Name: Kritik Hastalık Fare Modeli Sıvılar, Uyuşturucu ve Besin İdaresi için Santral Venöz Hattı Kullanımı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-02T14:45:00.000+00:00
Duration: 9 min 17 s
Description: Keşfedin santral venöz kateter ve CLP ile uzamış kritik hastalık fare modeli oluşturma yöntemini. Bu teknik yoğun bakım protokollerinde metabolik değişiklikleri incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

GVdB, Leuven Üniversitesi (KU Leuven) aracılığıyla, Flaman Hükümeti (METH08/07) tarafından finanse edilen Methusalem Programından uzun vadeli yapısal araştırma desteği alır ve Avrupa Birliği yedinci çerçeve programının Fikirler Programından Avrupa Araştırma Konseyi İleri Hibe AdvG-2012-321670 sahibidir. SET, Research Foundation-Flanders (FWO) Araştırma Görevlisi Bursu aldı.

protokol Hayvan Araştırmaları Leuven Etik İnceleme Kurulu Üniversitesi tarafından onaylanmıştır. Venöz Hattının 1. Hazırlık <ol><li> hızlı bir şekilde sıcak (&gt; 220 ° C), susam yağı içinde 60 cm mikrorenatan (MRE) boru orta kısmını daldırarak venöz kateter ucu hazırlayın. Daha sonra yavaşça birbirinden boru uçlarının hareket ettirerek dar bir çapa (dış çap (OD) &lt;0.5 mm) elde edecek tüpün orta kısmına uzanır. </li><li> 30 cm, her (bakınız Şekil 1, Tablo 1) iki parçaya boru kesmek için bir bisturi bıçağını kullanarak. </li><li> polietilen PE50 konnektörü kullanılarak polietilen boru PE10 için MRE boru bağlayın ve döner taban kısmına, bu PE10 boru bağlayın. PE10 boru için döner üst kısmı bağlayın ve Şekil 1 &#39;deki gibi PE50 konektör boru ile bir Luer saplama iğneye bağlayın. </li><li> Uygula güçlü hızlı actiBütün bağlantıların yapışkan yapıştırıcı ng ve hava ile yıkama ile sızıntı kateter test edin. Gaz kullanımdan önce kateter sterilize. </li></ol><img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/55553/55553fig1.jpg" /> Şekil 1: Venöz Hattı inşaatı. Venöz hat küçük bir çapa MTA, boru gerilmesi ve bir kemirgen döner cihaza polietilen boru ile bağlayarak hazırlanırlar. Farklı parçaların uzunlukları ile ilgili talimatlar için Tablo 1 &#39;e bakınız. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55553/55553fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> efsane </td><td> uzunluk </td><td> hacim </td></tr><tr><td> 1) Luer saplama iğnenin 22G, </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 2) PE50 - polietilen dan, 023&quot; x .038&quot; </td><td> 5 cm </td><td> 13 ul </td></tr><tr><td> 3) PE10 - polietilen 0,011&quot; x 024” </td><td> 50 cm </td><td> 30 uL </td></tr><tr><td> 4) Kemirgen Döner 20G </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 5) PE-10 </td><td> 15 cm </td><td> 9 uL </td></tr><tr><td> 6) PE-50 (bağlayıcı) </td><td> 5 cm </td><td> 13 ul </td></tr><tr><td> 7) MRE025 İpucu gergin mikrorenatan .025&quot; x 0,012&quot; </td><td> 30 cm </td><td> 27 ul </td></tr><tr><td> Toplam </td><td> 105 cm </td><td> 92 uL </td></tr></tbody></table> Tablo 1: Venöz Hattı inşaatı. Bu tablo, Şekil 1 için bir açıklama sağlamaktadır. 2. Anestezi ve Ön cerrahi İşleme <ol><li> (- 32 gr 27), 24 haftalık erkek C57BL / 6J fareleri kullanın. NOT: Bu yaş yoğun bakım hastalarının yaş ortalaması daha iyi karşılık olarak biz 24 haftalık fareleri (olgun yetişkin) kullanın. Biz östrojenlerin halkalı etkisini önlemek için sadece erkek fareler kullanın. Tercih edilen ise teknik aynı zamanda, daha küçük (16 haftalık farelerde test) Hayvanlar ve kadın üzerinde de kullanılabilir. </li><li> Kullanmadan önce tüm cerrahi aletler sterilize. herhangi bir hava kabarcıklarını çıkarmak için ve açıklık ve potansiyel sızıntı testi için tuzlu su ile steril ev yapımı venöz kateter yıkayın. </li><li> 80 cm uzunluğunda bir metal teli (0.8 mm çap) Kesme katlanarak iki katını ve bir döngü yaptırın. döngü iki tel üzerinden 3 inci kurşun. 3 inci yoluyla sondanın ucunu kılavuz metal telin, kateterin takın. NOT: Metal bağlantı teli kateter bağlı olduğu döner dönme için gereklidir. Bu şekilde, fare venöz hat engellemeden, serbestçe hareket edebilir. </li><li> m anestezisi0.03 ml ketamin (100 mg / kg) ve 0.02 ml ksilazin (/ kg, 13 mg) karışımı bir intraperitoneal (İP) enjeksiyon ile ouse. Bu anestezi reflekslerin yokluğu kontrol ederek yeterli olduğundan emin olun. Yavaşça dilin yutma yoluyla boğulma tehlikesini forseps ile dış fare dilini çekin. Not: 10 dakika sonra, fare hala geri çalışırsa konusu uzuvların bir 0.01 mL bolus olarak ek ketamin verir. </li><li> karın, boynun ventral tarafına (çene, sternum ve köprücük kemiğinin arasındaki üçgen) dahil olmak üzere cerrahi alanı tıraş ve) kafa tabanındaki kürek kemikleri arasında. </li><li> Bir önceden ısıtılmış ısıtma yastığı üzerinde pozisyonda fare yerleştirin,% 70 etanol ile cilt dezenfekte ve kurumasını gözü korumak için oftalmik yağlayıcı küçük bir miktar uygulanır. 