Name: Fare Abdominal aort Myointimal Hiperplazi ikna etmek için balon tabanlı yaralanma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-07T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Öğrenin farelerde balon yaralanması sonrası miyointimal hiperplazi gelişimini incelemek için bu cerrahi modeli. Transgenik farelerde hastalık mekanizmalarını ve tedavi stratejilerini araştırın.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar Christiane Pahrmann onun teknik yardım için teşekkür ederiz.
D.W. Max Kade Vakfı tarafından desteklenmiştir. Alınan T.D. hibe başka Kröner Fondation (2012_EKES.04) ve Deutsche Forschungsgemeinschaft (DE2133/2-1_. S. S. araştırma hibe Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; aldı. SCHR992/3-1, SCHR992/4-1).

Hayvan insana ilişkin Bakım Kılavuzu laboratuvar hayvanlarının ilkeleri için uygun olarak alınan, Enstitüsü ile laboratuvar hayvan kaynakları tarafından hazırlanan ve ulusal sağlık Enstitüleri tarafından yayınlandı. Tüm hayvan iletişim kuralları sorumlu yerel otorite ('' Amt für Gesundheit und Verbraucherschutz, Hansestadt (Office sağlık ve tüketici koruma) Hamburg'') tarafından kabul edildi.
1. kateter hazırlık
Not: kateter ile ilgili bilgi için Malzemeler tablo bakın.
<ol><li>Kateter kateter sahibinden al.</li>
	<li>Distal bağlantı noktası Lümen den embolisinin iyileşiyorsun.</li>
	<li>Siyanoakrilat yapıştırıcı kateter distal ucunda bir damla koymak. Dikkat: lateks veya nitril eldiven giymek.</li>
	<li>Kateter RX limanda embolisinin yerleştirin ve Lümen distal bağlantı noktasına ilerlemek. Daha sonra embolisinin biraz sonuna kadar ~ 5 mm boşluk bırakmayı çekin.</li>
	<li>Kuru yapışkan izin vermek için 5 dakika bekleyin.</li>
	<li>Embolisinin hareket, sabit olmalıdır. Eğer hala mobil, adımları 1.3-1.6 yineleyin.</li>
	<li>3-mL şırınga 1,5 mL % 0,9 serum doldurmak ve balon enflasyon bağlantı noktasına bağlayın.</li>
	<li>Balon enflasyon sınamak için şırınga pistonu itin. 0.6 mL serum fizyolojik şırıngada bırakın.</li>
</ol>2. fare hazırlık
<ol><li>Erkek farelerin 14 yaklaşık 30 gram ağırlığında haftalık yaşta elde edilir. Not: Biz laboratuvar Enstitüsü hayvanlardan elde edilen hayvanlar kullanılır. Biz burada C57BL/6J kullanılır.</li>
	<li>Bir indüksiyon odası fare 2.0-%2.5 isofurane (500 mL/dk oksijen akış hızı) ile uyuşturan için kullanın.</li>
	<li>Sırtında bir Isıtma yastık üzerinde fareyi getirin ve anestezi ağız ve burun fare kapsayan bir sağlamlılık ile korumak. Anestezi yeterli derinlik için arka ayak ve kuyruk refleksleri olmayışı doğrulamak için pinching tarafından kontrol edin.</li>
	<li>Karın saç saç makası kullanarak kaldırın.</li>
	<li>Arka ayakları yaymak ve konumlarını bant kullanarak düzeltin.</li>
	<li>Karın bölgesi povidone-iyot, % 80'i etanol tarafından takip kullanarak dezenfekte. Bu işlemi iki kez daha tekrarlayın.</li>
	<li>Cerrahi sitesi değil kontamine emin olmak için bir cerrahi örtüsü kullanın. Açık cilt ve kas katmanları boyunca linea alba karın organları ortaya çıkarmak için bir makas (veya neşter).</li>
	<li>Bağırsak % 0,9 serum fizyolojik nemli eldiven içinde yatıyordu ve onları nemli tutmak için sarın.</li>
	<li>İki iyi forseps yağ dokusu karın aortu yukarıda kaldırmak için kullanın.</li>
	<li>Bir insülin şırınga (30 G) kullanarak, heparin çözüm (50 U/mL) 250 µL Inferior Vena kava (IVC) içine enjekte ve sistemik dağıtımı için 3 dakika bekleyin. Heparin hemostaz bastırmak ve ameliyat sırasında istenmeyen pıhtılaşma önlemek.</li>
	<li>İki forseps kullanarak, infrarenal aortada aşağı onun çatallanma ve onun giden şube damarları incelemek.</li>
	<li>Klempe bir bölge, bir yüksek sıcaklık cauterizer yerleştirilmesi için beklenen yan damarlara ligate.</li>
	<li>Hemen altındaki renal arterler infrarenal aortada sıkma tarafından kan akışını durdurmak.</li>
	<li>İkinci bir klemp hemen üstünde aort çatallanma distal bir konuma yerleştirin.</li>
	<li>Küçük bir yatay kesi kelepçeler gemi boyunca arasındaki orta nokta itibariyle makas kullanarak gerçekleştirin. Not: Belgili tanımlık kesme boyutu 1/3 kap çevresi'e eşdeğer olmalıdır.</li>
	<li>Bir şırınga (30 G) iğne ile belgili tanımlık kesme yerleştirin ve aort 250 µL heparin çözüm (50 U/mL) ile yıkayın.</li>
	<li>10-0 dikişler kullanarak, bir tek düğüm belgili tanımlık kesme her yanına koyun.</li>
	<li>Aorta belgili tanımlık kesme bir gemi DİLATÖR ekleyerek genişletmek ve gemi biraz yayıldı. Dilatasyon 2-3 kere tekrar edin.</li>
	<li>% 0,9 serum fizyolojik ile balon kateter nemlendirir.</li>
	<li>Düzleştirilmiş balon katater aort yerleştirin ve aort üzerinde proksimal klemp doğru ilerlemek.</li>
	<li>Proksimal klemp ulaşan, dikkatle proksimal klemp açın ve ~0.6 mL serum enjekte edilerek kan kaçağı önlemek için balon şişirmek. Not: 1.5:1 gemisine şişirilmiş balon oranıdır.</li>
