Name: Sagittal düzlem kinematik yürüyüş analizi MOG35-55 için tabi C57BL/6 farelerde deneysel otoimmun ensefalomiyelit indüklenen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-11-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 2 s
Description: Öğrenin sagittal düzlem kinematik yürüyüş analizi ile C57BL/6 farelerinde EAE modelinde fonksiyonel motor bozukluklarını değerlendirmeyi. Bu yöntem, nörolojik hastalıklarda hareket bozukluklarını objektif olarak ölçer.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Sid Chedrawe filme ile onun teknik yardım için kabul etmek istiyoruz. Bu eser MS Society of Canada (EGID 2983) fon tarafından desteklenmiştir.

Bu iletişim kuralı uygun olarak hayvan bakım kuralları Kanada Konseyi ve laboratuvar hayvanlarının Dalhousie üniversite Komitesi tarafından kabul edildi.
 1. yansıtıcı işaretleri oluşturmak: <ol><li>bir el delik yumruk kullanarak bir yansıtıcı kağıdın üzerinden küçük daire için istediğiniz sayıyı yumruk. Her hayvan 5 işaretleri için tek bir kayıt gerektirir; iki büyük ve üç küçük işaretleri.</li>
	<li>İyi makas kullanarak, çevre çemberin ortasına doğru uzanan bir düz kesim olun.</li>
	<li>Yapışkan yüzeyi ortaya çıkarmak için işaretçiyi yedekleme kağıdı çıkarın. İyi forseps kullanarak, işaretçiyi sıkıca kavrama ve içinde bir koni şekli oluşturmak için parmağınızı kullanarak kendi kendine curl. Küçük bir işareti yapmak için koni sıkıca kıvırın. Büyük bir işareti yapmak için koni gevşek curl.</li>
	<li>Bir el tutkal tabancası kullanarak, koni ucu Forseps ile sürükleyici süre yapıştırıcı ile koni şeklindeki işaretçiyi içini doldurmak ve işaretçiyi bir düz parça karton için uygun. Tutkal çöken ve ışığın en iyi yansıması emin olmak için kayıt sırasında bükme işaretçiyi engeller. Tutkal ne zaman (yaklaşık 10 dakika) kuru, karton bir neşter ( şekil 1A) ile işaretçiyi kaldırmak.</li>
</ol> 2. Hayvan kayıt için hazırlamak <ol><li>Anesthetize fare ile bir indüksiyon odasına fareyi yerleştirerek isoflurane gaz (% 2.5; 2 litre/dak O 2). Fare bilinçsiz olduğunda, bu dolaşım bir su ısıtıcı battaniye üstüne yerleştirilmiş bir burun konisi yerleştirin. Anesthetization amacı fare işaretçisi yerleşim için immobilize etmektir; prosedür ağrılı değildir. Bu nedenle, anestezi derinliği değerlendirilmesi gerekmez.</li>
	<li>Her iki gözde bir topikal göz yağ uygulamak.</li>
	<li>Elektrik makası kullanarak istenen hindlimb tıraş. Ayak bileği başlar ve omurga ve kaburga altında genişletmek; hiçbir kürk yaptı bu marker yapışma zarar gibi olun. 
	Not: Burada, sağ hindlimb kaydedilmiştir; Ancak, her iki hindlimb-ebilmek var olmak kullanılmış.</li>
	<li>Kalıcı bir kalem kullanarak iliyak arması ve Kalça eklemi konumunu gösterir. İliyak kret sadece kaburgaların alt ve diz altında fare araya getirerek kolayca hissedilir &#39; s beden. 
	Not: Kalça eklemi esneme ve leğen kemiği ile kalça kemiği arasındaki eklem noktasını bulmak için bacak uzanan bulunabilir.</li>
	<li>Kullanma iyi forseps, sivri sonuna küçük bir işaretleyici kavramak ve hızlı yapıştırıcı tutkal Base'deki veya eşdeğer alternatif daldırma. Dördüncü basamak ucu üzerinde işaretçiyi yerleştirin ve kuru tutkal izin vermek 2-3 s için bir yerde tutun. Diğer iki küçük işaretleri metatarsofalanjiyal eklem ve ayak bileği üzerinde koyun aynı şekilde ( şekil 1B).</li>
	<li>Yer büyük işaretleri iliyak arması ve Kalça eklemi ( şekil 1B) aynı şekilde küçük işaretleyici olarak.</li>
	<li>Ve hemen bir transfer kafes kullanarak kayıt odasına transfer fare burun konisi çıkarın. Fareyi sabit koşu bandına yerleştirin ve anestezi tam kurtarma için sağlar.</li>
</ol> 3. Yürüyüş kayıt <ol>fare kayıt için <li>önceden &#39; s yürüyüş, koşu bandı üzerinde bilinen boyutlu bir kalibrasyon blok resim bir. 
	Not: Bu gerçek ölçümleri için dönüştürmek için video piksel sağlayacaktır. Kameranın yaklaşık 120 cm koşu bandı üzerinden yer almalıdır.
