Name: Kronik silikon sondalar ve kayıt bir zenginleştirilmiş koşu bandı aparat Hipokampal yer hücre implantasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: Öğrenin fare hipokampusuna kronik silikon sonda implantasyonu ve zenginleştirilmiş koşu bandında yer hücresi aktivitesi kaydı yöntemini. Bu teknik eşzamanlı nöron izleme ile mekanizma araştırmalarına olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu eser Kore Enstitüsü bilim ve Teknoloji Kurumsal programı (Proje No 2E26190 ve 2E26170) ve insan sınır bilim programı (RGY0089/2012) tarafından desteklenmiştir.

tüm yöntemleri açıklanan hayvan bakım ve Kore Enstitüsü bilim ve teknoloji kullanımı Komitesi tarafından onaylanmış olan.
 1. mikro-sürücü ve elektrodu hazırlanması <ol><li>mikro sürücü montaj.
	<ol><li>Mikro sürücü (kaymak, beden ve kabuk) bölümlerini yazdırmak bir yüksek çözünürlüklü 3D printerlere harcama maddeler kullanarak 14. Parçalar hiçbir kusurları olduğundan emin olun.</li>
		<li>Kaydırıcıyı mikro-sürücü vücuda bir vida (boyut 000-120 x 1/4) ile düzeltmek.</li>
		<li>Bir somun lehim (000-120 000 120/64 onaltılık boyut) vida ucu üzerine.</li>
		<li>Vida kaydırıcıyı yukarı veya aşağı taşımak için saatin tersi yönde taşımak için saat yönünde döndür.</li>
		<li>Kabuk vücut için bir vida (boyut 000-120 x 1/4) ile düzeltmek.</li>
	</ol></li> <li>Sonda üzerinde mikro sürücü montaj.
	<ol><li>Binoküler mikroskop altında yatay bir konumda mikro tahrik düzeltmek.</li>
		<li>Bir düz timsah klip dikkatle Forseps ile sevk irsaliyesi muhafaza sonda ayırma sırasında silikon sonda flex kablosu kapmak için kauçuk doldurma ile kullanın. Bir manipülatör timsah klibine düzeltmek.</li>
		<li>Manipülatör kullanarak lay mikro-sürücü kaydırıcıyı silikon sonda paralel hareket yönü için.</li>
		<li>Geçerli bir damla diş çimento (oda sıcaklığında kür akrilik diş tamir malzemesi) kaydırıcıyı için prob düzeltmek için. Bu kaymıştır sonda pozisyon düzelt. Tutkal gibi çok hızlı tedavileri ve elektrot konumunu yeniden düzenlemek zordur tavsiye etmiyoruz.</li>
		<li>Sonda C-sahibi (bağlayıcı sahibi) için bağlayıcı diş çimento ile düzeltmek.</li>
	</ol></li> <li>Temizleme ve boya sondası koyarak.
	<ol><li>Düzeltme Microdrive/sonda montaj prob Temizleme cihaz üzerinde. Cihazın küçük köpük sünger (non-steril temizleme bezi) dönen 2 ile donatılmıştır. Tarafından manipülatör boşluğu ayarlamak.</li>
		<li>Deterjan ile süngerler emmek.</li>
		<li>Yavaş yavaş yukarı ve aşağı yumuşak bir dokunuş sağlayan süngerler arasında sonda taşımak. Mikroskop altında temizlik işlemi izlemek.</li>
		<li>Soruşturma distile su ile yıkayın. Alkol soruşturma sterilizasyon için daldırma.</li>
		<li>Bir köpük bez kullanarak Uygula Dil (lipofilik floresan boya) prob, shanks arkası. Bu bir sonraki aşamada beyin yerlerde şaftlı görselleştirme sağlayacaktır.</li>
	</ol></li> <li>Şapka montaj <ol><li>hat (baş-plaka, bağlayıcı tutucu ve cap) bölümlerini 3D yazıcı kullanarak 14. 3 parça mühürlü bir muhafaza oluşturmak üzere birbirine.</li>
		<li>Ekle (boyut M2 ve 00-90 00 90/4) fındık kafa-plaka ve tutkal ve diş çimento ile saptamak yuvalarında.</li>
		<li>Bir çamaşır makinesi kap yuvaya takýn ve tamir ile diş çimento.</li>
	</ol></li></ol> 2. Ameliyat için kafatası üzerinde şapka tespit ameliyat için kullanılan tüm araçları önceden tarafından ısıyla sterilize. Kuru sıcak boncuk aygıtı kullanılan reaksiyonunu kontamine ve ameliyat sırasında sterilize edilecek gereken araçları sterilize.