0.2 ml ropivakain (/ kg 0.67 mg) ile cerrahi siteleri (arka karın, boyun-ön ve arka) infiltre. </li><li> Fare yüzükoyun pozisyonda hareketsiz iken, sırt tarafında dibinde küçük bir kesi yapmakbistüri veya makas ile başın. arka servikal kas Açığa ve kas altında bir 3.0 naylon iplik gelen 3,0 naylon bağlantı telinin döngü kas bağlar. </li><li> onun sağ tarafta fare yerleştirin. bir neşter veya makas ile ventral boyun derisinde küçük bir kesi yapın. Görsel kılavuzluğunda, tünel iğne boyunca önceden yapılmış ve kateteri iplik arkasında insizyon doğru ventral kesikten 18-gauge iğne deri altından ventral tarafında da exteriorize. </li><li> Sırtında fare yerleştirin. ısıtma yastığına fare ve bandın aşağı üst kesici dişleri arkasında 3.0 naylon geçirin. oksijen (/ dk 2L) vermek için bir yüz maskesi baş elde edin. kuyruk ve iki ön ayakları aşağı bantlayarak gerilmiş bir pozisyonda fare sabitleyin. Not: tek başına ketamin-ksilazin anestezi yeterli değilse, inhale izofluran (0,5-1,5%) ameliyat sırasında teslim edilebilir. </li></ol><pclass = &quot;jove_title&quot;&gt; 3. Bir Kronik kalıcı kateter yerleştirilmesi <ol><li> mikroskop altında fare yerleştirin. şahdamarı görüntülenmiştir kadar ventral boyun önceden yapılan kesi olarak, nazikçe uzak forseps ile yağ dokusu ve bezleri kızdırmak. </li><li> Açık açık ven ve bağ dokusu ile forseps ucu yerleştirme ve damar paralel olarak sürekli forseps açarak geminin üzerinde ve çevresinde bağ ve subkütan doku jugular damar boşaltmak için teşrih. Bu itibarla, damara hasar kaçınılacaktır. </li><li> ven altında künt forseps koyarak şah damarı izole edin. damar altında 3.0 ipek iplik üç adet besleme, juguler ven (kafatası bağ) ve sternocleidomastoid kas (kaudal bağ) yakın bir parçanın bifürkasyon pozisyonu tek parça yakın. kranyal bitişik harfleri ve ven esneme ve kateter yerleştirilmesi sırasında aşırı kanamayı önlemek için kaudal ligatürün sıkın. Tyani orta iplikle gevşek bir ligatür sonradan kateterin kolayca sabitlenmesini sağlamak için. </li><li> Mikro makas kullanarak, kranial ve kaudal bitişik harfler ve kateter geçecek kadar büyük arasındaki damar boyunca bir kesi yapmak. forseps ile kateter tut ve kateter damar içine 11 mm yerleştirin. Gevşek orta bitişik harfleri kapalı bağlayarak deriye tespit ve yavaşça steril tuzlu su ile yıkanmak suretiyle doğru yerleşimi onaylayın. </li><li> sıkıca gemi ve kateter etrafında orta ve kaudal bitişik harfleri kapalı bağlayarak kateter sabitleyin. Kravat sıkıca kateteri sabitlemek için bir araya kaudal ve orta ligature uçları. knot her düğüm yaptıktan sonra kateter ile yıkanması ile, damar tıkayan olmadığından emin olun. Son olarak, kaudal ve kranial ligatures kravat. 5.0 ipek dikişlerle kesi kapatın. </li></ol> 4. çekal bağlama ve delme <ol><li> bistüri veya makas ile karın alt yarısının deri yoluyla 1 cm ensizyon olun;periton boşluğuna nüfuz için dikkatli olun. </li><li> Karın kas linea alba belirlemek ve periton boşluğuna giriş kazanmak için bir intermusküler kesi yapmak. çekum bulun ve çekum izole etmek ve bunu exteriorize künt anatomik forseps kullanır. </li><li> 3.0 ipek sütürle uzunluğunun% 50 çekum Arter. Bağırsak süreklilik korunur, böylece ileoçekal valf bağlanması için değil emin olun. </li><li> yoluyla ve üzerinden tek bir tarafından 18-gauge iğne ile çekum delikli ligasyonu ve çekum ucu arasındaki delik yarıda. iğne ayrılmasından sonra, açıklık sağlamak için delik dışkıların bir miktar a&#39;ya. </li><li> karın boşluğunda bağırsak yeniden getirin ve 5.0 ipek sütür ile periton ve cilt kapatmak. NOT: Ortalama olarak, yeni bir stajyer sorunsuz venöz kateter yerleştirmek ve 45 dakika içinde CLP gerçekleştirmek edebilmek için 10 ila 15 hayvan gerektirir. eğitim dönemi, bir anestezi / cerrahi rela sonra% 10 ted ölüm beklenebilir. </li></ol> 5. Post-cerrahi tedavi ve Akışkan Resüsitasyon <ol><li> yatar pozisyonda fare yerleştirin ve bantla eki tele kateteri sabitleyin. bağımsız bir kafese fareyi hareket ettirin. döner cihaz fare üzerinde 25 cm tutmak için ayarlanabilir kelepçe ile bir stand kullanın ve sıkı bir şekilde döner dönme noktasına metal bağlanma telin serbest bir bantlayın. </li><li> venöz hat sıvı canlandırma başlatmak için: dengeli kolloid ve kristaloid (4 1) karışımını ihtiva eden bir şırınga takın. </li><li> 12 saatlik aydınlık ve karanlık döngüsü ile kontrol edilen bir sıcaklıkta (27 ° C), hayvan kabininde kafes yerleştirin ve doğru bir şırınga odaklı infüzyon pompası ile intravenöz sıvı replasmanını (10 mL / kg / saat) başlar. Bu tür iç içe malzeme ve ahşap bir blok olarak kafes zenginleştirme sağlar. </li></ol> 6. Yoğun Bakım <ol><li> 6 saat post-operatif olarak, deri altından ağrı medicatio enjekteburada n ve antibiyotikler (0.3 mL buprenorfin (0.15 mg / kg) ve 0.2 mL imipenem (16.67mg / kg)). NOT: Kurumun veteriner politikaları yönettiği gibi standart laboratuvar hayvanları hekimliği uygulaması sonrasında ağrı kesici ilk dozu daha sonra başlangıçtaki cerrahi kesi öncesi ve verilir. Deri altı enjeksiyonları dikkatli bir şekilde deri altı alana enjekte edilmelidir. </li><li> 20 sonra, - sıvı verilmesi 24 saat sonra, toplam parenteral beslenme (6.67 ml / kg / saat) kristaloidler / kolloidleri değiştirin. NOT: uygulanan total parenteral beslenmenin (5.8 kcal / 24 saat) yoğun bakım ünitesinde hastaların erken kalori alımı benzer farelerin, günlük kalori ihtiyacının% 40 civarında kapsar. </li><li> Subkutanöz olarak enjekte edilmiş ağrı kesiciler ve antibiyotikler (0.6 mL buprenorfin (0.3 mg / kg) ve 0.2 mL imipenem (16.67 mg / kg) kritik hastalık dönemi boyunca, her 12 saatte bir uygulanması. </li><li> Gün boyunca hayvanlar en az 3 saatte bir kontrol edin. Bir acı vererek ıstırabı değerlendirinvalide fare face ölçeğine 11 dayalı puanı. yüksek ağrı skoru hayvanlar için izleme yoğunlaştırılması. </li></ol> Deney 7. Sonu NOT: onaylanması ve modeline ve insan uç noktaları için yönergeleri ve politikalarının şiddeti düzeyine önerileri Hayvan Araştırmaları Yerel Kurumsal Etik İnceleme Kurulundan aranmalıdır. Not: bloke kateterin kateter yöresizleştirilmesi gibi fonksiyonel olmayan bir venöz hat halinde, bir şırınga pompası ile ilgili sorunlar, hayvan çalışma dışı ve ötenazi. <ol><li> Deney süresi sonunda, derin 0.03 ml ketamin (100 mg / kg) ve 0.02 mL (13 mg / kg), ksilazin karışımı kullanılarak fare anestezi. kalp ponksiyonu ile kanı ile fare öldürülür. Mağaza -80 ° C&#39;de ilgi dondurulmuş doku örnekleri ek. </li></ol>