	<ol><li>Koşu bandı olarak konumunu aynı yükseklikte ve düzey kameraya. Kalibrasyon görüntü takip kayıtları için aynı kamera konumunu korumak.</li>
	</ol></li> <li>Fare tamamen anesteziden kurtarıldı kez yürüyüş başlar fare izin vermek a alçak hız (5 cm/s) için koşu bandı açmak. Öyle ki fare işaretçileri doğru kamera karşı karşıya koşu bandı kemeri yön olduğundan emin olun.</li>
	<li>Artış koşu hızı yavaş yavaş 20 cm/s; Bu en sağlıklı farelerde tutarlı bir yürüyüş için ideal hızıdır. 
	Not: tüm fareler aynı hızda yürüyüş ideal olsa da, bazı tutarlı bir şekilde bu hız ulaşmak mümkün olabilir.
	<ol>Fare 20 cm/s, yürümeyi kaydedemediği <li>gereken hız azaltmak ve bu not etmeyi unutmayın. Tutarlı adım döngüleri elde kadar koşu hızını azaltmak. 
		Not: Daha sonra veri analiz hız farklılıkları için ayarlayabilirsiniz.</li>
	</ol></li> <li>Fare sürekli yürüyen bir kez video kayıt başlangıç (Yani, tutarlı bir tempoda yürüyüş, değil yetiştirme veya yan yana dokuma). 8-12 ardışık adım döngüleri kaydetmiş olduğunuz kadar kayıt devam etmek. Kaydedilen her video için kayıt hızı, koşu bandı ve fare yan.</li>
	Kayıt tamamlandığında, <li>treadmill kapalı ve fareyi onun kafes dönmek. Diğer fareler tarafından geride kokuları gelen fareler davranışını değiştirebilir olarak koşu bandı iyice arasında kayıtlar temiz. Stresi azaltmak ve deri hasar için veri işaretleyicilerini çıkarmayın; Onları kendi başlarına kaldırmak fareler izin.</li>
</ol> 4. Analiz <ol><li>hareket analiz yazılımı kullanarak video işlemek. 
	Not: bizim deneylerde kullandık görüntüleme ve istatistiksel yazılım için tasarlanmış özel komut dosyalarını Dr. Nicolas Stifani tarafından yazılmış (Tablo malzemeleri görmek) bu. Aşağıdaki adımlar seçili hareket analiz yazılımı kullanılarak gerçekleştirilir.
	<ol><li>İşaretleri piksel koordinatlarını hulâsa--dan video ve Kalibrasyon video kullanarak, santimetre için piksel değerlerini dönüştürmek ve her karede ortak açıları hesaplamak.</li>
		<li>Başlangıcı ve böylece adım süresi ve uzunluğu hakkında bilgi edinme her adım döngüsünün sonuna tanımlamak.</li>
		<li>Öyle ki salıncak ve duruş 100 kare, sırasıyla temsil edilir adım döngüsü süresi 200 normalleştirilmiş çerçevelere normalleştirmek.</li>
	</ol></li> <li>Normalleştirilmiş çerçeveleri kullanarak hesaplama elektronik tablo yazılımı kullanarak veri analizi için kinematik parametreleri (bkz. Tablo malzeme).
	Belirli bir ortak ortalama açısı kurmak, normalleştirilmiş çerçevesi içinde bütün açıları ortalamasını almak için <ol><li>: <img src="/files/ftp_upload/56032/56032eq1v4.jpg" /> Not: burada x, açı değerini temsil eden bir normalleştirilmiş verilen çerçeve ve n normalleştirilmiş çerçeve numarası temsil eder.</li>
		<li>İçin belirli bir fare, belirli bir eklemin hareket aralığını kurmak için çıkarma normalleştirilmiş çerçeve kümesinde en büyük açıdan en küçük açı aşağıdaki gibi: 
		Hareket aralığını açı maksimum - açı minimum =. 
		Not: Burada en fazla açı ve açı en az olan normalleştirilmiş adım döngüsü içinde sırasıyla elde en büyük ve en küçük açılar.</li>
		<li>RMS farkı belirtmek için ilk satır taban çizgisi kayıt ortalama açıdan deneysel her zaman noktasının çıkarma. Ardından, her fark Meydanı, tüm kareleri alınmış değerler ve karekök ortalama ortalamasını alır. Denklemi aşağıdaki gibidir: <img src="/files/ftp_upload/56032/56032eq3v4.jpg" /> Not: burada <img src="/files/ftp_upload/56032/56032eq4.jpg" /> ortalama açı kayıt; satır taban çizgisinden temsil eder. y deneysel her zaman noktasından ortalama açıyı ifade eder; n ve normalleştirilmiş kare sayısını temsil eder. Kök demek karesi alınmış (RMS) farkı olarak yürüyüş--dan temel recordings sapma değerlendirmek için kullanılan bir ölçü birimi.</li>
	</ol></li> <li>Bilimsel grafik ve istatistik yazılım analiz ve (bkz: Malzemeler tablo) veri sunmak için kullanın.</li></ol>

