Name: Balık Yağı Takviyeler Lipid Profilinin Rapid Değerlendirilmesi için Sağlam Aracı Olarak NMR Spektroskopisi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-01T11:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: Öğrenin, balık yağı takviyelerinin lipid profilini NMR spektroskopisi ile hızlı ve sağlam bir şekilde nasıl analiz edeceğinizi. Bu yöntem, yağ asidi dağılımını belirlemek için ayrıştırma adımı gerektirmeden etkili sonuçlar sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Ohio State Üniversitesi Sağlık Discovery Tema Foods ve Ohio State Üniversitesi Gıda Bilimi ve Teknolojisi Bölümü tarafından desteklenmiştir. Yazarlar Ohio Eyalet Üniversitesi NMR tesis ve Penn State Üniversitesi NMR tesis teşekkür etmek istiyorum.

<ol><li>Simopoulos, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+ratio+of+omega-6%2Fomega-3+essential+fatty+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">The importance of the ratio of omega-6/omega-3 essential fatty acids.</a> Biomed. Pharmacother. 56 (8), 365-379 (2002).</li>
<li>Goodnight, S. H. Jr, Harris, W. S., Connor, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+dietary+omega+3+fatty+acids+on+platelet+composition+and+function+in+man%3A+a+prospective%2C+controlled+study%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">The effects of dietary omega 3 fatty acids on platelet composition and function in man: a prospective, controlled study.</a> Blood. 58 (5), 880-885 (1981).</li>
<li>Harper, C., Jacobsen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usefulness+of+omega-3+fatty+acids+and+the+prevention+of+coronary+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Usefulness of omega-3 fatty acids and the prevention of coronary heart disease.</a> Am. J. Cardiol. 96 (11), 1521-1529 (2005).</li>
<li>Kremer, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+high-dose+fish+oil+on+rheumatoid+arthritis+after+stopping+nonsteroidal+antiinflammatory+drugs.+Clinical+and+immune+correlates%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+and+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Effects of high-dose fish oil on rheumatoid arthritis after stopping nonsteroidal antiinflammatory drugs. Clinical and immune correlates.</a> Arthritis and Rheumatol. 38 (8), 1107-1114 (1995).</li>
<li>Malasanos, T., Stackpoole, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+effects+of+omega-3+fatty+acids+in+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Biological effects of omega-3 fatty acids in diabetes mellitus.</a> Diabetes Care. 14, 1160-1179 (1991).</li>
<li>Han, Y., Wen, Q., Chen, Z., Li, P. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1876610211019503">Review of Methods Used for Microalgal Lipid-Content Analysis.</a> Energ. Procedia. 12, 944-950 (2011).</li>
<li>Guillén, M., Ruiz, A. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ejlt.200300799/abstract">1H nuclear magnetic resonance as a fast tool for determining the composition of acyl chains in acylglycerol mixtures.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 105, 502-507 (2003).</li>
<li>Sacchi, R., Medina, I., Aubourg, S. P., Addeo, F., Paolillo, L. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/237943502_Proton_Nuclear_Magnetic_Resonance_Rapid_and_Structure-Specific_Determination_of_o-3_Polyunsaturated_Fatty_Acids_in_Fish_Lipids">Proton nuclear magnetic resonance rapid and structure specific determination of ω-3 polyunsaturated fatty acids in fish lipids.</a> J. Am Oil Chem Soc. 70, 225-228 (1993).</li>
<li>Igarashi, T., Aursand, M., Hirata, Y., Gribbestad, I. S., Wada, S., Nonaka, M. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/226798699_Nondestructive_Quantitative_Acid_and_n-3_Fatty_Acids_in_Fish_Oils_by_High-Resolution_1H_Nuclear_Magnetic_Resonance_Spectroscopy">Nondestructive quantitative acid and n-3 fatty acids in fish oils by high-resolution 1H nuclear magnetic resonance spectroscopy.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 77, 737-748 (2000).</li>
<li>Plans, M., Wenstrup, M., Saona, L. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-015-2666-8">Application of Infrared Spectroscopy for Characterization Dietary Omega-3 Oil Supplements.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 92, 957-966 (2015).</li>
<li>Jian-hua, C. I. A. <a target="_blank" href="http://pubs.sciepub.com/jfnr/2/2/1/">Near-infrared Spectrum Detection of Fish Oil DHA Content Based on Empirical Mode Decomposition and Independent Component Analysis.</a> J Food Nutr Res. 2 (2), 62-68 (2014).</li>
<li>Millen, A. E., Dodd, K. W., Subar, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+vitamin%2C+mineral%2C+nonvitamin%2C+and+nonmineral+supplements+in+the+United+States%3A+The+1987%2C+1992%2C+and+2000+National+Health+Interview+Survey+results%5BTitle%5D)+AND+%22J.+of+Am.+Diet+Assoc%22%5BJournal%5D)">Use of vitamin, mineral, nonvitamin, and nonmineral supplements in the United States: The 1987, 1992, and 2000 National Health Interview Survey results.</a> J. of Am. Diet Assoc. 104 (6), 942-950 (2004).</li>
<li>Dwyer, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+developing+analytical+and+label-based+dietary+supplement+databases+at+the+NIH+office+of+dietary+supplements%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Compos.+Anal%22%5BJournal%5D)">Progress in developing analytical and label-based dietary supplement databases at the NIH office of dietary supplements.</a> J. Food Compos. Anal. 21, S83-S93 (2008).</li>