<ol><li>%4 için anestezi inisiyasyon isoflurane düzeyini ayarlayın. 5 dakika süreyle anestezi odasında fare koymak</li>
	<li>Fare stereotaksik bir cihaz yüklemek.</li>
	<li>% 1.5-2'ye isoflurane düzeyini azaltmak. Hayvan durumuna, solunum hızı, göre ameliyat sırasında seviyesini ayarlamak ve vücut sıcaklığı 20.</li>
	<li>Göze göz merhem uygulamak.</li>
	<li>Kafa derisi tıraş ve antiseptik (iodopovidone) ile hayvanın kafasını temizleyin. Cerrahi tüm adımları sırasında aseptik koşullar korumak.</li>
	<li>Kafa derisi altında enjekte bupivacaine (1 mg/kg). Kesme ve kenarlarından kafatasına ortaya çıkarmak için iyi makas kullanırken fare kafa parietal deri parçası kaldırmak. Serum ve kan durdurucu sargı süngerle temizlemek ve ameliyat sırasında kanamayı kontrol için kullanın.</li>
	<li>Bir kazıyıcı aracını kullanarak kapaklarini kaldırmak.</li>
	<li>Kafatası 21 tarihinde referans noktaları bulmak: bregma, lambda, koronal ve sagittal dikiş. Baş ayarlamak &#39; s açı sagittal ekseni boyunca Bregma ve lambda noktaları aynı yükseklikte vardır öyle ki.</li>
	<li>İki (~0.5 mm çap) başvuru ve zemin elektrotlar için kafatasındaki delik. Delikleri yaklaşık 1 mm Kaudal ve Lambda 1 mm lateral olmalıdır.</li>
	<li>Zemin ve referans elektrotlar (boyutu 000-120 000 120/16 minyatür paslanmaz çelik vidaları tel birleştiğinde-pim konektörleri için) ekleyin.</li>
	<li>Uygula ultraviyole (UV) ışık dentin aktivatör kafatası üzerinde bağ ve UV ışığı 45-60 s. için uygulayın</li>
	<li>Kafatası kenarlarında diş çimento bir tabaka uygulayın. Çimento cilt ve saç farelerin üzerinde yayılmasını önlemek.</li>
	<li>Stereotaksik manipülatör kafa plakasına düzeltmek ve kafatası üzerinde konumlandırın. Yavaş yavaş kafatası hafifçe dokunana dek kafa-plaka indirin ve kafatası ile kavşağında diş çimento uygulayın. Diş çimento tedavi 15 dakika süreyle izin</li>
	<li>Anestezi kaldırın. Fix bir bağlayıcı sahibi ve baş plaka bir kap. Ketaprofen alt kutanöz bir enjeksiyon verdikten sonra onun kafes içinde fare koymak 5 mg/kg</li>
	<li>Vermek ketaprofen alt Kutanöz enjeksiyonlari 5 mg/kg iki sonraki gün ve dikkatli bir şekilde acı bir iz için monitör için. Fareler genellikle anestezi 20-40 dakika içinde uyanmayı. Şapka implant nispeten olduğunu ışık (3,34 g), öyle ki fareler var onların başını kaldır, labirentler içinde koşmak ve tırmanmak için hiçbir sorun ev onların kafes kenarlarında.</li>
</ol> 3. Davranışsal eğitim <ol><li>sonra bir ameliyat sonrası iyileşme döneminde 7 gün, günde 1 mL su kısıtlama başlatın.</li>
	Koşu bandı kemer yapmak <li>kadife kumaş (1-2 m 5 cm) bir parça kesti ve küçük nesneleri üzerinde sıcak tutkal kullanarak bunu düzeltin. Fareyi hareket ile karışmaması amacıyla kemer kenarları dikilen nesneleri.</li>
	<li>Birlikte iki ucu dikiş tarafından koşu bandı tekerlek üzerinde kemer düzeltmek.</li>
	<li>Ekleyerek ve iki vidayı baş plaka baş-fiksasyon plaka yuvalarına sıkma baş-koşu bandı içinde sabit fare yükleyin.</li>
	<li>Kafa ölçülü su ödül için koşu bandı üzerinde çalıştırmak için fareyi eğitim Başlat. Su ödül yalamak bağlantı noktası üzerinden teslim. Başlangıçta, günde 3 kez 10 dk bir süre için koşu bandı üzerinde fare koymak.</li>
	<li>Fare kafa fiksasyon için kullanılan alır ve (genellikle ~ 3 gün sonra), kemer taşımak başlar artırmak eğitim oturumu süresi 30 dk. 2-3 hafta sonra bazı fareler 100'den fazla deneme 30 dk (kemer tam bir dönüşü olmak bir deneme sürümü) çalıştırmak.</li>
	<li>Kayıt deneyler için en iyi davranış performansları gösterilen fareler seçin.</li>