<ol><li>Angus, D. C., van der Poll, T. <a target="_blank" href="http://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMra1208623">Severe sepsis and septic shock.</a> N Engl J Med. 369 (9), 840-851 (2013).</li>
<li>Singer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Third+International+Consensus+Definitions+for+Sepsis+and+Septic+Shock+%28Sepsis-3%29%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3).</a> JAMA. 315 (8), 801-810 (2016).</li>
<li>Remick, D. G., Newcomb, D. E., Bolgos, G. L., Call, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+mortality+and+inflammatory+response+of+two+models+of+sepsis%3A+lipopolysaccharide+vs.+cecal+ligation+and+puncture%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Comparison of the mortality and inflammatory response of two models of sepsis: lipopolysaccharide vs. cecal ligation and puncture.</a> Shock. 13 (2), 110-116 (2000).</li>
<li>Copeland, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+inflammatory+response+to+endotoxin+in+mice+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Diagn+Lab+Immunol%22%5BJournal%5D)">Acute inflammatory response to endotoxin in mice and humans.</a> Clin Diagn Lab Immunol. 12 (1), 60-67 (2005).</li>
<li>Seok, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+responses+in+mouse+models+poorly+mimic+human+inflammatory+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Genomic responses in mouse models poorly mimic human inflammatory diseases.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (9), 3507-3512 (2013).</li>
<li>Rittirsch, D., Huber-Lang, M. S., Flierl, M. A., Ward, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunodesign+of+experimental+sepsis+by+cecal+ligation+and+puncture%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Immunodesign of experimental sepsis by cecal ligation and puncture.</a> Nat Protoc. 4 (1), 31-36 (2009).</li>
<li>Zolfaghari, P. S., Pinto, B. B., Dyson, A., Singer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+metabolic+phenotype+of+rodent+sepsis%3A+cause+for+concern%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+Care+Med+Exp%22%5BJournal%5D)">The metabolic phenotype of rodent sepsis: cause for concern.</a> Intensive Care Med Exp. 1 (1), 25(2013).</li>
<li>Radermacher, P., Haouzi, P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26266795">A mouse is not a rat is not a man: species-specific metabolic responses to sepsis - a nail in the coffin of murine models for critical care research.</a> Intensive Care Med Exp. 1 (1), 26(2013).</li>
<li>Dyson, A., Singer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+sepsis%3A+why+does+preclinical+efficacy+fail+to+translate+to+the+clinical+setting%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Animal models of sepsis: why does preclinical efficacy fail to translate to the clinical setting.</a> Crit Care Med. 37 (1 Suppl), S30-S37 (2009).</li>
<li>Osuchowski, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abandon+the+mouse+research+ship%3F+Not+just+yet%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Abandon the mouse research ship? Not just yet.</a> Shock. 41 (6), 463-475 (2014).</li>
<li>Langford DJ1, B. A., Chanda, M. L., Clarke, S. E., Drummond, T. E., Echols, S., Glick, S., Ingrao, J., Klassen-Ross, T., Lacroix-Fralish, M. L., Matsumiya, L., Sorge, R. E., Sotocinal, S. G., Tabaka, J. M., Wong, D., van den Maagdenberg, A. M., Ferrari, M. D., Craig, K. D., Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coding+of+facial+expressions+of+pain+in+the+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse.</a> Nat Methods. 7, (2010).</li>
<li>Hollenberg, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+hyperdynamic+murine+model+of+resuscitated+sepsis+using+echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Characterization of a hyperdynamic murine model of resuscitated sepsis using echocardiography.</a> Am J Respir Crit Care Med. 164 (5), 891-895 (2001).</li>
<li>Heuer, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cecal+ligation+and+puncture+with+total+parenteral+nutrition%3A+a+clinically+relevant+model+of+the+metabolic%2C+hormonal%2C+and+inflammatory+dysfunction+associated+with+critical+illness%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Cecal ligation and puncture with total parenteral nutrition: a clinically relevant model of the metabolic, hormonal, and inflammatory dysfunction associated with critical illness.</a> J Surg Res. 121 (2), 178-186 (2004).</li>
<li>Conti, M., Merlani, P., Ricou, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognosis+and+quality+of+life+of+elderly+patients+after+intensive+care%5BTitle%5D)+AND+%22Swiss+Med+Wkly%22%5BJournal%5D)">Prognosis and quality of life of elderly patients after intensive care.</a> Swiss Med Wkly. 142, (2012).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Biz sıvılar, uyuşturucu ve besin yönetimi için bir merkezi venöz kateter kullanımı ile sepsis ikna etmek çekal bağlama ve delme yöntemi birleştirerek, kritik hastalığın klinik açıdan daha anlamlı fare modelini geliştirdi. Bu deney düzeneği yeniden üretilebilir, burada insan klinik durumu 1 taklit eden bir kararlı ölüm oranı kritik hastalık ve uzun süreli bir faz çalışma sağlar. Çekal bağlama ve delme yoğun sepsis 6, <sup class="xref"...