	<li>Yaklaşık 2 cm retrograd kateter ilerlemek.</li>
	<li>Genişletilmiş kateter geri, balon biraz şırınga serbest bırakarak deflate ise çek.</li>
	<li>Katater aort kesi ulaştığında proksimal klemp takın. Balon tamamen boşaltmak ve çıkarın.</li>
	<li>30 G kullanarak aort 250 µL heparin çözüm (50 U/mL) ile yıkayın.</li>
	<li>10-0 dikişler kullanarak aort kesi kapatın. Yer dikiş ventral tarafta bir ya da iki dikiş tarafından takip her yan tarafında kesildi.</li>
	<li>Distal klempi aç. Kanama, durumunda kelepçe tekrar kapatın ve ek dikiş yerleştirin.</li>
	<li>Proksimal klemp dikkatlice açın.</li>
	<li>İki temizleme bezi destek ve herhangi bir kanama durdurmak için dikiş üzerinde yerleştirin.</li>
	<li>Absorbe hemostats Bunu sürdürebilmek için dikiş üzerinde yerleştirin. Not: Aortik nabız klemple kesi görünür olmalıdır.</li>
	<li>Bağırsak karın geri yerleştirin.</li>
	<li>Karın boşluğu ile steril % 0,9 serum, 37 ° C'ye Önceden ısıtılmış olduğu durulama</li>
	<li>6-0 çalışan dikiş kullanarak karın kas katman kapatın.</li>
	<li>5-0 çalışan dikiş ile cilt kapatın.</li>
	<li>4-5 mg/kg Carprofen subkutan uyanmak için fareyi izin vermeden önce enjekte et. O bilinç kazanmıştır kadar hayvan izle, sternal recumbency korumak. Hayvan yalnız bir kafes içinde tam kurtarma kadar tutun.</li>
	<li>Metamizole 3 gün ağrı kesici olarak içme suyu (50 mg/100 mL) ekleyin ve hayvan her gün izlemek. Genellikle fareler gibi tatlı metamizole tat ve ameliyattan hemen sonra içki başlatın. Tercih edilen sürekli salınım enjekte edilebilir maddeleri metamizole yerine kullanılabilir. Not: Bu model için gözlem süresi 28 gün olur.</li>
</ol>3. histopatoloji
<ol><li>Balon yaralı aort 2.2-2,9 adımlarda açıklandığı gibi farelerin hazırlayarak 28 gün sonra hasat.</li>
	<li>Makas (çatallanma ve böbrek damarlarının yukarıda 0.3 mm arasında) balon yaralı aort kaldırmak ve kalbini keserek fare ötenazi için kullanın.</li>
	<li>% 0,9 ile gemi Lümen sifonu NaCl.</li>
	<li>Gecede %4 paraformaldehyde (PFA) hasat gemi tamir ve 5 saat süreyle etanol, 2 saat, bir saat için % 80 etanol, % 95 etanol için 2 saat boyunca % 70 etanol ile başlayan ve % 100 etanol konsantrasyonları artan kurutmak. O zaman, Ksilen örneklerinde 2 saat boyunca parafin örnekleriyle infiltre daha önce 3 kez, kuluçkaya. Not: % 0,9 ile hasat gemi kızarma yerine NaCl, %4 ile temizlenip PFA. Dikkat: PFA ve Ksilen zehirlidir ve özen ile ele alınmalıdır.</li>
	<li>Örnek parafin içinde katıştırabilir ve bir microtome kullanarak 5 µm kalınlığında dilimler halinde kesin.</li>
	<li>Ksilen ile slaytlar için 3 kere 5 dakika deparaffinize.</li>
	<li>Etanol azalan bir dizi kullanarak doku slaytlar rehydrate. 2 kez 5 min, % 95, % 80 ve % 70 etanol tarafından 3 dakika takip için % 100 etanol ile başlayın.</li>
	<li>Slaytları Masson'ın açıklanan18trichrome boyama ile leke.</li>
	<li>% 100 etanol 10 min için 2 kez lekeli slaytları kurutmak. Ksilen 10 min için 2 kez ile temizleyin ve montaj ortamda monte edin.</li>
	<li>Slaytları parlak alan mikroskopla görüntüleyin. Bir genel bakış resim veya 0.35 detaylı gözlem için sayısal bir diyafram ile 20 x büyütme ile bir lens için 5 x büyütme ve 0.12 sayısal bir diyafram ile bir lens kullanmak.</li>
</ol>4. ayirt mikroskobu
<ol><li>Etanol azalan bir dizi kullanarak doku slaytlar rehydrate. 2 kez 5 min, % 95, % 80 ve % 70 etanol 3 min tarafından takip için % 100 etanol ile başlayın.</li>
	<li>Antijen-alma slaytlar bir gemi 20 dk için antijen-alma çözümde Isıtma tarafından gerçekleştirin.</li>
	<li>Oda sıcaklığında aşağı slaytlar soğumaya bırakın.</li>
	<li>Slaytları fosfat tamponlu tuz (PBS) ile üç kez yıkadıktan sonra antijen engelleme çözüm bölümlerinde 30 dk için geçerli.</li>
	<li>Slaytlar PBS ile 5 min için üç kez yıkayın.</li>
	<li>Bölümler ile birincil antikor birincil antikor Dilüent seyreltilmiş kuluçkaya. Not: Konsantrasyon ve kuluçka zamanı ayrı ayrı her antikor için seçilmelidir.</li>
	<li>Slaytlar ilişkisiz antikor kaldırmak için PBS ile 5 min için üç kez yıkayın.</li>
	<li>Bölümler ile önceden konjuge bir ikincil antikor ikincil antikor Dilüent seyreltilmiş kuluçkaya. Not: Konsantrasyon ve kuluçka zamanı ayrı ayrı her antikor için seçilmelidir.</li>
	<li>İlişkisiz antikorlar üç kez 5 min için slaytlar yıkayarak çıkarın.</li>
	<li>4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) kullanarak 15dk için hücre çekirdeği counterstain; son DAPI konsantrasyon-meli var olmak 350 nM.</li>
	<li>Slaytlar ayirt çözüm montaj uyumlu bağlayın. Not: Yanlış montaj çözümü kullanarak Floresans sinyal belirsiz.</li>
	<li>Slaytlar floresan mikroskop ile görüntüleyin. 40 x büyütme objektif 1.3 sayısal bir diyafram ile kullanın.</li>
</ol>