</ol> 4. Silikon sonda implantasyonu <ol><li>anestezi altında fare koymak.</li>
	<li>Fare kafa-plaka düzelterek stereotaksik aparatı yükleyin. Serum fizyolojik ile kafatası yüzeyi temizleyin.</li>
	<li>Bulmak stereotaksik işaretleri: bregma, lambda, koronal ve sagittal dikiş. Ekleme noktasına mesafeyi ölçmek ve onu işaretle</li>
	İnce ve saydam hale gelene kadar <li>kemik dikkatle matkap. Nemlendirin ve delme sırasında serum temiz.</li>
	<li>Dikkatli bir şekilde inceltilmiş kemik ve hassas güç kullanarak Dura sorun çıkarınPS. serum sürekli ıslak beyin yüzey tutun.</li>
	<li>Microdrive/silikon sonda montaj stereotaksik manipülatör için düzelt. Silikon sonda kranyotomi üzerinde de getir. Kafa-plaka silikon sonda bağlayıcı sahibine vida.</li>
	<li>Kayıt amplifikatör ve zemin/referans elektrotlar bağlayın. Kalkan elektromanyetik gürültü korumak için alüminyum folyo ile fare. Beyin elektriksel aktivitesinin izlemek için kayıt sistemi başlatmak.</li>
	<li>Yavaş yavaş micromanipulator kullanarak beynine silikon sonda yerleştirin. Sürekli elektrik sinyallerini, seyahat manipülatör mesafe ve sonda shanks kontrol (onlar beyin delici emin olun). Beyaz madde altında nispeten sessiz olmakla birlikte birim faaliyet korteks içinde görünür. Hipokampüs piramit tabakası shanks dokunduğumda birim faaliyet tekrar görünür. Bu noktadan sonra silikon sonda 200 µm geri çekmek (mikro sürücü ertesi gün bıçağı geri piramit tabaka haline getirmek için kullanabilirsiniz).</li>
	<li>Beyin yüzeyinde kemik balmumu ve mineral yağ karışımı ile kapak.</li>
	<li>Diş çimento kullanarak kafa plakasına mikro sürücü düzeltmek. Diş çimento tedavi 15 dakika izin ver. O zaman stereotaksik manipülatör mikro sürücüden bağlantısını kesin ve şapka ilham toplamak.</li>
	<li>Fareyi onun kafese koyun ve ketaprofen alt kutanöz bir iğne yapın 5 mg/kg. Acı bir iz için kontrol edin. Bu ameliyatı ilk olandan daha az invaziv ve 45 dakika içinde onlar uyanmak-yukarıya anesteziden sonra fareler genellikle etkindir. Ancak, silikon sonda beyinde stabilize etmek ihtiyacı olduğu bir gün kurtarmak fare izin.</li>
</ol> 5. Kayıt <ol><li>yüklemek fare kafa-sabit koşu bandı üzerinde. Şapka başIıkIı kaldırmak</li>
	<li>Kayıt amplifikatör bağlamak ve Kayýt iþlemini baþlatmak.</li>
	<li>İlk gününde, mikro sürücü silikon sonda hipokampüs piramit katmanına taşımak için kullanın. Vida yönünün her dönüş daha derin shanks 200 µm taşır. Yavaş yavaş şaftlı konumunu ayarlamak (~ 20-50 µm teker) dalgalanma salınımlarını 13 ve birim faaliyet görününceye.</li>
	<li>Sonraki günlerde, şaft konum ayarlamak ve ~ 1 h fare üzerinde kemer çalışırken Hipokampal etkinlik kaydetmeden önce bekleyin. Birkaç gün için iyi kayıt sinyal kalitesini korumak için sabit nesneleri kaldırmak ve fare tavan düşük &#39; şapka sert yüzeyler çarpma olasılığını en aza indirmek için s kafesi.</li>
</ol> 6. Sonda kurtarma <ol><li>anestezi altında fare koymak.</li>
	<li>Fare kafa-plaka düzelterek stereotaksik aparatı yükleyin. Şapka başIıkIı kaldırmak</li>
	<li>Hemen üzerinde mikro sürücü stereotaksik manipülatör getir. Mikro-sürücü manipülatör düzeltmek. Kafa-plaka bağlayıcı sahibinden sökün. Kabuk ve mikro sürücünün gövdesini birbirine bağlayan vidayı çıkarın.</li>
	<li>Binoküler mikroskop gözetiminde, yavaş yavaş mikro-sürücü/silikon sonda montaj stereotaksik manipülatör ile Yüksel kabuk bölümü geride bırakarak.</li>
	<li>Silikon sonda ile temizleme cihazı temizlemek.</li>
</ol>