Kritik hastalık, bir ya da daha fazla organ sistemlerinin işlev yoğun tıbbi destek tatbik sürece hastanın ölür ölçüde engellenmektedir edildiği bir hastalık durumudur. Yoğun bakım ünitesi (ICU), travma, karmaşık operasyon, yanıklar, sepsis hastalık alevlenmeler arasında değişen, değişebilir kabul için başlangıç ​​nedeni ise, her kritik hasta diğerleri arasında, hipoperfüzyon, hipoksi ve aşırı enflamasyonun neden olduğu hücresel hasara muzdarip , olan, organ yetmezliğine yol açar. Hastaların çoğu akut hakaret hayatta ancak hastaların önemli bir kısmı hemen kurtarmak ve uzun süreli yoğun bakım gerekmez. Bunlar nedeniyle çoklu organ yetmezliği olmayan çözümünde ölüm riski yüksektir. Bundan başka, kritik hastalık uzun faz patogenezi halen tam olarak anlaşılmamış olan derin kas zayıflığı ve endokrin ve metabolik değişimi ile hallmarked edilir. Çeşitli rOdent modeller kritik bakım araştırma ortamında kullanılmaktadır. iki çok kullanılan model lipopolisakarit (LPS) ve çekal bağlama ve delme (CLP) eksojen bulunmaktadır. Her iki model enfeksiyona, düzeni bozulmuş bir konakçı tepkisi neden olduğu bir yaşamı tehdit eden organ fonksiyon bozukluğu olarak tanımlanır sepsis, akut faz, taklit edilmesi için geliştirilmiş ve dünya çapında yoğun bakım ünitesinde, 1, 2 giriş için ana nedenlerinden biridir. Sadece geçici olarak sitokinlerin salgılanmasını ve hayvan 3 hemodinamik durumunu etkileyen olarak LPS modeli birçok dezavantajı vardır. İnsanlarda farklı olarak, kemirgenler de endotoksin karşı dayanıklıdırlar ve endotoksin, &#39;yüksek dozlarda&#39; kullanımı burada ayrıca bu yöntem 4, 5 geçerlilik endişelere yol, hipotansiyon ve mortaliteyi üretmek için gereklidir. Diğer model çekal bağlama ve delme modeli (CLP)Bir iğne deliği boyunca ve üzerinden, ardından çekum bir bölümünün bir ligasyonu bulunmaktadır. Bu prosedür, kan bölmesi içine bakteri translokasyonu ile doku hasarı ile polimikrobial karın enfeksiyonu neden olur. Bu sistemik inflamatuar yanıt ve sepsis gelişimi tetikler. Hyperinflammation, vazodilasyon, hipotansiyon ve artmış kardiyak çıkışı 6, 7: CLP modeli geniş ölçüde sepsis ana özelliklerini üretir akut kritik hastalık için bir hayvan modeli olarak kabul edilmiştir. Ancak, bu model olmayan çözme çoklu organ yetmezliği, kas zayıflaması ve endokrin ve kritik hastalığın uzun süreli aşaması için tipik olan metabolik değişimler, çalışma izin vermez. Fare modellerinden bulgular her zaman insan 8 ayara tercüme edilemez çünkü Dahası, son zamanlarda kritik hastalık için fare modellerinin geçerliliği, sorguya çekildi, 9, 10. Olası bir açıklama, hasta insan hastaları önemli bir biçimde sağlanan destekleyici bakım kritik fareler için sağlanmıştır bakımı büyük ölçüde farklı olduğunu olabilir. Bu nedenle, daha yakın insan ayar benzemeye ve kritik hastalık uzun faz araştırılmasını sağlamak için, bu tür yaygın damar içi sıvı uygulama ve antibiyotik olarak, insanlarda, verilen akut yoğun bakım taklit eden bir fare modeli geliştirilmiştir ve izin veren örneğin beslenme desteği olarak kritik hastalık, uzun süreli faz hayatta kalmak için destekleyici tedavi uygulanması. Bu amaçla, sepsis altın standardı olan, CLP kaynaklı sepsis fare modeli uyarlanmış ve akışkanların, beslenme ve ilaç verilmesini sağlayan bir merkezi venöz hat yerleştirilmiştir.

