Name: Perfüze Mikro-biyoreaktörler Chip tabanlı üç boyutlu Hücre Kültürü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-05-21T20:23:00.000+00:00
Duration: 12 min 39 s
Description: Keşfedin, mikro-biyoreaktörlerde üç boyutlu hücre kültürü için çip tabanlı bir platform nasıl hazırlanır. Bu yöntem, 10 milyon hücreye kadar yüksek yoğunluklu kültür ve kontrollü ortam sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz Mechthild Herschbach ve Anke Dech mükemmel teknik yardım için teşekkür etmek istiyorum.

Bu kağıt, birincil hücre hücre hatlarının yanı sıra üç boyutlu ekimi için bir çip tabanlı platform (Şekil 1) kullanımını açıklar. Birçok hücre, sadece 3 boyutlu bir ortamda ifade Organotipik fonksiyonları bu yana, biz hücreler tüm uzaysal yönde uymak için bir iskele sağlayan bir polimer çip geliştirdik ve sıvı akışının kontrolü için bir biyoreaktör konut monte edilebilir , deney tasarımı bağlı olarak oksijen basıncı vb, polimer yüzey çeşitli teknikler, örneğin, UV ışınlama, PECVD, γ-aşılama veya konvansiyonel ıslak kimya değiştirilmiş olabilir. <img src="/files/ftp_upload/old/564_2008_9_19_6/564_Figure-01.png" alt="564_Figure-01.png" width="546" height="386" /> Şekil 01 1. De-havalandırma ve çip, hydrophilisation Kullanmadan önce, çip deaerated ve hydrophilized. Bunun için, alkol serisi yürütülmektedir. DMPC arıtılmış su içinde izopropanol% 100,% 70,% 50,% 30 oluşan Isopropanol çözümler hazırlanır ve çip% 100 çözüm ile başlayan, her konsantrasyon batırılmış, 30&#39;lu kadar. Serinin son adım saf Dimetil pyrocarbonate (DMPC) arıtılmış su oluşur. Bu noktadan itibaren, bu çip ıslak tutmak için önemlidir. 2. Kollajen I kaplama Alkol serisinden sonra, çip genellikle bir sıçan kuyruğu kollajen ben çözümü ile kaplı. Kollajen stok solüsyonu% 0.2 asetik asit, 2 mg / ml 30 mg kolajen proteini gelen bir kısım son hacim 150 ul DMPC arıtılmış su ile seyreltilir. Bu sonuç 10 mg kolajen Ben her cm 2 yüzey alanı yoğunluğu ile çip yüzey kollajen bir kaplama. 3. Hepatosellüler karsinom hücrelerinin inokülasyonu Hepatosellüler karsinom hücreleri hattı Hep G2 tripsinize sayılır. Kısa vadeli deneyler için (1 ila 6 gün) 5 * 10 6 hücre her yonga ve ilgili kontrol 6 cm doku kültürü petri kaplarına inoküle . Inoculte için çip 5 * 10 6 hücre 150 ul kültür ortamı yeniden süspanse ve üst microstructured çip alanı (Şekil 2) üzerine yerleştirilir. Daha sonra, 2-3 saat için bir kuluçka yerleştirilir. Bu kuluçka döneminde mikro-konteyner içine hücreleri tortu ve kollajen I kaplı iskele bağlı. <img src="/files/ftp_upload/old/564_2008_9_19_7/564_Figure-02.png" alt="564_Figure-02.png" width="300" height="225" /> Şekil 2 4. Biyoreaktör gövde içine çip takılması Kuluçka döneminden sonra, çip inkübatör kaldırılır ve biyoreaktör konut monte. Bunun için temiz bir tezgah altında steril ambalaj, önceden monte edilmiş biyoreaktör kaldırıldı ve çip yerleştirilmesi için izin veren bir dereceye kadar sökülüp. Çip dikkatle ele alınır ve steril forseps ile biyoreaktör bir alt ve üst bölmesinin nesil yonga ve sonuçları mühürler conta içeren oyuğa yerleştirilir. Sonra, biyoreaktör tekrar toplandı ve pompaya bağlı inkübatör, gaz kaynağı ve oksijen analizörü transfer. 5. Sistemin doldurulması Biyoreaktör orta rezervuara bağlı olarak, pompa ve gaz kapalı dolaşım döngüsü orta ile doludur kaynağı. Bu çip üstünden orta akım olarak tanımlanır superfusion, elde böyle bir şekilde 3-way-konektörler konumlandırma yapılır. Bu iskele hücreleri çıkarmadan biyoreaktör dolaşımdan kapalı hava deşarj yol açar. Sistemi tamamen orta ile doldurulduktan sonra, 3-way-konektörler perfüzyon, doku yoluyla çip aşağıda akışı olarak tanımlanır, elde böyle bir şekilde devreye girerler. Perfüzyon yapılandırmada akışı hepatositler için genellikle 60-500 ul / dk arasında değişir hücre ihtiyaçlarına göre ayarlanır. 6. Örnekleme Deney sırasında orta örnekleri çizilebilir. Bunun için, şırınga orta rezervuar üstüne steril portlarına bağlanır. Örnekleme sonra, portların% 70 izopropanol ile sterilize edilir. 7. Downstream uygulamalar için çip sağlam hücrelerinin izolasyonu Deneyin sonunda, biyoreaktörler temiz tezgah aktarılır ve daha önce açıklandığı gibi demonte, gaz tedarik ve roller pompa kesilir. Steril forseps ile çip biyoreaktör konut kaldırılır yerleştirdi3,5 cm petri içine ve PBS ile durulanır. Daha sonra, çip microstructured alanından hücreleri ayırmak için bir kuluçka 5-15 dakika tripsin / EDTA ile (% 0.25 / 0.53mM) inkübe edilir. Toplanan hücre süspansiyonu 600 g. 5 dakika santrifüj Bu hücreler daha sonra, geleneksel downstream uygulamalar, örneğin, toplam RNA ve protein izolasyonu için kullanılabilir. Rutin, mikroarray analizi ve gerçek zamanlı RT-PCR (PARİS kiti, Ambion Inc, Austin, Teksas, ABD) total RNA izole eder. Bir lazer tarama mikroskobu ile çip içinde hücrelerinin protein ekspresyonu immünohistokimyasal sonra analiz edilir, ancak flow sitometri de, örneğin, aksi analiz edilebilir.