<ol><li>Giladi, N., Horak, F. B., Hausdorff, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classification+of+gait+disturbances%3A+distinguishing+between+continuous+and+episodic+changes%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">Classification of gait disturbances: distinguishing between continuous and episodic changes.</a> Mov Disord. 28 (11), 1469-1473 (2013).</li>
<li>Kiehn, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decoding+the+organization+of+spinal+circuits+that+control+locomotion%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Decoding the organization of spinal circuits that control locomotion.</a> Nat Rev Neurosci. 17 (4), 224-238 (2016).</li>
<li>Akay, T., Tourtellotte, W. G., Arber, S., Jessell, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Degradation+of+mouse+locomotor+pattern+in+the+absence+of+proprioceptive+sensory+feedback%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Degradation of mouse locomotor pattern in the absence of proprioceptive sensory feedback.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (47), 16877-16882 (2014).</li>
<li>Hafezparast, M., Ahmad-Annuar, A., Wood, N. W., Tabrizi, S. J., Fisher, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+for+neurological+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurol%22%5BJournal%5D)">Mouse models for neurological disease.</a> Lancet Neurol. 1 (4), 215-224 (2002).</li>
<li>Basso, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basso+Mouse+Scale+for+locomotion+detects+differences+in+recovery+after+spinal+cord+injury+in+five+common+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains.</a> J Neurotrauma. 23 (5), 635-659 (2006).</li>
<li>Tatem, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+locomotor+measurements+using+an+open+field+activity+monitoring+system+for+skeletal+muscle+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Behavioral and locomotor measurements using an open field activity monitoring system for skeletal muscle diseases.</a> J Vis Exp. (91), e51785(2014).</li>
<li>Hetze, S., Romer, C., Teufelhart, C., Meisel, A., Engel, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gait+analysis+as+a+method+for+assessing+neurological+outcome+in+a+mouse+model+of+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Gait analysis as a method for assessing neurological outcome in a mouse model of stroke.</a> J Neurosci Methods. 206 (1), 7-14 (2012).</li>
<li>Preisig, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-speed+video+gait+analysis+reveals+early+and+characteristic+locomotor+phenotypes+in+mouse+models+of+neurodegenerative+movement+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">High-speed video gait analysis reveals early and characteristic locomotor phenotypes in mouse models of neurodegenerative movement disorders.</a> Behav Brain Res. 311, 340-353 (2016).</li>
<li>Leblond, H., L'Esperance, M., Orsal, D., Rossignol, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treadmill+locomotion+in+the+intact+and+spinal+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Treadmill locomotion in the intact and spinal mouse.</a> J Neurosci. 23 (36), 11411-11419 (2003).</li>
<li>Ueno, M., Yamashita, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinematic+analyses+reveal+impaired+locomotion+following+injury+of+the+motor+cortex+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Kinematic analyses reveal impaired locomotion following injury of the motor cortex in mice.</a> Exp Neurol. 230 (2), 280-290 (2011).</li>
<li>Zorner, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Profiling+locomotor+recovery%3A+comprehensive+quantification+of+impairments+after+CNS+damage+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Profiling locomotor recovery: comprehensive quantification of impairments after CNS damage in rodents.</a> Nat Methods. 7 (9), 701-708 (2010).</li>
<li>Pearson, K. G., Acharya, H., Fouad, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+electrode+configuration+for+recording+electromyographic+activity+in+behaving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A new electrode configuration for recording electromyographic activity in behaving mice.</a> J Neurosci Methods. 148 (1), 36-42 (2005).</li>
<li>Balkaya, M., Krober, J. M., Rex, A., Endres, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+post-stroke+behavior+in+mouse+models+of+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Assessing post-stroke behavior in mouse models of focal ischemia.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 33 (3), 330-338 (2013).</li>
<li>Akay, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+measurement+of+muscle+denervation+and+locomotor+behavior+in+individual+wild-type+and+ALS+model+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Long-term measurement of muscle denervation and locomotor behavior in individual wild-type and ALS model mice.</a> J Neurophysiol. 111 (3), 694-703 (2014).</li>
<li>Taylor, T. N., Greene, J. G., Miller, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+phenotyping+of+mouse+models+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral phenotyping of mouse models of Parkinson's disease.</a> Behav Brain Res. 211 (1), 1-10 (2010).</li>
<li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Histopathological+and+Behavioral+Outcomes+Eight+Weeks+after+Rat+Spinal+Cord+Injury+by+Contusion%2C+Dislocation%2C+and+Distraction+Mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Differential Histopathological and Behavioral Outcomes Eight Weeks after Rat Spinal Cord Injury by Contusion, Dislocation, and Distraction Mechanisms.</a> J Neurotrauma. 33 (18), 1667-1684 (2016).</li>
<li>de Bruin, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+rodent+models+and+behavioral+measures+reveal+unexpected+responses+to+FTY720+and+DMF+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Multiple rodent models and behavioral measures reveal unexpected responses to FTY720 and DMF in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> Behav Brain Res. 300, 160-174 (2016).</li>
<li>Steinman, L., Zamvil, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+successfully+apply+animal+studies+in+experimental+allergic+encephalomyelitis+to+research+on+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">How to successfully apply animal studies in experimental allergic encephalomyelitis to research on multiple sclerosis.</a> Ann Neurol. 60 (1), 12-21 (2006).</li>