<li>Monakhova, Y. B., Ruge, I., Kuballa, T., Lerch, C., Lachenmeier, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+determination+of+coenzyme+Q10+in+food+supplements+using+1H+NMR+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Vitam.+Nutr.+Res%22%5BJournal%5D)">Rapid determination of coenzyme Q10 in food supplements using 1H NMR spectroscopy.</a> Int. J. Vitam. Nutr. Res. 83 (1), 67-72 (2013).</li>
<li>Monakhova, Y. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardless+1H+NMR+determination+of+pharmacologically+active+substances+in+dietary+supplements+and+medicines+that+have+been+illegally+traded+over+the+internet%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Test.+Anal%22%5BJournal%5D)">Standardless 1H NMR determination of pharmacologically active substances in dietary supplements and medicines that have been illegally traded over the internet.</a> Drug Test. Anal. 5 (6), 400-411 (2013).</li>
<li>Berger, S., Braun, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBerger%2C+S+%22200+and+more+NMR+experiments%3A+a+practical+course%22">200 and more NMR experiments: a practical course</a>. , Wiley-VCH. Weinheim. (2004).</li>
<li>Knothe, G., Kenar, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+the+fatty+acid+profile+by+1H-NMRspectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Lipid+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Determination of the fatty acid profile by 1H-NMRspectroscopy.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 106, 88-96 (2004).</li>
<li>Sacchi, R., Medina, J. I., Aubourg, S. P., Paolillo, I. G. L., Addeo, F. <a target="_blank" href="http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/jf00032a016">Quantitative High-Resolution 13C NMR Analysis of Lipids Extracted from the White Muscle of Atlantic Tuna (Thunnus alalunga).</a> J. Agric. Food Chem. 41 (8), 1247-1253 (1993).</li>
<li>Dais, P., Misiak, M., Hatzakis, E. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/277335832_Analysis_of_marine_dietary_supplements_using_NMR_spectroscopy">Analysis of marine dietary supplements using NMR spectroscopy.</a> Anal. Methods. 7 (12), 5226-5238 (2015).</li>
<li>Pickova, J., Dutta, P. C. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-003-0809-7">Cholesterol Oxidation in Some Processed Fish Products.</a> J. Anal. Oil Chem. Soc. 80 (10), 993-996 (2003).</li>
<li>Siddiqui, N., Sim, J., Silwood, C. J. L., Toms, H., Iles, R. A., Grootveld, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multicomponent+analysis+of+encapsulated+marine+oil+supplements+using+high-resolution+1H+and+13C+NMR+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22J.+of+Lipid+Rsrch%22%5BJournal%5D)">Multicomponent analysis of encapsulated marine oil supplements using high-resolution 1H and 13C NMR techniques.</a> J. of Lipid Rsrch. 44 (12), 2406-2427 (2003).</li>
<li>Sua´rez, E. R., Mugford, P. F., Rolle, A. J., Burton, I. W., Walter, J. A., Kralovec, J. A. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-010-1638-2">13C-NMR Regioisomeric Analysis of EPA and DHA in Fish Oil Derived Triacylglycerol Concentrates.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 87, 1425-1433 (2010).</li>
<li>Youlin, X. A., Moran, S., Nikonowiczband, E. P., Gao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Z-restored+spin-echo+13C+1D+spectrum+of+straight+baseline+free+of+hump%2C+dip+and+roll%5BTitle%5D)+AND+%22Magn.+Reson.+Chem%22%5BJournal%5D)">Z-restored spin-echo 13C 1D spectrum of straight baseline free of hump, dip and roll.</a> Magn. Reson. Chem. 46, 432-435 (2008).</li>
<li>Tengku-Rozaina, T. M., Birch, E. J. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ejlt.201300357/abstract">Positional distribution of fatty acids on hoki and tuna oil triglycerides by pancreatic lipase and 13C NMR analysis.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 116 (3), 272-281 (2014).</li>
<li>Berry, S. E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Triacylglycerol+structure+and+interesterification+of+palmitic+and+stearic+acid-rich+fats%3AAn+overview+and+implications+for+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr.+Res.+Rev%22%5BJournal%5D)">Triacylglycerol structure and interesterification of palmitic and stearic acid-rich fats:An overview and implications for cardiovascular disease.</a> Nutr. Res. Rev. 22 (1), 3-17 (2009).</li>
<li>Hunter, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+effects+of+dietary+fatty+acids+as+related+to+their+position+on+triglycerides%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids%22%5BJournal%5D)">Studies on effects of dietary fatty acids as related to their position on triglycerides.</a> Lipids. 36, 655-668 (2001).</li>
<li>Vlahov, G. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/(SICI)1097-458X(199805)36:5%3C359::AID-OMR274%3E3.0.CO;2-Z/abstract">Regiospecific analysis of natural mixtures of triglycerides using quantitative 13C nuclear magnetic resonance of acyl chain carbonyl carbons.</a> Magnetic Res. in Chem. 36, 359-362 (1998).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Sorun Giderme için Değişiklikler ve Stratejileri Spektral kalitesi. NMR sinyalinin ve böylece NMR spektrumunun çözünürlük çizgi genişliği manyetik alanın homojenlik optimizasyonu için bir işlem olup, bu, shimming son derece bağlıdır. rutin analizler için, 1D pullanma yeterli ve 3B pullanma bu düzenli bir şekilde NMR personel tarafından gerçekleştirilmesi göz önüne alındığında, gerekli değildir. O (90:10) D2: bu durum söz konusu değilse, bir 3D pullanma H2O...