<ol><li>Berry, M. N., Friend, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-yield+preparation+of+isolated+rat+liver+parenchymal+cells%3A+A+biochemical+and+fine+structural+study%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">High-yield preparation of isolated rat liver parenchymal cells: A biochemical and fine structural study.</a> J. Cell Biol. 53, 506-520 (1969).</li>
<li>Seglen, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+rat+liver+cells.+3.+Enzymatic+requirements+for+tissue+dispersion%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Preparation of rat liver cells. 3. Enzymatic requirements for tissue dispersion.</a> Exp. Cell Res. 82, 391-398 (1973).</li>
<li>Giselbrecht, S., Gietzelt, T., Gottwald, E., Trautmann, C., Truckenmueller, R., Weibezahn, K. F., Welle, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+tissue+culture+substrates+produced+by+microthermoforming+of+pre-processed+polymer+films%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Microdev%22%5BJournal%5D)">3D tissue culture substrates produced by microthermoforming of pre-processed polymer films.</a> Biomed. Microdev. 8, 191-199 (2006).</li>
<li>Welle, A., Gottwald, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((UV-based+patterning+of+polymeric+substrates+for+cell+culture+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Microdev%22%5BJournal%5D)">UV-based patterning of polymeric substrates for cell culture applications.</a> Biomed. Microdev. 4, 33-41 (2002).</li>
<li>Gottwald, E., Giselbrecht, S., Augspurger, C., Lahni, B., Dambrowsky, N., Truckenmueller, R., Piotter, V., Gietzelt, T., Wendt, O., Pfleging, W., Welle, A., Rolletschek, A., Wobus, A. M., Weibezahn, K. -F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+chip-based+platform+for+the+in+vitro+generation+of+tissues+in+three-dimensional+organization%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">A chip-based platform for the in vitro generation of tissues in three-dimensional organization.</a> Lab Chip. 7, 777-785 (2007).</li>
<li>Eschbach, E., Chatterjee, S. S., Noldner, M., Gottwald, E., Dertinger, H., Weibezahn, K. -F., Knedlitschek, G., G, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microstructured+scaffolds+for+liver+tissue+with+high+density%3A+Morphological+and+biochemical+characterization+of+tissue+aggregates%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell.+Biochem%22%5BJournal%5D)">Microstructured scaffolds for liver tissue with high density: Morphological and biochemical characterization of tissue aggregates.</a> J. Cell. Biochem. 95, 243-255 (2005).</li>
</ol>

