Bir Kinetik Floresans tabanlı Ca2 + seferberlik tahlil G Protein birleştiğinde reseptör agonistleri, antagonistleri ve Allosteric modülatörler tanımlamak için

Bu hücre bazlı testin genel amacı, G proteinine bağlı reseptör aracılı hücre içi kalsiyum mobilizasyonunu uyarabilen veya inhibe edebilen molekülleri tanımlamak ve karakterize etmektir. Bu yöntem, G proteinine bağlı reseptör ilaç keşfi için değerli bir test olabilir, çünkü reseptör aracılı hücre içi kalsiyum cisimlerini değiştiren molekülleri taramak için kullanılabilir. Bu tekniğin temel avantajı, agonistik veya antagonistik özelliklere sahip moleküllerin aynı tahlil içinde tanımlanmasına izin vermesidir.

Bu test, birçok insan hastalığında rol oynayan terapötik hedefler vaat eden G proteinine bağlı reseptörler üzerinde etkili olan yeni ilaç adaylarının keşfine yardımcı olabilir. Hücre geçişi gününde, siyah duvarlı polistiren 96 oyuklu bir plakanın her bir oyuğunu, 100 mikrolitre% 0.1 jelatin çözeltisi ile şeffaf diplerle kaplayın ve plakaları oda sıcaklığında iki saat inkübe edin. Jelatin katılaşırken, ilgilenilen hücreleri kültür şişelerinin dibinden kaldırmak için bir tripsin EDTA çözeltisi kullanın, hücreleri ayrıldıktan sonra 50 mililitrelik bir konik tüpte taze büyüme ortamında yeniden süspanse edin.