Diyet, n-3 yağ asitlerinin tüketimi, kalp bozuklukları, 1, 2, 3, enflamatuar hastalıklar 4 ve diyabet 5 gibi çeşitli koşullara karşı faydalı olduğu kanıtlanmıştır. Batı diyet n -3 yağ asitleri kötü kabul edilir ve böylece balık yağı takviyelerinin tüketimi n geliştirmek için tavsiye edilir -6 / n -3 tüketicinin beslenme 1&#39;de denge. balık yağı takviyesi tüketiminde son artışa rağmen, sorular bu ürünlerin bazılarının güvenliği, özgünlük ve kalitesi hakkında kalır. balık yağı takviyelerinin hızlı ve doğru kompozisyon analizi doğru bu ticari ürünlerin kalitesini değerlendirmek ve tüketici güvenliğini sağlamak için esastır. balık yağı takviyesi değerlendirilmesi için en yaygın yöntemlers gaz kromatografisi (GC) ve kızıl ötesi spektroskopi (IR) &#39;dir. Bu son derece hassas yöntemler olmakla birlikte, bunların çeşitli sakıncaları 6 muzdarip. GC analizi, ayrı ayrı bileşiklerin ayrılması ve türetilmesi 7 gereklidir ve lipid oksidasyonu analiz 8, 9 sırasında oluşabilir, çünkü zaman alıcı (4-8 saat) &#39;dir. IR spektroskopisi nicel olabilir, bir tahmin modeli IR bantları, tek bir bileşik 10 atfedilebilir hangi istisnalar olmasına rağmen, kısmi en az kareler regresyon (PLSR) kullanılarak inşa edilmesi gerekmektedir. PLSR analizi 11 süresini uzatır örneklerin çok sayıda, analiz edilmesi gerekir. Bu nedenle, balık yağı örneklerinin çok sayıda doğru ve hızlı analiz izin yeni analitik yöntemler geliştirilmesinde artan bir ilgi vardır. örneğin Offi gibi örgütlerSağlık (NIH) ve Gıda ve İlaç İdaresi (FDA) National Institutes of Besin Takviyesi (ODS) ait ce bu yeni yöntemler 12, 13 geliştirmektir Resmi Analitik Kimyagerler Derneği (AOAC) ile işbirliği var. Tarama ve diyet takviyeleri olarak çok bileşenli matrisler, değerlendirilmesi için en ümit verici analitik yöntemlerden biri, Nükleer manyetik rezonans (NMR) spektroskopisi 14, 15&#39;dir. NMR spektroskopisi birçok avantajı vardır: bir tahribatsız ve niceliksel bir teknik, hiçbir numune hazırlama için en az gerektirir ve mükemmel doğruluk ve üretkenlik ile karakterize edilir. bu çözücülerin sadece küçük miktarlarda kullanmaktadır Buna ek olarak, NMR spektroskopisi, çevre dostu bir yöntemdir. NMR spektroskopisi ana dezavantajı, diğer analyti kıyasla nispeten düşük duyarlılığıcal yöntem, ancak bu tür güçlü manyetik alanlar, çeşitli çaplarda kriyojenik sondalar, gelişmiş veri işleme ve çok yönlü darbe dizileri ve teknikleri gibi aletlerin son zamanlardaki teknolojik ilerlemeler nM aralığına kadar karşı artmış bir hassasiyet. NMR enstrümantasyon yüksek maliyetli olmakla birlikte, NMR spektrometre uzun ömürlü ve NMR birçok uygulama uzun vadede analiz maliyetini düşürmek. Bu ayrıntılı video protokol alanında yeni uygulayıcı 1 H ve balık yağı takviyeleri 13C NMR spektroskopik analizleri ile bağlantılı tuzaklar önlemek için tasarlanmıştır.