<ol><li>Schjetnan, A. G., Luczak, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recording+large-scale+neuronal+ensembles+with+silicon+probes+in+the+anesthetized+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Recording large-scale neuronal ensembles with silicon probes in the anesthetized rat.</a> J Vis Exp. (56), (2011).</li>
<li>Buzsaki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+recording+of+neuronal+ensembles%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Large-scale recording of neuronal ensembles.</a> Nat Neurosci. 7 (5), 446-451 (2004).</li>
<li>Suner, S., Fellows, M. R., Vargas-Irwin, C., Nakata, G. K., Donoghue, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reliability+of+signals+from+a+chronically+implanted%2C+silicon-based+electrode+array+in+non-human+primate+primary+motor+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans+Neural+Syst+Rehabil+Eng%22%5BJournal%5D)">Reliability of signals from a chronically implanted, silicon-based electrode array in non-human primate primary motor cortex.</a> IEEE Trans Neural Syst Rehabil Eng. 13 (4), 524-541 (2005).</li>
<li>Csicsvari, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Massively+parallel+recording+of+unit+and+local+field+potentials+with+silicon-based+electrodes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Massively parallel recording of unit and local field potentials with silicon-based electrodes.</a> J Neurophysiol. 90 (2), 1314-1323 (2003).</li>
<li>Hochberg, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+ensemble+control+of+prosthetic+devices+by+a+human+with+tetraplegia%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neuronal ensemble control of prosthetic devices by a human with tetraplegia.</a> Nature. 442 (7099), 164-171 (2006).</li>
<li>Okun, M., Lak, A., Carandini, M., Harris, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+Term+Recordings+with+Immobile+Silicon+Probes+in+the+Mouse+Cortex%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Long Term Recordings with Immobile Silicon Probes in the Mouse Cortex.</a> PLoS One. 11 (3), e0151180(2016).</li>
<li>Vandecasteele, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+recording+of+neurons+by+movable+silicon+probes+in+behaving+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Large-scale recording of neurons by movable silicon probes in behaving rodents.</a> J Vis Exp. (61), e3568(2012).</li>
<li>Kipke, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+neurotechnologies+for+chronic+neural+interfaces%3A+new+horizons+and+clinical+opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Advanced neurotechnologies for chronic neural interfaces: new horizons and clinical opportunities.</a> J Neurosci. 28 (46), 11830-11838 (2008).</li>
<li>Royer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+timing%2C+rate+and+bursts+of+hippocampal+place+cells+by+dendritic+and+somatic+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Control of timing, rate and bursts of hippocampal place cells by dendritic and somatic inhibition.</a> Nat Neurosci. 15 (5), 769-775 (2012).</li>
<li>Boyden, E. S., Zhang, F., Bamberg, E., Nagel, G., Deisseroth, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Millisecond-timescale+genetically+targeted+optical+control+of+neural+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Millisecond-timescale genetically targeted optical control of neural activity.</a> Nat Neurosci. 8 (9), 1263-1268 (2005).</li>
<li>Royer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-array+silicon+probes+with+integrated+optical+fibers%3A+light-assisted+perturbation+and+recording+of+local+neural+circuits+in+the+behaving+animal%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Multi-array silicon probes with integrated optical fibers: light-assisted perturbation and recording of local neural circuits in the behaving animal.</a> Eur J Neurosci. 31 (12), 2279-2291 (2010).</li>
<li>Geiller, T., Fattahi, M., Choi, J. S., Royer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Place+cells+are+more+strongly+tied+to+landmarks+in+deep+than+in+superficial+CA1%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Place cells are more strongly tied to landmarks in deep than in superficial CA1.</a> Nat Commun. 8, 14531(2017).</li>
<li>Ylinen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sharp+wave-associated+high-frequency+oscillation+%28200+Hz%29+in+the+intact+hippocampus%3A+network+and+intracellular+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Sharp wave-associated high-frequency oscillation (200 Hz) in the intact hippocampus: network and intracellular mechanisms.</a> J Neurosci. 15 (1 Pt 1), 30-46 (1995).</li>
<li>Battaglia, F. P., Sutherland, G. R., McNaughton, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+sensory+cues+and+place+cell+directionality%3A+additional+evidence+of+prospective+coding+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Local sensory cues and place cell directionality: additional evidence of prospective coding in the hippocampus.</a> J Neurosci. 24 (19), 4541-4550 (2004).</li>
<li>Hazan, L., Zugaro, M., Buzsaki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Klusters%2C+NeuroScope%2C+NDManager%3A+a+free+software+suite+for+neurophysiological+data+processing+and+visualization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Klusters, NeuroScope, NDManager: a free software suite for neurophysiological data processing and visualization.</a> J Neurosci Methods. 155 (2), 207-216 (2006).</li>
<li>Kadir, S. N., Goodman, D. F., Harris, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-dimensional+cluster+analysis+with+the+masked+EM+algorithm%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Comput%22%5BJournal%5D)">High-dimensional cluster analysis with the masked EM algorithm.</a> Neural Comput. 26 (11), 2379-2394 (2014).</li>
<li>Lewicki, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+methods+for+spike+sorting%3A+the+detection+and+classification+of+neural+action+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Network%22%5BJournal%5D)">A review of methods for spike sorting: the detection and classification of neural action potentials.</a> Network. 9 (4), R53-R78 (1998).</li>
<li>Battaglia, F. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Lantern%3A+an+ultra-light+micro-drive+for+multi-tetrode+recordings+in+mice+and+other+small+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">The Lantern: an ultra-light micro-drive for multi-tetrode recordings in mice and other small animals.</a> J Neurosci Methods. 178 (2), 291-300 (2009).</li>
<li>Blumberg, M. S., Sokoloff, G., Tiriac, A., Del Rio-Bermudez, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+valuable+and+promising+method+for+recording+brain+activity+in+behaving+newborn+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">A valuable and promising method for recording brain activity in behaving newborn rodents.</a> Dev Psychobiol. 57 (4), 506-517 (2015).</li>
<li>Haiss, F., Butovas, S., Schwarz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+miniaturized+chronic+microelectrode+drive+for+awake+behaving+head+restrained+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A miniaturized chronic microelectrode drive for awake behaving head restrained mice and rats.</a> J Neurosci Methods. 187 (1), 67-72 (2010).</li>
<li>Dombeck, D. A., Khabbaz, A. N., Collman, F., Adelman, T. L., Tank, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+large-scale+neural+activity+with+cellular+resolution+in+awake%2C+mobile+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Imaging large-scale neural activity with cellular resolution in awake, mobile mice.</a> Neuron. 56 (1), 43-57 (2007).</li>
<li>Villette, V., Malvache, A., Tressard, T., Dupuy, N., Cossart, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Internally+Recurring+Hippocampal+Sequences+as+a+Population+Template+of+Spatiotemporal+Information%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Internally Recurring Hippocampal Sequences as a Population Template of Spatiotemporal Information.</a> Neuron. 88 (2), 357-366 (2015).</li>
<li>Ziv, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+dynamics+of+CA1+hippocampal+place+codes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Long-term dynamics of CA1 hippocampal place codes.</a> Nat Neurosci. 16 (3), 264-266 (2013).</li>
<li>Danielson, N. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+Contribution+of+Adult-Born+Hippocampal+Granule+Cells+to+Context+Encoding%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Distinct Contribution of Adult-Born Hippocampal Granule Cells to Context Encoding.</a> Neuron. 90 (1), 101-112 (2016).</li>
<li>Stark, E., Koos, T., Buzsaki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diode+probes+for+spatiotemporal+optical+control+of+multiple+neurons+in+freely+moving+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Diode probes for spatiotemporal optical control of multiple neurons in freely moving animals.</a> J Neurophysiol. 108 (1), 349-363 (2012).</li>
<li>Wu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+implantable+neural+probe+with+monolithically+integrated+dielectric+waveguide+and+recording+electrodes+for+optogenetics+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neural+Eng%22%5BJournal%5D)">An implantable neural probe with monolithically integrated dielectric waveguide and recording electrodes for optogenetics applications.</a> J Neural Eng. 10 (5), 056012(2013).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Nöronal aktivite kronik kayıt Hipokampal yer alanları gibi sinirsel süreçleri anlamak için önemlidir. Kronik silikon sonda implantantation gerçekleştirmek için bizim yaklaşım kendisini ayıran diğer yöntemleri7,18,19,20 aslında bu elektrot paket at kurtarmak nispeten basit tarafından denemenin sonu. Yer hücreleri genellikle serbestçe hareket eden içinde incelendiği süre koşulları, koşu bandı cih...