<table><tbody><tr><td>Buprenorfin</td><td>Ekuphar</td><td></td><td>Veterjezik 0.3 mg / mL</td></tr><tr><td>C57BL / 6&nbsp;</td><td>Janvier labs</td><td>C57BL/6JRj</td><td></td></tr><tr><td>kolloidler</td><td>Fresenius Kabi</td><td></td><td>Volulyte %6</td></tr> <tr><td>kristaloidler</td><td>Baxter</td><td></td><td>Plasmalyte a viaflo</td></tr><tr><td>Ethilon 3.0</td><td>Ethicon</td><td>F3211</td><td></td></tr><tr><td>Imipenem</td><td>MSD</td><td></td><td>Tienam 500&nbsp; enjeksiyon sıvısı için mg toz</td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Eurovet</td><td></td><td>Iso-vet</td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Eurovet</td><td></td><td>Nimatek 100 mg / mL</td></tr><tr><td>LocTite Super glue3 tüm plastikler ve nbsp;</td><td>Rectavit</td><td>119818</td><td></td></tr><tr><td>Mersilk 3.0</td><td>Ethicon</td><td>L192</td><td></td></tr><tr><td>Mersilk 5.0</td><td>Ethicon</td><td>F682</td><td></td></tr><tr><td>Microrenathane .025" OD x .012" ID</td><td>Bioseb</td><td>MRE-025</td><td></td></tr><tr><td>olimel N7E</td><td>Baxter</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PE10 - Polietilen .011" x .024" &nbsp;</td><td>Instech Solomon</td><td>BTPE-10</td><td></td></tr><tr><td>PE-50 boru .023 "x.038"</td> <td>Instech Solomon</td><td>BTPE-50</td><td></td></tr><tr><td>Kemirgen Döner 20 G</td><td>Bioseb</td><td>RS-20G&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Ropivaca&iuml; ne</td><td>Astrazenica</td><td></td><td>Naropin 2&nbsp; mg/mL</td></tr><tr><td>Ksilazin</td><td>VMD</td><td></td><td>Ksilazin hidroklorür %2</td></tr></tbody></table>

kritik hastalık fare modeli sıvılar, uyuşturucu ve besin İdaresi için santral venöz hattı kullanımı

Use of a Central Venous Line for Fluids, Drugs and Nutrient Administration in a Mouse Model of Critical Illness

Bu protokol uzamış kritik hastalığın merkezi Kateterize fare modeli tarif etmektedir. İnsan klinik ayarını taklit etmek sıvılar, uyuşturucu ve besin yönetimi için bir merkezi venöz kateter kullanımı ile sepsis ikna etmek çekal ligasyon ve delme yöntemi birleştirir. Kritik hastalarda hayatta kalmak için yoğun tıbbi desteğe ihtiyaç. Hastaların çoğunluğu birkaç gün içinde iyileşir ederken, hastaların yaklaşık dörtte uzamış yoğun bakım ihtiyacı ve çoklu organ yetmezliği olmayan çözme ölme riski yüksektir. Bundan başka, kritik hastalık uzun faz patogenezi halen tam olarak anlaşılmamış olan derin kas zayıflığı ve endokrin ve metabolik değişiklikler dolayı ayar edilmektedir. yoğun bakım araştırmalarında en çok kullanılan hayvan modeli sepsis ikna etmek çekal bağlama ve delme modelidir. Bu, insan sep benzer akut enflamatuar ve hemodinamik değişiklikler ile çok tekrarlanabilir bir model, birHastalığın akut faz incelemek üzere tasarlanmıştır sis,. Ancak, bu model klinik insan durumdan farklıdır ve kritik hastalık uzamış aşamasını incelemek için geliştirilmemiştir yüksek öldürücülüğü ile hallmarked edilir. Bu nedenle, daha iyi kritik hastalığın insan klinik durumu taklit etmek için, bize klinik açıdan destekleyici bakım yönetmek için izin şah damarında bir santral venöz kateter yerleştirerek tekniğini uyarladı. Bu fare modeli hayvanların geniş bir cerrahi işlem ve günlük yoğun bakım gerektirir, ancak Hastalığın akut ve uzun süreli fazın ilgili bir modelde sonuçlanır.

