Tavşan modeli hızlandırılmış ateroskleroz: iliyak arter balon yaralanma bir metodolojik açıdan

Bu prosedürün genel amacı, sol iliak arterlerinin endotelini cerrahi olarak bozarak ve onları aterojenik bir diyetle besleyerek tavşanlarda aterosklerotik plakların oluşumunu indüklemektir. Tavşanlarda yalnız yaralanma ile plak bileşimini incelemek için genellikle aortta yapılır. Bununla birlikte, iliak arter, insan koroner arterine çok benzer ve bu da onu aterosklerotik plakları modellemek için çekici bir yer haline getirir.

Tavşan iliak arterinin kas içeriği, üniform lezyonları, göz dokusu faktörü aktivitesi ve tutarlı damar boyutlarının tümü insan koroner arteri ile karşılaştırılabilir. Sonuç olarak, bu, ticari olarak üretilen cihazların morfometrik ve anjiyografik uç noktalara göre değerlendirilmesine izin verir. Prosedürü göstermek, laboratuvarımdan bir işbirlikçi olan Aurelien Frobert olacak.

Tüm cerrahi aletleri, örneğin bir cam boncuk sterilizatörü kullanarak sterilize ettiğinizden emin olun. Ardından, iki balon kateter tertibatını hazırlayın ve kontrol edin. Her birinin üzerine, normal tuzlu suyla doldurulmuş bir mililitrelik Luer kilit şırıngası takın ve ardından balonun şişirme mekanizmasını kullanarak sıkışmış emblique olup olmadığını kontrol edin.

Ardından, cerrahi platformdaki termal pedi 37 santigrat dereceye ayarlayın. Sonra tavşanı tartın. Daha sonra, bir buprenorfin enjeksiyonu sağlayın ve tavşanı 10 ila 15 dakika boyunca dakikada beş litrede% 5 izofloran kullanarak uyuşturun.

Şimdi, anestezi uygulanmış tavşanı cerrahi bir platform üzerindeki ısıtma yastığının üzerine yerleştirin. Tavşanın sıcaklığını ve solunumunu izlemek ve elektrokardiyogramları toplamak için sensörler takın. Ardından, dakikada 2,5 litrede %4 izofloran sağlamak için bir yüz maskesi takın.

Ardından, öğürme ve küçük refleks kaybını test ederek uygun bir anestezi seviyesini onaylayın. Evrensel olarak gevşemiş bir kas tonusu da derin anestezinin göstergesidir. Sonra, her iki göze de abtonik merhem sürün.

Daha sonra, hayvan kılı kesme makineleri kullanarak diz eklemlerinin hemen altındaki ventral bölgeden kılları alın. Ardından, gevşek tüyleri çıkarın ve açıkta kalan cildi üç alternatif %70 etanol ve betadin fırçasıyla temizleyin ve hayvanı sadece alt ekstremiteyi açıkta bırakarak örtün. Ameliyata başlamak için safen arteri bulun ve 1,5 santimetrelik bir kesi yapın.

Daha sonra küçük kavisli forseps kullanarak, safen arterin küçük bir kısmını dikkatlice ortaya çıkarın. Femoral ven veya femoral sinire zarar vermemek için dikkatli olun. Bu maruziyet sırasında arterin iyice temizlenmesi çok önemlidir.

Daha sonra, safen arterin altına iki gevşek ligatür halkası yerleştirin ve arterin distal ucuna yakın bir ligatür halkası bağlayın. Ardından, bağın üzerindeki arter boyunca bir miktar mikro vasküler kelepçe yerleştirin ve kan akışını durdurmak için kelepçeyi kapatın. Arteri genişletmek ve faz spazmlarını önlemek için hemen bir damla papaverin uygulayın.

Daha sonra, ligatürü kullanarak safen arteri kaldırın ve 24 gauge iğne kullanarak küçük bir arteriyotomi insizyonu yapın. Ardından insizyon fleplerini kaldırın ve arterin lümenine yavaşça bir damar kazma veya kılavuz iğne sokun. Şimdi, safen artere dikkatlice bir arteriyel embolektomi kateteri yerleştirin.

Yırtılma yapmamak için nazik olun. Ardından damar kazmayı çıkarın ve arter üzerindeki mikro vasküler kelepçeyi serbest bırakın. Yaralanmayı oluşturmak için önce balon kateterini üçüncü işarete ilerletin.

Bu, iliak çatallanmanın kabaca iki ila beş santimetre üzerine koymalıdır. Daha sonra, balonu 0.1 mililitre normal tuzlu su ile şişirin. Şimdi, kateteri klipsleyin ve dokuya zarar vermek için döndürürken altı santimetre geri çekin.