<li>Emerson, M. R., Gallagher, R. J., Marquis, J. G., LeVine, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+the+ability+of+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+to+serve+as+a+more+rigorous+model+of+multiple+sclerosis+through+refinement+of+the+experimental+design%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Enhancing the ability of experimental autoimmune encephalomyelitis to serve as a more rigorous model of multiple sclerosis through refinement of the experimental design.</a> Comp Med. 59 (2), 112-128 (2009).</li>
<li>Bittner, S., Afzali, A. M., Wiendl, H., Meuth, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myelin+oligodendrocyte+glycoprotein+%28MOG35-55%29+induced+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+%28EAE%29+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG35-55) induced experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) in C57BL/6 mice.</a> J Vis Exp. (86), (2014).</li>
<li>Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+and+clinical+scoring+of+chronic-relapsing+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Induction and clinical scoring of chronic-relapsing experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> J Vis Exp. (5), e224(2007).</li>
<li>Barthelmes, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+Experimental+Autoimmune+Encephalomyelitis+in+Mice+and+Evaluation+of+the+Disease-dependent+Distribution+of+Immune+Cells+in+Various+Tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Induction of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis in Mice and Evaluation of the Disease-dependent Distribution of Immune Cells in Various Tissues.</a> J Vis Exp. (111), (2016).</li>
<li>Shaw, M. K., Zhao, X. Q., Tse, H. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overcoming+unresponsiveness+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+%28EAE%29+resistant+mouse+strains+by+adoptive+transfer+and+antigenic+challenge%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Overcoming unresponsiveness in experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) resistant mouse strains by adoptive transfer and antigenic challenge.</a> J Vis Exp. (62), e3778(2012).</li>
<li>Stromnes, I. M., Goverman, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Passive+induction+of+experimental+allergic+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Passive induction of experimental allergic encephalomyelitis.</a> Nat Protoc. 1 (4), 1952-1960 (2006).</li>
<li>Stromnes, I. M., Goverman, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+induction+of+experimental+allergic+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Active induction of experimental allergic encephalomyelitis.</a> Nat Protoc. 1 (4), 1810-1819 (2006).</li>
<li>Fiander, M. D., Stifani, N., Nichols, M., Akay, T., Robertson, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinematic+gait+parameters+are+highly+sensitive+measures+of+motor+deficits+and+spinal+cord+injury+in+mice+subjected+to+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Kinematic gait parameters are highly sensitive measures of motor deficits and spinal cord injury in mice subjected to experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> Behav Brain Res. 317, 95-108 (2017).</li>
<li>Jones, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+pathological+outcomes+in+MOG+35-55+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroimmunol%22%5BJournal%5D)">Behavioral and pathological outcomes in MOG 35-55 experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> J Neuroimmunol. 199 (1-2), 83-93 (2008).</li>
<li>van den Berg, R., Laman, J. D., van Meurs, M., Hintzen, R. Q., Hoogenraad, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rotarod+motor+performance+and+advanced+spinal+cord+lesion+image+analysis+refine+assessment+of+neurodegeneration+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Rotarod motor performance and advanced spinal cord lesion image analysis refine assessment of neurodegeneration in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> J Neurosci Methods. 262, 66-76 (2016).</li>
<li>Sasaki, M., Lankford, K. L., Brown, R. J., Ruddle, N. H., Kocsis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+in+the+Lewis+rat+induced+by+immunization+with+myelin+oligodendrocyte+glycoprotein+and+intraspinal+injection+of+vascular+endothelial+growth+factor%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Focal experimental autoimmune encephalomyelitis in the Lewis rat induced by immunization with myelin oligodendrocyte glycoprotein and intraspinal injection of vascular endothelial growth factor.</a> Glia. 58 (13), 1523-1531 (2010).</li>
<li>Merkler, D., Ernsting, T., Kerschensteiner, M., Bruck, W., Stadelmann, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+focal+EAE+model+of+cortical+demyelination%3A+multiple+sclerosis-like+lesions+with+rapid+resolution+of+inflammation+and+extensive+remyelination%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">A new focal EAE model of cortical demyelination: multiple sclerosis-like lesions with rapid resolution of inflammation and extensive remyelination.</a> Brain. 129 (Pt 8), 1972-1983 (2006).</li>
<li>Franco-Pons, N., Torrente, M., Colomina, M. T., Vilella, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+deficits+in+the+cuprizone-induced+murine+model+of+demyelination%2Fremyelination%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Lett%22%5BJournal%5D)">Behavioral deficits in the cuprizone-induced murine model of demyelination/remyelination.</a> Toxicol Lett. 169 (3), 205-213 (2007).</li>
<li>Goldberg, N. R., Hampton, T., McCue, S., Kale, A., Meshul, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Profiling+changes+in+gait+dynamics+resulting+from+progressive+1-methyl-4-phenyl-1%2C2%2C3%2C6-tetrahydropyridine-induced+nigrostriatal+lesioning%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Profiling changes in gait dynamics resulting from progressive 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine-induced nigrostriatal lesioning.</a> J Neurosci Res. 89 (10), 1698-1706 (2011).</li>
</ol>