Yukarıda tarif edildiği gibi, C57BL / 6 fareleri kritik yapılmıştır. İki zaman noktalarında kadar sonrası CLP hayatta kalmasını değerlendirmek için iki deney gerçekleştirildi: hayatta kalma gün 7 (n = 22) kadar günde 5 (n = 15) ve hayatta kalma sonrası CLP kadar. iki deneyin hayatta kalma eğrileri deney düzeneği tekrarlanabilirliğini gösteren (gün 5 kadar karşılaştırıldığında) önemli ölçüde farklı değildi. Sigara hayatta kalan hayvanlar sebebiyle ulaşan insan uç noktalara ölümü bulunamad...

Bu protokol, uzun süreli kritik hastalığın merkezi olarak kateterize edilmiş bir fare modelini tanımlar. Sepsisi indüklemek için çekal ligasyon ve ponksiyon yöntemini, insan klinik ortamını taklit etmek için sıvılar, ilaçlar ve besin uygulaması için merkezi bir venöz hat kullanımı ile birleştiriyoruz.

Kritik Hastalık Fare Modeli Sıvılar, Uyuşturucu ve Besin İdaresi için Santral Venöz Hattı Kullanımı

This protocol describes a centrally catheterized mouse model of prolonged critical illness. We combine the cecal ligation and puncture method to induce ...