<table><tbody><tr><td>Avance III 850 NMR cihazı</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Avance III 500 NMR cihazı</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TCI 5 mm prob</td><td>Bruker</td><td></td><td>Helyum soğutmalı ters (proton deetected) Üç bağımsız kanala sahip NMR probu (1H, 13C, 15N)</td></tr> <tr><td>BBO dahisi 5 mm prob</td><td>Bruker</td><td></td><td>Nitrojen soğutmalı gözlem (X-çekirdeği tespit edildi) probu, iki kanallı; biri 1H ve 19F tespiti için ve biri X-çekirdekleri için (15N'den 31P'yi kapsar)</td></tr> <tr><td>Döndürücü turbin</td><td>Bruker</td><td></td><td>NMR iplikçileri polimer malzemelerden yapılmıştır ve NMR tüpünü güvenli bir şekilde yerinde tutmak için kauçuk bir o-ringe sahiptirler</td></tr><tr><td>Topspin 3.5</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>döteryumlu kloroform</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&nbsp; 865-49-6</td><td>%99.8 atom D, 0.03 TMS</td></tr><tr><td>2,6-Di-tert-butil-4-metilfenol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&nbsp; 128-37-0</td><td>saflık >% 99</td></tr> <tr><td>Balık yağı örnekleri</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>NMR tüpleri</td><td>Yeni Çağ</td><td>NE-RG5-7</td><td>5mm OD Rutin " R&rdquo; Seri NMR Numune Tüpü</td></tr><tr><td>BSMS</td><td>Bruker Bruker</td><td></td><td>Sistemleri Yönetim Sistemi; kontrol sistemi cihazı</td></tr></tbody></table>

balık yağı takviyeler lipid profilinin rapid değerlendirilmesi için sağlam aracı olarak nmr spektroskopisi

NMR Spectroscopy as a Robust Tool for the Rapid Evaluation of the Lipid Profile of Fish Oil Supplements