Silikon sondalar gerçeğini onlar doku hasarı ve onlar mevcut yoğun dolu siteler1kayıt hassas bir düzeni en aza indirerek keskin profilleri ile tasarlanmıştır dahil olmak üzere Elektrofizyolojik kayıtlar için çeşitli avantajları sunmak, 2,3,4. Onlar farklı türler, insanlar3,5,6, farklı yaklaşımlar1,7ile de dahil olmak üzere çeşitli sistemleri incelemek için kullanılır. Henüz, tekrarlayan kullanımları bunların maliyet, kırılganlık ve kronik deneyleri için uygun yöntemleri8eksik olan gerçek yüzünden hala nispeten sınırlıdır. 3D baskı teknolojisinde son gelişmeler mikro-sürücüleri ve bu hassas elektrotlar daha kolay bir kullanımı sağlamak için baş-tabak gibi cihazların özel tasarımı mümkün kılmıştır. Bir ilk adım olarak, biz inşa ve kronik silikon sondalar14implantasyon için geliştirdiğimiz araçlar kümesi kullanmak nasıl anlatacağım.
Yer hücreleri genellikle serbestçe hareket hayvan labirentler içinde çalışan kullanarak incelendiği iken, son zamanlarda onlar da sanal ortamlar15 ve koşu bandı apparatii9 (şekil 1A) araştırıldı. Bu deneysel yöntemler hayvanlar baş-, 2 fotonlu mikroskop15, yama-kelepçe16ve optrode9,10,11 kullanımını ölçülü olduğunu avantaj sunuyor teknikleri daha kolay, hayvan davranışları ve çevre ipuçları12gelişmiş denetimi sağlayan ek olarak. İkinci adımda, fareler eğitim ve bir koşu bandı cihaz yer hücre etkinliği kaydetmek için yordamlar sunacak.