Sekal ligasyon ve perforasyon (CLP) için merkezi olarak kategorize edilmiş bu fare yönteminin genel amacı, insan klinik ortamını taklit etmek için yoğun bakım önlemleriyle birlikte, uzamış kritik hastalığın tekrarlanabilir bir modelini oluşturmaktır. Bu yöntem, yoğun bakım tıbbı alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Akut ve uzamış kritik hastalıklar sırasında meydana gelen endokrin ve metabolik değişikliklerin patogenezi hakkında.Bu tekniğin temel avantajı, standartlaştırılmış CLP tekniğini sıvı, ilaç ve besin uygulaması için kullanılan merkezi bir venöz hat ile birleştirmesidir. Prosedürü laboratuvarımızdan teknisyen Thomas Dufour gösterecek. Venöz hat ucunu hazırlamak için, 60 santimetre uzunluğundaki bir mikro-renathane tüp parçasının orta kısmını hızlıca 220 °C veya daha sıcak susam yağına daldırın.Tüpün orta kısmını daraltmak için uçlarından hafifçe çekin ve bir neşter ucu kullanarak tüpü 30 santimetrelik iki eşit parçaya bölün. Şimdi, gösterildiği gibi kateteri oluşturmak için tüpü bir polietilen PE 50 konnektöre, bir döner başlığa ve bir Luer uçlu iğneye bağlayın ve tüm bağlantı noktalarına güçlü, hızlı etkili yapıştırıcı uygulayın. Yapıştırıcı kuruduğunda, sızıntı olup olmadığını kontrol etmek için kateterden hava geçirin; ardından, 0,8 milimetre çapında metal bir telden 80 santimetrelik bir parça kesin ve teli kendi üzerine katlayarak bir halka oluşturun.Üç adet inciyi loopun çift katlanmış teli üzerinden geçirin ve kateteri tele sabitlemek için sterilize edilmiş kateterin ucunu üç incinin arasından yönlendirin. 27 ila 32 gram ağırlığında, 24 haftalık erkek c57 black six faresini anestezi altına alın ve sedasyonun gerçekleştiğini ayak parmağı sıkıştırma testine verilen yanıtın yokluğuyla doğrulayın. Dilin yutulmasını önlemek için pens kullanarak dili ağızdan nazikçe dışarı çekin.Ardından, cerrahi bölgeyi tıraş edin, daha sonra fareyi önceden ısıtılmış bir ısıtma pedinin üzerine yüzüstü pozisyonda yerleştirin. Açıkta kalan cildi %70 ethanol ile dezenfekte edin ve az miktarda oftalmik lubrikant uygulayın. Cerrahi bölgelere analjezi infiltre edin ve başın dorsal tarafının tabanında küçük bir insizyon yapın.Posterior servikal kasları açığa çıkarın ve bağlantı telinin halkasını kasa bağlamak için kasların altına bir parça 3.0 naylon geçirin. Ardından, fareyi sağ yan tarafı üzerine getirerek ventral boyun derisinde küçük dikey bir insizyon yapın. 18 gauge bir iğneyi, bu ventral insizyondan sırt bölgesindeki insizyona doğru subkütan olarak tünelleyin ve kateteri iğne aracılığıyla geçirerek iğneyi ventral taraftan dışarı çıkarın.Fare sırt üstü pozisyondayken, üç sıfır naylon ipi üst kesici dişlerin arkasından geçirin ve naylon ipi ısıtma pedine bantlayın. Ardından, kuyruğu ve ön uzuvları gergin bir pozisyonda sabitleyin. Şimdi, diseksiyon mikroskobunu odaklayın ve jugular ven görünür hale gelene kadar ventral insizyondaki yağ dokusunu ve bezleri penset kullanarak nazikçe kenara çekin.Pensetin ucunu ven ile bağ dokusu arasına yerleştirin ve juguler veni, damar etrafındaki bağ ve deri altı dokudan küt diseksiyonla ayırmak için penseti venle paralel şekilde defalarca açıp kapatın. Damar izole edildiğinde, küt uçlu penseti juguler venin altına yerleştirin ve venin altından iki parça üç sıfır ipek iplik geçirin. İpliklerden birini kranial ligatür için juguler venin bifurkasyonuna yakın, diğerini ise kaudal ligatür için sternokleidomastoid kasına yakın konumlandırın.Kateter yerleştirilirken veni germek ve aşırı kanamayı önlemek için kranial ve kaudal ligatürleri sıkın. Gevşek bir ligatür oluşturmak için üçüncü bir ip kullanın, ardından mikro makas kullanarak kranial ve kaudal ligatürler arasındaki ven boyunca kateterin geçebileceği büyüklükte bir insizyon yapın. Pens yardımıyla kateteri venin içine 11 milimetre yerleştirin ve kateteri orta ligatürle gevşekçe sabitleyin.Kateterin doğru yerleştirildiğini onaylamak için kateteri steril salin ile nazikçe yıkayın. Ardından, kaudal ve orta ligatürleri sıkıca sıkın. Kateteri sabitlemek için kaudal ve orta ligatürlerin uçlarını birbirine bağlayın.Her bağlamadan sonra kateteri yıkayarak venin düğümler tarafından tıkanmadığını doğrulayın. Son olarak, kranial ligatürü de bağlayın. Ardından, insizyonu beş sıfır ipek sütürlerle kapatın.Sekal Ligasyon ve Perforasyon için, periton boşluğuna girmemeye dikkat ederek karnın alt yarısının derisi boyunca bir santimetrelik bir orta hat insizyonu yapın. Karın kaslarının linea alba hattı belirlendikten sonra, periton boşluğuna giriş sağlamak için kaslar arası bir insizyon yapın.Küt uçlu anatomik pensler kullanarak sekumu izole edin ve dışarı çıkarın. Bağırsak sürekliliğinin korunması için ileoçekal valvi sıkmamaya dikkat ederek, sekumu uzunluğunun %50'sinden üç sıfır ipek sütürlerle ligatize edin. Ardından, ligasyon ile sekum ucu arasındaki orta noktadan, 18 gauge bir iğne ile sekumu tek bir kez boydan boya delin; iğneyi çıkardıktan sonra açıklığın sağlandığından emin olmak için delikten küçük bir miktar dışkı dışarı çıkarın.Bağırsakları karın boşluğuna yeniden yerleştirin, peritonu ve cildi beş sıfır ipek sütürlerle kapatın. Fare sırtüstü pozisyondayken, kateteri bağlantı teline bantlayın. Ardından, fareyi yuvalama malzemesi ve ahşap bir blok bulunan bireysel bir kafese yerleştirin.Ayarlanabilir bir klemense sahip bir stand kullanarak, döner düzeneği klemense yerleştirin ve metal bağlantı telinin boşta kalan kısmını döner düzeneğin dönme noktasına sıkıca bantlayın. Ardından, kafesi 12 saatlik ışık ve karanlık döngülerine sahip 27 °C sıcaklık kontrollü bir hayvan kabinine yerleştirin. Dengeli kolloid ve kristaloidlerin uygun karışımını içeren şırıngayı venöz hatta takın ve 0.3 mL/saat hızında sıvı resüsitasyonunu başlatmak için hassas bir şırınga pompalı infüzyon pompası kullanın.Altı saat sonra analjezi ve antibiyotik enjekte edin. Bir adet beş günlük ve bir adet yedi günlük sekal ligasyon ve perforasyon deneyinin sağkalım eğrilerinin analizi, sağkalım oranlarının beşinci güne kadar iki çalışma arasında anlamlı bir farklılık göstermediğini ortaya koymakta ve deneysel düzeneğin tekrarlanabilirliğinin altını çizmektedir. Sekumun %50'sinin ligasyonu; antibiyotikler, sıvı resüsitasyonu ve vena jugularis'e yerleştirilen venöz kateter yoluyla toplam parenteral beslenme ile kombine edildiğinde, kritik hastalığın birinci gününün ardından %13 oranında mortalite ile sonuçlanır.Kritik hastalığın üçüncü gününden sonra %24 mortalite, beşinci gününden sonra %27 ila %31 mortalite ve yedinci gününden sonra %36 mortalite gözlemlenmiştir. Ancak, besin alımları kritik düzeyde hasta farelerin alımına göre kalori kısıtlamasına tabi tutulan sağlıklı para beslemeli fareler, her iki deneyde de herhangi bir mortalite göstermemiştir. Tekniğe hakim olmak için 10 ila 15 hayvan kullanıldıktan sonra, prosedürler uygun şekilde gerçekleştirilirse, kateter yerleştirilebilir ve CLP işlemi 45 dakikalık bir süre içinde tamamlanabilir.Bu prosedürü uygularken kateteri vene dikkatlice yerleştirmeyi unutmayın. Kateterin kalbe çok fazla yerleştirilmesi kalp aritmilerini tetikleyebilir. Yeterince derin yerleştirilmemesi durumunda ise kateter kolayca dışarı çıkabilir.Kateterin damar lümeni içine yerleştirildiğinden daima emin olun. Kateter damar duvarı katmanları arasına yerleştirilirse, sıvılar çevre dokulara sızacaktır. Bu model kapsamlı bir cerrahi prosedür ve hayvanın günlük yoğun bakımını gerektirebilir.Ancak bu durum, akut ve uzun süreli kritik hastalıkların birçok yönünün incelenmesine olanak tanıyan stabil ve tekrarlanabilir bir modelle sonuçlanır.

use-central-venous-line-for-fluids-drugs-nutrient-administration

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Hiperinsülinemik öglisemik kelepçe, ya da insülin kelepçe, insülin etkisini değerlendirmek için altın...