Batı diyet nedenle balık yağı takviyelerinin tüketimi bu temel besinlerin alımını artırmak için önerilir n -3 yağ asitleri bakımından fakirdir. Bu çalışmanın amacı, yüksek çözünürlüklü 1 H ve iki farklı NMR aletleri kullanılarak 13 ° C NMR spektroskopisi kullanarak kapsül balık yağı takviyeleri kalitatif ve kantitatif analiz ortaya koymaktır; 500 MHz ve 850 MHz alet. Her iki protonu (1H) ve karbon (13C) NMR spektrumları, balık yağı takviyeleri ana bileşenlerinin miktarlarının belirlenmesi için kullanılabilir. Balık yağı takviyeleri lipid miktarının ilgili 1D spektrumları uygun NMR sinyallerinin entegrasyonu ile elde edilir. 1H ve 13 C NMR ile elde edilen sonuçlar, iki çekirdek ve iki araç arasında çözünürlük ve hassasiyet farkına rağmen, birbirleri ile iyi bir uyum içindedir. 1H NMR tekliftayfı, bir saat 10 dakika sürer 13C NMR analizi, aksine, 1 dakikadan daha az olarak kaydedilebilir olarak sa daha hızlı analiz, 13C NMR ile karşılaştırıldığında. 13C NMR spektrumu, ancak çok daha açıklayıcıdır. Tek tek yağlı asitlerin daha fazla sayıda sayısal verileri ve gliserol omurgası üzerinde yağlı asitlerin konumsal dağılımını belirlemek için kullanılabilir. Hem çekirdek arıtma veya ayırma aşamalarına gerek kalmadan tek bir deneyde sayısal bilgi sağlayabilir. Manyetik alanın gücü çoğunlukla 13C NMR ile ilgili olarak daha düşük bir çözünürlüğe 1H NMR spektrumları etkiler, ancak, daha düşük maliyetli NMR aletleri verimli gıda sanayi ve kalite kontrol laboratuarlarında standart bir yöntem olarak uygulanabilir.

1H ve 13C NMR spektrumları iki NMR aletleri kullanılarak ticari olarak mevcut balık yağı takviyeleri için toplanmıştır; 850 MHz ve 500 MHz spektrometre üzerinde kaydedildi. Bu tayflar, örneğin dokosaheksaenoik asidi (DHA), eikosapentaenoik asit (EPA), örneğin n gibi n -1 asil zincirleri ve beslenme açısından önemli indeksi gibi diğer bileşikler, balık yağı bileşenleri, kantitatif tayini için kullanılabilir -6 / n -3 oranı. miktar daha dahi...

Burada, yüksek çözünürlüklü 1H ve 13C Nükleer Manyetik Rezonans (NMR) spektroskopisi kapsüllenmiş balık yağı takviyeleri nicel ve nitel analiz için hızlı ve güvenilir bir araç olarak kullanılmıştır.

Balık Yağı Takviyeler Lipid Profilinin Rapid Değerlendirilmesi için Sağlam Aracı Olarak NMR Spektroskopisi

The western diet is poor in n-3 fatty acids, therefore the consumption of fish oil supplements is recommended to increase the intake of these essential ...