Yazarların beyan edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Biz aktif perfüze mikro biyoreaktörler hücrelerin üç boyutlu ekimi için bir çip-tabanlı bir platform geliştirmiştir. Cips, biyolojik olarak parçalanabilen polimerler olmayan biyolojik olarak parçalanabilen yanı sıra mikro enjeksiyon kalıplama, sıcak kabartma yanı sıra mikro termoform teknikleri 3 tarafından imal edilebilir . Deneysel tasarım bağlı olarak, polimer yüzey 4 UV ışınlama tarafından değiştirilebilir. Hepatosit hücre hatları gibi birincil rat hepatositlerinde ifade, bazı karaciğer spesifik genlerin analizi gi...

<table><tbody><tr><td>Hücreler</td><td>Diğer</td><td>ATCC</td><td>HB-8065</td><td></td></tr><tr><td>Sıçan kuyruğundan Kollajen I</td><td>Reaktif</td><td>Roche Group</td><td>11 179 179 001</td><td></td></tr><tr><td>PARIS kiti</td><td>Reaktif</td><td>Ambion</td><td>AM1921</td><td></td></tr><tr><td>Syto16</td><td>Reaktif</td><td>Invitrogen</td><td>S7578</td><td></td></tr><tr><td>anti sitokeratin 18</td><td>Antikor</td><td>Abcam</td><td>ab668</td><td>Primer Ab, Fare monoklonal, PBS içinde 1/100 oranında kullanıldı</td></tr><tr><td>Anti E-kaderin</td><td>Antikor</td><td>Abcam</td><td>ab1416</td><td>Primer Ab, Fare monoklonal, PBS içinde 1/50 oranında kullanıldı.</td></tr><tr><td>Keçi anti-albümin</td><td>Reaktif</td><td>Bethyl Laboratories</td><td>E80-129</td><td>Primer Ab, keçi anti-insan Albümin, PBS içinde 1/200 oranında kullanıldı</td></tr><tr><td>Tavşan anti-fare IgG1</td><td>Antikor</td><td>Invitrogen</td><td>A11059</td><td>Sekonder Ab, Alexa Flour 488 konjuge, PBS + 0.5 % BSA içinde 1/100 oranında kullanıldı</td></tr><tr><td>Cy3 anti-keçi IgG</td><td>Reaktif</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>705-165-003</td><td>Cy3 AffiniPure eşek a-keçi IgG Ab, PBS + 0.5% BSA içinde 1/700 oranında kullanıldı</td></tr></tbody></table>