<ol><li>Kochanek, K. D., Xu, J., Murphy, S. L., Minino, A. M., Kung, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deaths%3A+final+data+for+2009%5BTitle%5D)+AND+%22Natl+Vital+Stat+Rep%22%5BJournal%5D)">Deaths: final data for 2009.</a> Natl Vital Stat Rep. 60 (3), 1-116 (2011).</li>
<li>Austin, G. E., Ratliff, N. B., Hollman, J., Tabei, S., Phillips, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intimal+proliferation+of+smooth+muscle+cells+as+an+explanation+for+recurrent+coronary+artery+stenosis+after+percutaneous+transluminal+coronary+angioplasty%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Intimal proliferation of smooth muscle cells as an explanation for recurrent coronary artery stenosis after percutaneous transluminal coronary angioplasty.</a> J Am Coll Cardiol. 6 (2), 369-375 (1985).</li>
<li>Greenwald, S. E., Berry, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+vascular+grafts%3A+the+importance+of+mechanical+and+haemodynamic+properties%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Improving vascular grafts: the importance of mechanical and haemodynamic properties.</a> J Pathol. 190 (3), 292-299 (2000).</li>
<li>Majesky, M. W., Schwartz, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smooth+muscle+diversity+in+arterial+wound+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Smooth muscle diversity in arterial wound repair.</a> Toxicol Pathol. 18 (4 Pt 1), 554-559 (1990).</li>
<li>Owens, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+differentiation+of+vascular+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Regulation of differentiation of vascular smooth muscle cells.</a> Physiol Rev. 75 (3), 487-517 (1995).</li>
<li>Owens, G. K., Kumar, M. S., Wamhoff, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+regulation+of+vascular+smooth+muscle+cell+differentiation+in+development+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Molecular regulation of vascular smooth muscle cell differentiation in development and disease.</a> Physiol Rev. 84 (3), 767-801 (2004).</li>
<li>Kleemann, R., Zadelaar, S., Kooistra, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokines+and+atherosclerosis%3A+a+comprehensive+review+of+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Cytokines and atherosclerosis: a comprehensive review of studies in mice.</a> Cardiovasc Res. 79 (3), 360-376 (2008).</li>
<li>Karas, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+intimal+proliferation+after+balloon+injury+and+stenting+in+swine%3A+an+animal+model+of+restenosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Coronary intimal proliferation after balloon injury and stenting in swine: an animal model of restenosis.</a> J Am Coll Cardiol. 20 (2), 467-474 (1992).</li>
<li>Ip, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+platelets%2C+thrombin+and+hyperplasia+in+restenosis+after+coronary+angioplasty%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">The role of platelets, thrombin and hyperplasia in restenosis after coronary angioplasty.</a> J Am Coll Cardiol. 17 (6 Suppl B), 77B-88B (1991).</li>
<li>Mason, R. G., Read, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Some+species+differences+in+fibrinolysis+and+blood+coagulation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res%22%5BJournal%5D)">Some species differences in fibrinolysis and blood coagulation.</a> J Biomed Mater Res. 5 (1), 121-128 (1971).</li>
<li>Lafont, A., Faxon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+do+animal+models+of+post-angioplasty+restenosis+sometimes+poorly+predict+the+outcome+of+clinical+trials%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Why do animal models of post-angioplasty restenosis sometimes poorly predict the outcome of clinical trials?</a> Cardiovasc Res. 39 (1), 50-59 (1998).</li>
<li>Matter, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+balloon-induced+inflammation%2C+proliferation%2C+and+neointima+formation+in+apolipoprotein+E+%28ApoE%29+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Increased balloon-induced inflammation, proliferation, and neointima formation in apolipoprotein E (ApoE) knockout mice.</a> Stroke. 37 (10), 2625-2632 (2006).</li>
<li>Lindner, V., Fingerle, J., Reidy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+arterial+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse model of arterial injury.</a> Circ Res. 73 (5), 792-796 (1993).</li>
<li>Simon, D. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+neointimal+formation+in+Mac-1%28-%2F-%29+mice+reveals+a+role+for+inflammation+in+vascular+repair+after+angioplasty%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Decreased neointimal formation in Mac-1(-/-) mice reveals a role for inflammation in vascular repair after angioplasty.</a> J Clin Invest. 105 (3), 293-300 (2000).</li>
<li>Sata, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+vascular+injury+that+induces+rapid+onset+of+medial+cell+apoptosis+followed+by+reproducible+neointimal+hyperplasia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">A mouse model of vascular injury that induces rapid onset of medial cell apoptosis followed by reproducible neointimal hyperplasia.</a> J Mol Cell Cardiol. 32 (11), 2097-2104 (2000).</li>
<li>Moroi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+of+genetic+deficiency+of+endothelial+nitric+oxide%2C+gender%2C+and+pregnancy+in+vascular+response+to+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Interaction of genetic deficiency of endothelial nitric oxide, gender, and pregnancy in vascular response to injury in mice.</a> J Clin Invest. 101 (6), 1225-1232 (1998).</li>
<li>Painter, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myointimal+hyperplasia%3A+pathogenesis+and+implications.+2.+Animal+injury+models+and+mechanical+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Artif+Organs%22%5BJournal%5D)">Myointimal hyperplasia: pathogenesis and implications. 2. Animal injury models and mechanical factors.</a> Artif Organs. 15 (2), 103-118 (1991).</li>
<li>Stubbendorff, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducing+myointimal+hyperplasia+versus+atherosclerosis+in+mice%3A+an+introduction+of+two+valid+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Inducing myointimal hyperplasia versus atherosclerosis in mice: an introduction of two valid models.</a> J Vis Exp. (87), e51459(2014).</li>
<li>Deuse, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dichloroacetate+prevents+restenosis+in+preclinical+animal+models+of+vessel+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Dichloroacetate prevents restenosis in preclinical animal models of vessel injury.</a> Nature. 509 (7502), 641-644 (2014).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Bu yazı myointimal Hiperplazi gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterir ve altta yatan patolojik süreçlerin araştırma ve test yeni ilaçlar veya tedavi olanakları sağlar.
Bu iletişim kuralı en kritik aort denudation adımdır. Aşırı denudation anevrizma oluşumu ve modeli başarısızlık için yol açacak gibi özel bakım bu adımı sırasında ödenmesi gerekmektedir. Öte yandan, denudation yeterince gerçekleştirilirse, çok az myointima geliştirecek. Bu nedenle, denudation adım yoğunluğunu sonucu v...

