herhangi bir genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td>Herhangi bir genericon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bepanthene göz ve burun kremi</td><td>Bayer, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscop</td><td>Zeiss</td><td>Opmi MDO/S5</td><td></td></tr><tr><td>Vaporizatör</td><td>Eickemeyer</td><td>TEC3</td><td></td></tr><tr><td>Ultrason</td><td>Vevo, Kanada</td><td>770,2100</td><td></td></tr></tbody></table>

kol tekniği aort transplantasyonu - eğitici bir video bir fare model kullanma

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Orthotopic aort nakli kol tekniği kullanarak yaralanma ile başarısızlık oranı sadece % 10-20 aortaya azaltır. Kısa ve kolay çalışmalar ISO/allo greft izin 20 dk ortalama kol yöntemini kullanan farelerde aort anastomose vakti gelmişti. Aşağıdaki makalede, bizim Laboratuvarda kullanılan aort nakli yordam. Fareler % 1.5 birim isoflurane ve yüz maskesi ile % 100 oksijen karışımı ile anestezi. Bu noktada, renal arter ve onun çatallanma arasında aorta segment vena kava, serbestçe hazırlanan ve clampedat ayrılmış olan tek ipek dikiş proksimal ve distal kesimi. Aort kaldırma önce heparin içeren bir serum fizyolojik çözüm inferior vena kava enjekte ettiler. Sonra aort kelepçeler arasında kesildi ve serum fizyolojik heparin çözüm Lümen temizlemek için kullanılmıştır. Monofilament dikiş kol teknikle abdominal aort orthotopic pozisyonda nakli için kullanıldı.

Yükseltilmiş bir tromboz riski olsa anestezi gözlenen hiçbir fiziksel bozulma ile 15-30 dakika içinde fareler kurtarıldı. Ultrason analiz Postoperatif takip sırasında kullanıldı. Çalışmada kullanılan yaban tipi fareler hiçbir değişiklik onların Lümen boyutta sergiledi. Buna göre ne stenoses ne de aneurysmal oluşumları gözlenmiştir. Organ nakli hayvanlar plak geliştirme (Şekil 2) damar duvarlarının sergilemek başarısız oldu.
İmmunohistology gibi geleneksel boyama prosedürler plak, desen düz kas hücreleri ve makrofajlar birikimi belirlemek için kullanılabilir. Histolojik çalışma ve immunohistokimyasal boyama greft bütünlüğünü sınamak için aşılama sonra 6 hafta gerçekleştirilen. Histolojik boyama (Hematoksilen ve Eozin (o) ve immunohistokimyasal (düz kas aktin (SMA) ve makrofaj (MAC2)) boyama (şekil 3) bize gösterdi değişmeden düz kas hücreleri, sağlam endotel hücre astar ve Hayır dağıtım şekilleri intima hücrelerde birikimi. Bu bulgular Hayır önemli lezyon veya hücre harekete geçirmek aşılı gemiler (şekil 3) algılandığını göstermektedir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig1.jpg"> 
Resim 1 : Kollu tekniği. Abdominal aort kol tekniği kullanarak nakli. Bu yordamda bulaşan aort yüzeysel ısırıkları besleme gemi mevcut ile orthotopic pozisyonda yerleştirilmişti. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54915/54915fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig2.jpg"> 
Resim 2 : İntraoperatif ve ultrason resimleri. İntraoperatif (nekropsi) görünümü greft 6 hafta sonra nakli(a), üç boyutlu ultrason (B) ve B-modu görünümü (C) örnekleri. Ameliyat sonrası takip ultrason kullanılarak yapılmıştır. Resimleri herhangi bir değişiklik ile greft açıklık Lümen boyutlu olarak göster. Ayrıca, hiçbir stenoses veya aneurysmal oluşumları gözlenmiştir. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54915/54915fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54915/54915fig3.jpg"> 
Şekil 3 : Histolojik ve immünhistokimya görüntüler. 6 hafta sonra nakli transplante hayvanların histolojik ve immünhistokimya temsilcisi görüntüler. Önemli lezyon yok içinde transplante aortas Histoloji tarafından tespit edilmiştir (Hematoksilen ve Eozin, o, 100 X büyütme, ölçek çubuğu = 50 µm), (düz kas aktin SMA (kırmızı) veya makrofaj MAC2 (yeşil), 200 X büyütme, ölçek çubuğu = boyama immunohistokimyasal 25 µm). Çekirdeklerin DAPI tarafından (mavi) karşı lekeli. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54915/54915fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Biz farelerde kol tekniği kullanarak bir orthotopic aort nakli modeli mevcut. Bu damar hastalığı çalışmalarda istihdam bir çok hızlı anastomoz yöntemdir.