Yazarlar onlar ifşa birşey yok bildirin.

Farelerde EAE ile motor açıkları ölçme iki en yaygın yöntemleri klinik puanlama ve gecikme süresi bir rotarod27,28düşmek. Bu teknikler bazı sınırlamaları vardır. Her ne kadar rahat ve yaygın olarak kullanılan, klinik puanlama klinik puanları arasındaki farklar büyüklüğü değil, bilinen anlamı yalnızca sıralı düzeyinde veri verimli tarafından sınırlıdır. Klinik puanlama da motor açıkları yapısı hakkında kesin bilgi sağlamak duramayacak uğrar. Rotarod test klinik pu...

Yürüyüş tekrarlanan hareketleri ekstremitelerin hareket elde etmek için kullanılan bir dizi var. Yürüyüş iki safhaya ayrılır adım döngüleri oluşur: ayak geriye doğru yere vücut ileten; itmek için hareketli olan tutumunu faz ve ayak zemin ve hareketli ileriye nerede salıncak faz. Yürüyüş bozuklukları Medulla Spinalis Yaralanmalarında (SCI), multipl skleroz (MS), amyotrofik lateral skleroz (ALS), Parkinson hastalığı (PD) ve inme gibi birçok nörodejeneratif hastalıkların hallmark şekil are; Preklinik kemirgen modelleri bu bozuklukların sık sık onların anılan sıraya göre yürüyüş bozuklukları1özetlemek. Farelerde hareket temel kontrol mekanizmaları çalışılmış2,3olmuştur. Ayrıca, birçok insan nörolojik bozukluklar4fare modelleri vardır. Yürüyüş analizi farelerde bu nedenle birden fazla anatomik ilişkilendirir bilinen motor açıkları yönlerini ölçmek için çekici bir yaklaşımdır. Yürüyüş fare modellerinde çalışmanın nörodejeneratif hastalıklarda Lokomotor açıkları neuropathological üsleri içgörü sağlamak ve olası tedavileri tanımlaması etkinleştirin.
Yürüyüş Rodents ölçmek için kullanılan bazı teknikler görsel denetim (örneğin, Basso fare ölçek5 ve açık alan testi6) ve yürüyüş ventral uçak7analizini içerir. Hareket yürütme hakkında bilgi sağlar ve sonuç olarak daha ince değişiklikleri yürüyüş8, duyarlı olduğundan daha yakın zamanlarda, sagittal düzlem kinematik hindlimb hareketlerinin ölçmek için yöntemleri popülerlik kazanmıştır 9 , 10 , 11. kinematik Teknikleri hindlimb hareketi sagittal düzlemde bir koşu bandı9,12 tarihinde yürürken eğitim için geliştirilen adamları kapsamlı bir şekilde inceledik SCI, ALS, travmatik beyin yaralanmaları, inme, bağlamında ve Huntington hastalığı8,9,10,11,13,14,15,16. Buna ek olarak, bu teknikleri multipl skleroz17fare modelleri için sınırlı kullanım Lokomotor açıkları çalışmada gördük.
Deneysel otoimmun ensefalomiyelit (EAE) MS18en sık kullanılan fare modeldir. EAE inducing iki ana yöntem aktif ya da pasif aşılama yolu ile var. Etkin EAE içinde fareler miyelin antijenleri, neden autoreactive neuroinflammation T Hücre-aracılı ve spinal kord ve beyincik demiyelinizasyon ile aşı. Pasif EAE, öte yandan, autoreactive T hücreleri aktif EAE fareyle bir saf fare19' a geçiş yapan tarafından indüklenen. Başka bir yerde de açıklandığı gibi hastalık sahası ve nevropatoloji merkezi sinir sistemi (MSS) antijen tarafından etkilenmiştir ve fare süzün20,21,22,23,24 ,25. EAE deneylerde kontrol fare ile miyelin antijen olmadan tam Freund's adjuvan (CFA) enjekte edilir. EAE kuyruk zayıflık ile başlayan ve potansiyel olarak ön ayakları, içerebilir felç artan tarafından ataksi ve felç20dakikaya kaynaklanan karakterizedir. Son zamanlarda yürüyüş değişiklik miyelin oligodendrocyte glikoprotein 35-55 (MOG35-55) tabi C57Bl/6 farelerde nitelendirmiştir-EAE indüklenen. Bu çalışmalar sapmalar normal ayak bileği hareketinden çok beyaz madde kayıp lomber spinal kord EAE fareler26ile correlated çünkü klasik davranış analizi üstün olmak için yürüyüş analizi göstermiştir. Buna karşılık, beyaz madde kaybı ve diğer geleneksel davranış ve iki ölçümlerini (klinik puanlama rotarod) arasındaki korelasyon gücünü çok zayıf26oldu.
Biz burada bir koşu bandı üzerinde yürüme EAE farelerin sagittal düzlemde hareket açıkları tespit etmek için kinematik yürüyüş analizi nasıl kullanılacağını açıklar. Beş yansıtıcı işaretleyicileri hareket kalça, diz ve ayak bileği dururken, yüksek hızlı video kayıtları tanımlamak için bir hindlimb üzerine yerleştirildi. Hareket analiz yazılımı ortak geziler hakkında kinematik veri ayıklamak için kullanıldı. Belgili tanımlık yarar hareketi açıkları EAE MOG35-55 model ölçmek için bu tekniklerin ele alınmıştır. Bu teknikler de yürüyüş açıkları diğer fare modelleri nörodejeneratif hastalıkların incelenmesi için geçerlidir.