perfüze mikro-biyoreaktörler chip tabanlı üç boyutlu hücre kültürü

Chip-based Three-dimensional Cell Culture in Perfused Micro-bioreactors

Biz üç boyutlu hücre ekimi için bir çip tabanlı hücre kültürü sistemi geliştirdik. Olmayan biyolojik olarak parçalanabilen polimerler, örneğin, polikarbonat veya mikro enjeksiyon polimetil metakrilat, mikro sıcak kabartma veya termoform mikro çip tipik olarak imal edilmektedir. Ama, aynı zamanda biyo-bozunur polimerler imal edilebilir. Genel boyutları 0.7 1 x 20 x 20 x 0.7 mm 1 (hxwxl). Kullanılan yongaları temel özellikleri ya kadar 1156 metreküp mikro-konteynerler (cf-chip) bir ızgara her 120-300 boyutunu x 300 x 300 μ (hxwxl) veya 300 μ çaplı yuvarlak girinti ve derinlik 300 μ (r çip). Iskele 10 milyon ev. üç boyutlu bir yapılandırma hücreler. Optimal bir besin ve gaz kaynağı için çip biyoreaktör konut eklenir. Biyoreaktör basit yapılandırma, ayrica bir silindir pompa ve gaz kaynağı ile orta rezervuar oluşan, kapalı steril dolaşım döngü parçasıdır. Biyoreaktör perfüzyon, superfusion, hatta karışık bir çalışma modu çalıştırmak olabilir. Biz birkaç hafta süre başarıyla birincil hücre hücre hatlarının yanı sıra ekili var. Sıçan primer karaciğer hücreleri için en fazla 2 hafta süreyle Organotipik fonksiyonlarının korunması gösterilebilir. Hepatosellüler karsinom hücre hatları için, ya da sadece biraz standart tek tabaka kültürü ifade karaciğer belirli genlerin indüksiyon gösterebilirim. Beri bir kök hücre, kök hücre hatları ile ilk farklılaşma deneyler yetiştirme sistemi vaat sistemi de kullanışlı olabilir.

Biz, mikro-biyoreaktörler hücrelerin üç boyutlu ekimi için çip tabanlı platform açıklar. Bir çip 10 milyon kadar ev. steril, kapalı bir dolaşım döngü içinde sıvı akışı, oksijen basıncı vb ilişkin kesin olarak tanımlanmış koşullar altında yetiştirilen hücreler.

Perfüze Mikro-biyoreaktörler Chip tabanlı üç boyutlu Hücre Kültürü

Hücrelerin üç boyutlu kültürü için çip tabanlı bir hücre kültürü sistemi geliştirdik. Çip tipik olarak ... malzemesinden üretilmektedir.