<table><tbody><tr><td>Silikon Prob</td><td>Neuronexus</td><td>Buzsabi32</td><td>Kayıt elektrodu</td></tr><tr><td>Kayıt sistemi</td><td>Intantech</td><td>RHD2132/RHD2000</td><td></td></tr><tr><td>3D yazıcı</td><td>Asiga</td><td>Pico Plus 27</td><td>Mikro sürücülü</td></tr><tr><td>3D yazıcı</td> için yüksek çözünürlüklü yazıcı <td>Stratasys</td><td>Mojo</td><td>Şapka bileşenleri için daha düşük çözünürlüklü yazıcı</td></tr><tr><td>Stereotaksik aparat</td><td>Kopf</td><td>Model 963</td><td></td></tr><tr><td>Binoküler mikroskop</td><td>Leica</td><td>M60</td><td></td></tr><tr><td>Koşu bandı aparatı</td><td></td><td></td><td>Onları yapıyoruz</td></tr></tbody></table>

kronik silikon sondalar ve kayıt bir zenginleştirilmiş koşu bandı aparat hipokampal yer hücre implantasyonu

Implantation of Chronic Silicon Probes and Recording of Hippocampal Place Cells in an Enriched Treadmill Apparatus

Beyin fonksiyonlarını anlamak için önemli bir koşul davranış tanımlamasıdır ve hücre etkinlik karşılıklı olarak ilişkilendirir. Silikon sondalar elektrotlar nöronal aktivite büyük ölçekli Elektrofizyolojik kayıt için gelişmiş, ama onların kronik implantasyon için yordamlar hala gelişmemiş. Hipokampal yer hücrelerin aktivitesini bir hayvanın bulunduğu çevre ile ilişkilendirmek için bilinir, ama temel mekanizmaları hala belirsiz. Yer hücreleri araştırmak için burada yer alan faaliyet bir işaret zenginleştirilmiş koşu bandı cihazları izleme için fabrikasyon kronik silikon sonda için aygıt hangi aralıktan implantlar teknikleri bir dizi tarif. Mikro sürücü ve bir şapka uygun ve birlikte 3D baskılı plastik parçalar Tespitleme inşa edilir. Bir silikon sonda mikro sürücüde takılı, temizlenir ve boya ile kaplı. İlk ameliyat şapka bir fare kafatasında düzeltmek için gerçekleştirilir. Küçük simge fabrikasyon ve bir koşu bandı kemeri bağlı. Fare kafa-sabit çalıştırmak için eğitim koşu bandı üzerinde. İkinci bir ameliyat hangi geniş bant Elektrofizyolojik sinyalleri kaydedilir takip Hipokampus, silikon soruşturma implantı yapılır. Son olarak, silikon sonda yeniden elde etmek ve yeniden kullanılmak üzere temizledim. Koşu bandı yer hücre etkinliğini analiz yer alan mekanizmaları, yaklaşım yararı özetleyen bir çeşitlilik ortaya koymaktadır.