Koroner ve periferik arter arter stenoz morbidite ve mortalite hastalarda1üzerinde büyük bir etkiye sahiptir. Bir altta yatan patolojik myointima Hiperplazi (MH), artan nükleer silahların yayılmasına karşı geçiş ve vasküler düz kas hücreleri (SMC)2hücre dışı matriks proteinlerinin sentezi ile karakterize bir mekanizmadır. SMC gemi media tabakası bulunur ve Lümen yüzeye stimülasyon geçirilir. Uyarıcı sinyalleri ve büyüme faktörleri, sitokinler, hücre-hücre iletişim, lipitler, hücre dışı matriks bileşenleri ve mekanik makas içerir Kuvvetleri3,4,5,6germek. Yaralanma damar duvarının, patolojik veya iyatrojenik, endotel hücre ve düz kas hücre hasarı neden ve inflamatuar reaksiyonları teşvik ve böylece MH7' ye yol.
Farklı hayvan modelleri Arteryel yaralanma ve myointima Hiperplazi çalışmaya şu anda kullanılabilir. Veya büyük hayvanlar domuzlar gibi köpekler benzer arter ve koroner anatomi insanlarla paylaşma avantajına sahip ve özellikle anjiyoplasti teknikleri, yordam ve aygıtları8araştıran çalışmalar için uygundur. Köpekler sadece gemi yaralanma11hafif bir yanıt ancak, domuz modelleri daha yüksek thrombogenicity9,10, dezavantajı vardır. Buna ek olarak, tüm büyük hayvan modellerinde özel konut, ekipman ve personel, yüksek maliyetleri ile bağlı olan ve her zaman bir kurum olarak mevcut değildir gerektirir. Sıçanlar ve fareler küçük hayvan modelleri içerir. Fareler için karşılaştırıldığında, fareler daha düşük maliyet avantajları ve knock out modelleri çeşitli varlığı var. Bu videoda açıklanan model ApoE-/-Batı bir diyetle beslenen yakından anjiyoplasti aterosklerotik gemiler12klinik ayarını taklit etmek için fareler ile kombine edilebilir. Önceki misal yolu ile tel yaralanma13, sıvı kuruma14, Bahar15ya da kol yaralanması16vasküler yaralanma indüklenen. Yaralanma doğası büyük ölçüde geliştirme ve MH Anayasası etkisi olacaktır beri gemi yaralanma ikna etmek için bir balon kateter kullanarak klinik ayarını taklit etmek için en iyi yoldur.
Bu makalede MH farelerde bir balon kateter ile ikna etmek için bir roman yöntemi açıklanmaktadır. İntimal katmanın ve aynı zamanda bir overdistension gemi indüksiyon kazıma bir RX-Port (şekil 1A) ile bir balon kateter (1.2 mm x 6 mm) kullanımına izin verir. Bu faktörlerin her iki MH gelişimi için önemli Tetikleyiciler vardır. 28 gün17bu model gözlem zamanı.