Merhaba, ben Eric Gottwald ve Ware Teknoloji Enstitüsü Biyolojik Arayüzler Enstitüsü'nde araştırma bilimcisiyim. Bugün sizlere çip tabanlı perfüze mikro biyokaktif sistemimizi tanıtmak istiyorum. Çipi hücre kültürü uygulamalarında kullanabilmemiz için önce polimeri hidrolize etmemiz ve mikro yapılandırılmış alanı havalandırmamız gerekir.Bu işlem, çipin %100'den başlayarak farklı konsantrasyonlardaki izopropanol çözeltilerine daldırılmasıyla gerçekleştirilir. Çip, her konsantrasyona sadece birkaç saniye daldırılır ve son adım sadece sudur. Ardından çip kurutulur ve son olarak, hücrelerin polimere yapışmasını kolaylaştırmak için çip bir kolajen 1 solüsyonu ile kaplanmalıdır. Bu işlem, mikro yapılandırılmış alanın üzerine sadece birkaç damla kolajen 1 solüsyonu damlatılarak yapılır ve bu şekilde çip, 4 °C'de gece boyunca inkübe edilir.Kollajen bir çözeltisi ile gece boyunca inkübasyondan sonra, çözelti uzaklaştırılır ve çip steril PBS ile yıkanır. Ardından, PBS de uzaklaştırılır ve çip artık hücre ekimi için hazır hale gelir. Şimdi hücre çipini tek hücre süspansiyonu ile ekimleyeceğiz; bu işlem, mikro yapılandırılmış alanın üzerine 150 µL hücre süspansiyonu koyularak gerçekleştirilir. Hücrelerin yerleştirilmesinin ardından, çip bir inkübatörde 37 °C'de üç saat boyunca inkübe edilir.Üç saatlik inkübasyon süresinin ardından, çip inkübatörden çıkarılır ve ektöre yerleştirilmeye hazır hale gelir. Bunun için ektör, steril ambalajından çıkarılır; bu şeffaf folyonun steriliteyi gamma ışınlamasıyla sağlanmıştır. Bu nedenle sadece paketi açıp ektörü çıkarmamız yeterlidir.Sıradaki adımda, çipin yerleştirilebilmesi için biyoreaktör gövdesini sökebilmek amacıyla şişenin üst kısmını bu ortam rezervuarına yerleştireceğiz. Biyoreaktör gövdesini açtıktan sonra, çipi gövdedeki yuvasına yerleştirerek çip yerleştirme işlemini gerçekleştirebiliriz ve ardından biyoreaktör tekrar monte edilebilir. Son olarak, ortam rezervuarına iki adet steril filtre ve bir adet steril örnekleme portu bağlamamız gerekmektedir.Kapalı dolaşım döngüsündeki gerçek oksijen tansiyonunun ölçümü için, iki oksijen sensörünü bu iki konnektör arasına monte ederek yerleştireceğiz. Baktör artık kültür ortamı ile doldurulmaya hazırdır. Baktör sistemi şu an hücre kültür ortamıyla doldurulmaya hazırdır ve bu işlem, kapalı dolaşım döngüsü basitçe roller pompaya bağlanarak gerçekleştirilir.Böylelikle, tüm biyoreaktör sirkülasyonunu eş zamanlı olarak boşaltacağız. Buradaki Ector penceresinde görebileceğiniz üzere, besiyerinin aşağıdan yükseldiğini ve biyoreaktörden üst kısımdan ayrıldığını görebilirsiniz. Biyoreaktör sistemini inkübatöre yerleştirmeden önce, sirkülasyon döngüsünün hava kabarcığı kalmadan doldurulduğunu kontrol ederiz.Şu an sistem tamamen hücre kültürü ortamı ile doldurulmuş durumda ve biyoreaktörü inkübatöre aktarabiliriz. Şimdi biyoreaktörü inkübasyon odasına yerleştireceğiz. Bunun için, öncelikle, kısa bir süre önce gördüğünüz üzere, biyoreaktör roller pompaya bağlandı ve şu an biyoreaktör şişedeki bu ortam tarafından aktif olarak perfüze ediliyor.Ortamdaki oksijen konsantrasyonunu korumak için besiyeri rezervuarını gaz kaynağına bağlarız. Son olarak, sistemdeki oksijen tansiyonunu çevrimiçi olarak izlemek amacıyla sirkülasyona iki oksijen sensörü bağlayacağız. Artık kurulum tamamlanmıştır ve deneyi tasarladığınız süre boyunca çalıştırılabilir.MicroCon kaplarının içindeki hücrelerin organotipik fonksiyonlarının analizi sırasında kullanılan en güçlü araçlardan biri, burada gördüğünüz lazer taramalı mikroskoptur. Lazer taramalı mikroskop, bize her bir MicroCon kabını tahrip etmeden inceleme imkanı sunar. MicroCon kapları veya çip, geleneksel immün boyama ve immünofloresans yöntemleri için kullanılabildiğinden, mikro kapların içindeki her türlü markörü ve organotipik fonksiyonu tespit edebilmekteyiz.Burada, bu çipin animasyonunda görebileceğiniz üzere, alt kısım ve MicroCon konteyner duvarları tamamen hücrelerle doludur. Oldukça canlı durumda çok sayıda hücremiz var ve çok az sayıda ölü hücre mevcut. Bir sonraki resim, MicroCon konteynerı içerisinde her türlü organotipik fonksiyonu tespit edebildiğimizi göstermektedir.Örneğin hepatositler için, hücrelerdeki albümin üretimi veya E-cadherin ekspresyonu, buradaki üst üste bindirme görüntüsünde net bir şekilde görülebilmektedir. Çekirdek maviye boyanmıştır. E-cadherin yeşil ile boyanmış ve albümin kırmızı ile eksprese edilmiş veya boyanmıştır.Ve burada güzelce görebileceğiniz üzere, hepatositlerden beklediğiniz tüm organotipik fonksiyonlar bu tür bir 3D kültürde başarıyla ifade edilmektedir. Ayrıca, başka bir hepatosit markeri olan sitokeratin 18'e baktık ve bu resim, Sitokeratin 18'in de bu tür kültürlerde başarıyla ifade edildiğini göstermektedir. Bu durumun, bu tür organotipik fonksiyonların diğer organotipik kültürler için de faydalı olabileceği konusunda sizi ikna ettiğini umuyorum.Biore deneyi sona erdikten sonra, çip, örneğin total RNA gibi her türlü hücresel bileşenin izolasyonu için kullanılabilir. Burada gördüğünüz üzere, biyoreaktör sisteminden izole edilen total RNA'yı gösteriyoruz. Bu total RNA daha sonra gerçek zamanlı PCR veya burada gördüğünüz gibi mikroarray analizi gibi ileri uygulamalarda kullanılabilir.Ayrıca, sistemden bütün hücreler izole edilebilir ve bu hücreler daha sonra konvansiyonel akış sitometrisi analizi için kullanılabilir. Burada görebileceğiniz üzere, sistemin organotipik reaksiyonların gerekli olduğu her türlü uygulama için yararlı olabileceğini ve kök hücre uygulamaları gibi henüz değerlendirmediğimiz tüm bu tür uygulamalar için faydalı olabileceğini göstermiş olduğumuzu umuyorum.