Kol tekniği aort transplantasyonu - eğitici bir Video bir fare Model kullanma

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

Bu işlemde vericinin aortu ortopedik pozisyonda yerleştirilir ve beslenme kabına yüzeysel ısırıklar alınır. Fareleri bir yüz maskesi ile hacimce yüzde 1.5 izofluran ve% 100 oksijen karışımı ile uyuşturun. Fareyi sırtüstü pozisyonda bir platforma yatırın ve tüm bacakları ameliyat masasına bantlayın.İşlem sırasında kuruluğu önlemek için gözlere oftalmik merhem sürün. Farenin yeterince uyuşturulduğundan emin olmak için arka ayakları sıkıştırarak refleksleri kontrol edin. Karnındaki tüm tüyleri alın.Tüy dökücü bir krem uygulayın veya tıraş makinesi kullanın. İşlemi steril koşullar altında gerçekleştirin. Karın dezenfekte edin.Donör aortu çıkarmak için, orta hatta abdominal bir kesi yapın ve bağırsağı manuel olarak sağa doğru geri çekin. Pudrasız eldivenler kullanarak bağırsakları nazikçe manuel olarak yana doğru yansıtın. Bağırsakları nemli tutmak için tuzlu suyla ıslatılmış bir gazlı bez parçasına yerleştirin.Cımbızla künt diseksiyon kullanarak abdominal aortu çevreleyen dokudan çok dikkatli bir şekilde inceleyin. Aortun renal arter arasındaki segmentini ve vena kavadan bifurkasyonu cımbızla inceleyin. Bu segmentin tüm küçük dallarını 11-0 monofilament tek sütür kullanarak sabitleyin.Aortu çıkarmadan önce, 50 ünite heparin içeren 0.5 mililitre salin solüsyonunu inferior vena kavaya enjekte edin. Aort segmenti çıkarılmadan önce donör hayvanın kan kaybına uğramasına izin verin. Grefti tuzlu su ile tamamen durulayın ve hemen ardından buz gibi soğuk bir tuzlu su kabına koyun.Alıcıyı hazırlamak için, hayvanı bir yüz maskesi ile uyuşturun, saçları çıkarın ve yukarıdaki gibi dezenfekte edin ve bir neşter ile ksifoidden pelvise orta hat kesisi yapın. Karın duvarlarını ekartörlerle geri çekin. Bağırsakları tuzlu su çözeltisiyle nemlendirilmiş gazlı beze sarın ve çok nazikçe hayvanın sağına doğru yerleştirin.Cımbız ile renal arterler arasında proksimalde ve distal olarak bifurkasyon arasında infrarenal aortu serbest olarak inceleyin. Bu segmentin tüm küçük dallarını 11-0 monofilament tek sütür kullanarak sabitleyin. Aortun proksimal ve distal kısımlarını 6-0 tek ipek sütür ile klempleyin.Ortadaki aortu kelepçeler arasında bölün ve lümeni açmak için kesilen uçları heparinize tuzlu su ile sulayın. Grefti ortopedik pozisyonda yerleştirin. Anastomozu 11-0 monofilament kullanan dikişlerle sleeve tekniğini kullanarak gerçekleştirin.Bu yöntemle, besleme kabının ucu alıcı kabın içine yerleştirilir. Kızılötesi alıcı aortun ucunu donör aortun proksimal ucuna yerleştirin. Distal anastomozu da aynı şekilde gerçekleştirin.Donör aortun distal ucunu, alıcı aortun distal ucuna yerleştirin. Donör ve alıcı aortun mükemmel hizalanmasını sağlayarak aortta herhangi bir torsiyondan kaçınmaya dikkat edin. Kelepçenin serbest bırakılma anı, prosedürün çok önemli bir adımıdır ve çok dikkatli bir şekilde gerçekleştirilmelidir.Anastomozun düzenli olduğunu kontrol ettikten sonra kelepçeleri serbest bırakın. Önce distal klempi nazikçe serbest bırakın, ardından proksimal klempi açın. Bu şekilde, yüksek basınç tarafı serbest bırakılmadan önce duvarları bir arada tutmak için düşük basınç vardır.Greft hemen perfüze edilir ve bir nabız görülebilir. İpeğin kalıntılarını nazikçe çıkarın. Karın içeriğini karın boşluğuna geri koyun ve çalışan bir 3-0 poliglikolik asit sütür kullanarak yarayı kapatın.Anesteziyi sonlandırmadan önce fareye kilogram başına 0.05 miligram buprenorfin uygulayın. Transplantasyondan altı hafta sonra greftin nekropsi resimlerinin örneklerini ve ultrason üç boyutlu ve B-mod görünümünü sunuyoruz. Resimler greftin açıklığını göstermektedir.Greftin gösterdiği lümen boyutlarında herhangi bir değişiklik olmaz. Ayrıca herhangi bir darlık ya da anevrizmal oluşum bulamadık. Transplante edilen aortlarda histolojik ve immünohistokimyasal boyama ile anlamlı lezyon gözlenmedi.Çekirdekler DAPI ile karşı boyandı. Sonuç olarak, bu çok hızlı anastomoz yöntemi, genetik olarak tasarlanmış farelerde vasküler hastalıkları incelemek için kullanılabilir.

using-sleeve-technique-mouse-model-aortic-transplantation-an

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bir fare abdominal aort bir bölüm sadece bir allojenik veya sinjenik alıcı olarak renal arterler aşağıda orthotopically transplante edildiği bir yöntem açıklanmaktadır. Bu teknik, birörnek büyük arter nakli avantajlı olarak kabul edilir olan çalışmalarda yararlı olabilir.

