Kritik Hastalık Fare Modeli Sıvılar, Uyuşturucu ve Besin İdaresi için Santral Venöz Hattı Kullanımı

Çekal ligasyon ve ponksiyon için bu merkezi olarak kategorize edilmiş fare yönteminin veya CLP'nin genel amacı, insan klinik ortamını taklit etmek için yoğun bakım önlemleri ile tekrarlanabilir bir uzun süreli kritik hastalık modeli oluşturmaktır. Bu yöntem, yoğun bakım tıbbı alanlarındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Akut ve uzun süreli kritik hastalıklar sırasında endokrin ve metabolik değişikliklerin patogenezi hakkında.

Bu tekniğin ana avantajı, iyi standartlaştırılmış CLP tekniğini sıvı, ilaç ve besin uygulaması için merkezi bir venöz hattın kullanımı ile birleştirmesidir. Prosedürü göstermek, laboratuvarımızdan bir teknisyen olan Thomas Dufour olacak. Venöz hat ucunu hazırlamak için, 60 santimetrelik bir mikro renatan boru parçasının orta kısmını 220 santigrat derece veya daha sıcak susam yağına hızlıca daldırın.

Borunun ortasını germek, dar bir merkezi çap oluşturmak için borunun uçlarını yavaşça çekin ve boruyu iki eşit 30 santimetrelik parçaya kesmek için bir neşter bıçağı kullanın. Şimdi, kateteri gösterildiği gibi oluşturmak için boruyu bir polietilen PE 50 konektörüne, bir döner ve bir Luer saplama iğnesine bağlayın ve tüm bağlantılara güçlü, hızlı etkili yapışkan yapıştırıcı uygulayın. Tutkal sertleştiğinde, sızıntı olup olmadığını kontrol etmek için kateteri hava ile yıkayın, daha sonra 0,8 milimetre çapında bir metal telden 80 santimetrelik bir parça kesin ve bir halka yapmak için teli kendi üzerine katlayın.

Halkanın iki katına çıkarılmış telinin üzerine üç inci sürün ve kateteri tele takmak için sterilize edilmiş kateterin ucunu üç incinin içinden geçirin. 27 ila 32 gramlık, 24 haftalık bir erkek c57 siyah altı fareyi anestezi altına alın ve ayak parmağı sıkışmasına yanıt vermeyerek sedasyonu onaylayın. Dilin yutulmasını önlemek için dili ağızdan nazikçe çıkarmak için forseps kullanın.

Ardından, cerrahi alanı tıraş edin, ardından fareyi önceden ısıtılmış bir ısıtma yastığının üzerine yüzüstü pozisyonda yerleştirin. Maruz kalan cildi% 70 etanol ile dezenfekte edin ve az miktarda oftalmik kayganlaştırıcı uygulayın. Cerrahi bölgelere analjezi ile sızın ve başın dorsal tarafının tabanında küçük bir kesi yapın.

Posterior servikal kasları açığa çıkarın ve bağlantı telinin halkasını kaslara bağlamak için kasların altına bir parça 3.0 naylon geçirin. Daha sonra, fare sağ tarafındayken, ventral boynun derisinde küçük bir dikey kesi yapın. Bu ventral kesiden deri altından 18 gauge bir iğneyi arkadaki kesiye doğru tünelleyin ve iğneyi ventral tarafta dışsallaştırmak için kateteri iğneden geçirin.

Fare sırtındayken, üst kesici dişlerin arkasına üç sıfırlı naylon iplik geçirin ve naylonu ısıtma yastığına bantlayın. Ardından, kuyruğu ve ön ayakları gergin bir pozisyonda sabitleyin. Şimdi, diseksiyon mikroskobunu odaklayın ve juguler ven görüntülenene kadar ventral insizyondaki yağ dokusunu ve bezleri nazikçe uzaklaştırmak için forseps kullanın.

Forsepsin ucunu damar ve bağ dokusu arasına yerleştirin ve damar etrafındaki bağ ve deri altı dokusundan bağımsız olarak juguler veni künt bir şekilde incelemek için forsepsleri damara paralel olarak tekrar tekrar açın. Damar izole edildiğinde, künt forsepsleri juguler venin altına yerleştirin ve damarın altına üç adet sıfır ipek iplikten iki parça besleyin. Kraniyal ligatür için juguler venin çatallanmasına yakın bir parça ve kaudal ligatür için sternokleidomastoid kasa yakın bir parça yerleştirme.

Kateteri yerleştirirken damarı germek ve aşırı kanamayı önlemek için kraniyal ve kaudal ligatürleri sıkın. Gevşek bir bağ oluşturmak için üçüncü bir iplik kullanın, ardından mikro makas kullanarak, kateteri geçecek kadar büyük kraniyal ve kaudal ligatürler arasındaki damar boyunca bir kesi yapın. Forseps kullanarak, kateteri damarın içine 11 milimetre yerleştirin ve kateteri orta ligatür ile gevşek bir şekilde sabitleyin.