<table><tbody><tr><td>10-0 Ethilon sütür</td><td>Ethicon</td><td>2814G</td><td></td></tr><tr><td>3 mL Şırınga</td><td>BD Medical</td><td>309658</td><td></td></tr><tr><td>%37 HCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H1758</td><td></td></tr><tr><td>5-0 prolen sütür</td><td>Ethicon</td><td>EH7229H</td><td></td></tr><tr><td>6-0 prolen sütür</td><td>Ethicon</td><td>8706H</td><td></td></tr><tr><td>Asit Fuchsin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F8129-25G</td><td>Trikrom boyama</td></tr><tr><td>Antijen alma çözeltisi</td><td>Dako</td><td>S1699</td><td></td></tr><tr><td>Azofloksin</td><td>Waldeck</td><td>1B-103</td><td>Trikrom boyama</td></tr><tr><td>Bepanthen Göz ve Burun merhemi Bayer</td><td></td><td>1578675</td><td>Göz merhemi</td></tr><tr><td>Betadine Çözeltisi</td><td>Betadine Purdue Pharma</td><td>NDC:67618-152</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>Charles Nehri</td><td>Stok numarası 000664</td><td></td></tr><tr><td>Kelepçe aplikatörü</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>18056-14</td><td>ÇENE KARARTMASI: 4 x 0,75 mm
UZUNLUK: 13 mm</td></tr><tr><td>Kollajen 3</td><td>abcam</td><td>ab7778</td><td>Antikor</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Thermo Fischer</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>Eşek anti-Keçi IgG AF555</td><td>Invitrogen</td><td>A21432</td><td>İkincil antikor Eşek</td></tr><tr><td>anti-Tavşan IgG AF488</td><td>Invitrogen</td><td>A21206</td><td>İkincil antikor</td></tr><tr><td>Eşek anti-Tavşan IgG AF488</td><td>Invitrogen</td><td>A11055</td><td>İkincil antikor</td></tr><tr><td>Eşek anti-Tavşan IgG AF555</td><td>Invitrogen</td><td>A31572</td><td>İkincil antikor</td></tr><tr><td>Etanol% 70</td> <td>Th. Geyer</td><td>2270</td><td></td></tr><tr><td>Etanol% 96</td> <td>Th. Geyer</td><td>2295</td><td></td></tr><tr><td>Etanol mutlak</td><td>Th. Geyer</td><td>2246</td><td></td></tr><tr><td>FAP</td><td>abcam</td><td>ab28246</td><td>Antikor</td></tr><tr><td>Forseps ince</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Forseps standardı</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11023-10</td><td></td></tr><tr><td>Buzul Asetik Asit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>537020</td><td></td></tr><tr><td>Saç kesme makinesi</td><td>WAHL</td><td>8786-451A ARCO SE</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Rotexmedica</td><td>PZN 3862340</td><td>25.000 IE/mL</td></tr><tr><td>Yüksek sıcaklık koter seti</td><td>Bovie</td><td>18010-00</td><td></td></tr><tr><td>Image-iT FX Sinyal Arttırıcı</td><td>Invitrogen</td><td>I36933</td><td>Engelleme çözümü</td></tr><tr><td>Açık Yeşil SF</td><td>Waldeck</td><td>1B-211</td><td>Trikrom boyama</td></tr><tr><td>Mikrocerrahi kelepçe</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>18055-04</td><td>Mikro Serin - 4mm</td></tr><tr><td>MINI TREK Koroner Dilatasyon Kateteri 1.20 mm x 6 mm / Hızlı Değişim</td><td>Abbott</td><td>1012268-06U</td><td></td></tr><tr><td>Molibdatofosforik asit hidrat</td><td>Merck</td><td>1.00532.0100</td><td>Trikrom boyama</td></tr><tr><td>NaCl %0,9</td> <td>B.Braun</td><td>PZN 06063042 Mad. No.: 3570160</td><td></td></tr><tr><td>İğne tutucu</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>12075-14</td><td></td></tr><tr><td>Novaminsülfon</td><td>Ratiopharm</td><td>PZN 03530402</td><td>Metamizol</td></tr><tr><td>Turuncu G</td><td>Waldeck</td><td>1B-221</td><td>Trikrom boyama</td></tr><tr><td>Parafin</td><td>Leica biyosistemleri</td><td>REF 39602004</td><td></td></tr><tr><td>PBS pH 7,4</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>PFA %4</td> <td>Elektron Mikroskobu Bilimler</td><td>#157135S</td><td></td></tr><tr><td>Ponceau S çözeltisi</td><td>Serva Elektroforez</td><td>33427</td><td>Trikrom boyama</td></tr><tr><td>Birincil antikor seyreltici</td><td>Dako</td><td>S3022</td><td></td></tr><tr><td>Prolong Gold Montaj çözümü</td><td>Thermo Fischer</td><td>P36930</td><td>İmmünofloresan lekeli slaytlar için montaj çözümü</td></tr><tr><td>Değiştirilebilir İnce Uçlu</td><td>Bovie</td><td>H101</td><td></td></tr><tr><td>Rezorsin-Fuchsin Weigert</td><td>Waldeck</td><td>2E-30</td><td>Trikrom boyama</td></tr><tr><td>Rimadyl</td><td>Pfizer</td><td>400684.00.00</td><td>Carprofen</td></tr><tr><td>Makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>Makas Vannas tarzı</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>15000-03</td><td></td></tr><tr><td>İkincil antikor seyreltici</td><td>Dako</td><td>S0809</td><td></td></tr><tr><td>Hızlı etkili Yapıştırıcı MINIS 3x1g</td><td>UHU</td><td>45370</td><td>Siyanoakrilat</td></tr><tr><td>Sürgülü Raf</td><td>Ted Pella</td><td>21057</td><td></td></tr><tr><td>SM22</td><td>abcam</td><td>ab10135</td><td>Antikor</td></tr><tr><td>SMA</td><td>abcam</td><td>ab21027</td><td>Antikor</td></tr><tr><td>Boyama kabı</td><td>Ted Pella</td><td>21075</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi mikroskop</td><td>Leica</td><td>M651</td><td></td></tr><tr><td>Tabotamp fibriller</td><td>Ethicon</td><td>431962</td><td>Emilebilir hemostat</td></tr><tr><td>Transpore Cerrahi Bant</td><td>3M</td><td>1527-1</td><td></td></tr><tr><td>U-100 İnsülin şırınga</td><td>BD Medical</td><td>324825</td><td></td></tr><tr><td>Damar Genişletici</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>18603-14</td><td></td></tr><tr><td>Vitro-Clud</td><td>Langenbrinck</td><td>04-0001</td><td></td></tr><tr><td>Weigerts demir hematoksilen Kiti</td><td>Merck</td><td>1.15973.0002</td><td>Trikrom boyama</td></tr><tr><td>Ksilen</td><td>Th. Geyer</td><td>3410</td><td></td></tr></tbody></table>