Damar Hastalığı Çalışmaları Farelerde Ortotopik Aort Nakli

Biz fare greft arteriosclerois (GA) aynı doğuştan gerginlik bir alıcıya bir fare damar segmentinin interpozisyonu içeren modeller için protokolleri tarif. Damar donör içine ek genetik değişiklikler geri melezlenmesine tarafından, model GA belirli genlerin etkisini değerlendirebilir.

Greft damar sertliği için fare modelleri

Sıçangil modeli servikal kalp nakli immünolojik hem de iskemi reperfüzyon yaralanması çalışmasından için uygundur. Biz olmayan bir dikiş manşet tekniği kullanılarak prosedür değiştirilmiş ve bu yaklaşım ile 1.000 'den fazla başarılı nakli gerçekleştirildi.  Burada, videoyu tamamlamak için bu tekniğin ek ayrıntıları.

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

El yazması fare heterotopik kalp nakli gerçekleştirmek için gereken adımları açıklar.

Mürin Heterotopik Kalp Nakli Tekniği

Farelerde aort interpozisyon greftlemesi için bir protokol açıklıyoruz. Protokolün amacı, arterlerdeki alloimmün reaksiyonlar ve organ nakli başarısızlığına katkıda bulunan ortaya çıkan arteriyel değişikliklerle ilgili patolojik süreçleri ve terapötik stratejileri incelemek için bir model sağlamaktır.

Aloimmün kaynaklı Vasküler Reddi ve Nakli arterioskleroz Fare Modeli

Manşet tekniği, küçük damarların teknik olarak zorlayıcı sütür anastomozlarından kaçınarak farelerde heterotopik servikal kalp nakli modelini kısaltır ve kolaylaştırır. Bu video makalesinde gösterilen teknik ayrıntılar, araştırmacıların bu modeli laboratuvarlarında kurmalarına izin vermelidir.

Farelerde Heterotopik Servikal Kalp Nakli

Süper mikrovasküler anastomoz olmayan bir dikiş manşet tekniği uygulayarak fare ortotopik arka uzuv nakli için bu yeni model, vaskülarize kompozit doku yamasında (VCA) ile ilgili in vivo mekanik immünolojik araştırmalar için güçlü bir araç sağlar.

Fare Ortotopik Hind Ekstremite nakli

Burada servikal mürin modelinde sütür olmayan manşet tekniği ni kullanarak farelerde heterotopik aort transplantasyonu protokolünü salıyoruz. Bu model kronik allogreft vaskülopatinin (CAV) altta yatan patolojisini incelemek için kullanılabilir ve oluşumunu önlemek için yeni terapötik ajanların değerlendirilmesine yardımcı olabilir.

Modifiye Dikişsiz Manşet Tekniği Kullanılarak Murine Servikal Aort Transplantasyon Modeli

Biz manşet üzerinde evert yardımcı olmak için fare servikal heterotopik kalp nakli için manşet tekniği bir iç tüp yaklaşım tanıtmak. İki deneyimli cerrah arasındaki işbirliğinin ameliyat süresini belirgin bir şekilde kısalttAdığını gördük.

Murin Kalp Nakli için Manşet Tekniğinin Optimizasyonu

Bu protokolde, kardiyak allogreft rejeksiyon mekanizmasını araştırmak için bir fare kalp nakli modeli kullanılmıştır. Bu heterotopik kalp nakli modelinde, modifiye Manşet tekniği kullanılarak kalp implantasyonunun servikal uçtan uca anastomozu ile operasyon etkinliği artırılır ve kalp greftlerinin sağkalımı sağlanır.

Fare Servikal Heterotopik Kalp Transplantasyon Modeli için Modifiye Manşet Tekniği

Fare kardiyak transplantasyon modelleri, transplantasyon immünolojisini incelemek için değerli araştırma araçlarını temsil etmektedir. Mevcut protokol, laminer kan akışına izin vermek için alıcının ortak karotis arterine ve donörün pulmoner arter gövdesine manşetlerin yerleştirilmesini içeren fare heterotopik servikal kardiyak transplantasyonunu detaylandırmaktadır.

Vasküler Manşetler Kullanılarak Fare Heterotopik Servikal Kardiyak Transplantasyonu

Öğrenin fare modelinde kol tekniği ile ortotopik aort transplantasyonunu. Bu hızlı anastomoz yöntemi, vasküler hastalıkların araştırılmasında genetik olarak modifiye edilmiş farelerde kullanılabilir.

Kol tekniği aort transplantasyonu - eğitici bir Video bir fare Model kullanma

Daha fazla video keşfet