Bu yöntemin genel amacı, Nükleer Manyetik Rezonans spektroskopisi kullanarak balık yağı takviyelerinin lipid profilini belirlemektir. Bu yöntem, balık yağı takviyelerinin lipid içerikleri ve çeşitli yağ asitlerinin gliserol iskeleti üzerindeki konumsal dağılımı gibi lipid analizi için temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, ayırma ve saflaştırma basamaklarını kullanmadan, birkaç farklı molekülün hızlı ve güvenilir analizini tek bir görüntüleme ile mümkün kılmasıdır.Proton ve karbon NMR analizi için numuneleri hazırlamak amacıyla, önce bir şırınga kullanarak bir diyet kapsülünden yaklaşık 110 miligram balık yağına denk gelen 120 microliters çekin ve bunu 4-mL'lik cam bir viyale yerleştirin. Balık yağının ağırlığını kaydedin. 100 milligrams artı veya eksi 10 milligrams balık yağını çözmek için 500 microliters BHT stok çözeltisi kullanın.Yağı çözdükten sonra, çözeltinin tamamını doğrudan yüksek kaliteli, beş milimetrelik bir NMR tüpüne aktarın ve kapağını kapatın. Numuneleri, hazırlama işleminden sonraki 24 saat içinde analiz edin. NMR tüpünü bir spinner türbinine yerleştirin.Spinner'ı ve tüpü dereceli bir derinlik ölçerin üzerine yerleştirin ve tüpün alt kısmı ölçerin tabanına değene kadar tüpün üst kısmını hafifçe itin. Ardından NMR tüpünü numune kutusundaki boş bir yuvaya yerleştirin. Numunenin yerleştirildiği yuva numarasını not edin.Numuneyi NMR cihazına yüklemek için kontrol bilgisayarına dönün ve numunenin bulunduğu numune kutusundaki yuva numarasını belirten SX-numara komutunu yazın. Ekran üzerinde döteryumlanmış kloroformun döteryum sinyalinin görünmesini bekleyin. Döteryum sinyali görünür görünmez, komut satırına "lock" yazın ve numuneyi döteryum rezonansını kullanarak kilitlemek için çözücü listesinden döteryumlanmış kloroformu seçin.Döndürmenin aktif olmadığından emin olmak için komut satırına "bsmsdisp" yazın. Eğer döndürme düğmesi yeşilse, döndürmeyi devre dışı bırakmak için üzerine tıklayın. Yeni bir veri seti oluşturmak için "new" komutunu yazdıktan sonra, isim sekmesine veri setinin adını ve EXPNO başlıklı deney numarası sekmesine deney numarasını girin.PROCNO başlıklı işlem numarası sekmesinde bir numarasını kullanın. Deneyin başlığını TITLE sekmesine yazın. Experiment sekmesinde Select'e tıklayın ve C13IG parametre dosyasını seçin.Ardından, "Set selected item in editor" seçeneğine tıklayın ve OK'e basın. Mevcut NMR probu ve çözücü için standart parametreleri elde etmek amacıyla komut satırına "getprosol" yazın. Daha sonra, hem karbon hem de proton çekirdekleri için probun otomatik ayarlanması ve eşleştirilmesini gerçekleştirmek üzere "atma" komutunu yazın. Sonrasında, oldukça homojen bir manyetik alan ve böylece NMR sinyalleri için optimum çizgi şekli elde etmek amacıyla tek boyutlu gradyan şimleme işlemi yapın.Bunu yapmak için, komut satırına sırasıyla qu topshim 1dfast ss;qu topshim tuneb ss; ve qu topshim report" komutlarını girerek 1D şimleme için standart otomatik prosedürü uygulayın. Metin protokolünde açıklandığı şekilde parametre optimizasyonundan sonra, tek boyutlu karbon NMR spektrumlarını elde edin. Bunun için karbon veri setine gidin ve komut satırına pulprog zgig" yazarak ters kapılı ayrıştırılmış (inverse gated decoupled) bir darbe dizisi kullanın.nppm ile spektral ayarları, RF vericinin merkezini, tarama sayısını, dummy tarama sayısını, veri noktası sayısını ve doksan derecelik darbe açısı için darbe süresini ayarlamak üzere komut satırına komutları yazın. İyileştirilmiş bir temel hat ile spektrum elde etmek için komut satırına "digmod baseopt" yazın. Ardından, komut satırına "di 60s" yazarak 850 megahertz cihazı için 60 saniyelik bir relaksasyon gecikmesi ayarlayın.Alıcı kazancını, otomatik hesaplama için rga" komutunu kullanarak uygun bir değere ayarlayın. Son olarak, komut satırına pulse acquire komutu olan zg" yazarak veri toplamayı başlatın. Verileri işlemek için, önce sıfır doldurma (zero filling) uygulamak ve gerçek spektrum boyutunu 64K olarak ayarlamak için komut satırına si 64K" yazın.Ardından, 4ea transformasyonu öncesinde 1.0 hertz çizgi genişletme faktörüne sahip bir bekleme fonksiyonu uygulamak için komut satırına "lb 1.0" yazarak çizgi genişletme parametresini 1.0 hertz olarak ayarlayın. Komut satırına "efp" yazarak 4ea transformasyonunu gerçekleştirin. Sonrasında, komut satırına "apk" komutunu yazarak otomatik faz düzeltmesi yapın.Spektrumu daha da iyileştirmek için ek faz ayarlamaları gerekiyorsa, Process sekmesine tıklayın. Ardından Adjust Phase simgesine ve sıfırıncı derece ile birinci derece faz düzeltme için Phase Correction simgelerine tıklayın. Sıfırıncı derece ve birinci derece faz düzeltme simgelerine tıklarken, tüm sinyaller pozitif absorbsiyon moduna geçene kadar fareyi sürükleyin.Faz Düzeltme modundan çıkmak için Dön ve Kaydet düğmesine tıklayarak faz düzeltme değerlerini uygulayın ve kaydedin. Komut satırına abs n" komutunu yazarak, entegrasyon sırasında temel çizgi düzeltmesi için dördüncü dereceden bir polinom fonksiyonu uygulayın. Kimyasal kaymaları TMS'ye göre ppm cinsinden raporlamak için TMS sinyaline yakınlaştırın, ardından Kalibrasyon simgesine tıklayın ve kırmızı çizgili imleci, bu durumda TMS olan ve referans alınacak NMR sinyalinin üzerine yerleştirin.Eşik yoğunluğunu ayarlamak için gerekirse farenin orta düğmesini kullanın. Sol tıklayın ve 0 yazın. İç standart olarak BHT kullandığınızda, pikten her iki yöne doğru beş hertz uzanan delta 151.45'teki piki entegre edin.Ardından, integrali stok çözeltinin 0,5 mililitresi başına düşen BHT mikromol değerine eşitleyin. İlgilenilen piklerin, pikin her iki yanından beş hertz kadar uzanan kısımlarını entegre edin. Belirli bir bölgeye odaklanmak gerekirse, devre dışı bırakmak için vurgulama simgesine tıklayın.Ardından, bölgeye yakınlaştırmak için sol tıklayıp sürükleyin. Entegrasyon işlevini etkinleştirmek için vurgulama simgesine tekrar tıklayın ve bir sonraki pike geçin. İmleci integral boyunca sol tıklayarak sürükleyin.Return Save Regions düğmesine tıklayın. Burada, karbonil karbon bölgesindeki Karbon NMR analizinin temsili bir spektrumu gösterilmektedir. sn-1, 3 ve sn-2 konumlarındaki EPA ve DHA'nın NMR sinyalleri gösterilmiştir.Bu sinyaller, EPA ve DHA'nın kantitatif tayini için kullanılabilir. Burada, proton NMR analizinin temsili bir spektrumu gösterilmektedir. EPA ve DHA'nın tayini için kullanılabilecek NMR sinyalleri gösterilmiştir.Proton NMR spektrumu, karbon NMR spektrumu ile karşılaştırıldığında daha dar bir spektral genişlik ve dolayısıyla daha düşük bir spektral çözünürlük ile karakterize edilir. Uzmanlaşıldığında, bu teknik düzgün bir şekilde uygulandığı takdirde 30 dakikadan kısa sürede tamamlanabilir. Geliştirilmesinin ardından bu teknik, lipid analizi alanındaki araştırmacıların; gıda takviyeleri, bitkisel yağ ve biyoyakıtlar gibi çok bileşenli matrislerde görülen çeşitli lipid bileşenlerini hızla analiz etmelerinin önünü açmıştır.Bu videoyu izledikten sonra, balık yağı takviyelerinin lipid profilinin analizi için proton ve karbon NMR spektroskopisinin nasıl uygulanacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. NMR spektrometreleri tarafından üretilen güçlü manyetik alanlarla çalışmanın; kalp pilleri ve cerrahi protezlerin yanı sıra kredi kartları ve saatler gibi elektronik eşyalar için son derece tehlikeli olabileceğini unutmayın.