Bir fare ilk bir iki metre uzun kemer yardımlar (şekil 1 c) yoksun çalıştırmak için eğitildim. Elektrot implantasyonu, aynı uzunlukta yeni bir kemer takip ama 3 çift-in ipuçları sunan koşu bandı üzerinde allocentric kayma temsilcilikleri12,14oluşturmak için kuruldu. Geniş bant sinyalleri 250-kanal kayıt sistemi (amplifikatör kurulu USB arabirim kartını ve ısmarlama LabVIEW arayüzü ile) ve implante iki...

Kronik silikon sondalar implant ve bir işaret zenginleştirilmiş koşu bandı cihazları üzerinde çalışan kafa-sabit farelerde yer hücreleri kaydetmek için çeşitli adımlar açıklanmaktadır.

Kronik silikon sondalar ve kayıt bir zenginleştirilmiş koşu bandı aparat Hipokampal yer hücre implantasyonu

An important requisite for understanding brain function is the identification of behavior and cell activity correlates. Silicon probes are advanced ...

Bu prosedürün genel amacı, fare hipokampüsüne kronik silikon problar yerleştirmek ve ıstaka ile zenginleştirilmiş bir koşu bandında kafasına sabitlenmiş olarak çalışan farelerde yer hücresi aktivitesini kaydetmektir. Bu yöntem, yer hücresi aktivitesinin altında yatan mekanizmalar hakkındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bununla birlikte, çok çeşitli diğer sistemlere uygulanabilir.Silikon probların temel avantajı, yüzlerce yer hücresinin, tek bir aksiyon potansiyelinin zamansal çözünürlüğü ve hücrelerin özel konfigürasyonu hakkında bilgi ile aynı anda izlenebilmesidir. Görsel gösterim, hassas ve uygulanması gereken bir dizi manuel adım içerdiğinden kritik öneme sahiptir. Probu sevkiyat muhafazasından dikkatli bir şekilde ayırarak prob hazırlamaya başlayın.Binoküler mikroskop altında çalışırken, silikon probun esnek kablosunu tutmak için kauçuk dolgulu düz bir timsah klipsi kullanın ve muhafazayı forseps ile tutarken muhafazadan kaldırın. Timsah klipsini bir manipülatöre sabitleyin, ardından silikon probu hareket yönüne paralel olarak mikro sürücü kaydırıcısına yerleştirmek için manipülatörü kullanın. Probu kaydırıcıya sabitlemek için bir damla oda sıcaklığında kürlen

implantation-chronic-silicon-probes-recording-hippocampal-place-cells

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Silikon sondalar anestezi sıçan kullanarak nöronal aktivitenin Ekstrasellüler kayıtları açıklanacaktır. Bu teknik, aynı anda 100 den fazla nöron birden çok beyin bölgelerinin daha fazla bilgi almak sağlar. Bu tek hücre çözünürlük ile, birden fazla yerel devrelerin nöronal toplulukları dinamikleri hakkında bilgi sağlar.

Anestezi Rat Silikon Probları Büyük ölçekli Nöronal Toplulukları Kaydı

Biz büyük ölçekli birden çok tek birimlerinin kayıt ve silikon sondalar ile kemirgenlerde davranan yerel alanda potansiyel yöntemleri açıklanmaktadır. Sürücü imalat, sürücü ve prob implantasyon süreçleri prob eki kolay çoğaltma için yeterli ayrıntıları gösterilmiştir.

Kemirgenler davranmak yılında Hareketli Silikon Problar tarafından Nöronlar Büyük ölçekli Kaydı

Bu video, yerel alan potansiyellerini ölçmek için fare beynine çok uçlu bir lineer silikon prob implante etmek için bir protokolü özetlemektedir. Prosedür, probun stereotaksik bir üniteye sabitlenmesini, hedef beyin bölgesi üzerinde doğru bir şekilde konumlandırılmasını, beyne yerleştirilmesini ve diş çimentosu ile sabitlenmesini içerir. İmplantasyondan sonra, montaj bir kılıf ile korunur. İyileşmeyi takiben, kurulum, nöronal aktivite hakkında bilgi sağlayarak yerel alan potansiyellerinin...

