RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/56829-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines a surgical procedure to create a reliable animal model of cochlear implantation using guinea pigs. It aims to facilitate research on pharmaceutical interventions and electrode performance in preserving hearing thresholds.
Bu iletişim kuralı, çok sayıda araştırma soruları gidermek için kullanılan koklear implantasyon bir hayvan modeli sağlamak için hedeftir. Potansiyel uygulamalar ilaç müdahaleler veya işitme eşikleri veya elektrot impedances yararlı etkileri için elektriksel stimülasyon değerlendirilmesi içerir.
Bu cerrahi prosedürün genel amacı, kobay kullanılarak koklear implantasyon için güvenilir ve çok yönlü bir hayvan modeli sağlamaktır. Bu yöntem, farmasötik müdahalelerin veya yeni geliştirilen elektrotların artık işitmenin korunması veya elektrot empedansları üzerinde yararlı etkiler sağlayıp sağlamadığı gibi koklear implantasyonlar alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Guinea pig'in ana avantajı, nispeten büyük iç kulağa hızlı erişimdir ve bu da koklear implantasyonun güvenli, güvenilir ve çok yönlü bir hayvan modeli ile sonuçlanır.
Bu prosedür için, ameliyat sırasında kolay kullanım için deneycinin etrafına yerleştirilmiş bir cerrahi mikroskop, bir matkap, bir ısıtma plakası ve bir nabız oksimetresi olması önemlidir. Isıtma yastığını 38 santigrat dereceye ayarlayın. Steril tekniği takip edin.
Şapka, maske ve eldiven giyin. Daha sonra koklear implantasyon için sterilize edilmiş cerrahi aletleri yerleştirin. Ardından, bir ucundan üç milimetre yalıtımı ve diğer ucundan beş milimetre yalıtımı dikkatlice çıkararak 3,5 santimetre uzunluğunda bir Teflon yalıtımlı altın tel parçası hazırlayın.
Ardından, 2,5 santimetre uzunluğunda ikinci bir altın tel kesin ve her iki uçtan beş milimetre yalıtımı çıkarın. Ardından her iki kabloyu da alkolle sterilize edin. Daha sonra, metin protokolünde belirtildiği gibi anestezik bir kokteyl kullanarak bir kobay uyuşturun.
Ardından başını tıraş edin ve yüzüstü olarak ısıtma plakasına yerleştirin. Daha sonra, kobay ağzını küçük bir laringoskopla dikkatlice açın ve aspirasyon kullanarak ağız boşluğundaki tüm yiyecek artıklarını temizleyin. Daha sonra, direnç hissedilene kadar mideye yavaşça iterek yemek borusuna dikkatlice bir mide tüpü yerleştirin.
Tüpün trakeada olmadığından emin olmak için oksijen doygunluk seviyelerini kontrol edin. Daha sonra, 23 gauge iğne kullanarak boynun yağ yastığına fizyolojik salin,% 5 glikoz ve enrofloksasin karışımı enjekte edin. Alternatif povidon-iyot ve% 70 etanol fırçaları kullanarak cerrahi alanı hazırlayın ve ardından hayvanı örtün.
Analjezik kullanım için, lidokain ayrıca hayvanı gerektiği gibi anestezik ile yeniden dozlayın. Ameliyata, bir neşter kullanarak kulak kepçesinin üç ila beş milimetre arkasında, iki ila üç santimetrelik bir cilt kesisi ile başlayın. Kanama ile başa çıkmak için bipolar koter kullanın.
Daha sonra işitsel büllanın belirginliği için palpe edin ve retroauriküler bölgedeki kasları dikkatlice kesmek için 15 numara cerrahi neşter veya cerrahi makas kullanın. Kasları bülden çıkarmak için, kasları hafifçe bir kenara itin ve büllere engelsiz erişim için insizyonun tüm uzunluğunu ortaya çıkarmak için bir ekartör kullanın. Şimdi bullada bir delik açmak için 15 numaralı neşterin ucunu kullanın.
Kemik delindiğinde, orta kulak yapılarını incelemek için deliği gerektiği gibi genişletin. Hayvanı bükülmüş konuma getirin ve açıklığı kontrol edin. Kokleanın bazal dönüşü ve yuvarlak pencere nişi görünür olmalıdır.
Bükülmüş konumdayken hayvanların oksijen seviyelerine dikkat edin. Devam etmek için, hayvanı yüzüstü olarak yeniden konumlandırın ve dikdörtgen bir kesi kullanarak tepe noktasını ortaya çıkarın. Daha sonra, eksizyon derisini çıkarın, periosteuumu inceleyin ve bir neşter kullanarak periosteuumu temizleyin.
Ardından, 3,5 santimetrelik telin açıkta kalan üç milimetre ucuna küçük bir kanca yapın. Ardından altın telin diğer ucunu deri altından tepe noktasına yönlendirin. Mikro forseps kullanılarak 18 gauge periferik venöz kateter aracılığıyla.