Doğru yerleşimini doğrulamak için kateteri steril tuzlu su ile nazikçe yıkayın. Ardından kaudal ve orta bağı sıkıca sıkın. Kateteri sabitlemek için kaudal ve orta ligatürlerin uçlarını birbirine bağlayın.

Her bağlamadan sonra kateteri yıkayarak damarın düğümler tarafından tıkalı olmadığının doğrulanması. Son olarak, kraniyal ligatürü de bağlayın. Ardından, kesiyi beş sıfır ipek dikişle kapatın.

Çekal Ligasyon ve Delinme için, periton boşluğuna nüfuz etmemeye dikkat ederek karnın alt yarısının derisinden bir santimetre orta hat kesisi yapın. Abdominal kas sisteminin linea alba'sını tanımladıktan sonra. Periton boşluğuna giriş yapmak için kaslar arası bir kesi yapın.

Künt anatomik forseps kullanarak, çekumu izole edin ve dışsallaştırın. Bağırsak devamlılığının sağlanması için ileoçekal valvin daralmamasına özen gösterilerek çekumu uzunluğunun %50'si oranında üç adet sıfır ipek dikişle bağlayın. Ardından, iğneyi çıkardıktan sonra açıklığı sağlamak için delikten az miktarda dışkı çıkararak, ligasyon ile çekumun ucu arasında tek bir geçiş ve geçiş deliği ile çekumu delmek için 18 gauge bir iğne kullanın.

Bağırsağı karın boşluğunda yeniden konumlandırın ve peritonu ve cildi beş sıfır ipek dikişle kapatın. Fare sırtüstü pozisyondayken, kateteri bağlantı teline bantlayın. Ardından, fareyi iç içe geçme malzemesi ve tahta bir blok içeren ayrı bir kafese yerleştirin.

Ayarlanabilir kelepçeli bir stand kullanarak, döndürme cihazını kelepçeye yerleştirin ve metal bağlantı telinin serbest kısmını fırdöndünün dönme noktasına sıkıca bantlayın. Ardından, kafesi 12 saatlik aydınlık ve karanlık döngülerle 27 santigrat derece sıcaklık kontrollü bir hayvan dolabına yerleştirin. Dengeli kolloidler ve kristaloidlerin uygun karışımını içeren şırıngayı venöz hatta takın ve sıvı resüsitasyonunu saatte 0.3 milimetrede başlatmak için doğru bir şırınga tahrikli infüzyon pompası kullanın.

Altı saat sonra analjezi ve antibiyotik enjekte edin. Bir beş günlük ve bir yedi günlük çekal ligasyon ve ponksiyon deneyinin sağkalım eğrilerinin analizi, hayatta kalma oranlarının iki çalışma arasında beşinci güne kadar önemli ölçüde farklı olmadığını ve deney düzeneğinin tekrarlanabilirliğinin altını çizdiğini ortaya koymaktadır. Vena jugulariste venöz kateter yoluyla antibiyotikler, sıvı resüsitasyonu ve total parenteral nütrisyon ile birlikte çekumun %50'sinin bağlanması, bir günlük kritik hastalıktan sonra %13'lük bir mortalite ile sonuçlanır.

Üç günlük kritik hastalıktan sonra %24 ölüm oranı ve beş günlük kritik hastalıktan sonra %27 ila %31 ölüm oranı ve yedi günlük kritik hastalıktan sonra %36 ölüm oranı. Bununla birlikte, kritik hasta farelerin besin alımıyla sınırlı kalorili olan sağlıklı para ile beslenen fareler, her iki deneyde de herhangi bir mortalite göstermedi. Tekniğe hakim olmak için 10 ila 15 hayvandan sonra, kateter yerleştirilebilir ve prosedürler uygun şekilde yapılırsa CLP 45 dakikalık bir süre içinde gerçekleştirilebilir.

Bu işlemi gerçekleştirirken, kateteri damar içine dikkatlice yerleştirmeyi unutmayın. Kateterin kalbe çok fazla yerleştirilmesi kalp aritmilerine neden olur. Yeterince uzağa yerleştirilmediğinde, kolayca çıkarılabilir.

Her zaman kateterin damarın lümeni içine yerleştirildiğini onaylayın. Kateter damar duvarının katmanları içine yerleştirilirse, sıvılar çevre dokulara sızacaktır. Bu model, kapsamlı bir cerrahi prosedür ve hayvanın günlük yoğun bakımını gerektirebilir.

Ancak, akut ve uzun süreli kritik hastalıkların birçok yönünün incelenmesine izin veren istikrarlı ve tekrarlanabilir bir model ile sonuçlanır.