<table><tbody><tr><td>Kamera</td><td>Nikon</td><td>Nikon D750</td><td>Videoyu çekmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Yansıtıcı bant</td><td>B& L Mühendislik</td><td>MKR-Tape-2</td><td></td></tr><tr><td>İnce makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>15023-10</td><td></td></tr><tr><td>Forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11252-20</td><td></td></tr><tr><td>Tutkal tabancası</td><td>Craftsmart</td><td>E231647</td><td></td></tr><tr><td>neşter sapı #4</td><td>Roboz</td><td>R5-9884</td><td></td></tr><tr><td>Neşter Bıçağı No.10</td><td>Tüy</td><td>2020-12</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6 fareler</td><td>Charles River Laboratories</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anestezik makinesi</td><td>EZ Anestezi</td><td>EZ-AF9000 Otomatik Akış Sistemi</td><td></td></tr><tr><td>Devridaim su ısıtma battaniyesi</td><td>Androit</td><td>HTP-1500</td><td></td></tr><tr><td>topikal göz yağlayıcı</td><td>Refresh</td><td>DIN00210889</td><td></td></tr><tr><td>Tıraş Makinesi</td><td>Oster</td><td>78997-010</td><td></td></tr><tr><td>Yüksek hızlı kamera</td><td>Fastec Fastec</td><td> IL3-100</td><td></td></tr><tr><td>Yüksek güçlü ışık</td><td>Smith Victor Corporation</td><td>Model 700 SG (600 Watt kuvars ışık, 120 Volt)</td><td></td></tr><tr><td>Işık Standı</td><td>Promaster</td><td>LS1</td><td></td></tr><tr><td>Koşu Bandı</td><td>Köln</td><td></td><td></td>Üniversitesi Zooloji Enstitüsü'nde özel olarak üretilmiştir</tr><tr><td>Microsoft Excel 2016</td><td>Microsoft</td><td>Sürümü 2016</td><td></td></tr><tr><td>KinemaJ</td><td>Nicolas Stifani</td><td></td><td>Bu, ImageJ</td></tr><tr><td>KinemaR</td><td>Nicolas Stifani</td><td></td> ile <td>kullanılmak üzere oluşturulmuş bir komut dosyasıdır Bu, Rstudio Vicon Motus ile kullanılmak üzere oluşturulmuş bir komut dosyasıdır</td></tr><tr><td>Vicon Motus</td><td>Sürüm 9.00</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism</td><td>GraphPad</td><td>Sürüm 6.00</td><td></td></tr></tbody></table>

sagittal düzlem kinematik yürüyüş analizi mog35-55 için tabi c57bl/6 farelerde deneysel otoimmun ensefalomiyelit indüklenen

Sagittal Plane Kinematic Gait Analysis in C57BL/6 Mice Subjected to MOG35-55 Induced Experimental Autoimmune Encephalomyelitis