chip-based-three-dimensional-cell-culture-perfused-micro

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Ağırlıklı olarak tek tabaka kültürler - sık sık farklılaştırılmış birincil hücreler, nispeten kısa bir ömrü vardı ve kültürü içinde de farklılaşmış dezavantaj muzdarip geçmişte birçok in vitro kültür sistemleri. Bunun bir sonucu olarak, organ-spesifik fonksiyonları en hızlı kaybedildi. Böylece, bu hücrelerin in vitro için daha iyi koşullar çoğalmak için, değişiklikler ve uyarlamalar geleneksel monolayer kültürlere edilmiştir.

Röportaj: Kök Hücre Araştırma ve Yüzey-Modifiye 3D-Yapı iskeleleri Biyoreaktörler

Bu protokolde, teknolojinin dayandığı dikey yerinden mesajların microactuator dizi imalat, ve nasıl bu temel teknoloji, yüksek verimli mekanik dinamik hücre kültürü, hem de iki boyutlu ve üç boyutlu kültür yapmak için değiştirilebilir göstermektedir paradigmalar.

Mekanik Dinamik Hücre Kültürü için Microfabricated platformlar

Bu protokolde, prokaryotik mikroorganizmaların tek hücreli analizi için bir mikroakışkan pikolitre biyoreaktörün (PLBR) üretimi, kurulumu ve temel çalışması tanıtılmaktadır. Endüstriyel olarak ilgili mikroorganizmalar, geleneksel yöntemlerle neredeyse imkansız olan, belirli zaman dilimlerinde büyüme hızı, morfoloji ve fenotipik heterojenlik hakkında bilgi sahibi olmaya izin veren ilke kanıtı olarak analiz edildi.

Mikrobiyal Tek Hücreli Analiz için Mikroakışkan Pikolitre Biyoreaktör: Fabrikasyon, Sistem Kurulumu ve Çalışması

Burada, birincil hücreleri, doku modellerini ve punch biyopsilerini 28 güne kadar mikroakışkan çok organlı bir çipte kokültür yapmak için bir protokol sunuyoruz. İnsan dermal mikrovasküler endotel hücreleri, karaciğer agregatları ve deri biyopsileri ortak bir besiyeri dolaşımında başarılı bir şekilde birleştirildi.

Çok organ Chip - Uzun vadeli Çok doku kokültürü için mikroakışkan Platformu

Biz 3D kültür ve hücreler ve çok hücreli organoids ile deney için cihazlar oluşturmak için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu cihaz, tanımlanan kemoçekici degradeler ile 3D mikro ortamlarda çözünür sinyallere hücresel tepkiler analizi sağlar. Organoids zayıf gürültülü girişleri tespiti tek hücrelerden daha iyidir.