fare abdominal aort myointimal hiperplazi ikna etmek için balon tabanlı yaralanma

Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta

Hayvan modelleri kullanımını daha iyi MH, Arteryel stenoz için bir önemli neden anlamak için önemlidir. Bu makalede, biz kurulan Gemi yaralanma modelleri büyük hayvanlarda ile karşılaştırılabilir bir fare balon denudation model göstermek. Aort denudation model balon kateter ile klinik ayarını taklit eder ve karşılaştırılabilir pathobiological ve fizyolojik değişikliklere yol açar. Kısaca, yatay bir kesi içinde aorta abdominalisgerçekleştirdikten sonra bir balon kateter olacak geminin eklenen, şişirilmiş ve retrogradely tanıttı. Enflasyon balon intima yaralanma ve geminin overdistension yol açacaktır. Kateter kaldırdıktan sonra aort kesi ile tek dikiş kapalı olacaktır. Bu makalede gösterilen modeli tekrarlanabilir, gerçekleştirmek, kolay ve hızlı ve güvenilir bir şekilde kurulabilir. Ekonomik bir biçimde uygulanabilir pahalı deneysel tedavi edici ajanlar değerlendirmek için özellikle uygundur. Farklı nakavt-fare suşları kullanarak, farklı genler MH gelişimi üzerine etkisi tespit edilebilir.

Balon denudation MH geliştirme farelerde çalışmaya uygun bir modeldir. Hayvanlar cerrahiden de yeniden elde etmek ve mükemmel fiziksel durumu sonrası ameliyat göster. Bu model ile % 3 ölüm oranı cerrahi işlem nedeniyle daha az 50 farelerde kurduk. Şekil 1B -C temel cerrahi adımı göster. Bir cilt kesi sonra linea alba, aorta abdominalistanımlamak. Mikrocerrahi kelepçeler (şekil 1B) yerleştirin. A...

Bu makalede, aortik balon yaralanma sonra myointimal Hiperplazi (MH) gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterilmektedir.

Fare Abdominal aort Myointimal Hiperplazi ikna etmek için balon tabanlı yaralanma

The use of animal models is essential for a better understanding of MH, one major cause for arterial stenosis.In this article, we demonstrate a murine ...