Sagittal düzlemde kinematik yürüyüş analizi, multipl skleroz (MS) motor açıkları karakterize etmek için sık sık kullanılmıştır. Biz yürüyüş açıkları, MS, deneysel otoimmun ensefalomiyelit (EAE) bilinen bir fare modeli tanımlamak için bu tekniklerin uygulanması açıklanmaktadır. EAE için tabi farelerde felç ve motor açıkları genellikle klinik bir puanlama ölçeği kullanarak değerlendirilir. Ancak, bu ölçekte yalnızca sıralı veri sunan motor açıkları hassas doğası hakkında az bilgi verir. EAE hastalık şiddeti genel motor koordinasyon, ölçütü sağlar rotarod performansı da değerlendirildi. Buna karşılık, kinematik yürüyüş analizi, arka bacak sagittal düzlemde hareket Engelli olduğu hakkında son derece hassas bilgileri oluşturur. Bu yordamı gerçekleştirmek için yansıtıcı işaretleri zor durumda iken bir fare koşu bandında yürüyüş eklem hareketi algılamak için hind yerleştirilir. Hareket analiz yazılımı yürüyüş sırasında veri işaretleyicilerini hareket ölçmek için kullanılır. Kinematik yürüyüş parametreleri sonra sonuç verilerden elde edilmiştir. Bu yürüyüş parametreler Engelli EAE kalça, diz ve ayak bileği eklem hareketlerinin ölçmek için nasıl kullanılabileceğini göstermektedir. Bu tekniklerin daha iyi hastalık mekanizmaları anlamak ve MS ve hareketlilik zarar diğer nörodejeneratif hastalıklar için olası tedavileri belirlemek için kullanılabilir.

Şekil 1 kinematik yürüyüş analizi için kullanılan yordam, şematik bir gösterimidir. İlk, yansıtıcı işaretleri yaptı ve bir fare 5 anatomik noktalara yerleştirilmiş. Fareyi bir koşu bandı üzerinde yürüyor iken yürüyüş sonra kaydedilir. Hareket analiz yazılımı daha sonraki analiz için kinematik veri ayıklamak için kullanılır.
Şekil 2A -c kontrol CFA fare adım döngüsünde için bir hafta arayla aralıklı üç ardışık kayıt ot...

Kinematik yürüyüş analizi sagittal düzlemde hareket nasıl yürütüleceğini konusunda son derece hassas bilgi verir. Biz yürüyüş açıkları otoimmün aracılı demiyelinizasyon tabi fareler için tanımlamak için bu tekniklerin uygulanması açıklanmaktadır. Bu yöntemler, yürüyüş açıkları Engelli hareket featuring diğer fare modelleri için karakterize etmek için de kullanılabilir.

Sagittal düzlem kinematik yürüyüş analizi MOG35-55 için tabi C57BL/6 farelerde deneysel otoimmun ensefalomiyelit indüklenen

Kinematic gait analysis in the sagittal plane has frequently been used to characterize motor deficits in multiple sclerosis (MS). We describe the ...

Bu prosedürün genel amacı, deneysel otoimmün ensefalomiyelit veya EAE, fare modeli multipl sklerozda kinematik yürüyüş analizi kullanarak fonksiyonel motor bozuklukları ölçmektir. Kinematik yürüyüş analizinin fare yürüme davranışına uygulanması daha önce başkaları tarafından kurulmuş ve tanımlanmıştır. Bir EAE'deki nörolojik defisitler, omurilik ve beyincik boyunca nöral inflamasyon ve sporadik beyaz cevher kaybından kaynaklanır.Geleneksel olarak, EAE farelerinde motor stabilite, gözlemcinin motor eksikliklerin ciddiyetine ilişkin izlenimine dayalı olarak farelere bir klinik skor atandığı klinik puanlama sistemleri kullanılarak değerlendirilmiştir. Klinik skorlardan elde edilen veriler sıralıdır ve omurilik histopatolojisi ile iyi korelasyon göstermez. Kinematik yürüyüş analizinin, EAE farelerinde yürüme eksikliklerinin objektif bir tanımını sağlamanın yanı sıra, beyaz cevher kaybının klinik skorlardan daha iyi bir davranışsal korelasyonu olduğu son zamanlarda gösterilmiştir.Bu teknik, farelerin yüksek uzuvlarına yansıtıcı işaretleyiciler yerleştirmeyi ve yüksek hızlı bir kamera ile kaydedilirken bir koşu bandında yürümelerine izin vermeyi içerir. Kinematik parametreler daha sonra

sagittal-plane-kinematic-gait-analysis-c57bl6-mice-subjected-to-mog35

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu video, beyne göç eden otoreaktif T hücrelerini aktive etmek için miyelin türevi peptitleri bir adjuvan ile enjekte ederek deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE) indükleme yöntemini göstermektedir. Boğmaca toksini, kan-beyin bariyeri geçirgenliğini artırmak için uygulanır ve bu T hücrelerinin ve diğer bağışıklık hücrelerinin beyne girmesine izin verir. Bu bağışıklık hücreleri demiyelinizasyona neden olarak sinir iletiminin bozulmasına ve EAE gelişimine yol açar.

Bir Fare Modelinde Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelit Oluşumu

Deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE), çoklu skleroz kurulmuş bir hayvan modelidir. C57BL / 6 fareleri, merkezi sinir sistemi otoreaktif bağışıklık hücreleri tarafından neden olduğu artan gevşek felce neden, miyelin oligodendrosit glikoprotein (MOG) peptit 35-55 (MOG 35-55) ile immünize edilir. Hastalığın başlama ve izleme için protokoller tartışılacaktır.