Geri çekildikten sonra balonu söndürün. Ve tam endotel dilatasyonunu sağlamak için, işlemi iki kez daha tekrarlayın. Ardından kateteri çıkarın ve kanamayı durdurmak için hemen arteriyotomi bölgesinin hemen üzerindeki bağ halkasını bağlayın.

Daha sonra, yaranın perforunun etrafına uygun bir antiseptik uygulayın ve kan pıhtılarını temizleyin. Son olarak, cilt kesisini kapatın ve ameliyat bölgesini povidon-iyot solüsyonu ile dezenfekte edin. Daha sonra ikinci kateteri kullanarak kontralateral iliak arter üzerindeki tüm cerrahi prosedürü tekrarlayın.

Ameliyattan sonra, önce abtonik merhemi tavşanın yanlarından temizleyin. Sonra sülfadoksin ve trimetoprim uygulayın. Ardından tavşanı başlık pediyle birlikte temiz bir kurtarma kafesine ve bir izleme yamasına ve klipslerine aktarın.

Hayvan dış yaslanma yeteneğini geri kazandığında ve yürümeye başladığında, onu ev kafesine geri koyun. Ağrı yönetimi için buprenorfin sağlayın. Şimdi, hayvanı gerektiği kadar aterojenik bir diyetle beslemeye başlayın.

Erken ince keten toplamak için, ameliyattan iki veya dört hafta sonra, önce tavşanı uyuşturun ve ardından tavşanı interkardinal bir insizyonla ötenazi yapın. Sonra, karnı açın ve retroperitonu ortaya çıkarın. Daha sonra aortu iliak bifurkasyona doğru takip edin ve bifurkasyonun üzerine bağlayın.

Çevredeki dokuları dikkatlice çıkararak ve her iki iliak arteri izole ederek takip edin. Şimdi her iki arteri de inceleyin ve buz gibi soğuk PBS'ye daldırın. Orada forseps kullanarak pıhtıları çıkarın ve her arteri 46 segmente bölün.

Daha sonra segmentleri hemen OCT bileşiği içeren bir kalıba gömün ve dokuları sıvı nitrojen içinde dondurun. Dokuları eksi 80 santigrat derecede saklayın ve daha sonra standart metodolojiyi kullanarak beş mikron kalınlığındaki bölümleri boyayın. İliak arterlerin balon yaralanması bir saatten kısa bir sürede komplikasyonsuz olarak başarılı bir şekilde gerçekleştirildi.

Tavşan bir saat içinde iyileşti ve/veya önemli bir kilo kaybı olmadan sağlıklı göründü. Ameliyat sonrası herhangi bir komplikasyona rastlanmadı. Ve dört haftalık aterojenik diyetten sonra, tavşanların hepsinde hiperkolesterolemi vardı.

Balon yaralanması ve kolesterol diyetinin kombinasyonu, damar duvarında yapısal değişikliklere neden oldu ve iki hafta içinde aterosklorotik plax gelişimine yol açtı. Aynı hayvandan yaralanmamış ve balon yaralanmalı iliak arterler izole edildi ve karşılaştırıldı. Keten, lipid infiltrasyonunun yanı sıra düz kas ses göçü ve proliferasyonu ile karakterize edildi.

Lümen boyutu küçülmeye devam ederken, keten yaralı damarlarda büyümeye devam eder. Ortaya çıkan değişiklikler dört hafta boyunca çok belirgindi. İki ve dört hafta sonra, morfometrik kantitasyon, artmış bir intima media kalınlığı, artmış bir plak alanı, azalmış bir lümen alanı ve son olarak lipid birikiminde bir artış olduğunu ortaya çıkardı.

Alfa düz kas aktini ile boyama anti kor kas aktini ile reaksiyona girer, böylece vasküler düz kas hücrelerini tanımlar. Daha fazla 11 monoklonal antikor ile boyama yapılırken makrofajların sitoplazmasını ortaya çıkarır. Lekeler birlikte, hem düz kas hücrelerinin hem de makrofajın yaralı damarlardaki aterosklerotik plağa ne ölçüde çoğaldığını ortaya koymaktadır.

Bu videoyu izledikten sonra, oto güvenliği iyi anlamalı ve tavşanın iliak arterlerinde kolayca şiddetli bir yaralanma gerçekleştirmelisiniz. Aterojenik diyetle yapılan bu yaralanma, plakların iliak arterlerin zamanında homojen bir şekilde gelişmesine neden olur.