Bu fare tabanlı model sistemin genel amacı, aort balonu yaralanmasından sonra miyointimal hiperplazi gelişimini incelemektir. Bu model sistemi, gelişimine hangi faktörlerin katkıda bulunduğu gibi miyointimal hiperplazi ile ilgili temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Transgenik farelerde miointimal hiperplazinin gelişimini inceleyerek, hastalığın patomekanizmasını daha iyi anlamayı umuyoruz.Bu hayvan modelinin bir diğer avantajı da hastalığın hızlı ilerlemesidir. Sadece birkaç hafta içinde, farelerde incelendik. İlk önce gerekli kateteri hazırlayın.Tutucudan çıkarın ve kılavuz teli distal porttan lümenden dışarı çekin. Daha sonra kateterin distal ucuna bir damla siyanoakrilat koyun ve kılavuz teli RX portundan, ardından lümenden ve distal porttan dışarı doğru besleyin. Ardından, yaklaşık beş milimieterin dışarı çıkmasını sağlamak için kılavuz teli hafifçe geri çekin ve yapıştırıcının kurumasını bekleyin.Daha sonra üç mililitrelik bir şırıngayı 1.5 mililitre% 0.9 salin ile doldurun ve kateterin balon şişirme portuna bağlayın. Ardından balon şişirmeyi test etmek için pistonu itin. Şırıngada yaklaşık 0,6 mililitre salin bırakın.Ardından, fareyi ameliyat için hazırlayın. Bir izofluran odasında uyuşturun ve daha sonra ameliyat sırasında bir burun konisi yoluyla izofluran verin. Devam etmeden önce, refleks olmadığını doğrulamak için arka ayakları ve kuyruğu sıkıştırarak yeterli anestezi derinliğini onaylayın.Daha sonra bir saç düzeltici kullanarak karın kıllarını alın ve arka bacakların konumunu bant kullanarak sabitleyin. Son olarak, üç alternatif povidon iyot ve ardından %80 etanol kullanarak karın bölgesini dezenfekte edin. Karın organlarını ortaya çıkarmak için linea alba boyunca cildi ve kas katmanlarını diseksiyonla başlayın.Sonra bağırsakları bir kenara koyun, nemli tutmak için tuzlu suya batırılmış bir gazlı beze sarın. Şimdi abdominal aortun üzerindeki yağ dokusunu çıkarmak için iki ince forseps kullanıyor. Daha sonra bir insülin şırıngasından IVC'ye yaklaşık 12 ünite heparin sülfat enjekte edin ve sistemik dağıtım için üç dakika bekleyin.Daha sonra infrarenal aortu bifurkasyona kadar incelemek ve giden dalları ortaya çıkarmak için forseps kullanın. Daha sonra koterizasyon kullanarak, klemplenecek alan içindeki infrarenal aort boyunca yan damarları bağlayın. Ardından, damarı doğrudan renal arterlerin altına klempleyerek ve aort bifurkasyonunun hemen üzerinde distal bir pozisyonda klempleyerek kan akışını durdurun.Şimdi kelepçeler arasındaki orta noktada damar boyunca küçük bir yatay kesi yapın. Kesi, damarın çevresinin yaklaşık 1/3'ü kadar olmalıdır. Daha sonra, bir insülin şırıngası kullanarak, aortu daha önce olduğu gibi heparin çözeltisi ile yıkayın.Daha sonra, insizyonun her iki tarafına tek düğümlü 10-0 dikiş yerleştirin. Devam etmek için aortu genişletin. Kesiye bir damar genişletici yerleştirin ve damarı hafifçe yayın.Bunu iki veya üç kez yapın. Daha sonra balon kateteri tuzlu su ile ıslatarak hazırlayın. Daha sonra balon kateteri sönmüş olarak aort içine yerleştirin ve proksimal klempe doğru ilerletin.Proksimal kelepçeyi dikkatlice açın ve yaklaşık 0,6 mililitre salin enjekte ederek kan sızıntısını önlemek için balonu şişirin. Ardından, kateteri yaklaşık iki santimetre geriye doğru ilerletin. Balonu hafifçe söndürürken kateteri geri çekin.Kateter aort insizyonuna ulaştığında, proksimal klempi tekrar takın. Ardından balonu tamamen söndürün ve çıkarın. Şimdi aortu heparin çözeltisi ile durulayın.Daha sonra aort kesisini her iki yan tarafta kesintili 10-0 dikişler kullanarak kapatarak devam edin. Ardından ventral tarafta bir veya iki dikiş atılır. Daha sonra distal klempi açın, kanama olup olmadığını kontrol edin ve gerekirse ek dikişler yerleştirin.Kanama olmadığında, proksimal kelepçeyi dikkatlice açın. Destek ve kanamayı yavaşlatmak için dikişlerde sürüntü kullanın. Daha sonra onları sürdürmek için dikişlerin üzerine emilebilir kanama durdurucular yerleştirin.Her iki klemp de açıkken, aort nabzı insizyondan distal olarak görülebilmelidir. Şimdi bağırsakları tekrar karın içine yerleştirin ve karın boşluğunu 37 santigrat dereceye kadar ısıtılmış tuzlu su ile durulayın. Daha sonra karın kas tabakasını 6-0 koşu dikişleri kullanarak kapatın.Ve sonra cildi 5-0 koşu dikişleri ile kapatın. Daha sonra, hayvan uyanmadan hemen önce deri altına bir analjezik enjekte edin. Şimdi fareyi bilinç kazanana ve sternal yaslanmayı sürdürene kadar izleyin.Bilinciniz açıldıktan sonra, tamamen iyileşene kadar hayvanı tek başına barındırın. Üç gün boyunca içme suyuna Metamizol verin. İyi bir iyileşme sağlamak için her gün fareyi kontrol ettiğinizden emin olun.Balon denudasyonu, farelerde miyointimal hiperplazi gelişimini incelemek için uygun bir yöntemdir. Hayvanlar ameliyattan sonra iyi bir şekilde iyileşti ve mükemmel fiziksel durumdaydı. 50'den fazla ameliyatta %3'ten azı öldü.Greftte ilerleyici olarak miyointimal hiperplazi gelişti. Masson'un trikrom ile histolojik boyama, iç elastik lamina içinde miyointima oluşumunu gösterdi. Miyointimal lezyonlar esas olarak SM22 için pozitif hücresel bileşenlerden oluşuyordu, bu da düz kas hücrelerini ve yine kırmızı ile gösterilen miyofibroblastlar gibi ECM hücrelerini gösteriyordu.Bu videoyu izledikten sonra, farelerde balon yaralanmalarının nasıl gerçekleştirileceğini iyi anlamış olmalısınız. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik düzgün bir şekilde uygulanırsa 20 dakika içinde yapılabilir.

balloon-based-injury-to-induce-myointimal-hyperplasia-mouse-abdominal

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu video kemirgen arterlerde intimal plak iki kalkınma modelleri gösterir ve miyointimal hiperplazi ve ateroskleroz farklılıkları vurgulamaktadır.