Miyelin Oligodendrosit Glikoprotein (MOG<sub&gt; 35-55</sub&gt;) C57BL / 6 Farelerde Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelit (EAE) Bağlı

Ağrı yanıt nöropatik hayvan modeli olarak hassas bir değerlendirme ağrı hastalıkları Patofizyoloji araştırmak ve yeni analjezikler geliştirmek çok önemlidir. Biz bir otomatik yürüyüş analizi sistemi tarafından hind pençe kemirgen duyusal işlev belirlemek için hassas ve objektif bir yöntem mevcut.

Kronik daralma Yaralanmalı farelerde otomatik yürüyüş analizi

Bu çalışmada, biz ventral uçak motor koordinasyon yanı sıra ateş fare modelleri (Örneğin, endophilin mutant çağda ilerleyen ile ilerleme ince değişiklikleri izlemek için Imaging temel kinematik yürüyüş analizi kullanımını göstermektedir fare hat).

Yaş bağımlı Motor bozuklukları ile ateş farelerde, yürüyüş analizi

Burada sunulan bir protokol toplamak ve preklinik çalışmalar için kemirgenler dört ayaklı lokomotif üç boyutlu kinematik analiz etmektir.

Kemirgenler preklinik çalışmalar için 3D Kinematic yürüyüş analizi

Ayak izi analizi farelerde hareket anomalilerini ölçerek araştırmacılar için dijıtleştirilmiş yürüyüş analiz programlarına düşük maliyetli bir alternatiftir. Hız, basitlik ve uzunlamasına potansiyel nedeniyle, fare modellerinin davranışsal fenotiplemeyi için idealdir.

Nöromusküler hastalığın fare modellerinin davranışsal phenotyping için düşük maliyetli yürüyüş analizi

Bu protokol, miyelin oligodendrosit glikoprotein kullanılarak bir fare modelinde deneysel otoimmün ensefalomiyelitin indüklenmesini ve klinik bir skorlama sistemi kullanılarak hastalık sürecinin izlenmesini açıklamaktadır. Deneysel otoimmün ensefalomiyelit ile ilişkili semptomlar, hastalık sürecini kapsamlı bir şekilde değerlendirmek için fare femur mikro-bilgisayarlı tomografi analizi ve açık alan testi kullanılarak analiz edilir.

Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelitin İndüksiyonu ve Çeşitli Değerlendirme Göstergeleri

MouseWalker (MW) araç kutusunu kullanarak serbestçe yürüyen farelerin lokomotor modelini nicel olarak tanımlamak için ilk video kayıtlarından ve izlemeden niceleme sonrası analize kadar uzanan deneysel bir boru hattı sağlanmıştır. MW sisteminin yararlılığını göstermek için farelerde omurilik kontüzyon yaralanması modeli kullanılmıştır.

Omurilik Yaralanmasının Bir Fare Modelinde Lokomotor Disfonksiyonu Ölçmek için MouseWalker'ı Kullanma

Deneysel otoimmün ensefalomiyelit, multipl sklerozun en yaygın kullanılan murin modellerinden biridir. Mevcut protokolde, her iki cinsiyetten C57BL / 6J fareleri, miyelin oligodendrosit glikoprotein peptidi ile aşılanır ve bu da esas olarak kuyruk ve uzuvların artan parezi ile sonuçlanır. Burada EAE indüksiyonu ve değerlendirme protokolünü tartışıyoruz.

İki Cinsiyette Multipl Sklerozun Modellenmesi: MOG35-55 ile İndüklenen Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelit

DeepLabCut kullanarak serbest hareket eden farelerde spontan yürüyüş ve hareket etme nicelini ölçmek için düşük maliyetli, işaretsiz bir iş akışı sunuyoruz. Bu protokol, tek kameralı video alımını, anatomik işaretlerin işaretsiz takibi ve uzaylı-zamansal lokomotor parametrelerinin çıkarılmasını entegre ederek, özel ekipman olmadan motor davranış analizi için invaziv olmayan ve erişilebilir bir çerçeve sağlar.

Serbest Hareket Eden Farelerde Kendiliğinden Yürüyüş ve Hareket Analizi için İşleyicisiz DeepLabCut Tabanlı Düşük Maliyetli İş Akışı

Öğrenin sagittal düzlem kinematik yürüyüş analizi ile C57BL/6 farelerinde EAE modelinde fonksiyonel motor bozukluklarını değerlendirmeyi. Bu yöntem, nörolojik hastalıklarda hareket bozukluklarını objektif olarak ölçer.

Sagittal düzlem kinematik yürüyüş analizi MOG35-55 için tabi C57BL/6 farelerde deneysel otoimmun ensefalomiyelit indüklenen

Daha fazla video keşfet