nmr-spectroscopy-as-robust-tool-for-rapid-evaluation-lipid-profile

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Mikrobiyal planktonik toplulukların metaboliti çıkarımı için bir yöntem sunulmaktadır. Tüm topluluk örnekleme özel hazırlanmış filtreler üzerine filtrasyon sağlanır. Liyofilizasyon sonra, sulu çözünür metabolitleri ekstre edilir. Bu yaklaşım doğal ya da deneysel mikrobiyal toplulukların trans-omik araştırmalar çevre metabolomik uygulaması için izin verir.

Nükleer Manyetik Rezonans Spektroskopisi ile Çevre metabolomik için düşük yoğunluklu Planktonik topluluklardan Metabolitlerinin Konsantrasyon

İlerici bir kolonizasyon prosedürü daha ev sahipliği karaciğer metabolizması üzerine olan etkisini değerlendirmek için tarif edilir. Yüksek Çözünürlüklü Magic Angle İplik (İK MAS) bozulmamış biyopsi NMR profil hepatik metabolizma tarafından değerlendirilir Kolonizasyon NMR tabanlı metabolik profil mikrobiyal co-metabolitleri idrar atılımı değerlendirerek invazif olmayan izlenir.

Germ-free Mouse Aşamalı Kolonizasyon sırasında Karaciğer metabolik değişiklikler Değerlendirilmesi 1 H-NMR Spektroskopi

Mekanik hücre bozulması, solvent esaslı lipid ekstraksiyonu, transesterifikasyon ve miktar tayini ve gaz kromatografisi kullanılarak yağ asitlerinin tanımlanması göre mikroalg yağlı asit içeriği ve bileşimin belirlenmesi için bir yöntem tarif edilmektedir. Bir tripentadecanoin iç standart ekstraksiyon ve eksik transesterifikasyon esnasında muhtemel kayıpları telafi etmek için kullanılır.