Bilinçli Mesnetlenmemiş Fare hiperinsülinemik öglisemik Kelepçeleri

Intravenöz kendinden-yönetim (IVSA) paradigma kemirgenlerde kötüye ilaçların takviye özelliklerini incelerken altın standart olarak kabul edilir. Bu yazıda güvenilir IVSA verilerini elde etmek için gerekli deney prosedürleri ve cerrahi teknikler özetliyor. Özellikle, titiz kateter implantasyonu ve bakım vurgulanır.

Bir Fare Modelinde İntravenöz Öz Yönetim Yöntemleri

Bu videoda, ilaçlar ve izleyici boyalar gibi deneysel ajanların intravenöz olarak in vivo olarak verilebildiği bir fare modelinin juguler venine bir kateter implante etmek için bir yöntemi açıklıyoruz. Böyle bir düzenleme, diğer sistemlere bağlandığında, hemodinami ve kan örneklemesini izlemek için de kullanılabilir.

Deneysel Ajanların Kateter Bazlı İntravenöz Enjeksiyonu: Fare Modelinde Deneysel Ajanların Juguler Ven Yoluyla İntravenöz Olarak Verilmesi İçin Bir Teknik

Hemodinamiği ölçmek, sıvı sağlamak ve kan örneklemesi yapmak için vasküler erişimler, herhangi bir küçük hayvan modeli çalışması için önemlidir. Anestezi uygulanmış bir sıçanda monitörizasyon, infüzyon ve örnekleme yapmak üzere bir sisteme bağlanmak üzere karotis arter ve ortak juguler ven içine kateter implantasyonu için bir teknik sunuyoruz.

Karotis Arter ve Ven Juguler kateterizasyon bir Bilinçli Rat Modelinde, İnfüzyonları ve Kan Örnekleme hemodinamik Tedbirleri Gerçekleştirme

Bu film farelerde sistemik ve hepatik hemodinamik kazanmak için nasıl gösterir. Tüm izleme hayati parametrelerin, sistemik kan basıncı, santral venöz basınç, ortak hepatik arter akım hızı ve portal ven basıncı yanı sıra farelerde portal akış hızı edinimini içerir.

Farelerde Sistemik ve Karaciğer Hemodinamik Parametrelerin İzleme

Burada bir protokolü açıklayan veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu (ECMO) entübe sigara içinde tekniği, kendiliğinden nefes fare mevcut. Bu fare modeli ECMO, etkili akut deneysel çalışmalar ve son aşama akciğer hastalıkları uygulanabilir.

Veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu bir mouse

Bir aokaval fistül, her iki duvar üzerinden Vena Cava inferior içine murine infra-renal aort delip tarafından oluşturuldu ve inferior vena cava kısmi ligasyon yoluyla onun çıkış bir stenoz oluşturulması izledi. Bu tekrarlanabilir model, Merkezi venöz stenozu incelemek için kullanılabilir.

Bir outflow stenozu ile Aokaval fistül kullanarak Merkezi venöz stenozis murine modeli

Bu protokol, farelerde çoklu intravenöz bolus dozu uygulaması ve invaziv hemodinamik izleme yürütmek için adım adım bir prosedür sağlar. Araştırmacılar bu protokolü pulmoner arter hipertansiyonu için gelecekteki terapötik bileşik taraması için kullanabilirler.

Hipoksi ile İndüklenen Fare Pulmoner Arter Hipertansiyon Modelinde Çoklu İntravenöz Bolus Dozu ve İnvaziv Hemodinamik Değerlendirme

Bu protokol, apolipoprotein E (ApoE) eksikliği olan farelerde anjiyotensin II salınımı ile abdominal aort anevrizmasını indüklemek için ozmotik bir pompanın ve tekrarlanan ilaç tedavisi için juguler ven kateterli bir vasküler erişim portunun ardışık implantasyonunu tanımlar. Anevrizma gelişiminin 3D ultrason ile izlenmesi, dorsal implantlara rağmen etkili bir şekilde gerçekleştirilir.

Anjiyotensin II İndüklü Abdominal Aort Anevrizmasının Bir Fare Modelinde Santral Venöz Kateter ile İlaç Tedavisi ve 3D Ultrason ile İzleme

Bu makale, venöz ligasyon elde etmek için vasküler klipsler kullanarak bir fare kanseri modelinde venöz trombozu değerlendirmek için optimize edilmiş bir yöntem sunmayı amaçlamaktadır. Optimizasyon, trombozla ilişkili ölçümlerdeki değişkenliği en aza indirir ve insan kanseriyle ilişkili venöz trombozla alaka düzeyini artırır.

Bir Fare Kanser Modelinde Venöz Tromboz Testi

Hepatik insülin klerensi, glikoz homeostazını düzenlemek için kritik öneme sahiptir. Bu makale, farelerde yerinde karaciğer insülin klerens oranını doğrudan değerlendirmek için kullanıcı dostu bir hepatik perfüzyon prosedürünü açıklamaktadır.

Farelerde İnsitülin Klerensinin Yerinde Karaciğer Perfüzyonu ile Değerlendirilmesi

Keşfedin santral venöz kateter ve CLP ile uzamış kritik hastalık fare modeli oluşturma yöntemini. Bu teknik yoğun bakım protokollerinde metabolik değişiklikleri incelemek için kullanılır.

Kritik Hastalık Fare Modeli Sıvılar, Uyuşturucu ve Besin İdaresi için Santral Venöz Hattı Kullanımı

Daha fazla video keşfet