Chemoattractant degradelere Multi-hücresel tepkiler 3D Analizi

Bu protokol, hasta kaynaklı ksenogreftlerin (PDX) genişletilmiş in vitro kültürünü mümkün kılacak yöntemleri göstermektedir. Bir adım, 3D hidrojellerde çok hücreli küme kültürlerinin genel canlılığını, canlı olmayan tek hücrelerin doğrudan çıkarılması yoluyla artırır. İkincibir adım, pdx kültürü için en iyi uygulamaları perfüzyonlu mikroakışkan bir platformda gösterir.

Perfüzyonlu Mikroakışkan Platformda Hasta Kaynaklı Ksenogreftlerin Ex vivo 3D Hidrojel Kültürleri için Geliştirilmiş Canlılık

1500 kültür ünitesi, bir dizi gelişmiş peristaltik pompa ve yerinde karıştırma modülünden oluşan karmaşık yaşam makineleri üzerinde yüksek verimli çalışmalar için mikroakışkan bir sistem sunuyoruz. Mikroakışkan çip, vivodaki son derece karmaşık ve dinamik mikro çevresel koşulların analizini sağlar.

Yüksek Verimli Mikroakışkan Cihaz Kullanarak Dinamik ÇevreSel Koşulların Üretilmesi

Bu yazıda, hücresel proseslerde çözünenlerin sekresyon dinamiklerini ve absorpsiyon oranlarını ölçmek için düşük maliyetli, çok kanallı bir perfüzyon hücre kültürü sistemi kurmak ve çalıştırmak için bir yöntem sunulmaktadır. Sistem ayrıca hücreleri dinamik uyaran profillerine maruz bırakabilir.

Dinamik Hücre Kültürü için Çıkış Fraksiyonasyonu ile Entegre Çok Akışlı Perfüzyon Biyoreaktörü

Bu protokol, perfüzyonda kan damarlarının ex vivo kültürü için yeni geliştirilen, 3D baskılı bir biyoreaktörün kurulumunu ve çalıştırılmasını sunar. Sistem, diğer kullanıcılar tarafından kolayca benimsenebilecek, pratik, uygun fiyatlı ve temel biyoloji ve farmakolojik çalışmalar gibi farklı deneysel uygulamalara uyarlanabilir şekilde tasarlanmıştır.

Ex Vivo (Canlı Canlı) 3D Baskılı Biyoreaktörde Büyük Kan Damarlarının Perfüzyon Kültürü

Ayrıntılı protokolümüz, insan bağırsak mukozasını 3D yapılar ve çeşitli hücre tipleri ile simüle eden, mikrobiyal kolonizasyona yanıt olarak bağışıklık tepkilerinin ve hücresel fonksiyonların derinlemesine analizini sağlayan gelişmiş çip üzerinde bağırsak modelinin oluşturulmasını ve kullanımını özetlemektedir.

Bağırsak mukozal bağışıklık tepkilerini analiz etmek için immünokompetan çip üzerinde bağırsak modeli

Burada, mikrofizyolojik bir sistemde kollajen ve kollajen-agaroz matrisleri kullanarak 3D hücre kültürlerinin uygulanması için talimatları detaylandıran protokoller sunuyoruz. Bu protokoller, renal proksimal tübül ve renal hücreli karsinom sferoidlerinin ko-kültürünü destekleyerek in vivo koşulları simüle eder ve böbrek kanseri hücre etkileşimlerinin ileri düzeyde araştırılmasını sağlar.

Böbrek Kanseri İlerlemesini Modellemek için Renal Sağlıklı ve Tümör Epitelinin Mikroakışkan Ko-kültürü

Keşfedin, mikro-biyoreaktörlerde üç boyutlu hücre kültürü için çip tabanlı bir platform nasıl hazırlanır. Bu yöntem, 10 milyon hücreye kadar yüksek yoğunluklu kültür ve kontrollü ortam sağlar.

Perfüze Mikro-biyoreaktörler Chip tabanlı üç boyutlu Hücre Kültürü

Daha fazla video keşfet