Mikroalglerden yağlı asit içeriği ve bileşimi analizi

Bir Nile Red boyama prosedürü kullanılarak alg hücrelerinin nötral lipid içeriğini belirlemek için basit bir protokol tarif edilmektedir. Bu zaman tasarrufu tekniği geleneksel gravimetrik esaslı lipid miktar protokoller için bir alternatif sunuyor. Bu izleme biyoproses performansı belirli bir uygulama için tasarlanmıştır.

Floresan kullanma Alg hücrelerinde nötral Lipidler Ölçüm Basit ve Hızlı Protokolü

Memeli beyninin nörokimyası birçok nörolojik ve sistemik hastalıkta değişmiştir. Serebral metabolitlerin karakteristik profilleri, beyin dokusunun ham ekstraktlarına dayalı olarak verimli bir şekilde elde edilebilir. Bu amaçla, metabolit konsantrasyonlarının (metabolomikler) ayrıntılı kantitatif analizini sağlayan yüksek çözünürlüklü NMR spektroskopisi kullanılır.

Doku Esansı Yüksek Çözünürlük Nükleer Manyetik Rezonans Spektroskopisi ile Sıçan Beyin metabolomic Analizi

Bu iletişim kuralı tek bir üretim için doğal organik madde ve mikrobiyal proteomik farklı ekosistemleri içinde tam olarak eşleştirilmiş karakterizasyonu sonuçlanan tamamlayıcı analitik ve omics teknikleri açıklar. Bu yaklaşım sağlam karşılaştırmalar metabolik yollar ve sera gazı üretim tanımlamak ve çevresel değişimin yanıt tahmin için önemli dönüşümleri tanımlamak için izin verir.

Karmaşık doğal organik madde karışımları karakterize için tek işlem hacmi tamamlayıcı yüksek çözünürlüklü analitik teknikler

Bu makalede doku lipidomik ve transkriptomik için modüler bir protokol ve inflamasyon ve nöronal aktivitenin altında kalan lipitleri, membran lipitlerini, aşağı akış habercilerini ve lipid fonksiyonu altında bulunan mRNA kodlayıcı enzimleri/reseptörleri hedefleyen nörolojik hastalık fare modellerinde plazma lipidomikleri sunulmaktadır. Örnekleme, numune işleme, ekstraksiyon ve nicelik prosedürleri özetlenmiştir.

Nörolojik Hastalıklarda Lipidomik ve Transkriptomik

Uyarılmış Raman saçılma (SRS) mikroskopisi, spesifik kimyasal moieties'in seçici, etiketsiz görüntülenmesini sağlar ve lipit moleküllerini in vivo olarak görüntülemek için etkili bir şekilde sunulmuştır. Burada, SRS mikroskopi prensibine kısa bir giriş sağlıyoruz ve Caenorhabditis elegans'talipid depolama görüntülemede kullanımı için yöntemleri açıklıyoruz.

Uyarılmış Raman Saçılma Mikroskopisi Kullanılarak Caenorhabditis elegans Lipid Depolama Dinamiklerinin Etiketsiz Görüntülenmesi

Bu protokol deniz suyu ve biyolojik örneklerde lipitlerin belirlenmesi içindir. Filtratlardaki lipitler, katı madde durumunda kloroform veya kloroform ve metanol karışımları ile çıkarılır. Lipid sınıfları, alev iyonizasyon tespiti ile çubuk ince katmanlı kromatografi ile ölçülür ve toplam lipit içeriği verir.

Deniz Örneklerinde Toplam Lipid ve Lipid Sınıflarının Belirlenmesi

Av tüfeği kütle spektrometrisine dayalı lipidomikler, çeşitli kemirgen dokularından tek bir ölçümde aynı anda geniş bir lipit sınıfları spektrumunun hassas bir kantitatif görüntüsünü sunar.

Kemirgen Dokularının Av Tüfeği Lipidomikleri

Öğrenin, balık yağı takviyelerinin lipid profilini NMR spektroskopisi ile hızlı ve sağlam bir şekilde nasıl analiz edeceğinizi. Bu yöntem, yağ asidi dağılımını belirlemek için ayrıştırma adımı gerektirmeden etkili sonuçlar sunar.

Balık Yağı Takviyeler Lipid Profilinin Rapid Değerlendirilmesi için Sağlam Aracı Olarak NMR Spektroskopisi

Daha fazla video keşfet