İkinci bir çift mikro forseps kullanarak, telin kancalı ucunu dikkatlice orta kulağa yerleştirin. Daha sonra, yuvarlak pencere nişinin alanını bullostomi boyunca görselleştirmek için hayvanın başını bükün ve mikro forseps kullanarak altın teli kemikli çıkıntıya asın. Şimdi, altın tel üzerinde hafif bir gerginliği korurken, 27 gauge iğneden verilen 10 ila 15 mikrolitre siyanoakrilat kullanarak bullostominin kafatası kenarına sabitleyin.
Temel ölçümler artık altın telden alınabilir. Daha sonra, elektrodu monte etmek için hayvanı yüzüstü pozisyona getirin. Ve bir milimetrelik çapak matkabı kullanarak, lambda sütürünün bir milimetre önünde iki delik açın.
Dura'ya zarar vermeyin. Ardından, elektrot konektörünü takmak için vidaları deliklere implante edin. Şimdi, elektrodu kafatasına mümkün olduğunca yakın bir doku tabakasında konektörden bullaya yönlendirmek için 18 gauge periferik venöz kateter kullanın.
Daha sonra bir spatula kullanarak vidaların arasına 0,5 ila 0,7 mililitre yarı sıvı diş çimentosu koyun ve elektrot konektörünü vidaların arasına yerleştirin. Diş çimentosu sertleşirken konektörü yerinde sabit tutun. Hayvan yana doğru yeniden konumlandırılırken, kokleostomi yuvarlak pencereden bir milimetre uzakta dikkatlice delerek devam edin.
5000 rpm'de 0,5 milimetre elmas çapak kullanarak delin. Ardından, elektrodu dört milimetre skala timpaniye dikkatlice yerleştirin. Ardından elektrodu geri çekin ve yerleştirme işlemini tekrarlayın.
Ardından elektrodu sabitlemek için siyanoakrilat uygulayın. Stabil bir implantasyon daha fazla işitme eşiği kayması sağlayacaktır. Bu nedenle, istenmeyen sarsıntı hareketlerinin olasılığını en aza indirmek için elektrodu masaya yerleştirmek için kullanılan kolu stabilize etmek önemlidir.
Ardından bullostomiyi yaklaşık 0.3 mililitre diş çimentosu ile kapatın. Ve diş çimentosunun bulla içine yer değiştirmesinden kaçınılmalıdır. Daha sonra, retroauriküler insizyonu 5-0 emilebilir sütürler kullanarak kapatın.
Ardından hayvanı yüzüstü pozisyona getirin. Ardından, tepe noktasındaki dikdörtgen insizyonun arka kenarını tutmak için forseps kullanın. Ve makasla hayvanın boynuna iki santimetre deri altı tünel açın.
Tünelden forseps kullanarak 2,5 santimetre altın teli implante edin. Daha az açıkta kalan kabloya sahip ucu, konektörün belirlenen pimine yerleştirin, ardından bağlantıyı lehimleyin. Ardından, yuvarlak pencere niş elektrodunu konektörün uygun pimine lehimleyin.
Lehimleri tamamladıktan sonra, yalıtılmış pimleri ve elektrodu tamamen kaplamak için daha fazla diş çimentosu uygulayın. Bu implantasyonu tamamlar. Sunulan hayvanda ameliyat öncesi ve sonrası frekansa özgü CAP eşikleri, düşük frekanslarda neredeyse hiç değişmedi.
Oysa sekiz kilohertz'den başlayan yüksek frekanslı alanda yaklaşık 25 ila 30 desibellik bir eşik kayması elde edildi. İmplante edilen elektroda karşı yabancı cisim reaksiyonu önemli ölçüde değişebilir. Görünür bir reaksiyon olmayabilir veya skala timpaninin geniş bir alanı fibrotik doku ile dolabilir.
Kİ elektrot yerleştirilmesi sırasında kemik spiral laminanın kırılması bile mümkündür. Bu durumda, kırık spiral ganglion hücrelerinin kaybına, vestibüler kanalda fibroz ve osteogenezise ve Corti organının kaybına neden oldu. Bu tür kırıklar, bazı hayvanlarda beklenenden daha yüksek eşik kaymalarını açıklayabilir.
Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik düzgün bir şekilde uygulanırsa iki buçuk saat içinde yapılabilir. İntraoperatif işitme ölçümleri yapılırsa, toplam işlem için gereken süre oldukça artabilir. Bu videoyu izledikten sonra, kobayda koklear implantasyonun nasıl yapıldığını iyi anlamış olmalısınız.
Bu hayvan modelini kullanarak, bu alandaki çeşitli araştırma sorularını ele alabilirsiniz.
Related Videos
11:49
Related Videos
12K Views
04:00
Related Videos
640 Views
09:06
Related Videos
14.9K Views
07:03
Related Videos
7.8K Views
06:05
Related Videos
6.6K Views
06:16
Related Videos
3.7K Views
09:25
Related Videos
2.4K Views
08:30
Related Videos
4K Views
05:14
Related Videos
1.2K Views
07:19
Related Videos
582 Views