Çok Şaftlı Lineer Silikon Problar Kullanılarak Davranan Farelerde Beyin Elektriksel Aktivitesinin Kaydedilmesi

Bu video, bir fare modelinin hipokampusuna bir tel elektrot dizisinin ve bir optik fiberin stereotaktik implantasyonunu göstermektedir.

Fare Hipokampusuna Bir Elektrot Dizisi ve Optik Fiber İmplante Edilmesi

Kaynak: Slezia, A. et al. γ-aminobütirik asidin (GABA) Epileptik Odağa Elektroforetik Olarak Verilmesi Farelerde Nöbetleri Önler. J. Vis. Uzm. (2019)Bu video, anestezi uygulanmış bir farede nöbet aktivitesini inhibe etmek için gama-aminobütirik asidin (GABA) elektroforetik dağıtımını göstermektedir. Terapötik etkinliğini değerlendirmek için prob implantasyonu, nöral aktivite kaydı, nöbet indüksiyonu ve bir mikroakışkan iyon pompası aracılığıyla kontrollü GABA iletiminde yer alan adımları ana...

GABA'nın Anestezi Uygulanmış Bir Farenin Epileptik Odağına Elektroforetik Verilmesi

Bu iletişim kuralı yerel alan potansiyelleri ile çoklu şaftlı doğrusal silikon sondalar kayıt açıklar. Geçerli kaynak yoğunluk analiz kullanarak sinyalleri dönüşüm yerel elektrik etkinlik yeniden inşası farenin hipokampus sağlar. Bu teknik ile dağınık şekilde kısıtlı beyin salınımlarını serbestçe fare hareket okudu olabilir.

Dağınık şekilde kayıt sınırlı salınım oluşur içinde fareler davranmak

Bu protokol, serbestçe hareket eden farelerde iki beyin bölgesinde dokuz bağımsız olarak ayarlanabilir tetrode ve bir ayarlanabilir opto-silikon probu implantasyonu sağlayan bir hibrid microdrive dizisinin yapımını açıklar. Ayrıca güvenli bir şekilde kurtarma ve birden fazla amaç için opto-silikon probu yeniden kullanmak için bir yöntemdir gösterilmiştir.

SerbestÇe Hareket Eden Farelerde Çift Alan Yüksek Yoğunluklu Kayıt için Kurtarılabilir Opto-Silikon Prob ve Tetrode ile Hibrid Microdrive Sistemi

Burada sunulan protokol, eşzamanlı elektroensefalografi (EEG) ve gerçek zamanlı olarak davranışsal değerlendirme hakkında bilgi sağlar. Bu protokolde yer alan tüm adımları, özellikle öğrenme ve hafıza alanlarında, nörobilimin birçok alanındaki araştırmacılar için cazip bir çözüm olarak tartıştık.

Hipokampal nörogenezi incelemek için bir araç olarak kablosuz elektrofizyoloji ve hafıza davranış testinin eşzamanlı izlenmesi

Burada, doğum sonrası gün 20'den (p20) doğum sonrası gün 60'a (p60) ve ötesine kadar kritik bir gelişimsel pencerede aynı anda birden fazla beyin bölgesinden kronik alan ve tek üniteli kayıtlara izin veren bir mikro sürücü tasarımı, cerrahi implantasyon prosedürü ve ameliyat sonrası iyileşme stratejisini açıklıyoruz.

Genç farelerde kronik tetrod kayıtları için hafif tahrikli bir implant

Özel olarak üretilen mikro sürücüler, doğrusal silikon dizileri ile kortikal kayıt alanlarının milimetre altı hedeflenmesini sağlar.

Ortak Marmoset'te Laminer Kortikal Aktivitenin Elektrofizyolojisi

Burada, kemirgenlerde kronik elektrofizyoloji için kullanım kolaylığı, prob geri kazanımı, deneysel çok yönlülük ve davranışla uyumluluk için optimize edilmiş hafif, uygun maliyetli bir prob implant sistemi sunuyoruz.

DREAM implant: Başa sabitlenmiş ve serbest hareket eden farelerde kronik elektrofizyoloji için hafif, modüler ve uygun maliyetli bir implant sistemi

Öğrenin fare hipokampusuna kronik silikon sonda implantasyonu ve zenginleştirilmiş koşu bandında yer hücresi aktivitesi kaydı yöntemini. Bu teknik eşzamanlı nöron izleme ile mekanizma araştırmalarına olanak tanır.

Kronik silikon sondalar ve kayıt bir zenginleştirilmiş koşu bandı aparat Hipokampal yer hücre implantasyonu

Daha fazla video keşfet