Farelerde Ateroskleroz Karşı miyointimal hiperplazide uyaran: İki Geçerli Modellerinin An Introduction

Bu protokol, sıçan karotis arter üzerinde bir lümen içi yaralanmalara neden ve bundan sonra neointimal hiperplazi ortaya çıkarmak için bir balon kateter kullanır. Bu yaralanmaya yanıt olarak vasküler yeniden mekanizmalarını incelemek için iyi bilinen bir modeldir. Ayrıca yaygın potansiyel terapötik yaklaşımların geçerliliğini belirlemek için kullanılır.

Sıçan Karotis Arter Vasküler Balon Yaralanma ve intraluminal İdaresi

Restenozun inhibisyonu için terapötik bileşiklerin perivasküler verilmesi için bir model test sistemi olarak hizmet etmek üzere neointimal hiperplaziyi indüklemek için farelerin femoral arterinde tel yaralanması oluşturan bir cerrahi tekniği tanımlıyoruz.

Bir Perivasküler Drug Delivery Patch İmplantasyonunda ile Femoral Arter Tel Yaralanma sıçan Modeli

Kardiyovasküler prosedürleri takiben yapılan restenoz (baypas cerrahisi, anjiyoplasti veya stentleme) bu prosedürlerin dayanıklılığını azaltmakta önemli bir sorundur. İdeal bir terapi düz kas hücresi (VSMC) proliferasyonunu inhibe ederken endotelin rejenerasyonunu teşvik eder. VSMC çoğalması ve endotel fonksiyonunun in vivo olarak eşzamanlı olarak değerlendirilmesi için bir model tanımlıyoruz.

Murin Aort Kırma Yaralanması: Verimli<emIn vivo</em&gt; Düz Kas Hücresi çoğalması ve Endotel Fonksiyon Modeli

Ateroskleroz hayvan modelleri mekanizmasını anlamak ve plak geliştirme veya yırtılması, ölüm önde gelen nedenidir sanayileşmiş dünya önlemek için yeni yaklaşımlar incelemek için gereklidir. Bu iletişim kuralı bir arada balon yaralanma ve kolesterol zengin diyet tavşan iliyak arter aterosklerotik plaklar ikna etmek için kullanır.

Tavşan modeli hızlandırılmış ateroskleroz: iliyak arter balon yaralanma bir metodolojik açıdan

Burada servikal mürin modelinde sütür olmayan manşet tekniği ni kullanarak farelerde heterotopik aort transplantasyonu protokolünü salıyoruz. Bu model kronik allogreft vaskülopatinin (CAV) altta yatan patolojisini incelemek için kullanılabilir ve oluşumunu önlemek için yeni terapötik ajanların değerlendirilmesine yardımcı olabilir.

Modifiye Dikişsiz Manşet Tekniği Kullanılarak Murine Servikal Aort Transplantasyon Modeli

Sıçan şahdamar balonu yaralanması, aterosklerotik damarlarda kan akışını geri kazanmak için yapılan klinik anjiyoplasti prosedürünü taklit eder. Bu model, arteriyel duvarı dağıtarak ve endotel hücrelerinin intimal tabakasını indirgeyerek arteriyel yaralanma yanıtını indükler, sonuçta yeniden şekillendirmeye ve intimal hiperplastik yanıta neden olur.

Periadventitial Terapötik Uygulama ile Sıçan Karotis Arter Basınç Kontrollü Segmental Balon Yaralanması

Mevcut protokol, farelerde infrarenal abdominal aortun adventitisine doğrudan elastaz uygulanması yoluyla elastaz kaynaklı AAA modeli için standartlaştırılmış bir cerrahi yöntemi tanımlamaktadır.

Elastazın Perivasküler Uygulaması ile İndüklenen Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli

Bu protokol, AAA'ların patolojik özelliklerini ve moleküler mekanizmalarını incelemek için kalsiyum fosfata bağlı abdominal aort anevrizması (AAA) fare modelini tanımlamaktadır.

Kalsiyum Fosfat Kaynaklı Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli

Bu makale, önceki modelleme yöntemlerinin avantajlarını birleştirerek, kalsiyum klorür ve elastaz kullanarak bir fare abdominal aort anevrizması modeli oluşturmak için bir protokol sunmaktadır. Bu model, abdominal aort anevrizmalarının altında yatan patofizyolojik mekanizmaları araştırmak için kullanılabilir.

Periadventitial Kalsiyum Klorür ve Elastaz İnfiltrasyonu ile Bir Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli

Bu protokol, elastin hassasiyeti ve perivasküler elastaz uygulaması kullanarak C57BL/6 farelerinde abdominal aort anevrizmalarını (AAA) indüklemek için tekrarlanabilir ve güvenilir bir yöntem sunar; bu yöntem bağışıklık duyarlılığı bileşeni içeren bir AAA modelidir.

Elastin duyarlılığı ve perivasküler elastaz kullanarak güvenilir bir fare karın aort anevrizması modeli oluşturulması

Öğrenin farelerde balon yaralanması sonrası miyointimal hiperplazi gelişimini incelemek için bu cerrahi modeli. Transgenik farelerde hastalık mekanizmalarını ve tedavi stratejilerini araştırın.

Fare Abdominal aort Myointimal Hiperplazi ikna etmek için balon tabanlı yaralanma

Daha fazla video keşfet